实验四植物的各类组织
种子植物的组织结构按照其发育特点，可分为两大类，即分生组织和成熟组织。分生组织细胞在植物的一生中始终具有分裂能力，一方面增加新细胞到植物体中，另一方面使自己永存下去。成熟组织是由分生组织分裂的一些细胞在后来的生长发育过程中陆续分化而失去分裂的能力，所形成的有特定功能的细胞。按成熟组织的功能又可以分成营养组织、保护组织、输导组织、机械组织和分泌组织。在不同种植物、植物体不同的器官和植物发育的不同阶段，组织结构有所不同。
一、实验目的
1．能说出植物的分生组织、薄壁组织、保护组织、输导组织和机械组织的基本形态结构特点。
2．能从植物器官中辨认各种植物组织。
3．学习徒手切片法
二、重点与难点
重点：植物的分生组织、薄壁组织、保护组织、输导组织和机械组织的基本形态结构特点。
难点：辨认植物器官中各种植物组织
三、教学方法
利用电视显微系统示范讲解后，学生自己观察，教师检查并回答学生的问题
四、器材和试剂
1．植物材料玉米或洋葱根尖纵切永久制片、丁香茎尖纵切永久制片、南瓜茎横切及纵切永久制片、松茎的横切及纵切永久制片、松茎（2年生以上）、泡桐、葡萄或杨树等木本植物茎（2年生以上）、具有表皮毛的叶（向日葵、茄、天竺葵等）、柑橘果实、芹菜叶柄和秋海棠的叶。
2．实验器材显微镜、剪刀、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、滴管、培养皿。
3．实验试剂I2—KI染液、铬酸离析液。
五、操作步骤
1. 分生组织
（1）取玉米根尖纵切永久制片，先在低倍镜下观察，再用高倍镜。植物根尖顶端有一帽状的根冠，其内圆锥状的部分染色深，细胞小，细胞核相对较大，细胞质浓厚，没有明显的液泡，无分化，为原分生组织。原分生组织上方略有分化的组织，为初生分生组织，其表面是原表皮，表皮以内染色较淡的是基本分生组织，中央染色较深的部位为原形成层。注意观察：初生分生组织的细胞形态特点，有无正在分裂的细胞；如果观察到了正在分裂的细胞，注意观察其分裂的方向；初生分生组织的细胞之间有无细胞间隙？
（2）取丁香茎尖纵切永久制片观察，茎尖切片中有很多幼叶，幼叶之中包藏着顶端分生组织。茎的顶端分生组织同样也有原分生组织和初生分生组织，初生分生组织中同样分化为原表皮层、基本分生组织和原形成层，注意与根中的区别是什么？
在茎尖切片中，除最先端的原分生组织外，还可找到位于茎尖侧芽原基中的原分生组织，在一些发育较早的侧芽中还可以看到原形成层。
（3）将木本植物茎的“树皮”剥开，能体会到最易剥开的部位，特别是春天植物生长旺盛的时候，即为形成层所在的部位。从“树皮”被撕开的面上用刀刮取一薄层细胞制作临时装片，可以从中观察形成层细胞的形态特点。由于较难刮剧真正的形成层，这些细胞仅仅是与形成层形态相近的细胞。想想这是为什么？
2．保护组织
（1）撕取天竺葵叶表皮制成临时装片，观察其表皮细胞、气孔器的形态结构。可用I2—KI染液染色，观察细胞核的位置和叶绿体的分布。注意细胞间的排列、细胞间有无间隙。（2）取一些具表皮毛的叶，在体视镜下观察其表皮毛的形态。表皮毛有不同的形态结构特点；想想不同类型的表皮毛是如何起保护作用的？
3．输导组织
（1）取南瓜茎横做切永久制片，用放大镜观察找到10束排列成星状的维管束，这些维管束被埋在薄壁组织中。在低倍镜下，可以看到维管束中有数个直径很大的导管，中空，其壁被染成红色。具有导管的部分是木质部，从木质部向外，可以找到形成层，形成层外侧和木质部内侧是韧皮部。用高倍镜观察，维管束细胞排列紧密，可以见到有些细胞具有很多筛孔的筛板，有些较老的筛板被染成红色。韧皮部中大部分筛管（直径与筛板相似的细胞）没有被切到筛板的横切面，其细胞质稀薄，无细胞核。在一些筛管之间，还有规则地排列着一些直径较小的细胞，即伴胞。伴胞的细胞质浓，具有细胞核。
（2）观察南瓜茎的纵切永久制片，找出木质部中的导管、韧皮部中的筛管和伴胞，并仔细观察筛板。在维管束外，可以观察到被染成红色的长形的细胞，成群分布，此为木纤维。4．利用离析材料观察茎中的组织
在显微镜下，从葡萄、杨树等被子植物茎木质部的离析材料中可以观察到导管、管胞、木纤维和薄壁细胞的单个细胞。比较导管、管胞、木纤维的异同。在松茎中，只能找到管胞，而找不到导管和木纤维。注意观察松茎管胞上的具缘纹孔。
5. 厚角组织的观察
将芹菜叶柄或薄荷茎制成徒手切片，直接制片或用0，001％的钌红水溶液染色5 min 制成临时装片。置于显微镜下，观察叶柄或茎的棱角处，在表皮和维管束之间有一团厚角组织，细胞壁较厚，并有光泽，可被钌红染成红色。
6. 分泌组织
（1）在松茎的永久制片中，木质部及韧皮部中都有树脂道。树脂道的上皮细胞分泌树脂至空腔中。注意观察上皮细胞的特点。
（2）取柑橘外果皮，观察其上透明的小囊，挤压果皮，小囊中有什么物质溢出？将果皮制成切片，在显微镜下观察，小囊为一空腔，其中有什么物质？
六、作业 1. 绘图：分生组织在植物体内的分布。2. 绘叶表皮结构图。
思考题
1. 列表比较导管、管胞、筛管和伴胞在形态、结构、输导功能以及在植物体分布上的异同。
2. 比较厚角组织、厚壁组织在形态结构与功能上的异同？
3．以向日葵为材料，设计实验观察研究厚角组织是否会发育为厚壁组织。
探索性实验
种子植物是在地球上占统治地住的植物类群。它们体内的输导组织很发达，能很好地适应陆生环境。在种子植物中，裸子植物是比较原始的类群，被子植物是植物界中最高等的类群。很多学者认为，木兰目植物是比较原始的被子植物。
可以由3或4个同学组成一个小组合作，根据以上观点，选择同一生境下生长的不同类群的种子植物，用离析法研究种子植物木质部细胞的异同。将实验结果填入表中，并回答问题。｜
回答问题：
在种子植物中，较原始的种类与较高等的种类在木质部组成及结构方面存在哪些差异？这些差异与功能之间有什么关系？
