小鼠骨髓的综合性实验报告

实验七小鼠骨髓细胞染色体标本的制备一、实验目的1. 学会小鼠骨髓细胞的采集和处理方法。

2. 掌握细胞较好的贴壁与生长条件，以保证细胞的好。

3. 学会最常用的Gimsa染色方法，使出现的幻觉具有明朗的色调，以便细胞的编号与统计。

二、实验原理骨髓细胞是一种多能性细胞，可分化为血液成分或骨骼系统的成分。

骨髓细胞被用于检测细胞遗传学异常，在染色体物质遗传及细胞迁移等方面具有潜在用处，并可为结构遗传学提供信息。

作为染色体标本制备的来源，一般选用小鼠骨髓细胞是最为经常采用的试验模型之一，常常作为各类染色体研究、映射和诊断的标本；其区别如来源易得、繁殖成本低、染色体数量较少，易于研究、成熟度高等因素显得优越。

三、实验步骤1. 实验前准备工作（1）保存干燥灭菌的小鼠骨髓细胞培养基，避免接触灰尘。

（2）检查各种器械的完整性，保证手段的杀菌处理。

（3）使用有缩小五倍功能的显微镜，以确保细胞图片清晰度与细胞形态的准确。

（4）打开红外线灯，以增强视觉效果并避免光损伤。

（5）按实验方案准备各种试剂和设备。

（6）实验室内准备50 mL恒温水浴和常规离心机。

2. 骨髓细胞的采集（1）设备：小鼠解剖刀片、50mL离心试管、海绵、抽管等。

（2）用70%酒精清洗瓶子的注射器，使用注射器收集小鼠间隔内的骨髓，放入存储试管中。

（3）轻轻摇动骨髓，使其中的细胞与上清液充分混合均匀。

3. 细胞的处理（1）细胞浓度的调整：从建立骨髓细胞培养物开始，骨髓细胞培养物可以在50mL培养基中存在。

使用试管取出足量细胞，可用比值0.2 mL的浓度悬液被移入12孔文化板中，吸入的细胞细胞数为2×106个左右。

（2）添加培养基到细胞培养物中，以充分覆盖细胞。

（3）将板加入约为35℃，5%二氧化碳环境下的恒温培养箱中，进行配队。

（4）半小时后使用显微镜检查细胞的附着，然后循环补充适量接种。

在24小时之前，每隔2小时更换于第一个。

4. Gimsa染色法（1）准备细胞标本：从培养基中取出涂片架，然后“组织培养板”模式的检测做法，将液体在上面包括涂片架移至吸满液体。

动物骨髓细胞染色体标本的制备实验报告
实验目的：
本实验的目的是利用正常小鼠的骨髓细胞制备染色体标本，并通过显微镜观察染色体的形态和数量，并了解染色体的组成和结构。

实验原理：
染色体是细胞核中最大的有组织结构，由DNA和蛋白质组成。

染色体的数量和形态是每个物种独特的标志之一。

在有丝分裂过程中，染色体的形态和数量的变化可以反映出细胞的分裂状态。

为了制备染色体标本，需要通过细胞的裂解，释放和固定染色体，然后在显微镜下观察染色体的形态和数量。

实验步骤：
1. 取出小鼠的股骨，并在无菌条件下对其进行消毒。

2. 使用消毒的剪刀剪下股骨两端，将骨髓剪下，加入RPMI-1640培养液中，使髓液悬浮，然后用细胞培养器将其孵育2-3天，使骨髓细胞增殖。

3. 用离心机将骨髓细胞离心，去除培养液，用磷酸盐缓冲液进行细胞裂解。

4. 将制备好的染色体悬液滴在预先涂上盐酸聚赖氨酸溶液的载玻片上，让其固定，然后通过染色体芝士和琼脂糖溶液对细胞进行染色。

5. 用显微镜观察染色体标本，记录染色体的数量和形态，并观察细胞的分裂状态。

实验结果：
制备的染色体标本在显微镜下观察。

通过对标本的观察，我们可以看到染色体形态和数量的变化，以及细胞分裂状态的变化。

同时，我们可以从染色体上观察到细胞的遗传信息，包括基因序列和调控因子等。

结论：
本实验成功制备了小鼠骨髓细胞染色体标本。

观察染色体形态和数量的变化，可以从中了解细胞的遗传信息和分裂状态变化。

同时，该实验也展示了染色体的重要性和组成结构，加深了对细胞生物学的理解。

小鼠骨髓的综合性实验报告本科学生综合性实验报告学号姓名学院专业、班级实验课程名称:教师及职称开课学期至学年学期填报时间年月日云南师范大学教务处编印一( 实验设计方案实验名称实验序号实验室实验时间一、实验目的1、学习并掌握小鼠骨髓细胞染色体的制备方法。

