血液肿瘤是一类具有高度异质性的疾病，其诊疗需要结合形态学、免疫学、遗传学和分子生物学进行综合分析。二代测序（Next-generation sequencing, NGS）作为新的分子生物学技术，具有通量高、灵敏度高、成本低等优势，是探索血液肿瘤的分子发病机制并指导临床诊疗的重要手段。为推动NGS在血液肿瘤诊疗中的应用，提高诊疗水平，中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会、中华医学会血液学分会、中华医学会病理学分会组织国内相关的血液、病理和检验专家，结合国外权威资料和已积累的大样本数据，制订了NGS在血液肿瘤中应用的中国专家共识。
血液肿瘤中常见的分子生物学异常主要包括基因突变、融合基因及基因异常表达。目前NGS在基因突变的检测方面应用最为广泛和成熟，本共识仅涉及基因突变的检测。
一、NGS在血液肿瘤诊疗中的应用价值
1．诊断分型：
基因突变的检测在急性髓系白血病（AML）伴重现性遗传学异常、遗传易感性髓系肿瘤、骨髓增殖性肿瘤（MPN）、骨髓增生异常综合征伴环形铁粒幼红细胞（MDS-RS）、毛细胞白血病（HCL）和淋巴浆细胞淋巴瘤/华氏巨球蛋白血症（LPL/WM）的诊断中具有关键性的作用，对于其他血液肿瘤则起到辅助诊断的作用[1,2,3,4,5,6,7,8]。
2．预后判定：
基因突变是各类血液肿瘤预后判断的重要依据，目前NCCN指南已提出了基于基因突变的AML预后分层体系[1]。此外，MDS、MPN、MDS/MPN、急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤（CLL/SLL）、LPL/WM、大颗粒淋巴细胞白血病（LGLL）中，已经证实了一些具有明确预后意义的突变基因[2,3,4,5,6,7,8]。其他血液肿瘤中突变基因的预后意义尚有待于进一步研究。3．指导治疗：
一方面，基因突变检测可提供分子治疗靶点，对应靶向药物进行治疗，目前已有基于突变基因的靶向药物应用于临床或处于临床试验阶段，其中FLT3、IDH1/2、BRAF及JAK-STAT信号通路相关的突变基因已有靶向药物上市[1,4,5]；另一方面，基因突变可以导致对某些药物的敏感或者耐受，及时检测有助于治疗方案的调整。例如，TP53突变的CLL/SLL患者对常规化疗反应差，MYD88和CXCR4基因突变可影响伊布替尼在LPL/WM中的治疗效果，ABL1激酶区突变是慢性髓性白血病（CML）和Ph ALL酪氨酸激酶抑制剂（TKI）耐受的主要机制之一[4,7,8]。4．微小残留病（MRD）监测：
基因突变是MRD监测的分子标志物之一[9]。虽然实时定量PCR方法和流式细胞学是目前主流的MRD监测方法，但是由于NGS灵敏度随测序深度加深可进一步提高，在MRD监测方面具有更大的优势。
5．克隆演变：
血液肿瘤在发展过程中会伴随动态的克隆演变，或是基因突变负荷的改变，或是新的突变基因的出现，及时监测基因改变，有助于了解疾病进展并调整治疗方案
[10]。
二、基本流程
（一）检测的基因种类列表设计
1．检测的基因：
血液肿瘤相关检测基因由临床血液肿瘤专家和实验室专家共同制定，主要依据中国抗癌协会、中华医学会、WHO、NCCN等机构发布的血液系统疾病诊疗指南或者专家共识。对于其他权威文献报道的重要基因，可在验证之后纳入基因列表。血液肿瘤易感的胚系突变基因，根据检测需求可以纳入，例如CEBPA、DDX41、RUNX1、ETV6、GATA2等基因除了可发生体细胞突变外，发生胚系突变可导致髓系肿瘤的易感[2,4]。检测基因的数量应在满足临床需求的基础上，综合疾病类型、实验技术、样本数量以及检测成本达到最优化的设计[11,12]。随着基础及临床研究的不断深入，检测的基因种类亦需随之更新。
2．检测区域：
被检测的基因所覆盖区域可参考临床诊疗指南、权威数据库、文献及实验室自建数据库等。首先应纳入基因热点突变区域或重要结构域的编码区域，例如NPM1基因c.860_863为热点突变区域，NOTCH1基因突变最多见于HD结构域及ΔPEST 结构域[13]；无明确热点突变区域或突变位点分布比较分散的基因，应检测全部外显子，例如TP53、RUNX1等；剪接位点突变有可能导致外显子跳跃，影响蛋
白功能，建议根据数据库记录和文献报道将剪接位点±5 bp的区域纳入检测范围；对于存在非翻译区（UTR）突变的基因，例如BCL6，则应纳入相应区域检测[14]。需要注意的是，对于不能覆盖的热点突变类型或重要区域可通过其他检测方法进行补充，并在检测报告中明确说明。
（二）实验流程
1．样本采集：
疑诊为血液肿瘤的患者，初诊时应留存新鲜骨髓、外周血或组织样本，以备进行NGS检测，未留存者可使用初诊时的骨髓涂片进行检测。骨髓采集量以1~3 ml 为宜，外周血采集量3~5 ml为宜，若白细胞计数偏高或偏低，应适当调整采集量，使单个核细胞总数达到1×107以上。抗凝剂首选EDTA抗凝剂或枸橼酸钠抗凝剂，禁止使用肝素抗凝，推荐24 h内4 ℃冷藏运送。福尔马林固定后的组织标本需选择肿瘤成分，切片厚度8~10 μm，5~8片为宜，常温运输。已染色标本不推荐进行NGS检测。条件允许的病例，可从同一患者采取正常组织作为胚系突变对照。
2．DNA提取：
DNA质量是NGS检测成功的关键因素，同一患者的不同病灶组织、不同组织切片应分别单独进行DNA提取，并对DNA质量进行评估，包括浓度、纯度和完整性分析。由于FFPE组织标本以及骨髓涂片所提取的DNA易片段化，且因保存环境及保存时间不同，导致DNA片段化的程度参差不齐，因此各实验室应具有相应的方法检测DNA的完整性或降解程度，并设立明确的合格样本标准[11]。
3．文库制备：
文库制备用于目标区域的富集，主要有杂交捕获法和扩增子建库法，无论采用何种方法制备文库，均需使用已验证过的建库试剂[15]。多标本同时测序应有相应的分子标签用于区分不同的测序标本，明确不同的检测标本和分子标签的一一对应关系；必要时，可对加标签的方法及试剂进行说明[16]。文库浓度过高会导致多克隆数据的产生，降低有效测序数据量；过低会导致整体测序数据的减少，因此在测序之前推荐使用实时定量PCR或其他方法对文库进行定量，将文库浓度调整至合适的水平。每个检测项目应设定其文库质量的要求，并设立明确的合格文库标准。
4．上机检测：
目前测序主要有电位检测和光学检测两种基本原理，检测DNA合成过程中释放的氢离子或荧光信号。为保证测序质量、检测区域覆盖深度及报告时效性，需要根据样本数量和质量选取适当的测序平台和芯片。
（三）生物信息学分析流程
1．质控分析：
由测序平台产生的原始数据通常会存在碱基召回错误、插入删除错误、低质量读段（reads）及接头污染等问题，会在一定程度上影响下游的分析过程。因此，在对测序结果进行具体的生物信息学分析之前，要先对下机数据进行质量评估，制定有效的质量控制标准，包括碱基的质量Q20、目标区域平均测序深度、均一
性等评价参数。血液肿瘤的基因突变检测，测序深度应≥500×，平均测序覆盖度、均一性以及在靶率均≥90%。
2．数据过滤：
低质量读段会影响下游的序列处理和分析，因此需要对测序数据进行过滤处理。数据过滤所针对的读段主要有四种：测序质量低的读段（low quality reads），重复读段（duplicate reads），含有核苷酸的插入、删除和替换等错误的读段（insertion/deletion/mismatch）和带有人工污染的读段（adaptor等）。常用的数据过滤软件有Trimmomatic、Fastx_toolkit、NGS QC Toolkit等。
