虎杖中游离羟基蒽醌成分的提取和分离

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文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!虎杖中蒽醌类成分提取与分离的流程一、介绍蒽醌类化合物是一类具有重要生物活性的天然产物，在药物和化学领域具有广泛的应用价值。

虎杖中蒽醌类成分的提取与分离的实验原理及产物得率的因素演讲者：张世雄+虎杖为蓼科植物虎杖的干燥根及根茎。

+中药化学成分++虎杖+根和根茎含游离蒽醌及蒽配甙，主要为大黄素（emodin），大黄素甲醚（Physcion）[1‐3]，大黄酚（chrysopha－nol）[1,2]，蒽甙（anthraglycside）A即大黄素甲醚(8－O‐β‐D‐葡萄糖甙（Physcion‐8－O‐β‐D‐glucoside）[4]，蒽甙（anthraglycoside）B即大黄素8－O‐β‐D‐葡萄糖甙（emodin－8－O‐β‐D‐glucoside)[3,4]，迷人醇（fallacinol），6‐羟基芦荟大黄素（citreorsein），大黄素‐8‐甲醚（questin），6‐羟基芦荟大黄素‐8‐甲醚（questinol）[5]等。

还含芪类化合物：白藜芦醇（resveratrol）即是3，4’，5‐三羟基芪（3，4’，5－tri－+hydroxystilbene），虎杖甙（Polydatin）即白藜芦醇3‐O‐β‐D‐葡萄糖甙（rerveratrol‐3‐O‐β‐D‐glucoside）[3,6]，又含原儿茶酸（Protocate－chuic acid），右旋儿茶精（catechin)，2，5－二甲基‐7‐羟基色酮（2，5－dimethyl‐7‐hydroxychromone），7‐羟基‐4‐甲氧基‐5‐甲基香豆精(7‐hydroxyl‐4‐methoxy‐5‐methyl coumarin），2‐甲氧基‐6‐乙酰基‐7‐甲基胡桃配（2－methoxy－6－acetyl－7－methyljuglone），决明蒽酮‐8‐葡萄糖甙（torachrysone－8－O‐D－glucoside）[5]，β‐谷甾醇葡萄糖甙（β－sitosterol glucoside）[3]以及葡萄糖（glucose），鼠李糖（rhamnose）[1]，多糖[7]，氨基酸12．99％和铜、铁、锰、锌、钾及钾盐[8]等。

虎杖中蒽醌类化合物的提取与分离工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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虎杖中蒽醌类物质的提取、分离及鉴定（吕培银）【药物简介】虎杖，又名阴阳莲、斑杖、苦杖、酸汤杆等。

可在春、秋两个季节采挖，除去须根，洗净后，趁鲜切短段或厚片，晒干。

微苦，微寒。

归肝、胆、肺经。

利湿退黄，清热解毒散瘀止痛，止咳化痰。

用于湿热黄疸，淋浊，带下，风湿痹痛，痈肿疮毒，水火烫伤，经闭，癥瘕，跌打损伤，肺热咳嗽。

虎杖中主要含有蒽醌类、二苯乙烯类、黄酮类、香豆素类以及一些脂肪酸类化合物。

药理作用包括抗炎、抗病毒、抗菌、调血脂、抗血栓、改变血流变、扩张血管、保护心肌、抗氧化、抗肿瘤，改善阿尔茨海默症及预防艾滋病等。

【实验目的】一、学会撰写实验方案。

二、掌握中药材有效成分回流提取的方法和操作。

三、掌握pH梯度萃取法分离不同酸度游离羟基蒽醌的原理和操作。

四、掌握硅胶柱层析的操作方法。

五、掌握羟基蒽醌的理化检识和薄层检识方法。

【实验原理】羟基蒽醌类化合物及二苯乙烯类成分均可溶于乙醇，所以可以采用乙醇回流提取法，利用羟基蒽醌类苷元与苷的溶解度差异可以用乙醚捏溶的方法分离游离的蒽醌衍生物苷元和蒽醌苷类。

