_野蚕豆根的化学成分研究
- 格式:pdf
- 大小:1.53 MB
- 文档页数:5
利用蚕豆根细胞微核技术检测洗发水的毒性09生物技术宁伟王晓刚太红桥刘经源摘要微核(micronucleus,MCN)是真核生物细胞经各种理化因子作用后引起染色体畸变,在间期细胞中的一种表现形式。
在细胞间期,微核呈圆形或椭圆形,游离于主核之外,大小应在主核1/3~1/20,染色与主核一样或稍浅。
一般认为微核是由无着丝粒的染色体断片或落后染色体,在分裂末期不能进入主核,便形成了主核之外的核块。
当子细胞进入下一次分裂间期时,它们便浓缩成主核之外的小核,即微核。
[1]蚕豆根尖细胞微核试验(Micronucleustest,MC-NT)技术是一种以染色体断裂及纺锤丝损伤为测试终点的植物微核检测方法。
它是一种应用于监测环境致突变物对人体和其他生物体的遗传物质产生危害的技术,并从细胞遗传学水平上探讨植物遗传物质的改变状况与环境污染,也可以检测淡水环境的质量。
[2]关键词蚕豆根尖微核洗发水千分率蚕豆是一种很好的细胞遗传学研究材料。
它的染色体为六对相当大的染色体,而且根尖含有较多的分裂相细胞,非常适合显微观察。
目前,蚕豆根尖微核技术在环境致突变性检测/监测方面已经形成了一套完整的体系。
它的可靠性和灵敏性较高,且本底较低,这对于一种致突变性检测方法是十分重要的。
此外,它的检测物谱较广。
目前多数学者认为,在镜检细胞微核时,应按下列标准计数微核:(1)凡主核大小1/3以下,与主核分离的小核;(2)小核的着色与主核相当或稍浅;(3)小核形态可为圆形,不规则等。
[3]1. 实验目的掌握蚕豆根尖细胞微核检测技术的一般方法。
并利用蚕豆根尖细胞微核检测技术对洗发水的毒性状况给出客观的评价,同时表明蚕豆根尖细胞MCN对胁迫很敏感,蚕豆根尖微核技术可用于洗漱用品的安全监测。
2. 材料与方法2.1实验材料蚕豆种子、洗发水、显微镜、镊子、培养皿、剪刀、载玻片、盖玻片、烧杯、Carnoys固定液、盐酸酒精解离液、改良苯酚品红染液、NaN3等。
山豆根的主要化学成分和药理药性研究分析山豆根,为豆科槐属植物,主产于广西西南部至西北部,广东、云南和贵州也有少量分布。
山豆根的药用功效始载于唐代《开宝本草》,近代临床常用于治疗咽喉炎、黄疸、以及心律失常等病症。
山豆根中含有丰富的生物碱、黄酮类成分。
现代药理研究表明,山豆根总提取物具有抗病毒、抗炎和抗心率失常等多种活性一,对其化学成分和药理活性的研究一直深受人们关注。
为此,本文对山豆根的化学组成、主要成分的提取与含量测定及药理活性等方面的研究成果,尤其是近五年来的最新研究进展中发现山豆根与红花,菊花,千里光,益母草,苦参等制成的金菊千里光洁美洗液消炎,止痛,杀菌治疗妇科炎症效果非常好。
研究发现山豆根还含有很多微量元素孟君等一利用微波消解一氢化物发生一电感耦合等,离子体发射光谱联用技术,测定山豆根中微量元素的含量,在最佳工作条件下,山豆根中所含的砷、锑、铋和锡的等。
研究还发现山豆根具有很强的活性成分,像生物碱,生物碱是山豆根主要活性成分,也是其药效的物质基础。
从山豆根中分离得到的生物碱有以下四种类型:苦参碱型、金雀花碱型、奥豆碱型(鹰爪豆碱型)和羽扇豆碱型,其中最常见的是羽扇豆类生物碱,又称喹诺里西啶类生物碱。
据不完全统计,该类生物碱分布较广,存在于豆科二十多个属的植物中。
目前,已经发现的该类生物碱有160多种,约占己发现生物碱成分的2 。
柴田承二5等,从山豆根中分离得到苦参碱、氧化苦参碱、N一甲基金雀花碱、臭豆碱等。
我国学者窦金辉等一。
一从山豆根中分离得到槐胺碱、槐花醇、槐醇、氧化槐果碱、金雀花碱等。
肖平等一先后从山豆根中分离得到5a一羟基槐果碱、9 一羟基苦参碱、(+) 14 一羟基苦参碱、( ) 14G一羟基苦参碱、(+)一5a,9a 二羟基苦参碱、(一)一槐果碱以及两个新生物碱类化合物(+)一14a-乙酰苦参碱和(一)一1@-乙酰苦参碱。
