液相色谱故障排除大全
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高效液相色谱仪常见故障及解决方法一、泵故障1. 故障现象:泵无法正常启动或启动后无法正常停止。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧。
2. 故障现象:泵的流量不稳定或无法调节。
解决方法:检查泵头是否有污物堵塞,清除污物;检查泵头与控制器之间的连接线是否接触良好,如有松动,重新插紧;检查泵头与柱塞之间的密封圈是否损坏,如损坏,更换密封圈。
二、流动相跑空1. 故障现象:流动相液位下降至最低液位以下,导致无法正常进样。
解决方法:检查流动相的储液瓶是否已空,如已空,重新更换储液瓶;检查流动相的流速设置是否正确,如不正确,重新设置流速;检查管路是否有泄漏点,如存在泄漏点,修复泄漏点。
2. 故障现象:流动相液位迅速下降,导致无法正常进样。
解决方法:检查废液瓶是否已满,如已满,倾倒废液;检查管路是否有堵塞或弯折,如有,更换管路或调整管路布局。
三、峰面积重复性差1. 故障现象:同一色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查进样针的清洗是否彻底,如不彻底,加强清洗;检查样品前处理的稳定性是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:不同色谱条件下,每次运行同一色谱图时,峰面积重复性差。
解决方法:检查流动相的组成是否恒定,如不恒定,重新配制流动相;检查色谱柱的稳定性是否可靠,如不可靠,更换色谱柱;检查检测器的波长是否准确,如不准确,重新调整波长。
四、峰丢失1. 故障现象:在色谱图中看不到预期的峰。
解决方法:检查进样针是否堵塞或断裂,如堵塞或断裂,更换进样针;检查进样阀的切换次数是否过多,如过多,减少切换次数;检查样品前处理是否可靠,如不可靠,重新进行样品前处理。
2. 故障现象:在流动相中添加了某种物质后,出现了预期之外的峰。
解决方法:检查流动相中添加的物质是否稳定,如不稳定,重新配制流动相;检查检测器的灵敏度是否足够高,如不够高,调整灵敏度;检查色谱柱的类型是否正确,如不正确,更换色谱柱。
高效液相色谱常见故障及解决方案1.压力过高或过低-压力过高可能是由于柱堵塞或流动阻力增加所致。
解决方案包括更换柱、清洗柱或检查管路是否存在问题。
-压力过低可能是由于泵的磁力搅拌器不工作或进样器封堵所致。
解决方案包括检查泵的磁力搅拌器是否工作正常,清洗进样器。
2.峰形不对称-峰形不对称可能是由于进样量不均匀或柱温度过高所致。
解决方案包括确保进样量均匀和降低柱温度。
3.峰尾或前肩-峰尾可能是由于柱温度过高、流速过快或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括降低柱温度、减慢流速或调整pH值。
-前肩可能是由于流动相中存在杂质或柱堵塞所致。
解决方案包括更换流动相或清洗柱。
4.杂峰或基线噪声-杂峰可能是由于样品纯度不高、固定相老化或试剂污染所致。
解决方案包括提高样品纯度、更换固定相或检查试剂是否污染。
-基线噪声可能是由于进样器密封不良、流动相气泡或电噪声所致。
解决方案包括检查进样器密封情况、减少流动相中的气泡或检查电子设备是否存在干扰。
5.柱寿命短-柱寿命短可能是由于样品预处理不彻底、柱收尾不当或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括增加样品预处理步骤、正确收尾柱或选择合适的流动相pH值。
6.流量不稳定-流量不稳定可能是由于柱堵塞、进样器密封不良或流动相流速波动所致。
解决方案包括清洗柱、检查进样器密封情况或调整流动相流速稳定性。
7.进样量偏差-进样量偏差可能是由于进样器封堵、进样器针头磨损或进样器流速不稳定所致。
解决方案包括清洗进样器、更换进样器针头或调整进样器流速稳定性。
8.柱温度不稳定-柱温度不稳定可能是由于温控系统故障或环境温度变化所致。
解决方案包括检查温控系统是否工作正常或采取措施保持恒定环境温度。
这些是HPLC常见故障及其解决方案的例子。
在实际操作中,操作人员应该根据具体情况诊断和解决故障,并遵循相关的操作规程和安全操作指南。
液相色谱分析常见故障及解决方法液相色谱维修保养液相色谱作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确方式操作的话,就容易导致一些棘手的小问题。
其中常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。
液相色谱仪主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。
对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。
常见问题及解决方法一、柱压问题柱压问题是使用液相色谱过程中需要密切注意的地方,柱压的稳定与色谱图峰形的好坏、柱效、分离效果及保留时间等密切相关。
所谓柱压稳定并不是指压力值稳定于一个恒定值而是指压力波动范围在345kPa 以内或在50PSI之间(在使用梯度洗脱时,柱压平稳缓慢的变化是允许的)。
压力过高、过低都属于柱压问题。
1压力过高这是液相在使用中常见的问题,指的是压力突然升高,1、一般都是由于流路中有堵塞的原因。
此时,我们应该分段进行检查。
(1).首先断开真空泵的入口处,此时PEEK管里充满液体,使PEEK管低于溶剂瓶,看液体是否自由滴下,如果液体不滴或缓慢滴下,则是溶剂过滤头堵塞。
处理方法:用30%的硝酸浸泡半个小时,在用超纯水冲洗干净。
如果液体自由滴下,溶剂过滤头正常,在检查;(2).打开Purge阀,使流动相不经过柱子,如果压力没有明显下降,则是过滤白头堵塞。
处理方法:将过滤白头取出,用10%的异丙醇超声半个小时。
如果压力降至100PSI以下,过滤白头正常,在检查;(3).把色谱柱出口端取下,如果压力不下降,则是柱子堵塞。
处理方法:如果是缓冲盐堵塞,则用95%的水冲至压力正常。
如果是一些强保留的物质导致堵塞,则要用比现在流动相更强的流动相冲至压力正常。
