d分子筛层析系统清洁方法验证方案

目录1.引言 (2)2.参考文件 (2)3.仪器与器皿 (2)4.验证步骤 (3)5.结论 (10)6.QA评价 (11)1.引言1.1概述卡培他滨换盐酸厄洛替尼的公用设备中转罐S3101、对接反应罐S3102、对接浓缩罐S3103、中转罐S3104、萃取脱水罐S3105、过滤器S3109、过滤器S3110、成品精制罐S3107、离心机S3111、双锥真空干燥机S3112、摇摆式颗粒机S3113、过滤器S3120、过滤器S3180共线残留为卡培他滨，公用设备清洁确认是为了检测设备清洁后，设备直接接触药物表面的卡培他滨残留量是否符合要求，以确保设备中残留的卡培他滨不会对盐酸厄洛替尼的产品质量产生影响。

设备清洁后，按照不同设备分别用擦拭法、淋洗法、TOC进行取样。

现采用模拟取样法试验确定综合回收率，以HPLC检测，建立卡培他滨的清洁验证样品检测方法。

因《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》（QC-V-A030-00R）中已完成了专属性、定量限、线性的项目，但卡培他滨共线设备残留的擦拭法可接受理论最大限度（11.58μg/25cm2）低于《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》（QC-V-A030-00R）中的可接受限度（75.75μg/25cm2），淋洗法可接受理论最大限度（0.44μg/ml）低于《卡培他滨清洁验证检测方法学验证报告》（QC-V-A030-00R）中的可接受限度（2.8μg/ml），现对卡培他滨换盐酸厄洛替尼公用设备清洁方法验证中卡培他滨残留检测方法的系统适用性、溶液稳定性和综合回收率做验证，考察用于公用设备上卡培他滨残留检测的分析方法的可行性。

卡培他滨共线设备残留的擦拭法可接受理论最大限度为11.58μg/25cm2(10ml全部溶解出残留后浓度为1.158μg/ml)，淋洗法可接受理论最大限度（0.44μg/ml），现选此限度进行模拟取样检测试验，确定擦拭法和淋洗法的回收率作为实际检测中样品浓度计算的参数。

层析介质寿命、清洁和保存验证的综合设计与行业实践2021年，PDA发布了技术报告60-3：工艺验证、生命周期的方法，附件2生物制药原液的生产，其中提高层析介质的相关验证是工艺验证的重要一部分。

层析介质需要证明其在生命周期内保持一致性的能力，需要评估层析介质的清洁程序的有效性以及清洁程序对层析介质寿命的影响，更重要的是，该报告还提出层析介质需要验证能够保持其性能所需要的保存时间和保存条件的验证，而这是行业大多数企业常忽略的一点。

为了更好地满足监管机构的期望以及行业企业更好地进行层析介质相关验证的实践，本文提出了一种层析介质寿命、清洁和保存验证的综合设计，该设计综合利用了缩小模型和商业化规模运行，前瞻性工艺验证与持续工艺验证，并且完全符合法规对层析介质验证的期望。

层析介质的寿命、清洁和保存验证的综合设计主要包括以下步骤：●步骤1：层析介质清洁程序的开发●步骤2：层析介质缩小模型的寿命和清洁验证●步骤3：层析介质商业化规模的清洁确认●步骤4：层析介质寿命和清洁的持续确认●步骤5：层析介质的保存验证步骤1层析介质清洁程序的开发层析介质的清洁程序本应是层析纯化工艺固有的一部分。

特定的层析纯化必须要包含特定的层析介质清洁程序。

清洁程序的开发需要考虑层析过程中的污染物、清洁试剂的选择以及清洁工艺参数的研究。

清洁工艺参数应像开发层析分离工艺参数一样进行研究，必要时可采用FMEA风险评估和缩小模型进行DoE实验设计，以便确定清洁工艺参数之间的交互作用和设计空间。

最后，清洁程序需要放大，应在大规模的生产工艺中建立最终的清洁工艺操作和性能参数的操作范围，并且要符合GMP的要求。

图1. 亲和层析填料Mabselect SuRe的清洁程序的设计空间示意图。

步骤2层析介质缩小模型的寿命和清洁验证该步骤是在缩小模型同时进行层析介质的寿命和清洁验证，目的一是验证层析介质的可重复使用次数，二是同时验证清洁程序对寿命的影响以及清洁程序对残留物累积效应的控制。

