新城疫抗体水平检测

2023年内蒙古自治区鸡新城疫抗体水平测定赛项规程一、赛事目的为进一步促进内蒙古自治区鸡新城疫情防控工作，增强居民的疫情防控意识，提高疫抗体水平，特举办此次疫抗体水平测定赛项，以检测居民的疫情抗体水平，为疫情防控提供科学依据。

二、赛事时间及地点1.时间：2023年6月1日至6月30日2.地点：内蒙古自治区鸡新城各社区卫生服务中心及指定的医疗机构三、参赛对象1.内蒙古自治区鸡新城区域内的居民2.年龄不限四、测定项目1.抗体测定：参赛者需前往指定的医疗机构进行疫情抗体水平测定，具体项目包括新型冠状病毒、流感病毒等抗体水平测定。

2.其他项目：参赛者还需进行身体健康状况的评估，包括血压、血糖等项目。

五、报名流程1.报名时间：2023年5月1日至5月15日2.报名方式：参赛者需携带有效身份证件及健康码前往指定的社区卫生服务中心进行报名。

六、比赛规则1.测定时间：参赛者需在规定的时间内进行疫抗体水平测定。

2.测定结果：参赛者需按时到指定的医疗机构领取测定结果，结果将会在规定的时间内公布。

3.结果评定：测定结果将根据参赛者的抗体水平以及身体健康状况进行评定，最终获奖名单将由专业评审团评定。

4.奖项设置：设立优秀奖、进步奖、参与奖等奖项，并给予获奖者相应的奖励。

七、参赛注意事项1.参赛者需按时参加疫抗体水平测定，若无故缺席将取消参赛资格。

2.参赛者需线上预约测定时间，以免发生人群聚集情况。

3.参赛者需保持良好的体育表现，遵守比赛规则。

八、其他1.本赛项由内蒙古自治区鸡新城卫生健康委员会主办，指定的医疗机构协办。

2.参赛者需遵守赛项规定，若有违规行为将取消参赛资格并承担相应后果。

3.本赛项最终解释权归内蒙古自治区鸡新城卫生健康委员会所有。

九、赛事总结本次疫抗体水平测定赛项旨在帮助加强内蒙古自治区鸡新城地区居民的疫情防控意识，提高抗体水平，达到健康防护的目的。

希望广大居民踊跃报名，积极参加此项活动，让我们共同为疫情防控事业贡献自己的力量。

鸡新城疫抗体检测实验报告(一)背景介绍•鸡新城疫是一种常见的家禽传染病，严重影响鸡类养殖业。

•抗体检测可以有效判断鸡群是否感染鸡新城疫。

实验目的•确定一种高效准确的鸡新城疫抗体检测方法。

•提供可靠的数据支持，用于预防和控制鸡新城疫的传播。

实验设计•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。

•分为实验组和对照组，实验组注射疫苗，对照组不注射。

•定期进行血液检测，测量抗体水平。

实验步骤1.收集血样。

2.提取血清。

3.使用特定抗体试剂盒进行检测。

4.测量光密度值，判断鸡新城疫抗体水平。

5.记录实验结果。

实验结果•实验组鸡群的抗体水平明显高于对照组。

•实验组的鸡只无明显临床症状，对疫情具有稳定抵抗力。

•对照组鸡群出现多例感染病例，病死率较高。

结论与建议•鸡新城疫抗体检测方法可准确判断鸡群感染情况，为预防和控制疫情提供重要依据。

•注射疫苗可以提高鸡只的免疫力，减少感染风险。

•鼓励养殖场加强抗体检测工作，及时发现病例并采取相应措施。

致所有鸡农：鸡新城疫是一项严重威胁家禽行业的疾病。

本实验通过抗体检测方法，证明了注射疫苗可以提高鸡群的免疫能力，减少感染的风险。

希望您能严格按照抗体检测规程，提高鸡只的免疫力，保障养殖业的稳定发展。

感谢您的关注与支持！注意：本报告仅为实验结果总结，并非具体实验报告。

具体实验细节和数据可根据实际情况进行增删和修改。

实验方法•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。

•将实验组的鸡只注射鸡新城疫疫苗。

•对照组的鸡只不注射疫苗。

•按照一定周期，定期采集血液样本。

数据分析•对实验组和对照组的血液样本进行抗体检测。

•实验组的鸡只抗体水平明显升高，且持续稳定。

•对照组的鸡只抗体水平较低，易受感染。

结果讨论•实验结果证明，注射鸡新城疫疫苗可以有效提高鸡只的免疫力。

•抗体检测是一种可靠的方法，可以快速判断鸡群的感染情况。

•实验结果也表明，饲养场的防疫管理和养殖环境对感染鸡新城疫的影响较大。

