授课对象：06级检验1-5班
课 时：2学时
回收试验
目 标：1.掌握回收实验的基本原理
2.学会衡量检验方法和检测结果的准确度---回收率实验的设计
3.归纳总结进行回收实验的注意事项及对检测方法的评价
实验用品：（以二乙酰法测BUN 为例）水浴箱（100℃）、721型分光光度计、混合血
清、（①②③）、BUN 标准液（100mmol/L 、200 mmol/L 、7.14 mmol/L ）等
内 容： 一、原理：
在已知浓度的样品中加入一定量的被测物，然后用同样方法测定，测定值与“理论值”（样品浓度和加入浓度之和）之比，乘以100%即为回收率，一般实验方法应在100±5%为合格。
回收实验是测定生化实验方法准确性较好的方法之一，有人认为回收率除鉴定测定方法的优劣处，不可用来纠正测定中的误差，其计算公式如下：
100%%?=
加入浓度
回收浓度
）回收率（
)ml )ml )
ml 标准液量（血清量（标准液量（标准液浓度加入浓度+?
=
二、操作步骤（以二乙酰一肟法测尿素氮为例）：
1．样本处理：
a 混合血清2ml+H 2O0.1ml （R ）
b 混合血清2ml+BUN 标（200mmol/L ）0.1ml （R+S 1）
c 混合血清2ml+BUN 标（100mmol/L ）0.1ml （R+S 2）
2．测定： 1 R+S 2 S B R 血清 0.02 — — — — R+S 1血清 — 0.02 — — — R+S 2血清
—
—
0.02
—
—
BUN 标准 — — — 0.02 — 蒸馏水 — — — — 0.02 酸性试剂 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 二乙酰一肟 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 混匀，置100℃12min ，取出待冷比色（λ=540nm ），取各管A 值计算。
三、计算：
100
1
.00.21.010014
.7A A A %)
S ()
R )1S R (?+?
?-=
+（）回收率（
四、注意事项：
1．加入标准液的体积在整个样品中占比例要少，一般不能超过10%，否则整个样品稀释过大，不能反映原有样品的实际情况。
2．加入被分析物后，使回收实验样品的溶度达到医学决定水平（是指对病人医疗具有参考价值的临床分析物的溶度）。
3．回收实验应重复测定三次以上，以减少随机误差。
4．为防止因标准液不稳定，或制备中的误差，或因实验操作所致的误差，应同时用已被公认的可靠性强的方法做比较；测定时应用2份以上的样品；不同样品要同时测定以减少实验操作或样品对实验方法的影响。测定病人的血清，应注意某些药物的干扰。
课后小结：
问卷的回收率，即发出问卷后，经被调查者填答并能被研究者收回的问卷比率。影响问卷回收率的主要因素有：回收问卷的有效程度；调查组织工作的严密程度；调查课题的吸引力；问卷填写的难易程度；问卷回收的可控制程度。据统计，邮寄问卷的回收率约为30－60%，而当面发送问卷的回收率可达到80－90%，并且当面发送并回收，可以检查问卷是否有空填、漏填和明显的错误，以便及时能更正，保证问卷较高的有效性。因此，要想提高问卷的回收率，必须设计出短小、精干、有吸引力、填答容易的问卷，最好使用当面发送问卷的方法。否则应附上一个回函信封；注意发出问卷的时间，最好不要让问卷在重大节假日或事件发生之前寄到被调查者手中。 当已经制作完成的问卷发布给受众群体时，您需要考虑多个方面的问题，以提高问卷收集数据的质量。 首先，你不仅需要了解您的调查对象，你还需要建立一个与其利益息息相关、有效且有趣的调查。 许多答题者甚至不知道你是谁，假定是一份毫无吸引力的调查时，那么您的问卷回收率肯定不会如您期望的高。甚至会将您的调查邀请视为垃圾邮件，从此列入黑名单之列。 提高回收率，您需要注意以下这些关键点： 问卷设计： * 考虑您的研究目的。 * 建立与您的受访者关系，尽量预先通知他们即将推出的调查。 * 创建一个调查，问正确的问题，以满足您的研究目标。 * 让您的设计简洁，准确，符合逻辑，尽量精简。 * 试验测试，以确保所有收集数据的工作正常，保证答题不会白费功夫。 电子邮件邀请： * 消息内容是重要的：邀请信息是您的受访者最先看到的。当他们最初查看邀请一眼，受访者可以直接将其发送到垃圾邮件，如果你忽略这些技巧： * 不要使用邮件中的垃圾邮件的语言。 * 包括你的联系信息，你怎样得到的电子邮件地址，调查的目的，你将做什么的研究，是否是匿名答卷等。 * 个性化的信息。邀请包含受访者的名字。 * 不要使用类似全部大写主题标题垃圾邮件的语言，货币符号等 * 使用专业的答复电子邮件地址。 * 表明多久时间来完成调查，并在截止日期到达时，将停止回收问卷。 * 不要发送垃圾邮件。 * 使用常用的和最新的电子邮件列表。 * 考虑您的邀请分配时间。你的观众主要是由学生或他们工作的专业人士？ * 附表提醒信息。 * 提供奖励。
在测定样品得同时,于同一样品得子样中加入一定量得标准物质进行测定,将其测定结果扣除样品得测定值,以计算回收率 注意点 1.加标物得形态应该与待测物得形态相同 2.加标量应与样品中所含待测物得测量精密度控制在相同得范围内,一般情况下作如下规定: 1）加标量尽量与样品中待测物含量相等或相近,并应注意对样品容器得影响 2）当样品中待测物含量接近方法检出限时,加标量控制在校准曲线得低浓度范围 3）在任何情况下加标量均不得大于待测物含量得３倍 4）加标后得测定值不应超过方法得测量上限得90% 5）当样品中待测物浓度高于校准曲线得中间浓度时,加标量应控制在待测物浓度得半量 空白加标回收:在没有被测物质得空白样品基质中加入定量得标准物质,按样品得处理步骤分析,得到得结果与理论值得比值即为空白加标回收率。 样品加标回收:相同得样品取两份,其中一份加入定量得待测成分标准物质;两份同时按相同得分析步骤分析,加标得一份所得得结果减去未加标一份所得得结果,其差值同加入标准物质得理论值之比即为样品加标回收率。 