光镊原理
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真空光镊技术真空光镊技术是一种利用激光束和真空环境将微米级或纳米级物体精确抓取和操控的先进技术。
它在微电子、生物医学、光学器件等领域具有广泛的应用前景。
本文将从真空光镊技术的原理、优势和应用等方面进行阐述。
我们需要了解真空光镊技术的原理。
真空光镊技术主要通过激光束对微米级或纳米级物体施加辐射压力,将物体固定在光束焦点处。
由于真空环境中没有气体阻力和热传导,可以实现对微小物体的非接触式抓取和操控。
激光光束的功率和焦点位置可以精确控制,从而实现对微小物体的精准操作。
真空光镊技术相比传统的光镊技术具有许多优势。
首先,真空环境中减少了气体分子与物体的碰撞,减小了气体阻力对物体的影响,使得抓取过程更加稳定和可靠。
其次,真空环境中没有气体的热传导,可以避免热对微小物体的损伤,保持物体的完整性。
此外,真空光镊技术操作灵活,可以实现对微小物体的三维精确操控,具有很大的应用潜力。
真空光镊技术在许多领域都有重要的应用价值。
在微电子领域,真空光镊技术可以用于芯片组装、微电子器件的操控和测试等工作。
在生物医学领域,真空光镊技术可以用于细胞操作、单细胞分离和研究等。
在光学器件领域,真空光镊技术可以用于光纤组装、光学器件的调试和测试等。
此外,真空光镊技术还可以应用于纳米加工、纳米材料的制备和研究等方面。
随着科技的不断进步,真空光镊技术也在不断发展和完善。
目前,研究人员正在探索将真空光镊技术与其他技术相结合,以进一步提高其抓取和操控的精确性和效率。
例如,结合扫描电子显微镜技术可以实现对微小物体的实时观察和控制。
此外,还有研究人员尝试将真空光镊技术应用于纳米机器人的制造和操作,以实现更复杂的微纳米尺度操控。
真空光镊技术作为一种先进的微纳米操控技术,在微电子、生物医学、光学器件等领域具有广泛的应用前景。
其原理简单、操作灵活,可以实现对微小物体的精确抓取和操控。
随着科技的不断进步,真空光镊技术还将不断完善和发展,为微纳米尺度操控领域带来更多的创新和突破。
光电镊的原理范文光电镊是一种基于光电效应的仪器,通过利用光子的能量来控制和操作微小物体。
它常常被用于微机电系统(MEMS)、纳米技术和生物医学领域。
本文将详细介绍光电镊的原理。
光电镊的原理基于光电效应,光电效应是指当光照射到材料表面时,光子的能量可以被材料中的电子吸收,从而使得电子获得足够的能量从材料中脱离。
这个现象由爱因斯坦在1905年首次提出,并且为他赢得了诺贝尔物理学奖。
光电镊通常由两个主要部分组成:光学系统和控制系统。
光学系统由一束激光器和一套光学器件组成,用来产生聚焦的光束。
控制系统通过控制激光器的功率、频率和聚焦光束的位置来实现对物体的操作。
这两个部分密切协作,使得光电镊能够实现高精度和高效率的操作。
具体来说,当激光器发出激光束后,它会经过一系列的光学器件,如透镜和光栅,来聚焦成一个非常小的点。
这个点的大小由入射光束的焦距以及透镜的孔径决定。
光束聚焦后,它的能量密度变高,这是因为原本较大的激光面积被聚焦到一个很小的点上。
这个过程类似于用放大镜来聚焦太阳光照射在一块纸上,可以导致纸燃烧的现象。
当物体放置到激光束的焦点位置时,光电效应发生。
光子的能量被吸收,使得物体表面的电子获得足够的能量从原子中脱离。
这些脱离的电子会产生电荷,导致物体表面带电。
通过控制光束的功率和位置,可以在纳米尺度上控制和操作物体。
控制系统通过调节激光器的功率、频率和聚焦光束的位置来实现对物体的操作。
激光器的功率可以调节激光束的能量密度,从而控制光电效应的强度。
激光器的频率可以调节光束的颜色,不同颜色的光束对物体的光电效应有不同的影响。
聚焦光束的位置可以通过调节透镜的位置实现,使得光束能够准确地照射到物体的表面。
光电镊具有很多优点:高分辨率、高精度、非接触性和对物体的无损操作。
与传统的机械夹具相比,光电镊可以实现对微小物体的高精度操作,不会对物体造成损坏。