根据游离羟基蒽醌类化合物含有酚羟基数目和位置不同，不同表现出酸性强弱不同，利用梯度pH萃取法分离不同酸性强弱的有蒽醌衍生物。

硅胶吸附柱色谱法的原理是物质的吸附性具有差别，属于物理吸附。

碱梯度萃取虎杖中主要蒽醌的方法，优点是简单快捷，但很难提取到单一的蒽醌，往往夹带有酸性接近的蒽醌，要通过多次重结晶或色谱再分离，才能获得单一蒽醌，收率低。

柱色谱法虽然能分离到单一蒽醌，但是该法耗时间费溶剂，难以形成规模生产。

【1】化学检识的原理是羟基蒽醌类在碱性溶液中发生颜色改变，会使颜色加深，多呈橙、红、紫红色以及蓝色。

该显色反应与形成共轭体系的酚羟基和羰基有关。

【实验用品】实验材料：虎杖（100g）、95%的乙醇、乙醚、5%NaHCO3溶液、5%Na2CO3溶液、2%NaOH溶液、硅胶、石油醚、乙酸乙酯、MgAc2乙醇溶液。

2、薄层色谱(TLC)： 吸附剂：硅胶G－CMCNa板，用前活化 展开剂：石油醚—乙酸乙酯 (2：1) 样 品：a,b,c乙醇液，大黄素标准品 显 色：①先置可见光下观察色斑， 后紫外灯下观察荧光斑点 ②再用2%NaOH喷洒显色 结果及计算比移值
（三）含量测定
虎杖中游离蒽醌的测定 1. 标准曲线的制备 称取1,8-二羟基蒽醌25mg置于200ml容量瓶中，乙醚溶 解并定容，取此溶液0.05~5.00ml，分别置于25ml容量瓶 中，水浴上挥去乙醚，加5%氢氧化铝-2%氢氧化铵混 合碱液至刻度，在490nm测定光密度，绘制标准曲线。 2. 样品测定 取生药粉末（过40目）0.2g置于索氏提取器中，氯仿回 流提取至无色，将氯仿液置于分液漏斗中， 以5%氢氧 化铝-2%氢氧化铵混合碱分次提取至无色，合并碱液， 用少量氯仿洗涤，碱液调整至一定体积，碱液若不澄清， 垂熔漏斗过滤，滤液在沸水浴中加热4分钟，用冷水冷 却至室温，30分钟后在490nm比色，由标准曲线计算含 量。
中药化学典型实验多媒体课件
湖南中医药大学药学院中药化学教研究室
实验二
虎杖中蒽醌类成分 提取、分离、 鉴定及含量测定
一、教学要求
l、掌握梯度pH萃取法分离酸性成分的方法。 2、学习脂溶性成分和水溶性成分分离的方法。 3、了解蒽醌类化合物的一般性质和鉴别反应。
二、实验原理
本实验是根据虎杖中的羟基蒽醌类化合物及 二苯乙烯类成分均可溶于乙醇，故采用乙醇将 它们提取出来。羟基蒽醌类苷元成分能溶于乙 醚等弱亲脂性溶剂，采用乙醚使苷元和苷类成
四、 实验讨论及注意事项
1.常压蒸馏回收溶剂之前，应该加入沸石，以免暴 沸。 2.什么是梯度pH萃取法，适用于哪些物质的分离？ 试解释本次试验中pH萃取法应该注意哪些事项？ 3.两相萃取时，不可猛力振摇，只能轻轻旋转摇动， 以免造成严重乳化现象而影响分层。如果出现乳 化现象，如何破除？ 4.TLC鉴定a,b,c时，解释三者相对比移值的大小关 系？

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说明虎杖中蔥醌类成分的提取与分离流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

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一、实验目的
• 1、掌握用乙醇回流提取中药中有效成分技 术和注意点 2、掌握蒽醌类化合物亲脂性成分、亲水性 成分分离技术 3、掌握柱层析法,并能通过被分离化合物的 结构分析实训结果 4、能正确判断薄层色谱、显色反应的结果



四、实验步骤
• 1、提取：连接好实验装置装入已称好的20 克虎杖药品，加入70%乙醇90摄氏度，水 浴回流2h得到总蒽醌提取液，将提取液减 压蒸馏，回收乙醇并浓缩，得到类糖浆状 物置于烘箱烘干，得到粉红色粉末，备用

