专业班级：12级生物技术2班
实验日期：2014 年3 月5日到25日室温：20.12℃(平均温度)
大气压：82.75 KPa（平均气压）
实验一：普通果蝇的形态和生活史观察
一、目的：
1、观察并熟记果蝇的形态结构；
2、掌握果蝇培养基的制备方法；
3、掌握果蝇饲养管理的方法；
4、鉴定果蝇的雌雄性别；
5、观察并熟记果蝇的生活史。
二、原理：
（一）生物学特性：
1.1果蝇的形态特征：
黑腹果蝇属于果蝇科(Drosophilidae)，双翅目昆虫。成虫具有一对发达、膜质的前翅,后翅特化为一对平衡棒。生活史短，繁殖快，易饲养，个体小体型较小，身长3～4mm，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。
图一、普通野生型果蝇的形态图
1.2、果蝇的生活史：
本次实验采用野生型的红眼黑腹果蝇果蝇广泛存在于温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地内如果园，菜市场等地区内皆可见其踪迹。出啦南北极外，目前至少有1000个以上的果蝇物种被发现。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。
在不供给食物的情况下，果蝇可存活50小时左右，在不供给水得情况下果蝇无法活过一天。蛹期果蝇在其正常5天生活周期下可取食其体重3~5倍的食物，雌果蝇在产卵期每日可取用与体重等重的食物。果蝇成虫的食物内需有糖类。而蛹期则可以只依赖酵母即可生育。
1.2.1、果蝇的生活史
图二、果蝇的生活周期图
1．卵 2．一龄幼虫 3．二龄幼虫 4．三龄幼虫 5．蛹
6．成虫(雄) 7．成虫(雌)
图三、果蝇生活史中各时期的典型图
生活史：果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段（图1-1）。
1.2.1.1、卵：卵白色，长椭圆形，长约0.5mm，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。
1.2.1.2、幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期，体长可达4～5mm。在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。
1.2.1.3、蛹：幼虫生活七天左右即化蛹，化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，这就显示即将羽化了。
1.2.1.4、成虫：刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，身体较白嫩，此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的，没有多大区别。不久，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深，如野生型果蝇的体色成为灰褐色，突变型黑檀体果蝇的体色成为乌黑色。
果蝇生活周期的长短与温度关系密切，30℃以上时果蝇则将不育且濒临死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低。培养果蝇的最适温度是20～25℃。
1.3、果蝇的雌雄鉴别：
表一：成虫雌雄的鉴别表
雌果蝇雄果蝇
体形较大体形较小
腹部椭圆形，末端稍尖腹部末端钝圆
腹部背面有明显的五条黑色条纹腹部背面有三条黑色花纹，前两条
细，后一条宽且延续至腹面
腹部腹面有明显的6个腹片(刚毛围
四个腹片
成一圈)
无性梳第一对跗节基部的一节有性梳
外生殖器外观比较简单外生殖器外观较复杂，刚羽化的幼蝇
用低倍镜可明显观察到生殖弧、肛口
板及阴茎
图四、果蝇的性别鉴别图：
图五、雄果蝇的左前足他图：
左：雄性果蝇的左前足
中：跗节基部的性梳
右：雌果蝇无性梳
C、基节 TR、转节F、腿节
TI、胫节TA、跗节
图六、果蝇的左前足各部分的结构图：
图七、果蝇的性梳图：
图八、果蝇的性梳放大图：
图六：左：雄性果蝇的左前足中：跗节基部的性梳右：雌
C、基节TR、转节F、腿节TI、胫节TA、跗节
1.3.1、性梳：果蝇只有雄体在第一对足的跗节基部有一黑色鬃毛结构，形似
一小梳，称为性梳。而雌体没有性梳。性梳的有无是鉴别雌雄成蝇的可靠标志之一，只是需要放大后才易观察。
1.3.2、腹部体节数目：
雌果蝇6节，腹部底部为产卵管，呈现圆锥状凸出。
图九、雌果蝇的腹部体节简图：
腹部体节数目：
雄果蝇4节，腹部底部为交尾器，呈现黑色圆形外观
图十、雄果蝇的腹部体节简图：
（二）生态学特征：
2.1分布范围：
果蝇类昆虫与人类一样分布于全世界，并且在人类的居室内过冬，果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地内如果园，菜市场等地区内皆可见其踪迹。除了南北极外，目前至少有1000个以上的果蝇物种被发现由于体型小，很容易穿过砂窗，因此居家环境内也很常见。
2.2生活环境：
有些种生活以腐烂水果上。有些种则在真菌或肉质的花中生活。在垃圾筒边或久置的水果上，只要发现许多红眼的小蝇，即是果蝇；果蝇类幼虫习惯孳生于垃圾堆或腐果上。
2.2、果蝇的一般生态学特征：
2.2.1、喜温：最适培养温度20℃～25℃，在此范围内，温度越高，生长越快，繁殖的也越快，但高于30℃不育甚至死亡，低于12℃时，则生长发育变得迟缓。
2.2.2、喜湿：果蝇的生活周期包括卵、幼虫、蛹和成虫四个完全变态的发育阶段，从初生卵发育至新羽化的成虫为一个完整的发育周期，在25℃，60％相对湿度条件下，大约为10天。
通过控制养殖的温度，可以加速和减缓果蝇的发育。果蝇个体很小，幼虫在三龄时达到最大，约2毫米，成年果蝇也仅为2－3毫米。新羽化的雌性成虫大约8小时之后即可进行交配，交配之后大约40小时开始产卵，第4-5天出现产卵高峰。性成熟雌性果蝇生殖能力很强，产卵初期每天可达50～70枚，累计产卵可达上千枚。较短的生命周期及较强的繁殖能力使得在短时间内培养繁殖出大量特定种系的果蝇变得十分便利，使果蝇得以广泛应用于生物学研究，特别是系统发育学及遗传学等研究
2.2.3、向上性：果蝇具有向上爬的特性。
2.2.4、喜食酵母菌；
2.2.5、喜食糖份含量高的物质。
（三）遗传学特征：
3.1、染色体组成：果蝇为二倍体2n=8,
核内有丝分裂：不涉及细胞分裂和核分裂的染色体分裂方式。
体联会：一些特殊的体细胞中（如果蝇唾腺细胞）的染色体经多次复制却不分开，依旧紧密地排列在一起就象减数分裂中的联会现象一样。
染色体组：来自二倍体生物的正常配子的所有染色体。
连锁群：来自配子中的每条染色体及其携带的基因。
雌雄基因平衡理论：对果蝇而言，X染色体上有决定雌性的基因，常染色体上有决定雄性的基因存在，其比值决定果蝇的雌或雄，Y染色体只与育性有关，而与性别无关。
3.2、果蝇的性别决定：
果蝇的性别决定为XY型，Y染色体在性别决定上不起作用，只与育性有关。含有Y染色体，可产生正常的配子，不含Y染色体，则配子不育。性别决定与性比值（性指数）有关。
X/A=1 则为雌性；X/A=0.5 则为雄性。
X/A＞1，为超雌；X/A＜0.5，则为超雄；0.5＜X/A＜1则为中间性。
雌雄基因平衡理论：果蝇X染色体上有很多雌性基因，常染色体上有很多雄性基因，Y染色体上很少或没有与性别决定有关的基因，因此性别决定于基因的平衡。
连锁群：来自配子中的每条染色体及其携带的基因。
雌雄基因平衡理论：对果蝇而言，X染色体上有决定雌性的基因，常染色体上有决定雄性的基因存在，其比值决定果蝇的雌或雄，Y染色体只与育性有关，而与性别无关。
3.3、果蝇的连锁群：
X染色体上有141个基因；第2染色体上有228个基因；第3染色体上有156个基因；第4染色体上有12个基因。
3.4、同源染色体：来源相同、结构相似、控制的形状相同，在减数分裂中配对的一对染色体。