此外,它还可以在真空环境下和生物体内进行操作。
光电镊已经在很多领域得到应用,如微电子装备、纳米加工和细胞操作。
0引言1669年,牛顿提出光的“微粒说”,他认为光是从光源发出的一种光微粒流,具有直线传播的特性,这是人类对光的粒子性的最早认知。
1905年,基于普朗克的量子假说,爱因斯坦在一种全新的物理意义上提出了光子学说以及光的波粒二象性,合理地解释了光与物质相互作用的一些现象。
20世纪60年代,激光的问世为人们研究光与物质的相互作用提供了一种崭新的光源,为光镊的诞生埋下伏笔。
1970年,A.Ashkin 利用两束相向传播的聚焦光束成功地束缚住了在水中的电介质微粒。
1986年,A.Ashkin 只利用了一束聚焦良好的激光就实现了对水中电介质微粒的稳定捕获,这标志这光镊的诞生。
光子具有一定的能量和动量,而光镊充分体现了光的这一特性。
光镊是用高度会聚的激光束形成的三维势阱来俘获,操纵和控制微小颗粒的一项技术。
从1986年到今天,光镊技术不断发展升级,不仅促进了多种学科的发展,而且在生物学,物理学等领域发挥着越来越多不可替代的作用。
本文将介绍光镊的基本原理,装置构造,以及分类;讨论光镊应用的优势与不足,并做出相应的前景展望与改进;回顾近些年来光镊在技术和应用层面的新发展;最后将分析光镊未来的发展趋势。
1光镊简介1.1基本原理光镊是由强会聚的激光束形成的光学势阱,研究微粒在光阱中受到的光阱力的理论模型有几何光学(RO )近似模型和电磁(EM )模型。
RO 模型理论适用于几何尺寸远大于波长的微粒,EM 模型适用与尺寸小于波长的微粒。
图1左:光镊原理示意图,右:小球在光镊中的受力示意图光是一种电磁波,其内部震荡的电场会使照射物内形成电流。
电流在光的磁场中形成安培力,称之为光压(或光的辐射力)。
如图1所示,光的辐射力根据其效果可以分为两种:一种是推动目标沿光的传播方向的散射力(Scattering Force ),另一种是往光强密度高拉动目标的梯度力(Gradient Force )。
如图1所示,用TEM 00的激光照射一个小球,距离光轴较近的入射光线A 通过小球时,发生反射,折射,得到出射光线A'。
光热驱动纳米光镊新原理与新技术研究在现代科学的世界里,光和热这两个元素常常被我们看作是自然界的基础力量。
你想过吗?它们也许就在你眼前,悄悄地改变着我们的世界。
比如说,你晒太阳的时候感觉到的温暖,其实就是热量在做文章。
而光的力量嘛,不用说,已经把我们的生活照得明亮光彩。
但如果把光和热结合起来,用它们来操控微小的物体,你能想象到这会多神奇吗?这就是光热驱动纳米光镊的核心思想,简直像是科幻电影里才会出现的技术,但它确实正在向我们走来,越来越接近现实了!你知道纳米是什么吧?就是比你想象中的还要小得多的东西。
它们比细胞还小,比细胞的结构还微细。
现在的科学家们就想把这些小小的东西抓住,搬到我们需要它们的地方。
怎么做呢?光和热!哇哦,是不是很酷?比如说,如果你能利用光的能量去产生热量,再加上热量对物质的吸引力,就能让这些纳米级的物体在空间里悬浮或者移动。
想想看,像是你拿着一个看不见的小铲子,在微小的世界里挪动一颗颗“沙子”,是不是超级神奇?光热驱动的纳米光镊技术就是这么一种新奇的东西,它让科学家们能“钓”住那些肉眼看不见的微小颗粒。
就像你在水里丢个小纸船,它看起来飘来飘去,可是用光和热,你可以让它像在水面上漂浮一样,轻松地操控这些小颗粒。
你会问,为什么非要用光和热呢?简单,因为光和热不需要实际的物理接触,它们就能直接作用于物体,而且还是“远程操控”哦!这样一来,操作起来不仅灵活,而且精度也超级高。
能做到这一点,简直像是科技界的一场革命。
说到这里,可能你已经觉得这技术挺酷了,但它的应用可不止停留在“玩具”层面。
其实它有很多实用的地方,尤其在医疗和材料科学中。
例如,利用光热驱动纳米光镊,科学家可以在细胞层面上进行操作,处理微小的物质,比如修复损伤的细胞,或者进行药物传输,这就好比是拿着一把微型的镊子,在最微小的空间里干活,精准到让你惊叹。
