17_烯丙氨基格尔德霉素对人乳腺癌细胞基质金属蛋白酶表达调控作用的研究

17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响刘涛【摘要】目的探讨17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG)对人鼻咽癌细胞(HNE1)的影响.方法采用流式细胞技术检测不同浓度(17-AAG)、不同时间处理后HNE1细胞凋亡情况,组织免疫细胞技术检测药物处理后对VEGF、Survivin蛋白表达的影响.结果 17-AAG可以诱导人鼻咽癌细胞的凋亡,且这种作用具有时间和计量依赖性,且可抑制细胞中VEGF、Survivin蛋白的表达.结论热休克蛋白抑制剂17-AAG 具有诱导鼻咽癌细胞凋亡的作用,对鼻咽癌的临床治疗具有一定的指导意义.【期刊名称】《延安大学学报（医学科学版）》【年(卷),期】2011(009)001【总页数】3页(P1-2,18)【关键词】17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-AAG);鼻咽癌细胞;VEGF;Survivin【作者】刘涛【作者单位】延安大学附属医院耳鼻咽喉科,陕西,延安,716000【正文语种】中文【中图分类】R739.6热休克蛋白（Heat shock protein，HSP）是在热诱导下合成的具有高度保守性质的一组蛋白质，其中HSP90β是热休克蛋白家族中的重要成员，具有重要的生理功能［1］。

研究表明HSP90β作为抗原肽的载体参与了MHCI类抗原的递呈，在肿瘤免疫中具有重要作用［2］，且与肿瘤的分化程度有关，已成为抗肿瘤治疗研究的靶点。

我们前期的研究发现鼻咽癌组织中HSP90β阳性率高于鼻咽部正常组织，而且其表达强度与肿瘤分化程度相关，分化程度越低，HSP90β表达越强；HSP90β阴性表达者其5年生存率明显高于阳性者。

目前对于热休克蛋白抑制剂在抗肿瘤研究方面已有不少的报道［3－4］，17－丙烯胺基－17－去甲氧基格尔德霉素（17－allylamino－17－demethoxygeldanamyein，17－AAG）是目前进入临床前研究的热休克蛋白抑制剂，具有较好的应用前景，本研究探讨其对人鼻咽癌细胞株影响，以探讨17－AAG在鼻咽癌治疗中的应用。