3．序列比对：
当读段经过质控与过滤等步骤达到一定的质量标准之后，需要将其比对到参考基因组上。目前普遍参考的人类基因组参考序列为Human hg19。不同的比对方法根据不同的比对策略设计了不同的算法，常用的比对程序软件有MAQ、BWA、Bowtie/Bowtie2、SOAP/SOAP2、mrFAST和Stampy等，实验室应当选取合适的比对软件，建立完善的实验室比对流程。
4．突变位点注释：
突变位点识别常借助于Samtools、GATK等识别工具。对突变位点的注释内容包括功能信息、频率信息、软件预测结果信息以及疾病数据库信息，常用的包括Ensembl、RefSeq、GENCODE、dbSNP、1000genomes、ESP、ExAC、COSMIC、HGMD、Clinvar、polyphen和SIFT等。
5．突变位点筛选：
筛选与鉴别疾病相关突变位点需要经过严格的筛选流程，至少需要排除低质量变异、未有明确意义的非编码区变异、同义单核苷酸变异（SNV）及已知健康人群中的基因多态性位点。
（四）报告内容
1．基本信息：
报告中除患者信息、标本信息、送检日期、报告署名及日期等一般资料外，还应包括：检测基因列表、检测区域及突变类型；使用的检测平台、目标区域的富集方法、平均测序深度、数据分析软件名称及版本号；对相关专业术语进行解释说明；本实验室报告突变位点的规则、检测方法的局限性、检测灵敏度和准确度等；注明是否通过其他方法补充了NGS未覆盖或覆盖不佳的检测区域等[11,16]。2．突变位点的描述：
突变位点信息应该包括基因名称、突变的物理坐标、cDNA的转录本号、外显子位置、符合人类基因组变异协会（HGVS）书写规范的突变类型、氨基酸突变类型、变异等位基因频率以及该突变位点的测序深度等[17]。参考序列推荐使用美国国立生物技术信息中心（National Center of Biotechnology Information）收录的参考序列。当使用各基因编码DNA参考序列描述突变时，推荐最常使用的经典转录本（canonical sequence）[18]。
3．突变位点分级报告：
不推荐将良性或可能良性突变在报告中报道。建议突变位点根据临床意义的明确性进行分级报告：
①一级变异：具有明确临床意义的突变，包括：国家食品药品监督管理总局（CFDA）、美国食品药品管理局（FDA）等机构批准的用药治疗靶点；血液肿瘤诊疗指南或专家共识中有明确诊断、治疗、预后意义的突变；尚未进入诊疗指南或专家共识，但有权威文献或大规模报道在血液肿瘤中具有诊疗意义的突变。
②二级变异：具有潜在临床意义的突变，包括：基于多个小规模研究报道在血液肿瘤中具有诊断、治疗或预后意义，但尚未达成共识的突变；新发现的疾病相关基因重要结构域的体细胞突变。
③三级变异：临床意义未明的突变，对于尚有争议的突变位点，实验室必须制定相关规则，可以发现突变即报告，并附上说明和意义；也可以不报告或只报告小部分突变结果，并附上说明、参考文献及数据库。
4．报告解读：
突变位点的临床意义解读要平实客观、清晰易懂。推荐写明突变位点的人群突变频率、蛋白功能危害性预测和疾病数据库的记录，根据疾病诊疗指南、专家共识和既往研究说明突变位点在临床诊断、治疗和预后评估中的意义，注明其相关药物及正在开展的状态信息，并附上数据库和参考文献来源。对于胚系突变，除了疾病诊疗指南及重要参考文献外，推荐参考OMIM、HGMD和ACMG等数据库或学术机构中遗传疾病变异分类指导注释临床意义，并附上数据库和参考文献来源。
阴性结果并不能完全排除患者不存在基因突变，可能是由于检出灵敏度或检测区域局限性所致，报告中应当以医师可以理解的方式对此予以说明[19]。
三、质量控制与管理
1．实验室要求：
NGS检测实验室的总体设计与要求应参考《分子病理诊断实验室建设指南（试行）》、《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》等行业文献和要求。检测人员、生物信息分析人员、报告分析人员和提供咨询人员应具备相应专业背景且经过相应培训取得上岗资质[20]。实验室区域设置和环境需要满足实验环节和仪器要求。NGS检测试剂及测序平台应首选CFDA认可的产品。涉及实验室自配试剂、探针等，应该有严格的试剂制备标准操作规程（SOP），并经过临床实验室自建项目（LDT）验证合格后方可使用[11,18,21,22]。
2．质量控制：
NGS实验室应建立质量管理体系，对于标本采集和处理、实验操作、生物信息分析和报告分析各个环节均需要建立SOP文件，实验操作程序和生物信息分析须经过性能验证或确认[15]。
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表1
血液肿瘤相关突变基因的种类列表[1,2,3,4,5,6,7,8]
表1
血液肿瘤相关突变基因的种类列表[1,2,3,4,5,6,7,8]
注：AML：急性髓系白血病；ALL：急性淋巴细胞白血病；MDS：骨髓增生异常综合征；MPN：骨髓增殖性肿瘤
实验环节需要设置阴/阳性对照[11,18]。阳性对照一般采用包含已知突变信息的混合样本作为质控材料，并且其中应当包含最低检测限的突变位点，实验时同时进行检测，以确保其检出能力。阴性对照一般采用明确无突变或无核酸的样本作为质控材料，实验时同时进行检测，以确保实验过程中无污染及无非特异性。
实验室应定期参加相应检测项目的室间质量评价或能力验证；若无法实现，应通过与其他实验室（如使用相同检测系统的实验室）比对的方式，判断检验结果的可接受性。
样本质量问题、检测过程的不确定因素以及数据分析可能存在的漏洞，都可能导致检测结果中存在假阳性或者假阴性。实验室需要确定适宜的cut off值，在cut off值以上的结果可以采用自动化结果，但若出现比较疑似单碱基插入或缺失的未知突变，建议进行人工核对，并采用Sanger测序、ARMS-PCR、数字PCR等方法进行验证。而对于cut off值以下的有意义位点必须进行人工核对，同时采用ARMS-PCR、数字PCR或二次建库/测序方法进行验证[18]。很多实验室的NGS 测序平台都可能会出现一定数量的'实验室特异性'的突变，此类突变是该检测系统特有的假阳性突变，应在报告时予以剔除。
3．信息系统：
信息系统的功能应满足临床需要，包括数据分析、存储、传输及安全性等。生物信息分析流程应包括所有的算法、软件、脚本、参考序列和数据库，可以是内部的、供应商开发的或开源的。实验室应有记录NGS生物信息分析步骤的书面程序用来分析、解释、报告NGS检测结果，且针对每份NGS病例数据分析报告，需要设立追溯机制，确保检测中涉及的生物信息数据分析流程能够追溯[11,15]。实验室应规定原始序列核心数据的保存期限，并在医师要求或患者检测需要时，允许实验室间重新分析、重新注释及重新解释。同时应确保NGS数据内部和/或外部存储、转移的保密性以及数据的完整性。
4．样本管理：
检测后剩余的核酸样品应尽量长期保存，以备必要时复查，同时也为开展科研工作提供条件[11,18]。有条件的实验室可建立自己的样本库，样本库的建立需按照相关规定进行，标本的信息需完整，所有信息须由专人负责，并完善各项书面记录。
四、总结
随着分子生物学在血液肿瘤发病机制和临床诊疗研究的不断深入，NGS在血液肿瘤中的应用将会越来越广泛和高效。本共识阐述了NGS在血液肿瘤中应用的基本原则和总体流程，并对血液肿瘤的临床诊疗提供有效帮助。NGS在未来的技术、分析内容和结果解读方面会不断进步和完善，在血液肿瘤的实践应用过程中也会带来各种挑战。
委员会成员