加标回收率得测定, 就是实验室内经常用以自控得一种质量控制技术、对于它得计算方法, 给定了一个理论公式: 加标回收率＝(加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100%. 1、1 理论公式使用得前提条件 文献＆#91;1 &＃93;中对加标回收率得解释就是:“在测定样品得同时, 于同一样品得子样中加入一定量得标准物质进行测定, 将其测定结果扣除样品得测定值, 以计算回收率、"因此,使用理论公式时应当满足以下2 个条件:①同一样品得子样取样体积必须相等; ②各类子样得测定过程必须按相同得操作步骤进行。 1.2 理论公式使用得约束条件 文献[２＆＃93;中强调指出:加标量不能过大,一般为待测物含量得０、５~ 2、０倍, 且加标后得总含量不应超过方法得测定上限; 加标物得浓度宜较高, 加标物得体积应很小,一般以不超过原始试样体积得1％为好。 1。3 理论公式得不足之处 ( １)各文献对公式中“加标量"一词得定义, 均未准确给定, 使其含义不就是十分明确.从公式得分子上分析,加标量应为浓度单位; 从公式得分母上理解,应为加入一定体积得标准溶液中所含标准物质得量值, 为质量单位。 (2) 若公式中得加标量为浓度单位,此时得加标量并不就是指标准溶液得浓度, 而应该就是加标体积所含标准物质得量值除以试样体积(或除以试样体积与加标体积之与)所得得浓度值. 这里存在着浓度换算, 而在理论公式中并没有明确予以表现出来。? 2
准备两份：一份待测样品A，一份加入一定量标准B，然后用加标测的结果减去理论值,回收率等于B-A/B*100% 4.6. 5. 回收率 4.6. 5.1. 在检测的样品中添加一定量的标准物质，测试添加进去的标准物质的回收率，可以衡量前处理或测试过程中的基体干扰、样品的交叉污染、样品损失、仪器性能等，故回收率试验一直是化学实验室质量控制中重要的手段之一。 4.6. 5.2. 进行回收率测试时，应选择具有代表性的样品，样品应均匀性良好，目标测试物质具有一定的含量。 4.6. 5.3. 回收率测试时，称取上述选择的经预处理的样品两份，其中一份中加入目标测试物质，加入量是样品中目标测试物质量的50％－150％。两份样品同时经过前处理后，同时上机测试，计算回收率。 4.6. 5.4. 回收率＝(V2c2-V1c1)×100％/V0c0 其中：c2：加标样品测试值，ug/mL V2：加标样品体积，mL c1：未加标样品测试值，ug/mL V1：未加标样品体积，mL c0：加入标准溶液的浓度，ug/mL V0：加入标准溶液体积，mL 本计算公式是基于加标样品和未加标样品的质量一致的前提，如两者不一致，则应折算为一致的质量。 4.6. 5.5. 回收率的范围一般控制为80％－120％，根据项目的不同，由实验室技术指导进行适当调整。回收率的测定结果记录在《回收率测定记录表》中。 4.6. 5. 6. 回收率测试的另外一种形式是，如果怀疑样品溶液基体对测试结果有影响，则可以直接在样品溶液中加入一定体积的标准溶液，测试此加标液的浓度，计算加标回收率，此时可以衡量溶液基体对测试有无影响。 以上摘自我们公司的程序文件中关于结果质量保证中关于加标回收率测定， 回收率试验它也叫加标回收，即在测定样品的同时，于同一样品的子样品中加入一定量的标准物质进行测定，将其测定结果扣除样品的测定值，除以加入量，计算回收率。它可以反映测试结果的准确度。 目的就是控制实验的准确度。加标回收衡量准确度,做平行样是用来衡量精密度的.这两个手段是实验室质量保证上经常用到的措施. 测量方法确认技术分成以下几类。 (1)准确度试验(标准物质分析试验、回收率试验、不同方法的比对试验)。 (2)精密度试验(室内重复性、中间精密度、协同试验、极差试验)。 (3)检出限的确定。 (4)测量范围试验。 (5)影响结果因素的系统评价。
现在一般都用第二种方法，又分两种添加方法： 1 添加样品中含量一半的80%、100%和120%，每个两份 2 添加样品中含量一半的50%、100%和150%，每个两份。这两种都可以的 计算时添加后测得的含量与原来样品的含量一半之差作分子，添加的含量做分母，并计算这6个结果的RSD，小于3%即可。 关于加样回收率的讨论已有报道［１－３］，虽对加样回收率的两种计算方法均从不同侧面做了较透彻的讨论与选择，但均忽略了原样品（实际样品）中待测组分含量确定的方法及其误差性质对回收率结果可靠性的影响，有必要做进一步的探讨作为补充。设原样品中待测组分的真实量为Ｘｏ，待测组分纯品标准加入的真实量为Ｙｏ，为统一讨论，我们把Ｙｏ的获得及加入过程也看为一种测量，那么，Ｘｏ、Ｙｏ及其总量的测得量分别为Ｘ、Ｙ和Ｚ，它们的测量误差分别为ＥＸ、ＥＹ和ＥＺ，则目前回收率Ｒ有如下两种计算方法依据测得Ｘｏ的方法不同分以下两种情况讨论。 １成熟方法包括药典法及可靠的文献法。 由于选用的方法成熟可靠，测量误差小，则ＥＸ可忽略，而且Ｙｏ的获得及加入过程一般是可靠的，Ｅｙ亦可忽略，则（１）、（２）式可分别简化为（３）、（４）式：两式中，Ｒ唯一地与测量误差ＥＺ相关，理论上讲，可以用来检验拟订方法的准确度。２拟订方法同上讨论，Ｅｙ可以忽略，但由于Ｘ０是按拟订方法测得的，故ＥＸ不可盲目忽略，则（１）、（２）式可分别简化为（５）、（６）式：Ｒ并不唯一地与ＥＺ相关，还与测定原样品中Ｘｏ的误差ＥＸ有关，是否可以用来检验拟订方法的准确度需要做进一步的讨论。测量误差按其性质分为两类：偶然误差和系统误差，系统误差又包括恒定误差和比例误差。偶然误差可以通过增加试验次数来消除，本文不做更深讨论，而系统误差却会给测定带来固定方向的偏差。 ２．１系统误差为恒定误差：此时ＥＸ＝ＥＺ，所以（５）、（６）式可写为（７）、（８）式：即在该情况下，无论拟订方法的误差多大，回收率均为１００％。结果显然是不可靠的。 ２．