清洁验证系列：第八篇--清洁验证方案及验证状态维护扫码入群1.清洁验证方案参照物质或最难清洁物质、最难清洁部位和取样部位，如何制订验证的合格标准即最大允许残留清洁验证方案必须符合一般验证方案的共性要求。

验证方案中最关键技术问题为如何确定限度，用什么手段能准确地定量残留量，这包括取样方法和检测方法的开发和验证。

1.1 参照物质与最难清洁物质一般药品都由活性成分和辅料组成。

对于复方制剂，含有多个活性成分。

所有这些物质的残留物都是必须除去的。

在清洁验证中是否需要为所有残留物都制定限度标准一一检测呢？这是不切实际且没有必要的。

在一定的意义上，清洁的过程是个溶解的过程，因此通常的做法是从各组分中确定最难清洁（溶解）的物质，以此作为参照物质。

通常相对于辅料，人们更关注活性成分的残留，因为它可能直接影响下批产品的质量、疗效和安全性。

因此活性成分的残留限度必须作为验证合格的标准之一。

如当存在两个以上的活性成分时，其中最难溶解的成分即可作为最难清洁物质论处。

以复方18氨基酸注射液为例，它有18种氨基酸，均为活性成分。

其中最难溶解的为胱氨酸，仅微溶于热水，因此可将其作为最难清洁物质。

这样一来，清洁验证就找到了残留的“参照物”而不用考虑其他易溶解组分。

1.2 最难清洁部位和取样点取样点应包括各类最难清洁的部位，及各种材质的全面考虑。

1.3 清洁验证方案清洁验证方案可用多种格式，其共同要求要素包括如下内容：①目的明确待验证的设备和清洁方法。

②清洁规程待验证的清洁方法的SOP即清洁规程应当在验证开始前确定下来，在验证方案中列出清洁规程以表明清洁规程已经制定。

③验证人员列出参加验证人员的名单，说明参加者所属的部门和各自的职责，对相关操作人员的培训要求。

④确定参照物和限度标准在本部分应详细阐述确定参照物的依据，确定限度标准的计算过程和结果。

一般可将相关设备列表，计算总表面积，特殊表面面积；将相关产品列表，列入主要活性成分及其相关物理化学性质，MTDD值等，确定参照物质，计算限度标准。

清洁验证取样方法及检验方法验证方案文件编码：EL-YZ54010-01文件审定部门签名日期起草人审核人审核人审核人审核人审核人批准人四川诺迪康威光制药有限公司目录1.概述 (3)2.目的 (3)3.适用范围 (3)4.职责 (4)5.验证条件 (4)6.验证时间计划 (4)7.验证要求及标准 (2)8.验证实施 (7)9. 验证结果评定与结论 (7)10. 拟定再验证周期 (7)11. 附件 (7)1. 概述：生产过程中所用的生产设备均可能有残留物遗留，为了最大程度的避免由于上一批次生产产品的残留影响下一批次或其他品种，故必须对生产所用的设备进行清洁。

清洁后要对该清洗方法进行取样检测残留量。

一般通常的取样方法为棉签擦拭法和淋洗法。

由于我公司产品均为中成药，成分复杂，无法对每一成分进行测定，所以检测方2. 目的：考察清洗验证涉及取样过程和所用检测方法的过程，是对人员取样操作、残留物转移、测试过程的考察，考察项目最低定量限、线性、综合回收率等。

