1.7卡拉胶对蛋白质消化性影响的研究进展
蛋白质的消化受几个因素的高度影响，包括胃环境(pH值和酶活性)、蛋白结构和其他存在于胃肠道内的食物成分。研究表明通过食物处理过程比如加热和高压处理可以使蛋白质结构的改变，也可以影响蛋白质水解的速率和模式。（1 N. St˘anciuc, I. van der Plancken, G. Rotaru and M. Hendrickx, Rev. Roum.Chim., 2008, 53, 921–929.
2 M. R. Peram, S. M. Loveday, A. Ye and H. Singh, J. Dairy Sci.,2013, 96, 63–74.
3 I. O'Loughlin, B. Murray, P. Kelly, R. FitzGerald and A. Brodkorb, J. Agric. Food Chem., 2012, 60, 4895–4904.）近几年来，学者们研究发现通过对蛋白质外表面构造的修饰和减弱外表面的联结网络的形成，表面活性剂的存在会进一步增加蛋白质的水解。（8 J. Maldonado-Valderrama, A. P. Gunning, P. J. Wilde andV. J. Morris, So Matter, 2010, 6, 4908–4915.）在食物处理过程中，通过构象的改变和与其他成分结合，蛋白质的消化方式可能会发生改变。
两种大分子单独存在不能形成凝胶，而混合后却能形成凝胶体，且其凝胶特性随蛋白质—多糖质量比、混合环境pH值和处理温度以及离子强度而变化。蛋白质与多糖两种大分子在溶液中共存时，一些如温度、pH等物理条件适宜时，大分子上的部分基团可以相互连接，形成聚合物产生一些独特的性质，最终影响蛋白质的消化性。
蛋白质化学性质研究近三十年来取得了飞速的发展，扫描电镜、SDS-PAGE、流变等新技术的应用，使人们更加深入的了解蛋白质结构，蛋白质一、二、三、四级结构的阐明推动了结构研究的进程。卡拉胶的研究主要在于其结构的探测，以及其特性的研究。
尽管蛋白质和多糖各自在模拟胃环境中的消化行为已经研究得很深入了，但是很少有关注蛋白质和多糖混合系统的研究。每一种高分子的消化行为都能被同存的其他物质所影响。
(13 C. Villaume, C. Sanchez and L. M´ejean, Biochim.Biophys.Acta, Gen. Subj., 2004, 1670, 105–112.)蛋白质与卡拉胶在水溶液中发生交互作用，从而影响蛋白质的消化性，可以从以下几个方面探究：
1.7.1蛋白质与卡拉胶在水溶液中的相容性与不相容性
蛋白质与多糖在水溶液中的交互作用主要有以下三种形式，即共溶(Cosolubility)、相容(Compatibility)及不相容(Incompatability)。[38] Samant S. K., Singhal R. S., Kulkarni P. R., et al. Protein-polysaccharide interactions: Anew approach in food formulations. International Journal of Food Science and Technology,1993, 28: 547-562
[39] Williams P. A., Phillips G O. Interaction in mixed polysaccharide systems. In A. Stephan(Ed).Food Polysaccharide and Their Applications. Marcel Dekker Inc., New York. 1995:463一500
[40] Doublier J. L., Garnier C., Renard D., et al. Protein-Polysaccharide interactions. Colloidand Interface Science, 2000, 5:202-214其中相容是指蛋白质与多糖能在水溶液中发生交互作用，大分子间互相吸引，通过共价键、静电相互作用及氢键等方式进行连接，形成络合物。
1.7.1.2蛋白质—卡拉胶交互作用凝胶形成原因
蛋白质和卡拉胶之间的络合发生在接近或低于蛋白质等电点的pH值,通常是由于带相反电荷的生物聚合物两者之间的静电相互作用。（21 S. Turgeon, C. Schmitt and C. Sanchez, Curr. Opin. Colloid Interface Sci., 2007, 12, 166–178.
22 C. Schmitt and S. L. Turgeon, Adv. Colloid Interface Sci., 2011,167, 63–70.）静电吸引力的大小在很大程度上取决于相交互大分子的电荷密度。（23 J.-L. Doublier, C. Garnier, D. Renard and