3．5、果蝇的突变品系：（表一）
野生型：体色灰，翅膀呈圆卵型，静止时平放交叉重叠，长度约为腹部长度的两倍。
3.6、果蝇常见的突变表型：（表二）
匙形翅
残翅
小翅
黄体
叉毛
墨色眼
翻翅
短翅
卷曲翅
nub
2
vg
m
y
f
se
Cy
M
Cy
颜色比黑檀体深
翅小匙状
翅膀小，长度不超过身体
全身呈浅橙黄色
毛和刚毛分叉且弯曲
羽化时眼呈褐色并深化成墨色
翅退化，不能飞
翅向上翻卷，纯合致死翅膀短
小，不超过身体
翅膀向上卷曲，纯和致死
II
II
x
x
x
III
II
X
II 图十一、突变型：白眼（w）
图十二、突变型：小翅（m）
图十三、突变型：残翅（vg）
图十四、突变型：焦刚毛（sn）
图十五、突变型：无横隔脉（cv）
图十六、突变型：黄体（y）与黑檀体（e）
三、材料与方法：
3.1、材料：野生型黑腹红眼果蝇。
3.2、仪器设备：生化培养箱、双筒解剖镜、镊子、电磁炉、高压
灭菌锅、电热恒温干燥箱、培养瓶、棉花塞、烧杯、白瓷板、玻棒、棉签、滤纸；
3.3、试剂：乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖；
3.4、步骤：
3.4．1、野生型果蝇的捕获：
找一些塑料瓶或者不用的水杯，在里面放上烂的香蕉或者菠萝，并将其放在垃圾堆或者水果摊处（尽可能的放在向阳的地方），到第二天中午的时候再去用熟料袋或者纱布盖住瓶口将瓶子取走。
3.4.2、果蝇培养基配制：
先计算所要的量，然后制定配方：A：糖6.2克，加琼脂0.62克，再加水
40ml煮沸溶解；
B：玉米粉8.25克，加水40ml，加热搅拌均匀，再加0.7克酵母粉；
A和B混合加热成糊状后，加0.5 ml丙酸，即可分装到培养瓶中。
4.2.1、倒入培养基的厚度约2厘米，在培养基中插入一张消过毒的干燥硬纸片，以扩大果蝇的活动场所。
4.2.2、将培养瓶置入高温高压灭菌锅内，以121℃，1.5大气压消毒30分钟。
4.2.3、灭菌完成后，待灭菌锅内压力降至常压后开启锅盖使其半开，再以灭菌锅干燥培养瓶之棉塞30分钟，完成后取出使其冷却备用。
4.2.4、待培养基冷却后，用酒精棉花擦去瓶壁上的水珠。因为瓶里有了积水，移入的果蝇容易淹死或粘住。
3.4.3、麻醉：
4.3.1、对果蝇进行检查时，用乙醚麻醉，使果蝇处于昏迷状态。
4.3.2、使用时将乙醚(2—3滴)滴到麻醉瓶的棉花球上(注意不要让乙醚流进瓶内)。麻醉瓶要保持干燥，否则会粘住果蝇翅膀，影响观察。
4.3.3、麻醉果蝇时，先将长有果蝇的培养瓶在海棉垫上轻敲，使果蝇全部震落在培养瓶底部。然后迅速打开培养瓶的棉塞，把果蝇倒入去盖的麻醉瓶中，并立即盖好麻醉瓶。（果蝇的麻醉程度看实验要求而定：对仍须培养的果蝇以轻度麻醉为宜；但对不再培养，单单进行性状观察的果蝇，可以深度麻醉，甚而致死也无妨，果蝇翅膀外展45°角，说明已死亡)。
4.3.5、检查完毕后，把不需要的果蝇倒入水池中。
3.4.4、果蝇的雌雄鉴别：
将麻醉后的果蝇放在白瓷板上按照雌雄果蝇的异同点分离出雌雄果蝇，并记录好雌雄果蝇的只数。
3.4.5.、果蝇接种:
按照无菌操作技术，一手持培养瓶，一手持广口瓶，轻轻地旋转广口瓶棉塞，使果蝇掉离棉塞，迅速取下两瓶的棉塞，瓶口相对，培养瓶在上，果蝇触角根部的感觉神经能和人类的耳朵一样感知声音和重力，受惊吓后会向上逃走，轻轻敲击广口瓶，果蝇会陆续飞入培养瓶，塞好瓶口，培养瓶应该编上号数，注明名称，培养日期，并且登记在记录本上）放进恒温培养箱，25℃下进行培养。
3.4.6、培养观察：
在做新的留种培养时，应仔细检查果蝇有没有混杂，有没有突变个体产生。一般一瓶放5～10对亲本为宜，果蝇移入新瓶时，需将瓶子横放，待果蝇清醒过来后再把培养瓶竖起。每4~5周换一次培养基，最好每一个品种分成两套分别培养。标签上标明品种名称和日期，根据实验的要求进行培养（若只为实验留种温度一般控制在15~18℃，若需大批量进行实验温度则控制在20~25℃）。
3.4.7、每天记录下温度和大气压，并且记录每天果蝇繁殖后各个时期的形态的成长天数。
3.4.8、认真完成实验报告。
四、结果与分析
4.1、结果：
4.1.1、果蝇的形态结构：
图十七、果蝇的形态结构图：
4.1.2形态构造
头部：有一对复眼，三个单眼和一对触角。
胸部：有三对足，一对翅和一对平衡棒。
腹部：背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器在腹部末端，全身有许多体毛和刚毛。
4.1.3、果蝇的生活史：
从图中可知，果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低，果蝇培养的最适温度为20-25℃，由于本地的温差较大，而且室温大约在19℃~21℃，故会看到如上的生活史，在营养物质充足的前提下，可知： 19℃~21℃下果蝇的生活史为成虫经过减数分裂要得到精卵细胞大约12小时左右，而要完成受精成为受精卵大约需要2.5~3天从受精卵到一龄幼虫需要1天，从一龄幼虫到二龄幼虫需要1天，从二龄幼虫到三龄幼虫需要1天，从三龄幼虫到蛹需要2.5~3天，蛹到成虫4天,则可知从受精到发育为成虫大约需要14天左右。
五、讨论与结论
5.1、讨论
5.1.1、有资料显示（聂传朋.果蝇的生活史及其人工饲养. 生物学通报, 2012,2, 37:60-61 .），果蝇在不同温度下的生活史为：
表三：果蝇生活周期与温度的关系表
营养条件适宜，果蝇在20℃～25℃下生活较好，温度过高或过低都会使其生活力降低、不育甚至死亡。一对亲蝇能产生几百个后代。
5.1.2、有文献指出（邓接楼，晏燕花，付国良，章昱.不同培养温度下培养果蝇的效果差异研究. 上饶师范学院学报, 2012,12, 30:89-91.）：黑腹果蝇Drosophila melanogaster Meigen是杨梅、樱桃等浆果果实最主要害虫。为明确温度对黑腹果蝇种群增长的影响,掌握黑腹果蝇饲养合适温度,在室内观察了黑腹果蝇在15,20,25,30和35℃条件下的生长发育、存活与繁殖能力,并计算各温度条件下的种群增长参数。结果表明:在35℃条件下,黑腹果蝇不能完成发育,其他温度条件下黑腹果蝇从卵孵化至蛹羽化成成虫,发育速率随温度升高明显加快,在15℃下,完成发育需要长达41 d,而在30℃下,黑腹果蝇完成发育仅需7 d;黑腹果蝇成虫寿命随温度的升高而明显缩短,在15℃下,雌、雄平均寿命分别高达70,80 d,在30℃下,平均寿命都仅为30 d;黑腹果蝇在20和30℃的平均繁殖力没有显著差异,分别为138.85和137.97粒卵,雌-1,但在以上条件下的平均繁殖能力显著低于25℃条件下的平均繁殖力,25℃条件下黑腹果蝇平均产卵量高达375.4粒(P0.01);黑腹果蝇的种群增长参数净生殖率(R0)、内禀增长率(rm),在25℃时达最高值分别为55.10和1.021 d-1,而在15℃条件下值最小,分别为3
6.67和0.189 d-1。据此得出,25℃是最适宜黑腹果蝇生长发育和繁殖的温度,温度过高或过低都不利于黑腹果蝇种群增长。黑腹果蝇的发育起点温度为12.8℃,充分完成发育所需的有效积温为12.33度。
5.1.3、还有文献指出（聂传朋.果蝇的活史及人工饲养.生物学通报，2012,2,2:21）果蝇的1个完整的生活周期分为4个明显的时期，即卵一幼虫一蛹一成虫。卵长约0.5 mm、白色，前端背面伸出一触丝，能附着在食物或瓶壁上，不致深陷于食物中，卵经22～24 h孵化为幼虫，幼虫经两次蜕皮为三龄幼虫约4～5 mm，肉眼可见其一端稍尖为头部，上有一黑色钩状口器，幼虫生活约4 d左右化蛹，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变成深褐色，此时即将羽化，成虫果蝇自羽化后8 h可交配，2 d后即可产卵，成虫果蝇在25℃下一般存活37 d。
5.1.4、还有文献指出（李佳琳, 刘欢,那美玲,张太杰,罗志文.