假如按上面的方法长时间冲洗压力都不下降,则可考虑将柱子的进出口反过来接在仪器上,用流动相冲洗柱子。
这时,如果柱压仍不下降,只有换柱子入口筛板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以尽量少用。
问题无法解决可考虑更换色谱柱。
液相色谱仪常见故障分析及解决要点液相色谱仪作为一种常用的分析仪器,经常会遇到一些故障。
以下是液相色谱仪常见故障的分析及解决要点:1.噪声增加:可能原因:进样器泄漏、柱床固定不良、柱床老化、流体系统不稳定等。
解决方法:检查进样器和柱床的连接,更换柱床,检查流体系统并重新校准。
2.峰形畸变:可能原因:柱床老化、进样器问题、流体系统堵塞等。
解决方法:更换柱床、清洗进样器、检查流体系统并进行维护。
3.基线漂移:可能原因:溶剂质量不纯、流体系统不稳定、进样器问题等。
解决方法:更换纯净溶剂、检查流体系统并重新校准、清洗进样器。
4.压力异常:可能原因:流体系统堵塞、泵的柱床老化、柱床压力限制等。
解决方法:清洗流体系统、更换柱床、检查柱床的压力限制。
5.进样器问题:可能原因:进样器泄漏、进样器柱床老化、进样器阀门不灵活等。
解决方法:检查进样器的连接,更换进样器柱床,润滑进样器阀门。
6.柱温控制问题:可能原因:柱温控制器故障、柱床老化、温度传感器问题等。
解决方法:更换柱温控制器、更换柱床、校准温度传感器。
7.柱床老化:可能原因:使用时间过长、样品残留、溶剂残留等。
解决方法:更换柱床、进行柱床维护、清洗柱床。
8.溶剂选择错误:可能原因:溶剂质量不纯、溶剂选择不适合分析物等。
解决方法:更换纯净溶剂、重新选择合适的溶剂。
9.柱床堵塞:可能原因:样品残留、溶剂残留、柱床老化等。
解决方法:清洗柱床、更换柱床、进行柱床维护。
10.柱床压力限制:可能原因:柱床老化、流量设置不合理等。
解决方法:更换柱床、重新设置流量。
在解决液相色谱仪常见故障时,需要注意以下要点:确定故障现象,并记录下来,有助于分析和解决问题。
了解仪器的正常工作原理,对比故障现象,定位故障的可能原因。
逐一排除故障可能原因,一步一步进行检查和测试,从最简单的可能原因开始排除。
如果无法解决故障,及时向仪器供应商或相关专家咨询,并提供详细的故障描述和测试结果。
定期进行仪器的维护和保养,包括清洗柱床、更换柱床、校准流量和温度等。
高效液相色谱仪故障排除指南高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)作为一种常用的分析仪器,可以广泛应用于药物分析、环境检测、食品科学等领域。
然而,在使用过程中,不可避免地会出现一些故障情况。
本文将介绍一些常见的HPLC故障,并提供相应的排除方法。
一、进样器故障1. 进样器漏液若观察到进样口出现漏液现象,首先可以检查密封件是否完好,如若密封件损坏应及时更换。
若密封件完好,还可以检查进样器盖上是否存在污垢,若有,则可清洗并重新安装。
2. 进样器堵塞如果在进样过程中发现进样器堵塞,可以先使用无机溶液进行冲洗,以清除可能存在的样品残留物。
如果仍然无法解决堵塞问题,可以采取拆卸进样器进行彻底清洗的方法。
二、柱温箱故障1. 温度控制不稳定若柱温箱的温度控制不稳定,可能会导致分离信号的漂移,影响分析结果的准确性。
这时,可以首先检查温度控制仪是否设置正确,如有必要,可以重新设置。
另外,也可以检查柱温箱是否存在漏气现象,若存在,应及时修复。
2. 柱温箱泄漏柱温箱泄漏可能会导致温度失控,因而影响分析结果。
检测到泄漏时,应首先检查柱温箱的密封性能,如有必要,可以更换密封圈,确保密封良好。
三、流动相泵故障1. 流量不稳定如果在使用流动相泵时,发现流量不稳定,可能是由于空气进入了系统,导致气泡形成。
这时,可以检查胶管连接是否松动,以及胶管中是否有积气现象。
如果检查后仍然无法解决问题,可以考虑更换胶管或检修流动相泵。
2. 压力异常如果HPLC系统在运行过程中压力异常,可能是由于流动相泵的压力传感器出现问题。
此时,应检查压力传感器是否损坏,如有必要,可以进行维修或更换。
四、检测器故障1. 检测器信号异常如果在分析过程中,检测器的信号异常,可能是由于光源出现故障导致。
这时,可以检查光源是否正常工作,如有必要,可以更换光源。
另外,也可以尝试调整检测器的增益或灵敏度,以改善信号异常问题。
史上最全液相常见问题及解决方法压力异常操作压力的变化往往是故障的征兆。
从下表中找出所观察到的现象,并在右侧的列表中参考相应的解决方法。
A、没有压力显示,没有流动相流动原因解决方法1、电源问题 1、接通电源,开机2、保险丝被烧坏 2、更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败3、a、采取恰当的设定b、修理或更换控制器4、柱塞杆折断 4、更换柱塞杆5、泵头内有空气 5、溶剂脱气、启动泵抽出空气6、流动相不足 6、a、补充流动相 b、更换入口滤头7、单向阀损坏 7、更换单向阀8、漏液 8、拧紧或更换手紧接头B、流动相流动正常,但没有压力显示原因解决方法1、仪表损坏 1、更换仪表2、压力传感器损坏 2、更换压力传感器C、压力持续偏高原因解决方法1、流速设定过高 1、调整流速设定2、柱前筛板堵塞 2、a、在允许情况下反冲色谱柱 b、更换筛板 c、更换色谱柱3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀3、a、使用恰当的流动相 b、冲洗色谱柱4、色谱柱选择不当 4、选择恰当的色谱柱5、进样阀损坏 5、清洗或更换进样阀6、柱温过低 6、提高温度7、控制器失常 7、修理或更换控制器8、保护柱阻塞 8、清洗或更换保护柱9、在线过滤器阻塞 9、清洗或更换在线过滤器D、压力持续偏低原因解决方法1、流速设定过低 1、调整流速2、系统漏液 2、确定漏液位置并维修3、色谱柱选择不当 3、选择恰当的色谱柱4、柱温过高 4、降低温度5、控制器失常 5、维修或更换控制器E、压力不断上升原因解决方法1、见列表C 1、见列表CF、压力降为零原因解决方法1、见列表A、B 1、见列表A、BG、压力不断下降,但不回零原因解决方法1、见列表D 1、见列表DH、压力波动原因解决方法1、泵中有气体 1、a、溶剂脱气 b、从泵中除去气体2、单向阀损坏 2、更换单向阀3、泵密封损坏 3、更换泵密封4、脱气不充分4、a、溶剂脱气b、改变脱气方法(使用在线脱气法等)5、系统漏液 5、确定漏液位置并维修6、使用梯度洗脱 6、由于流动相粘度的变化引起的压力波动漏液通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。