而且它的操作精度和效率,完全可以打破传统技术的瓶颈,让原本很难做到的事情变得简单。
光纤光镊技术摘要光纤光镊利用光纤端面产生的光场对微小粒子进行俘获,俘获效果与光场密切相关。
比较常见的光纤光镊主要包括具有多个光纤的光镊、具有单个光纤的光镊以及特殊结构的光纤光镊等。
本文综合介绍上述各种光纤光镊。
关键词:具有多个光纤的光镊,具有单个光纤的光镊,特殊的光纤光镊,光阱力1.引言光镊因与人们生活中使用的镊子或者钳子的功能类似,可对微小粒子进行捕获,因此得名,也常被称为光钳。
最早期的是传统显微物镜型光镊,具有高数值孔径NA,对扩束、准直后的激光束进行高强度聚焦,产生的光阱力对粒子捕获,Ashkin.A在1970年首先发现[1]。
由于传统型的光镊缺陷显著,如结构复杂、成本高、体积大等,而光纤光镊搭建便利、操纵灵巧,采用高强度的激光光源可获得更大的光梯度力或光阱力,因而受到国内国外的研究学者高度关注,并不断发展、探索和创新。
2. 多个光纤的光镊多个光纤的光镊最先使用两根带光纤尾纤的红外二极管激光器形成光镊。
Constable.A等人在1993 年用两根单模光纤对微小粒子(聚苯乙烯球、活性酵母)进行光俘获[2]。
由于干涉现象等产生使得俘获微粒的稳定点不只一个,很难进行高精度的俘获微操作。
Guck、Bellini、Kreysing 等人先后采用两根光纤形成的光镊实现对生物细胞的俘获、拉伸、旋转,实现光镊操纵的多元化[3-5]。
Masahiro Ikeda 等人在2004年利用三根光纤形成光阱对微粒进行操纵,三根光纤的断面为半球形,通过控制三根光纤的光出射功率来控制微小粒子的旋转运动 [6]。
Zhang采用四根单模光纤形成光镊, 四根单模光纤在相互垂直的两个方向上对称设置,调整光纤准直后可捕获微粒,如图2-1。
利用3dB 的分光元件平衡各个光纤的光功率,四个衰减器单独控制各路光纤的出射功率 [7]。
多根光纤形成的光镊相比于传统型的光镊减少了体积、成本、结构复杂度,还将观测光路和操作光路进行分开,通过改变光纤断面形状提升光阱力、操作精度、稳定性。
精品文档1.1光镊技术简介光镊是以激光的力学效应为基础的一种物理工具,是利用强会聚的光场与微粒相互作用时形成的光学势阱来俘获粒子的【4】。
1969年,A. Ashkin等首次实现了激光驱动微米粒子的实验。
此后他又发现微粒会在横向被吸入光束(微粒的折射率大于周围介质的折射率)。
在对这两种现象研究的基础上,Ashkin提出了利用光压操纵微粒的思想,并用两束相向照射的激光,首次实现了对水溶液中玻璃小球的捕获,建立了第一套利用光压操纵微粒的工具。
1986年,A. Ashkin等人又发现,单独一束强聚焦的激光束就足以形成三维稳定的光学势阱,可以吸引微粒并把它局限在焦点附近,于是第一台光镊装置就诞生了【5,6】。
也因此,光镊的正式名称为“单光束梯度力势阱”(single-beam optical gradient force trap)。
由于使用光镊来捕获操纵样品具有非接触性、无机械损伤等优点,这使得光镊在生物学领域表现出了突出的优势。
这些年来,随着研究的深入和技术的不断完善,光镊在生物学的应用对象由细胞和细胞器逐步扩展到了大分子和单分子等。
目前,光镊常被用来研究生物过程中的细胞和分子的运动过程【7-10】,也常被用来测量生物过程中的一些力学特征【11-14】。
1.2光镊的原理与特点众所周知,光具有能量和动量,但是在实际应用中人们经常利用了光的能量,却很少利用光的动量。
究其原因,这主要是因为在生活中我们接触到的自然光和照明光等的力学效应都很小,无法引起人们可以直接感受到或观察到的宏观效应。
而科学家们利用激光所具有的高亮度和优良的方向性,使得光的力学效应在显微镜下显现了出来,在这里我们要介绍的光镊技术正是以这种光的力学效应为基础发展起来的。
1.2.1光压与单光束梯度力光阱光与物质相互作用的过程中既有能量的传递,也有动量的传递,动量的传递常常表现为压力,简称光压。
