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生物化学实验须知（适用于制药工程专业）过去几年中所学到的各种实验技术和操作技能，在生物化学实验中将会经常用到，当然更重要的是要学会一些新的、在生物化学的科学研究中最常用的实验方法。
要想在生物化学实验方面要取得好成绩，在很大程度上，取决于你们对这些专门化实验技术的熟练掌握和对生物化学原理的深入了解。
通过生物化学实验应该做到：①学习设计一个实验的基本思路，掌握各个实验的基本原理，学会严密地组织自己的实验，合理地安排实验步骤和时间。
②训练实验的动手能力，学会熟练地使用各种生物化学实验仪器，包括各种天平、分光光度计、离心机、各种电泳装置和摇床等等。
③学会准确详实地记录实验现象和数据的技能，提高实验报告的写作能力，培养严谨细致的科学作风。
④掌握生物化学的各种基本实验方法和实验技术，为今后参加科研和毕业论文工作打下坚实的基础。
为使学生上好生物化学实验课，对学生实验提出如下要求：一、生物化学实验室规则1．学生在实验前必需结合相关的生物化学理论知识认真预习实验内容。
进入实验室后每个学生都应该自觉遵守实验室规则，自觉维护课堂秩序，不迟到，不早退，保持室内安静，不大声谈笑。
2．在实验过程中自觉遵守课堂纪律，严格按照操作规程进行操作，要求独立完成的实验要学会独立操作；与同学合作完成的实验要做好分工、配合、协调工作。
3．实验数据和现象应随时记录在实验本上（不能随意记在纸片上！）。
实验结束后，实验记录必须送实验指导教师审阅后才能填写实验报告或离开实验室，实验报告一般于实验结束一周内由学习委员收齐后交实验指导教师批阅。
4．学生在实验过程中要精心爱护各种仪器、设备。
实验所需的一般仪器按规定借领、归还。
完成实验后应将器皿清洗干净后放在领物篮中并排列整齐。
如有器皿损坏或遗失需说明原因，进行登记、并经指导教师签名后方可补领，并按规定进行赔偿。
5．对于精密贵重仪器在每次使用后应登记使用者姓名并记录仪器设备的使用情况。
要随时保持仪器设备的清洁。
实验一单结晶体管触发电路及单相半波可控整流电路实验一．实验目的1．熟悉单结晶体管触发电路的工作原理及各元件的作用。
2．掌握单结晶体管触发电路的调试步骤和方法。
3．对单相半波可控整流电路在电阻负载及电阻电感负载时工作情况作全面分析。
4．了解续流二极管的作用。
二．实验内容1．单结晶体管触发电路的调试。
2．单结晶体管触发电路各点波形的观察。
3．单相半波整流电路带电阻性负载时特性的测定。
4．单相半波整流电路带电阻—电感性负载时，续流二极管作用的观察。
三．实验线路及原理将单结晶体管触发电路的输出端“G”“K”端接至晶闸管VT1的门阴极，即可构成如图1-1所示的实验线路。
四．实验设备及仪器1．教学实验台主控制屏2．NMCL—33组件3．NMCL—05E组件4．NMCL—03组件5．双踪示波器（自备）6．万用表（自备）五．注意事项1．双踪示波器有两个探头，可以同时测量两个信号，但这两个探头的地线都与示波器的外壳相连接，所以两个探头的地线不能同时接在某一电路的不同两点上，否则将使这两点通过示波器发生电气短路。
为此，在实验中可将其中一根探头的地线取下或外包以绝缘，只使用其中一根地线。
当需要同时观察两个信号时，必须在电路上找到这两个被测信号的公共点，将探头的地线接上，两个探头各接至信号处，即能在示波器上同时观察到两个信号，而不致发生意外。
2．为保护整流元件不受损坏，需注意实验步骤：（1）在主电路不接通电源时，调试触发电路，使之正常工作。
（2）在控制电压U ct=0时，接通主电路电源，然后逐渐加大U ct，使整流电路投入工作。
（3）正确选择负载电阻或电感，须注意防止过流。
在不能确定的情况下，尽可能选择较大的电阻或电感，然后根据电流值来调整。
（4）晶闸管具有一定的维持电流I H，只有流过晶闸管的电流大于I H，晶闸管才可靠导通。
实验中，若负载电流太小，可能出现晶闸管时通时断，所以实验中，应保持负载电流不小于100mA。
细胞周期检测（PI法）一、实验方法原理细胞周期（cell cycle)：是指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程，通常由G0/G1期、S期、G2期和M期组成。