17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡及血管内皮生长因子表达的影响马贵;祝宇;吴瑜璇;沈周俊;盛佳燕;徐云泽【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2011(031)012【摘要】Objective To investigate the effects of 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin (17-AAG), heat shock protein 90 ( HSP90) inhibitor, on the growth and expression of vascular endothelial growth factor ( VECF) in pheochromocytoma cell line PC 12 in rats. Methods PC 12 cells in experiment group were divided into experiment group 1 and experiment group 2. PC12 cells in experiment 1 were treated with different concentrations (0.005 u,mol/L, 0.025 μmol/L, 0.05 μnol/L, 0.1 μmol/L, 0.25 μmol/L, 0.5 μmol/L, 1.0 μmol/L and 2.0 μmol/L) of 17-AAG culture fluid respectively, and those in experiment group 2 were treated with 150 μg/L VEGF culture fluid ( VEG F group), 0. 1 μmol/L 17-AAG culture fluid (17-AAG group) and 0. I μmol/LH-AAG + 150 μg/L VEGF culture fluid (17-AAG + VEGF group) respectively. Besides, DMSO group (negative control group) and blank control group were also established. Cell survival rate was measured by MTT assay, cell morphology was observed by Wrighls-Giemsa staining, cell apoptosis was detected by flow cytometry, and expression of VEGF-165 protein in cells was determined by Western blotting. Results 17-AAG significantly inhibited the growth of PC 12 cells intime- and dose-dependent manners ( P < 0. 05), with 50% inhibitory concentration (IC50) of 0. 1 μmol/L. The apoptosis rates of PCI 2 cells after treatment with 0. 1 μmol/L 17-AAG for 6 h, 12 h, 24 h and 48 h were significantly higher than that in blank control group (P < 0. 01). The expression of VEGF-165 protein gradually decreased with treatment ofPC12 cells with 0. 1 μmol/L 17-AAG for 6 h, 12 h, 24 h and 48 h, and the expression of VEGF-165 protein at each time point was significantly different from that in negative control group (P<0. 05). Conclusion 17-AAG, HSP90 inhibitor, can inhibit the proliferation of PC12 cells, induce cell apoptosis and .inhibit the expression of VEGF protein.%目的探讨热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-丙烯胺-17去甲氧格尔德霉素(17-AAG)对大鼠嗜铬细胞瘤细胞系PC12细胞生长及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法将实验组PC12细胞分成两组:实验一组分别加入不同终浓度(0.005、0.025、0.05、0.1、0.25、0.5、1.0、2.0 μmol/L)17-AAG培养液；实验二组分别加入150 μg/L VEGF(VEGF组)、0.1μmol/L17-AAG(17-AAG组)、0.1μmol/L17-AAG+ 150μg/L VEGF(17-AAG+ VEGF组)培养液.另设DMSO组(阴性对照组)和空白对照组.采用MTT法检测细胞存活率；Wrights-Giemsa染色观察细胞形态变化；流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blotting检测细胞中VEGF-165蛋白的表达.结果17-AAG呈时间、剂量依赖性抑制PC12细胞增殖(P＜0.05)；24h半致抑制浓度(IC50)为0.1μmol/L.0.1μmol/L 17-AAG作用于PC12细胞6、12、24、48 h的细胞凋亡率均明显高于空白对照组(P＜0.01).0.1 μmol/L 17-AAG作用于PC12细胞6、12、24、48 h,VEGF-165蛋白表达逐渐降低；各时点VEGF-165蛋白表达量与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 HSP90抑制剂17-AAG 能抑制PC12细胞增殖,诱导细胞凋亡,抑制VEGF蛋白表达.【总页数】5页(P1687-1691)【作者】马贵;祝宇;吴瑜璇;沈周俊;盛佳燕;徐云泽【作者单位】上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025;上海交通大学医学院附属瑞金医院泌尿外科,上海200025【正文语种】中文【中图分类】R736.6【相关文献】1.17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响 [J], 陈美霓;郭巍;赵菊梅;魏晓丽2.17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素对人胃癌裸鼠移植瘤血管内皮生长因子表达的抑制作用 [J], 肖隆斌;吴文辉;刘其龙3.17-丙烯胺-17-去甲氧格尔德霉素对大鼠嗜铬细胞瘤裸鼠移植瘤的抑制作用 [J], 朱奇;祝宇;徐云泽;陈东宁;徐烈雨;张翀宇;赵菊平;吴瑜璇;沈周俊4.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素对鼻咽癌细胞VEGF和Survivin表达的影响 [J], 刘涛5.17-丙烯胺基-17-去甲氧基格尔德霉素诱导鼻咽癌细胞凋亡的实验研究 [J], 赵菊梅;刘涛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

格尔德霉素抗病毒作用的相关基因研究李怡璇;刘民;李欣;汤华【期刊名称】《病毒学报》【年(卷),期】2008(24)3【摘要】格尔德霉素(Geldanamycin,GA)作为一种苯醌安莎霉素类抗生素,能与热休克蛋白90特异性结合,具有广谱的抗病毒作用。

为了从转录水平上研究GA抗病毒的分子机制,本研究以单纯疱疹病毒I型(Herpes simplex virus type1,HSV-1)为对象,在确定药物有效抗病毒作用的基础上,采用基因芯片技术分析了在HeLa细胞中病毒感染和药物处理对细胞表达谱的影响,并筛选出GA抗病毒作用的可能相关基因。

同时用半定量RT-PCR方法对GA诱导上调、HSV-1诱导下调的基因(ACTG1、RAN、SOD1)以及GA诱导下调、HSV-1诱导上调的基因(HYAL1)进行了验证。

研究GA抗病毒作用对细胞表达谱的影响,有利于深入理解药物的抗病毒机制。

【总页数】5页(P208-212)【关键词】格尔德霉素;单纯疱疹病毒Ⅰ型;基因芯片;HeLa细胞【作者】李怡璇;刘民;李欣;汤华【作者单位】天津医科大学基础医学院【正文语种】中文【中图分类】R978.7【相关文献】1.4,5-双氢-7-去氨甲酰基-7-羟基-19-S-甲基格尔德霉素及其与格尔德霉素生物合成PKS后修饰的关系 [J], 牛沂菲;李书芬;王以光;武临专;赫卫清;李京艳;刘昕;倪四阳;林灵;王红远;孙桂芝2.格尔德霉素对胶质瘤细胞增殖及相关基因表达的影响 [J], 王春辉;李蕴潜;罗毅男;韩雪梅;熊文激;徐松柏;于音3.格尔德霉素对脑缺血／再灌注神经损伤保护作用的机制研究 [J], 温相如;陈玲;江志国;徐洲;宋远见;刘红芝;张荣丽4.17-丙烯氨基-17-去甲氧基格尔德霉素治疗肿瘤增敏作用及其纳米颗粒的研究进展 [J], 王叶;薛莲;于冬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