C. Sanchez, Curr. Opin. Colloid Interface Sci., 2000, 5, 202–214.
24 A. Ye, Int. J. Food Sci. Technol., 2008, 43, 406–415.
25 B. L. Sperber, H. A. Schols, M. A. Cohen Stuart, W. Norde and A. G. Voragen, Food Hydrocolloids, 2009, 23, 765–772.）带更高电荷密度的卡拉胶对蛋白质有更强的吸引力，在模拟不同区段的胃环境内，形成不同凝胶强度的凝胶，可能有不同的胃排空速度。
Bernal等（[24] Bernal, V.A. Interactions in protein /polysaccharide/calcium gels. J offood science,1987, 52(5):1121一1126），利用可破坏分子间作用力的物质来研究乳清蛋白与阴电性多糖类在混合水溶液中的交互作用。得出的结果证明阴电性多糖与蛋白质的交互作用以静电作用为主，而氢键、疏水交互作用的影响较小。蛋白质和多糖二种大分子的电荷密度、混合的浓度比例都影响交互作用的发生。而卡拉胶就是一种水溶性较好的阴性多糖，可以与蛋白质发生交互作用形成凝胶影响其消化。
1.7.1.3 蛋白质—卡拉胶交互形成的研究方法
将加热后的卡拉胶—蛋白质混合物打入模拟胃液中，胃环境能诱导凝胶结构自然发生。即使带正电的蛋白质和带负电的卡拉胶的比例很低的情况下。胃内凝胶的作用机制是当pH降到蛋白等电点以下，带正电荷的蛋白和带负电荷的蛋白通过静电作用相互吸引发生交联结合。(Hu B, Chen Q ,Cai Q.M. , Fan Y et al. Gelation of soybean protein and polysaccharides delays digestion [J]. Food Chemistry,2016)
1.7.2蛋白质—卡拉胶交互作用对蛋白质消化特性的影响
许多因素能影响蛋白质的功能性质，如pH值、温度及离子强度等。另外一个重要的因素就是食品体系中存在多糖，并与蛋白质发生交互作用，从而影响其功能特性。（孙哲浩,蛋白质与多糖类在水相介质中交互作用机理的研究[M],2001）蛋白质和卡拉胶的结合主要由于静电相互作用，很大程度取决于大分子的本性（分子量，结构和电荷密度）、加热时的PH、生物高聚物的比率和生物高聚物整个的浓度。（15 S. Peyron, J. Mou´ecoucou, S. Fr´emont, C. Sanchez and N. Gontard, J. Agric. Food Chem., 2006, 54, 5643–5650.）不同带点多糖与蛋白质联结形成的混合物，在模拟不同区段的胃环境内，形成不同凝胶强度的凝胶，可能有不同的胃排空速度。
在蛋白质基质中多糖的存在会引起蛋白质构象的改变，因此影响蛋白质的消化性，因为通过静电力的相互作用和多糖结合位于蛋白质上胃蛋白酶的接触位点可能会发生改变。另一方面，一直认为胃排空的速率对于短期食物的摄入起了重要的作用。在胃内低分解率的食物可能会延缓胃排空，因此增加饱腹感。有研究表明某种浓度的多糖会形成胃内凝胶延缓胃排空。考虑到带相反电荷的多糖和蛋白质在胃环境中非常可能聚集甚至出现胶状物质，这或许会改变蛋白消化的外表，延缓胃排空。（S Zhang and B Vardhanabhuti, Intragastric gelation of whey protein–pectin alters the digestibility of whey protein during in vitro pepsin digestion[J]. Food Funct., 2014, 5, 102）
孙哲浩,蛋白质与多糖类在水相介质中交互作用机理的研究[M],2001
1.7卡拉胶对蛋白质消化性影响的研究进展 蛋白质的消化受几个因素的高度影响，包括胃环境(pH值和酶活性)、蛋白结构和其他存在于胃肠道内的食物成分。研究表明通过食物处理过程比如加热和高压处理可以使蛋白质结构的改变，也可以影响蛋白质水解的速率和模式。（1 N. St?anciuc, I. van der Plancken, G. Rotaru and M. Hendrickx, Rev. Roum.Chim., 2008, 53, 921–929. 2 M. R. Peram, S. M. Loveday, A. Ye and H. Singh, J. Dairy Sci.,2013, 96, 63–74. 3 I. O'Loughlin, B. Murray, P. Kelly, R. FitzGerald and A. Brodkorb, J. Agric. Food Chem., 2012, 60, 4895–4904.）近几年来，学者们研究发现通过对蛋白质外表面构造的修饰和减弱外表面的联结网络的形成，表面活性剂的存在会进一步增加蛋白质的水解。（8 J. Maldonado-Valderrama, A. P. Gunning, P. J. Wilde andV. J. Morris, So Matter, 2010, 6, 4908–4915.）在食物处理过程中，通过构象的改变和与其他成分结合，蛋白质的消化方式可能会发生改变。 两种大分子单独存在不能形成凝胶，而混合后却能形成凝胶体，且其凝胶特性随蛋白质—多糖质量比、混合环境pH值和处理温度以及离子强度而变化。蛋白质与多糖两种大分子在溶液中共存时，一些如温度、pH等物理条件适宜时，大分子上的部分基团可以相互连接，形成聚合物产生一些独特的性质，最终影响蛋白质的消化性。 蛋白质化学性质研究近三十年来取得了飞速的发展，扫描电镜、SDS-PAGE、流变等新技术的应用，使人们更加深入的了解蛋白质结构，蛋白质一、二、三、四级结构的阐明推动了结构研究的进程。卡拉胶的研究主要在于其结构的探测，以及其特性的研究。 尽管蛋白质和多糖各自在模拟胃环境中的消化行为已经研究得很深入了，但是很少有关注蛋白质和多糖混合系统的研究。每一种高分子的消化行为都能被同存的其他物质所影响。 (13 C. Villaume, C. Sanchez and L. M′ejean, Biochim.Biophys.Acta, Gen. Subj., 2004, 1670, 105–112.)蛋白质与卡拉胶在水溶液中发生交互作用，从而影响蛋白质的消化性，可以从以下几个方面探究： 1.7.1蛋白质与卡拉胶在水溶液中的相容性与不相容性 蛋白质与多糖在水溶液中的交互作用主要有以下三种形式，即共溶(Cosolubility)、相容(Compatibility)及不相容(Incompatability)。[38] Samant S. K., Singhal R. S., Kulkarni P. R., et al. Protein-polysaccharide interactions: Anew approach in food formulations. International Journal of Food Science and Technology,1993, 28: 547-562 [39] Williams P. A., Phillips G O. Interaction in mixed polysaccharide systems. In A. Stephan(Ed).Food Polysaccharide and Their Applications. Marcel Dekker Inc., New York. 1995:463一500 [40] Doublier J. L., Garnier C., Renard D., et al. Protein-Polysaccharide interactions. Colloidand Interface Science, 2000, 5:202-214其中相容是指蛋白质与多糖能在水溶液中发生交互作用，大分子间互相吸引，通过共价键、静电相互作用及氢键等方式进行连接，形成络合物。 1.7.1.2蛋白质—卡拉胶交互作用凝胶形成原因 蛋白质和卡拉胶之间的络合发生在接近或低于蛋白质等电点的pH值,通常是由于带相反电荷的生物聚合物两者之间的静电相互作用。（21 S. Turgeon, C. Schmitt and C. Sanchez, Curr. Opin. Colloid Interface Sci., 2007, 12, 166–178. 22 C. Schmitt and S. L. Turgeon, Adv. Colloid Interface Sci., 2011,167, 63–70.）静电吸引力的大小在很大程度上取决于相交互大分子的电荷密度。（23 J.-L. Doublier, C. Garnier, D. Renard and C. Sanchez, Curr. Opin. Colloid Interface Sci., 2000, 5, 202–214. 24 A. Ye, Int. J. Food Sci. Technol., 2008, 43, 406–415.
