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・综述与讲座・3通讯作者,E 2mail:meiqiaomq@yahoo 肠黏膜屏障功能检测研究进展刘晓昌,梅 俏3,许建明(安徽医科大学第一附属医院,安徽合肥230022) [关键词] 肠黏膜;屏障;实验室技术和方法 [中图分类号] R446.9 [文献标识码] A [文章编号] 10022266X (2009)1620106202 肠黏膜屏障包括机械屏障、免疫屏障、生物屏障、化学屏障等多层含义。
在饥饿和营养不良、创伤、危重疾病、严重感染或炎症等情况下,肠黏膜的结构和功能可能受到损伤,导致肠黏膜屏障功能障碍、肠道细菌移位、内毒素入血,诱发或加重肠道局部或全身性炎症、免疫反应,严重者可导致多器官功能不全的发生。
在某些疾病尤其是多器官功能不全治疗的早期,采取措施保护肠黏膜屏障功能,有助于控制病情,提高疗效。
早期有效治疗的前提是对肠黏膜屏障有充分的认识,能早期对肠黏膜屏障功能进行检测并正确诊断。
因此本文主要从肠黏膜屏障的四个组成部分分别讨论肠黏膜屏障功能的检测。
1 机械屏障 机械屏障由肠道黏液层、肠黏膜上皮细胞、细胞间紧密连接等构成。
肠黏膜上皮细胞是肠屏障中最重要的部分,因此,目前主要针对肠黏膜上皮细胞进行一系列检测。
1.1 肠通透性检测 口服或静脉给予示踪物,然后根据示踪物通过肠黏膜上皮细胞的剂量大小反映肠黏膜的通透性。
用于检测肠黏膜通透性的示踪物主要有放射性同位素类、辣根过氧化物酶(HRP )和蛋白质类、聚乙二醇(PEGs )及糖类等四类。
放射性同位素类如51铬—乙二胺四乙酸(51Cr 2E D 2T A )、99m锝—二乙三胺五乙酸(99mTc 2DTP A )和125碘—白蛋白(125I 2albu m in ),可口服后用计数仪测量尿液中示踪剂的放射性活度。
但由于示踪剂具有放射性,不宜在同一患者身上重复使用,尤其是儿童;另外,其T 1/2短,标本不易保存,临床应用受到限制。
HRP 目前仅适用于体外肠道通透性的测定,不适合用于临床。
——一主苎垫薹胰高糖素样肽２对肠道缺血再灌注小鼠肠粘膜免疫的影响中文摘要研究目的：缺血再灌注损伤常常会损害肠屏障功能，产生免疫抑制和增加肠道细菌移位。
胰高糖素样肽２（ＧＬＰ一２）是新近发现的肠道特异性生长因子。
近年来的研究发现，使用ＧＬＰ一２治疗，可以增加啮齿类动物小肠粘膜的增生，并能防止和治疗休克、放疗、化疗、肠外营养等诱发的消化道损伤和免疫功能损害。
本研究通过建立小鼠肠道缺血再灌注模型，以探讨ＧＬＰ一２对维持正常的肠屏障功能、减轻免疫抑制和减少肠道细菌移位的影响。
材料和方法：实验１：将３０只雄性ＩＣＲ小鼠（３０～４０９）随机分成正常对照组（Ｎ组）、实验对照组（Ｃ组）和ＧＬＰ一２预处理组（Ｐ组）。
所有小鼠均予普食，Ｐ组小鼠给予１０“ｇ／ｍｌ的ＧＬＰ一２ＰＢＳ溶液，０．５ｍｌ，皮下注射，一日两次，连续５天。
Ｎ组、Ｃ组小鼠给予０．Ｏｌｍｍｏｌ／ＬＰＢＳ液，０．５ｍｌ，皮下注射，一目两次，连续５天。
Ｃ组和Ｐ组小鼠均在麻醉后剖腹，分离出肠系膜上动脉，以丝线结扎２０分钟后松开，形成肠道的缺血及再灌注状态。
２４小时后统计各组死亡率。
所有小鼠均在２４小时后处死，在无菌条件下，分别取肝、脾、肠系膜淋巴结和肺组织作细菌培养和菌种鉴定，鲎试验合成基质偶氮显色法检测血浆内毒素，二抗夹心ＥＬＩＳＡ法测量肺和全小肠灌洗液ｓｉｇｈ含量，分别切取近端、远端空肠和末段回肠作形态学和免疫组化检测肠粘膜淋巴细胞的分布和数量，ＥＬＩＳＡＫｉｔ试剂盒测量肠粘膜细胞因子ＩＬ一２、４、６、１０和ＩＦＮ—Ｙ的变化。
实验２：将７０只雄性ＩＣＲ小鼠（３０～４０９）随机分成正常对照组（Ｎ组）、实验对照组（ｃ组）和ＧＬＰ～２治疗组（Ｔ组）。
除Ｎ组外的小鼠均制成肠道缺血再灌注模型。
所有小鼠均予普食。
Ｎ组和Ｃ组给予皮下注射０．Ｏｌｍｍｏｌ／ＬＰＢＳ液，０．５ｍｌ，一日两次，直至处死。