1987年,麦克斯韦根据电磁波理论论证了光压的存在,并推导出了光压力的计算公式。
光镊技术概述姓名:刘志辉 学号:SC11009018 系所:009系光镊又称单光束粒子阱,是A.Ashkin [1]在1969年以来关于光与微粒子相互作用实验的基础上于1986年发明的。
单光束粒子阱实质上是光辐射压梯度力阱,是基于散射力和辐射压梯度力相互作用而形成的能够网罗住整个米氏和瑞利散射范围粒子的势阱。
一、光镊技术的基本原理光可以看作是光子流,每个光子都具有动量P [2]:λh C E P == E 是波长为的光子能量。
当光照射到物体时,光子的动量传递给物体并产生压强,称为光压。
光压对于宏观物体的影响可以忽略不计,但对于直径小于100um 的微小粒子,这种辐射压的作用是必须考虑的。
光镊对粒子的俘获作用机制与其尺寸有关。
根据粒子直径(D )和光波长(λ)的大小关系,光镊的作用机制被分为3类:几何光学机制(λ>>D 时)、雷利机制(λ<<D 时)和中间机制(介于前两者之间的情况)。
对于直径大于波长的米氏散射粒子来说,光镊的势阱原理可以用几何光学来解释[3]。
如图1所示。
入射光线a 在粒子小球的作用下而偏离原来的运动方向,粒子小球则受到一个相反的作用力Fa 。
同理可知,光线b 对粒子施加Fb 的作用力。
Fa 和Fb 的合力指向光束的焦点。
这样,就可以通过移动光束的焦点的位置,控制粒子小球前后左右的移动,实现对粒子的捕获和操控。
图1单光束梯度力光阱的几何光学原理对于直径小于激光波长的瑞利散射颗粒,适用于波动光学理论和电磁模型。
波动光学理论认为,在光轴方向有一对作用力:与入射光同向正比于光强的散射力和与光强梯度同向正比与强度梯度的梯度力。
在折射率为的介质中,折射率为 的瑞利粒子所受的背离焦点的散射力为c P n F scat m scat /= (1)这里scat P 为被散射的光功率。
或用光强0I 和有效折射率m p n n m /=表示为m scat n m m r c I F 2224650)21(3128+-=λπ (2) 对于极化率为α的球形瑞利粒子所受的指向焦点的梯度力为2222332)21(22E m m r n E n F m m scat ∇+--=∇-=α (3) 这样,在焦点处形成势阱的标准为指向焦点的梯度力与背离焦点的散射力之比大于1,即两者的合力指向焦点,即有11)2(643320352225≥-+==ωλπr m m n F F R m scat grad(4) 若粒子小球在横向(垂直于光轴方向)偏离中心位置,也会受到一个指向光束中心的作用力使小球锁在焦点处。
光镊原理及其应用摘要:激光的发明使得光的力学效应走向了实际应用。
本文介绍了光镊技术的基本原理及其在生物科学方面的一些应用。
关键词:光镊;光的力学效应;生物科学;应用1 引言光镊是A. Ashkin[1]在关于光与微粒子相互作用实验的基础上于1986年发明的。
光镊在问世之初被看作是微小宏观粒子的操控手段,并渐渐成了光的力学效应的研究和应用最活跃的领域之一。
近20年来光镊技术的研究和应用得到了迅速的发展,特别是在生命科学领域,光镊已成为研究单个细胞和生物大分子行为不可或缺的有效工具。
2 基本原理光镊的基本原理在于光与物质微粒之间的动量传递的力学效应。
对于直径大于波长的米氏散射粒子来说,光镊的势阱原理可以用几何光学来解释[1~3]。
如图1(a)所示。
入射光线A将光子的动量以辐射压的形式作用于粒子小球,力的作用方向与光线入射方向相同。
A经过若干反射、折射后,以光线A’出射。
入射光线的辐射压减去出射光线的辐射压为粒子小球所受的净剩力F A。
图1(b)为作用力简图,实际力的作用过程较此复杂,A’应为所有(包括反射光透射光)出射光线辐射压的合力,但结果与此相似,小球受轴向指向焦点的力。
对于直径小于激光波长的瑞利散射颗粒,适用于波动光学理论[1]和电磁模型。
波动光学理论(也是光镊的基本理论)认为,在光轴方向有一对作用力:与入射光同向正比于光强的散射力和与光强梯度同向正比与强度梯度的梯度力。