植物组织培养实验基本步骤 一、母液的配置 1、MS大量元素母液的配制 将大量元素配制成10倍的母液，使用时再稀释10倍。按照配方表中用量依次分别称取扩大10倍的：NH4NO3 、KNO3 、KH2PO4 、 MgSO4·7H2O 、CaCl2·2H2O ，所有药品称取完毕后用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，最后定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 2、MS微量元素母液的配制 将微量元素配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别依次称取：MnSO4· 4H2O 、ZnSO4·7H2O 、 H3BO3 、KI 、CuSO4·5H2O 、CoCl2·6H2O ，用蒸馏水逐个溶解，待全部溶解后，用容量瓶定容至500ml，转入500ml细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 3、MS铁盐母液配制 将铁盐配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：称
FeSO4·7H2O 和Na2·EDTA ，把FeSO4·7H2O和Na2·EDTA·2H2O分别置于200ml蒸馏水中，加热并不断搅拌使之溶解（磁力搅拌器，边加热，边搅拌）。保持加热，把FeSO4溶液慢慢倒入Na2·EDTA溶液中并不断搅拌，接近沸腾时停止加热，待溶液冷却后加蒸馏水到最终容积500ml，置于棕色细口瓶中，用力振荡1～2min，贴上标签，注明母液名称、放大倍数、配制日期、配制人姓名。在室温下避光保存一段时间令其充分反应后，再置于4℃冰箱中保存备用。 4、MS有机化合物母液的配制 将有机化合物配制成100倍的母液，使用时再稀释100倍。按照配方表中用量分别称取扩大100倍的：肌醇、维生素B1 、烟酸、甘氨酸、维生素B6 、蔗糖，用蒸馏水依次溶解并定容至500ml后，转入500ml 细口试剂瓶中，贴上标签，注明母液名称、配制日期、配制人姓名，置于4℃冰箱中保存备用。 二、植物激素的配置 常见激素：二氯苯氧乙酸（2，4－D）、萘乙酸（NAA）、吲哚乙酸（IAA）、吲哚－3－丁酸（IBA）、激动素（6-糠氨基嘌呤、 KT）、6－苄氨基嘌呤（6－BA）、赤霉素（GA3）、 1、生长素类： （1）、生长素类在组织培养中的主要作用是：诱导细胞的分裂和根的分化，诱导愈伤组织
甘肃农业大学农学院 药用植物组织培养实验指导 柳福智编 农学院中草药栽培与鉴定教研室 2007年8月 前言 药用植物组织培养实验是根据中草药栽培与鉴定专业的培养要求，为学生开设的一门实验课程。药用植物组织培养实验的任务是使学生加深对药用植物组织培养基本理论的理解，掌握药用植物组织培养实验的基本操作技能，学习药用植物组织培养实验的基本知识，养成严格、认真和实事求是的科学态度，提高观察、分析和解决问题的能力，为将来参加工作打下良好的基础。 编者 2007年8月 学生实验守则 1、实验前认真预习，领会实验原理，明确本次实验的目的和要求，了解实验步骤和注意事项。
2、实验时要严格按照规范操作进行，仔细观察实验现象，认真记录有关数据。 3、要认真写好实验报告，实验报告要清楚、简练、整洁。 4、学生进入实验室必须严格遵守实验室规则，服从带教老师的指导。 5、爱护实验室的仪器设备，不准将实验室的仪器设备私自带出室外。 6、严格遵守操作规程及实验时应注意的事项，在使用不熟悉其性能的仪器和药品之前，应查阅有关资料或请教指导教师，不要随意进行实验，以免损坏仪器，浪费试剂，使实验失败，更重要的是预防发生意外事故。 7、实验过程中应注意防火灾、防爆炸、防腐蚀、防污染工作，牢固树立“安全第一”意识。 8、实验结束后，一切仪器试剂应放回原处，玻璃仪器要清洗干净，一些有毒、有腐蚀性的废液应倒入废液缸内。 9、实验台面要擦试干净，由值日生负责安全卫生工作，包括清理实验室，检查水、电的开关，清除垃圾和污物，关好门窗后方可离开实验室。 药用植物组织培养实验报告一般包括以下内容和要求： （1）实验名称、实验日期。 （2）实验目的写明通过本实验要达到的训练目的。
扬州市植物组织培养实验室建设指导方案 （试行） 一、建设目的 植物组织培养是20世纪30年代初期发展起来的一项生物技术。在快速繁育、种苗脱毒、远缘杂交、突变育种、基因工程和生物制品等方面都得到了应用。植物组织培养技术涉及到多项高中生命科学课程中的基础知识，例如：细胞全能性原理、细胞增殖、细胞分化、植物激素及生命的基本元素和物质等。在生物选修一《生物技术》教材中，组织培养已经作为一个专题实验，成为高中升学考试的一个考点。组织培养作为一项生物技术，它对学生的动手能力和科学素养都提出新的要求，使学生能够在知识层面、能力层面和情感层面上达到了全面的拓展。 二、建设要求 组织培养实验室面积一般为96-120平方米，学生实验依据无菌间超净工作台的多少分组进行，原则上6~8人一组。 组织培养实验基于对无菌条件的严格要求，由准备室、缓冲间、无菌室、培养室和炼苗室四部分组成。 1、准备室 功能：进行一切与实验有关的准备工作。完成所使用的各种药品的贮备、称量、溶解、器皿洗涤、培养基配制与分装、培养基和培养器皿的灭菌、培养材料的预处理等。 设备：准备室应具备实验边台、药品柜、水池、仪器、药品、天平、纯水机（制作组织培养基用水）、酸度计、烘干箱、高压灭菌锅、超声波清洗器及常用的培养基配制用玻璃仪器等。 2、缓冲间 功能：是进入无菌室前的一个缓冲场地，减少人体从外界带入的尘埃等污染物。 要求：缓冲间需5～8平方米，保持清洁无菌。缓冲间需安装紫外线灭菌灯，用以照射灭菌。 3、无菌间 功能：也叫接种室，主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的转移、试管苗的继代、原生质体的制备以及一切需要进行无菌操作的技术程序，是植物离体培养研究或生产中最关键的一步。