随着分离工作的不断深入,陆续又从中分离得到13,14一去氢槐醇[ ,(一)一14G一羟基氧化苦参碱一。
第1篇一、实验目的1. 观察蚕豆根尖的结构;2. 学习并掌握蚕豆根尖的制片技术;3. 探讨不同处理对蚕豆根尖细胞的影响。
二、实验原理蚕豆根尖是植物学研究的重要材料,其结构简单,易于观察。
根尖包括根冠、分生区、伸长区和成熟区。
本实验通过观察蚕豆根尖的结构,了解不同处理对根尖细胞的影响,从而为后续研究提供依据。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜蚕豆、酒精、盐酸、醋酸洋红染液、载玻片、盖玻片、镊子、剪刀、解剖镜、显微镜等。
2. 实验试剂:95%酒精、15%盐酸、醋酸洋红染液。
四、实验步骤1. 取新鲜蚕豆,用剪刀剪去根尖,放入装有95%酒精的试管中浸泡30分钟,以固定细胞。
2. 将浸泡好的蚕豆根尖放入装有15%盐酸的试管中,在室温下处理30分钟,以解离细胞。
3. 将解离好的蚕豆根尖取出,用蒸馏水清洗3次,去除多余盐酸。
4. 将清洗干净的蚕豆根尖放入装有醋酸洋红染液的试管中,染色5-10分钟。
5. 将染色的蚕豆根尖取出,用蒸馏水清洗3次,去除多余染液。
6. 将清洗干净的蚕豆根尖放在载玻片上,用镊子轻轻压扁,盖上盖玻片。
7. 在显微镜下观察蚕豆根尖的结构,记录不同处理对根尖细胞的影响。
五、实验结果与分析1. 根尖结构观察(1)根冠:位于根尖的最前端,细胞排列紧密,具有保护作用。
(2)分生区:位于根冠之后,细胞较小,排列紧密,细胞核较大,具有强烈的分裂能力。
(3)伸长区:位于分生区之后,细胞停止分裂,开始迅速伸长,是根伸长最快的地方。
(4)成熟区:位于伸长区之后,细胞停止伸长,分化形成导管和根毛,是根吸收水分和无机盐的主要部位。
2. 不同处理对根尖细胞的影响(1)空白对照组:蚕豆根尖细胞结构正常,无异常现象。
(2)酒精处理组:蚕豆根尖细胞结构出现变形,部分细胞核变大,染色体凝聚。
(3)盐酸处理组:蚕豆根尖细胞结构出现严重变形,部分细胞核破碎,染色体断裂。
(4)醋酸洋红染液处理组:蚕豆根尖细胞结构正常,染色体染色均匀。
西"农业学&2020年33卷7期1480Southwest China Journal of Agricultural SciencesVol. 33No. 7文章编号:1001 -4829(2020)7 - 1480 -06 DOI : 10. 16213。
. cnkk scjvs -020. 7. 022野蚕豆根根腐病原菌、生物学特性及其有效杀菌剂研究孑匚 琼,袁盛勇**,郭建伟,周银丽,薛春丽,李 瑜,罗武华收稿日期:2019 -05 -14基金项目:国家自然科学基金(31260062) %云南省科技厅项目 (三区人才服务)%云南省地方本科高校(部分)基础研究联合专 项资金项目%红河学院生物学重点建设学科建设项目作者简介:孔 琼(1976 -),女(云南宣威人(博士(副教授,主 要从事植物病害综合治理研究,E-mail :kq_biPogy2@ 126- com %* 为通讯作者:袁盛勇,E-mail :/x /069@ 163- com 。
(红河学院生命科学与技术学院/云南省高校滇南特色生物资源研究与利用重点实验室,云南蒙自661199)摘要:!目的】本文研究了野蚕豆根的一种根部病害,明确了引起该病病原!的种类和生物学特性,并筛选出}诒该病的有效药剂。
【方法】运用形态学对引起该病的病原进行鉴定,采用菌丝生长速率、产抱量大-和抱子萌发率测定了该病!的生物学特性, 采用平皿测定了 10种杀!剂对该病原!的室内抑!效果。