在折射率为n m的介质中,折射率为n p 的瑞利粒子所受的背离焦点的散射力为[1]F scat =n m P scat/ c (1)这里P scat为被散射的光功率。
或用光强I0和有效折射率m = n p / n m表示为(2)对于极化率为α的球形瑞利粒子所受的指向焦点的梯度力为(3)这样,在焦点处形成势阱的标准为指向焦点的梯度力与背离焦点的散射力之比大于1,即两者的合力指向焦点,即有(4)若粒子小球在横向(垂直于光轴方向)偏离中心位置,也会受到一个指向光束中心的作用力使小球锁在焦点处。
光镊系统的组成光镊系统是一种基于光学原理的实验装置,用于操控微小的物体。
它由多个组件组成,包括光源、物镜、光学陷阱、控制系统等,每个组件都发挥着重要的作用。
光源是光镊系统的核心部分之一,它提供了操纵物体所需的光束。
光源通常使用激光器,激光器产生的单色、高亮度的光束具有较强的直线传播性和聚焦性,非常适合用于光镊系统。
激光器的输出功率和波长可以根据实验需求进行调节。
物镜是光镊系统的另一个重要组成部分。
物镜通常由高质量的透镜组成,具有较小的焦距和高放大倍数。
物镜的作用是将光束聚焦到微观尺度,使得物体能够被光束精确地捕捉和操控。
不同的物镜具有不同的焦距和放大倍数,可以根据实验需求进行选择。
光学陷阱也是光镊系统的关键组件之一。
光学陷阱利用光束的折射和反射原理,创造出一个稳定的光束束腰,使物体受到光束的作用力而被固定在束腰中。
光学陷阱的稳定性和精确性对于操控微小物体非常重要,它可以用于捕捉、移动、旋转甚至组装微米级别的物体。
除了上述组件,光镊系统还需要一个控制系统来实现对光束的精确控制。
控制系统通常由计算机和相应的软件组成,它可以实时监测光束的位置、强度和方向等参数,并通过调节光源和物镜等组件的参数来精确控制光束的位置和强度。
控制系统还可以将光镊系统与其他实验设备或系统进行集成,实现更复杂的操作。
在光镊系统中,光源、物镜、光学陷阱和控制系统之间通过光学路径相互连接。
光源发出的光束经过物镜聚焦后,通过光学陷阱固定物体。
控制系统通过实时监测光束的位置和强度,调节光源和物镜的参数,实现对物体的操控。
这种光学路径的设计和优化对于光镊系统的性能至关重要。
光镊系统的组成包括光源、物镜、光学陷阱和控制系统等多个组件。
这些组件的协同工作使得光镊系统能够精确操纵微小的物体。
光镊系统在生物医学、纳米技术、光子学等领域具有广泛的应用前景,为科学研究和技术发展提供了重要的工具和平台。
光镊技术技术原理:光与物质相互作的本质是光的电磁场与组成物质的带电粒子相互作用的结果,具体的物理过程依赖于与之相互作用的物质的性质。
以透明电介质小球作模型,设小球的大小等于或大于光波长,小球的折射率n1大于周围媒质的折射率n2,采用几何光学近似。
单光束梯度力光镊原理由一束高度会聚的激光束构成的。
在强会聚的光场中,粒子在X—Y—Z三个方向都将受到一指向光最强点(焦点)的梯度力。
Z方向受的力的方向与光传播方向相反,也就是说光对粒子不仅有推力还有拉力,粒子被约束在光最亮点附近。
技术特点:1)光镊是以光场的形式与物体交换动量的结果,光镊是一种特殊的“无形”镊子,没有机械镊子夹持物体有集中的受力点,光镊的操作是非接触的、无损的。
2)光具有的穿透特性,光镊可以越过透明屏障,穿过封闭系统的表层(细胞膜)操控其内部微粒(细胞器),也可以透过封闭的样品池的外壁,操控池内微粒,实现真正的无菌操作。
3)光镊更多的是在液体中工作,能够保持细胞生存的“天然”环境。
因此,光镊技术特别适合用于对活体生物细胞、细胞器以及生物大分子的操控和研究。
4)光镊操控微粒的尺度在几十纳米到几十微米,这也是生物大分子、细胞器、细胞的尺度范围。
在该尺度范围光镊是唯一的操作手。
5)光镊的所有机械部件离捕获对象的距离都远大于捕获对象的尺度(~1000倍),因此光镊是以“遥控”的方式,远距离工作的。
6)光镊操控微粒直接展现在显示屏,是可视性,完全暴露在我们视野中的细胞为研究者提供了进行下一步工作的极大方便。