3. 适用范围：清洁验证取样方法及检验方法。

4. 职责姓名部门小组职务职责方延刚质量管理部组长负责验证的组织协调工作，以保证本方案规定的验证项目顺利实施；负责验证数据及结果的审核；负责验证报告的起草；负责验证周期的确认乐元保工程部组员负责组织试验所需器具的校验。

张慧质量管理部组员负责验证现场监管并协调验证工作；负责偏差、变更的审核，杨燕质量管理部组员负责起草验证方案；负责验证方案的实施；负责协助调查和处理验证过程中的偏差；参与检验方法验证方案的实施；制备阴性样品。

李新质量管理部组员负责验证方案的实施。

负责协助调查和处理验证过程中的偏差。

陶瑶质量管理部组员负责验证方案的实施。

负责协助调查和处理验证过程中的偏差。

5. 条件5.1. 检验操作规程齐全（记录见附件1）清洁验证取样方法及检验方法验证方案 EL-YZ54010-01 X00，4/21 5.2. 设备相关标准操作规程齐全、用具齐全（记录见附件2）5.3. 检验、检测仪器均已校验（记录见附件3）5.4. 风险识别5.4.1. 本次风险评估根据公司《质量风险管理规程》要求进行。

清洁验证取样方法和检验方法验证方案一、目的：通过对清洁验证取样方法（棉签取样法）的回收率试验，来验证该取样方法的回收率和重现性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。

二、范围：适用于本公司设备清洁验证的取样和检验方法。

三、责任人：验证小组取样人员、检验人员。

四、内容:1.概述制药企业生产设备、生产场所、用具等需清洁，清洁后残留物限度经检验应符合要求，检验残留物的限度有两种方法：一是最终淋洗水取样；二是棉签擦拭取样，本公司目前所有设备均采用的是棉签擦拭取样方法。

棉签擦拭取样优点是能对最难清洁部位直接取样，通过考察有代表性的最难清洁部位的残留物限度评价生产设备的清洁状况。

但取样方法需验证其可行性（回收率和重现性），因此须通过取样方法验证确定清洁验证取样方法的有效性，及检验方法的线性、精密度（RSD）。

2.验证目的本验证是通过对清洗消毒后，棉签擦拭取样方法的回收率试验，来验证、评价取样方法的可行性（回收率和重现性）、代表性和科学性，及检验方法的线性、精密度（RSD），为证明清洗方法有效性提供基本的取样和检验依据。

3.范围本次验证适合清洁验证取样方法（棉签擦拭法）和检验方法（高效液相色谱法）。

4.验证选取的参照物本次验证选用黄芩苷（C21H18O11）来做取样方法回收率试验和检验方法的线性、精密度（RSD）。

5.验证周期及验证进度安排验证由起草人和审核人提出完整的验证计划，经批准后实施，整个验证活动分两个阶段完成。

验证小组成员的培训：试验时间：6.验证小组成员及职责验证小组成员所在部门验证小组职务质量部QA负责本次验证的取样人员，监督本次验证过程的实施，异常情况汇报和处理。

质量部QA主管验证小组组长，验证方案及报告的起草，提供取样方法验证方案；负责本次验证方案的培训与指导。

质量部QC负责进行本次验证过程中的检验、数据记录、分析和报告。

质量部QC主管验证方案及报告的审核，提供检验方法验证方案；负责本次验证实施规程中的指导。

【技术应用】详述层析介质的清洗验证策略扫码入群介质的清洗验证去除再生没有去除的杂质及介质中积累的污染物即清洗（CIP)，所以清洗过程比再生过程往往要剧烈，清洗要根据层析介质的类型耐受性，物料的性质，层析介质所处的工艺阶段，层析柱及层析系统的耐受性等综合考虑清洗的状态，通常使用1-10个循环清洗一次，同时要选择合适的清洗试剂。

