体外产气法评价反刍动物饲料营养价值的研究
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体外产气法评价南方农区非常规饲料资源的营养价值涂远璐;孟梅娟;高立鹏;白云峰;宋谦【摘要】To select unconventional feeds suitable in south China agriculture area, thirty-two unconventional feeds collected from Nanjing and its surrounding areas were evaluted for the nutritive values to ruminants by measuring cumulative gas productions in 2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 10 h, 12 h, 17 h, 24 h, 48 h, fermentation parameters and in vitro digestibilities of dry matter ,acid detergent fiber and neutral detergent fiber. There were nine feeds showing maximum gas productions a-bove 200 ml, which were soybean hull, corn bract, corn bran, orange peel, broad bean pod, apple pomace, sorghum hull, rice bran meal, and corn stalk, from the highest th the lowest. Among them, four feeds took longer time to start gas produc-tion, which were soybean hull, orange peel, apple pomace, and sorghum hull and two feeds, orange peel and apple pom-ace, displayed lower gas production speeds. Soybean hull had the highest in vitro dry matter digestibility(85. 41%) and corn stalk had the lowest (56. 85%). The top five feeds with higher fiber digestibility were soybean hull, corn bran, con bract, orange peel and garlic leaves, with neutral detergent fiber digestibility all above 60%. For crop there are seven different kinds feeds including rice bran meal, hull, corn bran, orange peel, apple pomace, corn bract and broad bean pod owning high nutritional values suitable for ruminants in south China agriculture region.%为筛选适宜南方农区推广的非常规饲料资源,采用体外产气法测定从南京周边搜集到的32种非常规饲料2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、17 h、24 h、48 h累积产气量( GP)、发酵参数( A、b、LAG)、干物质体外消化率( IVD-MD)和纤维体外消化率( IVNDFD、IVADFD),评定其对反刍动物的营养价值。
