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全国职业院校技能大赛鸡新城疫抗体水平测定赛项理论竞赛试卷（五）工位号：考试时长：120分钟一、填空题（每空0・5分，共10分）1.病原体由亲代传给子代的现象称为O2.病毒衣壳是包围在病毒核酸外面的一层外壳，其化学成分为O3.流感病毒囊膜上的纤突主要成分是血凝素和o4.在自然条件下，增强微生物毒力的最佳方法的回归。
5.外毒素经0∙3%~0.5%甲醛溶液于37℃处理一定的时间后，使其失去毒性，但仍保留很强的抗原性，称。
6.将同种细菌或病毒的不同血清型混合制成的疫苗为o7.革兰阳性菌细胞壁特有的组分是o8.在动物机体局部黏膜免疫中发挥主要作用的抗体是o9.小鹅瘟属于类动物疫病。
10.寄生虫的生活史属于直接发育型，不需要中间宿主，幼虫或虫卵在外界发育到感染期直接感染动物和人，称该寄生虫为。
11.由沙门氏菌引起仔猪发生的一种传染病被称为o12.结核病特征是在患病的组织器官上形成结核结节、病灶和钙化病变。
13.蓝舌病最易感的动物是o14.寄生于宿主体内的蠕虫主要有吸虫、线虫和棘头虫和。
15.牛海绵状脑病病原为与痒病病毒相似的一种o16.小反刍兽疫病理剖检盲、结近端和直肠出现特征性充血、出血。
17.由一个B细胞克隆针对单一抗原决定簇产生的抗体，称抗体。
18.家畜中最易感染口蹄疫病毒的动物是。
19.乙脑病传播媒介为蚊虫，其流行具有明显的o20.动物机体的特异性免疫应答的基本过程包括致敏阶段、反应阶段和O二、单项选择题（每小题1分，共10分）1.鸡产蛋下降综合症是由（）引起。
A.大肠杆菌B.沙门氏菌C.饲养管理不善D.禽腺病毒2.初次体液免疫应答过程中最早产生的抗体是（）。
A.IgGB.IgMC.IgAD.IgE3.机体自然感染病毒后产生的免疫力属于（）。
A.天然被动免疫B.天然主动免疫C.人工主动免疫D人工被动免疫4.与弱毒疫苗相比，灭活疫苗的特点是（）。
A.难保存B.接种量小C.体内可繁殖D.使用安全5.细菌在固体培养基上生长形成的菌落连成一片，称为（）。
全国职业院校技能大赛鸡新城疫抗体水平测定赛项理论竞赛试卷（八）工位号：考试时长：120分钟一、填空题（每空0・5分，共10分）1 .革兰阴性菌外膜层中镶嵌的多种蛋白质的统称是。
2 .细菌产生的毒素有和两种。
3 .细菌的遗传基因主要存在于o4 .细菌的菌落最常见的两种类型是和。
5 .病毒增殖的方式o6 .细菌增殖速度最快的时期是o7 .动物传染病的发展过程，在多数情况下具有一定的规律性，一般分为、、明显期和四个阶段。
8 .产肠毒素性大肠杆菌可引起、和仔猪水肿病等多种大肠杆菌病，是致初生仔猪和断奶仔猪腹泻的最常见和最重要的病原菌。
9 .鸭病毒性肝炎是由引起的急性、高度致死性传染病。
10 .非特异性免疫又称为o11 .免疫应答分为致敏阶段、和三个阶段。
12 .I型变态反应又称为,是发生速度最快的变态反应；发生速度最慢的变态反应是型变态反应。
二、单项选择题（每小题1分，共10分）1 .细菌异染颗粒使用碱性美蓝染色时呈现颜色为（）。
A.蓝色B.橙红色C.黑色D.红紫色2 .某些革兰阳性菌在一定条件下，菌体内可形成一个折光性强、通透性低的圆形或椭圆形的休眠体，称为（）。
A.荚膜B.包含体C.芽胞D.内含物3 .Q热的病原是（）。
A.支原体B.衣原体C.立克次氏体D.螺旋体4 .病毒衣壳的化学成分是（）。
A.纤维素B.糖类C.蛋白质D.脂质5 .以下不是非特异性免疫的特点的是（）。
A.遗传性B.针对性C.基础免疫性D.先天性6 .动物血清中含量最高的免疫球蛋白是（）oA.IgGB.IgDC.IgAD.IgE7 .具有疫苗作用的是（）。
A.内毒素B.外毒素C.类毒素D.抗毒素8 .用于稀释鸡的血清的电解质浓度为（）。
A.0.9%B.3%C.5%D.8%-10%9 .某100O只肉鸡群，4周内发病500只，死亡300只。
该病的病死率是（）。
A.30%B.50%C.60%D.40%10 .羊布鲁菌M5弱毒苗对以下哪种动物无免疫效果（）。
