多糖硫酸酯产率最大化的提取工艺研究

一、实验目的1. 了解多糖的基本性质和提取方法。

2. 掌握水提法、醇沉法、离子交换法等多糖提取方法。

3. 通过实验，提高对多糖提取技术的实际操作能力。

二、实验原理多糖是一类高分子碳水化合物，广泛存在于植物、动物和微生物中。

多糖具有多种生物活性，如免疫调节、抗炎、抗病毒、抗肿瘤等。

多糖的提取方法有水提法、醇沉法、离子交换法等。

本实验采用水提法、醇沉法、离子交换法三种方法提取多糖。

三、实验材料与试剂1. 实验材料：胡萝卜、葡萄糖、淀粉、纤维素酶、DE-23、DE-41、Sepharose（2B、4B、6B）等。

2. 实验试剂：蒸馏水、95%乙醇、95%丙酮、NaCl、NaOH、HCl、氯化钙、蒽酮、十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）、葡萄糖、磷酸盐缓冲溶液（PBS）等。

3. 仪器：组织匀浆机、水浴锅、台式高速离心机、分光光度计、磁力搅拌器、抽滤瓶、烧杯、移液管、试管等。

四、实验步骤1. 水提法提取多糖（1）将胡萝卜洗净、去皮、切片，称取适量胡萝卜组织，用组织匀浆机匀浆。

（2）将匀浆液转移到烧杯中，加入适量的蒸馏水，搅拌溶解。

（3）将溶液转移到离心管中，离心分离，取上清液。

（4）将上清液转移到烧杯中，加入95%乙醇，静置过夜。

（5）次日，离心分离，取沉淀。

（6）将沉淀用95%丙酮洗涤，干燥，得到胡萝卜多糖。

2. 醇沉法提取多糖（1）将胡萝卜匀浆液转移到烧杯中，加入适量的蒸馏水，搅拌溶解。

（2）将溶液转移到离心管中，离心分离，取上清液。

（3）将上清液转移到烧杯中，加入适量的95%乙醇，搅拌溶解。

（4）将溶液转移到离心管中，离心分离，取沉淀。

（5）将沉淀用95%丙酮洗涤，干燥，得到胡萝卜多糖。

3. 离子交换法提取多糖（1）将胡萝卜匀浆液转移到烧杯中，加入适量的蒸馏水，搅拌溶解。

（2）将溶液转移到离心管中，离心分离，取上清液。

（3）将上清液转移到烧杯中，加入适量的NaCl，搅拌溶解。

（4）将溶液转移到离子交换柱中，用蒸馏水冲洗至流出液无Cl-。

多糖的提取分离工艺研究多糖是由单糖连接而成的多聚物，人们对多糖的研究已经有很长时间的历史，对多糖的初始研究可追溯到1936年Shear对多糖抗肿瘤活性的发现，至20世纪50年代，陆续发现一些真菌多糖和高等植物多糖具有明显的抑瘤活性。

最近又发现许多中药多糖还具有降血糖作用。

70年代以来，科学家们发现多糖及糖复合物在生物体内不仅是作为能量资源和构成材料，重要的是它存在于一切细胞膜结构中，参与生命现象中细胞的各种活动。

多糖类物质是所有生命有机体的重要组成部分，广泛存在于动物、植物、和微生物细胞壁中，是生物体内除核酸和蛋白质以外的又一类重要的生物分子。

科学研究已经确认糖类物质具有许多生物活性，包括抗肿瘤、免疫、降血糖和抗病毒等，而且对机体几乎无毒副作用。

中药多糖因具有增强机体免疫功能及抗肿瘤降血糖等药理作用，而且几乎没有毒性与副作用，因此引起国内外药理学家、生物学家和化学家们的关注。

1.多糖的提取工艺1.1 水提法用水作溶剂来提取多糖是最常用的方法之一，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提。

水提取的多糖多数是中性多糖。

一般植物多糖提取多数采用热水浸提法，该法所得多糖提取液可直接或离心除去不溶物；或者利用多糖不溶于高浓度乙醇的性质，用高浓度乙醇沉淀提纯多糖；但由于不同性质或不同相对分子质量的多糖沉淀所需乙醇浓度不同，它也可以用于样品中不同多糖组分的分级分离；还可按多糖不同性质在粗分阶段利用混合溶剂提取法对植物中不同的多糖进行分离；其中，以乙醇沉淀最为普遍。

