实验一 显微镜油镜的使用和细菌形态的观察

显微镜油镜的使用及细菌观察一、实训目的能利用显微镜油镜观察细菌的基本形态和特殊结构，并会进行显微镜的保养。

二、实训器材显微镜、香柏油、乙醇乙醚(乙醇与乙醚的比例为3∶7)、擦镜纸、细菌染色标本片。

三、实训内容1．调试（1）将显微镜放置在洁净平稳的实验台上，绸布叠放整齐。

（2）打开电源开关和灯的开关，检查灯的亮度是否可以调节。

（3）尽量升高聚光器，放大光圈。

2．选择油镜（选好后使其正对通光孔）（1）长度最长；（2）放大倍数最大（100×）；（3）白色线圈标志；（4）“油”或“oil”字样标志。

3．放置标本片（1）正面朝上；（2）加油于待检部位滴加一滴香柏油，保持滴状，不要涂开。

4．镜检（1）第一步眼睛从镜筒侧面注视油镜头，转动粗调节器上升载物台，直至油镜头浸入油中，并与玻片相接触。

（2）第二步眼睛观察目镜，转动粗调节器使载物台缓慢下降，待看到模糊物像后，换成细调节器微调（转动1-2圈即可），直至物像完全清晰。

先粗后细观察内容：形态、大小、颜色、排列，尝试手绘或用相机进行拍照。

5．保养（1）灯高度调至最低，关上电源和灯的开关；（2）取下标本片；（3）擦拭镜头 3步走（干→湿→干）：干净擦镜纸擦拭→加少量乙醇乙醚后擦拭→干净擦镜纸擦拭。

每次用2-3片擦镜纸。

（4）擦拭完毕，把低倍镜转至中央，高倍镜和油镜与通光孔成“八”字形。

（5）将电源线折叠好，放在载物台上。

（6）将显微镜用绸布包好，放回原处。

（7）填写使用记录本。

实验报告内容：1．显微镜的使用方法2．画出细菌的形态和排列方式，最好用彩笔或标明细菌颜色。

参考图片：。

实验一油镜的使用及细菌形态的观察普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。

以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成,而当前使用的显微镜由一套透镜组成。

普通光学显微镜通常能将物体放大1500?2000倍。

一显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分:一为机械装置,一为光学系统,这两部分很好的配合,才能发挥显微镜的作用。

1、显微镜的机械装置显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件1镜座 ?镜座是显微镜的基本支架,它由底座和镜臂两部分组成。

在它上面连接有载物台和镜筒,它是用来安装光学放大系统部件的基础。

2镜筒 ?镜筒上接接目镜,下接转换器,形成接目镜与接物镜装在转换器下间的暗室。

从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。

因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。

镜筒长度的变化,不仅放大倍率随之变化,而且成像质量也受到影响。

因此,使用显微镜时,不能任意改变镜筒长度。

国际上将显微镜的标准筒长定为160mm,此数字标在物镜的外壳上。

3物镜转换器 ?物镜转换器上可安装3?4个接物镜,一般是三个接物镜低倍、高倍、油镜。

Nikon显微镜装有四个物镜。

转动转换器,可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通,与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。

4载物台? 载物台中央有一孔,为光线通路。

在台上装有弹簧标本夹和推动器,其作用为固定或移动标本的位置,使得镜检对象恰好位于视野中心。

5推动器? 是移动标本的机械装置,它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的,好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺,构成很精密的平面座标系。

如果我们须重复观察已检查标本的某一部分,在第一次检查时,可记下纵横标尺的数值,以后按数值移动推动器,就可以找到原来标本的位置。

6粗动螺旋 ?粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件,老式显微镜粗螺旋向前扭,镜头下降接近标本。