目前研究表明，基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）及性激素受体与乳腺癌发病及转移关系密切，乳腺癌患者MMPs表达普遍升高[1-2]。

此外，乳腺癌具有激素依赖性，性激素与乳腺癌发病的关系目前已较为公认，但其与乳腺癌转移的关系尚不清楚。

MMPs共有23种，目前已证实MMP-2与乳腺癌发病具有密切关系[2]。

近年来研究表明，MMP-1、3、7、11在乳腺癌干细胞中表达明显增高[3]。

本研究通过检测上述4种MMPs及性激素受体在乳腺癌组织与癌旁组织的表达，比较4种MMPs及性激素受体在无淋巴结转移与有淋巴结转移乳腺组织的表达差异，探讨4种MMPs及性激素受体与乳腺癌诊断及淋巴结转移的相关性。

1资料与方法1.1研究对象随机收集和选取本院乳腺外科2010年1月至2012年6月乳腺癌手术石蜡标本以及相关临床病理资料共50例，病理类型以乳腺浸润性导管癌为主，并且根据有无淋巴结转移情况分为有转移和无转移两组。

患者均为女性，年龄35～71岁，中位年龄48.9岁。

术前未进行放、化疗。

复查所有病例全部切片。

另取50例乳腺癌周围正常乳腺组织作为对照。

1.2研究试剂兔抗人多克隆抗体MMP-1、3、7、11，雌激素受体（estrogenreceptor，ER）、孕激素受体（progesterone receptor，PR）、雄激素受体（anti-androgen receptor，AR）抗体，SABC两步法免疫组化试剂盒（武汉博士德生物科技有限公司）等。

1.3免疫组化染色采用免疫组化法对全部病例及周围正常乳腺组织进行免疫组化染色，实验严格按照试剂说明书操作。

将4mm 厚的切片常规脱蜡至水，加入3%过氧化氢，进行热修复后，滴加山羊血清进行封闭10min，分别滴加一抗，如MMP-1、3、7、11，ER、PR、AR抗体（一抗稀释度均为1∶100），4℃过夜。

阴性对照加磷酸盐缓冲液（PBS）。

格尔德霉素对胶质瘤细胞MT1-MMP及u-PA基因表达的影响王春辉;李蕴潜;韩雪梅【摘要】目的研究格尔德霉素(GDM)作用下,膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)和尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)基因在胶质瘤细胞中的表达水平.方法培养胶质瘤细胞株U251-MG和U87-MG,反转录PCR方法检测MT1-MMP和u-PA mRNA表达.结果与正常对照组(NC)相比,HGF组u-PA mRNA表达显著增加(P＜0.05)；GDM组MT1-MMP和u-PA mRNA表达水平较对照组和HGF组均显著降低(P＜0.05)；HGF+GDM组u-PA mRNA表达水平较对照组和HGF组显著降低(P＜0.05).结论 GDM能够抑制胶质瘤细胞中MT1-MMP和u-PAmRNA的表达.【期刊名称】《中国实验诊断学》【年(卷),期】2013(017)010【总页数】3页(P1747-1749)【关键词】胶质瘤;格尔德霉素;肝细胞生长因子;膜型基质金属蛋白酶-1;尿激酶型纤溶酶原激活物【作者】王春辉;李蕴潜;韩雪梅【作者单位】吉林省人民医院神经外科,吉林长春130021;吉林大学第一医院神经外科;吉林大学中日联谊医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R739.41胶质瘤侵袭性生长的发生机制一直是研究的热点，然而，迄今尚未取得突破性进展。

肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）是一种多功能的细胞因子，主要通过 HGF／c－Met通路促进肿瘤细胞的增殖、凋亡和侵袭［1，2］。

格尔德霉素（geldanamycin，GDM）对HGF具有明显的抑制作用，能够阻断HGF／c－Met通路。

本研究拟探讨GDM作用下，HGF／c－Met通路下游基因胶质瘤细胞膜型基质金属蛋白酶－1（Membrane type 1 matrix metalloproteinase，MT1－MMP）和尿激酶型纤溶酶原激活物（Urokinase－type plasminogen activator，u－PA）表达情况，旨在为深入认识其侵袭性生长的分子机制奠定基础。