鸡新城疫血凝（HA)和血凝抑制(HI）抗体水平测定法1．本次实验的目的和要求掌握鸡新城疫血凝（HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法，以便检查疫苗使用效果和制定合理免疫程序。
2．实验内容或原理某些病毒（如新城疫病毒,禽流感病毒等）能够与动物的红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象（HA)。
这种红细胞凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制，即为红细胞凝集抑制试验（HI）。
3．需用的仪器或试剂等动物健康成鸡2-5只,被检鸡15—25只.器材高压灭菌器、滤纸、试管、试管架、离心机、离心管、三棱针、内径2mm聚乙烯塑料管100cm、酒精灯、石蜡、96孔V型微量凝集试验板、0。
025mm微量吸液器、微型振荡器、微量移液器、脱脂棉等。
药剂（1)浓缩抗原;（2）生理盐水或磷酸缓冲盐水（PBS）；（3）Alsever细胞保存液;（4）红细胞悬液;(5）待检血清4．实验步骤（1)发现与鉴定病毒：鸡新城疫和禽流感病毒分离后，这些病毒能凝集鸡的红细胞，又能被特异性的已知免疫血清抑制其凝集反应，即可鉴定此病毒。
（2）诊断病毒性疾病：如取同一发病的动物早期和恢复期血清进行红细胞凝集抑制实验，如抗体效价有4倍以上升高,即有诊断意义。
（3)免疫机体抗体效价的测定：3。
鸡新城疫(ND）的HA和HI（1）试验准备①抗原：一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUra系冻干苗作为已知抗原,进行试验。
② 0.7%细胞悬浮液：由鸡翅静脉或心脏采血，放入含有抗凝剂的灭菌试管(按每毫升血加入3.8％灭菌柠檬酸钠0.2毫升做抗凝剂）内，迅速混匀.如当时不用,可直接采血放入红细胞保存液内(保存液2份,血液1份)于4℃冰箱内可保存两周。
红细胞悬液的配制：将血液注入离心管中，经3000转／分钟，离心5—10分钟，用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜，将沉淀的红细胞加稀释液(生理盐水）洗涤。
再用离心机3000转／分钟离心5-10分钟，弃上清,再加稀释液洗涤，如此反复洗涤三次，将最后一次离心后的红细胞泥，按0.7％的稀释度加入稀释液（0。
162019年第 49卷·第5期本赛项由学校、行业、企业共同设立。
通过采取全国统一标准进行技能竞赛，有效促进全国高职院校畜牧兽医类专业之间的交流，引领专业建设与课程改革；能进一步深化学校与企业之间的合作交流，为专业建设和课程改革增添了新的思路，同时通过本赛项的资源转化，可以向社会展示畜牧兽医类专业的师生风采和建设成果，提高专业的教学水平，提升人才培养质量[1,2]。
１ 比赛对照标准鸡新城疫抗体水平测定技能大赛赛项是以教育部颁布的国家职业标准《动物疫病防治员》（高级）为基础，以国家标准GB/T16550-2008[3]《鸡新城疫诊断技术》为依据，严格按照大赛组委会赛项规定[4]，进行结果判定和评分。
1.1 实验仪器的准备以2018年全国职业院校技能大赛赛项规程为例。
实验器材的准备占实验总成绩的8%。
主要要求参赛选手按照操作规程进行器材准备，要求器材选择正确、摆放有序，物品标识合理，桌面整洁等。
由赛组委会提供的项目竞赛用仪器、设备与材料共计34项。
但在实际操作过程中并不是所有的全部选用，选择仪器设备要以“使用合理的前提下够用”为原则。
在仪器与材料准备时要检查清点，并要做好清晰合理的标识。
使用的烧杯、离心管、离心管盖和血凝板都要进行标识。
实验器材的摆放要严格遵守分区摆放的原则，明确污染区和洁净区各自物品的数量和用途。
摆放完毕尽可能的不要去来回挪动器材，尽可能的做好各区域之间的互不干扰。
该赛项中主要用到的仪器有不同规格的精准微量移液器及相应的配套材料、离心机、托盘天平、微型震荡器，用到的实验材料及动物有非免疫公鸡、禽用采血器、96孔微型反应板、烧杯等。
对仪器的操作和使用要掌握其工作的原理，尤其要做好规范操作和合理使用。