Ｔ组给予皮下注射ｌＯｐｇ／ｍｌ的ＧＬＰ一２ＰｇＳ溶液，０．５ｍｌ，一日两次，直至处死。
肠道免疫屏障功能损伤的研究进展戈娜，袁慧（湖南农业大学动物医学院，湖南长沙４１０１２８）收稿日期：２００７－１１－０１肠道除了消化、吸收、分泌功能外，还具有重要的屏障功能［１］。
肠道的屏障功能是指肠道上皮能够分隔肠腔内的物质，防止致病性物质的侵入和阻止肠道内细菌及内毒素的移位。
肠屏障包含肠黏膜的机械屏障、生物屏障、化学屏障及免疫屏障等多层含义。
随着对肠黏膜屏障研究的深入，近年来，学者们发现肠道黏膜能够选择性地允许肠腔内容物中的食物、药物等进入，而阻止细菌及毒素的进入，这除了与肠黏膜机械屏障有关外还与肠相关淋巴样组织（Ｇｕｔ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｙｍｐｈｏｉｄｔｉｓｓｕｅ，ＧＡＬＴ），即所谓的肠道免疫屏障密切相关。
同时，肠道黏膜免疫也是机体防止感染的第一道防线。
因此，研究肠道免疫屏障的损伤有助于我们能够更好地预防由于肠道屏障功能障碍所造成的脏器感染，多器官功能障碍等疾病的发生。
目前，关于肠道免疫屏障的损伤作用已逐渐引起人们关注。
１肠道免疫屏障的组成肠道免疫屏障由肠上皮细胞（ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ，ｉＥＣ）、肠上皮内淋巴细胞（ｉｎ－ｔｅｓｔｉｎａｌｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ，ｉＩＥＬ）、固有层淋巴细胞（ｌａｍｉｎａｐｒｏｐｒｉａｌｌｙｍｐｈｏ－ｃｙｔｅ，ＬＰＬ）、派伊氏结（ｐｅｙｅｒ＇ｐａｔｃｈ，ＰＰ）和肠系膜淋巴结等肠道组织及肠道浆细胞分泌型免疫球蛋白Ａ（ｓＩｇＡ）构成［２］。
其主要功能是由相关淋巴样组织通过分泌ｓＩｇＡ发挥抗感染的体液免疫以及细胞毒性的细胞免疫。
在肠道免疫屏障中有一个特殊的ＧＡＬＴ，ＧＡＬＴ是由ＰＰ、肠系膜淋巴结（ＭＬＮ）以及分散在黏膜固有层（ＬＰ）和肠上皮中的大量淋巴细胞组成。
ＧＡＬＴ既能抵御致病因子入侵，又可耐受肠道非致病菌群。
其作用机制就是在抗原刺激下产生局部的免疫反应，中和抗原物质（主要是产生大量的ｓＩｇＡ）［３］。
ｓＩｇＡ是免疫球蛋白Ａ（ＩｇＡ）单体通过Ｊ链连结而成的二聚体，主要由肠黏膜固有层浆细胞产生。
肠黏膜屏障的构成与功能研究进展基金项目:河北省科学技术研究与发展计划项目(05276101D -21)杨书良a ,李兰梅a ,陈育民b(河北工程大学医学院a .病理教研室;b .微生物与免疫学教研室,河北邯郸056029)关键词:肠黏膜;上皮细胞;紧密连接部;黏液;免疫中图分类号:R333.3文献标识码:A 文章编号:1004-583X (2008)24-1809-03 长期以来,人们普遍对肠道在营养物质消化吸收方面的功能研究较多,而对肠黏膜屏障在抵御内外病原微生物侵入机体,引起疾病方面研究较少。
近几年来,随着对肠黏膜屏障保护作用研究的深入,人们对肠黏膜屏障的功能越来越重视。
目前,肠黏膜屏障的概念已不仅仅局限在简单的传统的机械屏障上,而是由肠黏膜上皮、黏液层、黏膜免疫系统、肠道正常微生物群、肠道内分泌及肠蠕动等环节组成的一种复杂的防御体系。
从而可有效地阻挡肠道内上百种寄生菌及其毒素向肠腔外组织、器官移位和外源性病原微生物侵入机体[1]。
现就近几年对肠黏膜屏障的组成和功能方面的研究进展综述如下。
1 黏膜上皮屏障肠黏膜上皮屏障是构成机体内外环境之间的一种起机械保护作用的组织学屏障。
正常成人胃肠黏膜的总面积约400m 2,大约是自身体表面积的200倍,在防止病原微生物从黏膜侵入方面有着非常重要的作用。
肠黏膜上皮屏障主要由两部分组成,即肠黏膜上皮细胞及其周围的紧密连接。
1.1 肠黏膜上皮细胞 小肠黏膜表面有许多细小的绒毛状突起称为肠绒毛,它是由上皮细胞和固有层(lamina propria ,LP )共同向肠腔突起而形成。