植物组织培养实验报告 Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。 植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件
把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加
如对你有帮助，请购买下载打赏，谢谢！ 院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件 把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分；微量元素种类全，浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。 6.生长调节物质 包括天然植物激素额人工激素类似物。植物激素是一类植物自身合成、同时对其生长发育具有重要调节作用的有机化合物。生长调节物质对于离题培养中的细胞分裂分
植物组织培养实验室 (组培室规划设计 2009年 05月 31日星期日 10:18一、实验室要求 理想的组织培养实验室应该建立在安静、清洁、远离污染源的地方, 最好在常年主风向的上风方向, 尽量减少污染。规模化生产的组织培养实验室最好建在交通方便的地方, 便于培养产品的运送。 实验室的建设均需考虑两个方面的问题:一是所从事的实验的性质, 即是生产性的还是研究性的, 是基本层次的还是较高层次的; 二是实验室的规模, 规模主要取决于经费和实验性质。 无论实验室的性质和规模如何,实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足 3个基本的需要:实验准备 (培养基制备、器皿洗涤、培养基和培养器皿灭菌、无菌操作和控制培养。此外,还可根据从事的实验要求来考虑辅助实验室及其各种附加设施,使实验室更加完善。 在进行植物组织培养工作之前,首先应对工作中需要哪些最基本的设备条件有个全面的了解, 以便因地制宜地利用现有房屋, 或新建、改建实验室。实验室的大小取决于工作的目的和规模。以工厂化生产为目的,实验室规模太小,则会限制生产,影响效率。在设计组织培养实验室时, 应按组织培养程序来没计, 避免某些环节倒排, 引起日后工作混乱。植物组织培养是在严格无菌的条件下进行的。要做到无菌的条件, 需要一定的设备、器材和用具, 同时还需要人工控制温度、光照、湿度等培养条件。 二、实验室组成 (一基本实验室 基本实验室包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是组织培养实验所必须具备的基本条件。如进行工厂化生产,年产 4万 -20万, 需 3-4间实验用房,总面积 60平方米。
植物组织培养实验复习题 一、名词解释 1、大量元素:指含量占生物总重量万分之一以上的元素，包括C、H、O、N、P、S、K、C、Mg等。 2、微量元素:含量占生物总重量万分之一以下的元素。 3、植物生长调节剂:人工合成的对植物的生长发育有调节作用的化学物质。 4、外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官 5、细胞全能性：植物体的每个细胞都含有该植物全部的遗传信息。 6、基础培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人工配置的营养基质。 7、愈伤组织:人工培养基上由外植体组织的增生细胞产生的一团不定形的疏松排列的薄壁细胞。 8、褐变:植物组织中多酚氧化酶被激活，使酚类物被氧化成醌类物，可抑制其他酶活性，毒害外植体。 9、茎尖脱毒:茎尖分生区的病毒传播速度很慢，利用茎尖组培获得无病毒苗，来达到脱毒的目的。 10、不定芽：凡从叶、根或芽节间或是离体培养的愈伤组织上等通常不形成芽的部位生出的芽。 11、污染率：污染数除以接种数，再乘以100%。 12、诱导率：愈伤数除以未污染数，再乘以100%。 13、成活率：成活数除以未污染数，再乘以100%。 14、接种：将表面消毒的外植体转接到无菌的培养基上的过程。 15、消毒：消灭材料上的病菌（不损伤植物材料）。 16、灭菌：利用物理或化学的方法，达到组织培养所学的无菌环境。 17、母液：欲配培养液的浓缩液。 18、无病毒苗：指不含该种植物的主要危害病毒，即经检测主要危害病毒在植物内的存在表现为阴性反应的苗木。 19、植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体，培养在无菌培养基上和人工控制的环境中，使其生长、分化、增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。 20快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式 21、继代培养：继代培养是指愈伤组织在培养基上生长一段时间后，营养物枯竭，水分散失，并已经积累了一些代谢产物，此时需要将这些组织转移到新的培养基上的培养方式。 22、生根培养：将长到一定长度的微枝（>10mm）转移到生根培养基上培养。 23、玻璃化现象：试管苗的茎叶变成透明水渍状，生长畸形，增殖系数明显下降，难以诱导生根，即使诱导生根，其根系质量极差，移栽成活率极低。 24、暗培养： 25、液体培养：将所需培养物的悬浮液在液体培养基中培养的方法。 26、脱分化：一个成熟细胞回复到分生状态或胚性细胞状态的现象。 27、分化：由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变或发育方式改变的过程。 28、热处理脱毒：利用高温下使植物组织中的病毒部分钝化或完全失去活性的方法。 1 / 6 29、微尖嫁接技术：把极小（<0.2mm）的茎尖作为接穗嫁接到实生砧木上（无菌种子培养获无菌