２系统误差为比例误差：设比例误差的比例系数为Ｅ，则ＥＸ＝Ｅ·Ｘｏ，ＥＺ＝Ｅ·（Ｘｏ＋Ｙｏ），则（５）、（６）式可分别写成（９）、（１０）式：回收率的实质是单位真实量的测得量，而Ｅ是单位真实量的测量误差，所以Ｒ应等于１＋Ｅ，此时，用（９）式计算回收率是可靠的，而用（１０）式计算，Ｒ随Ｘｏ／（Ｘｏ＋Ｙｏ）的值变化而变化，当且仅当Ｘｏ／（Ｘｏ＋Ｙｏ）＝０，即Ｘｏ＝０或Ｙｏ为无穷大时，Ｒ＝１＋Ｅ。但前者回收率试验实质上已是模拟样品回收率，而后者已变为纯品回收率试验，均不在本文讨论范围之内。上面讨论的是两种极端情况，而在实际工作中，测量误差既包括恒定误差，又包括比例误差，文献认为：“仪器由于灵敏度等原因，测量一般为恒定误差，而方法误差也不全为比例误差，”另外，由于操作者造成的误差也往往表现为恒定误差，如对滴定终点指示剂变色的判断等。这说明目前定量研究的误差多属恒定误差，所以用拟订方法测定原样品中待测组分的含量后计算回收率的方法并不可靠。因此，虽然目前绝大多数药物分析工作者在做加样回收率计算时均使用（１）式，认为测得总量减去原样品测得量后即可消除原样品中待测组分含量及其测量误差的影响，但却未考虑到并非所有情况下均适用，反而会因此获得一个不真实的回收率，错误判断拟订方法的准确度。例：我们把某一测定方法假设为一根容量足够大的刻度吸量管，首先我们假设它有恒定误差，它的Ｏｍｌ刻度处实为１０ｍｌ，其余部分准确，即本吸量管有一１０ｍｌ的恒定误差，下面结合上述讨论对该吸量管（即某一测定方法）的准确度做一个检验。设Ｘ０＝２０ｍｌ，Ｙ０＝１０ｍｌ，则ＥＺ＝－１０ｍｌ。如用（３）、（４）式计算：（３）Ｒ＝１＋（－１０）／１０＝０％（４）Ｒ＝１＋（－１０）／（２０＋１０）＝６７％如用（５）、（６）两式计算：（５）Ｒ＝［１０＋（－１０）－（－１０）］／１０＝１００％（６）Ｒ＝（２０＋１０）＋（－１０）／２０＋１０＋１０＝１００％由上可见，对于一个设定的明显有很大误差的测定方法，用拟订方法测定Ｘ０后计算却得出了“理想”的回收率数据，可见如此计算在测定存在恒定误差的情况下是不可靠的；而用成熟方法测定Ｘ０后，均得出方法不准确的结论，但用两式计算，结果明显不同，我们认为造成这一现象的原因是对于每次测定来说，由于误差恒定，（３）式把本应该由整
加样回收率液色迷人 加标回收率的测定可以反映测试结果的准确度。 进行加标回收率测定时应注意以下问题： 1）加标物的形态应和待测物的形态一致。 2）加标量应尽量与样品中待测物含量相近，并注意对样品容积的影响。 3）加标后的测定值不应超过方法的测定上限的90%。 计算方法一: (测定量-已含量)/加入量乘以100% 计算方法二: 测定量/(已含量+加入量) 乘以100% 以上两种计算方法不知哪种是可行的,还是都可以使用? 我认为方法一可行，更准确些 加样回收率(%)=(测得量一原有量)/加入量x 100% ＝实际测得加入量／理论加入量 方法二不可行 加样回收率(%)=测定量/(已含量+加入量) x 100% ＝实际测得总量／理论总量 从误差传递的角度，以第一种为宜 我认为方法一可行，2005年版药典一部附录加样回收率也是这样要求的。 关于加样回收率的实验设计： 1.高中低三个浓度的选取原则：高浓度应为样品浓度的120％左右、中浓度应为样品浓度 的100％左右、低浓度应为样品浓度的80％左右。 2.高中低三个浓度样品的制备：最好采用加入50％量的样品，然后分别加入70％、50％、 30％量的对照品储备液，制成供试样品，每个浓度三份。 3.测定：采用测定方法分别测定，这个时候要注意你之前制定的标准曲线的范围(线性 范围)，是否能涵盖这九份样品的浓度范围？也就是说这九份样品的浓度都应该在你的 标准曲线范围内。 4.得到测定结果后的结算：应采用你的结果值，也就是每份样品的最终计算结果，而不 是测定过程中没有经过计算的数据，因为你的加样回收率要体现的是全部操作过程的准
确与变异程度，其中也包括数据计算。 关于药物定量分析中加样回收率实验的再探讨 回收率包括绝对回收率和相对回收率。绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物，经过样品处理都有一定的损失。做为一个分析方法，绝对回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基质中定量加入药物，经处理后与标准品的比值。标准品为流动相直接稀释而来，而不是同样品一样处理。若一样，只是不加基质来处理，可能会有很多影响因素被此屏蔽掉。如全部转移有机相时只转移了98%等。也就因此失去了绝对回收率的考察初衷。 相对回收率严格来说有两种。一种是回收试验法，一种是加样回收试验法。前者是在空白基质中加入药品，标准曲线也是同此，这种测定用得较多，但有标准曲线重复测定的嫌疑。第二种是在已知浓度样品中加入药物，来和标准曲线比，标准曲线也是在基质中加药物。相对回收率主要考察准确度。 准确度系指用该方法测定的结果与真实值或认可的参考值之间接近的程度。有时也称真实度。一定的准确度为定量测定的必要条件，因此涉及到定量测定的检测项目均需要验证准确度，如含量测定、杂质定量试验等。准确度应在规定的范围内建立，对于制剂一般以回收率试验来进行验证。试验设计需考虑在规定范围内，制备3个不同浓度的试样，各测定3次，即测定9次，报告已知加入量的回收率（％）或测定结果平均值与真实值之差及其可信限。 1.含量测定原料药可用已知纯度的对照品或符合要求的原料药进行测定，或用本法所得结果与已建立准确度的另一方法测定的结果进行比较。制剂可用含已知量被测物的各组分混合物进行测定。如不能得到制剂的全部组分，可向制剂中加入已知量的被测物进行测定，必要时，与另一个已建立准确度的方法比较结果。一般制剂的含量测定的回收率是向辅料中加入处方量80％、100%、120%已知含量的主药，按含量测定的方法测定。溶出度测定方法的回收率按处方量50％、80％、100％加入主药进行测定。 2.杂质定量试验杂质的定量试验可向原料药或制剂中加入已知量杂质进行测定。如果不能得到杂质，可用本法测定结果与另一成熟的方法进行比较，如药典方法或经过验证的方法。如不能测得杂质的相对响应因子，可在线测定杂质的相关数据，如采用二极管阵列检测器测定紫外光谱，当杂质的光谱与主成分的光谱相似，则可采用原料药的响应因子近似计算杂质含量（自身对照法）。并应明确单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（％）或面积比（％）。 3.7重复性试验 取同一批样品，按供试品溶液方法平行制备5份供试品溶液，按色谱条件进行测定，计算刺楸皂苷A的平均含量为9.67mg/g，RSD值为0.10%，表明方法的重复性良好。 表8 重复性试验结果 No. 峰面积(A) 含量(mg/g) (mg/g) RSD (%) 1 387411 9.65 9.67 0.10 2 387968 9.67 3 388227 9.67