【结果】野蚕豆根的根腐病病原!为茄病铢抱蓝色变种0 Fusrium pla-ni vvr- coemleum ( Saco. ) Booth ];适合病!生长的培养基为PSA ;菌丝生长和产抱最适—度25 i ;湿度对抱子萌发率具有较大影响,湿度越高,萌发率越高;!丝生长和产抱的pH 为7~8;菌/生长和产抱的最适}源为可溶性淀粉,!/扩展的最适氮源是(Y钾,产抱最适氮源为硫Y 铁;连续光照有利菌丝生长和产抱;病原!分生抱子致死温度为55 i 、10 mP ;10种杀!剂对野蚕豆根根 腐病原的毒力从大到-为简果〉应得>扑海因>灰灭〉甲基托布津〉灵动 >黑白立消 >保丽丹〉保->—r ,其中简果(三哇类)、应得(三哇类)和扑海因(二甲酰亚胺类)3种杀!剂的抑菌活性较强。
观察植物细胞有丝分裂的好材料——蚕豆侧根“观察植物细胞有丝分裂”是人民教育出版社1990年版高中《生物》4个必做实验之一。
在教学实践中多数学生包括不少教师反映观察不到分裂相细胞,实验效果差一直困扰着实验课老师。
究其原因,除操作技术掌握不当外,用于实验的材料——洋葱存在的不足可能是关键之处。
为此,我们选用10余种容易得到、培养方便的农作物种子作材料,以期筛选到适宜的实验材料。
经试验摸索,发现蚕豆侧根是一种非常理想的观察植物细胞有丝分裂材料。
现将其培养方法、操作等报道如下。
1蚕豆苗及侧根的培养选择无霉变、无虫害的蚕豆种子,加清水浸泡24h,取出埋入湿润黄沙或河沙中,蚕豆埋入沙中深度以2~3 cm为宜,在室温下培养(夏季气温高可放在阴凉处,冬季气温低可放在朝阳避风处,有条件的学校可置25℃恒温箱中培养),每天洒少量水,以防沙失水干燥。
待主根长至2~3 cm,拔出蚕豆苗,剪去其主根尖生长点,以促使侧根生长,再将苗埋入沙中继续培养。
在温度适宜情况下,7天(包括浸种时间在内)左右可长出1~2cm侧根,一般每根主根上可生侧根6~10根不等。
若继续保持沙粒湿润,放在室温环境中,侧根在2~3周内仍可保持旺盛生长,且其分生组织中细胞分裂活动仍呈活跃状态。
2 取样取1~2 cm长、粗壮侧根,在清水中洗去附着其上的沙粒,用刀片将根尖端纵剖为二,切口长度以2~3mm为宜。
纵剖根尖的目的是使根尖内部组织得到充分解离,并缩短在解离液中的处理时间。
3 解离将纵剖后的整条根尖放入1mol/L HCl溶液中,在室温下解离6~8 min。
解离时间长短与室温有关,室温高时,可适当缩短时间,反之亦然。
一般以根尖完全酥软为度。
4 漂洗待根尖酥软后,用镊子取出,放入清水中漂洗2~3min。
5 染色把漂洗后的根尖放在载玻片中央,用刀片截下2~3mm根尖,用吸水纸吸去根尖周围的水,加1~2滴改良石炭酸品红染液,在室温下染色6~10min。
为进一步提高染料对染色体的着色效果,可将载玻片置酒精灯火焰上方缓慢加热数分钟,以染液不沸腾为适,待染液即将挥发干时停止加热。
基金项目:国家自然科学基金(81860812);云南省应用基础研究-中医联合专项(2017FF116(-021))。
作者简介:吴银双(1990-),女,汉族,硕士,助理研究员,研究方向为药物分析和质量研究。
E-mail:1029225951@qq com通信作者:姚政(1977-),女,汉族,硕士,副教授,硕士生导师,研究方向为中西医结合防治肝病。
E-mail:yaozhmail@126 comHPLC法测定野蚕豆根中桃叶珊瑚苷含量的研究吴银双1 李 莉2 单 蕊3 陈 燕2 杜 冰2 李海宁2 姚 政21 云南省药物研究所,云南 昆明 650111;2 云南中医药大学,云南 昆明 650500;3 重庆市开州区中医院,重庆 405400【摘 要】 目的:建立HPLC法测定栽培野蚕豆根中桃叶珊瑚苷含量。
方法:采用外标法,XBridgeShieldC18色谱柱(250mm×4 6mm,5μm),甲醇-水(2∶98)为流动相,梯度洗脱;流速1 0mL/min,柱温30℃,检测波长203nm。
结果:桃叶珊瑚苷的质量浓度在:12 8~74 4μg/mL内与峰面积呈良好的线性关系,R=0 9990。
平均加样回收率为100 98%,RSD值为0 695%(n=9)。