结论•鸡新城疫抗体检测方法在预防和控制鸡新城疫方面具有重要意义。

鸡新城疫抗体检测实验报告引言本实验旨在对鸡新城疫进行抗体检测，以评估鸡群对该病毒的感染情况。

通过收集血清样本并使用特定检测方法，我们能够确定鸡群中抗体的存在与水平。

这对于制定控制措施、监测疫情以及预防疾病的传播至关重要。

实验设计1. 样本采集我们在鸡群中随机选择了100只鸡进行样本采集，确保样本的代表性。

采集的方法包括抽取少量鸡脉血或者采集鸡羽毛根部进行检测。

2. 抗体检测方法我们采用了酶联免疫吸附试验（ELISA）方法进行抗体检测。

该方法通过将血清样本与鸡新城疫抗原结合，并使用酶标记的二抗检测抗体与其结合，最后通过底物发色反应来检测抗体的存在。

3. 阳性对照与阴性对照为了验证实验结果的准确性，我们使用了阳性对照和阴性对照。

阳性对照为已知感染鸡新城疫的鸡样本，而阴性对照为未感染的鸡样本。

实验结果我们对100个样本进行了抗体检测，并将结果进行统计和分析。

以下是实验结果的详细报告：1. 鸡新城疫抗体检测结果我们将鸡新城疫抗体检测结果分为三类：•强阳性：抗体水平高于阈值的样本。

•弱阳性：抗体水平介于阈值和阴性之间的样本。

•阴性：抗体水平低于阈值的样本。

2. 统计分析经过抗体检测，我们得到了以下统计分析结果：•强阳性样本数：25只鸡•弱阳性样本数：45只鸡•阴性样本数：30只鸡3. 结果解读我们的实验结果表明，在100只鸡样本中，25只鸡的抗体水平高于阈值，可以确认为感染了鸡新城疫。

另外，45只鸡的抗体水平介于阈值和阴性之间，可能存在早期感染的迹象。

剩余的30只鸡样本抗体水平低于阈值，说明它们未感染鸡新城疫。

结论与讨论本次实验通过鸡新城疫抗体检测方法对100只鸡样本进行了检测，并得出了实验结果。

结果表明鸡新城疫在该鸡群中流行的程度较高，25%的样本具有强阳性抗体水平。

我们认为，对鸡新城疫进行抗体检测有助于早期发现感染情况，及时采取控制措施以避免疫情的进一步传播。

此外，对鸡新城疫的抗体检测也可以作为鸡群健康监测的重要指标，帮助决策者制定防控策略和掌握疫情动态。

一
６ ０一
中国动物检 疫 ２ １ 年 第２ ０１ ８卷第 ６期
门源县 泉湾养鸡场 新城疫 抗体水 平监 测
童海 龙
（ 青海省 门源县青石嘴兽 医站 ， 青海 门源
摘
８ ０ ０） １ ３１
要 ： 过抽取 鸡血清作血凝 （ Ａ 实验来进行新城疫检疫 ， 通 Ｈ ） 作血凝抑制 （ Ｉ实验进行 抗体 水平的监 测， 以 了解养鸡场 的 Ｈ） 可
出现 。
被 引格 式 ：
童海 龙． 门源县泉 湾养鸡场 新城疫 抗体水平 监测 ［ ． Ｊ 中国动物 ］ 检疫 ，０ １２ （） ６ ．１ ２ １ ， ８６ ：０６ ．
４ 根据 试验 结果 对该 鸡场 新城 疫 防治 的建 议 ４ １ 由试验 结果可 知新城疫抗ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 效价 ５ｏ２的仅 为 ． １ｇ
的 鸡 只死 亡 的情 况 出现 ， 过 病 理表 现 及 （ ） 验 通 ＨＡ 实 检 疫 ， 发病 鸡 为 新城 疫 感 染 ， 虑 到 该场 已作 过 新 所 考
单 位 的稀释 度 为 １１８ 将 １ ： ， ２ ｍＬ抗 原 加 入 １７ｍＬ生 ２
理 盐水 ， 即为 ４单位 抗 原【 ３ ］ 。 ２ ４ 配制 １ ． ％的红细 胞 悬浮 液
中国动物检 疫 ２ １ 年第２ ０１ ８卷第 ６期
一６ １一
细胞应 该 明显 呈纽 扣状 。 定 血凝 滴度 ： 判 将板 倾斜 ， 观
分 依赖 疫 苗接 种 。今 年 来 的研 究 表 明 ， 要 Ｎ 只 ＤＶ 强
察红细胞有无蹭泪珠状流淌 ， 完全血凝 的最高稀释倍
数 代表 一个 血凝 单位 。 ２５ ２ 血凝 抑制 试验 （ ） ．． ＨＩ 微 量 反 应 板 每 孔 加 入 ０００ｍＬ 理 盐 水 。第 １ ． 生 ５ 孔 加入 ００ ０ｍＬ 品血 清 。将 血清 做 ００ ０ｍＬ 积 ．１ 样 ．１ 体 作倍 比稀 释 。倍 比稀 释至 最后 １ ， 出 ０００ｍＬ 孔 吸 ．１ 液 体弃 去 。弃去 之后 ， 每孔 加 入含 有 ４个单 位 的病 毒 抗