温度对黑腹果蝇生长发育的影响.佳木斯大学学报（自然科学版），
2012,8,4:639-640)采用同样的培养基在培养瓶中，分别以１５℃，２０℃，２５℃，３０℃共４个温度条件下进行培养，并以２５℃作对照组。
在不同培养温度对黑腹果蝇生长发育的影响结果温度对黑腹果蝇生长发育的影响显著，随温度的升高，黑腹果蝇世代周期明显缩短，产卵数量明显增加，与对照组相比，呈现极显著差异；而鲜重的变化则随温度的提高而下降，亦有明显差异；性比变化的差异亦表现为极显著，培养温度偏离最适温度（２５℃）其性比有明显差异。
表四、温度对黑腹果蝇生长发育的影响
温度对黑腹果蝇的生长发育非常重要由实验结果不难看出，２５～２７℃为黑腹果蝇培养的适宜温度，产卵温度为１２～３２℃．用于保种和制备黑
腹果蝇唾液腺染色体方面，我们可选用１５～１８℃培养，除了可以节省培养基外，可以培养出适合唾液腺染色体观察的三龄幼虫．此外，极端温度对比试验也发现，黑腹果蝇生存的上限温度区间为３６～３７℃，高于３７℃时对其生长极为不利，甚至会造成死亡，黑腹果蝇蛹及幼虫耐高温能力略强于成虫．黑腹果蝇生存的下限温度区间为７～１０℃，低于５℃则处于休眠状态，１２～２４ｈ以后即会死亡．
果蝇的形态和生活史观察，首先得从果蝇的培养开始讨论。要使培养的果蝇能正常生存、繁殖就必须有足够的养分供给、合适的环境条件等。所以，果蝇的培养过程中有几个关键的环节如果掌握不好，将不能使果蝇正常生长，甚至会导致部分或全部果蝇死亡。因此，应特别注意一下三点：
5.1.5、玉米粉的溶解玉米粉一定要先用凉水拌匀后再加热,不能直接倒入加热的培养基中,否则容易聚集成团,不易溶解。配制的培养基容易出现块状,不易于果蝇的利用。
5.1.6、添加酵母的时间过早，酵母为活性物质,高温易失活。因此应当在培养基冷却到50℃左右时加入到培养基中,切勿将酵母粉加入到培养基中直接煮
沸。
5.1.7、培养温度果蝇的培养温度要以具体使用情况而定,在遗传学教学实验中,由于实验时间相对较短,要求果蝇的繁殖速度相对就较快,因此可以在23~25℃
的条件下培养,而保种则应在18℃左右下培养,以免培养基消耗过快,减少转接
次数。根据以上配置要求，我们在配制培养基的过程中放了两个错误。首先，就酵母的添加来说，我们在做实验时是把酵母粉和培养基其它成分放在一起加热成糊状的，温度远远超过了50℃。故不利于果蝇的生长，培养期间一直有果蝇死亡。
5.1.8、果蝇麻醉过度导致一部分果蝇死亡。在果蝇接种过程中，要注意果蝇具有以下一些特性：一是具有趋光性，二是喜欢向上爬。掌握了这些特性，我们就能很方便地将果蝇转移到另外一个培养瓶中。如果还不能顺利的转移果蝇，就得麻醉果蝇后在转接。将麻醉瓶的果蝇轻拍到瓶底，旋转瓶子使瓶口斜向下，迅速打开盖子，用镊子夹住蘸有乙醚的棉球塞住瓶口，待大多数果蝇行动迟缓或者不再爬动后拿开棉球，用毛笔将果蝇转移到白瓷板上。如果果蝇翅膀与身体成45°时，表明麻醉过度，果蝇已经死亡。
5.1.9、培养瓶中果蝇雌雄分配不均，果蝇数目限制导致有的培养瓶中全为雌果蝇或雄果蝇或者培养瓶中果蝇数目太少不利于繁殖。有的培养瓶中出现没有后代或子代数目很少的情况。出现这些问题，首先是果蝇收集的问题。由于收集到的果蝇数目不够多，导致每个培养瓶中分养得果蝇数目不足，有的培养瓶只分到3或4只，由于各种原因导致这些果蝇死亡后就没有多余的果蝇即时接种至培养瓶中，使生活史观察不同步，从而影响观察结果。其次就是接种时粗心大意，没有仔细的将果蝇按一定的雌雄比例接种进培养瓶中，导致有的培养瓶中全为雌蝇或全为雄蝇，不能繁育后代，影响对其生活史的观察。
5．1.10、果蝇的生活周期长短与温度关系很密切，30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使它生活周期延长，同时生活力也减低，果蝇培养的最适温度20—25℃。25℃时，从卵到成虫约10天；由于是在宿舍培养，大部分时间温度不足25℃，所以从卵到成虫用了14天。
5.1.11、数据记录不够准确。在我们观察记录过程中，由于卵吸附在培养基中肉眼很难分辨，故数数的时候只能取估计值。在幼虫期，幼虫到处爬动可能会出现少数或多数的情况，而蛹到成虫时期，数出得蛹数目更是不可靠，有的虫体已经脱离了蛹，只剩下一个空壳，我们只要少不注意就会把空壳给进去等等因素都会导致数据记录不准。
5.2、结论：
正如文献的内容所示，果蝇的生活史与温度密切相关，由于本实验所在的温度是：19℃~21℃，在营养物质充足的前提下，故出现上述结论中的生活史情况，即：果蝇的生活史为成虫经过减数分裂要得到精卵细胞大约12小时左右，而要完成受精成为受精卵大约需要2.5~3天从受精卵到一龄幼虫需要1天，从一龄幼虫到二龄幼虫需要1天，从二龄幼虫到三龄幼虫需要1天，从三龄幼虫到蛹需要2.5~3天，蛹到成虫4天,则可知从受精到发育为成虫大约需要14天左右。
六、思考题
1、作为模式动物的果蝇有哪些优点？
果蝇的形状观察和饲养管理 一、实验目的 了解果蝇的生活习惯，掌握果蝇饲养管理的方法，学习鉴定果蝇的雌雄性别，观察果蝇某些遗传性状。 二、实验原理 果蝇广泛存在于全球温带及热带气候区，在果园、菜市场等地皆可见其踪迹，目前已发现1000多种。果蝇以酵母菌为食，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。 黑腹果蝇，双翅目果蝇属。生活史短，每12天左右即可完成一个世代；饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左右；突变型多，突变性状多，多数是形态变异，容易观察；染色体少、个体小，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。 1、果蝇的生活史 果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4个时期：卵、幼虫、蛹和成虫。最适培养温度为25~30℃。果蝇在25℃时，从卵至蝇需10天左右。由蛹羽化成的成虫，雄性在12小时内为处女蝇，24小时后开始产卵，每天每个成虫可产50-75个卵，10天内最高产卵总股数为400-500个。 卵：白色，椭圆形，长约 0.5mm，前端背面伸出一触丝，附着在食物上。 幼虫：一龄——二龄——三龄，三龄体长4-5 mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。 蛹：化蛹前三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。 成虫：刚羽化的果蝇虫体较肥大，体表呈半透明，颜色逐渐加深，硬化。 2、果蝇的雌雄鉴别
4、果蝇饲料的配制 果蝇是以酵母菌作为主要食料的，因此实验室内凡是能发酵的物质，都可用作果蝇的饲料，常用的饲料油玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等。 三、动物与器材 黑腹果蝇品系：突变型（三隐性、黑体） 药品：乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。 培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、解剖镜、搪瓷杯、玻棒、镊子、培养瓶、海绵塞、滤纸、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板。 四、实验内容 1、果蝇培养基配制 （1）清洁指管，盖上适当大小的瓶塞，置高压灭菌锅内，以121℃，1.5大气压消毒15分钟，冷却备用。 （2）按配方称取培养基各组分。先取一半水加入琼脂于电磁炉上加热溶解，再加入蔗糖煮沸。 （3）取剩余的水将玉米粉调成糊状边搅拌边加入到琼脂糖溶液中，煮沸。（4）待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分调匀、分装（20 ml/管）。 2、果蝇性别鉴定及形状观察 取白纸板平置于桌面，将麻醉的果蝇倒于白纸板上。于解剖镜下进行性状观察，并记录。 五、思考题及注意事项 1、通过对果蝇雌雄个体的鉴别，你认为哪几个特征在鉴别中是主要的？ 答：黑色条纹和性梳。在实体镜下即可清楚地观察到雄蝇的三条条纹（第三条较宽）和雌蝇的五条黑色条纹。肉眼可以观察到性梳为第一对附肢第二小节上的一个小黑点，若用显微镜观察则可以观察到清晰的梳状结构。 相比之下，其他几个特征就不太好观察。首先是体型，在实体镜下很难判断哪个个体体型大或小（放大倍数不同），除非将雌雄蝇一同对比看，而用肉眼基本看不出体型的区别。腹部形状也容易判断错。腹片由于没有特殊眼色，也较难观察数量差别。 2、叙述配制培养基以及果蝇观察时的注意事项。 答：(1)玉米粉一定要先用凉水拌匀后再加热，不能直接倒入加热的培养基中，否则容易聚集成团，不易溶解。配制的培养基容易出现块状，不易于果蝇的利用。 (2)酵母为活性物质，高温易失活。因此应当在培养基冷却到50℃左右时加入到培养基中，切勿将酵母粉加入到培养基中直接煮沸。 (3)将培养基倒入指瓶中时应悬空，不要把培养基沾到指瓶壁上。如不慎沾到，应用酒精棉球擦拭，擦拭过程中注意酒精不要滴到培养基上。 (4)本次观察所用果蝇为已麻醉过的果蝇，应注意如果在观察过程中果蝇醒来，要及时再麻醉，不要让其飞走。