液相色谱仪5种常见故障及处理方法液相色谱仪是一种常见的分析仪器,在实验室中广泛运用。
但在实验中容易出现各种故障,严重影响实验结果的稳定性和准确性。
本文将介绍液相色谱仪的常见故障及其相应的处理方法,帮助实验人员提高实验效率和结果准确性。
故障1:峰缺失在进行液相色谱分析时,有时会发现某些峰的积分值明显偏低,或者甚至完全缺失。
这可能是由于以下几个原因导致的:可能原因:•柱子老化:液相色谱柱子长时间使用后,固定相可能流失或减少,导致结果出现峰缺失现象。
•进样量过大:进样量过大会使筛选柱中固定相与溶剂质量比例失衡,固定相与溶剂的分配不均匀,导致出现峰缺失现象。
•混杂:在样品制备时,不同的物质可能相互混合,导致某些组分不能被分离出来。
•溶剂挥发:极性溶剂如甲醇、乙醇等挥发性高,可能存在液相进样器进入柱子后被挥发掉的情况,影响分离。
处理方法:•柱子检测和维护:长时间使用后,液相色谱柱子的使用寿命会有所下降,建议定期检测和维护柱子。
•调节进样量:对进样量大小进行合理的调整,保证样品与固定相之间的比例均匀。
•加强样品制备:对样品进行充分的制备和清洁,避免溶剂挥发和不同组分混杂而导致结果不准确。
故障2:峰畸变峰畸变是指在分离的过程中,某些峰出现形状异常的变化。
峰畸变可能由以下原因导致:可能原因:•溶剂流速过快:溶剂流速过快,使柱子温度在某些区域过高或过低,导致峰的畸变。
•浓度不均:样品中各种组分的浓度不同,会使分离出的峰形状偏移或发生变化。
•柱子填充不均:柱子填充不均匀,导致分离出的峰形状不正常。
•流量不均:液相色谱仪内流体发生过快或过慢,可能会导致峰的畸变。
处理方法:•调节流速:合理地调整溶剂流速,使柱子内的流体分布均匀,以避免在特定点出现温度异常。
•调整样品浓度:避免样品中某种组分过多或过少,导致分离出的峰的畸变。
•检查柱子的填充和维护:检查液相色谱柱子的填充情况和保养,确保柱子填充均匀、表面光滑,避免填充物团聚、不均匀等情况。
高效液相色谱常见故障的判定及解决方法(一)保留时间变化1.柱温变化柱恒温,必要时需配置恒温箱2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够用>25mmol/L的缓冲液4.柱污染每天冲洗柱5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命采用保护柱(二)保留时间缩短1.流速增加检查泵,重新设定流速2.样品超载降低样品量3.键合相流失流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5.温度增加柱恒温(三)保留时间延长1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱3.键合相流失同前(二)34.流动相组成变化同前(二)45.温度降低同前(二)5(四) 出现肩峰或分叉1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏更换进样器转子(五)鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水(六) 基线噪声1.气泡(尖锐峰) 流动相脱气,加柱后背压2.污染(随机噪声) 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂3.检测器灯连续噪声更换氘灯4.电干扰(偶然噪声) 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)5.检测器中有气泡流动相脱气,加柱后背压(七)峰拖尾1.柱超载降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相2.峰干扰清洁样品,调整流动相3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品4.同前(四)4 同前(四)45.同前(四)3 同前(四)36.死体积或柱外体积过大连接点降至最低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管7.柱效下降用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱(八)峰展宽1.进样体积过大同(四)12.在进样阀中造成峰扩展进样前后排出气泡以降低扩散3.数据系统采样速率太慢设定速率应是每峰大于10点4.检测器时间常数过大设定时间常数为感兴趣第一峰半宽的10%5.流动相粘度过高增加柱温,采用低粘度流动相6.检测池体积过大用小体积池,卸下热交换器7.保留时间过长等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱8.柱外体积过大将连接管径和连接管长度降至最小9.样品过载进小浓度小体积样品现象主要原因措施A 输液不稳定泵的脉流大1。