新近出产的显微镜如Nikon显微镜镜检时,右手向前扭载物台上升,让标本接近物镜,反之则下降,标本脱离物镜。

实验一病原生物与免疫学实验室规章制度、显微镜油镜的使用与保护方法、细菌形态观察【实验目的】1.掌握显微镜油镜镜头的使用与保护方法；细菌的基本形态和特殊结构。

2.熟悉光学显微镜的构造；细菌特殊结构观察的临床意义。

3.了解显微镜油镜的使用原理；病原生物与免疫学实验室规则。

【实验仪器、材料】1.仪器：普通光学显微镜。

2.细菌标本：葡萄球菌、大肠杆菌、淋病奈瑟菌、霍乱弧菌、链球菌、肺炎链球菌荚膜、伤寒沙门菌鞭毛、炭疽杆菌芽胞、破伤风梭菌芽胞、结核分枝杆菌等多种细菌染色涂片。

3.其他：、香柏油、擦镜纸、无水乙醇。

【实验内容】一、病原生物与免疫学实验室规则。

二、显微镜油镜的使用（1）对光依据光源的强弱调整反光镜的位置。

若是天然光源或较强的光线，宜用平面反光镜；若是普通灯光或较弱光线，则用凹面反光镜。

（2）加油将标本片放在镜台上，染色的部位正对集光器的中央，用玻片夹固定。

先用低倍镜对好光进行观察（寻找观察目标），再用高倍镜观察（选取理想的观察目标）。

滴加香柏油一滴，再换油镜检查。

使用油镜时，不要倾斜镜柱，以免香柏油流溢。

（3）调焦点换用油镜观察时，先从侧面观察，谨慎旋转粗螺旋，使油镜头下降，浸入油滴中，注意勿用力下降过度，否则有压坏玻片和损坏油镜头的危险！然后用眼看目镜，用右手微转动粗螺旋，使油镜头慢慢上升，待看到模糊物像时，即改用左手轻轻转动细螺旋，使整个视野中的物像均能清楚识别为止。

（4）看物像在观察时，只准调节细螺旋，使镜筒微微上升，调节焦点；决不可将镜头下降过度，避免压破玻片或损伤镜头。

如没有看清视野，再照上法重新操作。

（5）换视野看清物像后，如想观察其他视野时，可调整移动架，使标本片向前后左右移动。

（6）用毕处理镜检完毕，将镜筒向上升起，取出玻片，以擦镜纸拭净镜面油滴，如油滴已干在镜头上，可以擦镜纸浸少许95%酒精单方向擦拭镜头，再立即用干净擦镜纸拭净。

最后将物镜转成“八”字形，并将集光器向下降落，下降镜筒固定，或在镜台与镜头间垫以厚层纱布，放入箱内。

实验一显微镜油浸系的使用及细菌基本形态观察一、几点说明（五个方面）1、点名、分组、确定每组的负责人。

第一次微生物实验，点名认一下人，点到谁的名字，举手答一个到。

每人有一个实验编号，编号都写在桌子上，是几号就坐在几号座位上。

分发实验物品时由每组的负责人分发。

另外一共30个人，共分成五组，分组情况写在黑板上。

2、值日安排。

实验结束后值日的组打扫卫生，一次轮一组，今天是第一组值日。

3、预习实验内容：上课前预习实验内容，要求至少提前十分钟到实验室，抄写板书（实验内容和作业），并为上课做准备。

4、本学期的微生物学试验的内容：共分七次试验分别为：实验一（油镜使用及细菌基本形态观察），实验二：细菌抹片染色。

实验三：培养基制备。

实验四、五：细菌分离培养、结果观察。

实验六：青贮料微生物或病料采集、包装和运送。

实验七：主要病原菌的认识。

5、交实验报告：学习委员每次收作业的时间是实验后的第二天，确认在第二天下午上班时间交到畜牧楼212许老师办公室，如果办公室没有人，就放在门头上，稍微露出一点儿以便老师及时发现。

二、实验须知。

1、防病原微生物传播。

咱们这间实验室有一点儿是跟其它实验室是不同的，就是安全要求特别严格，咱们这里是微生物实验室，由于实验需求，里面存在一定的病原微生物是难免的，也是必要的，所以同学们每次上课都要穿上白大褂，进入实验室以后，不要吃东西，不要用手揉眼，有咬笔杆儿习惯的同学在这里头也要控制一下自己。

这不是对咱同学们要求苛刻，而是为同学们自身的安全着想。

（1）实验室中宜着工作衣帽，如沾有可传染的材料，应脱下浸于消毒药水中（如5%石炭酸等）过夜或高压灭菌后再进行清洗。

如果出现菌液污染实验台的情况，也要用四层次5%石炭酸纱布盖住过夜。

（2）沾有病原微生物的器皿及废弃培养物，应置于指定的地点，先消毒后再进行洗涤；检查用过的动物尸体、脏器、血液等，应严加高压灭菌消毒、掩埋处理，防止病原微生物的散播。

（3）接种环、接种针用前用后必须置火焰中灼烧灭菌以免使用过程中的不同种细菌之间的混杂，导致试验操作的污染。

实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察本次实验主要介绍了显微镜油镜的使用以及细菌形态的观察。