• 2、分离：称取10g虎杖乙醇提取物加入30g 80~100目的硅胶，搅拌均匀，置于60摄氏度 的水浴加热，待液剂挥发后成样品胶。取 200g 300~400目的硅胶作为分离胶，均匀装 住，再装入干燥好的样品胶。然后用纯氯仿打 通柱子，以不同配比的氯仿与甲醇溶剂作为流 动相洗脱，包层层析法（TLC）跟踪检测，分 别收集。
• 3、检测：薄层层析检测，展开剂采用氯仿-甲 醇-水体系，265nm紫外光检测

本方法的优点
1、使用索氏回流提取装置，提取率高 2、该分离方法分离的效果好，因为都把组分
大部分分离出来 3、紫外光检测，比较精确

其他方法

• 虎杖为蓼科植物虎杖(Polygonumcus pidatum siedet Zucc)的根及根茎.别名阴阳莲,花斑竹.味 苦、性微寒.能清热解毒、祛风利湿、利尿通淋、 祛痰、止咳、通经等.主要用于湿热黄疸、风湿痹 痛、淋浊带下、经闭、烫伤. 虎杖中含有较多的羟基蒽醌类成分及二苯乙烯 类成分.其中主要有大黄素、大黄酚、大黄素-6-甲 醚、大黄素3-D-葡萄糖苷及β-谷甾醇、鞣质等.虎 杖得主要药理作用有抗菌、抗病毒及镇咳平喘、 常用来治疗急性炎症、烧烫伤、肝炎、气管炎等.

优选

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（三）含量测定
虎杖中游离蒽醌的测定
1. 标准曲线的制备
称取1,8-二羟基蒽醌25mg置于200ml容量瓶中，乙醚溶 解并定容，取此溶液0.05~5.00ml，分别置于25ml容量瓶 中，水浴上挥去乙醚，加5%氢氧化铝-2%氢氧化铵混 合碱液至刻度，在490nm测定光密度，绘制标准曲线。
2. 样品测定
（2）、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中， 加少量乙醇溶解后，再滴加1%醋酸镁的乙醇溶液 数滴，观察颜色变化。
（3）、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中， 加少量乙醇溶解后，再滴加1%三氯化铁的乙醇溶 液数滴，观察颜色变化。
优选
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2、薄层色谱(TLC)： 吸附剂：硅胶G－CMCNa板，用前活化 展开剂：石油醚—乙酸乙酯 (2：1) 样 品：a,b,c乙醇液，大黄素标准品 显 色：①先置可见光下观察色斑， 后紫外灯下观察荧光斑点 ②再用2%NaOH喷洒显色 结果及计算比移值
优选
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三、实验内容
(一)虎杖中蒽醌苷元的提取与分离 1、虎杖中蒽醌类成分的提取： 2、蒽醌苷与苷元的分离： 3、不同酸性蒽醌苷元的分离（梯度pH萃取法）
优选
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流程图
优选
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优选
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（二）鉴定
1、颜色反应
(l)、取以上a,b,c少量，分别置于三支试管中， 加少量乙醇溶解后，加2％NaOH溶液数滴，观察颜 色变化。
优选
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四、 实验讨论及注意事项
1.常压蒸馏回收溶剂之前，应该加入沸石，以免暴 沸。
2.什么是梯度pH萃取法，适用于哪些物质的分离？ 试解释本次试验中pH萃取法应该注意哪些事项？
3.两相萃取时，不可猛力振摇，只能轻轻旋转摇动， 以免造成严重乳化现象而影响分层。如果出现乳 化现象，如何破除？

说明虎杖中蒽醌类成分的提取和分离流程下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。

文档下载后可定制修改，请根据实际需要进行调整和使用，谢谢！本店铺为大家提供各种类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，想了解不同资料格式和写法，敬请关注！Download tips: This document is carefully compiled by this editor. I hope that after you download it, it can help you solve practical problems. The document can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you! In addition, this shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!提取和分离蒽醌类成分是一种常见的生物化学实验技术，本文将介绍其具体的操作流程。