1.2 1%鸡红细胞悬液配制1%鸡红细胞悬液的配置情况直接影响到实验的进度和实验结果的准确性。
而配置过程中采血是否成功是最为关键的。
在配置1%鸡红收稿日期：2019-03-26作者简介：张春霞（1989-），女，青海湟中人，讲师，主要研究方向为动物疫病防控。
职业院校技能大赛“鸡新城疫抗体水平测定”赛项规程一、赛项名称赛项编号：GZ-108赛项名称：鸡新城疫HI抗体水平测定。
英语翻译：Detection of the antibody titer against the Newcastle disease virus赛项组别：高职组赛项归属产业：农林牧渔大类二、竞赛目的本赛项考核的核心技能是鸡的采血方法、1%鸡红细胞悬液配制、红血球凝集（hemagglutination，HA）试验操作与结果判定、四个血凝单位（HAU）病毒溶液配制、红血球凝集抑制（hemagglutination inhibiion，HI）试验操作与结果判定、HI抗体滴度报告撰写等技能。
本赛项考核的核心知识是《动物微生物学》、《兽医免疫学》、《兽医临床诊疗技术》、《动物传染病学》等专业课程理论知识。
本赛项由学校、行业、企业共设，是高职畜牧兽医专业的核心技能，通过技能竞赛有效促进学校建设并完善实验、实训平台，加强核心技能的训练，提升高职畜牧兽医专业的人才培养质量。
同时，通过竞赛方式也有效促进学校与企业之间的合作交流，推动高职畜牧兽医等专业教学改革和校企合作，共同培养畜牧兽医行业一线技能型人才。
三、竞赛内容该项目由两人配合完成，按照操作规程进行试验器材的准备，并进行标识，合理摆放；之后进行采血、离心、洗涤，配制1%鸡红细胞悬液；用微量移液器在96孔V形微量反应板上进行红血球凝集试验，测定新城疫标准抗原的血凝价；根据血凝试验测定的新城疫标准抗原的血凝效价，配制4个血凝单位病毒溶液；进行被检血清的血凝抑制试验操作，并设新城疫标准阳性血清对照、阴性血清对照；正确读取HI抗体滴度结果，并完成试验相关记录和测定结果报告。
四、竞赛方式本赛项为团体赛。
每组参赛学生2名，比赛由2名学生配合完成，参赛选手均为高职院校在籍学生。
每组选手限2名指导教师，指导教师须为本校专兼职教师。
五、竞赛流程本项目竞赛日程与流程安排见表1。
45鸡场抗体监测与报告结果解读冯现明（林州市动物疫病预防控制中心456550）生产安全是养鸡场的首要生产目标，只有生产安全，才可能有养殖效益。
在做好鸡场生物安全的同时，要保证生产安全，必须提高鸡群抗病能力。
提高鸡群抵抗力最重要的途径就是做好免疫工作，而免疫效果的好坏，不能从鸡群表面分辨出来，实验室检测就成了考核群体抵抗力的唯一客观评价标准。
因此，鸡场疫情监测作为评价生产安全的一个客观标准，在养鸡生产中的作用尤为突出。
1抗体监测抗体监测是客观评价鸡群免疫抗体水平，了解鸡群抗病能力的一种实验室技术手段，也是对鸡群抗病力的客观评价标准。
1.1疫情监测的目的1.1.1制定合理免疫程序在蛋鸡产蛋期内，尤其是产蛋高峰期内，为减少免疫应激，要尽量减少免疫次数，又要保持坚强的免疫力，就需要准确把握免疫时间，要知道精确的免疫窗口期就要进行抗体检测；根据抗体水平和抗体值离散度情况确定接种时机，从而制定出合理的免疫程序。
1.1.2辅助诊断疫病鸡群发生疫病，发现明显临床症状时，通过抗体检测，对比抗体值高低和抗体值的离散度，如果抗体值高于发病阈值（不同病种阈值不同）且抗体值离散度较高，即可判定鸡群内有发病鸡只或鸡群发病。
而对于未免疫该病疫苗的鸡群，如果发现抗体阳性即可判定为鸡群内有发病鸡只或鸡群发病。
1.1.3评价免疫效果免疫效果评价是对疫苗产品质量、接种操作、疫苗保存运输等多方面进行验证的综合性考核工作。
通过实验室检测，了解鸡群抗体生成快慢、维持时间长短和抗体高峰值高低，可以对疫苗产品质量有个大概评价。
同时通过对鸡群的监测，还可以了解免疫操作是否规范，疫苗保存运输是否安全可靠。
只有疫苗产品质量良好、操作规范、保存运输条件符合基本要求，才能有一个好的免疫效果。