用100g去核枣粉，加入250mL适当体积分数的乙醇，45℃水浴回流脱脂两次，离心分离后枣渣加水共3500mL，90℃水浴搅拌浸提8h，离心分离，合并所得多糖提取液；提取液45℃减压浓缩，浓缩液用无水乙醇沉淀，离心分离，得粗多糖沉淀；粗多糖加水溶解后，氯仿、正丁醇脱蛋白，用NaOH溶液调pH值至弱碱性，加0.4倍多糖液体积的H2O2，40℃水浴保温4h脱色；脱色液对蒸馏水透析24h，无水乙醇沉淀，离心分离，45℃真空干燥，得到大枣多糖。

多糖的提纯化技术
溶剂提取法
(1) 水提法：以水为溶剂，可采用热水浸提或冷水浸提（植物多糖多采用热水浸提，可直接或离心去除杂质），由于多糖不溶于乙醇，可通过沉淀将多糖提纯出来。

水提法的确缺点在于温度高、耗时长、提取率低。

(2) 酸提法：有些含酸性基团的多糖在酸性条件下不易溶解，可用盐酸或乙酸处理后，再用乙醇或不溶性络合物将多糖沉淀出来。

酸提法容易破坏多糖的空间结构，一般较少使用。

(3) 碱提法：一些含有糖醛酸的多糖和酸性多糖在碱性条件下都比较稳定，可提高多糖的提取率，一般用硼氢化钠或硼氢化钾作为溶剂。

碱提法的不足之处在于某些多糖在碱性较强时会降解，而且容易影响成品的色泽和风味。

细江蓠硫酸酯多糖的提取工艺优化
细江蓠硫酸酯多糖的提取工艺优化
为实现资源丰富的南海海藻细江蓠的高值化利用,对细江蓠硫酸酯活性多糖的提取工艺进行优化研究.采用能有效保护硫酸酯基团的方法提取细江蓠硫酸酯多糖,通过正交实验研究了浸提温度、浸提时间、加水量与多糖产率的关系.结果表明,对细江蓠多糖产率的影响程度依次为:浸提时间＞加水量＞浸提温度,其最佳提取工艺为:浸提时间3 h,加水量60倍,浸提温度90℃.多糖产率可达13.42%.
作者：陈润智岑颖洲王庆荣马夏军 CHEN Run-zhi CEN Ying-zhou WANG Qing-rong MA Xia-jun 作者单位：暨南大学化学系,广东,广州,510632 刊名：暨南大学学报（自然科学与医学版）ISTIC PKU英文刊名：JOURNAL OF JINAN UNIVERSITY（NATURAL SCIENCE & MEDICINE EDITION）年，卷(期)：2006 27(3) 分类号：Q949.9 关键词：细江蓠硫酸酯多糖提取工艺。