目前还没有其它实验技术比光镊研究操控活体能如此得心应手。
7)光镊是微小力的探针。
光镊对微粒的操控不是刚性的,类似弹簧,在操作过程中能实时感应微小的负荷。
因此,光镊是极其灵敏的力传感器,力的分辨精度高达几飞牛。
8)光镊与其它技术手段结合,如常规显微镜所配置的荧光,相差,微针等,还有激光刀,近场光学显微镜,共聚焦显微镜,光谱仪等。
目前还没有能够直接深入到细胞内操控单分子的技术和方法,而光镊已实现了在体外操控单个大分子,实时追踪其运动,获取单分子静态和动态的力学性质等,成为生物学领域不可或缺的一种独立的技术。
光学镊子原理
光学镊子是一种利用光学原理设计的工具,它可以放大被观察物体的图像,使
得我们可以更清晰地观察和操作微小的物体。
光学镊子的原理主要涉及到光的折射和放大,下面我们将详细介绍光学镊子的原理及其工作过程。
首先,光学镊子利用了透镜的放大原理。
透镜是一种光学器件,它可以使光线
经过时发生折射,从而改变光线的传播方向和放大物体的图像。
在光学镊子中,通常使用的是凸透镜,它可以使光线聚焦在一个点上,从而放大被观察物体的图像。
当物体放置在凸透镜的焦点附近时,透镜会将物体的图像放大,使得我们可以清晰地观察到物体的细节。
其次,光学镊子还利用了眼睛的放大原理。
通过调节镜片间的距离,可以改变
透镜的焦距,从而改变放大倍数。
当我们通过光学镊子观察物体时,眼睛会对放大的图像进行进一步放大,使得我们可以更清晰地看到物体的细节。
这种双重放大的原理,使得光学镊子成为一种非常实用的工具,可以在实验室、医疗、制造业等领域发挥重要作用。
此外,光学镊子还可以利用光的折射原理来改变物体的位置和方向。
通过透镜
的折射作用,可以使得物体的图像发生倒立、放大或缩小的变化。
这种特性使得光学镊子不仅可以放大物体的图像,还可以改变图像的方向和位置,使得我们可以更方便地进行观察和操作。
总的来说,光学镊子的原理主要涉及到透镜的放大、眼睛的进一步放大以及光
的折射作用。
通过这些原理的相互作用,光学镊子可以实现对微小物体的放大观察,从而在科研、医疗、制造业等领域发挥重要作用。
希望通过本文的介绍,读者对光学镊子的原理有了更深入的了解。
1 / 16 1.1 光镊技术简介 光镊是以激光的力学效应为基础的一种物理工具,是利用强会聚的光场与微粒相互作用时形成的光学势阱来俘获粒子的【4】。1969年,A. Ashkin等首次实现了激光驱动微米粒子的实验。此后他又发现微粒会在横向被吸入光束(微粒的折射率大于周围介质的折射率)。在对这两种现象研究的基础上,Ashkin提出了利用光压操纵微粒的思想,并用两束相向照射的激光,首次实现了对水溶液中玻璃小球的捕获,建立了第一套利用光压操纵微粒的工具。1986年,A. Ashkin等人又发现,单独一束强聚焦的激光束就足以形成三维稳定的光学势阱,可以吸引微粒并把它局限在焦点附近,于是第一台光镊装置就诞生了【5,6】。也因此,光镊的正式名称为“单光束梯度力势阱” (single-beam optical gradient force trap)。 由于使用光镊来捕获操纵样品具有非接触性、无机械损伤等优点,这使得光镊在生物学领域表现出了突出的优势。这些年来,随着研究的深入和技术的不断完善,光镊在生物学的应用对象由细胞和细胞器逐步扩展到了大分子和单分子等。目前,光镊常被用来研究生物过程中的细胞和分子的运动过程【7-10】,也常被用来测量生物过程中的一些力学特征【11-14】。
1.2 光镊的原理与特点 众所周知,光具有能量和动量,但是在实际应用中人们经常利用了光的能量,却很少利用光的动量。究其原因,这主要是因为在生活中我们接触到的自然光和照明光等的力学效应都很小,无法引起人们可以直接感受到或观察到的宏观效应。而科学家们利用激光所具有的高亮度和优良的方向性,使得光的力学效应在显微镜下显现了出来,在这里我们要介绍的光镊技术正是以这种光的力学效应为基础发展起来的。 1.2.1 光压与单光束梯度力光阱 光与物质相互作用的过程中既有能量的传递,也有动量的传递,动量的传递常常表现为压力,简称光压。1987年,麦克斯韦根据电磁波理论论证了光压的存在,并推导出了光压力的计算公式。1901年,俄国人П.Н.列别捷夫用悬在细丝下的悬体实现了光压的实验测量【15】。此后,美国物理学家尼克尔、霍尔也2 / 16