参与共识讨论的专家：哈尔滨血液病肿瘤研究所（马军、邱林）；吉林大学第一医院（白鸥）；中国医科大学附属盛京医院（刘卓刚、张继红）；北京大学第一医院（任汉云）；解放军总医院（高春记）；北京协和医院（陈杰、梁智勇、周道斌）；中国医学科学院阜外医院（周洲）；中国食品药品检定研究院（黄颖）；中国合格评定国家认可委员会（周亚莉）；卫生部临床检验中心（彭明婷）；北京大学肿瘤医院（朱军）；北京大学人民医院（秦亚溱）；北京大学第三医院（克晓燕）；山西省肿瘤医院（苏丽萍）；山西医科大学第二医院（杨林花、王晨）；河北燕达陆道培医院（刘红星）；河北医科大学第二医院（罗建民）；空军军医大学西京医院（高广勋、王哲）；山东省立医院（王欣）；山东大学齐鲁医院（侯明、纪春岩）；上海交通大学医学院附属瑞金医院（赵维莅）；海军军医大学附属长海医院（杨建民、何妙侠）；上海交通大学医学院附属仁济医院（侯健）；复旦大学附属肿瘤医院（杜祥）；复旦大学附属中山医院（刘澎、侯英勇）；江苏省人民医院（乔纯、李建勇）；苏州大学附属第一医院（吴德沛、陈苏宁）；江苏省临床检验中心（许斌）；南京大学医学院附属鼓楼医院（樊祥山）；徐州医科大学附属医院（李振宇、桑威）；安徽省立医院（孙自敏）；安徽医科大学第一附属医院（曾庆曙）；福建医科大学附属协和医院（胡建达）；厦门大学附属第一医院（徐兵）；河南省肿瘤医院（宋永平）；郑州大学第一附属医院（姜中兴）；河南省人民医院（孙恺）；华中科技大学附属协和医院（胡豫）；华中科技大学附属同济医院（周剑峰）；武汉大学中南医院（左学兰）；中南大学湘雅医院（赵谢兰）；暨南大学医学院血液病研究所（李扬秋）；南方医科大学南方医院（刘启发、梁莉）；广东省人民医院（杜欣、翁建宇）；深圳市第二人民
医院（杜新）；南方医科大学珠江医院（李玉华）；重庆医科大学（丁克越）；陆军军医大学新桥医院（张曦、郭乔楠）；四川大学华西医院（牛挺、刘卫平）；陆军军医大学西南医院（陈洁平）；四川省人民医院（黄晓兵）；重庆医科大学第一附属医院（刘林）；宁夏医科大学总医院（郑波）；青海省人民医院（李文倩）；云南省人民医院（杨同华）；昆明医科大学第二附属医院（周泽平）；新疆维吾尔自治区人民医院（王晓敏）；海南省人民医院（姚红霞）；天津市临床检验中心（杨彬）；天津市肿瘤医院（张会来、李晓玲）；中国医学科学院血液病医院（蔺亚妮、张冬雷、朱平、魏辉、邱录贵、肖志坚、王建祥、汝昆）（执笔：蔺亚妮、张冬雷、朱平、刘红星、丁克越、乔纯、彭明婷、汝昆）
恶性肿瘤CIK/DCCIK临床治疗手册 肿瘤的CIK细胞过继免疫治疗应用的报道已近10年，2009年6月，国家卫生部正式批准CIK细胞治疗作为第三类医疗技术应用于临床（卫办医政发 [2009] 84号）。结合我公司治疗数千病例的经验，总结制定本治疗规范，以方便临床使用。 一、产品知识 肿瘤生物治疗简述 长期以来，肿瘤治疗最常见的方法是手术、放疗和化疗。但这三种传统的常规模式均有其自身的局限性。 随着人们对肿瘤发生发展机制的深入研究，及肿瘤免疫学、分子生物学、生物工程技术的发展，肿瘤的生物治疗迅速发展，成为肿瘤治疗的第四种治疗模式。生物治疗具有较强的针对性、特异性、有效性，对正常造血及免疫系统、主要器官无负面影响和明显毒性，被认为是本世纪肿瘤综合治疗模式中最活跃、最有前途的治疗手段。生物治疗可以单独使用，也可以与现代手术、化疗和放疗方法联合应用，具有很强的互补作用，不但具有清除体内不同部位的肿瘤细胞，防止肿瘤复发与转移的作用，而且对病人受损的免疫系统又能起到恢复与 重建的独特作用。 目前，肿瘤生物治疗主要有5 类：细胞因子治疗、单克隆抗体及其偶联物技术、基因治疗、过继细胞治疗和肿瘤疫苗治疗。其中，CIK 细胞治疗是最具有 发展应用价值的过继细胞治疗方法，而DC 细胞治疗是最具有发展应用价值的肿瘤疫苗治疗方法。 CIK细胞 1、CIK基本信息 CIK细胞，即细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-Induced Killer，CIK)是一种新型的免疫活性细胞，CIK增殖能力强，细胞毒作用强，具有一定的免疫特性。由于该细胞同时表达 CD3 +和 CD56+ 两种膜蛋白分子，故又称为NK 细胞
启东市永兴线东段路基路面工程 合作建设项目 “四新”技术推广及应用 编制： 审核： 南通林洋交通建设工程有限公司 启东市永兴线东段路基路面工程合作建设项目项目经理部 二〇一六年五月
“四新”技术推广及应用计划 一、工程概况 本工程为启东市启隆乡永兴路东段改建工程（K0+100-K12+560）路基全幅宽24.5m，半幅宽12.25m，路面半幅宽度为10.5m，全长12460米。其中桥梁4座（K1+251.3二通港河桥、K3+467.5东方河桥、K5+095仙鹤村河桥、K10+666桥），单孔3m盖板涵2道（K8+890、K12+114），单孔1.5m圆管涵1道，K6+441处新港河已列入水系建设计划。 永兴路东段改扩建工程结构层为： Ⅰ型主线行车道、硬路肩路面结构 上面层：4cm细粒式沥青混凝土（AC-13C） 下面层：6cm中粒式沥青混凝土（AC-20C） 封层：单层乳化沥青下封（不计厚度） 基层：18cm 4.5%水泥稳定碎石 底基层：32cm 12%石灰土（分两层施工，每层16cm）Ⅱ型与主线道路相交的机耕道路衔接处路面结构 面层：4cm细粒式沥青混凝土（AC-13C） 封层：单层乳化沥青下封（不计厚度） 基层：16cm 4.5%水泥稳定碎石 底基层：12%石灰土调平 本次施工范围为各施工图中路基、路面、桥涵工程。
二、推广“四新”技术的意义 所谓“四新”技术，即新技术、新工艺、新材料、新设备。 四新技术在工程施工过程中代表了先进技术与先进生产力，是交通工程从劳动力密集型向技术性转变的桥梁。通过在施工过程中运用“四新”技术可以提升施工工效、提高施工质量、降低施工成本，从而扩大项目盈利空间，最终提高公司经济效益。 三、“四新”技术推广运用 本工程在施工过程中拟定积极运用各类四新技术，以此顺应交通工程技术的迅速发展态势，从项目出发，提升企业可持续发展的同时，争取项目效益最大化。本工程主要运用的四新技术见下表：（1）混凝土裂缝控制技术 （2）泵送商品混凝土技术 四、采用四新技术介绍 1、混凝土裂缝控制技术 本工程桥梁墩台帽为大面积混凝土结构，为了有效控制混凝土裂纹产生，施工过程中将采用多项混凝土裂缝控制技术。 1.1、混凝土裂缝控制技术 混凝土裂缝控制与结构设计、材料选择、施工工艺等多个环节相关，其中选择抗裂性较好的混凝土是控制裂缝的重要途径。本技术主要是从混凝土材料角度出发，通过原材料选择、配比设计、试验比选