绒毛根部的上皮向固有层下陷形成管状小肠腺,又称为Liebe rkuhu 隐窝[2]。
小肠腺上皮与绒毛上皮构成完整的小肠黏膜上皮屏障。
小肠绒毛上皮主要由吸收细胞和少量的杯状细胞、内分泌细胞组成。
另外,还有少量的潘氏细胞和干细胞。
吸收细胞最多,呈高柱状,高约20μm ,肠腔面有许多微绒毛,主要功能是对营养物质进行吸收和起机械屏障作用。
肠道黏膜屏障机能及其调控研究进展翟双双【摘要】肠道不仅仅是机体消化、吸收营养物质的主要场所，也是机体的一道防御屏障。
肠道黏膜屏障包括黏膜生物屏障、机械屏障、化学屏障和免疫屏障，不论是哪一种肠道黏膜屏障受到损伤，都会导致机体不同程度的伤害，与一些疾病的发生密切相关。
本文就肠道黏膜屏障机能及其调控研究进展进行综述，为进一步认识肠道黏膜屏障及治疗由其损伤引起的疾病提供参考和帮助。
%The gut is not only the main place of digestion, absorption of nutrients, but a body defensive barrier. Intestinal mucosal barrier including mucosal biological barrier, mechanical bar-rier, chemical barrier and immune barrier. Regardless of what kind of intestinal mucosal barrier is damaged, it will cause the different degree of damage which closely associated with the occur-rence of some diseases. This paper reviews the progress research on intestinal mucosal barrier function and regulation, in order to further understanding of intestinal mucosal barrier and pro-vide reference and help to treatment the disease caused by the injury.【期刊名称】《现代畜牧兽医》【年(卷),期】2014(000)007【总页数】5页(P54-58)【关键词】肠道黏膜屏障;机械屏障;化学屏障;生物屏障;免疫屏障【作者】翟双双【作者单位】华南农业大学动物科学学院，广东广州 510642【正文语种】中文【中图分类】S852.21肠道是机体消化系统的主要组成部分，是消化、吸收营养物质的主要场所，是机体主要的免疫器官，同时还具有激素分泌、免疫调节和黏膜屏障等功能，肠黏膜屏障在维护肠道功能中发挥重要作用[1]。
・原 著・全肠外营养对肠道免疫功能影响的研究王 涛 黎沾良 陆连荣 王亚平 于 燕 于 勇 黎君有 常国有 提要 本研究采用SPF大鼠T PN支持模型,观察标准TPN和改良T PN〔T PN液中添加丙氨酰谷氨酰胺(Ala-Gln)、T PN辅以经口谷氨酰胺(Gln)或丙氨酰谷氨酰胺〕不同营养模式对肠免疫屏障功能的影响,探讨TPN导致肠粘膜免疫抑制的机理,进一步阐述T PN导致肠源性感染发生的综合机理。
结果显示,标准T PN由于缺乏肠粘膜必需氨基酸Gln和肠道刺激,引起肠粘膜免疫系统改变,肠腔细菌S-IgA包被率下降,导致肠粘膜免疫抑制和肠道微生态紊乱、机械屏障损伤协同,致细菌粘附率和易位率上升。
各改良组因添加肠道必需氨基酸Gln或前体物Ala-Gln,各参数接近对照组,肠屏障储备增加。
本研究结果提示:T PN严重损伤肠屏障功能,是肠源性感染的促发因素。
对标准T PN进行改良,添加肠粘膜保护剂,对肠屏障有较好维持作用,能降低肠源性感染发生率。