体外诊断试剂分析性能评估 （准确度回收实验） 技术审查指导原则
一、前言 准确度评估资料是评价拟上市产品有效性的重要依据，也是产品注册 所需的重要申报资料之一。定量检测方法的回收实验是评估准确度的方法 之一，用于评估定量检测方法准确测定待测分析物的能力，结果用回收率 表示。 本指导原则基于国家食品药品监督管理局《体外诊断试剂注册管理办 法（试行） 》的有关要求，参考有关标准，对采用回收实验进行准确度评估 的实验方法和数据处理方法进行了原则性要求。其目的是为生产企业采用 回收实验方法进行准确度评估并准备准确度评估资料提供原则性指导，也 为注册管理部门审核该部分分析性能评估资料提供技术参考。 由于体外诊断试剂产品发展速度快、专业跨度大，国家食品药品监督 管理局将根据体外诊断试剂发展的需要，适时对本指导原则进行修订。 二、适用范围 本指导原则适用于首次申请注册、申请许可事项变更的用于定量检测 的体外诊断产品。因体外诊断产品评价是将仪器、试剂、质控品、校准品 等作为一个系统进行评价，因此回收实验的评价采用系统的概念进行描述。 如特殊产品不适用于本指导原则，可进行详细说明并采用适当的方法进行 准确度评价。 三、基本要求 （一）回收实验的基本要求
1操作者应熟悉待评价系统的操作。 . 2编写系统标准操作规程，其中包括校准程序和室内质控程序，采用 . 合适的校准品、质控品并保持系统处于正常状态。 3待评价系统的处理。进行回收实验前，应该对待评价系统进行初步 . 评价，并且对待评价系统进行精密度及线性评价（参考相关标准） ，只有在 以上评价完成并且符合相关标准要求后，才可进行回收实验。 （二）回收实验的评估及数据处理方法 1实验样本的基本要求和制备方法 . （1 ）选择合适浓度的常规检测样本，分为体积相同的 34 - 份。 （2 ）在其中 23 - 份样本中加入不同浓度相同体积的待测物标准液制备 待回收分析样本，加入体积小于原体积的 1% 0，制成 23 - 个不同加入浓度的 待回收分析样本，计算加入的待测物的浓度。 （3 在另一份样本中加入同样体积的无待测物的溶剂， ） 制成基础样本。 2实验过程 . 用待评价系统对待回收分析样本和基础样本进行测定，通常对样本进 行3 次重复测定，计算均值，取其均值进行下述计算。 3数据处理及结果报告 . （1 ）加入浓度 n 标准液浓度 n 标准液加入体积/样本体积+ = ×[ ( 标准液 体积) ] （2 ）计算回收率： 回收率 n = （3 ）计算平均回收率：
体外诊断试剂分析性能评估（准确度-回收实验） 指导原则 一、前言 准确度评估资料是评价拟上市产品有效性的重要依据，也是产品注册所需的重要申报资料之一。定量检测方法的回收实验是评估准确度的方法之一，用于评估定量检测方法准确测定待测分析物的能力，结果用回收率表示。 本指导原则基于国家食品药品监督管理局《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》的有关要求，参考有关标准，对采用回收实验进行准确度评估的实验方法和数据处理方法进行了原则性要求。其目的是为生产企业采用回收实验方法进行准确度评估并准备准确度评估资料提供原则性指导，也为注册管理部门审核该部分分析性能评估资料提供技术参考。 由于体外诊断试剂产品发展速度快、专业跨度大，国家食品药品监督管理局将根据体外诊断试剂发展的需要，适时对本指导原则进行修订。 二、适用范围 本指导原则适用于首次申请注册、申请许可事项变更的用于定量检测的体外诊断产品。因体外诊断产品评价是将仪器、试剂、质控品、校准品等作为一个系统进行评价，因此
回收实验的评价采用系统的概念进行描述。如特殊产品不适用于本指导原则，可进行详细说明并采用适当的方法进行准确度评价。 三、基本要求 （一）回收实验的基本要求 1.操作者应熟悉待评价系统的操作。 2.编写系统标准操作规程，其中包括校准程序和室内质控程序，采用合适的校准品、质控品并保持系统处于正常状态。 3.待评价系统的处理 进行回收实验前，应该对待评价系统进行初步评价，并且对待评价系统进行精密度及线性评价（参考相关标准），只有在以上评价完成并且符合相关标准要求后，才可进行回收实验。 （二）回收实验的评估及数据处理方法 1.实验样本的基本要求和制备方法 （1）选择合适浓度的常规检测样本，分为体积相同的3-4份。 （2）在其中2-3份样本中加入不同浓度相同体积的待测物标准液制备待回收分析样本，加入体积小于原体积的10%，制成2-3个不同加入浓度的待回收分析样本，计算加入的待测物的浓度。
加样回收率 集团公司文件内部编码：（TTT-UUTT-MMYB-URTTY-ITTLTY-
加样回收率液色迷人 加标回收率的测定可以反映测试结果的准确度。 进行加标回收率测定时应注意以下问题： 1）加标物的形态应和待测物的形态一致。 2）加标量应尽量与样品中待测物含量相近，并注意对样品容积的影响。 3）加标后的测定值不应超过方法的测定上限的90%。 计算方法一:(测定量-已含量)/加入量乘以100% 计算方法二:测定量/(已含量+加入量)乘以100% 以上两种计算方法不知哪种是可行的,还是都可以使用? 我认为方法一可行，更准确些 加样回收率(%)=(测得量一原有量)/加入量x100% ＝实际测得加入量／理论加入量 方法二不可行 加样回收率(%)=测定量/(已含量+加入量) x100% ＝实际测得总量／理论总量 从误差传递的角度，以第一种为宜 我认为方法一可行，2005年版药典一部附录加样回收率也是这样要求的。 关于加样回收率的实验设计：