济祁淮合段路基07标“四新”技术应用总结报告 一、工程概况 济南至祁门高速公路淮南至合肥段是济祁高速公路的一段，北接永城至利辛至淮南段，南连合肥至桐城至枞阳段，是安徽省“四纵八横”高速公路网规划中“纵三”的重要部分，承担着山东、河南等华北地区通往江西、福建、广东等华南地区，项目沿线县域之间及通往周边地市的交通出行。 路线起于淮南市毛集曹集村西，接济祁高速利辛至淮南段，自北往南延伸，在新建队东北跨越淮河，此后跨越寿西湖行洪区，经寿县双桥东、窑口西、堰口西、安丰塘东、保义东、安丰东、茶庵东、三觉东，在肥西县高店乡仪城西的大楼岗附近接合六叶高速公路，里程约82.72公里。 本标段起点桩号K131+000，终点桩号为K148+800，里程长17.8Km，双向四车道高速公路，设计速度120Km/h，路基宽度27.0m。本项目主要以借土填筑为主，共设取土坑14处；设置服务区1处、大桥1座、分离立交4道、中桥2座、车行天桥1座，其中桩基186根计5368m；25m箱梁80片、13mT梁108片、16mT 梁126片；涵洞通道共计99道，其中圆管涵49道、装配式管形涵洞通道13道，装配式箱形涵洞通道37道。本标段工程总造价1.917亿元（含暂定金额2000万元）；计划开工日期2014年4月，计划竣工日期2015年11月，总合同工期20个月。 二、“四新”技术应用综述 本标段自开工之始，公司领导就十分重视，要求项目部精心施工，严格管理，技术创新，针对该工程特点，结合施工实际，我们从工程一开工就积极依靠科技来提高效率，积极应用各项新技术、新工艺、新材料、新设备。我们充分认识到，只有积极推动技术进步，不断创新，才能谋求更高的发展，并积极创建安徽建工集团质量安全标准化示范工地。 进行广泛的社会调研，积极收集有关技术资料，及时了解和掌握新技术发展动态，力求为我所用。 对推广应用的新技术项目逐层落实教育，进行三级技术培训。做到从管理层到操作层都能熟知其应用方法，确保应用的可靠性。 及时对完成应用的新技术成果总结，并作新技术应用综合社会效益经济效益
新技术、新材料、新工艺的应用 在本工程施工过程中，我们将积极推广应用新技术，提高工程质量，加快施工进度，节约成本，努力创建新技术特色示范工程。 1、粗钢筋连接技术 在墙板和柱中的竖向钢筋直径16及以上的全部采用电渣压力焊，水平筋中直径Ф14及以上的钢筋采用闪光对焊，直径在25及Ⅲ级钢均采用直螺纹连接以节约钢材，提高受力性能。 2、模板体系 墙板及楼板采用九夹板作为模板，柱、墙在梁、板模支模完成后，方可浇捣柱、墙混凝土，以使柱墙与梁板接头浑然一体。 3、建筑节能和新型墙体材料应用技术 主体工程墙体采用空心砖。 应用节能保温密封的塑钢门窗。 4、新型建筑防水和塑料管应用技术 屋面防水采用SBS防水卷材。 室内给排水管及电线套管均采用硬聚氯乙烯管材。
“四新”技术和建筑节能技术在工程上的应用 在本工程施工过程中，我们积极推广应用新技术，提高工程质量，加快施工进度，节约成本，努力创建新技术特色示范工程。 1、现浇大块模板及早拆模支撑体系技术： 墙板及楼板采用大块竹（木）模板施工，柱、墙在梁、板支模完成后，方可浇捣柱、墙混凝土，以使柱墙与梁板接头形成一体。 模板支撑体系采用先进的快拆支撑体系： 其方案是：当楼板砼浇筑5~7d,达到设计强度的50%以上时，可提前早拆柱头，先拆除横楞，而柱头顶板仍然支顶着现浇楼板，直到砼强度达到符合规范允许拆模数值为止的模板施工技术。 流程：（1）根据工程结构设计图进行配模设计，绘制模板工程施工图，并对模板、支撑的刚度和强度进行验算。（2）计算出所需的模板和支朱撑的规格与数量，（3）制定确保质量和安全施工等有关措施（4）制定支模和拆模工艺流程，早期拆模时间。 （5）采取“小流水段”施工方法，提高模板使用效果。 大块竹（木）模板施工，拼接少、速度快、加固简便，可充分发挥施工机械的作用，提高了生产效率，加快了施工进度。减轻劳动强度提高工效。 2、混凝土中综合使用外加剂及泵送技术： 为了加快工程进度，提高工效，现场采用搅拌式泵送砼， 混凝土中掺加活性掺合料（如粉煤灰），优化混凝土的亚微观结构，提高骨料与砂浆之间的界面强度，可改善混凝土施工性能，起到对混
2020-2021生物标志物在消化道肿瘤免疫治疗的应用探 索（完整版） 2018年免疫元年的开始，正式拉开了免疫治疗在各个癌种的应用的大幕。目前免疫治疗的研究进展代表了多个肿瘤治疗的进展。随着免疫治疗在临床实践的应用开始广泛，各种临床试验的结果陆续公布，特别是今年美国临床肿瘤学会（ASCO）年会和欧洲肿瘤内科学会（ESMO）大会上消化道领域公布的重磅结果，应该是彻底改变了食管和胃癌治疗的格局。但是临床试验中及真实世界中并不是所有的患者都能从免疫治疗中获益。通过生物标志物去筛选有效人群成为免疫后时代重要的研究方向。本文总结了消化道肿瘤中常用的生物标志物，供大家思考，以带来治疗过程中的启示。 PD-L1的表达在消化道肿瘤的探索 目前PD-L1的表达在食管癌和胃癌临床试验中用于分层最为多见。在KEYNOTE系列当中我们可以看到PD-L1的表达CPS评分越高，免疫治疗的总生存（OS）获益更为明显。 比如KEYNOTE-180研究[1]是第一个帕博利珠单抗三线治疗晚期食管癌/胃食管结合部癌的疗效和安全性的研究。在整体人群中中位OS 5.8个月，在CPS ≥10的患者中位OS更长[6.3个月（4.4~9.3个月）vs 5.4个月（3.9~6.3个月]。
二线治疗帕博利珠单抗对比化疗的KEYNOTE-181研究[2]中，在总体人群中的OS两组没有达到统计学上的差异（7.1个月vs 7.1个月），但是在PD-L1 CPS≥10的患者中，帕博利珠单抗显著延长了患者总生存达2.6个月（P<0.05），而且客观缓解率（ORR）在帕博利珠单抗组高达化疗组的3倍（21.5% vs 6.1%）。在亚洲人群及中国人群当中同样重复了相同的趋势。 所以根据KEYNOTE-181的结果，2019 NCCN指南已将帕博利珠单抗推荐为PD-L1 CPS≥10的晚期食管癌患者二线治疗方案。今年ESMO报道的KEYNOTE-590研究[3]比较了帕博利珠单抗联合化疗与单纯化疗一线治疗晚期食管癌患者的疗效，总体人群中2组的OS达到了统计学差异[12.4个月vs 9.8个月，HR=0.73（0.62~0.86）]，而且在CPS≥10的患者中OS获益更好，死亡风险也下降明显（13.5个月vs 9.4个月，HR=0.62，P<0.001)。同样在胃癌的临床试验KEYNOTE-059队列1中[4]帕博利珠单抗单药用于胃癌三线及后线治疗，PD-L1阳性（CPS>1）的患者无论是无进展生存（PFS）、ORR 还是OS都高于PD-L1阴性组。 虽然KEYNOTE-061研究[5]帕博利珠单抗单抗对比紫杉醇化疗没有在PD-L1表达阳性患者中发现OS有差异，但是在CPS≥10的亚组中，帕博利珠单抗二线治疗相比紫杉醇可延长生存。 KEYNOTE-062研究[6]作为帕博利珠单抗单药或联合顺铂+5-FU一线治疗晚期胃癌或胃食管结合部癌的随机、对照、多中心Ⅲ期临床研究，
四新技术应用 为了贯彻执行国家建设部文件以及陕西省建设厅文件精神，我公司根据本项目情况以及近年来新技术、新工艺应用的经验，要求项目经理部充分认识到新技术、新工艺推广应用工作的重要性，加强组织领导，使新技术、新工艺的实地应用，使其落实在本工程的各项工序施工中，提高工程质量，发挥经济效益。 根据本工程的具体情况以及我公司近年来新技术、新工艺应用的经验，本项目计划推广应用新技术、新工艺、新材料的主要内容有： ⑴粗直径钢筋的连接：对于直径大于18的钢筋采用剥肋直螺纹连接。 不但能保证钢筋的连接质量，而且能提高工程的施工进度。 ⑵钢筋综合下料：工程钢筋采用“优化配筋，综合下料”的方法进行管理。即：利用计算机技术制作优化的配筋单，所有Ⅱ级钢筋进行对焊加长最后断料成型；对于Ⅰ级钢筋进行冷拉处理，其伸长8%左右，既起到除锈作用，又节约钢筋。 ⑶清水模板体系：新型模板和脚手架技术。 ⑷梁、板模板采用双面涂膜钢化竹质多层板整体模板，保证砼一次成型。 模板和脚手架是土木建筑施工中量大而广的重要施工工具，模板工程占钢筋砼工程造价的20—30%，劳动量的30—40%，工期限的40—50%，因此，采用新型模板及脚手架，是减少模板工程费用，节省劳动力、降低砼结构工程费用的重要途径。 （5）膨胀型抗裂防渗剂的应用可以有效的提高混凝土的抗裂能力。 （6）在装修工程中，为了解决混凝土抹灰开裂、空鼓问题，采