果蝇基因图距的测量 实验日期：2013年4月15日– 2013年5月31日 组号：2-3 生17班姚远同组搭档：赵心怡 一、实验目的 1.通过果蝇杂交实验计算在同一染色体上控制三对性状的基因的相对位置、图距等参 数，理解和验证基因的连锁和交换定律。 2.掌握果蝇杂交的方法，深入了解果蝇生活史、世代周期。 二、实验原理 广泛用于遗传学研究的果蝇为黑腹果蝇(Drosophila melanogaster) , 属于果蝇科、果蝇属, 它作为遗传学模式生物有如下特点： 1)生活史长短随温度而不同； 2)成年雌性蝇类长到12小时才成熟，便于确保雌性蝇类是处女蝇； 3)繁殖能力强； 4)突变种类多，染色体数目少。 位于同源染色体上的非等位基因在形成配子时，多数随所在染色体一起遗传，若发生非姊妹染色单体之间的交换可产生少量的重组型配子。位于同一条染色体上的基因连在一起的伴同遗传的现象称为连锁（linkage）。连锁现象是英国遗传学家（W. Bateson）等人于1906年在香豌豆(Lathyrus doratus )杂交过程中发现。1911年摩尔根用果蝇做杂交实验，发现了同类现象，提出了连锁与互换的概念，称之为遗传学第三定律。 基因的交换率反映了两基因之间的相对距离。1910年，Morgen TH提出假设：假定沿染色体长度上交换的发生具有同等的几率，那么两个基因位点间的距离可以决定减数分裂过程中发生重组染色体的发生率，即重组分数。人们规定同一染色体上两个位点间在一百次减数分裂发生一次重组的机会时，定义两位点间的相对距离为一个cM(centimorgan)。根据基因在染色体上有直线排列的规律，把每条染色体上的基因排列顺序（连锁群）制成图称为遗传学图(genetic map)，亦称基因连锁图(gene-linkage map )。 三点测交就是通过一次杂交和一次测交，同时确定三对等位基因（即三个基因位点）的排列顺序和它们之间的遗传距离，是基因定位的常用方法。主要过程是：用三杂合体和三隐性个体杂交，获得三因子杂种（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置，即相当于进行三次两点测验，而且能在试验中检测到所发生的双交换。 通过对测交后代表型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离，并通过双交换频率计算并发率（coefficient of coincidence）和干扰。 完全连锁现象：雄性果蝇具有较为罕见的基因完全连锁现象。在雄性果蝇同一染色体上的基因不论其实际图距有多少，都不会发生减数分裂同源重组的现象。 三、实验材料及仪器 1.实验材料：
姓名班级同组人 科目遗传学实验题目果蝇的观察组别匙形翅 一、研究背景 果蝇（Drossphila）是遗传学试验中最常用的多年生物之一。属昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。果蝇的染色体数目少（仅四对），具有许多自然的或诱发的可遗传突变性状，世代周期短（25℃下10~12天一代，个体小易于饲养，培养费用低廉，繁殖能力强，后代数目繁多，故被作为遗传学实验的典型模式生物。后续实验要作果蝇的杂交实验，需要大量的果蝇，本次实验可以学会识别果蝇的各种形状、区分果蝇的性别以及基本的饲养方法，为后续的实验打下基础。 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)，果蝇科(Drosophilidae)果蝇属(Drosophila)昆虫。因其生活史短（在25℃左右温度下十天左右繁殖一代），繁殖力强（雌性可一次产下400个0.5毫米大小的卵），相对性状明显且可遗传，易于培养，培养成本低（酵母和细菌，腐烂水果），符合上述遗传学实验研究要求，同时因其染色体仅4对，基因组仅约165Mb，并且基因组超过60%的片段同人类疾病基因相似。故已将其作为一种常见的模式生物(model organism）大量使用在遗传学(genetics)和发育生物学(developmental biology)的研究。 二、实验目的 1、了解果蝇生活史，观察各发育阶段的形态特征 2、掌握麻醉瓶的使用，即果蝇麻醉技术 3、学会用肉眼（或解剖镜、显微镜）识别果蝇的性别，以及几种果蝇的特征（大 小、形态、条纹、性梳和外生殖器等）； 4、了解实验室饲养果蝇的常识方法和所用器械 5、熟练观察果蝇几种突变性状，为果蝇杂交系列实验做准备。 三、实验器材 解剖镜、蓝色塑料板（10cm*10cm）一张、小毛笔、解剖针、麻醉瓶、培养皿、实 验室饲养的黑腹果蝇野生型及其突变体（在果蝇瓶，即指管内）、镊子、酒精灯 四、实验试剂 乙醚、70%乙醇水溶液（含脱脂棉） 五、实验步骤 1、麻醉果蝇 观察果蝇要先把果蝇麻醉，使之处于昏迷状态，便于观察。具体步骤如下： （1）麻醉瓶灭菌 用70%的酒精擦拭麻醉瓶内壁，用镊子夹着在酒精灯上方烤干，注意镊子应与麻 醉瓶口大约成45°角，以免酒精高温产生的火舌产生伤害事件。 原因：做果蝇杂交实验时，转移、分拣果蝇需要无菌处理，否则将影响果蝇瓶中 酵母的生长，因而本次实验要求对其麻醉时需要灭菌。 （2）果蝇麻醉 将麻醉瓶冷却，用手背轻碰，直至不烫为止。拿出培养瓶，轻拍使果蝇震落到培 养基上。拔掉培养瓶的塞子，迅速将培养瓶口倒扣在麻醉瓶口上。向培养瓶瓶塞
果蝇杂交实验【实验目的】 通过实验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。 【实验原理】 1. 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有3000多种，我国已发现800多种。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用 以 果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生活史如下： 雌蝇→减数分裂→卵 受精 雄蝇→减数分裂→精子 羽化（第八天） （可活26～33天）产第一批卵
蛹（第四天） 第二次蜕皮第一批卵孵化 （第二天）（第零天） 第一次蜕皮幼虫 （第一天） 果蝇的生活周期和各发育阶段的经过时间 果蝇的性别及突变性状的鉴别： 果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。 色体上，直刚毛对焦刚毛为完全显性。用具有这两对相对性状的纯合亲本杂交，其性状的遗传行为应符合自由组合定律。 4. 生物某些性状的遗传常与性别联系在一起，这种现象称为伴性遗传（sex-linked inheritance），这是由于支配某些性状的基因位于性染色体上。果蝇属XY型生物，共有四对染色体，第一对为性染色体，其余三对为常染色体。雌果蝇的性染色体构型为XX，、雄果蝇为XY。控制果蝇眼色的基因位于X染色体上，在Y染色体则没有与之相应的等位基因。将红眼（+）果蝇和白眼（w）果蝇杂交，其后代眼色的表现与性别有关。而且，正反交的结果不同。 5. 不完全连锁基因在形成配子时，随同源染色体非姊妹染色体单体之间发生交换而交
专业班级：12级生物技术2班 实验日期：2014年3月5日到25日室温：20.12 °C （平均温度） 大气压：82.75 KPa （平均气压） 实验一：普通果蝇的形态和生活史观察 、目的： 1、观察并熟记果蝇的形态结构； 2、掌握果蝇培养基的制备方法； 3、掌握果蝇饲养管理的方法； 4、鉴定果蝇的雌雄性别； 5、观察并熟记果蝇的生活史。 、原理： （一）生物学特性： 1.1果蝇的形态特征: 黑腹果蝇属于果蝇科（Drosophilidae），双翅目昆虫。成虫具有一对发达、膜质的前翅，后翅特化为一对平衡棒。生活史短，繁殖快，易饲养，个体小体 型较小，身长3?4mm是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。