1.高中低三个浓度的选取原则：高浓度应为样品浓度的120％左右、中浓度应为样品浓度 的100％左右、低浓度应为样品浓度的80％左右。 2.高中低三个浓度样品的制备：最好采用加入50％量的样品，然后分别加入70％、50％、 30％量的对照品储备液，制成供试样品，每个浓度三份。 3.测定：采用测定方法分别测定，这个时候要注意你之前制定的标准曲线的范围(线性 范围)，是否能涵盖这九份样品的浓度范围？也就是说这九份样品的浓度都应该在你的 标准曲线范围内。 4.得到测定结果后的结算：应采用你的结果值，也就是每份样品的最终计算结果，而不 是测定过程中没有经过计算的数据，因为你的加样回收率要体现的是全部操作过程的准 确与变异程度，其中也包括数据计算。 关于药物定量分析中加样回收率实验的再探讨? 回收率包括绝对回收率和相对回收率。绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物，经过样品处理都有一定的损失。做为一个分析方法，绝对回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基质中定量加入药物，经处理后与标准品的比值。标准品为流动相直接稀释而来，而不是同样品一样处
加标回收率计算示例（计算时单位要一致）： 1、测定过程 （1）分别取 100ml 水样两份 （2）向其中一份加入 1.00ml 浓度为 1000ug/mL的标准溶液， （3）相同条件下分别测定它们的浓度，结果如下表 2、加标回收率的计算 （1）加标液体积小于等于加标样品体积1%（可忽略加标体积时）质控表编写 例如：标准溶液浓度为 1000ug/mL 序号1#1#+ 体积（ mL）100100 加入标准溶液体积0 1.00 样品浓度 mg/L20.030.2 实验室质量控制记录表 加标回收率分析测定值单位：mg/L 样品编号DB1#+ 取样量（ mL）100.00 标准溶液浓度（ug/mL）1000 加标体积 mL 1.00 加标量 mg/L10
加标前测定值 mg/L20.0 加标后测定值 mg/L30.2 回收率 (％)102 是否合格+ 加标回收率样品分析百分比：10% 实验室质量控制记录表 加标回收率分析测定值单位： mg 样品编号DB1#+ 取样量（ mL）100.00 标准溶液浓度（ mg/L）1000 加标体积 mL 1.00 加标量 mg 1.00 加标前测定值 mg 2.00 加标后测定值 mg 3.02 回收率 (％)102 是否合格+ 加标回收率样品分析百分比：10% 加标前测定值=样品浓度×体积=20.0mg/L ×100mL=2.00mg 加标后测定值=样品浓度×体积=30.2mg/L ×100mL=3.02mg 加标量 =标准溶液浓度×加标体积 =1000mg/L×1mL=1mg （2）加标液体积大于加标样品体积1%，（不能忽略加标溶液的体积）例如：标准溶液浓度为100mg/L 序号1#1#
回收率 回收率包括绝对回收率和相对回收率。 绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物，经过样品处理都有一定的损失。做为一个分析方法，绝对回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基质中定量加入药物，经处理后与标准品的比值。标准品为流动相直接稀释而来，而不是同样品一样处理。若一样，只是不加基质来处理，可能会有很多影响因素被此屏蔽掉。如全部转移有机相时只转移了98%等。也就因此失去了绝对回收率的考察初衷。 相对回收率严格来说有两种。一种是回收试验法，一种是加样回收试验法。前者是在空白基质中加入药品，标准曲线也是同此，这种测定用得较多，但有标准曲线重复测定的嫌疑。第二种是在已知浓度样品中加入药物，来和标准曲线比，标准曲线也是在基质中加药物。相对回收率主要考察准确度。 回收率加样回收试验 加样回收就是在已知浓度的样品里加该样品量的80%、100%、120%的对照品，然后测定结果各3次共9次，结果减去已知的量再除以加入量就是回收率，一般都要求达到95%以上，即于已知被测成分含量的成药中再精密加入一定量的被测成分纯品，依法测定。测定值应在线性范围内，用实测值与原样品含被测成分量之差，除以加入纯品量，计算回收率。 A ：样品所含被测成分量 B ：加入纯品量 C ：实测值 回收率试验至少需进行3次试验（n=3），或三组平行试验（n=6），加入欲测样品或成分量相同或不同，后者则可进一步验证测定方法取样量多少更为适合。 为了反映各次回收率的实验波动情况，建议除写出各次试验的实测数据，并计算实测值的均数，标准差（S ）及相对标准偏差（RSD ）。相对标准偏差较小的实验波动较小，重复性较好。计算方法如下： % %100回收率=?-B A C