用抹灰防裂剂，保证了抹灰质量，从而减少了发少返工。 （7）合理的外架形式可以减少钢化材料的投入。 （8）机电安装方面，上水采用承插连接，速度快，质量好，安装后可立即通水试压投入使用。 （9）现代化微机管理：工程施工的现代化管理，是体现一个施工企业素质和反应这个企业的综合实力，能够全面的反应与管理工程施工全过程，减少人为因素，优化管理程序，确保工程的优质高效。 以上新技术均已不同程度的成功应用在我公司的各个工程项目中，提高了我公司的管理水平与技术素质，取得良好的经济效益和社会效益。
新建铁路锡林浩特至二连浩特站前工程 XEZQ-2标 DK164+100～DK366+556 “四新”技术项目中的应用 中铁七局集团有限公司锡二铁路项目经理部 二○一二年五月
新工艺、新技术、新材料在工程中的应用 由于科学技术的不断进步，在工程建设领域，新技术、新工艺和新材料也不断涌现。为了确保工程质量、降低工程成本、节约劳动消耗和缩短工期、提高工程建设的综合经济效果的目的。我们在施工过程中积极采用新技术、新工艺、新材料。 一、高性能混凝土以及混凝土的泵送技术应用 本工程的基础及主体结构全部采用泵送混凝土，均采用固定泵或汽车泵输送混凝土，泵送混凝土的应用大大提高了工作效率，降低了工人的劳动强度，缩短了工期。 在混凝土内添加粉煤灰和高效减水剂，有效保证地下砼的抗渗、防裂、抗冻、抗碳化、抗盐、抗酸等要求,对增强混凝土的和易性和可泵送性，预防砼中碱—集料反应，十分有效。同时节约了水泥和水用量，从而降低了施工成本，并保证了砼的质量稳定性，加快了施工进度。 二、粗直径钢筋连接技术 对于大直径钢筋，优先应用等强度直螺纹连接技术，并辅之以套筒冷挤压技术；钢筋接头均能达到“A”级。等强度直螺纹连接技术的最大优点是可以在施工现场外、对钢筋进行提前加工，现场操作工序简单，施工速度快，适用范围广，不受气候影响，且成本较底等。套筒挤压连接的优点是接头强度高，质量稳定可靠，安全、无明火，不受气候影响。 本工程钢筋施工量很大，运用多种机械连接技术，将大大提
高项目工程钢筋分项工程的施工质量，加快钢筋工程施工效率，缩短工期。其较高的施工工效、可靠的质量保证满足了工程的施工需求。若采用搭接连接，在钢筋配料加工中，每根钢筋会多0.5米用料，若采用对焊连接施工困难，运输不方便。采用等强度直螺纹连接技术后，减少了钢筋的浪费，节约了施工成本。 三、新型模板应用技术 本工程主体结构工期极短，无法考虑模板周转问题，且工程质量要求高，若使用组合钢模，浇捣时易漏浆，不易保证砼质量。且截面尺寸和平整度难以控制。经研究决定采用九夹板及定型大模板，根据构造尺寸进行配套设计。编制专项的模板工程方案，为降低成本，采用普通钢管脚手架，从整体构造要求上设置垂直与水平的剪刀撑。 大木模板主要特点：强度、刚度和硬度等性能较高。表面光滑、易脱模。割锯方便、拼装严密，能较好地控制混凝土的外形尺寸，保证砼质量，加快工程进度。耐水、耐磨、耐腐蚀、保温性能强，在混凝土养护时不会变形。梁、柱节点处能保证模板的拼装质量。主要是加工方便、施工进度快、效率高的特点，为本工程的进度、质量保证奠定基础。 四、旋挖钻进成孔工艺： 由于地层多为砂卵石，采取常规的成孔方法比较困难。因此投标人采用旋挖钻机成孔，其施工速度是普通反循环钻机施工，效率高、方便灵活、成孔速度快、扩孔率小。特别是在砂卵石层
云南建投香丽高速公路土建施工第十项目部“四新”技术推广应用方案 云南建投香丽高速公路土建施工第十项目部 2018年3月
目录 一、工程概况 ----------------------------------------- - 1 - 二、新技术应用计划 ----------------------------------- - 1 - 2。1、本工程选用的新技术 -------------------------- - 1 - 三、新技术应用解析 ----------------------------------- - 2 - 3.1、工字木梁模板施工工法 ------------------------- - 2 - 3.2、混凝土控温、控裂技术(大体积混凝土施工）------- - 6 - 3.3、大直径钢筋直螺纹连接技术 -------------------- - 10 - 3.4、松散堆积体及小型滑坡钢管桩施工工法----------- - 11 - 3。5、负弯矩张拉装置及台车技术 ------------------- - 12 - 四、新技术应用实施管理措施 -------------------------- - 13 - 4.1、经济措施 ------------------------------------ - 13 - 4。2、组织措施 ----------------------------------- - 13 - 4.3、技术管理措施 -------------------------------- - 13 -
新技术应用与推广方案 一、工程概况 香丽第十工区项目部位于丽江市境内，起点K85+200位于丽江市龙蟠乡新联村，止点K94+200位于龙蟠乡星明村,路线全长9Km，其中路基12段，里程4。87KM，桥梁11座，里程3.8KM，隧道一座，里程0.33KM；桥隧里程占比45.73％（桥隧造价占比78.12％）。本项目内部协议工程量清单总价93310。1299万元,原设计台帐+变更台帐金额为81821.8054万元.岩羊1#连续刚构大桥是本项目的控制性工程. 岩羊1号大桥位于香格里拉至丽江高速公路10标段岩羊村段,岩羊村东侧约300处，为跨越山谷而设，中心里程K90+780，是本项目部的控制性工程之一。该桥位于整体式的路线段，单幅桥宽为12米.左幅桥跨布置为:(（3×29）+（4×29））米连续T梁+(83+150+150+83)米连续刚构+（5×29）米连续T梁，里程:K90+339～K91+161，桥长为822米。右幅桥跨布置为2×(4×29)连续T梁+（83+150+150+83）米连续刚+2×（3×29））米连续T梁,里程： K90+309~K91+193,桥长为884米。 二、新技术应用计划 2。1、本工程选用的新技术 “科学技术是第一生产力”，要使科技成果尽快转化为生产力,产生经济效益和社会效益,关键在于推广应用。在施工期间，我们将对工程技术难点进行攻关。同时，将把施工现场作为科技进步的主战场,围绕工程项目，根据施工需要，充分推广应用“四新”科技成果，采用先进合理的技术措施和现代化管理手段,提高质量、缩短工期、降低消耗、提高效益,圆满完