蛋白多糖-又称黏多糖，为基质的主要成分，是多糖分子与蛋白质结合而成的复合物 蛋白多糖-又称黏多糖，为基质的主要成分，是多糖分子与蛋白质结合而成的复合物。多糖部分为糖胺多糖，又称氨基已糖多糖，由成纤维细胞产生，主要分硫酸化和非硫酸化两类。前一类主要有硫酸软骨素、硫酸角质素、硫酸肝素等；后一类为透明质酸，是曲折盘绕的长链大分子，构成蛋白质多糖复合物的主干，其他糖胺多糖则与蛋白质结合，形成蛋白多糖亚单位，后者再通过结合蛋白链与透明质酸长链分子形成蛋白多糖聚合体。 学术术语来源—— 温阳益髓中药干预兔膝骨关节炎软骨基质金属蛋白酶的表达 文章亮点： 1 实验的特点为发现温阳益髓中药对骨关节炎软骨中基质金属蛋白酶13表达的抑制作用极其显著，可以降低基质金属蛋白酶1的表达，其作用效果较盐酸氨基葡萄糖要略弱，对基质金属蛋白酶3表达具有显著的抑制作用，其作用强度比盐酸氨基葡萄糖更强。 2 作者认为，温阳益髓中药可以有效抑制软骨基质中基质金属蛋白酶的表达，通过抑制基质金属蛋白酶的表达减少软骨基质的降解，从而对关节软骨起到保护作用。 关键词： 组织构建；软骨组织工程；温阳益髓；中药；骨关节炎；基质金属蛋白酶；软骨；盐酸氨基葡萄糖；北京市自然科学基金 主题词： 骨关节炎；软骨；中草药；基质金属蛋白酶 摘要 背景：目前临床上关于温阳益髓中药治疗膝骨关节炎对软骨基质金属蛋白酶表达影响的研究还较少有报道。 目的：制作兔膝骨关节炎模型观察温阳益髓中药对软骨基质金属蛋白酶表达的影响。 方法：健康成年新西兰大白兔96只，随机选取72只采用石膏外固定方法制作兔膝骨关节炎模型。确定造模成功后再随机分为3组，模型组不做处理；中药治疗组每日灌胃方药提取液24 mL/kg，药物对照组每日灌胃葡立胶囊(盐酸氨基葡萄糖)24 mg/kg，1次/d，至造模成功后8周。另外24只新西兰大白兔作为空白对照。 结果与结论：PCR方法定量分析骨关节炎模型组软骨组织中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶13表达水平均显著高于其他3组。中药治疗组及药物对照组中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶13的表达较模型组明显降低。说明温阳益髓中药治疗兔膝骨关节炎能够有效抑制兔骨关节炎软骨基质金属蛋白酶的表达。 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程
植物多糖结构复杂，种类多样，分子量大，极性大，且常与蛋白质、脂质等结合成多糖复合物，生物活性也因其糖基的组成、排列顺序、连接方式、分支的位置等不同而相异，多糖骨架链间以氢键结合的各种聚合体，糖单位的羟基、羧基、氨基以及硫酸基之间的非共价键相互作用，多聚链间非共价键结合形成的聚集体，这些给多糖的提取分离带来了困难，加之多糖的提取方法和工艺尚未成熟和效率、成本等多方面的考虑，所以选择一种合适的提取分离方法对多糖的研究具有重大意义。 提取的多糖常混有蛋白质、色素等杂质，需进一步分离纯化，提高多糖纯度后，再对多糖组分进行分级。 2.1多糖中蛋白质的去除 蛋白质遇有机溶剂变性，常用氯仿与正丁醇按一定体积比组成的Sevage试剂，和三氯乙酸去除蛋白。也可根据酶的专一性选用蛋白酶，可除去大部分蛋白。蔡永红等〔25〕分别采用了Sevage法、三氯乙酸法和蛋白酶法去除栀子多糖中的蛋白质。Sevage法除蛋白后蛋白质含量为7.51%，三氯乙酸法为2.13%，蛋白酶法为4.23%。三氯乙酸作用强烈，除蛋白率较高。 Sevage试剂需重复多次，每次至少静置30min，时间较长，且有机试剂毒性较大及用量较多，多糖损失较高，还会对多糖的结构有破环。蛋白酶法作用温和，除蛋白效率高。欧文等〔26〕在除去荠菜多糖中的蛋白质时，采用Sevage法和三氯乙酸去除蛋白，蛋白去除率分别为80%、85.52%，而多糖损失率分别为20%、25.08%。而用木瓜蛋白酶法在酶用量为2.0%、pH5.5时作用2h，蛋白去除率为88.21%，多糖损失率为7.43%。蛋白酶法除蛋白率最高，多糖损失率最小。 2.2多糖中色素的去除 常用活性炭、过氧化氢、大孔吸附树脂除去多糖中的色素。活性炭吸附法一般去除鞣质色素。因活性碳疏松多孔无选择性，使多糖损失较多。李向东等〔29〕采用氧化氢去除黄芪多糖中的色素，并优化出最佳条件：每50mL样液用过氧化氢5~20mL脱色2~4h，色素除去率为92.05%。过氧化氢的氧化性较强，可能会造成多糖结构的改变，使用时应注意用量。 2.3透析法 透析法常用于多糖提取后的纯化，通常将粗多糖溶液装入透析袋，用自来水、蒸馏水透析。多糖是大分子物质，而盐类、小分子物质在溶剂作用下扩散出来。