G1期：细胞开始RNA和蛋白质的合成，但DNA含量仍保持二倍体。
S期：DNA开始合成，这时细胞核内DNA的含量介于G1期和G2期之间。
当DNA复制结束成为4倍体时，细胞进入G2期。
G2期的细胞继续合成RNA及蛋白质，直到进入M期。
因此，单纯从DNA含量无法区分G2期和M期。
一旦有丝分裂发生，细胞分裂成两个细胞，这两个细胞或者进入下一个细胞周期，或者进入静止期（G0期），而G0期从DNA含量上同样无法与G1期区分。
因此，整个复制周期可以描述为G0/G1、S、G2/M期。
通过核酸染料PI标记DNA,并由流式细胞仪进行分析，可以得到细胞各个时期的分布状态，计算出G0/G1%、S%、G2/M%，了解增殖能力，在肿瘤病理学研究中，通常以S期细胞比率作为判断肿瘤增殖状态的指标。
流式细胞仪的工作原理：是将待测细胞放入样品管中，在气体的压力下进入充满鞘液的流动室。
在鞘液的约束下细胞排成单列由流动室的喷嘴喷出，形成细胞柱。
通过对流动液体中排列成单列的细胞进行逐个检测，得到该细胞的光散射和荧光指标，分析出其DNA特征。
细胞周期检测的原理：PI法是较常见的一种周期检测方法。
PI 为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，从而计算出各个期的百分含量。
PI染色后，假设G0/G1期细胞的荧光强度为1，那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强度的理论值为2，正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。
细胞周期示意图如（图一）所示（图一）二、材料及准备工作1.材料准备试剂、耗材名称品牌货号细胞培养瓶corning6孔板corning10ml离心管国产1.5ml EP管国产胰酶（无EDTA）贝博试剂盒中包括RNase-A 贝博试剂盒中包括PI 贝博试剂盒中包括无水乙醇国产PBS 自配2. 试剂配制10XPBS液体配方（0.1MPBS pH 7.4）以1L量为例：NaCl 80gNa2HPO4·12H2O 32.3gNaH2PO4·2H2O 4.5g（十二水合磷酸氢二钠和二水合磷酸二氢钠）加双蒸水900mL 左右，用HCl/NaOH 调pH至7.4，最后定容为1000mL。
水文学实验指导书福建师范大学地理科学学院水文学教研组目录实验一水位水深测量 (1)实验二流速测量 (4)实验三水位流量关系实验研究 (8)实验四波浪测量 (12)附录1 水流、波浪实验室系统简介 (15)附录2 LGY—Ⅲ型多功能智能流速仪简介 (17)附录3 CBY-Ⅱ型波高测量控制系统简介 (20)实验一水位水深测量一、实验目的1、了解水位测针的结构、原理和使用方法。
2、掌握直接测量法和测针法，对不同流量下的水位或水深进行测量。
二、实验设备实验装置由实验水槽、水位测针、钢尺等组成。
水位测针的构造如图1（a）（b）所示。
图1 水位测针结构图三、实验原理学会准确地测量水位，是做好水文学实验的重要基本功。
因为在进行水文学实验时，一些测量流速、流量的方法都归结于测量水位。
水位是指河流或其他水体的自由水面相对于某一基面的高程。
已知河床底部的高程，就可以通过测量水深来计算水位值；或者当已知河床断面形态，通过测量水位，可以计算平均水深。
在实验室中，可以假定水槽底部高程为0，测量的水深即为水位。
当水面位置恒定，不随时间改变时，通常可以采用以下方法进行水位测量。
1、直接测量法将有刻度的钢尺或物体放入水中，读出水面位置的读数。
或者在玻璃水槽外部附上标尺，直接读出水槽内水面位置的读数。
由于表面张力的作用，水面与标尺接触部位水面局部升高，影响到水面位置读数的准确性。
在应用直接测量法测量水位时，要考虑由此产生的读数误差。
2、测针法在需要测量水位处设置测针架，当测针尖接触水面后，游标上的零刻度对应测针杆标尺的数值为水位读数。
为提高读数的精度，需了解测针游标的测读方法。
测针标尺的单位刻度是1mm，游标的单位刻度是0.9mm。
测针标尺的单位刻度与游标的单位刻度之差为1.0-0.9=0.1mm。