液相色谱高效液相色谱使用维护注意事项及常见问题排除现 象判 断排除方法柱压高于正常值 (1) 柱端过滤器堵塞(2) 长期使用柱端固定相板结,塌陷(3) 分析生化、染料等易污染固定相的样品导致柱污染(1) 拆下过滤器用稀硝酸超声清洗(2) 挖掉板结部分修补柱端或更换色谱柱(3) 采用保护柱柱压低于正常值 某连接处泄漏 高压查找泄漏处,连接处更换密封刃环塔板数下降 (1) 色谱柱老化(2) 柱被污染(1) 柱再生或换柱(2) 依色谱柱说明书清洗进样后不出峰(1) 检测器选择不当,样品无吸收(2) 试样溶液浓度太低,而检测灵敏度不高(3) 检测器到色谱工作站之间的信号线连接处不好或断开(4) 进样用注射器堵塞或泄漏使样品溶液不能进入进样阀(1) 正确选择检测器,如样品无吸收就不应选择UV检测器,而应选其他检测器(2) 适当提高样品浓度和进样量,提高检测灵敏度(3) 修复接好信号线并将灵敏度调到适当的位置(4) 修理或更换注射器或进样阀进样不出峰或者峰高不正常(1) 注射器泄漏(2) 阀转子上针头密封垫磨损导致泄漏(3) 选用的注射器针头与进样阀不匹配(4) 定子与转子接触密封面损坏引起内通道断路(5) 定量管堵塞(1) 更换新注射器(2) 更换新的零件(3) 更换合适的针管(4) 损坏不严重的转子重新研磨,使之恢复性能,否则更换新的转子(5) 设法疏通,或更换定量环出现未知杂峰(1) 进样阀或进样针污染(2) 流动相中有气泡流入检测器(1) 清洗进样阀的样品通路和进样针(2) 排出气泡,方法参照仪器说明书峰形拖尾(1) 定量管与进样阀连接处出现死体积(2) 进样器内有污染或不干净(3) 色谱柱选择不当,试样与固定相间有作用(4) 进样技术有误(5) 样品在流动相中溶解度小(6) 进样量太大(7) 色谱柱与阀、检测器连接处出现死体积(1) 更换新管消除死体积(2) 可先用2:l:4的硫酸-硝酸-水的混合溶液清洗接着用蒸馏水洗净然后用丙酮或乙醚等溶剂清洗烘干(3) 更换色谱拄(4) 提高进样技术(5) 选用对试样溶解能力强的溶剂作为流动相(6) 减少进样量(7) 重新装柱或更换连接管路分离度变差(1) 柱端固定相板结(2) 柱端床层塌陷(3) 柱子寿命已到(4) 进样量过大(5) 样品浓度过大(6) 试样溶解不完全(7) 色谱柱污染柱效下降(1) 挖掉修补,重填固定相(2) 修补柱床(3) 更换新柱(4) 减少进样量(5) 减小配样浓度(6) 换溶剂使其完全溶解(7) 更换柱子或用极性溶剂冲洗保留时间不重复(1) 更换流动相对旧流动相末完全被替换(2) 正相柱中流动相脱水不完全(3) 柱温变化(4) 缓冲液容量不够(5) 柱内条件变化(6) 柱塌陷或形成短路通道(1) 延长平衡时间(2) 重新脱水(3) 用柱温箱恒温(4) 用较浓的缓冲液(5) 稳定进样条件,调节流动相(6) 更换色谱柱出现无规律色谱峰 长期进样滞留在柱中的组分被洗脱出来 用强极性溶剂冲洗再用流动相平衡平顶峰(1) 色谱柱超载(2) 检测池及其透镜、池窗等光学附件污染(1) 减少进样量(2) 清洗检测池以及透镜、池窗等光学附件峰分裂(一个组分有两个峰)(1) 样品中可能有异构体(2) 样品不稳定有部分分解(3) 进样量大,柱超载(1) 按异构体特征选择条件,使两组分完全分离(2) 采取措施,防止试样组分的分解(3) 减小进样量色谱峰摆动 检测池内有气泡 排除检测池内的气泡基线有尖峰不规则地漂移(1) 色谱柱污染变脏(2) 检测池内有气泡通过(3) 实验室内其他大功率电器的影响。
故障现象一:泵不能正常运行故障描述:开泵后,仪器报错,显示主位置错误,泵不能正常运行。
故障原因及解决方法:以LC-20AT为例,泵报错HOME POS,代表传感器无法检测到电动机的原始位置,电动机不能运行,或是空转。
原因可能是泵体缺机油,椭轮、连接轮磨损,导致电机不能带动椭轮;皮带松动,使电机不能正常传动到椭轮;位置传感器脏,不能正确感应电机初始位置。
解决方法:将仪器断电,打开仪器上盖板与泵体盖板,可以看到泵体内部构造。
观察泵体内部有无锈渍,用手前后转动皮带观察椭轮与连接轮之间运动是否流畅,及时清理泵体内部的锈渍及杂质,并在椭轮和连接轮上加机油,直到海绵上的机油饱和(固定螺丝的槽内也应适当加一点机油);用手前后转动皮带感觉皮带松紧及皮带有无变形,如有问题应调整或更换皮带,使皮带与齿轮之间的摩擦力变大;检查位置传感器上是否有浮灰并及时清理。
故障即可排除。
故障现象二:漏液报警故障描述:打开仪器后,仪器显示漏液报警。
故障原因及解决方法:首先检查仪器各连接管路是否有漏液,如有漏液可通过拧紧或更换各连接部件解决。
若没有检查到有漏液现象,可通过面板VP按键进入到校正支持组CALIBRATION,检查漏液阀值是否设置过低。
LEAK THR显示当前设置值(当实际检测值超过此值时报警),ActLv显示当前实际值(指当前在传感器周围的溶剂蒸气浓度),重新调整设置值,故障即可排除(适用于泵、检测器等带有漏液传感器的各个仪器组成单元)。
故障现象三:器基线漂移故障描述:仪器运行后,检测器基线长时间漂移,不能平衡,有时候噪音很大。
故障原因及解决方法:首先,检查泵压是否稳定。
若泵压不稳,单向阀内可能有异物或气泡;预柱、色谱柱、手动进样器、在线过滤片或者管路堵塞。
解决方法:将单向阀拆下用超声波清洗,根据样品分析时使用的不同流动相(如有机溶剂、无机溶剂、含盐溶剂),可以判断选择清洗液。
清洗完单向阀并重新装上后,为防止在单向阀内产生气泡,可以先用甲醇做流动相赶一下气泡,再根据分析时使用的不同流动相选择不同的置换液(注意:在置换甲醇时不要把气泡带入管路中);更换色谱柱或者用阻尼管代替色谱柱,看压力有无变化,判断色谱柱是否堵塞。
液相色谱仪常见故障的处理方法液相色谱仪是一种常用的分析仪器,广泛应用于制药、化工、环境等领域。
然而,液相色谱仪在运行中难免会遇到故障,这些故障如果不及时处理,将会影响分析结果的准确性和可靠性。
下面就介绍一些液相色谱仪常见故障的处理方法。
一、泵系统故障1.1 压力稳定性差当液相色谱仪中的某一个压力降较大时,其稳定性会变差。
此时可以尝试根据实际情况适当调整流速或空气泡数量,并检查泵的活塞是否顺畅,是否需要更换。
1.2 漏气在进行某些特殊的分析时,需要使用无气泡溶剂,如果出现漏气,可能会使得分离柱床压缩,导致分离效应减弱。
此时需要及时检查泵的密封性,并根据实际情况更换密封圈或换泵头。
二、检测器故障2.1 检测器响应不稳定液相色谱仪的检测器响应不稳定可能会影响分析结果的准确性和可靠性。
一些常见的影响因素包括:灯丝寿命、流量计的稳定性、载气的纯度等。
针对这些因素,可以通过更换灯丝、清洁流量计和更换或加入更纯的载气来解决。
2.2 信号噪声过大如果检测器的信号噪声过大,可能会干扰峰的分析,导致分析结果不准确。
这时可以尝试调整检测器的增益、检测器和信号放大器的设置,或者更换检测器的灯丝和各种电子元器件。
三、自动取样器故障3.1 管道堵塞当自动取样器采样管道出现堵塞时,会使得样品无法正常进入分析系统,从而导致分析结果的不准确。
此时可以尝试使用针筒或吸头进行清洗,注意不要损坏管道,或者更换采样针头。