2、观察小鼠染色体的形态特征,统计细胞的染色体数目。

3、了解微核发生的机制;4、掌握微核实验的一般程序和实践意义;5、掌握对实验动物进行药物处理的一般程序;6、掌握进行实验设计的一般程序和规则，并锻炼实践能力。

二、实验原理、实验流程或装置示意图1、骨髓细胞具有高度的分裂增殖能力。

因此可以直接得到中期细胞而不必象血淋巴细胞或组织那样要经过体外培养。

经秋水仙素处理后，分裂增殖中的骨髓细胞由于纺缍体的形成受到抑制，染色体不能正常趋向两极而使之停留于中期，同时染色体缩短，轮廓清晰，把收获的细胞进行低渗，固定处理，使细胞处于膨胀状态，再将细胞悬液滴在载片上，使细胞破裂，染色体散开，染色后即可观察到染色体。

2、微核(Micronucleus):染色单体或染色体的无着丝点断片，或因纺锤体受损而丢失的整个染色体，在细胞分裂后期，仍然遗留在细胞质中。

末期之后，单独形成一个或几个规则的次核，被包含在子细胞的胞质内，因比主核小，故称为微核。

凡能使染色体发生断裂或使染色体和纺锤体联结损伤的化学物，都可用微核试验来检测。

各种类型的骨髓细胞都可形成微核，但有核细胞的胞质少，微核与正常核叶及核的突起难以鉴别。

嗜多染红细胞是分裂后期的红细胞由幼年发展为成熟红细胞的一个阶段，此时红细胞的主核已排出，因胞质内含有核糖体，姬姆萨染色呈灰蓝色，成熟红细胞的核糖体已消失，被染成淡桔红色。

骨髓中嗜多染红细胞数量充足，微核容易辨认，而且微核自发率低，因此，骨髓中嗜多染红细胞成为微核试验的首选细胞群。

三、实验设备及材料1、材料:小白鼠(2n=40)2、器具:注射器(1ml，5ml各一支)、托盘、解剖剪、镊子、吸管、离心管、离心机、载片、滤纸、白纱布小块等。

实验课名称遗传学实验实验名称小鼠骨髓细胞染色体的制备与观察成绩________________姓名王大锤实验报告系列年级学号组别时间温度实验原理及目的实验目的1、学习小鼠骨髓细胞染色体制片程序；2、掌握空气干燥法制片方法；3、观察了解小鼠的端着丝粒染色体的形态。

实验原理1、染色体标本制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术，优良的染色体制片是其它技术（如显带、原位杂交等）的先决条件。

2、骨髓细胞染色体染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。

动物染色体制备最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。

在骨髓细胞中，有丝分裂的指数很高，可以直接得到中期细胞而不必像血淋巴细胞或其它组织需要经过体外培养。

3、空气干燥法指细胞经过秋水仙素处理、低渗处理、充分固定和滴片等步骤之后，使载片在空气中自然干燥的方法。

实验材料、仪器及试齐U仪器：光学显微镜，2mL注射器，5号针头，10mL刻度离心管，吸管，试管，试管架，载玻片，盖片，离心机，光学显微镜，解剖器具（解剖盘，剪子、镊子）。

材料：小白鼠（Mus musculus 2n=40 ）,体重约18-20g （65-90日龄），雌雄皆可。

试剂及其他：秋水仙素溶液（100卩g/mL）, 2%柠檬酸钠溶液，0.075M KCl，冰醋酸，甲醇，Giemsa原液, 0.01 M 磷酸缓冲液（PBS, pH 7.4）1•预处理生命与环境科学学院实验报告进行秋水仙素处理。

取骨髓前3-4h给小鼠经腹腔注入秋水仙素（100卩g/ mL）0.3-0.4mL。

2. 取骨髓处死动物，立即取后肢骨。

用剪刀剪掉、清除腿部的皮肤和肌肉，然后从股骨两端关节头处剪下股骨，立即用2%柠檬酸钠溶液冲洗干净。

剪掉股骨两端膨大的关节头，使其露出骨髓腔，用吸有适当量的柠檬酸钠溶液注射器，从一端插入注射针头，将骨髓吹入10mL刻度离心管中，可反复吹洗数次，直至股骨变白为止。

小鼠不同部位骨髓组织病理切片分析ﻭﻭﻭ骨髓存在于长骨的骨髓腔，扁骨和不规则骨的松质骨中,以下是搜集整理的一篇小鼠不同部位骨髓组织病理切片探究的,供大家阅读查看。

ﻭ骨髓是机体的主要造血器，由骨髓实质和造血微环境组成,其造血功能的强弱可通过骨髓病理切片反应出来。

当骨髓被致病因素抑制时，骨髓实质分化增殖不良，造血微环境的改变均可导致机体造血功能下降。

因此,众多实验研究者通常选择制作骨髓组织病理切片并观察其镜下特点,以此作为检测造血系统损伤的指标之一。

ﻭ在大量实验研究制作小鼠骨髓病理切片时,实验者大多选择将小鼠处死后取其股骨，作为制作切片的主要取材部位，也有研究报道采用取小鼠腰椎骨髓或胸骨骨髓的方法制作骨髓病理切片。