2监测报告的解读2.1抗体阴性与阳性定义阴性，是指未能检测到特异性的目标抗体或目标抗体值不大于阴性抗体阈值；阳性是指能明确检测到特异性目标抗体且目标抗体值不小于阳性抗体阈值。
职业院校技能大赛“鸡新城疫抗体水平测定”赛项规程一、赛项名称赛项编号：GZ-108赛项名称：鸡新城疫HI抗体水平测定。
英语翻译：Detection of the antibody titer against the Newcastle disease virus赛项组别：高职组赛项归属产业：农林牧渔大类二、竞赛目的本赛项考核的核心技能是鸡的采血方法、1%鸡红细胞悬液配制、红血球凝集（hemagglutination，HA）试验操作与结果判定、四个血凝单位（HAU）病毒溶液配制、红血球凝集抑制（hemagglutination inhibiion，HI）试验操作与结果判定、HI抗体滴度报告撰写等技能。
本赛项考核的核心知识是《动物微生物学》、《兽医免疫学》、《兽医临床诊疗技术》、《动物传染病学》等专业课程理论知识。
本赛项由学校、行业、企业共设，是高职畜牧兽医专业的核心技能，通过技能竞赛有效促进学校建设并完善实验、实训平台，加强核心技能的训练，提升高职畜牧兽医专业的人才培养质量。
同时，通过竞赛方式也有效促进学校与企业之间的合作交流，推动高职畜牧兽医等专业教学改革和校企合作，共同培养畜牧兽医行业一线技能型人才。
三、竞赛内容该项目由两人配合完成，按照操作规程进行试验器材的准备，并进行标识，合理摆放；之后进行采血、离心、洗涤，配制1%鸡红细胞悬液；用微量移液器在96孔V形微量反应板上进行红血球凝集试验，测定新城疫标准抗原的血凝价；根据血凝试验测定的新城疫标准抗原的血凝效价，配制4个血凝单位病毒溶液；进行被检血清的血凝抑制试验操作，并设新城疫标准阳性血清对照、阴性血清对照；正确读取HI抗体滴度结果，并完成试验相关记录和测定结果报告。
四、竞赛方式本赛项为团体赛。
每组参赛学生2名，比赛由2名学生配合完成，参赛选手均为高职院校在籍学生。
每组选手限2名指导教师，指导教师须为本校专兼职教师。
五、竞赛流程本项目竞赛日程与流程安排见表1。
西安市鸡新城疫免疫抗体水平调查与分析苏琪;李小丽【摘要】为更好地了解全面免疫后鸡群抗体产生情况和抗体滴度分布规律,对西安市不同区县、不同来源的鸡群进行了新城疫免疫抗体监测.从2011到2015年,从西安市下辖的未央区、高陵区、长安区、灞桥区、阎良区、户县、周至县及蓝田县等区县共采集血样3 465份,涉及规模以上养鸡场120个,散养户10个,畜禽交易市场3个,其中合格样品3 227份.对采集来的血样分离血清,采用血凝试验和血凝抑制试验检测抗体滴度,对监测结果按照依据进行分类统计.结果表明,从2011年到2015年,西安市不同区县鸡群春秋两季新城疫免疫抗体合格率均达到了70%以上,平均合格率为93%,免疫效果良好.5年的数据和春秋两季抗体合格率监测结果表明,采用合理的免疫程序和规范操作,全面免疫后鸡群新城疫抗体保护水平较高,采用的免疫程序可以作为参考程序推广应用.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2017(038)006【总页数】5页(P102-106)【关键词】鸡;新城疫;免疫;抗体;调查【作者】苏琪;李小丽【作者单位】西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌 712100;安市灞桥区畜牧技术推广中心,陕西西安 710038;西安市灞桥区动物卫生监督所,陕西西安 710038【正文语种】中文【中图分类】S852.659.5目前，我国规定对新城疫(Newcastle disease,ND)进行全面免疫预防，主要采取接种疫苗的方法进行本病的防控。
为了解和掌握西安市不同区县鸡群新城疫免疫情况，评价疫苗接种后的免疫效果，制定科学的免疫程序，笔者依据对西安市13个区县鸡群新城疫抗体水平监测与分析结果，对新城疫免疫接种效果进行评价，为进一步做好新城疫防控工作提供科学依据。
1.1 材料1.1.1 样品2011年至2015年从西安市下辖的未央区、高陵区、长安区、灞桥区、阎良区、户县、周至县及蓝田县等区县共采集鸡血样3 465份。
