实验4肠道杆菌——【医学微生物学精品讲义】

肠杆菌科及检验● 考点概述概念；命名与分类原则；共同特点；自然与人体内的分布；微生物学检查方法；临床意义。

埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属、耶尔森菌属及其他肠杆菌科细菌。

生物学性状；微生物学检验；临床意义。

【内容讲解】一、概述（共性）肠杆菌科是由多个菌属组成，G-杆菌，生物学性状相似。

大多数肠道杆菌属于正常菌群。

当机体免疫力降低或侵入肠道外组织时成为条件致病菌而引起疾病。

部分为致病性细菌。

（一）分类肠杆菌科细菌的种类繁多。

主要根据细菌的形态、生化反应、抗原性质以及核酸相关性进行分类。

根据《伯杰系统细菌学手册》（1984年）将肠杆菌科的细菌分为20个属即埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属、普罗威登斯菌属、变形杆菌属、摩根菌属、耶尔森菌属等。

（二）生物学特性1.形态与染色G-，杆菌，大小为（1.0～6.0）μm×（0.3～1.0）μm。

多数有周鞭毛（除志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC），无芽胞，少数菌属细菌可形成荚膜。

2.培养需氧或兼性厌氧；营养要求不高；普皿和麦康凯培养基：中等大小、表面光滑的菌落；液体培养基：混浊生长。

3.生化反应发酵葡萄糖产酸、或产酸产气；乳糖发酵试验：非致病菌 +，致病菌 -（除外变形杆菌）。

触酶阳性；氧化酶阴性；硝酸盐还原为亚硝酸盐。

4.抗原构造表面抗原（如Vi抗原、K抗原）：包绕在O抗原外的不耐热的多糖抗原，可阻断O抗原与相应抗体之间的反应，加热处理能破坏其阻断作用。

5.变异菌落S～R变异鞭毛H～O变异耐药性变异生化反应性质的改变6.抵抗力不强。

加热60℃，30分钟即被杀死。

不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。

对低温有耐受力，能耐胆盐。

7.肠杆菌科的初步分类（三）致病性1.致病性肠道杆菌：以肠内感染为主，腹泻为共显症状，引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹泻及肠热症等。

2.条件致病菌：为医院感染主要病原菌，出现移位感染。

肠道杆菌检验(实验)一、实验目的本实验的主要目的在于检测食品和水中的肠道杆菌，以此评估其是否达到安全要求。

通过本实验，可以了解肠道杆菌的常见特点和检测方法，培养学生科学的实验技能能力。

二、实验原理肠道杆菌是一种典型的大肠杆菌，被广泛应用于食品和水质检测中。

它主要存在于动物肠道中，也能够存在于它们的排泄物中，因此如果食品和水受到动物排泄物的污染，就会存在肠道杆菌。

通过检测肠道杆菌的存在和检测数量，可以判断食品和水的卫生质量是否达到安全要求。

肠道杆菌在营养富含的培养基上易于生长，并可以通过简单的染色方法进行检测。

常用的检测方法包括在培养基上培养并计数，或者利用PCR技术进行定量和鉴定。

三、实验步骤1. 实验准备(1) 肠道杆菌检测脱氧胆酸琼脂培养基、营养琼脂培养基、氧气酒精灯、电热板、灭菌器、微孔过滤膜、灭菌钳等。

(2) 检测器具：恒温培养箱、显微镜等。

(3) 检测样品：需要检测的食品或水样品。

2. 实验操作(1) 样品处理：对待检测的食品或水样品进行处理，如筛选、稀释等等，以达到最佳的检测效果。

(2) 复制脱氧胆酸琼脂培养基和营养琼脂培养基，用微孔过滤膜将样品过滤到培养基上，放入恒温培养箱中进行培养。

(3) 测量生长：在一定时间后，观察脱氧胆酸琼脂培养基中的菌落数量，判断是否存在肠道杆菌，并计算出菌量。

(4) 进行染色：将培养细胞染色，观察细胞形态，以鉴定是否存在肠道杆菌。

四、实验注意事项(1) 实验过程中需要注意卫生，防止污染样品。

(2) 营养琼脂培养基和脱氧胆酸琼脂培养基必须进行灭菌处理。

(3) 实验过程需要严格按照实验操作步骤进行，以免影响结果。

五、实验结果及分析通过检测食品和水中的肠道杆菌，在不同的培养基上进行培养和计数，可以判断食品和水是否满足卫生要求。

如果检测出的肠道杆菌数量较高，则说明食品或水存在严重的卫生问题，需要及时采取措施加以解决。

通过本实验可以培养学生的科学思维能力，提高其对卫生的认识和保健意识。

肠道杆菌的实验报告实验报告：肠道杆菌实验1. 实验目的：本实验旨在了解肠道杆菌的形态特征、生长习惯、营养要求以及其在人体中的作用，进一步探究肠道杆菌对人体健康的影响。