《园林植物组织培养》课程标准 适用专业：园林技术、烟草栽培技术 第一部分前言 植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物材料（器官、组织、细胞、原生质体等）培养在人工控制的条件下，使其再生形成完整植株的技术。进入21世纪，生物技术发展迅猛，在植物生产中的应用愈来愈多，植物组织培养也成为生产中不可或缺的一种手段。基于工作过程的《植物组织培养》课程开发与设计，坚持以服务为宗旨，以就业为导向，直接面向生产实践，构建学校与企业供需和谐的技术平台，通过分解组培工作过程能力，将组培企业生产环节模块化，工作过程项目化、任务化，采用多种教学方法与手段，培养具有敬业精神和协作能力的专业技术人才。 一、课程性质 《植物组织培养》是园林技术、烟草栽培技术专业学习领域中的专业核心技术课程，是基于植物组织培养生产过程，突出培养学生组织培养操作技能应用的一门工学结合的课程。 本课程重视实践能力的培养，强调通过项目实战、理论与实训一体等方法，激励学生主动思考和大胆实践，进而形成积极的职业态度和和熟练的职业能力。 该课程以《植物及植物生理》、《植物生长与环境》等为前导课程，学习完本课程，学生直接进入顶岗实习阶段，在园林技术专业职业能力培养中起到了明显的支撑作用。 二、课程设计思路 围绕“工学结合，能力为本”的理念，通过校企合作，共同开发，根据组培具体工作岗位的典型工作任务，依照岗位对组培工作的职业能力要求，兼顾学生未来的可持续发展，运用项目引导教学、现场教学、企业实景教学等多种教学方法和手段，以培养学生组培职业工作能力为重点，选取教学内容。 1、面向职业岗位，注重素质结构 本课程是面向组培企业培养基制作工、组织培养接种工和组培苗驯化管理员3个岗位的需要，培养掌握组培核心职业能力的专业人才，提倡在全面素质结构基础上培养职业能力。 2、基于工作过程，建立职场环境 根据组培工作的内容，依照一般组培的工作流程，组织课程内容。依托“洋兰组培生产任务”、“铁皮石斛有机基质无土栽培技术研究”等课题，充分利用真实职业环境，组织参与真实职业活动，积累经验，锻炼学生的心智，培养学生合作共事能力，并使学生熟练掌握职业所需的主要知识、技能、态度和关键能力。 3、采用项目途径，开展体验参与 本课程构建“教、学、做一体”教学模式，以项目为载体，让学生在教师的指导下，通过实践、参与和合作等方式，实现项目目标，感受成功。在学习过程中进行情感和策略调整，以形成积极的学习态度，促进职业能力的提高。 4、注重过程评价，促进学生发展 建立能激励学生学习兴趣和自主学习能力发展的评价体系。注重学生学习的积极性和自信心。评价要有利于促进学生综合能力和健康人格的发展，促进教师不断提高教育教学水平，促进本课程的不断发展与完善。
植物组织培养实验报告 一实验目的 让植物组织经过脱分化作用，形成愈伤组织，经过再分化作用，愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。 二实验原理 植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要的作用，吲哚乙酸（IAA ）和 6 –苄基氨基腺嘌呤（6 – BA ）的比例，决定了根和芽的分化。 三实验器材 （一）试剂 乙醇、IAA 或 2 ，4 – D 、HgCl 2 （或次氯酸钠）、6- 苄基氨基腺嘌呤（6-BA ） MS 培养基 （二）仪器设备 培养室，高压灭菌锅，水浴锅，解剖刀，三角烧瓶（100mL ），烧杯，量筒，培养皿，超净工作台，分析天平，长镊子，剪刀，橡皮筋等 三实验步骤 1. 配制培养基 （1 ）愈伤组织诱导培养基：MS 培养基（蔗糖含量为10 g/L ，2,4 – D 含量为 2 mg/L ，琼脂10 g/L ）。 （2 ）试验培养基：在MS 培养基中按表33 – 1 加入IAA 和6–BA 。 吲哚乙酸先用少量0.1 mol/L NaOH 溶解，6- 苄基氨基腺嘌呤先用少量0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸馏水稀释，再加入培养基中。 2. 培养基灭菌 将配好的培养基加入琼脂加热溶解，调至pH 5.8 ，趁热分装于100 mL 三角烧瓶中，每瓶约20 mL 。待培养基冷却凝固后，用两层称量纸包扎瓶口，并用橡皮筋扎牢，然后在高压灭菌锅中121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下灭菌20 min 。取出三角烧瓶放在台子上，