附件1：高职农林牧渔专业类鸡新城疫抗体水平测定赛项技能竞赛规程、评分标准及选手须知一、竞赛内容本项目为鸡新城疫抗体水平测定（微量法），测定方法按《新城疫抗体诊断技术》（GB/T16550-2008）标准进行。
本赛项不设理论考试，只对技能操作进行综合考核，技能竞赛题为公开试题，见本赛项规程的主要技术规程及要求。
二、竞赛方式本赛项为2人小组赛，以院校为单位组队参赛，不得跨校组队。
三、竞赛时量比赛时间为3小时。
比赛时由参赛队自行确定分工完成相关竞赛内容。
四、名次确定办法本赛项满分100分，采用分项计分法。
按总分由高到低排序，总分相同按完成时间先后排序，用时少者列前；若二项均相同，则按抗体滴度报告、西凝试验得分高低依次排序。
五、评分标准与评分细则1．评分标准及分值项目技能竞赛评分标准及分值见表1。
表1 项目技能竞赛评分标准及分值2．评分细则项目技能竞赛评分细则见表2。
表2 项目技能竞赛评分细则六、赛点提供的设施设备仪器清单仪器设备按《新城疫诊断技术》（GB/T16550-2008）标准要求配制，且均为常用仪器、设备与材料。
本赛项所用的仪器、设备与材料见表3。
七、选手须知（一）主要技术规程及要求鸡新城疫抗体水平测定（微量法）按《新城疫抗体诊断技术》（GB/T16550-2008）标准进行,具体步骤及其分值如下：（一）试验器材准备（占总成绩的8%）按照操作规程进行器材准备，要求器材摆放有序，物品标识合理，桌面整洁等。
（二）配制1%鸡红细胞悬液（占总成绩的18%）按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1%鸡红细胞悬液，要求采血规范、熟练、采血量适量、离心机使用规范、洗涤次数及洗涤时间适宜等。
（三）血凝试验（占总成绩的20%）按照操作规程，用微量移液器在96孔V型血凝反应板滴加稀释液、新城疫标准抗原，充分混匀，倍比稀释后，添加1%鸡红细胞悬液，充分振荡混匀，正确判定抗原的血凝效价。
要求微量移液器使用规范、倍比稀释操作规范、结果正确等。
鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）抗体水平测定法1．本次实验的目的和要求掌握鸡新城疫血凝（HA）和血凝抑制（HI）抗体水平测定法，以便检查疫苗使用效果和制定合理免疫程序。
2．实验内容或原理某些病毒(如新城疫病毒，禽流感病毒等)能够与动物的红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象(HA)。
这种红细胞凝集现象可于病毒悬液中加入特异免疫血清所抑制，即为红细胞凝集抑制试验(HI)。
3．需用的仪器或试剂等动物健康成鸡2-5只，被检鸡15-25只。
器材高压灭菌器、滤纸、试管、试管架、离心机、离心管、三棱针、内径2mm聚乙烯塑料管100cm、酒精灯、石蜡、96孔V型微量凝集试验板、0.025mm微量吸液器、微型振荡器、微量移液器、脱脂棉等。
药剂（1）浓缩抗原；（2）生理盐水或磷酸缓冲盐水（PBS）；（3）Alsever细胞保存液；（4）红细胞悬液；（5）待检血清4．实验步骤(1)发现与鉴定病毒：鸡新城疫和禽流感病毒分离后，这些病毒能凝集鸡的红细胞，又能被特异性的已知免疫血清抑制其凝集反应，即可鉴定此病毒。
(2)诊断病毒性疾病：如取同一发病的动物早期和恢复期血清进行红细胞凝集抑制实验，如抗体效价有4倍以上升高，即有诊断意义。
（3）免疫机体抗体效价的测定：3.鸡新城疫（ND）的HA和HI（1）试验准备①抗原：一般以鸡新城疫Ⅱ系或LaUra系冻干苗作为已知抗原，进行试验。
② 0.7％细胞悬浮液：由鸡翅静脉或心脏采血，放入含有抗凝剂的灭菌试管(按每毫升血加入3.8％灭菌柠檬酸钠0.2毫升做抗凝剂)内，迅速混匀。
如当时不用，可直接采血放入红细胞保存液内(保存液2份，血液1份)于4℃冰箱内可保存两周。
红细胞悬液的配制：将血液注入离心管中，经3000转／分钟，离心5-10分钟，用吸管吸去上清液和红细胞上层的白细胞薄膜，将沉淀的红细胞加稀释液(生理盐水)洗涤。