牛羊类反刍动物饲料的营养成分评定1 饲料营养成分评定方法1.1 常规成分分析法我国目前沿用的饲料成分常规分析法是德国人Hennebery和Stohmann于1862年在Weende实验站提出的概略养分分析方法。
该方法将饲料成分划分为水分、粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、无氮浸出物6大营养成分来评定饲料的营养价值。
由于每一类都可细分且结构复杂,所以称为“粗养分”。
Weende分析方法是饲料营养价值评定的基础,自诞生以来就在饲料的营养价值评定中起着十分重要的作用,但该方法对纤维成分的划分很不明确,不能很好地区分纤维素、半纤维素和木质素。
1.2 范式纤维分析法范氏(Van Soest)分析方法是在Weende分析方法的基础上建立起来的,对粗纤维和无氮浸出物这两个指标进行了修正和重新划分。
对于反刍动物来讲,仅用常规营养成分来评价粗饲料的营养价值是不够的,因为粗饲料的消化率与纤维物质关系密切,而粗纤维并不能完全代表所有的纤维物质,粗纤维除了包含所有的纤维素外,还包含部分半纤维素和木质素。
在评定饲草和纤维性饲料时,一旦测出饲料的NDS(中性洗涤可溶物)、ADF(酸性洗涤纤维)、NDF(中性洗涤纤维)、ADL(酸性洗涤木质素),就可以单独或配合使用这些测定值来评定饲料的营养价值。
邓卫东等研究表明,饲料干物质体外消化率与NDF呈极显著负相关(P<0.01),与CP含量呈显著正相关,而且粗饲料干物质体外消化率(IVDMD)与CP、ADF和ADL含量之间存在显著的回归关系,回归方程分别为:Y=103.678-1.981×ADF+2034×ADL(R2=0.897);Y=18.083+1.650×CP(R2=0.813)。
VanSoest分析方法对动物纤维性物质营养研究和高产奶牛饲料营养价值评定的发展和进步作出了历史性贡献。
但是由于反刍动物具有特殊的消化道结构及消化生理,因此仅根据化学分析很难说明反刍动物对饲料的消化和利用情况,因而不能较好地反映饲料的营养价值,在使用过程中存在一定的局限性。
体外产气法和尼龙袋法测定饲料营养成分的比较摘要:以玉米、豆粕、啤酒糟和玉米秸青贮为对象,分别测定了每种饲料的体外产气参数和瘤胃尼龙袋发酵参数,比较2种方法测定饲料营养成分发酵的异同及相互关系。
结果表明,2种方法在评价玉米干物质(dry matter,dm)和有机物(organic matter,om),豆粕dm,啤酒糟om 48 h消失率方面存在显著差异(p瘤胃尼龙袋技术(in situ nylon bag technique, isnbt)是一种评定饲料在瘤胃内降解速度和程度的方法,因其简便易行、成本低,且能提供较可靠的参数,成为现今评定反刍动物饲料营养价值的重要方法,已得到广泛应用,但对大量样品进行评价时,会受到时间及动物数量的限制[1]。
体外产气量法(in vitro gas production technique,ivgp)是模拟静态的瘤胃发酵,依据发酵与产气高度相关的体外研究方法。
自menke等[2]成功应用该技术预测发酵底物的营养价值以来,因其简便、经济、评价效率高等优点,现已广泛用于饲料营养价值的评定。
但体外产气法作为一种体外模拟技术,试验环境有别于动物实际生理状况(如发酵的累计),同时各种类型的饲料产气量不同,且产气量并不能直接平衡不同种饲料之间的降解程度[3]。
为比较上述2种方法评定不同饲料营养成分的发酵特点及两种方法评价参数间的相互关系,特进行本次研究。
1 材料与方法1.1 试验动物4头健康,年龄为21月龄,体重420±30 kg,装有永久性瘤胃瘘管的利木赞×复州黄牛杂交阉牛为试验动物。
试验在中国农业大学肉牛研究中心实验基地(北京大兴区魏善庄镇)——金维福仁清真食品有限公司肉牛养殖场进行。
1.2 日粮与饲养管理试验牛日粮配制参照nrc(1996)肉牛营养需要配成全混合日粮(total mixer ration,tmr),日粮组成及营养成分见表1。