3.2 移液量不准确液相色谱仪的自动取样器需要能够准确地移液,否则可能会影响分析结果的可重复性。
一些常见的影响因素包括:采样针头的污染、吸头容量的错误等。
这时可以尝试更换采样针头,或者重新校正吸头容量。
四、其他故障4.1 通道阻塞当液相色谱仪中的通道出现阻塞时,会使得分离效应不理想,从而影响分析结果。
此时可以尝试使用清洗溶液进行清洗,或者更换分析柱。
4.2 控制系统故障液相色谱仪的控制系统故障可能会影响仪器的正常运行。
对于这种情况,可以尝试重启控制系统,检查控制系统的电源和通信线路。
液相色谱最全故障总结高效液相色谱仪系统主要由贮液瓶、泵、进样器、柱子、柱温箱、检测器、数据处理系统组成。
对于整个系统而言,柱子、泵和检测器是核心部件同时也是易出问题的主要部位。
作为一种高精密仪器,如果在使用过程中不按照正确操作的话,就容易导致一些问题。
其中最常见的就是柱压问题、漂移问题、峰型异常问题。
今天泰坦化学就列出几个常见故障现象,并附最全可能性建议,让你把故障挨个排除,重拾信心!现象1:出现基线不平的现象,后经过冲洗正常,后又出现柱塞杆漏液,换了密封圈后正常,接着测样品时,泵发出很大的噪音,立即停止泵的运行,对泵进行了润滑后,噪音消失,进样后又发现出的峰峰高都特别低,又试了几次最后竟然什么峰也不出了,为什么?建议:1.检查液路是否正常,保证流量,密封性都对的2.不接柱子进纯品看看检测器有没有响应,如果没有就是检测器出问题了3.检查你的样品是不是正常的现象2:液相色谱六合进样器,最近堵住了,启动泵进样阀就开始漏液,有人说是进完样后没用甲醇去进样清洗堵掉了,我想知道每次走完样后是不是需要进几针甲醇去清洗,而漏液什么原因?建议:其实要知道六通阀有没有堵,你可以在停泵的状态下,用有机相来清洗,如果能够正常清洗的话,那应该没堵,如果溶剂打不进去,那应该是堵了,或者你可以看看漏液的地方是不是有螺丝松了。
现象3:使用液相色谱,将一个样品连进六针,峰面积差异很大,忽高忽低,这是为什么?建议:1.进样器有的时候会出现气泡,如果此时连续进一个样品就会出现峰面积忽高忽低,多做几次purge injector就OK了。
2.用标准品试一下看是不是样品的问题;然后再看看柱压柱温、流速、进样器、氘灯有没有问题。
3.查看定量环是否有气泡4.进样的六通阀、色谱柱接口、泵至色谱柱接口的管路中是否有泄漏现象其实,说到底一般是两种情况,要么是样品的原因,要么是仪器原因。
如果是样品,建议换一下其他物质试一下;如果是仪器原因,可能是进样器、定量环、比例阀等问题。
制备液相色谱故障排查及解决方案液相色谱是现代化学分析中常用的一种分离和检测技术,它已广泛应用于医药、化工、环保、农业等领域。
然而,液相色谱设备在使用过程中,难免会出现一些故障,如何高效地排查和解决这些故障,提高设备的稳定性和可靠性,对于保障实验数据的准确性和可信度十分重要。
本文将从液相色谱设备常见故障出发,介绍液相色谱故障排查和解决方案。
液相色谱设备常见故障1.系统堵塞–堵塞柱头和柱端的可能原因:样品中含有颗粒物,或者样品溶液中的盐类、酸碱度或有机溶剂含量不合适。
–堵塞管径较小的零件的可能原因:管径较小的零件包括:进样器、针头和检测器中的光纤等。
这类故障可能是气泡、颗粒物、化学物质沉积、时间久了,或者泵缓冲液清洗不干净等原因造成的。
2.噪声干扰–检测器Baseline噪声的可能原因:电子噪声是最常见的噪声类型,多半是由于部件松动、机械强度不足、设备磨损或者温度变化导致Detector信号中某些内在值的抖动。
此类问题可以通过更好的隔离、抗振动装置、定期更替设备等方式来规避或解决。
3.色谱分离不良–固定相与手册不符或损坏的可能原因:固定相问题很多时候不符合使用说明或遇到特殊样品的时候被破坏。
如果固定相是污染或破坏了,色谱分离就会受到影响。
解决方案1.系统堵塞解决方案–加载前过滤样品–更换柱头或柱端–清洗柱头或柱端–在进样器中压入干净的纯水或缓冲液,换下柱头并紧固,并注射清洁的纯水或缓冲液,直至检测器所用的检测方法不再提示残留物。
–检查缓冲液的 pH 值是否合适,一般缓冲液的 pH 值在 3-10 之间,如果缓冲液的 pH 值偏于酸或碱,则容易造成系统堵塞。
2.噪声干扰解决方案–更换检测器或升级检测器–覆盖并密封色谱柱–清洗固定相材料、缓冲溶液、样品或移除异物–检查和确认在使用过程中是否有质谱仪产生的相互干扰,例如电子痕迹–检查环境温度变化,避免恒温装置的故障3.色谱分离不良解决方案–更换固定相柱–更改移动相流速–更改 pH 值–增加样品载体浓度结论液相色谱是一种精密的仪器设备,故障排查和解决方案需要经验和技能的支持。
液相色谱仪的维护与维修一、常见故障与排除方法1、泵①单向阀现象:柱压波动范围很大。
原因:单元向阀污染或阀内进入气泡引起。
污染使得球与阀座密封不严,液流倒流,压力不稳,或球与阀座粘在一起阻死。
气泡进入阀中会紧贴在阀体的一侧,使球难以返回到阀座,引起倒流,使压力和流速变化范围大,有时甚至为零。
措施:对于污染用不同极性的一系列溶剂冲洗有可能解决问题,如用25mL水、甲醇、异丙醇、二氯甲烷依次冲洗。
或拆下进出单向阀放在10%的硝酸液内超声清洗30~60min,若仍不解决问题则要更换单元向阀。
对于阀内进入气泡不必弄清气泡存在何处,只要打开泄液阀大流速冲洗就可解决问题,在冲洗泵时可用扳手迅速打开泵头上的输出管路,以促进气泡排出。
②塞杆密封垫现象:在高压下压力不稳定,从泵头渗漏流动相液体,反映在分析结果上是样品保留时间的改变。
原因:垫圈与运动着的柱塞杆紧紧接触,是液相色谱系统中最易磨损的部件。
缓冲液或其它含盐的流动相更加速垫圈的磨损。
垫圈磨损是不可避免的。
措施:一旦垫圈损坏只有进行更换。
更换时注意要将柱塞杆缩至最后,松开泵头的两根收紧螺钉,操作时处处以平衡的动作进行,切不可摇动或上下摆动泵头,否则柱塞杆极易折断。
③塞杆现象:无流动相流出,压力波动,更换新的垫圈后仍渗漏。
原因:一旦出现以上现象,只有更换柱塞杆。
更换进要用专用工具,由于此项操作比较复杂困难,故需请专业维修工程师来解决。
也可自行按说明书的指导仔细进行。
2、进样系统当测量样品的面积,峰高数据不重复时,则要考虑进样系统的问题。
①手动进样器首先检查手动进样器是否有渗漏,一般是由于污染使转子磨损或用尖头的针扎进手动进样器,划伤了转子。