再用离心机3000转／分钟离心5-10分钟，弃上清，再加稀释液洗涤，如此反复洗涤三次，将最后一次离心后的红细胞泥，按0.7％的稀释度加入稀释液(0.7毫升红细胞泥加99.3毫升稀释液)。
附件1：高职农林牧渔专业类鸡新城疫抗体水平测定赛项技能竞赛规程、评分标准及选手须知一、竞赛内容本项目为鸡新城疫抗体水平测定（微量法），测定方法按《新城疫抗体诊断技术》（GB/T16550-2008）标准进行。
本赛项不设理论考试，只对技能操作进行综合考核，技能竞赛题为公开试题，见本赛项规程的主要技术规程及要求。
二、竞赛方式本赛项为2人小组赛，以院校为单位组队参赛，不得跨校组队。
三、竞赛时量比赛时间为3小时。
比赛时由参赛队自行确定分工完成相关竞赛内容。
四、名次确定办法本赛项满分100分，采用分项计分法。
按总分由高到低排序，总分相同按完成时间先后排序，用时少者列前；若二项均相同，则按抗体滴度报告、西凝试验得分高低依次排序。
五、评分标准与评分细则1．评分标准及分值项目技能竞赛评分标准及分值见表1。
表1 项目技能竞赛评分标准及分值2．评分细则项目技能竞赛评分细则见表2。
表2 项目技能竞赛评分细则六、赛点提供的设施设备仪器清单仪器设备按《新城疫诊断技术》（GB/T16550-2008）标准要求配制，且均为常用仪器、设备与材料。
本赛项所用的仪器、设备与材料见表3。
七、选手须知（一）主要技术规程及要求鸡新城疫抗体水平测定（微量法）按《新城疫抗体诊断技术》（GB/T16550-2008）标准进行,具体步骤及其分值如下：（一）试验器材准备（占总成绩的8%）按照操作规程进行器材准备，要求器材摆放有序，物品标识合理，桌面整洁等。
（二）配制1%鸡红细胞悬液（占总成绩的18%）按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1%鸡红细胞悬液，要求采血规范、熟练、采血量适量、离心机使用规范、洗涤次数及洗涤时间适宜等。
（三）血凝试验（占总成绩的20%）按照操作规程，用微量移液器在96孔V型血凝反应板滴加稀释液、新城疫标准抗原，充分混匀，倍比稀释后，添加1%鸡红细胞悬液，充分振荡混匀，正确判定抗原的血凝效价。
要求微量移液器使用规范、倍比稀释操作规范、结果正确等。
2014年全国职业院校技能大赛“鸡新城疫抗体水平测定”赛项规程一、赛项名称赛项编号：G-057赛项名称：鸡新城疫抗体水平测定英语翻译：Detection of the antibody titer againstthe Newcastle disease virus赛项组别：高职组赛项归属产业：农业二、竞赛目的通过本项目竞赛，促进高职学生了解鸡新城疫抗体水平测定的内容，熟练掌握测定方法，提高检测水平，培养学生的团队合作能力，不断提升学生的职业能力；引领农业职业院校适应畜牧业行业现状及技术发展趋势，促进畜牧兽医专业建设与教学改革；推进学院与相关企业深度合作，更好地实现工学结合的人才培养模式，为畜牧兽医行业培养高素质技术技能型人才。
三、竞赛内容与时间（一）竞赛内容竞赛项目为鸡新城疫抗体水平测定（微量法）。
测定方法参考《新城疫诊断技术》（GB/T16550—2008）标准，具体分为6个部分。
竞赛总时间为180分钟。
1.试验器材准备（占总成绩的6%）按照操作规程进行试验器材的准备，并进行标识，合理摆放。
2.配制1%鸡红细胞悬液（占总成绩的20%）按照操作规程进行采血、离心、洗涤、配制1%鸡红细胞悬液。
3.血凝（HA）试验（占总成绩的16%）按照操作规程，用微量移液器在96孔V型血凝反应板上滴加稀释液、新城疫标准抗原，充分混匀后倍比稀释，添加1%鸡红细胞悬液，充分振荡和感作，正确判定抗原的血凝效价。
4.配制四单位病毒（占总成绩的15%）根据HA试验测定结果，按照操作规程配制四单位病毒。
5.血凝抑制（HI）试验（占总成绩的16%）按照操作规程，对10个被检血清进行血凝抑制试验操作，同时设新城疫标准阳性血清对照和阴性血清对照。
6.抗体滴度报告（占总成绩的27%）按照操作规程正确读数，填写完成报告单。
（二）竞赛时间四、竞赛方式本赛项为团体赛。
