色谱柱冲洗方法是指在色谱分析中，为了清洗色谱柱，去除残留的样品和杂质，保护色谱柱的使用寿命，而采取的一系列操作。常用的色谱柱冲洗方法包括以下几种：
1. 洗脱剂冲洗法：用洗脱剂反复冲洗色谱柱，以去除残留的样品和杂质。常用的洗脱剂有甲醇、乙醇、乙酸乙酯等。
2. 水冲洗法：用纯水反复冲洗色谱柱，以去除残留的盐类和其他水溶性杂质。
3. 酸碱冲洗法：用酸或碱溶液反复冲洗色谱柱，以去除残留的有机酸、有机碱和其他酸碱性杂质。
4. 溶剂冲洗法：用纯溶剂反复冲洗色谱柱，以去除残留的样品和杂质。常用的溶剂有乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。
在进行色谱柱冲洗时，需要注意以下几点：
1. 冲洗时要注意保护色谱柱，避免使用过于强烈的冲洗剂或过于频繁的冲洗，以免损坏色谱柱。
2. 冲洗时要注意洗脱剂的选择，根据不同的样品和分析要求
选择合适的洗脱剂。
3. 冲洗后要及时检查色谱柱的状态，如有异常应及时更换或修复。
目前，看到园子谈到色谱柱冲洗的问题。我来谈谈我自己的一点意见，主要针对的反向色谱柱而讲的。 1.色谱柱简介 最常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶。反相色谱系统使用非极性添充剂，以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用，辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶（如氰基硅烷键合相和氨基硅烷键合相等）也有使用,正相色谱系统使用极性填充剂，常用的填充剂有硅胶等。离子交换填充剂用于离子交换色谱；凝胶或高分子多孔微球等填充剂用于分子排阻色谱；手性键合填充剂用于对映异构体的拆分分析。 填充剂的性能（如载体的形状、粒径、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、含炭量和键合类型等）以及色谱柱的填充，直接影响待测物的保留行为和分离效果。孔径在15nm（1 nm=10埃）以下的填料适合于分析分子量小于2000的化合物，分子量大于2000的化合物则应选择孔径在30nm以上的填料。以硅胶为载体的一般键合固定相填充剂适用PH2~8的流动相。当PH大于8时，可使载体硅胶溶解；当PH小于2时，与硅胶相连的化学键合相易水解脱落。当色谱系统中需使用PH大于8的流动相时，应选用耐碱的填充剂，如采用高纯硅胶为载体并具有高表面覆盖度的键合硅胶、包裹聚合物填充剂、有机-无机杂化填充剂或非硅胶填充剂等；当需使用PH小于2的流动相时，应选用耐酸的填充剂，如具有大体积侧链能产生空间位阻保护作用的二异丙基或二异丁基取代十八烷基硅烷键合硅胶、有机-无机杂化填充剂等。 2.色谱柱的冲洗体积确定 一般情况都是冲洗色谱柱10-20倍柱体积，具体可以这样计算，根据柱内径和柱长算出色谱柱内体积。短柱一般时间就是30分钟、长柱一般冲洗60分钟就可以了。举例：内经为4. 6mm、长250mm，其柱内体积=3.14*4.6*4.6/4*250=4.153毫升，流速是1.0毫升每分钟，折中取15被柱内体积，则冲洗时间就出来了。 3.色谱柱冲洗 冲洗色谱柱最好在分析结束后，用流动相冲洗到基线平稳，然后用10%左右的有机溶剂冲洗色谱柱，主要是冲洗干净流动相中的缓冲盐。然后用100有机溶剂冲洗。最好是梯度变化冲洗。分析物可能为一些能溶解在水中，有些需要用纯溶剂才能完全去除。如果分析时间紧迫一定要把盐分冲洗干净，一般情况不要用纯水冲洗色谱柱，特别是反向柱的填料的键合集团容易折断，对色谱柱造成损伤。色谱柱被使用在某种程度上就是开始被污染了，所以色谱柱的寿命和我们使用的情况有很大的关系。虽然被污染但是对我们分析目标物没有造成影响我们也就是认为还能用。 4.色谱柱维护冲洗 常见故障筛板阻塞，解决办法是：a、过滤流动相；b、过滤样品；c、运用在线过滤或保护柱。 柱头塌陷解决方法是：：a、避免使用PH>8的流动相（针对大部分硅胶的柱子）；b、使用保护柱；c、使用预柱（饱和色谱柱）。 前面谈到的不管用什么溶剂一定要加入一定比例的用机溶剂，主要是考虑到一些疏水基团在有机溶剂里面容易伸展利于冲洗其包藏的杂质等。当我们的色谱柱在压力和柱效下降时，我可以拆开泵近端柱头的螺丝取出筛板，清洗筛板以及观察里面的填料，如填料污染严重，就要进行挖取一部分被污染的填料然后用其他废弃的柱子相同填料来填补，用新的筛板或清洗好的筛板拧好螺丝。然后冲洗观察柱压变化和测试柱效等。