因此在定期清洗进样器,使用缓冲液后,要用水进行充分的冲洗,以防沉积结晶盐,磨损转子。
如确定转子已磨损,则要更换转子。
若有进样器管路部分阻塞,可分段检查,将阻塞的管路拆下,反装在泵出口处进行反冲。
②自动进样品A、针密封垫损坏。
此时出现渗漏。
液相色谱仪常见故障及解决方法液相色谱解决方案1、气泡溢出流动相内有气泡,关闭泵,打开泄压阀,打开purg键,清洗脱气,气泡不断从过滤器冒出,进入液相色谱流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。
原因过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,过滤器内部由于霉菌的生长繁殖,形成菌团,堵塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。
处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;亦可将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再将过滤器用纯水清洗几次,打开泄压阀,打开purge键清洗脱气,如仍有气泡不断从过滤器冒出,连续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,如没有气泡不断从过滤器中冒出,说明过滤器内部的霉菌菌团已被硝酸破坏,流动相可以流畅地通过过滤器。
打开泄压阀,打开泵,流速调至 1.0~3.0ml/min,纯水冲洗过滤器1小时左右。
即可将过滤器清洗干净。
关闭泄压阀,纯甲醇冲洗半小时即可。
液相色谱仪2、峰面积重复性不佳(1)进样阀漏液。
(2)加样针不到位。
(3)液量不足。
处理对于*种情况更换进样阀垫圈;对于第二种情况保证加样针插到底,注射样品溶液后须快速、平稳地从LOAD 状态转换到INJECT状态,以保证进样量的精准。
日常工作中,液相色谱仪的保养特别紧要,如要注意不要让空气进入输液系统和高压泵中,储液器内的溶液如长时间未用应清洗储液器并更换溶液,每次用完色谱仪后缓冲液要用纯水冲洗干净,防止无机盐析出或沉积;样品的前处理也很紧要,任何样品都要尽可能地去除杂质,完全溶解,尽量削减对色谱柱的污染,以延长色谱柱的使用寿命,同时避开注射过浓的样品溶液,以免残留液在进样阀内析出固体引起堵塞;色谱柱作好标记,用于不同分析目的的色谱柱不要混用等。
3、柱压高原因(1)缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内。
(2)样品污染沉积。
处理对于*种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压渐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
液相色谱仪几种常见故障解决方案液相色谱仪是一种用于分离和分析混合物的仪器。
它主要由溶液供给系统、色谱柱系统、检测器、数据处理和控制系统组成。
液相色谱仪在实验室中得到广泛应用,但是在使用过程中也难免会出现一些故障。
本文将介绍液相色谱仪的几种常见故障及其解决方案。
色谱柱跑峰色谱柱跑峰是液相色谱仪中最常见的问题之一。
出现这种故障可能是因为色谱柱缺少填料、填料老化、填料堆积不均匀等原因引起的。
针对色谱柱跑峰的解决方案如下:1.更换填料:如果填料过老或者填料堆积不均匀,可以通过更换新的填料来解决这个问题。
2.调节流速:调节流速以达到更合适的分离效果。
3.检查前处理:在进行分离前,检查前处理的步骤是否严谨。
否则的话,可能会影响分离结果。
色谱柱背压过高色谱柱背压过高往往意味着某些问题需要解决,例如填料堵塞、流动阻力增大等等。
针对此故障,有以下解决方案:1.清洗色谱柱:定期清洗色谱柱以防止填料过于堵塞。
2.检查前处理步骤:与跑峰一样,良好的前处理也有助于防止后续某个阶段的系统堵塞。
3.调节流速:降低流速可以减轻柱的背压。
检测器信号异常如果检测器的信号异常,则可能是检测器本身的问题或者某些环境因素所致。
解决此故障的方案如下:1.清洗检测器:定期清洗检测器以确保它保持良好的工作状态。
2.更换检测器:如果清洗或者调节无法恢复检测器的信号,则可能需要更换检测器。
3.检查柱系统:异常信号也可能与色谱柱系统相关,检查柱并修复可能的问题。
4.调整移液管:检查移液管的状态,更换或调整它们以改善液相分析。
溶剂混合错误液相色谱仪是根据不同的化学性质来分离混合物,而这也意味着液相色谱仪需要运行具有不同性质的溶剂。
因此,溶剂混合错误可能对分析结果产生负面影响。
解决此故障的方案如下:1.检查溶剂混合比例:确保比例的准确性,这样可以获得更好的分离效果。
2.检查溶剂质量:再次检查您使用的溶剂质量以确保准确性。
3.检查柱温:高温或低温可能会影响柱内混合液相除密度以外的其他因素。
液相色谱故障处理背景介绍液相色谱(Liquid Chromatography,简称LC)是化学分析中常用的一种分析技术,它以液体为移动相,在色谱柱中进行化合物的分离。
液相色谱是一种高效、灵敏和精确的分离和定量分析技术,广泛应用于药物、化学、生物、环境等领域的分析试验中。
然而,在实验操作过程中,难免会出现仪器故障,下面将介绍常见液相色谱故障及其处理措施。
常见故障及处理措施流量异常1.缓冲液流量异常原因:缓冲液中的盐分浓度过高,柱子内部出现盐颗粒等堵塞物抑制缓冲液流动,或者柱子内部压力过大等等。
解决方法:检查缓冲液中盐分浓度是否合适,清洁柱子。
2.流量计问题原因:流量计故障或者气泡引起的不稳定。
解决方法:检查流量计并更换或调整。
3.泵压异常原因:泵装置故障或挡板不启动。
解决方法:检查泵装置、更换出现问题的部件。
峰形异常1.前驱峰过宽原因:注入体积过大、流速过快、柱子内部存在异物等等。
解决方法:检查注射器、调整流速、清洗柱子。
2.分离不良原因:柱子老化、柱内填充物流速不匹配等等。
解决方法:检查柱子是否到期、更换柱子。
3.后峰异常原因:柱内填充物表面污秽和老化,柱子内部流速不匹配。
解决方法:更换柱子内部填充物。
噪声问题1.底噪过高原因:仪器的部分环境噪声,如压力传感器、泵装置等等。