结论:栽培野蚕豆根中桃叶珊瑚苷2年生根、1年生根、2年生茎叶、1年生茎叶的平均含量分别为:24815%、0 9759%、0 3758%、0 0266%;实验采用的HPLC法操作简便、快速、准确,样品处理简便易行,适于野蚕豆根中桃叶珊瑚苷的质量控制。
【关键词】 野蚕豆根;桃叶珊瑚苷;HPLC法【中图分类号】R284 2 【文献标志码】A 【文章编号】1007-8517(2020)24-0021-04HPLCMethodtoDeterminetheContentofAucubininTheRootsofCentrantheragrandifloraBenthWUYinshuang1 LILi2 SHANRui2 CHENYan2 DUBing2 LIHaining2 YAOZheng2 1 YunnanInstituteofMateriaMedica,Kunming650111,China;2 YunnanUniversityofChineseMedicine,Kunming650500,China;3 chongqingKaizhouTCMHospital,Chongqing405400,ChinaAbstract:ObjectiveToestablishaHPLCmethodforthedeterminationoftheaucubincontentinthecultivatedCentrantheragrandiflorabenth.MethodsQuantitativetestswerecarriedoutbyexternalstandardmethod,inwwhichXBridgeShieldC18column(250nmx4 6nm,5μm)withmethanol-water(2∶98)asmobilephasewasusedforgradientelution.Thechromatographiccondi tionswereasfollows:flowrate1 0mL/min,columntemperature30℃,detectionwavelength203nm.ResultsThemassconcentrationcalculatedbypeakareashowedagoodlinearrelationship(R=0 9990)waswithin12 8~74 4μg/mL.Theaveragerecoverywas100 98%,andtheRSDvaluewas0 695%(n=9).ConclusionAccordingtoourexperimentalstudy,theaverageaubucincontentsof2-yearrooting,1-yearrooting,2-yearstemsandleavesand1-yearstemsandleaveswere2 4815%,0 9759%,0 3758%and0 0266%,respectively.ResultsofthestudyshowedthattheHPLCmethodisnotonlysimple,rapidandaccuratebutalsohasthecharacteristicsofsimpleandeasysampletreatment,whichmeansitissuitableforthequalitycontrolofaubucinintheCentrantheragrandiflorabenth.Keywords:CentrantheragrandifloraBenth;Aubucin;HPLC 野蚕豆根,又名化血丹、小红药、金猫头(广西)、灵芝草(云南),原植物来源于玄参科(Scrophulariaceae)胡麻草属(Centranthera)植物大花胡麻草CentrantheragrandifloraBenth,主要分布于云南、贵州、广西等地,越南、缅甸、印度也有分布[1]。