这对临床创伤和围手术期病人进行营养支持有一定参考意义。
关键词 SPF大鼠; 全肠外营养; 肠屏障功能; 肠源性感染; 丙氨酰谷氨酰胺 全肠外营养(T PN)是重要的营养途径。
但随着临床及基础研究的深入,发现接受标准TPN的严重创伤病人,感染和脓毒症发生率高,感染的发生可能与TPN造成的肠屏障功能损害有关。
包括:¹肠道原籍菌微生态紊乱;º粘膜结构和功能完整性丧失;»宿主免疫防御机能受损〔1～3〕。
但T PN支持高感染率的综合机理尚未完全阐明,改良T PN 对肠免疫屏障功能的保护作用少有报告。
本研究的目的是:¹利用SPF大鼠营养支持模型,观察TPN引起的肠屏障功能改变;º观察不同营养途径及改良TPN对肠屏障功能有何影响,探讨T PN引起肠源性感染的机理;»探索对临床T PN病人提供肠屏障功能维护的方法。
cinoma[J ].Carcinogenesis ,2002,23:4352445.[18]LOWES K N ,BRENNAN BA ,YEOH G C ,et a1.Oval cell num 2bers in human chronic liver diseases are directly related to dis 2ease severity[J ].Am J Pathol ,1999,154:5372541.[19]HIXSON DC ,BROWN J ,MCBRIDE AC ,et al.Differenti 2ation status of rat ductal cells and ethionine 2induced he 2patic carcinomas defined with surface 2reactive monoclonal antibodies[J ].Exp Mol Pathol ,2000,68:1522169.[20]周思朗,李鹏,曹漫明,等.大鼠肝癌干细胞生物学行为研究[J ].中华肝脏病杂志,2006,14:3642366.[21]GOODELL MA ,BROSE K ,PARADIS G ,et al.Isolationand f unctional properties of murine hematopoietic stem cells that are replicating in vivo [J ].J Exp Med ,1996,183:179721806.[22]AL ISON MR.Tissue 2based stem cells :ABC transporter pro 2teins take centre stage[J ].J Pathol ,2003,200:5472550.[23]HIRSCHMANN 2J AX C ,FOSTER A E ,WUL F GG ,et al.A distinct “side population ”of cells with high drug efflux capacity in human tumor cells [J ].Proc Natl Acad Sci USA ,2004,101:14228214233.[24]HIRSCHMANN 2J AX C ,FOSTER A E ,WUL F GG ,et al.A distinct “side population ”of cells in human tumor cells :implications for tumor biology and therapy [J ].Cell Cy 2cle ,2005,4:2032205.[25]G ABRI LOVE JL ,WE L TE K,LU L ,et al.C onstitutive produc 2tion of leukemia differentiation ,colony 2stimulating ,erythroid burst 2prom oting ,and pluripoietic factors by a human hepatoma cell line :characterization of the leukemia differentiation factor [J ].Blood ,1985,66:4072415.