第26卷第3期2006年6月 暨南大学学报(自然科学版) Journa l of Jinan Unive rsity (N atural Science ) Vol .27No .3　Jun.2006[收稿日期]　2006-01-09[基金项目]　广东省“十五”重大科技专项(2002A3050503)、广东省自然科学基金研究团队项目和粤科基办【2003】11号-33[作者简介]　陈润智(),男,硕士研究生,研究方向天然产物的分析与应用,通迅联系人岑颖洲,T 853,fx@j 细江蓠硫酸酯多糖的提取工艺优化陈润智,　岑颖洲,　王庆荣,　马夏军(暨南大学化学系,广东广州510632)[摘　要]　为实现资源丰富的南海海藻细江蓠的高值化利用,对细江蓠硫酸酯活性多糖的提取工艺进行优化研究.采用能有效保护硫酸酯基团的方法提取细江蓠硫酸酯多糖,通过正交实验研究了浸提温度、浸提时间、加水量与多糖产率的关系.结果表明,对细江蓠多糖产率的影响程度依次为:浸提时间>加水量>浸提温度,其最佳提取工艺为:浸提时间3h,加水量60倍,浸提温度90℃.多糖产率可达13142%.[关键词]　细江蓠;　硫酸酯多糖;　提取工艺[中图分类号]　Q949.9 [文献标识码]　B [文章编号]　1000-9965(2006)03-0490-03Stud i es on the opt i m a l technology fa ctor s of extract i n g sulfa tedpolysaccha r i des fr o m a lga G racila ria tenu ispita t aCHEN R un 2zhi,　CEN Ying 2zhou,　WANG Q ing 2r ong,　MA Xia 2jun(Depar m ent of Chem istry,J inan Unive rsity,G uangzhou,510632,Chi na)[Abstra ct]　I n order t o make high -quality use of the abundant algal r esourse in NanHa i Ocean,the op ti m al technology fac t ors of extrac ting sulf uted polysaccharides fr om alga G r acila ria tenu isp ita ta have been studied .The polysaccharideswere extracted by the me thod tha t the sulfa tes can be more effec tively pr otected .The technol ogy factors such as extracti on ti m e,volume of water and extrac tion te mperature were studied by orthog onal expenri m ent design.The result shows that the effects of technol ogy factors on the extrac tion r a te are c ompared as f ollows:extr action ti me >volu m e of wa ter >extrac tion te mperatur e,the optium technology c onditions are:3h of extr acti on ti m e,60f olds volum e of wate r ,extrac tion te m 2perature at 90℃.The extr acti on yield of sulfated polysaccharides can r each 13142%.[Key word s]　G racila ria tenu ispita ta;　sulfated polysaccha rides;　extrac tion technol ogy 细江蓠属于红藻门(Rhodop hyta )、真红藻纲(F l orideae )、杉藻目(G i ga rtina les )、江蓠科(Gra cila racea e ),主09211979-::e l :020-22420E -m a il :o nu.e du .cn要分布在广东、广西、海南等沿海地区,是近年来我国养殖数量最大的一种经济海藻[1].细江蓠含有丰富的硫酸酯多糖.硫酸酯多糖是一类十分重要的生物活性物质,在医药、保健食品、功能精细化工等行业有着重要及广泛的应用.据报道,麒麟菜等海藻硫酸酯多糖对β型流感病毒、腮腺炎、脑膜炎病毒、单纯疱疹病毒及柯萨奇病毒有明显的抑制作用,其效果甚至优于目前常用的抗病毒药品病毒唑[2-3],该硫酸酯多糖对小鼠肉瘤S180也有抑制作用,抑瘤率达到60%[4].不少研究经已证明,海藻硫酸酯多糖的生物活性与其相对分子质量及硫酸基含量有密切的联系[5].提取海藻多糖的常用方法主要有酸提、碱提、水提等.酸提、碱提工艺在一定程度上会破坏多糖的硫酸酯基结构,使其生物活性受到很大的影响.一般海藻加工业多采用碱提工艺提取细江蓠多糖,所提取的多糖产品一般只适用于作为食品增稠剂、药品包装胶囊材料等用途.在反复对各种工艺提取的多糖的生物活性进行研究和比较的基础上[6-7],筛选了一条有别于一般的海藻多糖提取方法的较适于提取硫酸酯活性多糖的工艺路线,并运用正交实验对该活性多糖的提取工艺参数进行了优化.结果证明,该提取工艺不仅可有效地保护多糖的活性基团———硫酸酯基,使提取出来的活性多糖产品在医药、保健食品和功能化妆品添加剂等行业有更广泛的用途,而且还显著地提高了多糖的提取产率.