作者：尹银亮、陈会平、毛良伟译来源：生物谷 原文刊登于《分析化学》综述Analytical Chemistry 原文标题：Landscape of Next-Generation Sequencing Technologies 索引信息：https://www.doczj.com/doc/ad18568055.html,/10.1021/ac2010857 | Anal. Chem. 2011, 83, 4327–4341 原文作者：Thomas P. Niedringhaus, Denitsa Milanova, Matthew B. Kerby, Michael P. Snyder,and Annelise E. Barro 译者资料： 尹银亮，香港华大基因研发中心有限公司email：stevenyinbio@https://www.doczj.com/doc/ad18568055.html, 陈会平，毛良伟，武汉华大基因科技有限公司 【内容】 第二代测序 第二代测序成本 第三代测序技术 单分子测序法 边连接边测序法 边合成边测序法 纳米孔测序技术 蛋白质纳米孔测序法 固态纳米孔测序法 长距离阅读DNA的扩展方法 总结性评论 DNA测序正处在技术上天翻地覆剧变的阵痛之中，其突出特点是，测序通量（测序数据量）的大幅增长，原始数据中每个碱基的测序成本急剧下跌，并伴随着以巨资购买仪器以引进新技术的需求。以前看似高不可攀的奢侈性研究活动（如个人基因组测序，宏基因组学研究，以及对大量重要物种的测序），在短短几年之间，正以急速的步伐而变得越来越切实可行了。本篇综述将集中讨论在第三，第四代测序方法背后的故事：它们所面临的挑战；各种方法的局限性；以及它们带给我们的充满诱惑的前景。 第一代DNA测序技术用的是1975年由桑格（Sanger）和考尔森（Coulson）开创的链终止法或者是1976-1977年由马克西姆（Maxam）和吉尔伯特（Gilbert）发明的化学法（链降解）. 在1977年，桑格测定了第一个基因组序列，是噬菌 体X174的，全长5375个碱基。其测序方法和历史过程以前已做过详细回顾。 后来的四色荧光桑格测序法（每一种荧光代表四种碱基中的一种）被用在自动毛细管电泳测序系统中，此系统由应用生物系统有限公司（Applied Biosystems Inc.）推上市场，后来该公司被整合入生命技术公司(Life Technologies)和贝克曼.考尔特公司(Beckman Coulter inc.)（见表1）。发表于2001年的第一个人类基因组
四新技术应用情况总结 济祁淮合段路基07标“四新”技术应用总结报告 一、工程概况 济南至祁门高速公路淮南至合肥段是济祁高速公路的一段，北接永城至利辛至淮南段，南连合肥至桐城至枞阳段，是安徽省“四纵八横”高速公路网规划中“纵三”的重要部分，承担着山东、河南等华北地区通往江西、福建、广东等华南地区，项目沿线县域之间及通 往周边地市的交通出行。 路线起于淮南市毛集曹集村西，接济祁高速利辛至淮南段，自北往南延伸，在新建队 东北跨越淮河，此后跨越寿西湖行洪区，经寿县双桥东、窑口西、堰口西、安丰塘东、保 义东、安丰东、茶庵东、三觉东，在肥西县高店乡仪城西的大楼岗附近接合六叶高速公路，里程约82.72公里。 本标段起点桩号K131+000，终点桩号为K148+800，里程长17.8Km ，双向四车道高速公路，设计速度120Km/h，路基宽度27.0m 。本项目主要以借土填筑为主，共设取土坑14处；设置服务区1处、大桥1座、分离立交4道、中桥2座、车行天桥1座，其中桩基 186根计5368m ；25m 箱梁80片、13mT 梁108片、16mT 梁126片；涵洞通道共计99道，其中圆管涵49道、装配式管形涵洞通道13道，装配式箱形涵洞通道37道。本标段工程 总造价1.917亿元（含暂定金额2000万元）；计划开工日期2019年4月，计划竣工日期2019年11月，总合同工期20个月。 二、“四新”技术应用综述 本标段自开工之始，公司领导就十分重视，要求项目部精心施工，严格管理，技术创新，针对该工程特点，结合施工实际，我们从工程一开工就积极依靠科技来提高效率，积 极应用各项新技术、新工艺、新材料、新设备。我们充分认识到，只有积极推动技术进步，不断创新，才能谋求更高的发展，并积极创建安徽建工集团质量安全标准化示范工地。 进行广泛的社会调研，积极收集有关技术资料，及时了解和掌握新技术发展动态，力 求为我所用。 对推广应用的新技术项目逐层落实教育，进行三级技术培训。做到从管理层到操作层 都能熟知其应用方法，确保应用的可靠性。 及时对完成应用的新技术成果总结，并作新技术应用综合社会效益经济效益 分析、收集，真理好应用新技术资料，留作今后再次应用时参考，以求取得更好的成果。
高通量测序：第二代测序技 术详细介绍 -标准化文件发布号：（9456-EUATWK-MWUB-WUNN-INNUL-DDQTY-KII
在过去几年里，新一代DNA 测序技术平台在那些大型测序实验室中迅猛发展，各种新技术犹如雨后春笋般涌现。之所以将它们称之为新一代测序技术（next-generation sequencing），是相对于传统Sanger 测序而言的。Sanger 测序法一直以来因可靠、准确，可以产生长的读长而被广泛应用，但是它的致命缺陷是相当慢。十三年，一个人类基因组，这显然不是理想的速度，我们需要更高通量的测序平台。此时，新一代测序技术应运而生，它们利用大量并行处理的能力读取多个短DNA 片段，然后拼接成一幅完整的图画。 Sanger 测序大家都比较了解，是先将基因组DNA 片断化，然后克隆到质粒载体上，再转化大肠杆菌。对于每个测序反应，挑出单克隆，并纯化质粒DNA。每个循环测序反应产生以ddNTP 终止的，荧光标记的产物梯度，在测序仪的96 或384 毛细管中进行高分辨率的电泳分离。当不同分子量的荧光标记片断通过检测器时，四通道发射光谱就构成了测序轨迹。 在新一代测序技术中，片断化的基因组DNA 两侧连上接头，随后运用不同的步骤来产生几百万个空间固定的PCR 克隆阵列（polony）。每个克隆由单个文库片段的多个拷贝组成。之后进行引物杂交和酶延伸反应。由于所有的克隆都是系在同一平面上，这些反应就能够大规模平行进行。同样地，每个延伸所掺入的荧光标记的成像检测也能同时进行，来获取测序数据。酶拷问和成像的持续反复构成了相邻的测序阅读片段。
Solexa 高通量测序原理 --采用大规模并行合成测序法(SBS, Sequencing-By-Synthesis)和可逆性末端终结技术（Reversible Terminator Chemistry） --可减少因二级结构造成的一段区域的缺失。 --具有高精确度、高通量、高灵敏度和低成本等突出优势 --可以同时完成传统基因组学研究（测序和注释）以及功能基因组学（基因表达及调控，基因功能，蛋白/核酸相互作用）研究 ----将接头连接到片段上，经 PCR 扩增后制成 Library 。 ----随后在含有接头（单链引物）的芯片（ flow cell ）上将已加入接头的 DNA 片段变成单链后通过与单链引物互补配对绑定在芯片上，另一端和附近的另外一个引物互补也被固定，形成“桥” ----经30伦扩增反应，形成单克隆DNA簇 ----边合成边测序（Sequencing By Synthesis）的原理，加入改造过的DNA 聚合酶和带有4 种荧光标记的dNTP。这些dNTP是“可逆终止子”，其3’羟基末端带有可化学切割的基团，使得每个循环只能掺入单个碱基。此时，用激光扫描反应板表面，读取每条模板序列第一轮反应所聚合上去的核苷酸种类。之后，将这些基团化学切割，恢复3'端粘性，继续聚合第二个核苷酸。如此继续下去，直到每条模板序列都完全被聚合为双链。这样，统计每轮收集到的荧光信号结果，就可以得知每个模板DNA 片段的序列。目前的配对末端读长可达到2×50 bp，更长的读长也能实现，但错误率会增高。读长会受到多个引起信号衰减的因素所影响，如荧光标记的不完全切割。 Roche 454 测序技术 “一个片段 = 一个磁珠 = 一条读长（One fragment =One bead = One read）”