解决方法:检查周围环境是否干净,其他仪器是否产生干扰。
2.漂移噪声原因:流动相组成不稳定,温度变化大等等。
解决方法:检查液相分离液压力、温度等。
结论液相色谱检测是化学分析中常用的测试技术,流量、峰形和噪声都是故障发生的常见原因,只有全面分析各种原因,并找到相应的解决方法,才能顺利进行实验,保证实验准确性和可靠性。
液相色谱故障排除大全注意:在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。
**如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
色谱柱的维护1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围3.避免流动相组成及极性的剧烈变化4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中6.压力升高是需要更换预柱的信号HPLC六通阀进样器的使用及保养六通阀进样器是高效液相色谱系统中最理想的进样器,它是由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。
美国Rheodyne公司的六通阀进样器最为通用,各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。
工作原理:1、手柄位进样(Load)位臵时,样品经微量进样针从进样孔注射进定量环,定量环充满后,多余样品从放空孔排出;2、将手柄转动至进样(Inject)位臵时,阀与液相流路接通,由泵输送的流动相冲洗定量环,推动样品进入液相分析柱进行分析。
虽然六通阀进样器具有结构简单、使用方便、寿命长、日常无需维修等特点,但正确的使用和维护将能增加使用寿命,保护周边设备,同时增加分析准确度。
如使用得当的话,六通阀进样器一般可连续进样3万次而无需维修。
以下浅谈有关六通阀进样器的使用及保养事宜(仅供参考):1、手柄处于Load和Inject之间时,由于暂时堵住了流路,流路中压力骤增,再转到进样位,过高的压力在柱头上引起损坏,所以应尽快转动阀,不能停留在中途。
在HPLC系统中使用的注射器针头有别于气相色谱,是平头注射器。
一方面,针头外侧紧贴进样器密封管内侧,密封性能好,不漏液,不引入空气;另一方面,也防止了针头刺坏密封组件及定子。
2、六通阀进样器的进样方式有部分装液法和完全装液法两种。
使用部分装液法进样时,进样量最多为定量环体积的75%,如20gL 的定量环最多进样15p,L的样品,并且要求每次进样体积准确、相同;使用完全装液法进样时,进样量最少为定量环体积的3至5倍,即20gL的定量环最少进样60至1001aL的样品,这样才能完全臵换样品定量环内残留的溶液,达到所要求的精密度及重现性。
推荐采用100ul的平头进样针配合20ul满环进样。
3、可根据进样体积的需要自已制作定量环,一般不要求精确计算定量环的体积,譬如,一根名义上10gL的定量环,实际是9gL还是1lgL并不重要,因为被测样品和校正样品的进样体积保持一致,在计算结果时误差都被抵消了。
4、进样样品要求无微粒和能阻死针头及进样阀的物质,样品溶液均要用0.45~tm的滤膜过滤。
防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。
为防止缓冲盐和其它残留物质留在进样系统中,每次结束后应冲洗进样器,通常用不含盐的稀释剂、水或不含盐的流动相冲洗,在进样阀的Load和Inject位臵反复冲洗,再用无纤维纸擦净注射器针头的外侧。
液相色谱仪色谱柱使用及维护每天用足够的时间来平衡色谱柱,您就会在处理问题方面获得最大的"补偿",而且您的色谱柱的寿命也会变得更长!------ 一定得做!新的色谱柱在使用之前应该在您自己的液相色谱仪上进行性能测试,即使用色谱柱附带的检验报告上测试条件和样品来测定该色谱柱的柱效。
并且,在以后的使用中,应时常对色谱柱进行测试。
卡套柱的安装(不加预柱) 1.将卡套架套入柱芯2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高于夹套(见左图)3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片4.将卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手拧紧5.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端6.连接到液相色谱仪,PEEK接头手拧即可;若为不锈钢接头应使用专用扳手注意:使用卡套柱时,两端的卡套应时刻连接在柱芯上。
不管您是平衡色谱柱或是清洗,任何时候都不能将卡套取下来,否则会造成填料的流失。
卡套柱的安装(加预柱)1.将卡套架套入柱芯2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使夹套高于柱芯(见左图) 3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片4.将"子弹头"预柱放入卡套片内5.将卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手拧紧6.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端7.连接到液相色谱仪,PEEK接头手拧即可;若为不锈钢接头应使用专用扳手更换色谱柱滤网和玻璃棉过滤片(同时可以修补色谱柱)注意:在取出反相柱芯的滤网和玻璃片之前,应该将色谱柱充分用水和甲醇/乙腈冲洗,而且修补工具的头部也应该蘸取少量的甲醇/乙腈,以避免在取出滤网和玻璃棉滤片时带出柱子内的填料。
1.将修补工具中的2套入柱芯的顶端2.将修补工具中的3轻轻地旋入已套着2的柱芯中,并顺时针方向旋转到旋紧3.一手握柱芯,另一只手轻轻地向外拉3,取出柱芯顶端的滤网4.用一个小铲子轻轻地取出滤网下面的玻璃棉以及被污染的填料5.将新的填料用甲醇润湿,然后填入挖去的部位,压平6.照(左图)装上新的玻璃棉滤网,并用修补工具中的4将玻璃棉压入柱芯顶端7.柱芯顶端套上2,然后参照(左图)将滤网放入8.压紧,然后取下2,再用4将滤网的边缘压平平衡色谱柱反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。