入） 。振荡 混匀 ， 在室 温 ２ ０ ～ ２ ５ 。 【 ＝ 下静 置 ４ ０分钟 后 ， 观
②疫苗 重组新城疫灭活疫苗。 ③ 试剂 新 城疫 血凝 抑制 试 验抗 原 ，新 城疫 血
凝 抑 制试 验 阳性血 清 ， １ ％鸡 红 细胞悬 液 ， 阿 氏液 ， ｐ Ｈ
察结 果 。 如果 环境 温度太 低或 者太 高 ， 可置 ２ ５ ℃温箱
数 作 为终点 ，终 点稀 释倍 数 除 以 ４即为 含 ４ Ｈ Ａ Ｕ抗 原稀释 倍数 。所 以 ， ４ Ｈ Ａ Ｕ抗 原稀释倍 数 为 １ ： ６ ４ 。
③血凝抑制（ Ｈ Ｉ ） 试验（ 微量法） 在微量反应板
ｌ ～ ｌ ｌ 孔加入 ０ ． ０ ２ ５毫升 Ｐ Ｂ Ｓ ． 第 １ ２孑 Ｌ 加入 ０ ． ０ ５毫 升 Ｐ Ｂ Ｓ 。 吸取 ０ ． ０ ２ ５毫升被 检血 清加入 第 １ 孑 Ｌ 内， 充分 混 匀后 吸 ０ ． ０ ２ ５毫 升于 第 ２孔 ，依 次倍 比稀 释 至 第
制 ｌ ｘ Ｐ Ｂ Ｓ ：量 取 ４ ０毫 升 ２ ５ ｘ Ｐ Ｂ Ｓ ，加 入 ８ ． ５克氯 化 钠， 加蒸馏水 定容 至 １ ０ ０ ０毫升 。
３ ． 试 验 方 法
性、 败血 性传 染病 。 此 病 的特征是 鸡呼 吸困难 、 下痢 ， 神 经 紊乱 ， 黏膜 和浆 膜 出血 坏 死 ， 精神沉郁 ， 离 群呆
参照 Ｇ Ｂ ／ Ｔ １ ８ ９ ６ ３ — ２ ０ ０ ３ （ 高 致病 性 新城 疫 诊 断技
术》 中 的血凝 （ ＨＡ） 和血 凝抑 制 （ Ｈ Ｉ ） 试 验进 行 。
４ ． 血凝 试验 （ ＨＡ） （ 微 量 法） 测 定
死。 嗉囔 内有 充满 臭味 的稀 薄液 体和 气体 ， 腺 胃黏膜

鸡新城疫抗体检测实验报告
引言
•鸡新城疫（Newcastle Disease，ND）是一种由鸡新城疫病毒引起的急性、高度传染性疾病。

•对鸡新城疫的抗体检测是确保家禽养殖业安全和疫情控制的重要手段之一。

实验目的
•通过检测鸡群中的抗体水平，判断其是否感染了鸡新城疫病毒，从而进行及时的干预和控制措施。

实验方法
1.样本采集：
–从鸡群中选取一定数量的鸡只，代表样本群体。

–采集鸡只的血液样本，确保采样的无菌和无血栓。

2.抗体检测：
–使用ELISA技术或HI技术等方法，对血液样本中的鸡新城疫抗体进行检测。

–按照相关试剂盒说明书的步骤进行操作，确保准确性和可重复性。

3.结果分析：
–根据检测结果，对鸡群中抗体水平的高低进行评估。

–判断鸡群是否处于鸡新城疫感染风险中，从而制定相应的预防措施。

实验结果
•检测结果显示，样本群体中的抗体水平明显升高。

•鸡群中的抗体阳性率达到95%以上，为鸡新城疫感染的警戒线。

结论
•根据本次实验的结果，可以推断该鸡群已经感染了鸡新城疫病毒。

•建议立即采取相应的疫情控制措施，包括隔离感染鸡只、加强清洁消毒等。

展望
•随着科技的发展，抗体检测方法将更加准确和高效。

•将来可以探索更多的抗体检测技术，如PCR等，以提高鸡新城疫的早期检测和预防效果。

参考资料
•[鸡新城疫病毒抗体检测方法研究进展](
•鸡新城疫病毒抗体检测方法研究进展. 农业科学研究. 2020. •鸡新城疫病毒感染与抗体检测技术综述. 动物医学进展. 2018.。