试验牛在牛棚内栓饲,单槽饲养,每天08∶30和16∶30分2次饲喂,自由饮水。
体外消化法评定饲料营养价值研究进展对各种饲料的营养价值进行准确评定是配制日粮的关键。
众所周知,评定饲料的营养价值的方法主要有化学分析法、体内法和体外法。
化学分析法是评定饲料营养价值的一种常用方法,如总能、总磷、粗蛋白、粗纤维和粗脂肪等测定方法。
但利用概略养分分析所测得的饲料养分与动物消化吸收养分间存在很大差异,不足以准确地反映出饲料的实际营养价值。
利用动物试验能够比较准确地对饲料营养价值进行评定,但这些方法往往耗时、费力,很难在短时间内对大量的饲料样品进行评价分析,且生物学影响因素多,结果变异较大,重复性差,限制了其实用性。
因此,人们建立了体外法来研究饲料的营养价值。
随着技术的进步和动物消化生理的研究进展,利用动物体外消化模拟技术来研究饲料的营养价值也成为可能。
体外法具有简单、快捷、重演性好等特点,在饲料营养价值评定等方面占有重要地位。
本文就体外法在不同动物上的应用状况、应用中存在的问题及应用前景作以综述,以提高人们对体外法的认识和重视。
体外消化在猪上的应用由于猪个体较大,体外消化所需要的一些消化酶,如胃蛋白酶和胰酶以及小肠液等比较容易获得。
而且一次性获得数量也比较大。
因此,体外消化法在猪上的研究和应用较多。
猪体外消化法有pH法、单酶(比如胃蛋白酶)法、两步法(胃蛋白酶-胰酶法)、三步法(胃蛋白酶-胰酶-碳水化合物法)等,它们都能很好地预测猪饲料的体内消化情况。
利用NaOH不断中和蛋白质水解过程中所产生的H+,使pH保持恒定不变,并记录所用NaOH数量。
利用该方法所测定的31种植物性蛋白质饲料和11种动物性蛋白质饲料体外消化率与猪体内消化率存在显著相关(r=0.85和0.92)。
在对89个日粮样品进行评定时发现,用胃蛋白酶在 pH=1.5的条件下处理饲料样品,有机物质体外消化率与体内消化率相关系数很高(r=0.92),可以用来预测饲料在猪体内的消化率。
研究员对胃蛋白酶 -胰酶法进行了改进。
在分离已消化养分与残渣时,先利用三氯乙酸将可溶性肽和蛋白质沉淀出来,然后用测定纤维的标准过滤器过滤消化食糜液,分离已消化养分。
饲料所建立常用饲料营养价值评定的体外预测模型。
在反刍动物日粮中,粗饲料通常占全部采食40%~80%,甚至更高。
粗饲料中的纤维物质对控制采食量、维持瘤胃的正常功能及提高生产力具有重要作用。
对粗饲料的营养价值进行评定,获得饲料原料准确的营养价值对配合饲料日粮及提高动物的生产性能具有重要意义。
然而,我国地域辽阔,粗饲料品种繁多,其组成和营养价值变异很大。
在制定饲料配方和饲料检测中,要获得所有饲料原料的营养价值是极其困难的。
因此,要求评定饲料营养价值的方法必须快速、有效、经济、省力。
近日,中国农业科学院饲料研究所刁其玉研究员带领的反刍动物营养生理团队以我国常用粗饲料为研究对象,从其营养成分的消化率、体外产气参数和发酵参数等多个方面建立了38种常用粗饲料原料的快速评定饲料营养价值预测模型。
该方法首先通过康乃尔净碳水化合物-蛋白质体系(CNCPS)、半体内法和体外产气法分别对粗饲料的营养价值进行评定,并比较各评定方法的结果及相互关系,筛选最佳预测因子,建立用化学成分及产气量预测粗饲料营养物质的瘤胃降解率、体外消化率及NH3-N和挥发性脂肪酸预测模型。
为快速评定饲料的营养价值,合理利用粗饲料提供了科学、可行的技术手段。
该研究建立的预测模型,可用于肉羊常用粗饲料营养价值的预测,特别适用于没有代谢试验条件的中小养殖企业。
通过该技术可以在实验室条件下简单、快速地评定粗饲料的营养价值,从而简化了粗
饲料营养价值评定方法,提高了工作效率。
(通讯员:王苑)。
反刍动物常用粗饲料营养价值评定及其有效能值反刍动物常用粗饲料营养价值评定及其有效能值本试验分别从黑龙江省的哈尔滨市、大庆市、宝清县八五三农场、红卫农场和青冈县等地采集反刍动物常用粗饲料5类14种25个样品。