对于选取何处病理组织制作切片最能反映机体的造血功能,尚鲜有报道。

本实验通过选取小鼠不同部位骨髓组织制作病理切片，镜下观察其骨髓实质及造血微环境,探寻能够更好反映小鼠骨髓病理变化的部位,为今后动物实验制作骨髓病理切片的取材部位选择提供理论依据.1材料和方法ﻭ 1.1实验动物ﻭ健康SPF级昆明种小鼠10只，雄性，6~８周龄，体重1８~22g,由西安大学医学院动物实验中心提供【SＣXK(陕)２0１3—00１】，在陕西中医药大学中药药理实验室【ＳYXK(陕)20０７—00６】中取材。

ﻭ1.２仪器与材料ﻭﻭ E22０光学生物显微镜（０lympuｓ)、病理图文系统分析工作站、轮转式切片机、推片与烤片两用器、苏木精－伊红（ＨE）染液等。

ﻭﻭ１.3方法ﻭﻭﻭ健康ＳＰF级昆明种小鼠10只,适应性饲养7d 后，颈椎脱臼处死并解剖,分别取小鼠胫骨、股骨、颅骨、胸骨、髂骨等5个不同部位制做骨髓病理切片,常规HＥ染色，40倍光镜下观察并拍照。

2结果ﻭﻭ光镜下各部位骨髓切片均可见不同分化阶段粒、红、巨核细胞，但胫骨、股骨骨髓切片镜下脂肪细胞较多，支架结构较疏松;颅骨、胸骨骨髓切片镜下造血红系、粒系细胞数量较少，微环境排列较松散；唯有髂骨骨髓切片镜下红系、粒系细胞大量存在，分布均匀且排列紧密，血窦和巨核细胞清晰,粒细胞胞浆嗜碱性，增生活跃，并可见核像，骨髓造血组织支架结构紧密且脂肪细胞数量较少,可较好的反映骨髓的造血功能。

第1篇一、实验目的1. 了解骨髓细胞染色体制备的基本原理和操作步骤。

2. 掌握染色体制片技术，观察骨髓细胞染色体结构。

3. 熟悉显微镜的使用方法，提高观察细胞结构的能力。

二、实验原理骨髓细胞染色体制备是研究染色体结构、数量及异常的重要方法。

通过染色体制备，可以在显微镜下观察到细胞的染色体结构，从而分析细胞的遗传特性。

本实验采用小鼠骨髓细胞作为实验材料，通过秋水仙素处理使细胞分裂阻滞在中期，再进行低渗处理、固定、滴片、染色等步骤，制备染色体标本。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：小鼠骨髓细胞、秋水仙素、柠檬酸钠、固定液、染色液等。

2. 实验仪器：显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、滴管、烧杯等。

四、实验步骤1. 实验前准备：将小鼠处死，取出骨髓组织，放入装有柠檬酸钠的小烧杯中，用剪刀剪碎，使骨髓细胞游离出来。

2. 低渗处理：将骨髓细胞悬浮液放入离心管中，离心后弃去上清液，加入适量固定液，再次离心，弃去上清液。

3. 染色：将固定后的细胞沉淀用染色液染色，室温放置10-15分钟。

4. 滴片：将染色后的细胞沉淀用滴管滴在载玻片上，盖上盖玻片，用显微镜观察。

五、实验结果与分析1. 观察到细胞呈圆形，细胞核较大，染色质清晰可见，染色体呈X形，可见有丝分裂中期细胞。

2. 观察到染色体数目与小鼠的正常染色体数目一致，染色体结构完整，无断裂、缺失、易位等异常。

六、实验讨论1. 秋水仙素处理：秋水仙素是一种细胞分裂抑制剂，能使细胞分裂阻滞在中期，有利于观察染色体结构。

2. 低渗处理：低渗处理可以使细胞膨胀，便于观察染色体结构。

3. 固定：固定可以使细胞和染色体保持原状，便于观察。

4. 染色：染色可以使染色体着色，便于观察。

七、实验总结本实验成功制备了小鼠骨髓细胞染色体标本，并观察到了染色体结构。

通过本实验，我们掌握了染色体制备的基本原理和操作步骤，提高了观察细胞结构的能力。

在今后的实验中，我们将进一步学习染色体分析技术，为遗传学研究提供有力支持。