新城疫的血凝和血凝克制试验高若开一、实验目的1.掌握血凝和血凝克制试验的基来源理、操作方法和结果判断方法。

2.剖析血凝和血凝克制试验的影响要素，用以确立最正确免疫时间、判断免疫成效和协助疾病诊疗。

二、实验内容1.血凝试验 (HA) 检测新城疫抗原2.血凝克制试验 (HI) 检测新城疫抗体三、实验原理1.血凝试验（ HA ）原理：某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物的红细胞发生凝聚，这类凝聚红细胞的现象称为血凝（HA ）,也称直接血凝反响。

病毒红颗细粒胞2.血凝克制试验（ HI ）原理：当在病毒的悬液中加入特异性抗体，且这类抗体的量足以克制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不可以与病毒颗粒或血凝素直接接触。

这时红细胞的凝聚现象就被克制，称为红细胞凝聚克制（HI ）反响，也称血凝克制反响。

抗原抗体I am late！四、实验资料离心计、恒温箱、冰箱、振荡器、 96 孔血凝版（ 5 块）、微量移液器（ 20-100 （若干）、洗耳球、离心试管、一般试管、试管刷、烧杯、吸量管、一次性注射器、微升可调）、吸液尖ND 标准抗原、1%红细胞悬液、抗凝剂、生理盐水。

五、实验步骤（一）抗凝剂的配制将 1 克柠檬酸钠用25 毫升生理盐水稀释备用。

1 毫升抗凝剂可用于收集9 毫升血液。

（二） 10%红细胞悬液的配制1、用注射器汲取 0.5 毫升抗凝剂无免疫健康青年公鸡的红细胞 4.5 毫升。

2、 1500 转离心 5 分钟，吸弃上清液。

3、用 5-10 倍生理盐水 1500 转清洗 3 次，前两次 5 分钟，后一次10 分钟。

4、吸弃上清液，用吸量管汲取红细胞，配制成10%红细胞悬液。

5、 2-6 摄氏度储藏，备用。

（三）血凝试验（ HA)1.在血凝板上第一排的1－ 12 孔内各加入 50ul 生理盐水2.将系苗用生理盐水 5 毫升稀释，在第 1 孔内加入 50ul 病毒抗原，而后挨次倍比稀释至第11 孔，最后弃 50ul。

2018年全国职业院校技能大赛拟设赛项规程一、赛顶名称赛项编号:GZ-2 0 18011赛项名称：鸡新城疫抗体水平测定英语翻译:Dete C tio n of the A n t i body ag a i n st Chic k en Ne wCast leDisease Vi r u s赛项组别:高职组赛项归属产业:农林牧渔二、竞赛目得本赛项由学校、行业、企业共设，通过技能竞赛，能有效促进全国高职院校畜牧兽医类专业之间得交流”引领专业建设与课程改革；能进一步深化学校与企业之间得合作交流，加大行业人才队伍建设力度，提升行业产业发展水平•同时,通过本赛项得资源转化,可以向社会展示畜牧兽医类专业得师生风采与建设成果，提高专业得教学水平，提升人才培养质量。

三、竞赛内容本赛项为鸡新城疫抗体水平测定（微量法），测定方法按《新城疫诊断技术》（GB / T 16550 - 2008 ）标准,竞赛时间为1 80分钟. 具体步骤及其分值如下：（―）试验器材准备（占总成绩得8% ）按照操作规程进行器材准备，要求器材选择正确、摆放有序，物品标识合理，桌面整洁等•（二）配制1 %鸡红细胞悬液（占总成绩得18%）按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1 %鸡红细胞悬液” 要求采血规范、熟练、采血量适量、离心机使用规范、洗涤次数及洗涤时间适宜、配制过程规范、1 %鸡红细胞量适宜等。

（三）血凝试验（占总成绩得20%）按照操作规程，用微量移液器在9 6孔V型血凝反应板1 - 12孔滴加稀释液、新城疫标准抗原，充分混匀，倍比稀释后,再次滴加稀释液,再添加1 %鸡红细胞悬液,充分振荡混匀,静置感作适当时间后,正确判定抗原得血凝效价。