因此多糖可用透析法可以除去无机盐、单糖、双糖等，设备简单，无污染，能耗低。周鸿立等〔31〕用正交试验优化出透析玉米多糖的最佳条件：在30oС透析7h，更换缓冲液3次，多糖纯度由27.00%提高到42.35%，多糖损失率为9.25%，相对于其他除杂方法，多糖损失率较低。 2.4超滤分离 超滤是一种膜分离技术，具有分子筛作用，以压力差为动力，依据相对分子质量的不同进行分离。大分子物质流经膜表面，小分子物质在压力的作用下进入膜的另一侧。超滤膜常用于除杂和分离纯化大分子物质。将样品浸提后的溶液经超滤膜分离，可得多糖。焦光联等〔33〕用超滤膜分离黄芪多糖和大分子蛋白质多酚等物质，采用200kDa、10kDa的超滤膜在料液浓度20g/L、压力0.35MPa、温度30oС、进料流速0.467L/s最佳条件下，多糖含量由36.0%提高到86.8%。超滤膜可以连续使用，并保持较好的分离效果。不损坏多糖的活性，不需要添加化学试剂，设备简单，能耗低，无污染。醋酸纤维素膜是分离多糖最常用的一种膜。膜分离过程中浓差极化和膜污染等造成的膜渗透通量下降，加之多糖结构的复杂性，其
蛋白质多糖复合物的作用 蛋白质多糖复合物是由蛋白质和多糖两种生物大分子组成的复合物。它在生物体内起着重要的生理作用，对于维持生物体的正常功能具有至关重要的作用。本文将从多个角度来探讨蛋白质多糖复合物的作用。 蛋白质多糖复合物在细胞外基质中起着结构支持和细胞粘附的作用。细胞外基质是细胞外的一种复杂环境，由多种蛋白质和多糖组成。蛋白质多糖复合物通过与细胞外基质中的蛋白质相互作用，形成细胞外基质的支架结构，为细胞提供支持和保护。此外，蛋白质多糖复合物与细胞膜上的受体结合，促进细胞与基质之间的黏附，维持细胞的形态和结构。 蛋白质多糖复合物在免疫系统中具有重要的作用。免疫系统是生物体内的一套防御机制，能够识别和排除外来物质，保护生物体免受病原体的侵害。蛋白质多糖复合物在免疫反应中起到信号传递和调节的作用。当病原体侵入机体时，免疫细胞会识别并结合病原体表面的蛋白质多糖复合物，从而激活免疫反应，并引发炎症反应。此外，蛋白质多糖复合物还能够调节免疫细胞的活化和增殖，对于维持免疫系统的正常功能至关重要。 蛋白质多糖复合物在细胞间信号传递中发挥着重要的作用。细胞间的信号传递是细胞之间相互作用的重要方式，对于细胞的生长、分
化和功能发挥起着至关重要的作用。蛋白质多糖复合物通过与细胞膜上的受体结合，诱导细胞内信号通路的激活。这些信号通路可以调控细胞的基因表达和蛋白质合成，从而影响细胞的生理功能。 蛋白质多糖复合物还在细胞外调节因子的储存和释放中起着重要作用。细胞外调节因子是一类能够通过细胞外基质与细胞相互作用的信号分子，能够调控细胞的生长、分化和功能。蛋白质多糖复合物能够与细胞外调节因子结合，并将其储存起来。当需要时，蛋白质多糖复合物能够释放储存的调节因子，从而调控细胞的生理功能。 总结起来，蛋白质多糖复合物在生物体内的作用非常广泛。它在细胞外基质中起着结构支持和细胞粘附的作用，对于维持细胞的形态和结构至关重要。在免疫系统中，蛋白质多糖复合物能够调节免疫反应，保护生物体免受病原体的侵害。在细胞间信号传递中，蛋白质多糖复合物能够诱导细胞内信号通路的激活，影响细胞的生理功能。此外，蛋白质多糖复合物还在细胞外调节因子的储存和释放中发挥重要作用。因此，深入理解蛋白质多糖复合物的作用机制对于揭示生物体的生理过程具有重要的意义。
软骨多糖的生物活性（食品研究与开发-2008年12期） 多糖是机体内多功能分子，它可以根据机体的需要维持、促进或抑制细胞的生长；在正常发育和病理情况下，多糖可结合、储存和向靶细胞释放包括生长因子在内的多种调节因子或其它功能因子，来达到调控细胞增殖或诱导细胞凋亡的目的；影响细胞的黏附、调节细胞与细胞以及细胞与基质之间的相互作用；此外，蛋白多糖还具有调节血管形成、诱导细胞生长以及参与细胞分裂时的信号传递等作用。这些功能既取决于多糖本身特殊、多样的结构和性质，也与多糖和其它生物大分子之间的相互作用密切相关。 近年来关于多糖的活性和功能机理方面的研究非常多，人们已从不同的生物材料中得到多种具有抗肿瘤活性的多糖，如软骨多糖、透明质酸等。这些多糖不仅具有抗衰老、降血脂、降血糖、抗过敏等活性，而且还具有免疫调节与抗肿瘤的生物功能。 国外自20世纪70年代初开展了有关动物软骨多糖抗肿瘤作用的研究，认为软骨有效成分通过抑制血管生成而抑制肿瘤的增殖，或直接杀伤肿瘤细胞，来实现其抗肿瘤的作用。软骨活性成分的抗肿瘤机制推测是由于其含有大量黏多糖、胺基糖及丰富的活性蛋白，并含有多种抗肿瘤有效成分(如血管生成抑制因子、抗入侵因子和肿瘤细胞抑制因子等)，可通过阻止肿瘤周围毛细管网的形成抑制肿瘤的生长。