图一、普通野生型果蝇的形态图 1.2、果蝇的生活史： 本次实验采用野生型的红眼黑腹果蝇果蝇广泛存在于温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地内如果园，菜市场等地区内皆可见其踪迹。出啦南北极外，目前至少有1000个以上的果蝇物种被发现。大 部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。 在不供给食物的情况下，果蝇可存活50小时左右，在不供给水得情况下果蝇无法活过一天。蛹期果蝇在其正常5天生活周期下可取食其体重3~5倍的食物，雌果蝇在产卵期每日可取用与体重等重的食物。果蝇成虫的食物内需有糖类。而蛹期则可以只依赖酵母即可生育。 1.2.1、果蝇的生活史 图二、果蝇的生活周期图 1?卵 2 ?一龄幼虫 3 ?二龄幼虫 4 ?三龄幼虫 5 ?蛹 6 ?成虫（雄） 7 ?成虫（雌）
图三、果蝇生活史中各时期的典型图 生活史：果蝇的生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个连续的发育阶段（图11）。 121.1、卵：卵白色，长椭圆形，长约0.5mm在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。 121.2、幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，经过两次蜕皮到第三龄期，体长可达4?5mm在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。 1.2.1.3、蛹：幼虫生活七天左右即化蛹，化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一个棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，这就显示即将羽化了。 1.2.1.4、成虫：刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，身体较白嫩，此时野生型体色与黑檀体体色都是一样的，没有多大区别。不久，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深，如野生型果蝇的体色成为灰褐色，突变型黑檀体果蝇的体色成为乌黑色。 果蝇生活周期的长短与温度关系密切，30C以上时果蝇则将不育且濒临死亡, 低温则使它的生活周期延长，同时生活力也降低。培养果蝇的最适温度是20 ?25C。 1.3、果蝇的雌雄鉴别:
果蝇杂交实验报告 实验日期：2012年9月28日 -2012年10月20日 小组编号：周五5组 小组成员：白坦蹊陈朱媛呼波王启明 【摘要】 实验利用果蝇，这一常用的遗传学模式生物，进行杂交实验，验证了基因的分离定律、自由组合定律、伴性遗传、基因连锁交换等遗传学规律。报告对实验数据进行了卡方检验，对三隐性状中的基因遗传距离进行了计算，证明实验数据基本符合假设的。 【实验原理】 一、遗传定律 1.基因分离定律 一对等位基因在杂合状态中保持相对的独立性，在配子形成时，按原样分离到不同的配子中去，理论上配子分离比是1∶1，F2代基因型分离比是1∶2∶1，若显性完全，F2代表型分离比是3∶1 。 控制体色性状的突变基因位于2号常染色体，正常体色对黑体完全显性，用正常体色果蝇与黑体果蝇交配，得到F1代都是正常体色，F1代雌雄个体之间相互交配，F2代产生性状分离，出现两种表现型。 2.基因自由组合定律 不同相对性状的等位基因在配子形成过程中，等位基因间的分离和组合是互不干扰，各自独立分配到配子中去，它们所决定的两对相对性状在F2代是自由组合的，在杂种第二代表型分离比就呈9∶3∶3∶1。 控制体色性状的突变基因位于2号常染色体，正常体色对黑体完全显性，控制眼色性状的突变基因位于性染色体。红眼对白眼完全显性，用黑体红眼果蝇(♀)与正常体色白眼果蝇(♂)交配，得到F1代都是正常体色，F1代雌雄个体之间相互交配，F2代产生性状分离，出现四种表现型。 3.伴性遗传 位于性染色体上的基因，其传递方式与位于常染色体上的基因不同，它的传递方式与雌雄性别有关，因此称为伴性遗传。 果蝇的性染色体有X和Y两种，雌蝇为XX，雄蝇为XY。红眼与白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因(W)位于X染色体上，且红眼(W)对白眼(w)为完全显性。 当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，F1代雌性果蝇、雄性果蝇都为红眼，F2代雌性果蝇都是红眼，雄性果蝇红眼和白眼的比例为1∶1；当白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交时，F1代雌性果蝇为红眼，而雄性果蝇为白眼，此现象又称为绞花式遗传，F2代雌性果蝇的红眼与白眼比例为1∶1，雄性果蝇的红眼与白眼比例也是1∶1 。 4.连锁与交换定律 连锁是指在同一同源染色体上的非等位基因连在一起而遗传的现象；互换是指同源染色体的非姊妹染色单体之间的对应片段的交换，从而引起相应基因间的交换与重组。同一条染色体上的基因是连锁的，而同源染色体基因之间可以发生一定频度的交换，因此在子代中将发现一定频度的重组型，但一般比亲组型少得多。 5.基因定位 基因定位就是确定基因在染色体上的位置，确定基因的位置主要是确定基因之间的距离和顺序，而它们之间的距离是用交换值来表示的。只要准确地估算出交换值，并确定基因在染色体上的相对位置就可以把它们标志在染色体上，绘制成图。
果蝇杂交实验正式报告 姓名： 学号： 班级： 日期：年月日
果蝇的杂交实验 一、实验目的 1、了解伴性遗传和常染色体遗传的区别； 2、进一步理解和验证伴性遗传和分离、连锁交换定律； 3、学习并掌握基因定位的方法。 二、实验原理 红眼和白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因位于X染色体上，且红眼对白眼是完全显性。当正交红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，无论雌雄均为红眼；反交时雌蝇都是红眼，雄蝇都是白眼。 三、实验材料和器具 野生型雌蝇雄蝇，突变型雌蝇雄蝇、放大镜、麻醉瓶、毛笔、超净台、乙醚、酒精棉球、酵母、玉米粉、丙酸、蔗糖、琼脂 四、实验流程 配培养基→选处女蝇→杂交（正交，反交）→观察F1 五、实验步骤 1、配培养基 2、选处女蝇在超净台上选取野生型和突变型的雄蝇雌蝇 3、杂交 （1）正交取红眼雌蝇5个和白眼雄蝇4个，放入培养瓶中（♀）红眼（+ +x x w） x）×（♂）白眼（y （2）反交取红眼雌蝇3个和白眼雄蝇4个，（♀）白眼（w w x x）×（♂）红眼（y x+） 贴上标签，放于恒温箱饲养 4、观察并记录 分别将正反交的F1代用乙醚麻醉，倒在白纸上，分别数红白眼的雌蝇和雄蝇，记录数据。 六、实验结果与分析
在正交实验中，F1代雌雄硬都是红眼；在反交实验中，雌性都是红眼，雄性都是白眼，但也出现了个不该出现的雌性白眼分析：在伴性遗传中，也有个别例外产生，这是由于2条X不分离造成的，F1中出现的不该出现的雌性白眼，但是这种情况极为罕见。 七、注意事项 要经常观察，如果培养瓶内有生霉的，必须将果蝇转移到干净的培养瓶中 F1代幼虫出现即可将亲本放出或处死 要严格控制温度，偏高的温度或者偏低的温度都可能引起果蝇的死亡 亲本必须是处女蝇，其原因是雌蝇生殖器官有受精囊，可以保存交配所得的大量精子，能使交配后卵巢产生的卵受精。在杂交时若不是处女蝇，其体内已储有另一类型雄蝇的精子，会严重影响实验结果，导致整个实验失败。 在F1代羽化前，一定要将亲本全部清除干净并处死，以免出现回交现象，影响结果 果蝇的麻醉要适当，掌握好麻醉时间，麻醉过度会使果蝇直接死亡 取果蝇的时候用毛笔，避免用其他锋利的器具，避免戳伤果蝇，影响生长繁育 八、个人总结 第一次饲养果蝇，开始时感觉这么复杂和漫长的实验是一个很大