每组参赛学生2名，须为同校在籍学生。
由各省、自治区、直辖市教育行政部门商农业行政部门，在本区域内设置畜牧兽医专业的涉农高职院校全日制在籍学生中（参赛选手年龄须不超过25周岁，即2014年7月1日前不满26周岁），经选拔组成1个代表队参加比赛，每队限报1名指导教师。
本赛项本次竞赛不邀请境外代表队参赛。
竞赛安排上午、下午各一场，竞赛场次由领队抽签决定。
竞赛场座位号由选手抽签决定，竞赛用仪器设备、材料及实验动物与座位号对应。
五、竞赛试题本赛项不设理论考试，只对操作技能进行综合考核，技能竞赛题为公开试题，见本赛项规程的竞赛内容。
六、竞赛规则1.参赛选手必须持本人身份证和参赛证竞赛。
2.参赛选手提前15分钟检录进入赛场，按照抽签座位号参加比赛，不得擅自变更、调整。
迟到15分钟以上者取消参赛资格；开赛15分钟后，选手方可离开赛场。
3.选手进入赛场后须检查实验用品是否齐全，如有疑问向裁判或工作人员询问。
4.选手在竞赛过程中不得擅自离开赛场，如有特殊情况，需经裁判同意；选手若需休息、饮水或去洗手间等，所耗用时间计算在比赛时间内。
5.选手实物标签上不得有任何暗示选手身份的记号或符号，否则取消竞赛成绩。
6.各组参赛选手要做好详细试验记录，判定试验结果时要举手示意裁判。
7.竞赛时间结束时，选手应立即停止操作，不得以任何理由拖延竞赛时间。
结束后举手示意，由志愿者记录结束时间，选手签座位号确认后离开比赛现场。
七、竞赛环境竞赛场地为承办单位独立的实验室，面积约为130㎡，赛场内设有18张独立的实验台，每张实验台标有座位号，每组选手根据抽签座位号对应实验台。
实验室环境照明、控温良好，符合竞赛标准环境要求。
八、技术规范竞赛项目以国家职业标准《动物疫病防治员》（高级）规定的技能要求为基础，以中华人民共和国国家标准（GB/T16550—2008）“新城疫诊断技术”为依据，操作规范与要求参考（GB/T16550—2008）的第5（血凝试验）和第6（血凝抑制试验）两个部分。
九、技术平台本竞赛项目需要的仪器设备符合各高职农业类院校畜牧兽医专业建设要求。
竞赛所用仪器、设备与材料等均为畜牧兽医专业常用仪器、设备与材料。
1.仪器与设备本竞赛项目所用仪器设备见表2。
2.试剂及辅料生理盐水250ml、3.8%柠檬酸钠溶液20ml、新城疫标准抗原（标识字母A）、被检血清10份（分别标识编号1、2、3、4、5、6、7、8、9、10）、新城疫标准阳性血清（标识字母B）、新城疫标准阴性血清（标识字母C）；75%酒精棉球若干、标签纸若干、实验报告单1张。
3.实验动物非免疫公鸡1只。
十、评分标准项目竞赛评分标准细则见表3。
十一、评分方法1.裁判员组成聘请相关专业职业技能鉴定高级考评员、行业企业专家、高等院校专业教师为裁判员，建议由7～9人组成。
2.裁判评分方法裁判员根据评分标准，采取过程评分和操作结果评分相结合的方式进行独立评分，评分按100分制计分。
3.成绩产生方法裁判员的评分中，去掉最高分和最低分，取平均分作为竞赛各组选手最终得分。
4.成绩审核方法各裁判员首先审核自身对选手的原始打分成绩，并签名；裁判长对所有裁判员的打分成绩进行审核，并签名；最终，竞赛组委会总裁判长对本项目裁判员的打分成绩进行最终审核，并签名。
5.成绩公布方法竞赛组委会对本项目裁判员的打分进行最终审核后，再根据成绩产生的方法，计算出选手最终成绩后，即可公布成绩。
若有异议者，及时向竞赛组委会进行申诉与仲裁。
十二、奖项设定本赛项为团体奖。
竞赛奖项设定为：一等奖占比10%，二等奖占比20%，三等奖占比30%。
获得一等奖的指导教师由组委会颁发优秀指导教师证书。
十三、赛项安全1.赛场的管理员、裁判员、参赛选手一律凭大赛执委会统一配发的证件进入。
2.进入赛场的人员一律不得携带包、食品、饮料等物品。
3.赛场严禁吸烟。
4.管理员、裁判员、参赛员等进入赛场后要严格阅读赛场的应急安全疏散图，当发生紧急情况，听到疏散指令（警报声响）时，要迅速按疏散图撤离赛场。
5.竞赛用生物制品均由符合国家标准的企业生产与提供。
实验动物符合生物安全规范，竞赛场所按相关技术规范与要求设计。