软骨制剂(shark cartilage preparati0n，SCPl含有的各种黏多糖(硫酸软骨素、透明质酸)中的胺基能激活机体免疫系统，使T、B淋巴细胞、臣噬细胞和肿瘤细胞抑制因子对肿瘤细胞的生成起直接或间接的杀伤抑制作用。SCP作用于肿瘤细胞，还可抑制细胞骨架的形成或使细胞骨架发生凝聚或固缩，破坏其结构完整性，从而影响细胞的一系列功能。 当前，软骨多糖类药物的研究正从一般药效学向作用机理深入；由细胞水平向分子水平、基因水平深入。本课题组多年以来从自由基和抗氧化系统、MAPK 信号转导通路、细胞周期及凋亡过程相关蛋白表达和细胞凋亡信号转递过程及动力学变化等方面研究其功能，证明其生物活性。 蛋白多糖与涎腺肿瘤（现代口腔医学杂志-2010年6期） 蛋白多糖(proteoglycans，PG)是细胞外基质(extraeellular matrix，ECM)的主要组成成份，它和弹性纤维、胶原纤维以及糖蛋白等一起构成细胞外间质。蛋白多糖参与机体各项生理功能和物质代谢过程，对细胞的生长与增殖、细胞间的相互作用、细胞的信号传导以及肿瘤细胞的粘附、转移侵袭等生物特性有重要影响。特别是随着对肿瘤中PG研究的不断深人，PG在涎腺肿瘤中的作用也引起学者们的关注。在此对于涎腺肿瘤与PG的有关研究概况加以阐述。 PG及其功能 1．PG组成和种类：蛋白多糖是一类大分子糖蛋白，由葡胺多糖(glocosaminoglycans，GAGs)链以共价键形式与核心蛋白(core protein)结合，形成多聚阴离子线性结构。核心蛋白因表达细胞不同，具有不同的结构和功能，至今已明确有超过2O种的核心蛋白存在。GAGs侧链主要包括：硫酸乙酰肝素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、硫酸角质素、硫酸肝素、肝素及透明质酸等。除透明质酸外，其余PG都经历硫酸化过程。GAG侧链是由40—400次重复的葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、艾让糖醛酸和已糖醛酸等硫酸化多糖二糖单位构成，同一核心蛋白上可以结合不同的GAGs，不同的核心蛋白和不同的GAGs组合构成种类多样的PG，并赋予其各自不同的功能。
地龙蛋白的作用与功能主治及功效 1. 什么是地龙蛋白？ 地龙蛋白，是一种从地龙中提取的活性物质，富含多种活性成分。其主要成分 是一种多糖蛋白复合物，具有多种生物活性和药理作用。地龙蛋白具有抗炎、镇痛、免疫调节、促进伤口愈合等多种作用和功能。 2. 地龙蛋白的作用与功能主治 2.1 抗炎作用 地龙蛋白具有明显的抗炎作用，能够抑制炎症反应的发生和发展。它可以抑制 炎症介质的释放，减轻组织炎症反应，缓解炎症引起的疼痛和不适。因此，地龙蛋白在治疗各种炎症性疾病方面有着广泛的应用。 2.2 镇痛作用 地龙蛋白具有显著的镇痛作用，能够减轻疼痛感知和传导。它可以通过改善神 经递质的平衡，降低疼痛的感知阈值，减轻疼痛的强度和持续时间。因此，地龙蛋白在缓解各种类型的疼痛和不适方面具有良好的疗效。 2.3 免疫调节作用 地龙蛋白能够调节免疫系统的功能，增强机体的免疫力。它可以调节免疫细胞 的活性和数量，促进免疫球蛋白的合成和释放，提高机体对疾病的抵抗能力。因此，地龙蛋白在增强免疫力、预防感染和提高抗病能力方面有着重要的作用。 2.4 促进伤口愈合作用 地龙蛋白能够促进伤口的愈合和修复过程。它可以促进血液循环的改善，加速 伤口的血管生成和修复，增加胶原蛋白的合成和分泌，促进细胞增殖和再生，加快伤口愈合的速度和质量。因此，地龙蛋白在治疗创伤和促进组织修复方面具有重要的作用。 3. 地龙蛋白的功效 3.1 缓解炎症性疾病 地龙蛋白具有抑制炎症反应的作用，能够缓解炎症性疾病的症状和不适。它可 以用于治疗关节炎、风湿性关节炎、腰椎间盘突出症等疾病。
3.2 缓解疼痛和不适 地龙蛋白具有显著的镇痛作用，能够缓解各种类型的疼痛和不适。它可以用于缓解头痛、肌肉酸痛、神经痛等疾病。 3.3 增强免疫力 地龙蛋白具有调节免疫系统的功能，能够增强机体的免疫力。它可以用于增强机体抵抗力、预防感染和提高抗病能力。 3.4 促进伤口愈合 地龙蛋白能够促进伤口的愈合和修复过程。它可以用于治疗创伤和促进组织修复，加快伤口愈合的速度和质量。 结论 地龙蛋白作为一种具有多种活性成分的物质，具有抗炎、镇痛、免疫调节和促进伤口愈合等多种作用和功能。它在治疗炎症性疾病、缓解疼痛和不适、增强免疫力以及促进伤口愈合方面都具有重要的作用。因此，地龙蛋白在医药领域有着广泛的应用前景。