我是做中药的，对西药不是很了解，但我知道中药的回收率是95~105%。对于特殊品种，如黄芪的含量测定，公认的很难达到标准，但也要求你的申报资料达到要求。审评专家说“你的资料上的内容明显都不符合标准，我又如何让你通过评审，最起码你的申报资料要达到标准的要求。但是你作实验就要注意了，你可以从作的很多实验里面选出5个达到要求的数据。”其中的意思要靠大家自己去领会。 我不了解你所测定成分的性质，就我感觉你是不是可以从对照品的加入方式，还有对照品的溶解方式，溶媒的选择上再试一试。我在做中药的过程中发现有些成分选用不同的溶媒溶解的时候，液相色谱图的峰形还是有变化的。 【资料】加标回收率对样品测试准确度的影响 加标回收率对样品测试准确度的影响 准确度既可用于说明测量结果，也可用于测量仪器的示值。当用于测量结果时，表示测量结果与被测量真值之间的一致程度。在一定条件下可用加标回收率来表示样品测定的准确度。 在理化分析中，用测定加标回收率表示准确度的方法有一定的局限性，主要有以下几方面： 一般认为加入试样中的标准物质的量与试样待测物质的量相近为易，尽管这项要求并不严格，但较大量的差别所引起的误差是应该重视的。众所周知，由于生产工艺的差别和环境、原料被测对象、定位、测量条件等的差异变化规律难以掌握，所以很难估计到试样中待测物质的量，而且即使能估计到试样中待测物质的量，由于标准物质的浓度变化范围小，对环境、温度条件、测量条件要求高，不易做到合适的加入量。亚硝酸的盐氮是自然界中氮循环的中间产物，即使环境、温度状况较稳定，氮的各种形态的转换也在不断进行，一旦环境、温度状况有所变化，试样中氮的某一形态必然会发生较大变化，如果此时用标准物质测定加标回收率，必然会有更大误差。 加入标准物质的形态，性质与试样中待测物质未必一致，处理步骤就有所不同，这容易增加新的待测物质损失，而且加入的标准物质还有可能与试样中其他物质发生化学反应，从而产生固体沉淀及挥发性气体之类物质，势必会造成更大误差。用氰化物标准物质加入试样中测定加标回收率时，如试样的pH值过低，则易产生挥发性气体，氰化物会被分解，会导致测定值的偏低，亚硝酸的盐氮的测定也存在类似的情况。 有的试样中待测物质不稳定或方法中所用药品，试剂不稳定，此时也不适宜用测定加标回收率的方法来反映操作的准确度，硫化物标准物质加入试样后就很容易产生沉淀或被分解，用对氨基二甲基胺光度测定时，其所得加标回收率范围仅为80-95%，在做氰化物的工作曲线时，氰化物标准溶液的浓度由硝酸银溶液来标定，两次标定的终点显示均为不明显的颜色变化属半定量分析的范围，所以尽管标准曲线的准确度，精密度易于合乎要求，但进一步提高分析水平则不易做到，所以这两个项目操作水平的高低仅用测定加标回收率来反映不是最佳的方法。 总之用测定加标回收率的方法来反映分析操作水平时，特别需要注意相应的条件，切勿千篇一律，在实际分析中应力争做到以下几点：选择合适的分析方法；准确把握所使用的试剂量；尽量减小测量误差；消除或校正系统误差；适当增加平行测定次数取平均值；杜绝过失误差等都能有效减小误差，提高分析结果的。 在测定中，尽量使用蒸馏水代替试样进行测定，较好的蒸馏水纯度高，杂质少，干扰小。这样做更能达到测定操作水平准确度的目的，值得注意的是用蒸馏水代替试样时，稀释倍数应根据待测物的性质而定，不能过大。
定义：在测定样品的同时，于同一样品中加入一定量的标准物质进行测定，将其测定结果扣除样品的测定值，以计算回收率。 加标回收率的测定可以反映测试结果的准确度。当按照平行加标进行回收率测定时，所的的结果既可反映测试结果的准确度，也可以判断其精确度。 响应值是测定值的一种习惯叫法。 一般是通过手工计算。也可编程带入计算机直接打出结果。 个人认为:(加标样品的浓度-未加标样品的浓度)/加入的纯标准品的浓度 萃取效率愈高，萃取愈完全。常用符号E表示，公式为：E=有机相中被萃物质的量/被萃物质的总量萃取效率与分配比(D)有如下关系：E=D/(D+V/V0)式中，V为水相体积；V0为有机相体积。 (加标后浓度-加标前浓度)/加标浓度×100% 1、回收率的通用公式是: 回收率(%)=(加标样品测定值-样品测定值加标量)/加标量×100% 而在测定过程中上面的值根据响应的不同可以用浓度\吸广度\质量等来表示,其表达式各式各样(其实纯粹是个小学数学问题),但有一点要注意,那就是要做到分子分母的统一,下面以浓度来表示计算公式: 回收率(%)=(加标样品测定值-样品测定值*加标样品中测定液体的比例)/加标量×100% (注意在这里加标量是用浓度来表示的,即:加标量=标准浓度*加入标准量/总体积) 从物质的量或质量来计算的话为: 回收率(%)=(加标样品测定值*总体积-样品测定值*样品加入体积)/(标准浓度*加入的标准体积)×100% 2、回收率＝回收量/添加量＝（添加后的检验值－添加前的检验值）/添加量*100％ 3、以前有浓度是A,向里面加入了浓度B,用你使用的方法测定出来的浓度是C,那么回收率就等于(C-A)/B *100% 4、什么叫回收加标试验 回收率P=[（加标试样测定值-试样测定值）/加标量]*100%。 加标，即为在待分析的样品--(1)中加入一定量的标准物质---(2)； 分析(1)和(2)中的待测物的含量，(2)中的含量与(1)中的含量的比值的百分率即为加标回收率。 用回收加标率的方法做的实验就是回收加标实验。 5、问：加样回收率/方法回收率/绝对回收率/相对回收率/提取回收率 这些概念的区别是什么呢？ 答：回收率包括绝对回收率和相对回收率。绝对回收率考察的是经过样品处理后能用
实验室质量控制技术之一 加标回收率的学习与探讨 1、准确度：单次测定或多次测定的平均值与真值之间的符合程度。准确度用绝对误差和相对误差表示。 2、评价准确度的方法标准物质测定和加标回收率测定。 3、重点学习：加标回收率 一、概念 加标回收率的测定是实验室内常用以自控的一种质量控制技术。 1、加标回收率：在测定样品的同时，于同一样品中加入一定量的标准物质进行同步测定，加标试样测定值与试样测定值的差值与加标量之比，就是加标回收率。 2、空白加标回收：在没有被测物质的空白样品基质中加入一定量的标准物质，按样品的处理步骤分析，得到的结果与加标量的比值即为空白加标回收率。 3、样品加标回收：相同的样品取两份，其中一份加入定量的待测成分标准物质，两份同时按相同的分析步骤分析，加标的一份所得的结果减去未加标一份所得的结果，其差值同加入标准物质的量之比即为样品加标回收率。 4、公式： 二、测定注意事项 1、加标物质的形态应该和待测物形态相同，测定过程必须按相同的操作步骤进行。 2、加标量应尽量与样品中待测物含量相等或相近，并应注意对样品容积的影响；加标物的浓度宜较高, 加标物的体积应很小，一般以不超过原始试样体积的1%为好。