[26]WAN G SY ,CH EN L Y ,TSA I TF ,et al.Constitutive pro 2duction of colony 2stimulating factors by human hepatoma cell lines :possible correlation with cell differentiation[J ].Exp Hematol ,1996,24:4372444.[27]PA TRAWAL A L ,CAL HOUNT ,SCHN EIDER 2BROUSSARD R ,et al.Side population is enriched in tumorigenic ,stem 2like cancer cells ,whereas ABCG2+and ABCG22cancer cells are similarly tumorigenic[J ].Cancer Res ,2005,65:620726219.(收稿:2007211205)(校对:郭顺明)作者单位:650011昆明市云南省第三人民医院消化内科作者简介:郑盛男,25岁,住院医师肠黏膜屏障功能障碍研究进展郑 盛 综述 刘 海 审校【摘要】 肠道除具有消化吸收及蠕动功能外,还有激素分泌、免疫调节和黏膜屏障功能,肠黏膜屏障在维护肠功能中扮演着重要角色。
肠道黏膜屏障功能评估的研究进展高鹏1 张旭光2 刘雪来3（1.哈尔滨市儿童医院 普外一科，黑龙江 哈尔滨150010；2.哈尔滨市儿童医院 儿童保健科，黑龙江 哈尔滨 150010；3.首都儿科研究所附属儿童医院 外科，北京 100020）·综述· 肠道具有免疫功能，可将肠道内细菌、毒素阻隔在肠腔内，防止病原微生物及其毒素入侵人体。
肠道免疫功能主要靠肠道黏膜屏障实现，各种因素（如免疫、生物、理化）损伤肠道黏膜屏障功能，将出现肠道内菌群移位、内毒素吸收等一系列病理改变［1］。
采用合适的方法及时准确地评估肠道屏障功能受损程度，是有效阻止上述病理效应发生的重要手段［2］。
目前肠道黏膜屏障功能的评估方法有肠黏膜通透性测定、血浆内毒素测定、肠黏膜pH值测定、肠型脂肪酸结合蛋白(intestinal fatty acid binding protein, IFABP)含量测定、血浆谷氨酰胺含量测定、大便浆细胞分泌型蛋白（sIgA）含量测定、病理检测等［3］。
尿乳果糖和甘露醇比值（ratio of lactulose to mannitol, L/M），血、尿IFABP测定方法因其简单、快速、经济等特点，已被广泛应用。
本文简述肠道黏膜屏障功能，并对尿L/M，血、尿IFABP 用于评估肠黏膜屏障功能的研究进展进行综述。
1 肠道黏膜屏障及其功能评估方法 肠道屏障是指肠道防止肠腔内有害物质或病原微生物进入人体的结构和功能总和，包括肠道黏膜上皮、肠道菌群、黏液、分泌型免疫球蛋白、肠道相关淋巴组织等。
肠道黏膜屏障为肠道屏障的主体，由机械屏障、化学屏障、免疫屏障与生物屏障组成。
肠黏膜上皮细胞、细胞间紧密连接与菌膜三者构成肠道的机械屏障，能有效阻止细菌及内毒素等有害物质透过肠黏膜进入血液；肠黏膜上皮分泌的黏液、消化液及肠腔内正常寄生菌产生的抑菌物质构成肠道的化学屏障；肠黏膜淋巴组织（包括肠系膜淋巴结、Kupper细胞）和肠道内sIgA构成免疫屏障，通过产生特异性sIgA来防止致病性抗原对机体的损害，当外源性因素刺激肠道黏液分泌并加速黏液层的流动，可有效地阻止细菌对肠黏膜的粘附；肠道正常寄生菌群与宿主的微空间结构形成了一个相互依赖、相互作用的微生态系统，构成了肠道的生物屏障。