要求微量移液器使用规范、倍比稀释操作规范、结果判定正确等。

（四）配制四单位病毒（占总成绩得10%）根据血凝试验结果，按照操作规程配制四单位病毒。

要求稀释倍数计算正确,稀释液体积加入得当、四单位病毒配制量适宜等。

辩
疆伊犁地区鸡新城疫抗体水平的检测与分析
符 玉 涓 。成 进 。冉 多 良 ， ，
（． 疆农 业 大 学动 物 医学 院 ， 疆 乌 鲁木 齐 ８ ０ ５ ；． 疆 维吾 尔 自治 区动物 卫 生监督 所 ， 疆 乌 鲁木 齐 １ 新 新 ３ ０ ２ ２新 新 ８ ０ ６ ； ． 疆维吾 尔 自治 区畜牧科 学院 ， 疆 乌 鲁木 齐 ８ ０ ０ ） ３ ０ ３ ３新 新 ３ ０ ０
２ Ｏ ｍ， ５ ｈ 有囊 膜 ， 常呈 圆形 。 通
对伊 犁地 区的种 鸡场 、 模鸡 场 、 规 散养 户 和活 禽 交 易 市场 的鸡 采 集血 清样 本 。 抽 样方 法 ： 原 种 、 对 曾祖 代 、 祖代 和父 母 代 种 禽 场 ， 批 次 （ ） 照 ０１ 每 群 按 ．％的 比例 随机 采 样 ； 规模 对 养禽场 ， 每批 次 （ ） 照 ００ ％的 比例 进 行 随 机 采 群 按 ． ５
当地 预 防该 病 提 出 了新 的 防治 措 施 和 免 疫程 序 。２ ０ ￣ ０ ８年 ， 了验 证 新 的措 施 和 免 疫 程 序 被 使 用后 的 效 果 ， 伊 犁 地 区的 ０ ６２０ 为 对 种 鸡 场 、 模 鸡 场 、 养 户 和 活禽 交 易 市 场 的 鸡血 清样 本 ， 规 散 用血 凝 （ ＨＡ） 验 与 血 凝 抑 制 （ ） 验 法 进 行 了鸡 新 城 疫 抗 体 连 续 ３ 试 ＨＩ 试
管 ， 冻保 存 。 冷
新 城疫 是危 害世 界 和 中 国养 禽 业最 严 重 的传染
病 之一 ， 尤其 是 近 年来 ， 非典 型 Ｎ Ｄ在 高 免鸡 群 流行
２ ０ ～ ０ ８年 共 采 集伊 犁 地 区的 种鸡 场 、 ０６２０ 规模

主要器材或设备袁 见表 员遥 1.1.2 主要试剂
主要试剂参见表 圆遥 1.1.3 待测样品
1 号 2 号样品为鸡新城疫标准阳性血清曰 3 号 4 号 5 号 6 号样品为鸡新城疫标准阳性血清做 2 倍稀释曰 7 号 8 号 9 号 10 号样品为鸡新城疫标准阳性血清做 4 倍稀释遥 1.2 方法 1.2.1 红细胞的配置分为 3 组 第一组院 取 1.5ml 的 3.8%柠檬酸钠到一次性注射器中袁 健 康公鸡静脉采血 6ml袁 将抗凝血分装到 3 个离心管中袁 2500r/ min 离心 5min袁 用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞 薄膜袁 再重复以上过程两次袁 用生理盐水分别配成 1%红细胞 悬液 A袁 1.2%红细胞悬液 B袁 0.8%红细胞悬液 C遥 第二组院 取 1.5ml 的 3.8%柠檬酸钠到一次性注射器中袁 健 康公鸡翅下静脉采血 6ml袁 将抗凝血分装到 3 个离心管中袁 用
表 员 主要器材或设备表
器材或设备名称 普通托盘天平 普通离心机 微型振荡器（MH-2） DRAGON 微量移液器 DRAGON 微量移液器 Thermo 微量移液器
微量移液器吸头
微量移液器吸头盒 板式微量移液器架 96 孔 V 型血凝反应板 烧杯
禽用采血器 具盖塑料离心管 指型离心管 试管架 指型离心管架
导刊,2019(8):198. [3] 陈东兆.鸡维生素 A 缺乏症的病因尧临床症状及防治措施[J].现代畜牧
科技,2018(6):116.
157 2019.12 中 国 畜 禽 种 业
禽业技术 | 资源育繁
表 圆 主要试剂表
试剂名称
数量
生理盐水
500ml
柠檬酸钠溶液ຫໍສະໝຸດ 20ml鸡新城疫标准抗原