“四新”技术应用计划 1、工程概况 XXX水库位于XXX境内XXX河上。坝址在XXX河出山口前2km，距XXX市约30km。XXX水库工程是一项以灌溉为主，兼顾发电的水利枢纽工程。水库正常蓄水位1164.45m，对应库容2851万m3，调节库容996万m3；死水位1124.89m，死库容80 万m3；设计洪水位1166.2m，校核洪水位1166.79m。根据《水利水电工程等级划分及洪水标准》(SL 252-2000)的规定，本工程为Ⅲ等工程，工程规模为中型工程。大坝为沥青混凝土心墙砂砾石坝，坝高73.6m，主要建筑物级别为3级（其中大坝提高至2级），次要建筑物为4级，临时建筑物为5级 拦河大坝（沥青混凝土心墙砂砾石坝）设计洪水标准为50 年一遇，洪峰流量为150m3/s，校核洪水标准1000 年一遇，洪峰流量为305m3/s；泄洪放水洞，溢洪道的下游消能防冲设施：设计洪水标准为30 年一遇，洪峰流量为130m3/s。 本工程由挡水坝、右岸导流泄洪供水洞及右岸表孔溢洪道组成。 大坝为沥青砼心墙沙砾石坝，拦河布置，坝顶长228.4最大坝高73.6m；倒流泄洪供水洞由导流洞改建而成，布置在河道右岸，为有压洞，由进口引渠段、固定拦污栅段、矩形有压段、竖井段、洞身段、出口段组成，全长534.37m；溢洪道布置在右岸，采用岸边式侧槽无闸溢洪道，开敞式布置，溢洪道轴线与坝轴线成64.61°夹角，斜向下游。溢洪道由侧堰段、调整段、泄槽段、挑流段、护坦段五部分组
成。 2、推广“四新”技术的意义 所谓“四新”技术，即新技术、新工艺、新材料、新设备。 四新技术在工程施工过程中代表了先进技术与先进生产力，是建筑业从劳动力密集型向技术性转变的桥梁。通过在施工过程中运用四新技术可以提升施工工效、提高施工质量、降低施工成本，从而扩大项目盈利空间，最终提高公司经济效益。 3、“四新”技术推广运用 本工程在施工过程中拟定积极运用各类四新技术，以此顺应建筑业技术的迅速发展态势，从项目出发，提升企业可持续发展的同时，争取项目效益最大化。本工程主要运用的四新技术见下表：（1）混凝土裂缝控制技术 （2）大直径钢筋直螺纹连接技术 （3）工程量自动计算技术 （4）滑动模板施工技术 （5）泵送商品混凝土技术 4、采用四新技术介绍 4.1、混凝土裂缝控制技术 本工程基础工程为超长、超大面积混凝土结构，为了有效控制混凝土裂纹产生，施工过程中将采用多项混凝土裂缝控制技术。 4.1.1、混凝土裂缝控制技术 混凝土裂缝控制与结构设计、材料选择、施工工艺等多个环节相
在过去几年里，新一代DNA测序技术平台在那些大型测序实验室中迅猛发展，各种新技术犹如雨后春笋般涌现。之所以将它们称之为新一代测序技术(next-generation sequencing)，是相对于传统Sanger测 序而言的。Sanger测序法一直以来因可靠、准确，可以产生长的读长而被广泛应用，但是它的致命缺陷 是相当慢。十三年，一个人类基因组，这显然不是理想的速度，我们需要更高通量的测序平台。此时，新 一代测序技术应运而生，它们利用大量并行处理的能力读取多个短DNA片段，然后拼接成一幅完整的图 画。 Sanger测序大家都比较了解，是先将基因组DNA片断化，然后克隆到质粒载体上，再转化大肠杆菌。对 于每个测序反应，挑出单克隆，并纯化质粒DNA每个循环测序反应产生以ddNTP终止的，荧光标记的产 物梯度，在测序仪的96或384毛细管中进行高分辨率的电泳分离。当不同分子量的荧光标记片断通过检测器时，四通道发射光谱就构成了测序轨迹。 在新一代测序技术中，片断化的基因组DNA两侧连上接头，随后运用不同的步骤来产生几百万个空间固定的PCR克隆阵列(polony )。每个克隆由单个文库片段的多个拷贝组成。之后进行引物杂交和酶延伸反应。由于所有的克隆都是系在同一平面上，这些反应就能够大规模平行进行。同样地，每个延伸所掺入的 荧光标记的成像检测也能同时进行，来获取测序数据。酶拷问和成像的持续反复构成了相邻的测序阅读片 段。 DNA hnginetilntion DNA fraqmentnlion fn vivo cloning and amplification Cycle sequencing 3'-... GACTAGATACGAGCGTGA.. .-5* (template) 彳-…CTGAT O 曲爭i .CTGATC^A ...CTGATCT"*^ …CTG町CTA先 _________ > .,,CTGATCTAT ..CTGATCTATC ,.CTGATCTATGC ..CTGATCTATGCT ...CTGATCTATGCTC ..CTGATCTATGCTCG — Electro pho rsesis (1 read/cnpU(ary) Cyclic array sequencing Cycle 1 (>10? reads/array) Cycle 2 Cyde 3 B- A A A Is O 0 O? What IS Ibas# 1 ? Whar is bast 卍 in vitro ndaptor ligation Generf^tiorii ol ipolony array Polymerase dNTPs Lat>0led ddNTPs
四新技术推广应用策划方案 一、工程概况 1.1、工程概述 本工程位于胶州市福州南路，东面为福州南路。现场有可供材料加工的场地，基础施工阶段现场材料加工场地狭窄。 本工程总建筑面积为51766.58 ㎡，其中地上建筑面积为37719 ㎡，地下建筑面积为7588 ㎡，地上层数19 层，地下2 层，建筑功能：地下室为汽车库、设备房、非机动车停车库，地上塔楼为商业住宅综合体。建筑物结构大屋面结构板面高75.20m，建筑物结构最高点为81.5m 。基础采用CFG桩，结构体系采用框架—剪力墙结构。 1.2、工程简介 二、新技术应用计划 2.1 、本工程分解 2.1.1 、土方工程：由我方承包和管理。
2.1.2 、基础及地下室工程：26#楼采用筏板基础地下室两层，地下室地面标高-7.4m ，负二层层 高3.7m ，嵌固层层高4.3m，室外地下室顶面标高-0.04m 。 2.1.3、主体结构工程：首层层高4.3m，首层以上为标准层，层高2 3.7m 。为框剪结构。 2.1.4、屋面工程：本工程为平屋面，屋面设有防水层、保温层、保温保护层等。 2.1.5、装饰工程：内装饰；墙体粉刷、大白，顶棚直接批灰，地下室内墙直接批灰，柱、剪力墙面 直接批灰。外墙：粉刷、无机砂浆保温、抗裂砂浆压入玻纤网、外墙涂料。 2.1.6、门窗工程：窗为铝合金窗、一级防火门及普通木门、防盗门。 2.1.7、楼地面工程：主要有水泥砂浆地面、细石混凝土地面、地砖地面。 2.2、本工程选用的新技术 “科学技术是第一生产力” ，要使科技成果尽快转化为生产力，产生经济效益和社会效益，关键在于推广应用。在施工期间，我们将对工程技术难点进行攻关。同时，将把施工现场作为科技进步的主战场，围绕工程项目，根据施工需要，充分推广应用“四新”科技成果，采用先进合理的技术措施和现代化管理手段，提高质量、缩短工期、降低消耗、提高效益，圆满完成工程施工任务。熟练、掌握新技术运用，推广新技术应用。根据本工程设计概况及实际施工作业需要，施工过程中本工程应用的主要新技术有： 本工程新技术应用列表 三、新技术应用解析 3.1、高强高性能混凝土技术 采用新技术的具体措施在有泵送砼中掺加粉煤灰，其作用是保证混凝土的水化热控制在允许的范围内。特别是在大体积混凝土施工中，会发挥极其重要的作用。 粉煤灰是燃煤电厂排出的工业固体废渣，粉煤灰混凝土的应用符合国家的环保政策，是建设部八五、九五期间推广的十大新技术之一。