实验3 果蝇形态观察 一、实验目的 1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点； 2.区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征； 3.掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术。 二、实验材料、用具及试剂 双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、新毛笔、乙醚、酒精 1.果蝇的生活史 果蝇属于昆虫纲，双翅目，果蝇属，与家蝇 是不同的种。 果蝇的生活周期长短与温度关系很密切。 30℃以上的温度能使果蝇不育和死亡，低温则使 它的生活周期延长，同时生活力也降低，果蝇培养的最适温度为20-25℃。 10℃15℃20℃25℃ 卵→幼虫8天5天 幼虫→成虫57天18天 6.3天 4.2天从表中可以看出，25℃时，从卵到成虫约10天；在25℃时成虫约活15天。 卵：羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天后才能产卵。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。 幼虫：从卵孵化出来后，经过两次蜕皮，发育成三龄幼虫，此时体长可达4-5mm。肉眼可见其前端稍尖部分为头部，上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透明的唾液腺，透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的两侧，精巢较大，外观上是一明显的黑点，而卵巢则较小，可以此作为鉴别。幼虫活动力强而贪食，它们在培养基上爬行时，留下很多条沟，沟多而且宽时，表明幼虫生长良好。 蛹：幼虫生活7-8天准备化蛹，化蛹前从培养基上爬出，附着在瓶壁上，逐渐形成一梭形的蛹.在蛹前部有两个呼吸孔，后部有尾芽，起初蛹壳颜色淡黄而柔软，以后逐渐硬化，变为深褐色，表明即将羽化了。 成虫：幼虫在蛹壳内完成成虫体型和器官的分化，最后从蛹壳前端爬出。刚从蛹壳里羽化出来的果蝇虫体比较长，翅膀尚未展开，体表尚未完全几丁质化，
一、实验目的 了解果蝇的生活习惯，掌握果蝇饲养管理的方法，学习鉴定果蝇的雌雄性别，观察果蝇某些遗传性状。 二、实验原理 果蝇广泛存在于全球温带及热带气候区，在果园、菜市场等地皆可见其踪迹，目前已发现1000多种。果蝇以酵母菌为食，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。 黑腹果蝇，双翅目果蝇属。生活史短，每12天左右即可完成一个世代；饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500个左右；突变型多，突变性状多，多数是形态变异，容易观察；染色体少、个体小，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。 1、果蝇的生活史 果蝇是完全变态昆虫，生活周期可分为4个时期：卵、幼虫、蛹和成虫。最适培养温度为25~30℃。果蝇在25℃时，从卵至蝇需10天左右。由蛹羽化成的成虫，雄性在12小时内为处女蝇，24小时后开始产卵，每天每个成虫可产50-75个卵，10天内最高产卵总股数为400-500个。 卵：白色，椭圆形，长约，前端背面伸出一触丝，附着在食物上。 幼虫：一龄——二龄——三龄，三龄体长4-5 mm，幼虫头尖尾钝，头上有一黑色钩状口器。 蛹：化蛹前三龄幼虫停止摄食，爬到相对干燥的瓶壁上，形成菱形的蛹，形状由淡黄、柔软逐渐硬化为深褐色。 成虫：刚羽化的果蝇虫体较肥大，体表呈半透明，颜色逐渐加深，硬化。 2、果蝇的雌雄鉴别 果蝇是以酵母菌作为主要食料的，因此实验室内凡是能发酵的物质，都可用作果蝇的饲料，常用的饲料油玉米饲料、米粉饲料、香蕉饲料等。
三、动物与器材 黑腹果蝇品系：突变型（三隐性、黑体） 药品：乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。 培养箱、高压灭菌锅、电磁炉、解剖镜、搪瓷杯、玻棒、镊子、培养瓶、海绵塞、滤纸、酒精棉球、毛笔、麻醉瓶、白纸板。 四、实验内容 1、果蝇培养基配制 （1）清洁指管，盖上适当大小的瓶塞，置高压灭菌锅内，以121℃，大气压消毒15分钟，冷却备用。 （2）按配方称取培养基各组分。先取一半水加入琼脂于电磁炉上加热溶解，再加入蔗糖煮沸。 （3）取剩余的水将玉米粉调成糊状边搅拌边加入到琼脂糖溶液中，煮沸。（4）待稍冷后加入酵母粉和丙酸，充分调匀、分装（20 ml/管）。 2、果蝇性别鉴定及形状观察 取白纸板平置于桌面，将麻醉的果蝇倒于白纸板上。于解剖镜下进行性状观察，并记录。 五、思考题及注意事项 1、通过对果蝇雌雄个体的鉴别，你认为哪几个特征在鉴别中是主要的？ 答：黑色条纹和性梳。在实体镜下即可清楚地观察到雄蝇的三条条纹（第三条较宽）和雌蝇的五条黑色条纹。肉眼可以观察到性梳为第一对附肢第二小节上的一个小黑点，若用显微镜观察则可以观察到清晰的梳状结构。 相比之下，其他几个特征就不太好观察。首先是体型，在实体镜下很难判断哪个个体体型大或小（放大倍数不同），除非将雌雄蝇一同对比看，而用肉眼基本看不出体型的区别。腹部形状也容易判断错。腹片由于没有特殊眼色，也较难观察数量差别。 2、叙述配制培养基以及果蝇观察时的注意事项。 答：(1)玉米粉一定要先用凉水拌匀后再加热，不能直接倒入加热的培养基中，否则容易聚集成团，不易溶解。配制的培养基容易出现块状，不易于果蝇的利用。 (2)酵母为活性物质，高温易失活。因此应当在培养基冷却到50℃左右时加入到培养基中，切勿将酵母粉加入到培养基中直接煮沸。 (3)将培养基倒入指瓶中时应悬空，不要把培养基沾到指瓶壁上。如不慎沾到，应用酒精棉球擦拭，擦拭过程中注意酒精不要滴到培养基上。 (4)本次观察所用果蝇为已麻醉过的果蝇，应注意如果在观察过程中果蝇醒来，要及时再麻醉，不要让其飞走。 六、实验结果 1、三隐形个体的观察
果蝇杂交实验 【实验目的】 通过实验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。 【实验原理】 1. 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有3000多种，我国已发现800多种。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。以果蝇作为遗传学研究的材料，利用突变株研究基因和性状之间的关系已近一百年，至今，各种研究遗传学的工具已达完善的地步，果蝇对今日的遗传学的发展有其不可磨灭的贡献；从1980年初，Drs. C. Nesslein-Volhard和E. Weichaus以果蝇作为发育生物学的模式动物，利用其完备的遗传研究工具来探讨基因是如何调控动物体胚胎的发育，也带动了其它模式生物（线虫、斑马鱼、小鼠和拟南芥等）的研究，且有非常具体的成果。 通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。用果蝇作为实验材料有许多优点： ⑴饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 ⑵生长迅速。十天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间就可获得大量的子代，便于遗传学分析。 ⑶染色体数少。只有4对。
⑷唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。 ⑸突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。 果蝇的生活史： 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20～25℃。 生活周期长短与饲养温度的关系 果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生活史如下： 雌蝇→减数分裂→卵 受精 雄蝇→减数分裂→精子 第一批成虫 羽化（第八天） （可活26～33天）产第一批卵 蛹（第四天）