通过试验证明清洗有效且污染物的残留及清洗试剂残留已经降低到安全水平的工作就是清洗验证。

清洗验证可通过检测载量，流速及清洗试剂残留的方式去验证。

因此不同的工艺过程，介质的清洗有不同的操作模式和方法，清洗验证是整个目标物质制备工艺中的一部分。

介质清洗的依据清洗过程通常都要涉及到高盐，酸碱及有机溶剂，相对都是比较剧烈的条件，剧烈的条件对层析介质的性能都会有一定的影响，那么我们如何确定介质是否需要进行清洗及何时清洗呢？在寿命验证过程中，当介质使用后和设定的工艺目标发生偏差时就要开始清洗，也就是说，在我们寿命验证的小试实验中，我们就要使用多少个循化后要开始清洗，以及如何清洗。

清洗是工艺过程的一部分，与工艺过程有密切关系。

介质清洗方式清洗是去除再生没有去除的污染物，那么我们就要了解污染物的来源，污染物与物料及工艺阶段，工艺过程联系紧密。

1）捕获阶段，物料通常比较复杂，含有大量的杂质，色素，内素素等，再生往往难以去除干净，那么待清洗去除的物质也很复杂，清洗过程也很复杂，可能需要多种模式配合作用，同时清洗的频率和强度都要高。

通常使用1个循环后就要清洗一次。

2）中度纯化阶段，物料已经去除了大部分杂质，通过再生残留在介质上的污染物就很少了，清洗过程和频率比捕获阶段就要低很多。

使用5-10个循环后就需要清洗一次。

3）精纯阶段，物料已很纯净，只含有微量的杂质，再生通常就可以达到清洗的目的，此时清洗的频率和强度就更低。

根据小试确定的清洗需要开始的状态进行清洗。

介质清洗方法不同的介质及不同的污染物清洗方法不同，清洗纪要保证清洗效果同时要减少对层析介质的损伤，还要避免清洗试剂对介质的二次污染，选择合适的清洗方法非常重要。

山东金泰生物工程有限公司验证管理文件编号：V00P005题目：分子筛层析系统清洁方法验证方案版本号：01版共 3 页，第 1 页生效日期：年月日起草：日期：一审：日期：二审：日期：批准：日期：1 验证范围分子筛S-200层析柱、泵管、检测器管路及吸收池所组成的系统的清洁2 验证目的确保分子筛层析系统的清洁方法有效可行，确保纯化过程中不受外来污染。

3 验证合格标准3.1 在0.02AUFS、280nm时，基线平稳没有大的波动3.2 pH应与S-200洗脱缓冲液的pH相同，即为pH=6.8±0.13.3内毒素的含量≤2 EU/mL4 验证步骤4.1 分子筛层析系统清洁方法流程配制0.1MNaOH无热原缓冲液→通过泵冲洗柱子1-2个柱体积→配制pH6.8 S-200缓冲液→平衡柱子1-2个柱体积4.2 验证所用相关文件序号题目编号1细菌内毒素检查法Q00E0082pH计操作规程P00D0063分子筛层析缓冲液配制操作规程P01R0124分子筛层析系统操作规程P00D0165重组人白介素-2分子筛层析岗位操作法P01M0064.3 程序4.3.1 S-200纯化后，用0.1MNaOH溶液冲柱子1-2个体积。

4.3.2 灵敏度为0.02AUFS时，半小时基线平稳无大的波动。

4.3.3 根据pH测定法，检测器端测得洗脱液出液的pH=6.8±0.1.4.3.4 根据内毒素测定法，内毒素含量≤2EU/mL.5 再验证连续三次按上述验证步骤检验清洁方法，做好记录，在以后生产过程中每年验证一次。

清洁方法验证记录验证部门：项目时间基线pH内毒素验证人复核人分子筛层析系统清洁方法验证报告验证部门：验证日期：报告填写人：报告日期：1 经检查并确认在0.02AUFS灵敏度下，基线（平稳或不平稳）。

验证人：核对人：2 经检查并确认所测pH （符合或不符合）清洁方法验证要求。

验证人：核对人：3 经验证内毒素含量（符合或不符合）验证要求验证人：核对人：4 验证结果分析及验证总结论。