实验四植物组织 一、目的与要求 掌握各类植物组织的形态结构特点，学会在植物的器官中识别各种组织。 二、材料与用具 新鲜材料：蚕豆、天竺葵、向日葵、八宝、紫竹梅等植物叶，柑橘果皮、芹菜叶柄、梨果实和秋海棠的叶，马铃薯块茎、南瓜茎和蓖麻茎皮的组织离析材料。 永久制片：玉米或洋葱根尖纵切，茎尖顶芽纵切，小麦、玉米叶的表皮，接骨木幼茎和老茎的横切，小麦、玉米种子的纵切，水稻、黑藻、眼子菜的茎横切，南瓜茎横切及纵切，松茎三切面，多年生椴树茎横切。 用具：显微镜、放大镜、剪刀、镊子、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿、I2-KI染液。 三、内容与方法 （一）分生组织 1．根尖分生组织观察 取玉米或洋葱根尖纵切永久制片观察，先用低倍镜找出细胞最小、染色最深，核大、细胞质浓厚、没有明显的液泡的区域为分生区，即为根端生长锥，细胞没有任何的分化，有着强烈持久的分裂能力，称原分生组织。在其前端有一帽状的根冠，注意观察有无正在分裂的细胞，如果有是处于哪一个分裂期？根尖的后一部分的细胞已有初步的分化，其最外一层细胞为原表皮，在其与原表皮之间的区域为基本分生组织，中央染色较深的部位为原形成层（图4-1）。 图4-1 洋葱根尖 2．茎尖分生组织观察 取黑藻茎尖纵切永久制片观察（图4-2），在切片中有很多幼叶，幼叶之中包藏着顶端分生组织，即茎的生长锥。它比根尖分生区复杂，因为在生长锥周围有叶原基和腋芽原基的发生和形成。注意识别叶原基突起仅有两层细胞厚，而腋芽原基有多层细胞的半圆形突起。
图4-2 黑藻茎尖 1.生长锥 2.腋芽原基 3.叶原基 4.幼叶 观察丁香等陆生植物茎尖纵切永久制片，寻找茎尖分生组织所在的部位，可见茎尖生长锥上叶原基和腋芽原基的发生均靠近前端，结构复杂，但它们的原形成层分化明显，为纵向伸长的、着色较深的维管组织的前身，胞质浓厚。 3．居间分生组织观察 取玉米茎尖没有拔节时的嫩茎节间基部的居间分生组织纵切片观察，可见大部分染色浅的细胞，相当于基本分生组织，薄壁的细胞多呈横向伸长的扁平状态，除纵向分裂者外，横向分裂极为明显，而且出现了程度不同的液泡化。而局部相当于原形成层束的细胞纵列呈索状，细胞呈等直径形或细长形，胞核密集、染色很深，并常见有原生木质部贯穿于其中的原始维管束。 （二）保护组织 1．取新鲜的植物叶（豌豆、天竺葵、向日葵等），撕取下表皮一小块，制成临时装片观察。可以见到表皮细胞形状不规则，表皮细胞之间有气孔器分布。每一气孔器有一对肾形的保卫细胞，内含一细胞核和较多的叶绿体，保卫细胞之间的缝隙即为气孔（图4-3）。可用I2-KI 溶液染色，使含淀粉的叶绿体变成紫黑色，而细胞核呈暗黄色来区分叶绿体和细胞核。 图4-3 豌豆叶下表皮 1.气孔 2.保卫细胞 3.表皮细胞 2．取一些具有表皮毛的植物如天竺葵的叶，撕其表皮制成临时装片，观察不同形态的表皮毛。 3．取小麦或玉米叶的下表皮装片观察。其表皮主要由排列紧密的长方形的表皮细胞组成，在长细胞之间夹有成对的短细胞、表皮毛和气孔器。气孔器的两个保卫细胞呈哑铃形，它的两端壁薄，膨大成球状，其胀缩变化直接影响气孔的启闭，中部狭窄，壁较厚，在哑铃
《植物组织培养技术》实验指导 实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌 一、目的要求： 1．通过参观，了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。 2．通过实际操作，学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。 二、材料用具： 高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。三、说明： 在进行各类具体的组培实验前，首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的，总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。 植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染，第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒，使它们保持无菌状态，
做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧，因此每个学生必须学好这套基本功。 四、方法和步骤： 首先在老师带领下参观组培室，并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克，溶解在500ml在水中，然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸（或废硫酸）配好的溶液呈红色，铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止。此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。 每人清洗部分玻璃器皿，方法：清水洗净→泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷→清水反复冲洗→蒸馏水淋一遍→烘干备用。 然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸，即用洗衣粉洗刷后冲洗干净→晾干→侵入酪酸洗液，浸泡时间视器皿的肮脏程度而定→清水反复冲洗干净→蒸馏水淋洗一遍→烘干备用。 带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时，再用水冲洗，凉干后浸入洗液，以后的步骤同前。 对器皿和用具进行高压灭菌，即用手提式高压灭菌锅，在1.1个大气压下保持15~20分钟。解剖刀、手术剪、解剖针、镊子等用具在接