显微镜是生物科学中最基本最必要的仪器，也被称为生命科学研究的窗口。

而观察细菌形态则是微生物学重要的研究内容之一，对于深入了解微生物的特性和分类十分关键。

一、显微镜油镜的使用1、准备工作在使用显微镜前，需要对仪器做一些准备工作，具体如下：（1）检查显微镜是否清洁干净。

使用棉花棒和无水酒精擦拭镜头和接口。

（2）插入镜片，拧紧螺丝。

注意，平光镜的凹面朝上。

（3）透镜的高度应调整至最高点，油镜周围涂上润滑油。

（4）在准备好玻片后，使用无菌针将样本划到玻片上。

2、操作步骤（1）将玻片插入载置物台。

调整光源，使其在镜片下方成圆形状。

（2）使用低倍放大的物镜，在载置物台下调整样本位置，然后转动焦点，调整到最清晰的位置。

（3）切换到高倍物镜。

在不移动载置物台的情况下，调整焦距直至视野内的细胞详细可见。

（4）将油镜轻轻接触载置物台上的镜片，调节光源以得到最佳观察效果。

（5）旋转调节管，使细胞从上到下等比例进入视野，观察细菌的形态、大小、数量等。

二、细菌形态的观察1、细菌分类根据细菌的细胞形态、大小、结构和移动方式等特征，可以将细菌分为不同的分类。

细菌形态既包含单细胞长条状物、圆球体等基本形态，又包括复杂的细胞、菌株组成的群体等。

常见的细菌形态有以下几种：（1）球菌（cocci）：球形或椭圆形的细胞。

（2）杆菌（bacilli）：棒状或柱状的细胞。

在实验过程中，使用显微镜观察样本，发现细菌形态上虽然存在一定的差异，但一般表现为以下情况：（1）球菌或细圆菌：呈球形，直径一般在0.5-2μm之间。

（3）螺旋菌：呈螺旋形，长度几乎无限制，直径0.5-1μm左右。

然而，即使细菌大小、形态有所不同，它们的细微结构也存在着明显的相似性，这种结构相似性在分类学上具有相当的意义。

细菌形态的观察是微生物学中非常重要的基础工作，通过观察细菌的形态、大小、数量等，能够更好地了解微生物的生长繁殖规律，对于深入研究微生物的特性、分类以及对环境的影响等方面具有非常重要的价值。

实验一油镜的使用细菌的革兰氏染色和细菌形态的观察实验目的：本实验旨在通过油镜的使用，观察细菌的革兰氏染色和形态，以掌握细菌鉴定的基础方法。

实验原理：革兰氏染色是一种常用的细菌染色方法，用于分辨细菌的结构和形态。

该染色方法将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。

革兰氏阳性菌在革兰氏染色中染成紫色，革兰氏阴性菌染成红色。

实验步骤：1.准备培养细菌的平皿和无菌的玻璃，使用酒精灯对玻璃杯进行灭菌处理。

2.取一根无菌的铂丝，沾取扩展细菌后在培养基平皿上划线接种。

3.将接种的培养基平皿在37°C恒温箱中培养12小时。

4.取出培养基平皿，使用吹泡沫取一点接种，放到滴眼瓶中，加入适量的生理盐水。

使用吹泡沫轻轻吹散细菌。

5.取一个无菌玻璃片，将油镜放在玻璃片上，使其与玻璃片连接。

6.使用无菌的锡夹夹取一小滴被吹散细菌的生理盐水，滴在油镜上。

7.将另一个无菌玻璃片放在油镜上，用力按压，使细菌均匀散布在油镜上。

8.将油镜取下，并将其放在培养基平皿上。

将油镜根据标记分为两部分，每部分放置一个培养基平皿。

9.将培养基平皿放入37°C恒温箱中，培养12小时。

10.将培养基平皿取出，观察细菌在油镜上的生长情况。

11.取一个干净的玻璃片，将油镜放在玻璃片上。

12.使用吸水纸轻轻将油镜上的细菌液吸干，并用培养基液洗净。

13.将玻璃片放在烘箱中烤干。

14.使用革兰氏染色方法对油镜上的细菌进行染色处理。

15.将革兰氏染色后的油镜进行形态观察，使用显微镜进行放大观察细菌结构。

实验结果分析：观察油镜后，革兰氏染色能够将细菌染成紫色或红色。

紫色堆状或链状的细菌属于革兰氏阳性菌，红色的细菌属于革兰氏阴性菌。

通过观察细菌形态，可以判断细菌的形状、大小、胞内结构等特征。

实验注意事项：1.实验过程中无菌操作非常重要，要使用无菌工具，注意无菌条件。

2.实验后要及时消毒处理，避免细菌污染。

3.实验中需要按照实验室的安全操作规范进行操作，避免危险发生。