图1.1 单光束梯度力光阱
分别测量了光压【16】。20世纪70年代,人们开始研究激光的辐射压力,并发展了原子束的激光偏转【17】、激光冷却【18】、光子粘团【19】等实验技术。在宏观微粒的光压力研究方面,由光悬浮发展到光捕获、光致旋转等【20】。1970年,A.Ashkin【21】首次实现了水溶液中的光悬浮。随后的一些研究【22-25】最终导致了光镊的发明。 通常光对物体的作用力都是推力。但是,在一定条件下光也可以对物体产生拉力,或更一般的,产生束缚力。这就牵涉到光对物体作用的梯度力。 为了阐明梯度力的概念,以透明介质小球为例说明。如图1.1所示,一个透明介质小球处于一个高斯分布的非均匀会聚光场中,小球的折射率大于周围介质的折射率。当会聚激光束照射到微粒上时,激光发生折射和反射,也包括一部分吸收。被微粒反射和吸收的光作用就是光辐射压力,或者称散射力,其方向与光传播方向一致,它趋向于使小球沿光束传播方向运动。与此同时,光束经过微粒会发生多次折射,有些会聚光线折射后传播方向更趋向于光轴(即光束传播方向),从而增大了轴向动量,因而给与微粒与光传播方向相反的作用力,表现为拉力,这就是轴向梯度力的本质,由于此拉力的作用,导致粒子在轴向可以稳定在激光焦点附近。而微粒在横向的偏离,由于光场的非均匀性,也会受到指向激光焦点的回复力,即横向梯度力。在梯度力和散射力的共同作用下,微粒被稳定束缚在激光焦点附近。这就是单光束梯度力光阱。 1.2.2 光镊技术的特点 光镊是对单光束梯度力光阱的形象的称呼,因为它与宏观的机械镊子具有相似的操控物体的功能。但与宏观的机械镊子相比,或者与传统的操控微纳米粒子的显微微针或原子力显微镜等相比,光镊具有不可比拟的优越性。光镊对微粒的3 / 16
操控是非接触的遥控方式,不会给对象造成机械损伤。这使得光镊在生物学研究特别是单细胞单分子研究领域应用非常合适。首先,光镊捕获微粒的尺度在几十纳米到几十微米,正好是生物细胞、细胞器以及生物大分子的尺度范围。其次,光镊的温和操控不会损失细胞,虽然激光会产生热,但可以通过选择合适的波长,避开细胞对光的吸收波长,将热效应降到最低。另外,由于大部分细胞膜是透明的,光可以穿过细胞膜操控细胞内部微粒,这是其他操控手段无法做到的。 光镊不仅可以操控微粒,还可以进行微小力的测量,粒子偏离捕获中心的距离和其受到的回复力成正比,类似与弹簧,在操控过程中能实时感应俘获粒子的微小负荷。因此,光镊是极其灵敏的力传感器,其作为微小力的探针,可以进行细胞和生物大分子之间的相互作用的定量测量,进一步揭示细胞的功能以及活动规律。
3.2 单个光镊的光路设计 在我们设计的纳米光镊系统中将配备多个光镊。而每个光镊的光路设计都遵循相同的设计要求。即激光束从光源出射开始,到通过物镜形成光镊,中间所经过的耦合光路,要保证物镜输出的光束会聚度最大、像差最小,形成的光镊捕获效果最好。为此要求物镜后瞳能被光束完全充满,以便提高光镊捕获性能。本节以HeNe激光光镊为例,详细讨论单个光镊的光路设计。
图3.2为HeNe激光光镊的光路简图。我们采用的倒置显微镜的光路为无穷远系统,因此激光进入物镜后瞳时应是平行光束。显微镜中有个固定在镜体内的透镜-焦距150mm的辅助透镜T。它必须作为光镊系统中的一部分参与到光路设计中。 为了得到尽可能大的激光束会聚度,即油浸物镜数值孔径NA所许可的最大
图3.2:HeNe光镊光路示意图 4 / 16
会聚角度,激光器输出的光束必须被扩束,以满足耦合光路对光束直径的要求。当物镜像侧的孔径(后瞳)被高斯光束恰当地照明时,光束将会被聚焦为衍射极
限的焦斑。物镜出射光束的理想会聚角度为126度,由001.272可得