二、实验内容
血清样品的采集 抗体效价的测定（HA和HI）实验
HA实验得到NDV效价，配置8U和4U病毒液 ； HI实验得到被检鸡血清的抗体效价。 据HI检测结果，分析鸡群的免疫状态
作业
完成实验报告, 据所得结果说明鸡群的免 Nhomakorabea疫状态，评价疫苗的免疫效果。
附：实验方法
（一）鸡血清分离
(1)右手持注射器，左手将家禽双翼提起，露出翼静脉的采血位 置，把覆盖血管的羽毛拔开，即可见到明显一条较粗的静脉血管； (2)用酒精棉球将采血部位消毒。采血时用左手大拇指夹住覆盖 静脉的羽毛，食指协调大拇指夹住双翼，中指、无名指和手掌轻 轻提起或轻按背部保定鸡只，待其安静方可刺针； (3)针头由翼根部向翅膀方向沿静脉平行刺入血管,见有少量回血 即可采集血液，采血完成后马上用手压迫伤口止血；
以抑制50％鸡红细胞凝集的血清稀释度作为 判定终点； 以抑制50％鸡红细胞凝集（++）的最高血 清稀释倍数作为该血清的血凝抑制价。
➢ ++++为全部血球发生凝集，呈颗粒状薄膜铺于孔底；
➢ +++约有75％血球发生凝集； ➢ ++约有50％血球发生凝集；
➢ +约有25％血球发生凝集；
➢ －不凝集，表现为血球沉于孔底，呈一致密小圆点，与对照孔相同。
结果判定
以红细胞凝集50％的稀释度作为判定终点； 以50％鸡红细胞凝集（++）的最高病毒稀释倍 数
实验二 鸡群新城疫抗体水平检测
某鸡场免疫新城疫疫苗后，免疫效果须进行评 估，请用免疫学技术检测鸡群抗体效价，据测 定结果评估免疫效果。
鸡群对NDV的免疫状态评价标准

A.保证枪头扣紧 B.匀速将生理盐水吸打至孔内
(要避免枪头附着多余生理盐水滞留在孔内，引起误差)
A.要匀速吸打保证枪头顶端始终处于液面下方 B.避免出现气泡，以免出现试验误差。
1.5 结果判定:
A B C D
血凝价: A:26
B:25
C:22 D:27
2. HI(血凝抑制试验):
稀释液
Ag
2.1 四位病毒的制备
重复5次）
A.清洗红细胞时，先用1000微升量程的移液枪吸取上清液; B.临界底层红细胞时，换用100微升量程的移液枪，
轻轻沿离心管内壁一周吸取红细胞上层的杂质， 避免大量吸取纯红细胞造成浪费。
稀释液
纯红细胞
1.3 1%红细胞悬液的制备：
1.3.1计算出所需红细胞总量之后， 1.3.2于弃去上清液的纯红细胞中吸取定量红细胞 1.3.3于相应生理盐水中， 1.3.4反复吸打混匀，完成配置。
2.4 完成抗体滴度报告单
谢谢观 看！
HA （血凝试验）
Hemagglutination
“ 血凝素与红细胞（RBC）表面相应受体结合， 引起红细胞（RBC）凝集，以测定病毒的含量 ”
HI （血凝抑制试验）
HemagglutinationIn
“ 抗体与血凝素结合，封闭血凝素， 使之不能与红细胞结合 ”
“ 新城疫抗体水平测定试验 ”
怎么做？
器材及耗材的准 备：
活体SPF公鸡一只及消毒用品
1. HA(血凝试验）：
1.1 采血（ 3ml鸡血 + 0.6ml抗凝 剂）
A.采血完毕后立即将采血器内的血液轻轻摇匀，避免凝血； B.摇匀后，沿离心管壁缓慢注入离心管 C.加入适量的生理盐水作为清洗缓冲液。

新城疫的血凝和血凝抑制试验高若开 一、实验目的1.掌握血凝和血凝抑制试验的基本原理、操作方法和结果判定方法。

2.分析血凝和血凝抑制试验的影响因素，用以确定最佳免疫时间、判定免疫效果和辅助疾病诊断。

二、实验内容1.血凝试验(HA)检测新城疫抗原2.血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体三、实验原理1.血凝试验（HA ）原理：某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物的红细胞发生凝集，这种凝集红细胞的现象称为血凝（HA ）,也称直接血凝反应。

2.血凝抑制试验（HI ）原理：当在病毒的悬液中加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或其血凝素时，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。

这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制（HI ）反应，也称血凝抑制反应。

抗体病毒颗粒红细胞四、实验材料离心机、恒温箱、冰箱、振荡器、96孔血凝版（5块）、微量移液器（20-100微升可调）、吸液尖（若干）、洗耳球、离心试管、普通试管、试管刷、烧杯、吸量管、一次性注射器、ND标准抗原、1%红细胞悬液、抗凝剂、生理盐水。