2. 实验原理：肠道杆菌是一种革兰氏阴性菌，常见于人和动物的肠道中，是肠道中最为重要的菌群之一。

在健康的肠道环境中，肠道杆菌对人体有多重好处，可以协助人体消化食物、延缓衰老、增强免疫等。

但是当它们数量过剩时，就可能会对人体产生不良影响，如引起腹泻、食物中毒等。

本实验中，我们需要使用肠道杆菌样本进行培养和观察，以便更加深入的了解它们的特征和影响。

3. 实验步骤：（1）准备肠道杆菌样本：从肠子中采集肠道杆菌样本，制作培养基。

选用营养成分丰富的Luria-Bertani（LB）培养基，加入适量的琼脂糖，并用自来水煮沸，冷却至室温并倒入无菌的平板培养皿中凝固。

（2）接种肠道杆菌样本：用火吸管从肠道杆菌样本中取一点菌落转移到平板培养皿上，然后在其表面做“描点”，使其均匀分布在培养基表面。

（3）培养肠道杆菌：将装有接种皿的Petri盘转移到37℃的培养箱中，并在适当的时间进行观察。

对于肠道杆菌，最好的温度是37℃，不宜过高或过低。

（4）观察肠道杆菌的形态特征：观察菌落的颜色、形状和大小等特征。

此外，我们还可以使用显微镜观察肠道杆菌的细胞形态和结构，并做出相应的记录。

4. 实验结果：经过观察，我们发现样本中的肠道杆菌在LB培养基上形成了白色、光滑、周围有边界的菌落。

肠道杆菌菌落大小大约为2mm 左右，单个菌落中的菌体呈细长形，通常呈棍状，并在显微镜下呈现出直的、弯的和交替排列的形态。

5. 结论：通过上述实验，我们成功了解了肠道杆菌的形态特征、生长习惯和营养要求等方面的知识，也为我们更好地了解肠道杆菌在人体中的作用提供了依据。

此外，我们还需要进一步分析和研究其潜在的健康风险和防治措施，以保障人体健康。

一、实验目的1. 了解肠道杆菌的基本特征及分类；2. 掌握肠道杆菌的分离、纯化及鉴定方法；3. 掌握肠道杆菌的生化反应及药敏试验；4. 培养实验操作技能，提高微生物学实验水平。

二、实验原理肠道杆菌是一类革兰氏阴性菌，广泛分布于人类和动物肠道中。

根据其生物学特性，可将肠道杆菌分为条件致病菌和非致病菌。

本实验主要针对肠道杆菌的分离、纯化、鉴定及药敏试验进行研究。

三、实验材料1. 标本：粪便、食品、水等；2. 培养基：营养肉汤、营养琼脂、SS琼脂、双糖铁琼脂、克氏双糖铁琼脂等；3. 试剂：革兰氏染色液、吲哚试剂、甲基红试剂、V-P试剂、KCN试剂、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等；4. 仪器：高压灭菌锅、培养箱、显微镜、接种环、试管、锥形瓶等。

四、实验方法1. 标本采集与处理：采集粪便、食品、水等标本，加入无菌生理盐水，充分混匀后取适量接种于培养基。

2. 肠道杆菌分离与纯化：将接种后的培养基置于37℃恒温培养箱中培养24小时，观察菌落生长情况，挑取单个菌落进行纯化。

3. 肠道杆菌鉴定：（1）革兰氏染色：观察菌体形态，判断其为革兰氏阴性菌；（2）生化反应：进行吲哚试验、甲基红试验、V-P试验、KCN试验等，判断细菌能否发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等；（3）药敏试验：采用纸片扩散法，观察细菌对氨苄西林、头孢噻肟、环丙沙星等药物的敏感性。

4. 结果记录与分析：将实验结果进行记录，并进行分析。

五、实验结果1. 肠道杆菌分离与纯化：成功分离出多个肠道杆菌纯培养物。

2. 革兰氏染色：观察到革兰氏阴性菌形态。

3. 生化反应：部分菌株能发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等。

4. 药敏试验：部分菌株对氨苄西林、头孢噻肟、环丙沙星等药物敏感。

六、实验讨论1. 本实验成功分离出多种肠道杆菌，为后续研究提供了菌种资源。

2. 生化反应和药敏试验结果表明，不同肠道杆菌具有不同的生物学特性，有助于对其进行分类和鉴定。

3. 实验过程中，应注意无菌操作，避免污染。