蛋白多糖复合物的主干结构 蛋白多糖复合物是一种由蛋白质和多糖组成的复合结构。它在生物体内起着重要的功能和作用。在本文中，我们将介绍蛋白多糖复合物的主干结构以及相关的特点和研究进展。 蛋白多糖复合物的主干结构通常由蛋白质和多糖分子相互交织而成。蛋白质是由氨基酸组成的生物大分子，而多糖是由糖分子组成的生物大分子。这两种生物大分子通过化学键结合在一起，形成了蛋白多糖复合物的主干结构。 蛋白多糖复合物的主干结构具有一定的特点。首先，它们通常具有高度的复杂性和多样性。不同的蛋白质和多糖分子可以组合成各种不同的蛋白多糖复合物，从而实现不同的功能和作用。其次，蛋白多糖复合物的主干结构往往具有一定的空间结构和立体构型。这种空间结构和构型决定了蛋白多糖复合物的生物活性和相互作用方式。 蛋白多糖复合物的主干结构在生物体内起着重要的功能和作用。首先，它们参与了许多生物过程和代谢途径。例如，一些蛋白多糖复合物在细胞信号传导、受体识别和细胞黏附等生物过程中发挥重要作用。其次，蛋白多糖复合物还可以用作生物体的结构支架和载体。一些蛋白多糖复合物在细胞外基质、骨骼和软骨等组织中起着结构支持和维持的作用。 近年来，对蛋白多糖复合物的研究取得了许多重要进展。一方面，
科学家们通过生化和生物物理方法，揭示了许多蛋白多糖复合物的结构和功能。例如，他们发现一些蛋白多糖复合物在细胞信号传导途径中起着关键的作用，从而为相关疾病的治疗提供了新的思路和靶点。另一方面，研究人员还通过合成生物学和材料科学的方法，设计和构建了一些人工蛋白多糖复合物，用于生物医学和材料科学领域。这些人工复合物具有良好的生物相容性和功能可调控性，有望应用于药物传递、组织工程和生物传感等领域。 蛋白多糖复合物是一种由蛋白质和多糖组成的复合结构，具有高度的复杂性和多样性。它们在生物体内起着重要的功能和作用。近年来，对蛋白多糖复合物的研究取得了许多重要进展，为相关疾病的治疗和生物医学应用提供了新的思路和方法。随着技术的不断发展，相信蛋白多糖复合物的研究将会取得更多的突破和进展，为人类健康和生物科学的发展做出更大的贡献。
糖缀合物名词解释 糖缀合物，又称糖聚合物，是由有机物质通过键连接结合形成的高分子复合物。它主要包括糖类、蛋白质、核酸、脂质等多种物质，它们经过键结合后形成复合物，在生物系统中发挥重要作用。《糖缀 合物名词解释》 一、糖类 糖类是一种组成糖缀合物的重要物质，它能够与另外的物质结合，形成糖缀合物。一般来说，糖类主要指五种糖，即葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖和麦芽糖。它们的分子形态不同，但可以形成多种糖缀合物，具有高度的可控性。 二、蛋白质 蛋白质是组成糖缀合物的另一种重要物质，它通常由一系列肽段组成，每一个肽段由20种氨基酸组成，每一种氨基酸可以有多种不 同变种。不同的蛋白质可以形成不同类型的糖缀合物，具有丰富的可控性和多样性。 三、核酸 核酸是另外一种组成糖缀合物的重要物质，它由甲基化的脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）组成，可以与其他糖类物质构成特定的糖缀合物，在生物体中具有重要的控制作用。 四、脂质 脂质是一种碳水化合物，是组成糖缀合物的另外一种重要物质。它可以与糖类和蛋白质结合，形成不同类型的糖缀合物，在生物体内
发挥重要作用。 五、多糖 多糖是一种特殊的糖缀合物，它由多种不同类型的糖类结合而成，具有多样性和特殊的结构。多糖可以与蛋白质、核酸和脂质结合，形成不同类型的复合物，在生物体内发挥重要作用。 六、其他物质 除了糖类、蛋白质、核酸和脂质外，糖缀合物还可以通过其他物质，如氨基酸、脂肪酸、细胞壁组分、酶等物质，结合而成。这些物质形成的糖缀合物，可以在细胞内发挥多种功能，对于细胞的正常生长发育起到关键作用。 糖缀合物是一种重要的复合物，它由糖类、蛋白质、核酸、脂质和其他物质的有机结合而成，在生物体内发挥重要的功能。糖缀合物的结构组成是复杂的，但它可以根据具体的功能要求进行精确的控制，以满足生物系统的特定需求。
多糖结构分析
多糖结构研究方法 多糖及其复合物是来自于高等动、植物细胞膜和微生物细胞壁中的天然大分子物质之一，自然界含量丰富，与人类生活紧密相关，对维持生命活动起至关重要的作用。多糖和核酸、蛋白质、脂类构成了最基本的4类生命物质。由于多糖的生物活性与多糖的结构关系密切，因此清楚认识多糖的结构是进行多糖研究和利用的基础。多糖结构比蛋白质和核酸的结构更加复杂，可以说是自然界中最复杂的生物大分子。从化学观点来看，多糖结构解析最大的难点就在于其结构的复杂性。糖的结构分类可沿用蛋白质和核酸的分类方法，即多糖的结构也可分为一级、二级、三级和四级结构。与蛋白质或核酸大分子相比，糖链的一级结构“含义”要十分丰富。测定糖链的一级结构，要解决以下几个问题：(1)相对分子质量；(2)糖链的糖基组成，各种单糖组成的摩尔比；(3)有无糖醛酸及具体的糖醛酸类型和比例；(4)各单糖残基的D-或L．构型，毗喃环或呋喃环形式；(5)各个单糖残基之间的连接顺序；(6)每个糖苷键所取的a-或B．