根据各种食用菌生长时对营养物质的要求，用人工方法配制而成的营养基质，供菌丝生长发育。把这种营养物质叫培养基。它如同农作物需要土壤一样。
（一）培养基种类 目前，人们采用的培养基相当多，种类各不相同。不论哪种培养基都有共同特点：一般都含有水分、碳源、氮源、无机盐以及生长因素等。水分是食用菌的组成成分，食用菌在生理活动中，需要在有水的情况下进行。 碳源是构成细胞物质的主要元素，也是食用菌生长发育所需能量来源。碳源的主要原料是糖类、淀粉、纤维素物质。代表物质是葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮、米糠、锯木、棉籽壳等。 氮源是食用菌细胞质和细胞核中蛋白质和核酸的主要元素，蛋白质和核酸是生命的基本物质。一切生命活动都离不开这些物质。氮源主要有氨基酸、蛋白胨、尿素、硫酸铵、含有氮素的物质有玉米、棉籽壳。 培养基中的无机盐虽用量不多；但不可缺少。它主要是酶类的组成成分，调节各种生命代谢活动。如磷酸二氢钾、硫酸镁。 生长因素需要量很少，是培养基中的特殊营养物质，它是维持食用菌正常生长所不可缺少的生长因素。如马铃薯、 麸皮、米糠等都含有丰富的生长因素，维生素也属此类。 。
（二）食用菌母种分离用培养基的制作 食用菌的母种就是从孢子分离培养或组织分离培养获得的菌丝体。一般常在琼脂培养基上培养。 1.马铃薯——蔗糖——球脂培养基（PDA）： 马铃薯煮汁 1000毫升 蔗糖 20克 琼脂 20克 PH值 5.5～6.0 制法：先将新鲜无病害的马铃薯洗净，去皮后切成小薄片，称200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后过滤，其滤汁为马铃薯煮汁。然后加琼脂和蔗糖煮溶，后补足水分至1000毫升，装管（瓶）灭菌备用。 一般食用菌母种的分离和培养都适合此培养基。2.麦粒培养基： 小麦粒 200克 糖 5克 碳酸钙 15克 水 500毫升 PH值 自然 制法：取小麦200克洗净，置锅中加水500毫升，煮沸20分钟，加入其他成分，煮5分钟，用纱布过滤，水汁分 装至试管的 1／3长度为好。
（三）原种和栽培种培养料的制备 原种是由母种繁殖而来，进而制成栽培种，用于播种、生产。 1.粪草培养基（适于制作蘑菇菌种）： 粪草(粪：草=6：4、堆积发酵15～20天) 90斤 米糠或麸皮 8斤 碳酸钙 1斤 糖 1斤 水 适量 2.麦粒培养基（适于制作蘑菇、凤尾菇、毛木耳菌种）： 浸湿蒸透的麦粒 88％ 木屑 10％ 石膏 2％ 水 50％一60％ 3.木屑米糠培养基（适宜各种木生食用菌的制作）： 阔叶树木屑 70％～80％ 米糠或麸皮 20％～28％ 碳酸钙 1％ 蔗糖 1％ 石膏 1％ 水 调至适量 4.棉皮培养基（平菇、凤尾菇
户） 棉籽壳 99％ 石膏粉 1％ 5.玉米芯培养基： 玉米芯 99％ 石膏粉 1％
（五）培养基的灭菌 按上述培养基装好后就要立即进行灭菌；将其中的杂菌杀死，然后才能接入我们所需要的纯菌种，进行培养。 不论是母种分离时用的斜面培养基，还是原种、栽培种瓶培养基或聚丙烯塑料袋培养基，一般都采用热力灭菌法。 高压蒸汽灭菌法：若是斜面试管培养基。应先用牛皮纸扎成捆，标明棉塞为上端部分，然后竖直放入高压锅内，进行灭菌。在1．1公斤／平方厘米压力下维持30分钟，即可达到灭菌目的。开锅取出试管，趁热放成斜面。 灭菌材料如是原种和栽培种，应在1.1公斤／平方厘米压力保持60～90分钟。这样才能达到灭菌目的。达到所规 定的时间后，应停火并逐渐排去蒸汽。待压力表的指针回复零位时，再把消毒锅的螺栓旋开，打开盖子，取出瓶子。停火排汽时必须注意，排汽阀不能一下子放大，只有一点一点开，让压力表慢慢地回复到原位，然后再揭锅盖。如果排汽过猛，锅内压力急速下降，则会造成棉塞脱落和玻璃容器破损。 常压蒸汽灭菌法：如没有具备高压锅，可用土蒸锅或蒸笼进行。在常压的条件下，以 100℃的温度持续6-8小时，以杀死培养料中的各种杂菌