3、加标量不能过大,一般为待测物含量的0.5～2.0 倍。 4、当样品中待测物含量接近方法检出限时，加标量应控制在校准曲线的低浓度范围。 5、在任何情况下加标量均不得大于待测物含量的3倍。 6、加标后的测定值不应超出方法的测定上限的90%。 7、当样品中待测物浓度高于校准曲线的中间浓度时，加标量应控制在待测物浓度的半量。 8、测定率一般随机抽取样品的10～20﹪测定。 三、结果评价 清洁样品合格回收率范围为95～105﹪，废水按85～115﹪判断。
空白加标回收：在没有被测物质的空白样品基质中加入定量的标准物质，按样品的处理步骤分析，得到的结果与理论值的比值即为空白加标回收率。 样品加标回收：相同的样品取两份，其中一份加入定量的待测成分标准物质；两份同时按相同的分析步骤分析，加标的一份所得的结果减去未加 标一份所得的结果，其差值同加入标准物质的理论值之比即为样品加标回 收率。 加标回收率的测定, 是实验室内经常用以自控的一种质量控制技术. 对于它的计算方法, 给定了一个理论公式： 加标回收率= (加标试样测定值－试样测定值)÷加标量×100% 理论公式使用的前提条件 文献[1 ]中对加标回收率的解释是:“在测定样品的同时, 于同一样品 的子样中加入一定量的标准物质进行测定, 将其测定结果扣除样品的测定值, 以计算回收率. ”因此,使用理论公式时应当满足以下2 个条件：① 同一样品的子样取样体积必须相等; ②各类子样的测定过程必须按相同的 操作步骤进行。 1.2 理论公式使用的约束条件 文献[2 ]中强调指出: 加标量不能过大,一般为待测物含量的0.5～ 2.0 倍, 且加标后的总含量不应超过方法的测定上限; 加标物的浓度宜较高, 加标物的体积应很小，一般以不超过原始试样体积的1%为好。 1.3 理论公式的不足之处 ( 1) 各文献对公式中“加标量”一词的定义, 均未准确给定, 使其含 义不是十分明确. 从公式的分子上分析, 加标量应为浓度单位; 从公式的 分母上理解, 应为加入一定体积的标准溶液中所含标准物质的量值, 为质 量单位。 (2) 若公式中的加标量为浓度单位, 此时的加标量并不是指标准溶液 的浓度, 而应该是加标体积所含标准物质的量值除以试样体积(或除以试 样体积与加标体积之和)所得的浓度值. 这里存在着浓度换算, 而在理论 公式中并没有明确予以表现出来。
加样回收率 文稿归稿存档编号：[KKUY-KKIO69-OTM243-OLUI129-G00I-FDQS58-
加样回收率液色迷人 加标回收率的测定可以反映测试结果的准确度。 进行加标回收率测定时应注意以下问题： 1）加标物的形态应和待测物的形态一致。 2）加标量应尽量与样品中待测物含量相近，并注意对样品容积的影响。3）加标后的测定值不应超过方法的测定上限的90%。 计算方法一: (测定量-已含量)/加入量乘以100%计算方法二: 测定量/(已含量+加入量) 乘以100%以上两种计算方法不知哪种是可行的,还是都可以使用 我认为方法一可行，更准确些加样回收率(%)=(测得量一原有量)/加入量x 100% ＝实际测得加入量／理论加入量方法二不可行加样回收率(%)=测定量/(已含量+加入量) x 100% ＝实际测得总量／理论总量 从误差传递的角度，以第一种为宜 我认为方法一可行，2005年版药典一部附录加样回收率也是这样要求的。 关于加样回收率的实验设计：1.高中低三个浓度的选取原则：高浓度应为样品浓度的120％左右、中浓度应为样品浓度 的100％左右、低浓度应为样品浓度的80％左右。2.高中低三个浓度样品的制备：最好采用加入50％量的样品，然后分别加入70％、50％、
30％量的对照品储备液，制成供试样品，每个浓度三份。3.测定：采用测定方法分别测定，这个时候要注意你之前制定的标准曲线的范围(线性 范围)，是否能涵盖这九份样品的浓度范围也就是说这九份样品的浓度都应该在你的 标准曲线范围内。4.得到测定结果后的结算：应采用你的结果值，也就是每份样品的最终计算结果，而不 是测定过程中没有经过计算的数据，因为你的加样回收率要体现的是全部操作过程的准 确与变异程度，其中也包括数据计算。 关于药物定量分析中加样回收率实验的再探讨? 回收率包括绝对回收率和相对回收率。绝对回收率考察的是经过样品处理后能用于分析的药物的比例。因为不论是生物基质还是制剂辅料中的药物，经过样品处理都有一定的损失。做为一个分析方法，绝对回收率一般要求大于50%才行。它是在空白基质中定量加入药物，经处理后与标准品的比值。标准品为流动相直接稀释而来，而不是同样品一样处理。若一样，只是不加基质来处理，可能会有很多影响因素被此屏蔽掉。如全部转移有机相时只转移了98%等。也就因此失去了绝对回收率的考察初衷。相对回收率严格来说有两种。一种是回收试验法，一种是加样回收试验法。前者是在空白基质中加入药品，标准曲线也是同此，这种测定用得较多，但有标准曲线重复测定的嫌疑。第二种是在已
为什么要做精密度和回收率试验？ 测量方法确认技术分成以下几类。 (1)正确度试验(标准物质分析试验、回收率试验、不同方法的比对试验)。 (2)精密度试验(室内重复性、中间精密度、协同试验、极差试验)。 (3)检出限的确定。 (4)测量范围试验。 (5)影响结果因素的系统评价。 (6)结果不确定度的评价。 根据测量方法预期用途的特定要求,选用以上至少两项确认试验或评价技术,以便得到与特定要求相关的技术指标。 在没有系统偏差或系统偏差不显著时,精密度好,则正确度高。否则精密度好,正确度不一定高。方法精密度好,才可能采用最少的重复测定次数得到准确的结果。从这个意义上说,方法的精密度对正确度有很大影响。因此,测量方法的精密度要优于正确度的限量,才能满足测量方法正确度的要求。 新制定的标准测量方法应首选实验室间协同试验来确定测量方法精密度,扩充和更改的标准测量方法应视情况选择其他精密度试验。 实践中通常把残留分析检测方法的精密度试验简化为高(略低于检测方法的最高限量)、中(检出限的两倍)、低(略高于检出限)3个浓度各进行不少于10次的测试。应用线性回归原理进行测量的方法一般在线性范围内选择包括检测低限、检测高限在内的6个质量水平样品分别进行不少于3次的测试。检测结果经统计应满足拟确认测量方法精密度的要求。化学分析方法一般采用Horwite方程： cM=2(1-0.5lgc)(%)(c为浓度水平,1,10,100,1000,,)评价方法的精密度。 对于组成不十分清楚的试样, 常采用加入回收法。在试样中加入已知量的被测组分与等量的另一份相同的试样平行进行分析, 求得加入的被测组分的回收率, 由回收率检查系统误差的大小。 提高试验精密度和采用回收试验，都是为了尽可能减少实验误差，使得试验更准确。