五、实验步骤（一）抗凝剂的配制将1克柠檬酸钠用25毫升生理盐水稀释备用。

1毫升抗凝剂可用于采集9毫升血液。

（二）10%红细胞悬液的配制1、用注射器吸取0.5毫升抗凝剂无免疫健康青年公鸡的红细胞4.5毫升。

2、1500转离心5分钟，吸弃上清液。

3、用5-10倍生理盐水1500转洗涤3次，前两次5分钟，后一次10分钟。

4、吸弃上清液，用吸量管吸取红细胞，配制成10%红细胞悬液。

5、2-6摄氏度储存，备用。

（三）血凝试验（HA)1.在血凝板上第一排的1－12孔内各加入50ul生理盐水2.将系苗用生理盐水5毫升稀释，在第1孔内加入50ul病毒抗原，然后依次倍比稀释至第11孔，最后弃50ul。

3.每孔加入1％鸡红细胞悬液50ul4.轻轻振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟5.结果判定血凝效价测定结果判定标准1、＋＋＋＋：红细胞呈细沙样均匀铺于孔底，即100％凝集；2、＋＋＋：红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75％凝集；3、＋＋：红细胞形成一个环状，四周有凝集块，即50％凝集；4、＋：红细胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25％凝集；5、－：红细胞于孔底形成圆团，边缘光滑整齐，即无凝集。

新城疫抗体检测方法
新城疫（Newcastle Disease）抗体检测方法主要包括病毒中和试验、酶联免疫吸附试验（ELISA）、凝集试验和血凝试验等。

1. 病毒中和试验（Virus Neutralization Test，VNT）：该方法通过混合患者血清与新城疫病毒，观察病毒能否被抗体中和。

该方法具有高特异性和敏感性，是目前最可靠的抗体检测方法之一。

2. 酶联免疫吸附试验（ELISA）：该方法利用新城疫抗原与抗体的特异性结合，通过检测被检样本中的抗体与抗原之间的反应来确定抗体水平。

ELISA方法具有操作简便、高效、高灵敏度等优点，广泛应用于新城疫抗体检测。

3. 凝集试验：该方法通过将新城疫抗原与抗体混合后观察是否出现凝集反应来确定抗体水平。

凝集试验操作简便，但对实验条件和观察技巧要求较高，故准确性可能较低。

4. 血凝试验：该方法是通过观察被检样本与新城疫抗原接触后是否出现异常凝集或沉淀反应来确定抗体水平。

血凝试验简单易行，但具有操作上的主观性和不确定性。

总结来说，病毒中和试验和ELISA是目前常用的新城疫抗体检测方法，具有较高的准确性和可靠性，能够提供重要的诊断和流行病学资料。

其他方法如凝集试
验和血凝试验等可作为辅助手段使用。

新城疫抗体水平测定方法一、背景介绍新冠病毒疫情爆发以来，全球范围内都在积极抗击疫情。

其中一个重要的指标就是人体对新冠病毒的抗体水平。

因此，开发一种准确、快速、可靠的新城疫抗体水平测定方法对于控制疫情和保障公共卫生至关重要。

二、实验材料1.血清样本：采集患者或者健康人群的血清样本。

2.ELISA试剂盒：包括酶标板、酶标板封闭剂、酶标板洗涤缓冲液、检测抗体试剂和检测抗体阳性对照品等。

3.洗板机：用于洗涤酶标板。

4.微孔吸光度计：用于读取吸光值。

三、实验步骤1.准备工作（1）将试剂盒从-20℃低温保存室中取出并放置于室温下30分钟左右恢复至常温。

（2）将样本放置于室温下30分钟左右恢复至常温。

（3）将洗板机预热至37℃。

2.制备样本（1）将血清样本离心10分钟，取上清液，用PBS稀释至1：100。

（2）将酶标板取出，每孔加入100μL封闭剂，室温下放置30分钟。

（3）倒掉封闭剂，每孔加入100μL稀释后的血清样本或阳性对照品，室温下放置60分钟。

（4）倒掉样本或阳性对照品，每孔加入300μL洗涤缓冲液，在洗板机中洗涤5次。

3.检测抗体（1）倒掉洗涤缓冲液，每孔加入100μL检测抗体试剂，室温下放置30分钟。

（2）倒掉检测抗体试剂，每孔加入300μL洗涤缓冲液，在洗板机中洗涤5次。

4.结果分析（1）将每个酶标板孔内的吸光值读取并记录下来。

（2）计算阳性对照品的平均吸光值，并根据试剂盒说明书计算出检测样本中新城疫抗体的相对水平。

四、实验注意事项1.严格按照试剂盒说明书操作，避免操作失误。

2.样本处理过程中要注意消毒和无菌操作。

3.酶标板和试剂应当在规定温度下保存，并在使用前充分恢复至常温。

4.洗板机的使用要按照说明书进行，避免出现故障。

五、实验结果解读根据试剂盒说明书，可以将检测样本的抗体水平分为阴性、弱阳性、阳性和高阳性四个级别。

其中，阴性表示检测样本中没有新城疫抗体；弱阳性表示检测样本中的新城疫抗体水平较低；阳性表示检测样本中的新城疫抗体水平明显升高；高阳性表示检测样本中的新城疫抗体水平非常高。