异头异构形式；(7)每个糖残基上羟基被取代情况：(8)糖链和非糖部分连接情况； (9)主链和支链连接位点：（10)糖残基可能连接硫酸酯基、乙酰基、磷酸基、甲基的类型等。多糖的二级结构是指多糖主链间以氢键为主要次级键而形成的有规则的构象，与分子主链的构象有关，不涉及侧链的空间排布；多糖的三级结构和四级结构是指以二级结构为基础，由于糖单位之间的非共价相互作用，导致二级结构在有序的空间里产生的有规则的构象四。多糖结构的分析手段很多。不仅有仪器分析法，如红外、核磁共振、质谱等，还有化学方法，如完全酸水解、部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化反应等，以及生物学方法，如特异性糖苷酶酶切、免疫学方法等。 1质谱(MS) 由于MS法在糖链结构分析中具有快速灵敏，样品用量少、结构信息直观的特点而得到越来越广泛的应用。近年来各种软电离技术的诞生，如快原子轰击质谱(FAB—MS)，电喷雾质谱(ESI—MS)，基质辅助激光解析离子化质谱(MALDI-MS)等，使得糖结构分析的研究取得了日新月异的发展。 (1)快原子轰击质谱(FAB—MS) FAB-MS是上世纪80年代初发展起来的一种新的软电离质谱技术。其显著区别于传统质谱之处在于样品受加速原子或离子的轰击，可直接在基质溶液中电离。FAB-MS的引入使传统质谱技术难以分析的极性强，难挥发以及热不稳定的化合物不经衍生化就可以直接进行质谱分析，而且对生物大分子的研究取得了重大突破。FAB-MS已被证明是分析糖结构最为有力的方法之一，它不仅可以测定寡糖及其衍生物的分子量，而且可以测定聚合度高于30的糖的分子量。同时，FAB-MS还可以确定糖链中糖残基的连接位点和序列，已广泛用于糖类的分析。 (2)电喷雾质谱(ESI-MS) ESI-MS是将溶液中分子转变成气相离子非常有效的手段，是目前最软的一
(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利说明书 (10)申请公布号CN 113133535 A (43)申请公布日2021.07.20 (21)申请号CN202110467286.4 (22)申请日2021.04.28 (71)申请人华南理工大学;广州现代产业技术研究院 地址511458 广东省广州市南沙区环市大道南路25号华工大广州产研院 (72)发明人赵谋明许蓉郑淋 (74)专利代理机构44102 广州粤高专利商标代理有限公司 代理人何淑珍;江裕强 (51)Int.CI A23L33/17(20160101) A23L29/256(20160101) A23L29/25(20160101) A23L29/231(20160101) A23L29/269(20160101) 权利要求说明书说明书幅图(54)发明名称 一种具有抗消化性质的可溶性非变 性Ⅱ型胶原蛋白-多糖复合物及其制备方法 (57)摘要 本发明公开了一种具有抗消化性质 的可溶性非变性Ⅱ型胶原蛋白‑多糖复合 物及其制备方法。该方法包括，将可溶性 非变性Ⅱ型胶原蛋白粉末和多糖粉末混
匀，加水，低温搅拌，调pH至酸性，冷 冻干燥，粉碎过筛。本发明采用的可溶性 非变性Ⅱ型胶原蛋白纯度高，三螺旋结构 保持完整，具有改善关节炎活性，且溶解 性好，有利于在肠道中充分释放其活性部 位；所述的海藻酸钠、阿拉伯胶、果胶、 黄原胶和卡拉胶均为阴离子多糖，在酸性 条件下与可溶性非变性Ⅱ型胶原蛋白结合 形成复合物，减少其在胃消化过程中的降 解，保证可溶性非变性Ⅱ型胶原蛋白活性 位点所在的三螺旋结构保持完整到达小肠 内，从而发挥出最大的功效；本发明的方 案简便易行、稳定性好、活性高。 法律状态 法律状态公告日法律状态信息法律状态 2021-07-20公开公开 2021-08-06实质审查的生效实质审查的生效2022-10-18授权发明专利权授予
蛋白质一多糖的好合物和凝聚物 摘要：在关于蛋白质一多糖的静电聚合物和凝聚物的形成的最新研究进展中，提出了其结构和特性。第一部分强调了复合物形成的热力学，特别讨论了燧和牖对其影响。对它们的结构进行了不同长度尺度上的描述，最新研究中包括了复合物和凝聚物的相序动力学。最后阐述了蛋白质一多糖复合物和凝聚物的相关功能性质在食品方面的应用。 1. 前言 静电相互作用诱导像复合体和凝聚物等超分子生物高聚物的结构的形成是一种基本的理化现象，与很多已知的生物过程有关，如蛋白质的转录翻译，抗原抗体反应和酶反应。一个原始的例子是沙堡蠕虫的矿化管，它是由外源性的矿物颗粒和反向充电蛋白通过复凝聚法形成的胶合剂粘在一起。