分析化学中标准曲线及加标回收 来源：邢台水文局文章作者：曹秋香录入时间：09-04-02 16:39:04 在实验中，常用标准曲线法进行定量分析，通常情况下的标准工作曲线是一条直线。标准曲线的横坐标(X)表示可以精确测量的变量(如标准溶液的浓度)，称为普通变量，纵坐标(Y)表示仪器的响应值(也称测量值，如吸光度、电极电位等)，称为随机变量。当X取值为X1, X2,……Xn时，仪器测得的Y值分别为Y1, Y2, ……Yn。将这些测量点Xi, Yi描绘在坐标系中，用直尺绘出一条表示X与Y之间的直线线性关系，这就是常用的标准曲线法。用作绘制标准曲线的标准物质，它的含量范围应包括试祥中被测物质的含量，标准曲线不能任意延长。用作绘制标准曲线的绘图纸的横坐标和纵坐标的标度以及实验点的大小均不能太大或太小，应能近似地反映测量的精度。 由于误差不能完全避免，实验点完全落在工作曲线的的情况是极少的，尤其是在误差较大时，实验点比较分散，它们通常并不在同一条直线上，这样凭直觉很难判断怎样才能使所连接的直线对于所有实验点来说误差是最小的，目前较好的方法是对实验点(数据)进行回归分析。 研究随机现象中变量之间相关关系的数理统计方法称为回归分析，当自变量只有一个或X 与Y在坐标图上的变化轨迹近似一直线时，称为一元线性回归。 加标回收率：在测定样品的同时于同一样品的子样中加入一定量的标准物质进行测定，将其测定结果扣除样品的测定值，以计算回收率。 加标回收率的测定可以反映测试结果的准确度。当按照平行加标进行回收率测定时，所得结果既可以反映测试结果的准确度，也可以判断其精密度。 在实际测定过程中，有的将标准溶液加入到经过处理后的待测水样中，这不够合理，尤其是测定有机污染成分而试样须经净化处理时，或者测定挥发酚、氨氮、硫化物等需要蒸馏预处理的污染成分时，不能反映预处理过程中的沾污或损失情况，虽然回收率较好，但不能完全说明数据准确。 进行加标回收率测定时，还应注意以下几点：1、加标物的形态应该和待测物的形态相同。 2 、加标量应和样品中所含待测物的测量精密度控制在相同的范围内，一般情况如下：①加标量应尽量与样品中待测物含量相等或相近，并应注意对样品容积的影响；②当样品中待测物含量接近方法检出限时，加标量应控制在校准曲线的低浓度范围；③在任何情况下加标量均不得大于待测物含量的3倍；④加标后的测定值不应超出方法的测量上限的90％；⑤当样品中待测物浓度高于校准曲线的中间浓度时，加标量应控制在待测物浓度的半量。3、由于加标样和样品的分析条件完全相同，其中干扰物质和不正确操作等因素所导致的效果相等。当以其测定结果的减差计算回收率时，常不能确切反映样品测定结果的实际差错。
1、方法空白method blank, MB 或称样品制备空白，每批样（少于20 个）必带做。 用于验证萃取-分析的全过程是否引入玷污。 在无基底的情况下，加入与制备其他样品一样的溶剂、试剂、替代物，走完 样品预处理的全过程；再加入内标，走完仪器分析的全过程。由于没有基底，替 代物的回收不应受到影响。 2、实验室空白加标/实验室空白加标平行lab blank spike/lab blank spike duplicate, LBS/LBSD 每批样（少于20 个）必带做。 LBS用于检验分析方法的准确度。 LBSD用于检验方法的精度。它们用于检验实验室的分析系统。 在无基底的情况下，加入与制备其他样品一样的溶剂、试剂、替代物，和目 标物的标准溶液，走完样品预处理的全过程；再加入内标，走完仪器分析的全过 程。 3、基底加标/基底加标平行matrix spike/matrix spike duplicate, MS/MSD 每批样（少于20 个）必带做。 MS用于检验分析方法的准确度。 MSD 用于检验方法的精度。它们用于检验实验室的分析系统。 任选一个样品做基底，加入与制备其他样品一样的溶剂、试剂、替代物，和 目标物的标准溶液，走完样品预处理的全过程；再加入内标，走完仪器分析的全 过程。 MS/MSD 中加入的替代物和目标物的标准溶液可以与LBS/LBSD 一样。 两者之间的差异仅在于一个有基底，另一个仅有溶剂。 若MS 结果坏而LBS 结果好： 则说明实验室分析结果是好的，只是基底干扰大，用于MS/MSD 的样品不合适。 MS/MSD 加入的时间间隔问题： 假如离萃取时间很早就加入，大部分目标物与基底相作用的时间长，与基底化合物结合得更紧。如果提前24 小时加入标准，让溶剂挥发，比在样品预处理前即刻加入，结果可能是大不一样的。溶剂挥发后目标物更容易与基底化合物结合。 MS/MSD 加入量的问题： 一般来说，加标量越多越好，但是，加入的量应与目标物的量在同一水平上为好。还应考虑样品中目标物的基底水平，一般应加入1-5 倍的基底的量的标准。计算回收率时，仅计算有效回收，即加入的目标物应引起仪器的响应值增加1 倍以上。 LBS 与MB 的差别在于： LBS 中加入了目标物的标准，可以检查回收率，即样品制备过程的回收率。LBS/LBSD 与下述的MS/MSD 的差别在于有无基底。如果LBS/LBSD 失败的话，证明QC 失败，任何样品的测试都得不到好数据，而如果LBS/LBSD 成功但MS/MSD 失败，则还有可能是因为基底干扰过大而引起的