果蝇杂交实验实验报告 学号: 班级: 日期: 年 月 日果蝇得杂交实验 一、实验目得 1、了解伴性遗传与常染色体遗传得区别; 2、进一步理解与验证伴性遗传与分离、连锁交换定律; 3、学习并掌握基因定位得方法、 二、实验原理 红眼与白眼就是一对相对性状,控制该对性状得基因位于X染色体上,且红眼对白眼就是完全显性。当正交红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时,无论雌雄均为红眼;反交时雌蝇都就是红眼,雄蝇都就是白眼。 三、实验材料与器具 野生型雌蝇雄蝇,突变型雌蝇雄蝇、放大镜、麻醉瓶、毛笔、超净台、乙醚、酒精棉球、酵母、玉米粉、丙酸、蔗糖、琼脂 四、实验流程 配培养基→选处女蝇→杂交(正交,反交)→观察Ｆ１ 五、实验步骤 1、配培养基 2、选处女蝇 在超净台上选取野生型与突变型得雄蝇雌蝇 3、杂交 (1)正交 取红眼雌蝇5个与白眼雄蝇4个,放入培养瓶中(♀)红眼()×(♂)白眼()(2)反交 取红眼雌蝇３个与白眼雄蝇4个,(♀)白眼()×(♂)红眼()
贴上标签,放于恒温箱饲养4、观察并记录 分别将正反交得Ｆ1代用乙醚麻醉,倒在白纸上,分别数红白眼得雌蝇与雄蝇,记录数据。 六、实验结果与分析 在正交实验中,F1代雌雄硬都就是红眼;在反交实验中,雌性都就是红眼,雄性都就是白眼,但也出现了个不该出现得雌性白眼 分析:在伴性遗传中,也有个别例外产生,这就是由于2条X不分离造成得,F1中出现得不该出现得雌性白眼,但就是这种情况极为罕见。 七、注意事项 要经常观察,如果培养瓶内有生霉得,必须将果蝇转移到干净得培养瓶中F １代幼虫出现即可将亲本放出或处死要严格控制温度,偏高得温度或者偏低得温度都可能引起果蝇得 死亡亲本必须就是处女蝇,其原因就是雌蝇生殖器官有受精囊,可以保存交配所得得大量精子,能使交配后卵巢产生得卵受精。在杂交时若不就是处女蝇,其体内已储有另一类型雄蝇得精子,会严重影响实验结果,导致整个实验失败。 在F1代羽化前,一定要将亲本全部清除干净并处死,以免出现回交现象,影响结果果蝇得麻醉要适当,掌握好麻醉时间,麻醉过度会使果蝇直接死亡取果蝇得时候用毛笔,避免用其她锋利得器具,避免戳伤果蝇,影响生长繁育八、个人总结 第一次饲养果蝇,开始时感觉这么复杂与漫长得实验就是一个很大得担心,除此之外还有对于果蝇这种实验动物得畏惧也就是一个小小得障碍、但就是通过配培养基与随后得杂交等一系列得实验过程,我们越来越熟悉操作,感觉越来越得心应手。其实果蝇很干净,也很好饲养,更不烦人,渐渐地我们开始有些享受这一个长时间得实验,同时也在心里默默得感谢我们饲养得果蝇短暂得生命给我们带来得成果。实验过程长,要求也高。通过自己得全力以赴与与同伴得合作,我们最终完成了实验,我对自己得实验技能更加有信心,也体会到合作就是一件多美好得事情。另外还要真心得感谢邵老师与其她为我们实验前前后后付出辛劳得老师,在我们开始试验之前,您们已经为我们做了很多保证我们实验得成功与减轻我们得负担,实验过程中,还要随时回答我们无休止得奇怪问题,但老师始终都很
实验四：果蝇的杂交 姓名：许哲同组者：李永久 班级：生科08级学号：200805140167 实验时间：周二下午 摘要经典遗传学的三大遗传定律分别是：分离定律，自由组合定律和连锁与交换规律。果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的好材料，尤其在基因分离、连锁、交换等方面，对果蝇的研究更是广泛而充分。本次通过自行设计实验方案，观察后代中果蝇的各种性状，结合各种统计处理方法，从而证明这三大定律。 1．引言 孟德尔定律是G.J.孟德尔根据豌豆杂交实验的结果提出的遗传学中最基本的定律，包括分离定律和独立分配定律。孟德尔最早选用豌豆，根据从简单到复杂的原则，提出了分离定律和自由组合定律。对之后遗传学的发展奠定了基础。 分离定律（law of segregation）是指在生物的体细胞中，控制同一性状的遗传因子成对存在，不相融合；在形成配子时，成对的遗传因子发生分离，分离后的遗传因子分别进入不同的配子中，随配子遗传给后代。其表现在两个具有相对性状的纯种个体进行杂交，F1代全部表现显性个体的性状，F1代自交，F2代出现隐性个体的性状。并且，在理论上，F2代中，显性个体与隐性个体的比例为3:1。孟德尔最初使用豌豆的花色（红花和白花来验证）。理论如图所示： 图一：分离定律图示 自由组合定律（the Law of Independent Assortment）是指非同源染色体上的决定不同对性状的基因在形成配子时等位基因分离，不同对基因（非等位基因）之间互不干扰，其实质是F1产生配子时，等位基因分离，非同源染色体上的非等位基因自由组合。最初由孟德尔在做两对相对性状（豌豆的子叶颜色黄色，绿色，圆粒和绉粒）的杂交实验时发现，基因分离比为9:3:3:1。（如图所示）
专业班级：11级生物技术学号：20111052133 姓名：陆海云 实验日期：2013年4月12日室温：24.5℃大气压：82.38Kpa 实验一：普通果蝇的形态和生活史观察 一、目的： 1、了解果蝇的生活习性； 2、掌握果蝇培养基的制备方法； 3、掌握果蝇饲养管理的方法； 4、鉴定果蝇的雌雄性别和突变性状。 二、原理： 果蝇英文俗名fruit fly或vinegar fly ，果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地内如果园，菜市场等地区内皆可见其踪迹。除了南北极外，目前至少有1000个以上的果蝇物种被发现，大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。 ?果蝇(Drosophila )属于昆虫纲，双翅目。 双翅目：成虫具有一对发达、膜质的前翅， 后翅特化为一对平衡棒。 ?特点：生活史短，繁殖快，易饲养，染色体 少，突变型多，个体小是一种很好的 遗传学实验材料，是一种模式生物 生态学特征： 分布范围：果蝇类昆虫与人类一样分布于全世界，并且在人类的居室内过冬。由于体型小，很容易穿过砂窗，因此居家环境内也很常见。 生活环境：有些种生活以腐烂水果上。有些种则在真菌或肉质的花中生活。在垃圾筒边或久置的水果上，只要发现许多红眼的小蝇，即是果蝇；果 蝇类幼虫习惯孳生于垃圾堆或腐果上。 生物学特征： 中国科学家最近发现，小果蝇对危害人类健康的家居装饰材料所散发的有毒气体非常敏感，这种有毒气体一般被称为“隐形杀手”。 作为一种真核多细胞昆虫，果蝇有类似哺乳动物的生理功能和代谢系统，对空气质量非常敏感。 通过李曙光（上海同济大学基础医学院院长）科学家的一个有趣的实验，我们发现果蝇的异常表现能反应室内空气污染。在实验中，在一个10平米的新电表房设置五组果蝇，适应各种装修材料甲醛，苯，氨和氡。每组设两点，分别是0.5米（人体躺下来的高度）和1.7米（人体站着的高度）。每一个点，科学家放40种果蝇来检测空气污染度。实验结果表明，800个果蝇的平均寿命从正常的50天到25天左右，缩短了一半。这些死亡的果蝇数在每一个测试点几乎是相同
果蝇杂交实验对遗传学三大定律的验证 摘要：经典遗传学的三大遗传定律分别是：分离定律，自由组合定律和连锁与交换定律。根据本学期遗传学实验中对果蝇的实验，包括亲本的选择，果蝇的杂交，观察后代中果蝇的各种性状，结合各种统计处理方法，来验证这三大遗传定律。 关键词：遗传学分离定律自由组合定律连锁与交换定律果蝇杂交 果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便等特点，是研究遗传学的好材料，尤其在基因分离、连锁、交换等方面，对果蝇的研究更是广泛而充分。分离定律是一对等位基因在 杂合状态中保持相对的独立性，在配子形成时，按原样分离到不同的配子中去。自由组合定律是位于非同源染色体上的两对基因，它们所决定的两对相对性状在杂种第二代是自由组合的。连锁与互换定律是同一条染色体上的基因是连锁的，而同源染色体基因之间可以发生一定频度的交换，因此在子代中将发现一定频度的重组型，但一般比亲组型少得多[1-2]。 1.实验材料与方法 1.1实验材料 1.1.1 用具 显微镜，麻醉瓶，培养瓶，滤纸，毛笔，标签，恒温培养箱，超净台 1.1.2材料 野生型果蝇原种（A），小翅、白眼、焦刚毛突变型果蝇原种(B) 1.1.3实验用品 乙醚，乙醇，培养基 1.2实验流程1. 2.1收集处女蝇 从4月14日晚8点早8点开始收集处女蝇 1.2.2亲本杂交 选择合适的果蝇组合进行杂交。具体组合形式如下表所示： 表一亲本果蝇组合类型 只雄蝇放入新的培养管中，并贴上标签，写上杂交组合、实验时间、实验者的姓名等内容。相同操作进行反交实验。将培养瓶置于25℃下培养一周。 1.2.3杂交一代二代 将培养瓶中所有亲本果蝇清除，继续培养一周，并配置新的培养基，以备第三周用。从正反交组合中的F1中各挑选出两对果蝇，放入一个新的培养瓶，贴上标签，在25℃下继续培养。同理获得F2代并杂交F2代。 1.2.4 鉴别果蝇不同性状 观察并记录正反交组合中F1代F2代中果蝇的性状和个数。 2.实验结果