本研究对推进海藻细江蓠的高值化工业开发具有积极的意义.1　实验部分1.1　材料、试剂及仪器细江蓠G racil a ria tenui spita ta 采自广东省湛江市沿海;浓硫酸,分析纯,广州化学试剂厂;蒽酮,分析纯,上海五联化工厂;D -半乳糖,生化试剂,上海博奥生物科技有限公司.RE -52AAA 旋转蒸发仪,上海嘉鹏科技有限公司;T U -1901双光束紫外可见分光光度计,北京普适通用仪器有限责任公司.1.2　细江蓠硫酸酯多糖的工艺提取流程细江蓠ϖ热水浸提ϖ过滤ϖ滤液真空浓缩至原体积1/5ϖ醇析ϖ沉淀物加水溶解ϖ冷冻干燥ϖ细江蓠硫酸酯多糖(sulfuted polys accha ride s of G ra cila ria tenuispita t a,G TSPS )1.3　GTSPS 总糖与硫酸基含量的测定采用蒽酮-硫酸法[8]测定总糖含量,Dodgson 法[8]测定硫酸基含量.1.4　工艺参数优化实验设计采用单因素分析法,分别考察了时间、温度、加水量(干燥海藻质量的倍数)对GTSPS 产率的影响程度,根据实验结果设计正交实验表,再对各工艺参数进行优化,最后确定其最佳提取工艺.2　实验结果2.1　单因素分析实验(1)浸提时间对G TSPS 产率的影响:在提取温度70℃,加水量60倍的条件下考察浸提时间对GT SPS 产率的影响,发现随着浸提时间的延长,GTSPS 的产率也随之提高,但当浸提时间达到4h 后,产率增长趋于平缓.故设定L 9(33)正交表中浸提时间的3个水平为2、3、4h .(2)浸提温度对GTSPS 产率的影响:在提取时间3h,加水量60的倍条件下考察温度的影响,发现在90℃以下温度区间,GTSPS 的产率随温度的升高而升高.温度为60～80℃时,多糖产率随温度的升高上升较为缓慢,当温度升至80～90℃区间,多糖产率增长最为明显.但温度在90～100℃时,多糖的产率反而有所下降,其原因可能是因为温度太高,多糖发生降解所致.故本实验设定L 9(33)正交表中温度的3个水平为70、80和90℃.(3)加水量对G TS S 产率的影响在浸提温度8℃,浸提时间3的条件下考察另一重要因素加水量对GTS S 产率的影响程度随着加水量的增加,GTS S 的产率也升高,当加水量超过倍,多糖产率上升为缓慢故设定L (33)正交表中加水量的3个水平为5、6、倍194第3期陈润智,等:　细江蓠硫酸酯多糖的提取工艺优化 P :0h P .P 70.90070.2.2　正交试验及极差分析结果由正交实验得浸提温度3个水平的K 值分别为22138、34198、30119,浸提时间3个水平的K 值分别为39123、26197、31132,,而加水量3个水平的K 值为26112、32160,28183,因此,GTSPS 最佳提取工艺为:浸提温度90℃(K =34198),浸提时间3h (K =31132),加水量60倍(K =32160).由极差分析的结果可知,上述3因素对GTSPS 产率的影响程度依次为:浸提时间(T =12160)>加水量(T =6148)>浸提温度(T =4135).2.3　方差分析[9]浸提温度、浸提时间、加水量的F 值分别为15167(P <0105),1188(P <0125),4110(P <011),因此,上述三因素对GTSPS 产率的影响程度依次为:浸提时间>加水量>浸提温度,与极差分析的结果一致.2.4　GTAP S 与碱提多糖产率及硫酸酯基含量的比较按传统的碱提工艺[6]提取了半叶马尾藻碱提多糖,其产率为3106%,硫酸酯基质量分数4104%.按212中确定的细江蓠多糖的最佳提取工艺提取的GT SPS,产率为13142%,硫酸酯基质量分数为6177%,除多糖的产率远高于G T APS,硫酸酯基质量分数也高于GT APS,是GT A PS 的115倍.3　讨论海藻多糖的提取工艺主要有酸性提取和碱性提取法.海藻加工业上一般采用的是碱性提取法,该工艺得到的多糖产品具有很好的黏滞性、凝固性、乳化性和成膜性,常作为凝固剂、稳定剂、乳化剂和增稠剂等大量应用于化工、食品和化妆品工业.但该工艺会导致了多糖分子硫酸酯基的大量脱落,破坏了多糖的部分生物活性,如抗病毒活性.与一般海藻多糖的碱性提取工艺相比,应用本研究的工艺提取细江蓠多糖,不仅可获得较高的多糖产率,多糖分子上的硫酸酯基也得到了有效的保护.可以预期,该活性多糖产品在医药、保健食品和功能精细化工领域有着更广泛的用途.海藻多糖的产率除了受到提取工艺的影响,同时也受到海藻原料的影响.处于不同生长时期的海藻,其多糖含量不同.而不同地区的同一种海藻由于气候及其生长环境的不同,其多糖含量也不同,在本研究中,由于样品采集条件的限制,预实验与正交实验采用了不同时间采集的两批样品,发现预实验中多糖的产率可高达15%,大于最佳工艺下的13.42%,显然,海藻原料也是多糖产率的重要影响因素.由于极差分析法是一种初步的分析法,不能准确分析实验误差的大小,也难以区分数据的波动是由因素水平变化引起的还是由实验误差引起的.因此本实验在极差分析的基础上,对数据作了进一步的方差分析.方差分析的结果表明,本实验的误差对实验结果影响甚微.本研究对我国海藻资源十分丰富的海藻细江蓠的高值化工业开发有积极的推进作用.[参考文献][1]　刘思俭.江蓠养殖[M ].北京:农业出版社,1998:36-68.[2]　邓志峰,纪明侯.龙须菜和扁江蓠多糖的组成及其抗肿瘤效果[J ].海洋与湖沼,1995,26(6):575.[3]　CE N Ying 2zhou,Q I U Y u 2m ing,YE Shao 2m ing,e t al .The antivira l ac tivities on HS V -1and CVB3in vitro ofpolysaccha ri de fro m alga Eucheu ma S tria tu m [J ].Chem ical Journal on Internet,2004,6(4):28.[4]　纪明侯.海藻化学[M ].北京:科学出版社,1997.[5]　王长云,管华诗.多糖抗病毒作用研究进展且硫酸多糖抗病毒作用[J ].生物工程进展,2000,20(2):3.[6]　梁智渊,岑颖洲,叶绍明,等.琼枝和异枝麒麟菜中硫酸酯基多糖不同提取方法的化学分析比较[J ].暨南大学学报:自然科学版,2005,26(3):380-385.[7]　岑颖洲,马夏军,王凌云.羊栖菜多糖的制备及其对HepG 2细胞的抑制作用[J ].中国海样药物,2005,24(1):21-24.[8]　张惟杰复合多糖生化研究技术[M ]上海上海科学技术出版社,8[]　秦建侯,邓　勃,王小芹分析测试中的实验设计和优化方法[]分析试验室,85,()555[责任编辑黄建军]294暨南大学学报(自然科学版)2006年　..:197.9.J .19410:4-.:。