其他生物学上的相关示例有硫酸软骨素蛋白聚糖、黏多糖透明质酸和软骨连接蛋白形成的三元复合物为软骨提供机械性能，肝素对等离子体抗凝血酶的约束抑制了一•系列的凝固蛋白，酒中果胶多糖和唾液中蛋白质的离子相互作用减弱了蛋白质单宁酸的相互作用而且有助于缓解涩味，蛋白质、多糖和胃酹的三元复合物的形成改变了肽的外形轮廓和它们的变应原性。生物高聚物之间的作用之中经常涉及的生理学过程是蛋白质多糖间的。蛋白质一多糖复合物和聚合体在工业应用中也非常重要，如微米级或纳米级的封装过程, 多层次结构的设计，乳状食物的形成和稳定，新型食物凝胶剂的形成和工业副产品中蛋白质的复性。 由于蛋白质一多糖静电相互作用和蛋白质一多糖复合物和凝聚物在工业上的巨大潜力，近十年越来越多的研究团队开始专注于相关体系的研究。这种趋势解释了发表的相关文章呈指数增长的现象。正在科西斯举行的研讨会是从2000年以来的第六屈，这足以说明该领域的重要性，后来的两个分别是关于蛋白质一聚合电解质络合物形成和理论上和模拟方面的高分子络合。一篇文章和评论的临界分析指出了近几年关注的最重要的基本问题有：1）蛋白质和多糖之间的静电相互作用的热力学描述中尤其重要的问题是络合物形成或聚合的焙和焙的特性，但是其他弱的相互作用力也很重要，如氢键和疏水相互作用，2）蛋白质多糖复合物和凝聚物在不同尺度下的结构3）有可能会发生成核与生长如电位分离的机理，最后是 4）对蛋白质一多糖复合物和聚合体的流变性能和界面行为的理解。 当代研讨会的特定目标就是突出以上提到的四点，主要集中在蛋白质一多糖体系。必要时，结果中获得的蛋白质一蛋白质或蛋白质一聚合电解质体系可能会被提到，这是因为它们的特定喜好或理论原因。迄今为止他们的研究中还没有详细地考虑计算机模拟方面。值得注意的是蛋白质一多糖体系和蛋白质一多糖规合物也就是复合体通过共价相互作用联系，远超出本文的范围。 2.热力学方面 在过去的几年，相较于复合物和凝聚物的结构功能，蛋白质一多糖复合物的形成和聚合的能量学方面受到的关注较少。过去四年形势的变化和大量发表的文章从这些现象的源头解释了复合物形成的热力学特性和本质上的非共价相互作用。在关注这些不同方面之前，我们首先在本部分中给出一些关于高分子复合物形成的总体热力学趋势。 当总的吉布斯自由能减小即AGV0时，高分子复合物的形成能够自发的发生，不利的燧变来源于一经绑定生物聚合物流动性下降或者可能来源于复合物表面水的有序排列。由于水的结构的复杂度和过程的精细程度，很难估计总懒变对其影响。就焰变的影响而言同样如此。溶剂重组占焰的很大•部分，扩展复合物表面的氢键网能够使燧变更加有利，即使它和燧的影响是平衡的。其他对婚变的重要影响来自于直接的非共价相互作用，这就决定了在一个严格的检测中对焰的约束。不管怎样，对每个特殊的非共价相互作用的生成烯进行分类都是非常困难的。 综合考虑，回顾一下得到的蛋白质一多糖系统的数据。基于相变的量热学的测量值和温度的独立性，其他文章中也得到了相同的结论，基于兔合物的形成依赖于很强的离子强度，复合物形成过程中的吸热信号通过等温滴定微量热仪记录下来。最近的另一篇通过等温滴定量热法研究了聚合物的静电叠层集合，也得出了聚电解质之间的配合物的形成几乎完全由端推动，尽管实验证明焰
多糖除蛋白的方法 多糖除蛋白是一种常见的实验技术，用于制备纯化的多糖样品。它适用于许多不同类型的多糖，包括淀粉、聚葡萄糖、海藻酸等。在本文中，我们将详细介绍多糖除蛋白的方法。 多糖除蛋白的方法有多种，其中最常用的是酶法和重组蛋白亲和层析法。下面我们将详细介绍这两种方法。 1.酶法： 酶法是最常用的除蛋白方法之一。多糖通常会与蛋白质结合在一起形成复合物，通过酶法可以将这种复合物分解成单独的多糖和蛋白质。酶法分为两步：预处理和酶处理。 预处理：首先将多糖样品与一定体积的缓冲液（如PBS缓冲液）混合，使其达到适宜的pH值和离子强度，并加入一定量的还原剂（如二硫代乙酸）以破坏多糖的分子间氢键。然后加入一定浓度的蛋白酶抑制剂（如苯甲酸硼酸盐）以保护多糖不受蛋白酶降解。
酶处理：选择适合的酶对多糖进行处理。常用的酶有葡萄糖酸酶、淀粉酶等。将酶加入预处理好的多糖样品中，并在适宜的温度和pH条 件下进行酶解反应，通常持续数小时至数天。酶解反应结束后，将样 品进行离心分离，上清液中即可得到纯化的多糖样品。 2.重组蛋白亲和层析法： 重组蛋白亲和层析法利用多糖和结合多糖的蛋白质之间的特异性 相互作用来分离蛋白质。这需要使用带有特定亲和标签（如Histidine 标签）的重组蛋白来结合多糖。以下是该方法的具体步骤：制备多糖亲和柱：在柱子中填充具有亲和标签的重组蛋白（如融 合了Histidine标签的亲和素树脂）。 样品处理：将多糖样品与一定浓度的缓冲液混合，并加入适量的 离子强度调节剂（如NaCl），使其达到适宜的pH和离子强度。 样品加载：将样品加载到多糖亲和柱中，并进行一定的洗脱步骤 以去除非特异结合的蛋白质。