实验目的 了解果蝇的生活习惯，掌握果蝇饲养管理的方法，学习鉴定果蝇的雌雄性别和某些遗传性状。 二、实验原理 果蝇是遗传学研究重要的实验材料和模式生物，属双翅目果蝇科。因为其易于饲养，染色体数目少，具有许多天然的或诱发的可遗传突变性状等优点而受到全世界遗传学家学家的广泛关注和使用，并且利用果蝇解决了一系列重大的遗传学问题。我们的果蝇杂交实验，是重走经典科学研究之路，也能掌握一定的实验方法和技能，也有利于我们今后的学习和研究。目前已发现1000 多种果蝇，果蝇以酵母菌为主要食料，能发酵的水果或植物基质，都可用作果蝇的饲料。 果蝇具有以下特征：生活史短，每12 天左右即可完成一个世代；饲养容易，以玉米粉等做饲料就可以生长繁殖；繁殖能力强，每只受精的雌蝇可以产卵500 个左右；突变型多， 突变性状多，多数是形态变异，容易观察；染色体少、个体小，是一种很好的遗传学实验材料，是一种模式生物。 三、实验材料及仪器 实验材料：各种形态的果蝇。 实验试剂：乙醚、酒精、丙酸、酵母粉、琼脂、玉米粉、白糖。实验仪器：培养瓶、麻醉瓶、瓶塞、冰袋、体视显微镜一台、解剖针、滤纸、毛笔、白瓷板、酒精棉球、玻璃板、小烧杯。 四、实验方法 1、搬移果蝇至新培养瓶或麻醉瓶 取新培养瓶一瓶，将棉塞略为松动，放置于右手侧，取欲转移之果蝇培养瓶置于左手侧，以左手握住瓶颈，两指轻扣棉塞顶部，以右手轻拍瓶底使果蝇掉落于培养基表面，将培养瓶置于左手侧，拔起棉塞以左手两指夹住棉塞外端，再将置于右手侧之新培养瓶棉塞拔起，以右手两指夹住棉塞外端，再以右手将新培养瓶倒扣于旧培养瓶上，再以左手握住两瓶口相接处，翻转使新培养瓶位于下方，然后以右手掌心轻拍新培养瓶瓶底，使果蝇掉落于新培养瓶瓶底，然后迅速盖上各瓶棉塞。 2、麻醉方法 取一麻醉瓶，瓶口应与培养瓶大小相仿，使两瓶口相对，培养瓶在上，用手拍击培养瓶， 使果蝇落入麻醉瓶内，迅速盖上棉塞，滴加 3 滴乙醚于小管口中的棉花上，约一分钟左右果蝇倒卧于瓶底，即可将果蝇倒出进行操作。 注意：过度麻醉将导致果蝇死亡。如果果蝇的翅膀与身体呈45 度角翘起，表明麻醉过度，不能复苏。 3、观察、计数 取白瓷板平置于桌面，将麻醉的果蝇倒于白瓷板上，解剖镜或低倍显微镜下进行性状观察，并将雌雄果蝇分开放置。 接种观察过的果蝇（2-3 对）到新配置的培养瓶中，为避免麻醉的果蝇直接掉落于培养基表面而粘着于培养基表面致死，先将培养瓶横放，将麻醉的果蝇用毛笔转移到瓶壁，待其苏醒后再将培养瓶正立。
传学设计性实验报告 实验名称果蝇杂交实验 学院生命科学学院 专业生物技术 班级名称 学生姓名 学号 任课教师 完成日期2015年11月15日 教务处制 1前言 1.1 实验目的 通过实验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果
蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。 1.2 实验原理 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有3000多种，我国已发现800多种。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。以果蝇作为遗传学研究的材料，利用突变株研究基因和性状之间的关系已近一百年，至今，各种研究遗传学的工具已达完善的地步，果蝇对今日的遗传学的发展有其不可磨灭的贡献；从1980年初，Drs. C. Nesslein-Volhard和E. Weichaus以果蝇作为发育生物学的模式动物，利用其完备的遗传研究工具来探讨基因是如何调控动物体胚胎的发育，也带动了其它模式生物（线虫、斑马鱼、小鼠和拟南芥等）的研究，且有非常具体的成果。 通常用作遗传学实验材料的是果蝇。用果蝇作为实验材料有许多优点： ⑴饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 ⑵生长迅速。十天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。 ⑶染色体数少。只有4对。 ⑷唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。 ⑸突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。 果蝇的性别及突变性状的鉴别： 果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。 果蝇的雌雄在幼虫期较难区别，但到了成虫期区别相当容易。雄性个体一般较雌性个体小，腹部环纹5条，腹尖色深，第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳（Sex combs）。雌性环纹7条，腹尖色浅，无性梳。 实验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定，例如红眼与白眼，正常翅与残翅等。 2 实验材料 2.1果蝇品系 正交：2#（雌）×6＃（雄）反交：2#（雄）×6＃（雌） 2.2实验用具、药品 显微镜、培养瓶、棉塞、量筒、麦片、玉米粉、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等 3实验方法 3.1、果蝇的饲养 3.1.1 培养基的配制（以100ml量为例） 70ml水 + 0.85g琼脂 +
一、研究背景 果蝇（Drossphila）是遗传学试验中最常用的多年生物之一。属昆虫纲，双翅目，果蝇科，果蝇属。果蝇的染色体数目少（仅四对），具有许多自然的或诱发的可遗传突变性状，世代周期短（25℃下10~12天一代，个体小易于饲养，培养费用低廉，繁殖能力强，后代数目繁多，故被作为遗传学实验的典型模式生物。后续实验要作果蝇的杂交实验，需要大量的果蝇，本次实验可以学会识别果蝇的各种形状、区分果蝇的性别以及基本的饲养方法，为后续的实验打下基础。 黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)，果蝇科(Drosophilidae)果蝇属(Drosophila)昆虫。因其生活史短（在25℃左右温度下十天左右繁殖一代），繁殖力强（雌性可一次产下400个0.5毫米大小的卵），相对性状明显且可遗传，易于培养，培养成本低（酵母和细菌，腐烂水果），符合上述遗传学实验研究要求，同时因其染色体仅4对，基因组仅约165Mb，并且基因组超过60%的片段同人类疾病基因相似。故已将其作为一种常见的模式生物(model organism）大量使用在遗传学(genetics)和发育生物学(developmental biology)的研究。 二、实验目的 1、了解果蝇生活史，观察各发育阶段的形态特征 2、掌握麻醉瓶的使用，即果蝇麻醉技术 3、学会用肉眼（或解剖镜、显微镜）识别果蝇的性别，以及几种果蝇的特征（大 小、形态、条纹、性梳和外生殖器等）； 4、了解实验室饲养果蝇的常识方法和所用器械 5、熟练观察果蝇几种突变性状，为果蝇杂交系列实验做准备。 三、实验器材 解剖镜、蓝色塑料板（10cm*10cm）一张、小毛笔、解剖针、麻醉瓶、培养皿、实 验室饲养的黑腹果蝇野生型及其突变体（在果蝇瓶，即指管内）、镊子、酒精灯 四、实验试剂 乙醚、70%乙醇水溶液（含脱脂棉） 五、实验步骤 1、麻醉果蝇 观察果蝇要先把果蝇麻醉，使之处于昏迷状态，便于观察。具体步骤如下： （1）麻醉瓶灭菌 用70%的酒精擦拭麻醉瓶内壁，用镊子夹着在酒精灯上方烤干，注意镊子应与麻 醉瓶口大约成45°角，以免酒精高温产生的火舌产生伤害事件。 原因：做果蝇杂交实验时，转移、分拣果蝇需要无菌处理，否则将影响果蝇瓶中 酵母的生长，因而本次实验要求对其麻醉时需要灭菌。 （2）果蝇麻醉 将麻醉瓶冷却，用手背轻碰，直至不烫为止。拿出培养瓶，轻拍使果蝇震落到培 养基上。拔掉培养瓶的塞子，迅速将培养瓶口倒扣在麻醉瓶口上。向培养瓶瓶塞 中的棉团滴2至3滴乙醚，再次轻拍培养瓶，使果蝇掉入麻醉瓶内，当有足够数 量的果蝇落入麻醉瓶内时，重新盖上塞子。部分果蝇向上爬，爬得越高摔得越狠， 因为离乙醚最近，便会被麻醉，片刻，果蝇纷纷掉落瓶底。 原因：果蝇被麻醉了 2、果蝇的观察 将麻醉的果蝇置于解剖镜下，用小毛笔（最好不用解剖针）轻轻的拨动观察，使