e分析方法比对及甲基汞标准样品的研制

========================讨论与研究作者简介：封跃鹏，男，1964年出生，高级工程师，长期从事进口大中型分析仪器分析测试和标准样品的研究工作。

甲基汞分析方法比对及甲基汞标准样品的研制封跃鹏（国家环境保护总局标准样品研究所，北京，100029）摘要对甲基汞的4种分析方法（气相色谱法，液相色谱法，冷原子吸收光谱，毛细管电泳法），进行了比对讨论，应用表明，气相色谱法效果较好。

研制了甲基汞标准样品，测试结果表明，样品性能能满足实际应用的需要。

关键词烷基汞甲基汞标准样品1前言汞是一种常用的液态金属，在温度计、荧光灯、电池等许多物品中都要使用，汞又是一种有毒物质。

汞有三种形态，即金属汞、无机汞化合物和有机汞化合物，其中毒性最大的是有机汞，而在有机汞中甲基汞对人体健康危害最大。

沉积于河底的汞离子，经过厌氧细菌的作用，在甲基维生素B12存在下可形成甲基汞。

甲基汞能积聚在水生生物体内，通过食物链进一步富集浓缩，达到极高浓度。

例如日本水俣湾鱼体中的甲基汞浓度达1～20mg /kg 。

另外据美国《科学新闻》周刊报道，垃圾填埋场中的汞在细菌作用下发生化学改性也能生成甲基汞，并有可能排入大气。

已经有人在空气和雨水中监测到了甲基汞，从而表明垃圾填埋场可能是空气和雨水中汞的重要来源。

2分析方法比对测定甲基汞的方法很多，应用范围各异。

为了选择准确可靠、简单高效的分析方法，有必要对测定甲基汞的一些方法进行分析比对。

2.1气相色谱法气相色谱法适用于地面水、生活饮用水、生活污水、工业废水、沉积物、鱼体及人发和人尿中甲基汞含量的测定［1］。

采用琉基纱布和琉基棉二次富集前处理，用气相色谱仪-电子捕获检测器（GC /ECD ）测定水、沉积物和尿中甲基汞，可检出浓度分别为0.01ng /L 、0.02µg /kg 和2ng /L ；采用盐酸溶液浸提前处理，测定鱼肉和人发组织中的甲基汞，可检出浓度分别为0.1µg /kg 和1µg /kg 。

气相色谱法也适用于地面水及污水中烷基汞的测定［2］。

用巯基棉富集水中的烷基汞，用盐酸氯化钠溶液解析，然后用甲苯萃取，GC /ECD 测定。

当取水样1L 时，甲基汞通常检测到10ng /L ，乙基汞检测到20ng /L 。

用气相色谱法还可以测定头发和尿液中的甲基汞［4］。

用盐酸浸出样品中的甲基汞，在pH =3条件下，经疏基棉富集，用2N 盐酸解析，以苯萃取，GC /ECD 测定苯萃取液中的甲基汞。

2.2液相色谱法液相色谱法最大的优点是能够分离环境样品中各种有机汞化合物。

样品中的有机汞及无机汞与二乙基二硫代氨基甲酸盐反应形成络合物，经氯仿萃取后用反相高效液相色谱进行分离测定。

该方法可分离样品中的甲基汞、乙基汞、苯基汞和无机汞，对甲基汞的检测限为0.25ng 。

2.3冷原子吸收光谱法冷原子吸收光谱法，适用于常人和接触汞（汞蒸气、无机汞和有机汞）的工作人员尿中甲基汞、无机汞和总汞的测定［3］。

尿中总汞（有机汞和无机汞）在24分析仪器2003年第2期镉离子存在下，在强碱性（pH=14）条件下，用高浓度氯化亚锡还原成元素汞，汞蒸气由空气送入测汞仪的检测管，测量吸光度。

在不加镉离子和氯化亚锡浓度较低的条件下，只有无机汞被还原成元素汞，而有机汞不被还原，从而测出无机汞的含量。

总汞减去无机汞即为有机汞含量。

方法的最低检测浓度为：有机汞0.2µg/L、无机汞0.3µg/L，总汞0.5µg/L。

2.4毛细管电泳法毛细管电泳法也可用于甲基汞的分析［5］。

为了得到较低的检测限，可采用样品堆积极注射技术，即利用毛细管中样品注射区和支持缓冲区之间的电位差，使样品离子通过边界时运动速度降低，从而提高样品区的浓度。

该法的检测限为12ng/g。

2.5结论通过以上的介绍可以看出。

在甲基汞的分析方法中，气相色谱法效果较好。

当前使用较多的方法是巯基棉两次富集，色谱柱分离，电子捕获检测器测定。

该法富集倍数大，分离效果好，操作简单快速，重现性好，准确度、灵敏度较高，适用于大批量样品的分析，是一种较成熟的甲基汞测定方法。

3标准样品研制为了配合甲基汞分析方法的使用，根据国家环保总局国家标准样品制备计划，研制了甲基汞标准样品。

经过相关文献的查询，未见到关于该标准样品的相关报道。

3.1制备方法综合考虑仪器的检测限和灵敏度，确定甲基汞标准样品的浓度水平为2.0µg/mL。

当前国内较成熟的甲基汞分析方法［1-4］和国外文献介绍的方法［6、7］，普遍使用苯作为萃取剂，同时考虑到标准样品的实用性，所以确定以苯作为溶剂，配制甲基汞标准样品。