一代、二代、三代测序技术 第一代测序技术-Sanger链终止法 一代测序技术是20世纪70年代中期由Fred Sanger及其同事首先发明。其基本原理是，聚丙烯酰胺凝胶电泳能够把长度只差一个核苷酸的单链DNA分子区分开来。一代测序实验的起始材料是均一的单链DNA分子。第一步是短寡聚核苷酸在每个分子的相同位置上退火，然后该寡聚核苷酸就充当引物来合成与模板互补的新的DNA链。用双脱氧核苷酸作为链终止试剂（双脱氧核苷酸在脱氧核糖上没有聚合酶延伸链所需要的3－OH基团，所以可被用作链终止试剂）通过聚合酶的引物延伸产生一系列大小不同的分子后再进行分离的方法。测序引物与单链DNA模板分子结合后，DNA聚合酶用dNTP延伸引物。延伸反应分四组进行，每一组分别用四种ddNTP（双脱氧核苷酸）中的一种来进行终止，再用PAGE分析四组样品。从得到的PAGE胶上可以读出我们需要的序列。 第二代测序技术-大规模平行测序 大规模平行测序平台（massively parallel DNA sequencing platform）的出现不仅令DNA测序费用降到了以前的百分之一，还让基因组测序这项以前专属于大型测序中心的“特权”能够被众多研究人员分享。新一代DNA测序技术有助于人们以更低廉的价格，更全面、更深入地分析基因组、转录组及蛋白质之间交互作用组的各项数据。市面上出现了很多新一代测序仪产品，例如美国Roche Applied Science公司的454基因组测序仪、美国Illumina公司和英国Solexa
technology公司合作开发的Illumina测序仪、美国Applied Biosystems公司的SOLiD测序仪。Illumina/Solexa Genome Analyzer测序的基本原理是边合成边测序。在Sanger等测序方法的基础上，通过技术创新，用不同颜色的荧光标记四种不同的dNTP，当DNA聚合酶合成互补链时，每添加一种dNTP就会释放出不同的荧光，根据捕捉的荧光信号并经过特定的计算机软件处理，从而获得待测DNA的序列信息。以Illumina测序仪说明二代测序的一般流程，（1）文库制备，将DNA用雾化或超声波随机片段化成几百碱基或更短的小片段。用聚合酶和外切核酸酶把DNA片段切成平末端，紧接着磷酸化并增加一个核苷酸黏性末端。然后将Illumina测序接头与片段连接。（2）簇的创建，将模板分子加入芯片用于产生克隆簇和测序循环。芯片有8个纵向泳道的硅基片。每个泳道内芯片表面有无数的被固定的单链接头。上述步骤得到的带接头的DNA 片段变性成单链后与测序通道上的接头引物结合形成桥状结构，以供后续的预扩增使用。通过不断循环获得上百万条成簇分布的双链待测片段。（3）测序，分三步：DNA 聚合酶结合荧光可逆终止子，荧光标记簇成像，在下一个循环开始前将结合的核苷酸剪切并分解。（4）数据分析 第三代测序技术-高通量、单分子测序 被称为第三代的测序的He-licos单分子测序仪，PacificBioscience的SMRT技术和 Oxford Nanopore Technologies 公司正在研究的纳米孔单分子测序技术正向着高通量低成本长读取长度的方向发展。不同于第二代测序依赖于DNA模板
高养中心“十二五”四新技术应用总结 “十二五”期间,我中心用“四新”技术引导公路养护的方式转变,加强四新技术的研究与应用,贯彻好“有路必养、养必优良”的养护观,大力推广应用公路养护“新技术、新材料、新工艺、新设备”,把加快科技创新能力建设放在优先地位,加大科技对公路养护的有力支撑,发挥科技创新的引领作用,坚持以四新技术推广应用研究为重点,加大科技创新力度,积极推进科学养护进程,力争在四新技术推广上有所突破。 一、对新材料进行应用推广 (一)路面坑洞修复剂(AC-K5) 在G30线高速公路桥梁养护工作中,积极探索应用新材料路面坑洞修复剂(AC-K5)进行桥梁伸缩缝的维修。路面坑洞修复剂(AC-K5)就是一种针对道路病害的水泥基修复材料,利用此种材料,既能满足伸缩缝的性能要求,又能快速便利地开展施工,维修后能够快速通车,重点解决了高速公路桥梁伸缩缝维修中施工不便、养生期长、施工及养生过程中存在安全隐患等问题,延长了桥梁的使用寿命,同时能达到较好的修复效果。 (二)SPC水泥聚合物快速修复材料 在G30线高速公路桥梁养护工作中,积极探索新材料SPC水泥聚合物快速修复材料进行伸缩缝的维修。SPC水泥聚合物快速修复材料就是甘肃公路养护技术研究院研制提出的一种新型产品,主要用于桥梁伸缩缝快速维修、桥面铺装维修以及其她混凝土工程中。本产品采
用快硬硫铝酸盐水泥+聚合物+外加剂的体系。快硬硫铝酸盐水泥具有较好的抗冻性能与低温硬化性能,能经受-50℃的严寒考验,聚合物采用羧基丁苯胶乳。这种材料通过在快硬混凝土中添加聚合物等柔性改性材料,利用柔性材料的大变形能力及抗开裂能力,改变混凝土材料受冲击变形性能,同时改善混凝土的界面粘结性能,使之在满足快速修补的同时,具有良好的伸缩缝使用性能。 (三)裂缝贴 益路泰?高分子路面裂缝贴(又名:贴缝条、压缝带)主要由高分子聚合物结合高强度聚合胎基预制组成的一种用于公路表面对裂缝进行防水处理的特殊路用材料,它能够有效阻止雨水通过路面已有裂缝浸入渗透,阻缓裂缝的进一步扩大。裂缝贴使用时裂缝不需要进行开槽、清缝处理,只需将裂缝及其两侧按超出预定宽度10~20cm进行清扫、清理完成后,将该产品揭去隔离膜后直接粘在裂缝处。该产品具有单面自粘性、施工非常简单、粘贴后可以马上开放交通、不会发生粘轮胎现象等特点。具有操作简单、施工速度快、质量可靠,美观耐用、成本低廉的优点。 （四）AC-R灌浆材料 AC-R压浆胶泥就是一种以水泥为主胶结材,经聚合物改性、配以复合添加剂的水泥基压浆材料。适用于各种结构缝隙、洞穴压浆。具有良好的粘结力,有利于与基层的有效附着;高流态、高渗透性,有利于压浆灌注的密实性;高膨胀,灌注胶泥在塑性状态发生高膨胀,保证缝隙填充密实;胶泥硬化后形成坚固的水泥石,不收缩、耐老化、耐水、
“四新”技术推广应用计划编制人： 审核人： 审批人：
目录 “四新”技术推广应用计划.......................................... 错误!未指定书签。 1、工程概况 .......................................................................... 错误!未指定书签。 2、推广“四新”技术的意义 ..................................................... 错误!未指定书签。 3、“四新”技术推广运用......................................................... 错误!未指定书签。 4、采用四新技术介绍 ............................................................ 错误!未指定书签。 4.1、混凝土裂缝控制技术................................................................. 错误!未指定书签。 4.2、大直径钢筋直螺纹连接技术..................................................... 错误!未指定书签。 4.3、建筑用成型钢筋制品加工与配送............................................. 错误!未指定书签。 4.4、工程量自动计算技术................................................................. 错误!未指定书签。 4.5、其他“四新”技术运用 ................................................................. 错误!未指定书签。