三、实验药材：
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虎杖【 Huzhang】
【药材学名】 Rhizoma Polygoni Cuspidati。 【别名】花斑竹、酸筒杆、酸桶笋、酸汤梗、川筋龙、斑庄、斑杖根、大叶蛇总管、 黄地榆 【分布】分布于山东、河南、陕西、湖北、湖南、江西、福建、台湾、云南、四川、 贵州。 【采制贮藏】春、秋二季采挖，除去须根，洗净，趁鲜切短段或厚片，晒干。置干燥 处，防霉，防蛀。 【性状】本品多为圆柱形短段或不规则厚片，长1～7cm，直径0。5～2。5cm。外皮棕 褐色，有纵皱纹及须根痕，切面皮部较薄，木部宽广，棕黄色，射线放射状，皮部与 木部较易分离。根茎髓中有隔或呈空洞状。质坚硬。气微，味微苦、涩。 【性味与归经】微苦，微寒。归肝、胆、肺经。 【功能与主治】清热解毒，利胆退黄，祛风利湿，散瘀定痛，止咳化痰。用于关节痹 痛，湿热黄疸，经闭，癓瘕，咳嗽痰多，水火烫伤，跌扑损伤，痈肿疮毒。 【使用注意】孕妇慎用。 【气味】 （根）微温。
虎杖的提取分离与检识
-------郭爽、潘潇、孙超
一、实验目的：
1.掌握从大黄中提取和分离游离蒽醌的方法。 2.掌握用PH梯度萃取法分离不同酸性的羟基蒽醌类 化合物。 3.掌握蒽醌类化合物的主要检识方法。 4.熟悉蒽醌类化合物的色谱检识法。 5.了解用柱色谱法分离蒽醌类成分。
二、实验原理：
• 此次实验是根据大黄中的羟基蒽醌苷经酸水解成 游离羟基蒽醌，而游离羟基蒽醌不溶于水，可溶 于氯仿、乙醚等亲脂性有机溶剂的性质，用氯仿 从水解液中将游离羟基蒽醌提取出来，再利用各 游离羟基蒽醌的酸性不同，采用PH梯度萃取法将 其分离，其中大黄素和大黄素甲醚的酸性十分相 近，用PH梯度萃取法难以分离，可利用两者的极 性不同，采用硅胶柱色谱法进行分离。

18(5) 383—385 [6] 杨燕军 舒惠一 闵知大.巴戟天和恩施巴戟的蒽醌化合物[J].药学学报 1992 27(5) 358—364
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根据蒽醌类化合物在不同介质中吸收光谱的不同 采用差示分光光度法测定虎杖中蒽醌含 量
精确称取 1 2 5 8-四羟基蒽醌 5.39mg 置于 50mL 容量瓶中 用甲醇溶解并稀释至刻度 摇匀 精密吸取 0.40 0.60 0.80 1.00 1.20 1.60mL 各两份于 10mL 容量瓶中 一份加 0.5% 的醋酸镁甲醇溶液至刻度 另一份用甲醇稀释至刻度 摇匀 分别用甲醇及 0.5%的醋酸镁甲醇 溶液为参比液 于 400-550nm 区间作二者的吸收光谱图 确定在两种介质中的最大吸收波长 甲醇溶液最大吸收波长为 430nm 加入醋酸镁后的最大吸收波长为 505nm 因虎杖中非蒽醌类 成分不与醋酸镁甲醇溶液显色 因此 对于配制的标准系列分别以后者为参比 在 505nm 波长 处测定各溶液的吸光度 A 值 3 结果与讨论 3.1 虎杖中蒽醌类物质含量测定
在五种溶剂中 乙醇对蒽醌的提取率最高 同时 乙醇毒性低 价格便宜 易于回收 用 乙醇为溶剂可以把不同类型 性质的蒽醌提取出来[4~6] 采用回流提取方法 分别用 20% 40% 60% 70% 80% 90%不同浓度乙醇提取虎杖中蒽醌成分 当乙醇浓度为 70%时的提取率最高 活性物质的提取不仅与溶剂的溶解能力相关 而且与溶剂对药材植物细胞的溶涨 穿透能力相
热时间也长 致使其中的化学成分易改变 超声提取法虽然可以提高提取速率 但是对药材的
粒度的大小和形状有一定要求 否则提取液的后处理困难 冷浸法虽然避免了加热 对热不稳
定性药材有一定的安全性 但此法提取时间长 浸提 48h 提取仍不完全 尤其对于坚硬 较粗