实测了黑龙江省25种饲草的营养成分指标,尤其按CNCPS体系增加了一系列新的养分指标,采用体外(In Vitro)、体内(In Vivo)相结合的方法对不同粗饲料瘤胃发酵情况进行研究,得出了饲草有效能的体外测定值和体内实测值,建立了饲料营养成分预测饲草有效能值的回归方程。
最后采用动物体内试验对体外法测定值和预测值的有效性进行了比较研究。
旨在为饲草的能量价值评定方法提供便捷的途径。
本研究获得以下6方面结果:1.测定了25种反刍动物常用粗饲料的常规营养成分以及CNCPS体系指标。
2.采用体外产气法,研究了各种粗饲料瘤胃发酵情况,根据试验测定结果对黑龙江省各地区的粗饲料营养价值初步评定,为粗饲料的科学利用提供依据。
得到结果为:豆科类饲草体外发酵效果较好,品质最优;禾本科类饲草发酵效果最差,品质最劣;青贮类饲草和秸秆类饲草介于中间,青贮类饲草品质优于秸秆类。
3.应用两级离体消化法得出了各种饲草及其日粮的体外能值及GI 值,并应用GI值评定了各种饲草及其日粮的营养价值。
结果表明,按三个不同纤维指标(NDF、ADF、ADL)所得的粗饲料分级指数(GIN、GIA、GIL)对16种粗饲料及其配合日粮的品质优劣划分次序是一致的,即:八五三农场苜蓿大庆苜蓿青冈苜蓿红卫农场苜蓿八五三农场青贮哈尔滨青贮红卫农场青贮大庆青贮大庆羊草哈尔滨羊草八五三农场小叶樟哈尔滨玉米秸红卫农场小叶樟大庆玉米秸红卫农场玉米秸八五三农场玉米秸;青冈苜蓿+C八五三农场苜蓿+C红卫农场苜蓿+C大庆苜蓿+C哈尔滨青贮+C八五三农场青贮+C大庆羊草+C红卫农场青贮+C 哈尔滨羊草+C大庆青贮+C大庆玉米秸+C哈尔滨玉米秸+C红卫农场玉米秸+C红卫农场小叶樟+C八五三农场小叶樟+C八五三农场玉米秸+C。
体外产气法评价反刍动物饲料营养价值的研究王芳;徐元君;牛俊丽;赵勐;张养东;张开展;卜登攀【摘要】试验旨在通过体外产气法评定反刍动物常用饲料原料的营养价值.饲料原料包括3种能量饲料(玉米、玉米皮、麸皮)和3种粗饲料(苜蓿草粉、苜蓿干草、玉米秸秆),通过体外发酵试验,测定各种饲料原料2、6、12、24 h累积产气量、体外发酵参数及营养物质降解率,并分析不同类型饲料发酵动力学参数及发酵动力学与营养成分之间的相关关系.结果表明,能量饲料中,玉米体外发酵24 h的产气量(GP24)、理论最大产气量(A)最高,产气曲线的平滑度(B)与其他能量饲料相比没有显著差异(P>0.05);玉米的干物质降解率(DMD)最高,玉米皮的中性洗涤纤维降解率(NDFD)最高,麸皮的粗蛋白质降解率(CPD)最高;粗饲料间GP24差异不显著(P>0.05),苜蓿草粉的GP24、A、DMD、CPD均最高,而粗饲料间B部分差异不显著(P>0.05);GP24和A与粗蛋白质(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、灰分(Ash)均呈极显著负相关关系(P<0.01).综上所述,不同类型饲料间产气量及动力学参数存在显著差异,能够为奶牛日粮配制提供参考.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2016(043)001【总页数】8页(P76-83)【关键词】体外产气法;能量饲料;粗饲料;营养价值【作者】王芳;徐元君;牛俊丽;赵勐;张养东;张开展;卜登攀【作者单位】中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;北京中地种畜有限公司,北京100028;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;CAAS-ICRAF农用林业与可持续畜牧业联合实验室,北京100193;东北农业大学食品安全与营养协同创新中心,哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】S963.3精饲料是反刍动物日粮的重要组成部分,其品质的优劣直接关系到日粮的营养水平。