野蚕豆根的功效与作用野蚕豆根,学名为毛白豆根,属豆科蚕豆属植物。
它是一种山野常见的野生草本植物,生长期短,种植周期短,在我国南方的一些地区广泛分布。
野蚕豆根的主要功效与作用包括降血脂、降血压、抗炎止痛等,因此被广泛应用于药用、食品、养生保健等领域。
一、降血脂作用野蚕豆根富含多种生物活性物质,其中主要活性成分为野蚕豆根皂苷。
研究表明,野蚕豆根皂苷具有明显的降血脂作用。
它能够降低血清中的甘油三酯和胆固醇含量,增加高密度脂蛋白胆固醇水平,改善血脂代谢。
同时,野蚕豆根皂苷还能够增加胆汁酸的排泄,提高胆汁酸的合成,从而促进胆固醇的转运和代谢,减少胆固醇在体内的积累,起到降血脂的作用。
二、降血压作用野蚕豆根内含有一种叫做野蚕豆根碱的生物碱。
野蚕豆根碱具有明显的降压作用。
野蚕豆根碱能够抑制血管紧张素转换酶的活性,减少血管紧张素Ⅱ的生成,从而降低血压。
此外,野蚕豆根碱还能够抑制虚血性心脏病的发作,改善心肌供血,缓解心肌缺血。
因此,野蚕豆根对于高血压患者具有一定的辅助治疗作用。
三、抗炎止痛作用野蚕豆根富含多种抗炎物质,包括黄酮类化合物、多糖类物质等。
这些物质能够抑制炎症反应的发生和发展,减少炎症介质的生成和释放,从而起到抗炎止痛的作用。
研究表明,野蚕豆根水提物对大鼠脚肿胀和炎症反应有明显的抑制作用,能够显著减轻炎症病变,并缓解疼痛。
四、增强免疫力野蚕豆根富含多种营养物质,包括蛋白质、多糖类物质、维生素、矿物质等。
这些物质能够提供充足的营养,增强人体的机体免疫力,提高人体抵抗疾病和损伤的能力。
野蚕豆根水提物对小鼠巨噬细胞活性具有显著的促进作用,能够增加巨噬细胞的吞噬能力和杀伤能力,加强人体的免疫功能。
五、抗氧化作用野蚕豆根富含丰富的黄酮类化合物,这些化合物具有很强的抗氧化作用。
它们能够清除自由基,减轻氧化应激和细胞氧化损伤,防止衰老和疾病的发生。
野蚕豆根水提物对羟自由基的清除能力很强,能够抑制非酶类氧化过程的发生,具有良好的抗氧化效果。
山豆根有效成分提取工艺研究进展山豆根是常用的药食两用植物,其中营养价值非常丰富,含有多种人体所需的营养成分。
根据研究表明,山豆根中含有大量的多糖、黄酮、葫萝卜素、维生素C等成分。
因此,山豆根被广泛应用于保健、养生等领域。
近些年来,随着人们对健康和营养需求的逐渐增加,山豆根的应用范围也逐渐扩大。
但是,山豆根有效成分的提取技术也成为制约其广泛应用的关键技术之一。
因此,在山豆根有效成分提取方面的研究至关重要。
1. 总黄酮提取技术总黄酮在山豆根中占据极大比例,因此,总黄酮提取技术是山豆根有效成分提取技术中重要的一部分。
早期的研究采用传统的水提醇沉法提取总黄酮,但是,这种方法效率较低,提取率较低,同时,还有被其他杂质影响的现象。
后来,使用超声波、微波、微波辅助提取等技术提取总黄酮的方法被提出。
其中,微波辅助提取法提取总黄酮更为高效、快捷、环保,被广泛应用。
多糖也是山豆根中重要的有效成分之一。
针对多糖这一特点,目前多糖的提取技术主要有碱提法、水提法、酸提法、醇提法等。
但是,这些方法存在提取效率较低、传统加热方法容易破坏多糖分子、提取后多糖存在杂质等问题。
因此,新型高效率的多糖提取技术被广泛研究和应用。
例如,超声波法、微波辅助提取法、微波酶解法、生物制剂法等新型技术被用于提取山豆根中的多糖,提高了多糖的提取率、纯度和活性。
3. 工艺优化山豆根有效成分的提取工艺不仅要考虑单一技术,更需要结合多种技术。
针对不同的有效成分、多种提取技术进行优化,以提高有效成分的提取率和纯度。
此外,压力、温度、溶剂比例等因素的影响也需要进一步研究,以优化和调控提取工艺。
综上所述,山豆根有效成分的提取技术是山豆根综合利用研究中必须关注的重要方面。
在当前研究中,应聚焦于总黄酮、多糖等多个成分的提取技术,同时结合工艺优化等方法,以提高提取率、纯度和活性,以满足市场的不同需求。
未来,还需要采用更为先进、高效、环保、可持续的技术,以提高山豆根有效成分的开发利用效益。