十四、申诉与仲裁本赛项在竞赛过程中若出现有失公正或有关人员违规等现象，代表队领队可在竞赛结束后2小时之内向仲裁组提出申诉。
大赛采取两级仲裁机制。
赛项设仲裁工作组，赛区设仲裁委员会。
大赛执委会办公室选派人员参加赛区仲裁委员会工作。
赛项仲裁工作组在接到申诉后的2小时内组织复议，并及时反馈复议结果。
申诉方对复议结果仍有异议，可由省（市）领队向赛区仲裁委员会提出申诉。
赛区仲裁委员会的仲裁结果为最终结果。
十五、竞赛观摩1.本赛项公开观摩的对象本赛项公开观摩的对象为：全国各中等职业院校畜牧兽医类专业的专业负责人、骨干教师、各相关企业负责人、各畜牧兽医行业或协会组织负责人、各农业出版社负责人等。
2.本赛项公开观摩的方法为了不影响选手进行本项目的比赛，采取分批、分时的方法，分期到赛场指定观摩地点，通过玻璃墙来进行观摩。
3.观摩时应遵守的纪律观摩时应服从组委会的统一安排，分批进入指定的赛场观摩地点；在观摩时，不得大声喧哗，不得擅自进入赛场，不得对选手进行暗示，不得抽烟等。
十六、竞赛视频本赛项将安排赛程摄录像，记录竞赛全过程，制作优秀选手采访、优秀指导教师采访、裁判专家点评和企业人士采访视频资料，突出赛项的技能重点与优势特色，为宣传、仲裁、资源转化提供全面的信息资料。
十七、竞赛须知（一）参赛队须知1.发扬良好的道德风尚，听从指挥，服从裁判，不弄虚作假。
2.坚决执行竞赛的各项规定，对竞赛期间的意见和建议及时向执委会提出。
3.各参赛队应可在竞赛开始前一天规定时间段进入赛场熟悉环境。
（二）指导教师须知1.每组选手限1名指导教师。
2.指导教师经报名并通过资格审查后确定，选手和指导教师的对应关系一经确定不得随意变更。
3.比赛期间，指导教师不得进入竞赛场地内，发现违规取消该队参赛资格。
（三）参赛选手须知1.参赛选手严格遵守赛场规章、操作规程，保证人身及设备安全，接受裁判员的监督和警示，文明竞赛。
2.选手参赛时不得离开竞赛场地，如有特殊情况，需经裁判人员同意后方可离开，但离开期间的时间一律计算在竞赛时间内。
3.每批次参赛选手必须在正式竞赛前30分钟到候赛场报到，报到时应持本人身份证或学生证，并携带（佩戴）大赛组委会签发的参赛证、胸牌。
4.竞赛时，在收到开赛信号前不得启动操作，只有等竞赛正式开始后，方可进行操作。
各参赛选手需在抽签确定的座位上完成相应竞赛项目，严禁作弊行为。
5.比赛期间，参赛选手必须严格遵守赛场纪律，不得在赛场内大声喧哗，不得作弊或弄虚作假；同时，必须严格遵守操作规程，确保设备和人身安全，并接受裁判员的监督和警示。
若因选手因素造成设备故障或损坏，无法进行竞赛，裁判长有权终止该队比赛；若因非选手个人因素造成设备故障的，由裁判长视具体情况做出裁决。
6.在竞赛规定时间结束时各参赛队应立即停止操作，不得以任何理由拖延竞赛时间。
参赛队欲提前结束竞赛，应向现场裁判员举手示意并记录竞赛终止时间。
竞赛终止后，不得再进行任何与竞赛有关的操作。
7.竞赛操作结束时，各参赛队要按照大赛要求提交竞赛材料，按照现场考试要求的名字进行命名，如不符合命名规则，体现单位信息与编号信息的，取消该队竞赛成绩。
（四）工作人员须知1.在赛前40分钟进入赛场，协助裁判员做好设备、用具的清点与核查，做好竞赛物品保障工作。
2.做好赛场和竞赛设备、用具的清理工作等。
3.协助维持赛场秩序。
做好比赛现场的维护工作，确保比赛的顺利进行。
十八、资源转化1.本赛项拟建设资源本赛项拟建设的资源有赛项资料文本、视频资料和图片资料等。
资料文本包括本赛项通知、本赛项比赛规则、本赛项比赛规程等；视频资料包括本赛项全程录像资料、优秀选手和优秀指导教师进行采访所拍摄的视频资料，以及裁判专家点评、相关企业人士采访的视频资料等。
2.本赛项资源转化途径本赛项资源通过师资培训，发放相关资料，达到资源转化的目的；通过各种信息交流（如电话、互访等），向学校和教师推介本赛项的资源，让更多学校和教师了解成果。
通过相关技能大赛网站，共享本赛项资源，无偿提供给所需单位和个人使用。
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