其中能量饲料是反刍动物进行正常生命活动的主要能量来源,而现阶段中国能量饲料供应不足,据估计2000~2020年中国将有0.24亿t~0.83亿t的能量饲料缺口[1]。
不同能量饲料由于其组成和结构不同,在瘤胃内的发酵情况也有差异,进而对反刍动物的影响也不同[2-5]。
因此,对能量饲料进行营养价值评定使其得到充分合理地利用很有必要。
粗饲料也是反刍动物日粮必不可少的部分,占反刍动物日粮的40%~80%,能为宿主动物和微生物提供重要的营养[6]。
粗饲料较精饲料营养价值低,但其来源广泛、成本低,因此若对粗饲料利用合理,则能最大限度地发挥反刍动物的生产性能,提高经济效益。
体内法、半体内法和体外法是目前评定饲料营养价值的主要方法。
体内法和半体内法费时费力,且易受到时间及动物数量的限制。
Menke等[7]利用体外产气法成功预测了发酵底物的营养价值,自此,体外法由于方法简便、经济、快速且可进行大量样品检测及数据重复性好等优点而被广泛用于饲料营养价值的评定[8-10]。
本试验旨在应用体外产气法评定目前中国奶牛常用能量饲料和粗饲料的体外发酵特性,并分析产气参数与饲料营养成分的相关性,为在反刍动物日粮中合理利用能量饲料和粗饲料资源提供科学依据。
选用3种能量饲料(玉米、玉米皮和麸皮)和3种粗饲料(苜蓿草粉、苜蓿干草和玉米秸秆)作为试验材料,饲料样品收集于新疆伊犁、五家渠、石河子、塔城等地,样品经65 ℃烘干后粉碎过1 mm筛,密封避光保存备用。
选用3头胎次相同、健康且装有永久性瘤胃瘘管的泌乳期荷斯坦奶牛作为瘤胃液供体。
奶牛每天饲喂2次(07∶00和19∶00),自由饮水。
于晨饲后2 h采集瘤胃液,混合后装于保温瓶带回实验室,在厌氧无菌条件下经4层纱布过滤,操作于39 ℃水浴中进行。
采用Menke等[11]的方法配制缓冲液,持续通入CO2,至pH为6.8~7.0,置于39 ℃水浴中恒温静置,备用。
体外发酵装置采用中国农业大学研制的AGRS-Ⅲ型64通路微生物发酵微量产气全自动记录装置与软件系统(AGRS)[12]。
准确称取0.5 g饲料于150 mL厌氧发酵瓶中,接种前将发酵瓶放于39 ℃恒温箱中预热,迅速向每个瓶中加入预热的液体培养基50 mL和经4层纱布过滤的新鲜瘤胃液25 mL,并通入CO2 5 s后,立即加上瓶塞,并将每个发酵瓶与产气装置对应的传感器连接,39 ℃连续培养24 h。
每种饲料做4个重复,同时设不添加饲料的空白组以校正仪器,39 ℃连续培养24 h,分别在2、6、12、24 h时记录累积产气量。
在24 h产气后,迅速将发酵瓶放于冰水中终止发酵,立即测定发酵液的pH。
经尼龙袋滤过的发酵液分装后于-20 ℃冷冻保存,用于氨态氮(NH3-N)和挥发性脂肪酸(VFA)指标的测定。
将装有发酵液固相的尼龙袋清洗干净,65 ℃烘箱烘干用于干物质降解率(DMD)、粗蛋白质降解率(CPD)和中性洗涤纤维降解率(NDFD)的测定。
DM(NDF,CP)降解率(%)=[样品中DM(NDF,CP)量(g)-降解后残渣中DM(NDF,CP)量(g)]/样品中DM(NDF,CP)量(g)×100%ME (MJ/kg)=0.157×GP+0.0084×CP+0.022×EE-0.0081×CA+1.06NEL (MJ/kg):0.115×GP+0.0054×CP+0.014×EE-0.0054×CA-0.36粗饲料中代谢能(ME)、净能(NEL)值计算公式:ME (MJ/kg)=0.136×GP+0.0057×CP+0.000286×EE+2.20NEL (MJ/kg)=0.096×GP+0.0038×CP+0.000173×EE+0.54式中,GP为200 mg底物的矫正气体值;CP、EE、CA分别为粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分的%DM值[11]。
采用Excel整理数据,用SAS 9.2软件的ANOVA程序和邓肯氏复极差测验对数据进行分析,采用SAS中CORR程序对不同类型饲料发酵动力学参数与营养成分之间进行相关性分析。