但市售分析纯苯中常含有少量水、噻吩、羟基化合物和不饱和化合物等杂质，这些杂质会影响烷基汞的存储稳定性并干扰测定结果，因此必须对市售分析纯苯进行提纯处理。

配制工作在清洁的超净间内进行。

在恒温条件下，准确称量纯度为98%的氯化甲基汞0.1188g，将提纯处理的苯完全溶解到1L容量瓶中，在恒温箱中平衡一定时间后定容。

配制好的标准样品经低温处理后，灌封于2mL棕色安瓿中避光保存。

3.2均匀性检验安瓿的灌装和封装过程时间较长，由于溶剂的挥发及其它一些不可预见因素的影响，可能会导致瓶内标准样品浓度在封装过程中发生变化。

因此，采用随机分期抽样检验法，在分装样品的前、中、后期，按GB/T15000-94《标准样品工作导则》中“液体化学成分标准样品技术通则”要求，抽取一定瓶数样品进行均匀性检验。

经方差检验［8］，F值符合要求，说明封装期间，样品浓度无明显差异，标准样品均匀性良好。

3.3稳定性检验本着前密后疏的原则，在2年的时间间隔内抽检标准样品进行稳定性检验。

甲基汞标准样品稳定性曲线见图1。

分析仪器测量。

然后用Grubbs 和Dixon 准则在95%置信限对均值进行检验，无界外值出现。

计算标准样品的平均值、标准偏差和不确定度［10］，并进行t 检验。

以标准样品的配制值为真值，对标准样品的测试结果进行t 检验。

以测试结果的平均值作为标准样品的标准值和99%置信限，计算标准样品的不确定度，计算结果为：2.00±0.06µg /mL 。

3.5结论研制成的甲基汞标准样品，稳定性和均匀性良好，能够满足各个行业对该样品的需求，并可应用于计量认证、仪器校准、分析测试、质量保证/质量控制等工作。

参考文献1国家环境保护总局.中华人民共和国国家标准GB /T17132—1997：环境甲基汞的测定—气相色谱法.北京：国家环境保护总局，1998:12中国标准出版社第二编辑室.水质分析方法国家标准汇编.北京：中国标准出版社，1996:5643国家卫生部.WS /T27—1996:尿中（甲基）汞、无机汞、总汞的还原—冷原子吸收光谱法.北京：国家卫生部，1996:14国家卫生部.中华人民共和国国家标准DC16—07:614.73GB6989—86：尿中甲基汞、无机汞、总汞的还原—冷原子吸收光谱法附录E.国家卫生部，1986:55Bloom C J.Fish Aquat Sci ，1989，46:1131-11406Kamps L R et al.J AOAC ，1972.55:5907Longbottom J E et al.J AOAC ，1972，56:12978封跃鹏等.中国环境监测，1998，（5）:189封跃鹏等.中国环境科学研究，1998，（6）:4010全浩主编.标准物质及其应用技术.北京：中国标准出版社，1990:97收稿日期：2002-07-08Comparision of methods for analysis of methyl mercury and the preparation of methyl mercury reference material.Feng Yuepeng （Instiute for Reference Materials of State Environmental Protection Administration ，Beijing ，100029）Four methods （gas chromatography ，liquid chromatography ，cold atomic absorption spectrometry and capillary elec-trophoresis ）for the analysis of methyl mercury are discussed.The applications show that gas chromatography is a better and mature method for methyl mercury analysis.The reference material of methyl mercury was prepared and its quality tested.The data show that it can meet requirements of various uses.作者简介：孔毅，男，河南夏邑县人，1968年4月出生，博士，主要从事生化药物研究与开发。

蛋白质分子量测定方法比较研究孔毅1吴梧桐2吴如金2（1.南京大学生命科学学院，南京，210093；2.中国药科大学，南京，210009）摘要采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，高效凝胶过滤色谱以及电喷雾离子化质谱三种方法对新发现的一种蛋白质的分子量进行了测定。

聚丙烯酰胺凝胶电泳非还原电泳测得的分子量为26.2kDa ，还原电泳测得的分子量为29kDa ，高效凝胶过滤色谱测得的分子量为24.5kDa ，电喷雾离子化质谱测得的分子量为30298Da 。

对以上三种方法的优缺点进行了分析比较。

关键词蛋白质分子量聚丙烯酰胺凝胶电泳高效凝胶过滤色谱电喷雾离子化质谱分子量是蛋白质的主要特征参数之一，当发现一种新的蛋白质时，首先应准确测定其分子量。

蛋白质分子量的测定方法有多种，如渗透压法、光散射法、超速离心法、凝胶色谱法及聚丙烯酰胺凝胶电泳44分析仪器2003年第2期。