实验四 植物组织中核酸的提取和测定 一、 实验目的 1.掌握从植物组织中提取核酸的方法。 2.掌握RNA 、DNA 的定性鉴定方法。 二、实验原理 用冰冷的稀三氯乙酸或稀高氯乙酸溶液在低温下抽提植物组织匀浆，以除去酸溶性小分子物质，再用有机溶剂，如乙醇、乙醚等抽提，去掉脂溶性的磷脂等物质。最后用浓盐溶液(10％氯化钠溶液)和0.5mol ／L 高氯酸(70℃)分别提取DNA 和RNA ，再进行定性鉴定。 由于核糖和脱氧核糖有特殊的颜色反应，经显色后所呈现的颜色深浅在一定范围内和样品中所含的核糖和脱氧核糖的量成正比，因此可用此法来定性、定量测定核酸。 1.核糖的测定 测定核糖的常用方法是苔黑酚(即3，5－二羟甲苯法(Orcinol 反应))。当含有核糖的RNA 与浓盐酸及3，5－二羟甲苯在沸水浴中加热10～20分钟后，有绿色物产生，这是因为RNA 脱嘌呤后的核糖与酸作用后生成糠醛，后者再与3，5－二羟甲苯作用产生绿色物质。 2.氧核糖的测定 测定脱氧核糖的常用方法是二苯胺法。含有脱氧核糖的DNA 和二苯胺在沸水浴中共沸10分钟后，产生蓝色。这是因为DNA 嘌呤核苷酸上的脱氧核糖与酸生成ω－羟基－6－酮基戊醛，它再和二苯胺作用产生蓝色物 质。 此法易受多种糖类及其衍生物和蛋白质的干扰。 上述两种定糖的方法准确性较差，但快速、简便，能鉴别DNA 与RNA ，是鉴定核酸、核苷酸的常用方法。 三、仪器、原料与试剂 仪器：恒温水浴锅、离心机、吸管、量筒、电炉、布氏漏斗装置、 烧杯、剪刀。 原料：新鲜菜花(花椰菜) 试剂： 1. 95％乙醇：600mL 2. 丙酮：400mL 3. 5％高氯酸溶液：200 mL 4. 0.5mol/L 高氯酸溶液：200mL 5. 10％氯化钠溶液：400mL 6. 标准RNA 溶液(5mg/100mL)：50mL 7. 标准DNA 溶液(15mg/100mL)：50mL 8. 粗氯化钠：250g 9. 海砂：5g 10. 二苯胺试剂60mL 将1g 二苯胺溶于100 mL 冰醋酸中，再加入2.75 mL 浓硫酸(置冰箱中可保存6个月。使用前，在室温下摇匀)。 11. 三氯化铁浓盐酸溶液：25mL 将2 mL10％三氯化铁溶液(用FeCl3〃6H2O 配制)加入到400 mL 浓盐酸中。 12. 苔黑酚乙醇溶液：200mL 溶解6g 苔黑酚于100 mL95％乙醇中(可在冰箱中保存1个月)
植物组培实验个人总结 一、项目简介 我们在实验中以植物为研究对象，通过对它们进行组织培养来观察植物的生长状况、激素对植物的促进作用、植物的褐化以及对它的改良等等。我们最初是对柳树、紫玉兰和栀子花这三个易于培养的植物进行实验，探索培养植物的方法以及如何能减少褐化。等到技术熟练后我们会开始进行一些与人们健康息息相关的植物的研究，去探索如何如何能够用最低的成本使得我们的植物成活以及对它们进一步的应用。 二、本人在项目研究中承担的工作及发挥的作用 本人在此次大学生创新性实验当中主要负责的是进行培养基的配制和植物的接种工作。培养基在配制过程中需要准确的数据，所以在配制培养基时需要较长的时间。我们现在进行的实验中我自己主要进行的是对母液和激素的称取以及植物的接种。我们现在正在锻炼自己对植物培养的技术性。并且，我们每个人需要对培养基配制和接种工作非常熟练，再去进行下一步更深入的工作。从我们称取药品开始到培养基灭菌结束共需要10小时左右时间，因此我们团队需要协商好每个人负责的项目。同时，由于我们团队的成员并非同一班级，我们需要把时间分配好，以免造成时间的盲区从而导致植物没人照看而出现问题。由于实验数据的准确性直接关系实验结果的测定，因此在本实验中占有重要的地位，测定过程中要求有很好的理论知识的基础和动手实际的能力，并且注重责任感。所以在实验的初期，查阅各种相关文献资料，了解实验注意事项，深刻理解实验原理，熟悉实验操作步骤，分析实验中可能遇到的问题和影响实验结果的因素。在实验初期制定实验规划，整理实验思路，过程中不断适当调整。积极配合其他成员完成实验。实验结束后，整理实验仪器，清洗实验器材。对实验的全过程认真负责，积极动手，遵守正确的实验要求。对此次实验的成功也发挥积极的作用。
人教版高中生物选修一《植物的组织培养技术》教学设计一、项目目标 （一）知识目标 1.掌握植物组织培养技术的基础知识：植物组织培养的概念、类型、培养基成分。 2.理解植物组织培养技术的基本原理：植株的再生性、植物细胞的全能性、植物生长调节剂对植物器官形成的作用等。 3. 熟练基本工作程序：培养基配制、外植体选择、外植体灭菌、诱导培养、增殖培养、生根培养、驯化移栽。 （二）学科能力目标 1. 充分利用提供的资源，形成快速阅读并收集和分析资料的能力。 2. 能够在教师的指导下根据所选课题自主设计实验，并写出包含实验设计、实验过程与安排和结果分析等内容在内的实验报告。 3. 掌握植物组织培养实验室的基本结构及仪器设备使用规范。 4. 掌握培养基的配制方法及无菌操作技术规范，能够准确说出实验流程。
5.探究不同因素对组培实验的影响，并能够对实验中出现现象进行尝试性解释。提高学生的创新能力与自主探究能力。 6.了解植物组织培养产业链，根据组培植物的培养条件及生活习性对学校光伏大棚进行规划设计。培养学生的校园主人翁意识与社会责任。 7.进行植物组织培养文化产品的设计与制作。 （三）素养目标 1.能运用科学的思维方式解决现实问题，独立思考，勇于探索，逐步形成科学思维。 2.在观察组培植物生长的过程中，激发学生热爱自然、热爱科学的情感与兴趣，培养学生的生命观念。 3.在参与实验、现象观察、数据调研的过程中，发现问题、解决问题提高科学探究素养、创新意识和创新能力。 4.结合植物组织培养的生产实际，帮助学生深刻体会生物学在生产实践中的应用。
5. 超长战线的实验使学生彼此交流沟通，分工合作，集体观念和团队精神增强。在师生之间、学生之间实现智慧和友谊的碰撞与交流。 二、项目教学重、难点 1. 学习重点：植物组织培养技术的过程和应用。 2. 学习难点：植物组织培养过程中各环节的条件。 三、项目教学策略和方法 1. 教学策略：启发式教学策略、探究式教学策略、反馈式教学策略 2. 教学方法：讲授法、实验法、多媒体演示法、归纳法、比较法、体验法、合作教学法 四、项目教学过程 任务一：植物组织培养概述与基础理论 1. 阅读植物组织培养文献资料。（课下） 2. 学习植物组织培养概述、基本操作流程及植物组织培养的应用。（课上） 3. 参观青岛农业大学植物组培实验室。（课下）