请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。
由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。
硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。
如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡如何平衡色谱柱?平衡过程中,将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)色谱柱的再生进行色谱柱再生时,应使用一个谦价的泵,我们建议最好不使用您的高效液相色谱仪上的泵。
表1 建议用来冲洗的溶剂体积色谱柱尺寸柱体积所用溶剂的体积 125-4 1.6ml 30ml250-4 3.2ml 60ml250-10 -20ml 400ml请根据下表选择您的再生方法:极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生:正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱注意:在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。
**如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。
色谱柱的维护1.使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度)2.大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围3.避免流动相组成及极性的剧烈变化4.流动相使用前必须经脱气和过滤处理5.如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中6.压力升高是需要更换预柱的信号液相色谱仪(hplc)的保养1.HPLC的日常操作条件:温度:10—30℃;相对湿度<80%;最好是恒温、恒湿,远离高电干扰、高振动设备。
2.泵的保养:1)使用流动相尽量要清洁;2)进液处的沙芯过滤头要经常清洗;3)流动相交换时要防止沉淀;4)避免泵内堵塞或有气泡;3.进样器的保养:1)每次分析结束后,要反复冲洗进样口,防止样品的交叉污染; 4.柱的保养:1)柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动;2)当柱子和色谱仪联结时,阀件或管路一定要清洗干净;3)要注意流动相的脱气;4)避免使用高粘度的溶剂作为流动相;5)进样样品要提纯;6)严格控制进样量;7)每天分析工作结束后,要清洗进样阀中残留的样品;8)每天分析测定结束后,都要用适当的溶剂来清洗柱;9)若分析柱长期不使用,应用适当有机溶剂保存并封闭;5.检测器(UV)的保养:1)紫外灯的保养:在分析前、柱平衡得差不多时,打开检测器;在分析完成后,马上关闭检测器。
2)样品池要保养。
高效液相色谱仪的几个使用问题1. 色谱柱中的流动相会排干吗?不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。
如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。
即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排入色谱柱。
因为泵只能输送液体,而不能输送空气。
相比之下,另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。
同样,整个色谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂是色谱柱变干需要相当长的时间。
即使色谱柱真的变干了,也不一定就不可救药了。
可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。
较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。
色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润,恢复到正常状态。
2. 使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接头需要注意什么问题?如果经常需要改变流路或更换不同品牌的色谱柱,使用PEEK材料制成的管路和接头会非常方便。
PEEK管路容易连接;PEEK接头不仅无需工具,手拧即可固定,而且容易调节锥箍之外的管路长度,方便与不同品牌或规格的色谱柱相连接。
使用此类材料的管路需要注意的是:PEEK对卤代烷烃和四氢呋喃的兼容性不好。
虽然未观察到上述溶剂溶解PEEK材料的明显迹象,但PEEK遇到上述溶剂会变脆。
另一个西药考虑的因素是压力限。
不锈钢管可耐受6000psi的压力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多数HPLC应用系统压力不会超过3000psi)。
使用PEEK接头时则无需担心接头耐溶剂性能,因为接头几乎或很少与溶剂直接接触。
但手拧固定的PEEK接头压力限低于不锈钢管,因而压力太高时,可能会使接头在管路上滑动而产生死体积或漏液。
3. 如何预防液相泵的故障:要保持泵的良好操作性能,必须维护系统的清洁,保证溶剂和试剂的质量,对流动相进行过滤和脱气.下面列出预防泵故障的几项措施:1).用高质量试剂和HPLC级溶剂;2)、过滤流动相和溶剂;3)、脱气;4)、每天开始使用时放空排气,工作结束后从泵中洗去缓冲液; 5)、不让水或腐蚀性溶剂滞留泵中;6)、定期更换垫圈;7)、需要时加润滑油;8)、查阅有关泵操作手册中的其它建议。