多糖硫酸酯产率最大化的提取工艺研究多糖硫酸酯是生物活性物质，具有较强的药物活性，具有安全性和卓越的抗疲劳、抗炎和抗肿瘤等作用，因此在药物、保健品和食品添加剂行业中具有重要的应用价值。

通过大量技术研究，我们发现，提取多糖硫酸酯的工艺可能会影响其产量。

尽管目前还未精确测定，但在某些情况下，在一定条件下以提高产量的工艺能够提供明显的节省成本优势，从而提高整个行业的竞争力。

本文旨在探讨一种以最大化多糖硫酸酯产率的提取工艺。

首先，任何提取多糖硫酸酯的技术都不可避免地受到原料工艺因素的影响。

多糖硫酸酯是从多糖中分离制备的，而多糖是由多种糖苷或其他多糖类物质组成的复合物，具有复杂的结构、组分和其他性质。

有效提取多糖硫酸酯的关键在于分离多糖，因此应从原料工艺上入手，确定有利的温度、时间和提取剂等综合因素，以便在分离工艺中有效减少多糖类物质，从而提高多糖硫酸酯的提取率。

其次，提取多糖硫酸酯的工艺应包括各种活性物质的分离和提取。

冷汽提取和挥发油精制是两种常用的多糖硫酸酯提取方法。

这两种提取方法可以有效地提取多糖硫酸酯，而且提取率较高，但受技术经济性的限制，提取效率较低。

为了提高提取效率，应全面考虑提取技术，以更好地提取多糖硫酸酯，如超声波提取、臭氧清洗等，并加以适当改良，以降低提取成本。

最后，有效地降低多糖硫酸酯提取过程中的浪费和污染，也是提高多糖硫酸酯的提取率的重要途径之一。

针对膜过滤技术，要采取合理的过滤条件，以节约能源和资源，同时有效减少多糖硫酸酯提取过程中的污染物。

另外，应在提取过程中实施“反应污染控制和污染预防”的原则，通过复杂的物理和化学方法，在提取过程中有效控制污染，最大限度地减少浪费。

综上所述，以最大化多糖硫酸酯产率的提取工艺需要从原料工艺技术、活性物质提取技术、以及膜过滤污染防治等方面考虑与整合，以获得最大的产率优势。

本文分析了可有效提高多糖硫酸酯提取力的表面活性体和复杂糖苷技术，并改进了传统有机溶剂精制技术，以提高提取效率，同时考虑控制和去除污染物的技术和措施，以最大限度地提高多糖硫酸酯产率。