由表1可知,3种能量饲料DM差异不大;麸皮的CP、EE和Ash含量最高,玉米皮CP和Ash含量低于麸皮,玉米的EE含量低于麸皮;玉米皮的NDF和ADF含量最高,麸皮次之,玉米最低。
3种粗饲料DM差异较大,苜蓿干草最高,玉米青贮最低;苜蓿草粉的CP和Ash含量最高,NDF和ADF含量最低;苜蓿干草CP和Ash含量次于苜蓿草粉,EE含量最低,DNF、ADF含量最高。
由表2可知,在能量饲料中,玉米在各个时间点(除2 h外)的累积产气量均显著高于其他饲料(P<0.05),玉米皮和麸皮在各个时间点累积产气量均无显著差异(P>0.05);在粗饲料中,苜蓿草粉、玉米青贮和苜蓿干草在24 h时累积产气量依次降低,12和24 h累积产气量差异均不显著(P>0.05)。
在能量饲料中,A部分与体外产气量趋势一致,玉米理论产气量A显著高于其他饲料(P<0.05);3种能量饲料的B部分差异不显著(P>0.05);玉米的C部分显著高于玉米皮和麸皮(P<0.05),玉米皮与麸皮差异不显著(P>0.05);在粗饲料中,苜蓿草粉的A和C均显著高于苜蓿干草和玉米青贮(P<0.05),而三者B部分差异不显著(P>0.05)。
由表3可知,在能量饲料中,玉米的DMD显著高于玉米皮和麸皮(P<0.05);玉米皮的NDFD显著高于玉米和麸皮(P<0.05);麸皮、玉米皮、玉米的CPD和pH 依次降低,且差异显著(P<0.05);3种能量饲料瘤胃液中NH3-N差异均不显著(P>0.05);玉米的ME和NEL均显著高于玉米皮和麸皮(P<0.05),玉米皮和麸皮差异不显著(P>0.05)。
在粗饲料中,苜蓿草粉的DMD显著高于苜蓿干草和玉米青贮(P<0.05),苜蓿干草与玉米青贮差异不显著(P>0.05);3种粗饲料的NDFD差异显著(P<0.05),玉米青贮最高,苜蓿草粉次之,苜蓿干草最低;苜蓿干草和苜蓿草粉的CPD和发酵液pH显著高于玉米青贮(P<0.05),但苜蓿干草和苜蓿草粉差异不显著(P>0.05);3种粗饲料的NH3-N、ME和NEL差异均不显著(P>0.05)。
由表4可知,在能量饲料中,玉米的乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、TVFA 和乙酸/丙酸均显著高于玉米皮和麸皮(P<0.05);麸皮的丙酸和TVFA显著低于玉米和玉米皮(P<0.05);玉米皮与麸皮的丙酸、丁酸、戊酸、TVFA和乙酸/丙酸均差异显著(P<0.05)。
在粗饲料中,除苜蓿草粉和玉米青贮的乙酸差异不显著外,苜蓿干草、苜蓿草粉和玉米青贮的其他指标差异均显著(P<0.05);玉米青贮的丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸、戊酸和TVFA产量最高,但其乙酸/丙酸最低(P<0.05);苜蓿干草的乙酸、丙酸、戊酸和TVFA产量最低(P<0.05),但其乙酸/丙酸最高(P<0.05)。
由表5可知,24 h累积产气量(GP24)、理论最大产气量(A)分别与粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和灰分均呈极显著的负相关关系(P<0.01),与粗脂肪呈极显著正相关关系(P<0.01);B和C与粗蛋白质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和灰分关系不显著(P>0.05)。
本试验发现苜蓿草粉CP含量较高,NDF、ADF均较低,而苜蓿干草CP含量与之相比较少,纤维物质(NDF,AND)较高,EE含量接近。
这可能是因为苜蓿草粉多为苜蓿叶,苜蓿干草多为苜蓿杆。
3种能量饲料的DM、EE含量均较高,ADF、NDF与粗饲料相比含量相对较低。
本试验中玉米、玉米青贮、苜蓿草粉和苜蓿干草的CP均与莫放等[17]试验结果一致,但麸皮的CP含量略高,可能是饲料来源不同导致了这种差异;有研究表明,ADF不易被动物利用,与消化率呈负相关[18],本试验中能量饲料的粗纤维普遍低于粗饲料,玉米和苜蓿草粉分别在能量饲料和粗饲料中粗纤维相对含量较低。