因此，游标刻度与测针标尺刻度重合处的游标读数是精确到0.1mm的读数。
例如图1（c），游标上零刻度正好对应测针读数2，且两刻度重合，所以水位读数为2.00cm。
GC-2014C气相色谱仪操作规程毛细柱注样实验操作步骤1．进行毛细柱实验时，先根据样品要求选择好毛细色谱柱，然后将毛细色谱柱通过毛细柱进样口与FID2检测器相连接，连接方法按GC-2014C气相色谱仪操作说明进行。
2．确认GC-2014C气相色谱仪处于关闭状态，然后将氮气钢瓶的给气阀门开到最大（注意不是减压阀门），正常情况下氮气压力表（右边块）指示值一般在5~15MPa之间（当氮气瓶气压降到3MPa 时应停止使用，并填充氮气），再调节减压阀门（左边的手动阀门）将压力调节到0.5~0.8MPa左右。
3．打开GC-2014C气相色谱仪顶部后边的压力表保护罩：左边有5块0~200KPa的压力表：MAKE UP是ECD保护源压力表，一般为20~30KPa；上面两块为FID点火氢气给气，一般为60KPa；下边两块为FID点火空气给气，一般为50KPa。
中间：一个浮子流量计（没有接气源），下方对应的左边为毛细柱分流调节旋钮及其对应的排气孔，右边为毛细柱隔垫吹扫调节旋钮及其对应的排气孔。
右边四块压力表：左上0~1000KPa的为氮气压力总表PRIMARY，一般为500KPa“恒压”；左下为毛细柱氮气给气压力表，一般为80~120KPa“恒压”；右边压力表为FID的载气“恒流”，其下方对应两个气体流量调节阀分别对应左边和右边两路FID。
4．毛细柱注样实验压力表保护罩内要使用到的压力表及调节旋钮有：左边5块：MAKE UP压力表及其对应的流量调节旋钮ECD保护源压力表，调节其对应的旋钮将压力调节至20~30KPa；FID2点火氢气给气压力表及其对应的流量调节旋钮，在步骤9中进行操作；FID2点火空气给气压力表及其对应的流量调节旋钮，在步骤9中进行操作。
中间浮子流量计下方：对应的左边为毛细柱分流调节旋钮SPLIT及其对应的排气孔，根据样品分析要求，调节是否进行分流，其详细参数见GC-2014C气相色谱仪说明书12.2；右边为毛细柱隔垫吹扫调节旋钮PURGE及其对应的排气孔；先顺时针关严，再按操作箭头逆时针旋转3圈即可。
《药理学》实验讲义实验一药理学实验的基本知识和基本技术一、目的1. 掌握基本操作，锻炼动手、动脑能力；2. 更好地掌握药理学基本理论知识；3. 培养科学思维二、基本要求1. 实验前：预习实验内容并复习相关理论知识；2. 实验时⑴实验器材要妥善保管；⑵实验操作按步骤进行，仔细观察实验中出现的现象，实事求是地做好记录；⑶注意节约实验药品；⑷维持良好的课堂纪律。
3. 实验后⑴各组同学将实验动物处死，实验台擦干净，将实验方盘送回准备室；⑵值日生搞好实验室卫生，将死亡动物送至指定场所；⑶书写实验报告。
三、实验报告的书写1. 题目2. 目的3. 原理4. 材料：实验动物，器材，药品5. 方法：用自己的语言简单扼要描述出来；6. 结果：要求真实、清楚；7. 讨论：将实验结果进行比较、分析；实验中有哪些不足之处；结果异常或失败的原因；8. 结论：将实验结果进行归纳总结，应带有提示性质。
四、药理学实验实验设计原则1.随机原则按照机遇均等的原则进行分组。
其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少，而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。
2.对照原则空白对照（指在不加任何处理的条件下进行观察对照）；阴性对照也称假处理对照（给予生理盐水或不含药物的溶媒）；阳性对照也称标准对照（指以已知经典药物在标准条件下与实验药进行对照）。
3.重复原则能在类似的条件下，把实验结果重复出来，才能算是可靠的实验，重复实验除增加可靠性外，也可以了解实验变异情况。
五、实验动物1. 动物的选择（1）小白鼠：适用于需大量动物的实验，如某些药物的筛选，半数致死量的测定。
也较适用于避孕药实验、抗炎镇痛药实验、中枢神经系统药实验、抗肿瘤药及抗衰老药实验等。
（2）大白鼠：比较适用于抗炎药物实验，血压测定、利胆、利尿药实验，也可用于进行亚急性和慢性毒性实验。