院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师范）年级13级学号17130208 姓名组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6 指导老师实验名称植物组织培养综合实验 一、实验目的 1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法 2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法； 3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法； 4.了解组织培养的基本程序； 5.掌握接种的方法和材料的培养过程； 6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术； 7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体； 8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别 二、实验原理 1.植物细胞的全能性 一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。 2.植物细胞表现出全能性的条件 1.离体状态； 2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）； 3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型 3.无菌条件 把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。 4.脱分化与愈伤组织 已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。 5.培养基 植物组织培养常用的培养基为MS培养基。常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。琼脂的用量一般在4—10克／升之间。琼脂的凝固能力除与原料、厂家的加工方式等有关外，还与高压灭菌时的温度、时间、pH值等因素有关，长时间的高温会使凝固能力下降，过酸过碱加之高温会使琼脂发生水解而丧失凝固能力，存放时间过久，琼脂变褐，也会逐失去凝固能力。MS培养基属于富盐平衡培养基，特点是：无机盐浓度较高，元素间的比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲性，因而在培养的过程中可维持较好的稳定性；营养丰富，在一般培养中无须额外加入复杂的有机成分；微量元素种类全，浓度高。这类培养基是目前使用最广泛的培养基。 6.生长调节物质 包括天然植物激素额人工激素类似物。植物激素是一类植物自身合成、同时对其生长发育具有重要调节作用的有机化合物。生长调节物质对于离题培养中的细胞分裂分化、器官形成和个体再生等均起着重要而明显的调节作用。一般来说，基本培养基只能保证培养物的生存，维持其最低的生理活动，而只有植物激素的配合使用，才能完成离体培养物中按照需要设计的各个调节环节。常用的植物组培激素种类主要有生长素类、细胞分裂素类、赤霉素。
植物组织培养实验及实习指导 杨玲编 西南林学院生物技术教研室
目录 实验一、母液的配制和保存 (2) 实验二、培养基的配制与灭菌 (5) 实验三、外植体消毒与初代培养的建立 (7) 实验四、继代与增殖培养 (9) 实验五、生根培养 (1) 1 实验六、植物茎尖脱毒培养 (1) 3 实习试管苗的炼苗与移栽 (1) 5
实验一、母液的配制和保存 一、实验目的 通过配制MS培养基母液，掌握贮备液的配制和保存方法。 二、原理 配制培养基时，为了使用方便和用量准确，通常采用母液法进行配制，即按培养基配方中各试剂的用量，扩大若干倍后再准确称量，分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存。使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。 以MS培养基为例，所需配制的母液为：大量元素母液（母液Ⅰ，浓缩20倍）、微量元素母液（母液Ⅱ，浓缩200倍）、铁盐母液（母液Ⅲ，浓缩200倍）和有机化合物母液（母液Ⅳ，浓缩200倍）等。 三、实验材料、试剂和仪器设备 1．试剂 NH 4NO 3 , KNO 3 , CaCl 2 ·2H 2 O, MgSO 4 ·7H 2 O, KH 2 PO 4 , KI, H 2 BO 3 ， MnSO 4 ·4H 2 O, ZnSO 4·7H 2 O, Na 2 ·MoO 4 ·2H 2 O, CuSO 4 ·5H 2 O, CoCl 2 ·6H 2 O, Na 2 ?EDTA?2 H 2O，FeSO 4 ·7H 2 O，烟酸，甘氨酸, 盐酸硫胺素, 肌醇, 盐酸吡哆醇, 蒸馏水 2．仪器设备 冰箱，天平，酸度计或pH试纸，烧杯（50ml，100ml，500ml，1000ml），量筒(1 000ml，100ml，25ml)，容量瓶(1000ml，500ml，100ml)，磨口试剂瓶(500ml，1 000ml)，药勺、称量纸、酸度计或pH试纸，滴管、玻璃棒，电炉，微波炉 四、实验方法 1.大量元素母液的配制