理想束腰0为363nm。 本装置中使用了一个10(如图3.2,由透镜L1和L2组成)扩束器。HeNe激光器发出的激光束直径为0.65mm,经过扩束后光束直径为6.5mm。该光束被焦距250mm的透镜L3会聚到物平面的共轭面C(该平面的位置为显微镜左侧的CCD接收靶面的位置)上,然后通过CCD通道进入显微镜,被45度二向色反射镜反射,再经过辅助透镜T后,变换为合适直径的平行光束进入物镜O的后瞳,在物镜的物平面形成会聚点,在该点附近形成了光镊。 在实际光路的设计中,除了要保证物镜后瞳被光束充满,我们还需要考虑下列情况:阱位与焦点位置并不一致。为了保证被捕获的微粒能够清晰成像到观测平面上,激光束经过物镜后的会聚点应适当偏离物平面,而使阱位落在物平面上。通常被捕获微粒的比重大于周围液体,因此要求阱位也即物平面在焦点之内。上面描述的光路和元件参数就是基于这样的考虑,经过实验测量确定的。 我们改变了光路中HeNe光束的扩束情况,使激光束经过扩束镜后并不是平行光束,而透镜L3和辅助透镜T之间的距离也被改变,并不严格等于该两枚透镜的焦距之和。最后到达物镜后瞳处的激光束并不平行,光斑直径约为6mm,稍大于物镜后瞳(5mm)。光束的焦点落在物平面之外,保证了被捕获样品的清晰成像。保证了被捕获样品的成像状态和光镊的捕获性能,并且由于进入物镜后瞳的光斑稍大,这就使得当入射激光束有少许偏转的时候,物镜后瞳依然能保持充满,光镊性能受到的影响较小。 出于光镊光路调整的需要,也是为了在必要时对阱位作横向调节,光路中还插入了两个可进行俯仰、左右二维调整的反射镜。同样,必要时可通过对扩束镜中透镜位置的纵向(激光传播方向)调节实现光镊阱位在纵向的移动,这些将在后文中进行详细介绍。
3.3 多光镊的光路设计 5 / 16
在多光镊系统的设计中,耦合光路要能地将多个光镊有机地耦合在一起,而不影响它们的独立操控。 目前所使用的多光镊装置,可以分为两大类。 第一, 单光镊的分时复用:这种方式是在单光镊的基础上,在光镊中加入一个光学扫描部件,使单光镊依次反复在多个位置间进行快速的切换[7,8]。每一个位置都按次序使用激光光源的一个时间片段。例如:光镊在初始位置捕获一个微粒,然后迅速地切换位置,在另一个位置抓住第二个微粒。按这种方式,当光镊经过若干位置后,重又回到原来的位置,只要切换速度足够快,第一个微粒还没有来得及脱离光镊捕获区域,因此又会被重新稳定在捕获位置。如此反复即实现了光镊的分时复用。这种方式的机械复杂度较高,使用的时候在光镊扫描的路线上都可以实现捕获,即可以实现多个微粒的捕获;微粒间的距离不易准确控制,不易实现光镊间相对的复杂操作。 第二, 多光束实现多光镊:这种方法思路简单,每个光镊都由独立的光束形成。实现方法主要有如下几种:1.对某一激光束进行分束,可以是能量分束或偏振分束。能量分束是将激光束按照能量比例分成多束。不过由于它们来源于同一激光束,分束后的激光具有好的相干性,容易发生干涉,对光捕获不利。偏振分束是将激光束分成偏振方向互相垂直的二束光[5]。这种方法简单易行、能量损耗低,得到的二束偏振光之间无干涉效应,并且也可以通过光学器件对分束后两束偏振光的能量比进行连续调节。该方法形成的双光镊稳定,但最多只能形成两个光镊;2.对同一激光束作位相变换,使激光束波前形成所需要的分布,最后可以在光场内形成多个光镊[9,10]。目前已有科研人员采用液晶位相变换器实现了多光镊[11,12],光镊数量可以达到上百个。这种方法适应范围广,但代价较高;3.用多个激光器形成多个光镊,即采用不同波长的激光器。这对光学器件镀膜的要求较高,而且增大了光路的复杂度,因此不宜采用过多的不同波长激光。 我们采用偏振分束和不同波长激光两种方法相结合来实现三光镊装置。图3.3为设计简图。作为基本设置,三个光镊既可以协同实现单个刚性微粒在空间的准确定位与定向;也可以用二个光镊操控一线形大分子、第三个光镊操控单个微粒,研究它们间的相互作用;也可以独立操控三个微粒,研究它们的相互作用。三个光镊可以同时操作,也可以相对操作,它们的相互配合能够实现各种复杂的