（3）豚鼠：因其对组胺敏感，并易于致敏，故常被选用于抗过敏药、平喘药和抗组胺药的实验。
也常用于离体心脏、心房、肠管实验。
必修1 第一章从实验学化学知识清单：一、化学实验基本方法：（一）化学实验安全：1、为确保实验安全应注意以下问题：（1）遵守实验室规则，时时想到“安全第一”。
（2）了解安全措施①浓硫酸稀释应慢慢将浓硫酸沿器壁注入水里，并不断搅动，若不慎将浓硫酸溶液。
酸、碱溅在眼洒到皮肤上应立即用大量水冲洗，然后涂上3%~5%的NaHCO3中立即用水反复冲洗，并不断眨眼。
②做有毒气体的实验时，应在通风橱中进行，并注意对尾气进行适当处理（吸收或点燃等）。
进行易燃易爆气体的实验时应注意验纯，尾气应燃烧掉或作适当处理。
③洒在桌面上的酒精燃烧，应立即用湿抹布或沙土扑盖。
④水银洒在桌面上，可洒上硫粉进行回收；⑤误食重金属离子，可服用大量鸡蛋、牛奶等含蛋白质的食物进行解毒；⑥实验中要做到“五防”：防爆炸，防倒吸，防暴沸，防失火，防中毒。
火警电话“119”，急救电话“120”，也可拨打“110”求助。
⑦取用药品时做到“三不”，即不能用手接触药品、不能把鼻孔靠近容器口去闻药品的气味、不能品尝药品的味道。
（3）掌握正确的操作方法①药品的取用：固体粉末状药品：用药匙取用块状药品：用镊子取用液体少量液体：用胶头滴管吸取一定量液体：用量筒量取②酒精灯的使用不能向燃烧的酒精灯内添加酒精，添加酒精的量不能超过酒精灯容积的2/3，用完酒精灯用灯帽将酒精灯熄灭，不可用嘴吹灭。
③加热能直接加热的仪器：试管、坩埚、蒸发皿、燃烧匙；需垫石棉网加热的仪器：烧杯、烧瓶、锥形瓶；不能加热的仪器：集气瓶、试剂瓶、启普发生器；常见的计量仪器：温度计、天平、量筒、容量瓶（注：量器不可加热和用做反应容器。
）④试纸的使用a.试纸的种类及性能石蕊（红色、蓝色）试纸：用来定性检验气体或溶液的酸碱性。
pH＜5的溶液或酸性气体能使蓝色石蕊试纸变红色；pH＞8的溶液或碱性气体能使红色石蕊试纸变蓝色。
pH试纸：用来粗略测量溶液pH大小（或酸碱性强弱）。
pH试纸遇到酸碱性强弱不同的溶液时，显示出不同的颜色，可与标准比色卡对照确定溶液的pH值。
《应用化学综合性实验》指导书实验须知●注意实验安全！特别是处理强酸、强碱时。
稀释浓硫酸时，先量取所需要的蒸馏水，然后缓慢地将浓硫酸倒入盛有蒸馏水的容器，同时小心搅拌。
●严禁擅自将实验室内的化学品带出实验室，否则后果自负！●用完试剂后，及时将瓶盖盖上，特别是有机溶剂。
有机溶剂不得接触明火。
●使用烧杯等玻璃容器加热时，首先应检查烧杯壁是否有裂痕，加热前用干抹布将烧杯外壁的水擦干，开始加热后不要急剧升温，先小火后大火，以免烧杯受热不均炸裂。
观察烧杯溶液加热情况时，不要让眼睛处于烧杯的正上方。
加热时，同组必须有人在一旁观察，以免溶液局部过热溅出伤人。
加热完毕后，小心取下，置于干燥的．．．实验台上。
●浓度很高的强酸和强碱未经稀释不得直接入下水道!!●用完后的滤纸等杂物不得随意丢入水槽，以免堵塞下水道。
●实验前需完成预习报告，预习报告包括实验的基本原理、基本流程等，可事先将所需记录表格列好。
●原始数据记录要规范、清晰，如有效数字。
●常用酸的浓度，浓硫酸18 M，浓盐酸12 M，浓硝酸15 M。
●取用试剂时，注意试剂瓶标签上所标注的化学组成，有时所购买试剂的组成与我们所需的不完全一致，如结晶水的数目。
●每组同学实验完成后，首先要将本组的实验台打扫干净，将原始数据记录纸和预习报告交给指导老师检查签字后才可离开实验室。
●实验过程中如有特殊情况，及时向指导教师报告。
实验1 铅铋混合液中铋、铅含量的测定一、实验目的1．掌握控制溶液酸度，用EDTA连续滴定铋、铅两种金属离子的原理和方法。
2．掌握二甲酚橙指示剂颜色变化。
二、原理Bi3+、Pb2+均能与EDTA形成稳定的配合物，其稳定常数分别为lgK BiY= 27.94，lgK PbY =18.04，两者差值较大。
因此可利用酸效应，控制不同的酸度，用EDTA连续滴定Bi3+和Pb2+。
通常，先调节酸度pH=1，滴定Bi3+；再调节至pH=5～6，滴定Pb2+。
Bi3+ + H2Y2– = BiY– + 2H+Pb2+ + H2Y2– = PbY2– + 2H+在测定时均以二甲酚橙作指示剂，终点由紫红色变为黄色。