酵母β-1,3-d-葡聚糖硫酸酯制备工艺的研究酵母β-1,3-d-葡聚糖硫酸酯（YPS）是一种多糖类化合物，具有多种生物活性和生物医学应用潜力。

下面是酵母β-1,3-d-葡聚糖硫酸酯的制备工艺的一般研究流程：1.酵母菌培养：选择适当的酵母菌株，并在基于葡萄糖的培养基中进行预培养。

预培养的目的是提高酵母菌的细胞密度，以便后续的β-1,3-d-葡聚糖合成。

2.收获和处理酵母细胞：将酵母菌培养物进行离心分离，收集细胞沉淀。

然后对细胞进行洗涤和处理，例如使用酶或酸来破坏细胞壁，释放出内部的多糖。

3.β-1,3-d-葡聚糖的提取：通过酶解或其他适当的方法将多糖从酵母细胞的细胞壁中提取出来。

其中，酶解法是应用最多的方法，常使用酶如β-1,3-glucanase来降解酵母细胞壁，从而释放出β-1,3-d-葡聚糖。

4.硫酸酯化反应：将提取的β-1,3-d-葡聚糖与硫酸酯化试剂进行反应。

硫酸酯化试剂可以是硫酸氯或硫酸亚铁等。

反应通常在适当的溶剂和反应条件下进行，最终生成酵母β-1,3-d-葡聚糖硫酸酯。

5.分离与纯化：对反应产物进行分离和纯化，以去除杂质和未反应的物质。

分离技术可以包括凝胶过滤、离心、超滤等。

6.表征与分析：使用适当的分析方法，如质谱、核磁共振、红外光谱、高效液相色谱等，对制备得到的酵母β-1,3-d-葡聚糖硫酸酯进行结构表征和性质分析。

在酵母β-1,3-d-葡聚糖硫酸酯制备工艺的研究中，还需考虑诸如反应条件优化、反应机理研究、产率提高和制备成本降低等方面的问题。

具体的研究内容和策略将取决于该领域的具体需求和研究目标。

多糖硫酸酯产率最大化的提取工艺研究张彦民;李宝才;念娥美;戴伟锋;何静;张健【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2004(13)3【摘要】目的:探讨海藻中多糖硫酸酯(SPS)提取的工艺条件.方法:对采用的两种工艺流程和不同粒度(20,40,60,80目)的藻粉水煮法与酶提取法分别进行了分析对比.结果:确定了60目的海藻粒度和水煮工艺提取SPS为获取海藻中SPS最大提取率的工艺条件,产率可达到3.10%,大于相关文献所报道的产率,且主要理化指标(硫酸根+多糖)含量大于50%.结论:该工艺为多糖硫酸酯工业化生产提供了依据.【总页数】2页(P54-55)【作者】张彦民;李宝才;念娥美;戴伟锋;何静;张健【作者单位】昆明理工大学生物与化学工程学院,云南,昆明,650224;昆明理工大学生物与化学工程学院,云南,昆明,650224;云南省药品监督管理局,云南,昆明,650021;昆明理工大学生物与化学工程学院,云南,昆明,650224;昆明理工大学生物与化学工程学院,云南,昆明,650224;昆明理工大学生物与化学工程学院,云南,昆明,650224【正文语种】中文【中图分类】TQ460.6【相关文献】1.超声波法提取裙带菜中褐藻多糖硫酸酯的工艺研究 [J], 谭洁怡;王一飞;钱垂文2.超声辅助提取海带褐藻多糖硫酸酯的工艺研究 [J], 戴圣佳;刘振锋;吕卫金;张浚伟;陈士国;叶兴乾3.多糖硫酸酯产率最大化的提取工艺研究 [J], 张彦民;李宝才;念娥美;朱利平;戴伟锋;何静;张健4.超声波法提取总状厥藻中硫酸酯多糖的工艺研究 [J], 程青芳;王启发;刘丽沙;张辉;刘峰;王皓鹤5.响应面法优化黔产青钱柳多糖提取工艺研究 [J], 申琳燕;邹娟;郑传丽;叶江海;林雪梅;何康因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。