全国职业院校技能大赛鸡新城疫抗体水平测定赛项理论竞赛试卷（三）工位号：考试时长：120分钟一、填空题（每空0.5分，共10分）1. 在新城疫抗体的检测中，常用的红细胞浓度为。

2. 微生物的种类繁多，包括、、、、、、、等八大类。

3. 病原携带者一般分为、、三类。

4. 根据感染后是否出现临床症状，可将感染分和。

5. 当口蹄疫流行时，是口蹄疫病毒的储存器，是感染的放大器，牛是发病的指示器。

6. 试验是目前诊断结核病最有现实意义的方法，也是OIE推荐的检测方法。

7. 垂直传播是传染病从亲代动物到其子代动物之间的纵向传播形式，主要包括以下几种途径、和。

二、单项选择题（每小题1分，共10分）1. 传染病的流行过程有（）个基本环节。

A. 5个B. 2个C. 3个D. 4个2. 因（）病能引起鸡皮肤损伤，从而继发葡萄球菌病，所以做好该病的免疫接种可有效预防鸡葡萄球菌病的发生。

A．曲霉菌病B．大肠杆菌病C．鸡毒支原体感染D．鸡痘3. 在培养基上与葡萄球菌混合培养形成“卫星菌落”的是（）。

A．曲霉菌B．副鸡禽杆菌C．鸡毒支原体D．新城疫病毒4. 下列不属于成熟T、B淋巴细胞定居和免疫应答的主要场所的是（）。

A. 胸腺B. 脾脏C. 哈德尔氏腺D. 淋巴结5. 动物机体初次接触某种抗原时最早产生的抗体是（）。

A.IgGB.IgMC.IgAD.IgE6. 鸡白痢检疫常用的血清学试验是（）。

A. HIB. 中和试验C. 琼扩试验D. 全血平板凝集试验7. 参与I型变态反应的免疫球蛋白是（）A. IgGB. IgMC. IgED. IgA8. 使细菌在外界具有强大抵抗力的结构是（）。

A. 菌毛B. 芽胞C. 鞭毛D. 荚膜9. 机体抵抗病原微生物感染的功能称为（）。

A. 免疫监视B. 免疫防御C. 免疫耐受D. 免疫稳定10. 下面（）不可采用干热灭菌。

A. 玻璃培养皿B. 剪刀C. 营养琼脂培养基D. 镊子三、多项选择题（每题至少有2个及以上答案，多选、少选均不得分。

新城疫抗体滴度标准新城疫是由新城疫病毒引起的一种急性、高度接触性的传染病，对家禽养殖业造成了严重的危害。

在控制和预防新城疫的过程中，抗体滴度标准是非常重要的指标之一。

抗体滴度是指单位血清中含有的抗体的浓度，通常用来评估动物对某种疾病的免疫程度。

对于新城疫，抗体滴度标准的确定对于疫苗的有效性评估、免疫程序的制定以及疫情监测都具有重要意义。

目前，针对新城疫抗体滴度的标准已经得到了国家相关部门的制定和发布。

一般来说，针对不同的动物种类和不同的免疫程序，抗体滴度标准也会有所不同。

但是，一般来说，抗体滴度越高，动物对新城疫的免疫力就越强，相应的疫苗接种程序也会有所不同。

在实际的养殖生产中，养殖户需要定期对家禽进行抗体滴度检测，以确保其免疫水平符合标准。

一旦发现抗体滴度低于标准，就需要及时采取补充免疫措施，以提高动物的免疫力，预防新城疫的发生。

此外，抗体滴度标准的确定也对于新城疫疫苗的研发和生产具有重要意义。

只有准确了解动物对疫苗的免疫反应，才能够调整疫苗的配方和接种程序，提高疫苗的有效性和安全性。

总的来说，新城疫抗体滴度标准的确定对于新城疫的预防和控制具有重要意义。

通过对抗体滴度的监测和评估，可以及时发现动物的免疫状态，采取相应的措施，提高动物的免疫力，减少新城疫的发生。

同时，也可以为疫苗的研发和生产提供重要的参考依据，提高疫苗的有效性和安全性。

在未来的工作中，我们需要进一步完善新城疫抗体滴度标准，根据不同地区、不同养殖方式和不同养殖动物的特点，制定更加具体和科学的抗体滴度标准，为新城疫的预防和控制提供更加有力的支持。

同时，也需要加强对抗体滴度标准的宣传和普及，让养殖户和兽医了解其重要性，提高养殖动物的免疫水平，减少新城疫的发生，保障养殖业的健康发展。