实 验 报 告 实验名称：植物的各种组织课程名称：植物学实验 学院：专业班级：姓名：小组成员：日期：指导老师：
一、实验目的 1.巩固显微镜的使用方法； 2.了解分生组织的位置以及功能； 3.掌握植物体各种成熟组织的分布以及功能； 4.了解不同组织细胞的结构特点。 二、实验原理 1.光学显微镜成像原理：物体先经过物镜成放大的实像，再经目镜成放大的虚像，二次放大，便能看清楚微小的物体。光线通过凹透镜后，成正立虚像，而凸透镜则成正立实像。实像可在屏幕上显现出来，而虚像不能。 2.细胞分化是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。细胞分化的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达，通过不同基因表达的开启或关闭，最终产生标志性蛋白质。 3.植物组织由来源相同和执行同一功能的一种或多种类型细胞集合而成的结构单位。植物组织包括五大基本组织：保护组织、输导组织、营养组织、机械组织、分生组织。植物组织的出现是植物进化层次更高的标记。在植物的系统发育过程中，多细胞植物的出现为组织的发生提供了基础。在多细胞群体型植物向多细胞有机体的进化过程中，群体型个体的细胞间由于所处的位置不同，受到环境的影响也不同。处于不同位置的细胞群间便出现了相异的形态特征和生理代谢活性与类型的分化。植物的进化程度愈高，其体内细胞（群）间的分工愈细，植物体的结构愈复杂，适应性愈强。被子植物是现存植物中高度发达和适应性的植物类群，具有最完善的组织分工，在形态结构和生理功能上表现出高度的统一，适应环境的能力也最强。 三、实验材料以及器材 1.材料：蚕豆叶片、树木2~3年生枝条、南瓜茎纵横切片、梨果实、玉米茎横切片、洋葱根尖永存片和梨茎尖永存片。
实验植物抗逆性的测定（电导仪法） 一实验目的 进一步理解和认识逆境胁迫对植物细胞膜透性的影响，了解电导法在植物逆境生理与抗性育种研究中的应用范围。 二、实验原理 在正常生长状况下，植物细胞膜保持着良好的选择透性，而当植物组织受到逆境（例如干旱、低温、高温、盐渍等）伤害时，由于膜脂过氧化、膜蛋白变性及膜脂流动性改变，造成膜相变和膜结构破坏，使得细胞膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，胁迫强度越大，伤害越重，外渗越多，电导率的增加也越大。同时也与植物抗逆性的强弱有关，抗性越强，伤害越轻，外渗越少，电导率的增加也越小。所以，通过测定外渗液电导率的变化，就可以反映出细胞膜的伤害程度和所测材料抗逆性的大小。 三、材料、仪器和试剂 1. 材料： 各种植物叶片（如丁香、小麦等） 2. 仪器设备： 电导仪；天平；恒温箱；真空干燥器；抽气机；恒温水浴锅；烧杯；剪刀或打孔器； 吸水纸；纱布等。 3.试剂：去离子水 四、实验步骤 1．容器的洗涤： 电导法对水和容器的洁净度要求严格，所用容器必须彻底清洗，再用去离子水冲净，倒臵于洁净滤纸上备用。 2．试验材料的处理： 选取正常生长的小麦或其他植物相同部位叶片若干，剪下后，先用纱布拭净，分成2份，将其中一份放臵50℃左右的恒温箱中处理30min，进行逆境胁迫处理。另一份放臵在室温下作对照。 3. 测定步骤 (1) 将处理组叶片与对照组叶片用去离子水冲洗2次，再用洁净滤纸吸净表面水分，各称取2g，然后剪成长约1cm小段放入小烧杯中（大小以够容电极为度），并用玻璃棒压住，在杯中准确加入蒸馏水20ml，浸没叶片。将其放入真空干燥器中，用抽气机抽气7～8min以抽出细胞间隙中的空气；重新缓缓放入空气，水即被压入组织中而使叶片下沉。（注：材料为
T 植物细胞组织培养技术实验指导书 中国计量学院生命科学学院 二零零六年七月 《植物细胞组织培养》实验指导
目录 实验一、植物组织培养培养基母液的配制实验二、植物组织培养的培养基配制 实验三、康乃馨的离体快繁 实验四、胡萝卜愈伤组织的建立 实验五、组织培养物的继代培养
一、实验一组织培养基母液的配制 一、仪器及药品 冰箱、天平（0。0001g） 容量瓶:1000ml,500ml、250ml、100ml、25ml 广口储液瓶:500ml、250ml、50ml、25ml 烧杯：1000ml、500ml、250ml、100ml、50ml 数十根玻璃搅棒、大药勺、小药勺或挖耳勺 标签纸、胶水、50％酒精、95％酒精、1mol/L盐酸、1mol/LNaOH 几种常用的培养基所需的大量元素、微量元素、有机物、激素、铁盐等 药品 蒸馏水 二、方法和步骤： 按照培养基配方，把大量元素、微量元素、铁盐、有机物、植物激素 培养基各种母液的配制步骤如下: 分类,每一类中各种药品分别称量,如N 6 大量元素母液：包括用量较大的几种化合物〈见N 培养基配方〉，按表中 6 排列顺序，将每种药品的用量扩大10倍,分别称取，分别溶解，然后按照顺序混合在一起。如钙盐等易发生沉淀的药品不能混合，应单位定容，最后加上蒸馏
水,定容至1升或500毫升。在定容时注意用蒸馏水洗净烧杯和玻璃搅棒以减少误差。定容后的溶液为大量元素母液,配制培养基时，每配1L培养基需吸取该母液l00ml或50ml。 微量元素母液:因用量少，为了称量精确和方便,常配成100倍或1000倍的母液，即每种药品扩大l00倍或者l000倍。逐个溶解，混合在一起成为微量元素母液，每配1LN 6 培养基需吸取该母液10ml或者1ml。 铁盐：在N 6培养基中需要单独配制,它是由硫酸亚铁(FeSO 4 ?7H 2 O）2.78 g和 乙二氨四乙酸二钠(Na 2 —EDTA）3.73 g，分别溶解，混合后,用酒精灯加热半小 时以上，冷却后定容至1 L。冰箱过夜贮藏无结晶析出，否则重新配制。每配l 升N 6 培养基需加该铁盐母液5ml.