色谱柱清洗及保存方法 1、尺寸排阻色谱柱： （1）树脂基质分子尺寸排阻色谱柱 ①离子性吸附：对于阳离子性吸附物质，通过提高盐浓度进行过柱清洗 （1mol/L的醋酸缓冲液） ②疏水性吸附：对于疏水性吸附物质，可通过提高有机溶剂的浓度 （PW·PW XL：50%、α及SuperAW：100%可）进行过柱清洗。 ③复合吸附：对于阳离子性·疏水性物质的去除，可提高盐浓度进行过柱， 水洗后，提高有机溶剂浓度进行过柱。 （2）硅胶基质分子尺寸排阻色谱柱 ①碱性物质的去除（离子性吸附）：通过提高淋洗液的盐浓度（通常 0.5mol/L）进行过柱清洗。 ②疏水性吸附的去除（疏水性吸附）：在淋洗液中添加甲醇、乙腈（10-20%） 等水溶性有机溶剂进行过柱清洗。本法请注意缓冲液中盐的析出。 ③在淋洗液中添加尿素、中性界面活性剂：在淋洗液中添加6-8mol/L的 尿素或0.2-0.3%的中性界面；活性剂（Triton、Tween、Brij等）后进 行过柱清洗。但需注意尿素及界面活性剂的柱中残留。 一般来说，清洗时间可选择为过柱5-10个柱体积便可。 2、离子交换色谱柱、 （1）如果预柱滤片或保护柱在分离之前曾经使用过，需要首先将预柱滤片或保护柱反接用清洗溶液冲洗15-30min。如果经过冲洗效果没有得到明显 改善，则需要更换预柱滤片或保护柱。对于Proteomix阴离子交换色谱柱，清洗溶液为含150mM硝酸钾的75%乙腈溶液（用HCl调节pH至2）。 对于Proteomix阳离子交换色谱柱，清洗溶液为含1.0M NaCl的50mM磷 酸盐缓冲液（pH10）。 （2）在使用过程中，样品经常会被吸附在柱入口端的筛板或者填料上。 当样品吸附累积到一定程度时，柱压将会升高，色谱峰形也会出现展宽。 这时就需要清洗色谱柱了。 下面是色谱柱清洗的基本步骤：
色谱柱冲洗方法 （最新版4篇） 篇1 目录 1.色谱柱冲洗的必要性 2.色谱柱冲洗的方法 2.1 水冲洗法 2.2 有机溶剂冲洗法 2.3 缓冲盐冲洗法 2.4 反冲法 3.色谱柱冲洗的注意事项 篇1正文 色谱柱是液相色谱系统中的核心部件，它在样品分离过程中起着至关重要的作用。然而，在色谱柱使用过程中，柱内可能会积累一些脏物或盐析物，影响色谱柱的分离效果。因此，对色谱柱进行定期冲洗是非常必要的。下面我们将介绍几种常见的色谱柱冲洗方法。 首先，水冲洗法是最常用的色谱柱冲洗方法。此方法操作简便，只需将色谱柱连接到水流系统上，使用纯水进行冲洗。 篇2 目录 一、色谱柱冲洗的必要性 二、色谱柱冲洗的方法 1.水冲洗法 2.纯有机相冲洗法 3.缓冲盐冲洗法
4.反冲法 5.专用清洗剂冲洗法 三、不同类型色谱柱的冲洗方法 1.反相色谱柱 2.正相色谱柱 3.离子交换色谱柱 4.凝胶渗透色谱柱 四、色谱柱冲洗的注意事项 篇2正文 色谱柱是高效液相色谱系统中的核心部件，其在样品分离过程中起到关键作用。然而，在长时间的使用过程中，色谱柱内部可能会积累一些脏物，影响色谱柱的分离效果。因此，对色谱柱进行定期冲洗是非常必要的。 色谱柱冲洗的方法有很多种，下面我们分别进行介绍： 1.水冲洗法：这是一种最常用的色谱柱冲洗方法。使用纯水或含有少量缓冲盐的水进行冲洗，可以有效去除色谱柱内部的脏物。对于反相色谱柱，可以使用纯水或甲醇/水混合溶液进行冲洗。 2.纯有机相冲洗法：在冲洗色谱柱时，可以使用纯有机溶剂（如乙腈、甲醇等）来代替水相。这种方法适用于具有疏水性的色谱柱，如 C18、C8 等。 3.缓冲盐冲洗法：在冲洗过程中，可以加入一定浓度的缓冲盐，以保持色谱柱内部的离子强度。这种方法适用于离子交换色谱柱和凝胶渗透色谱柱。 4.反冲法：这是一种比较彻底的冲洗方法，可以有效去除色谱柱内部的沉淀物。在反冲过程中，需要将色谱柱的流动相改为反向，并提高流速。然而，反冲过程可能会对色谱柱造成一定程度的损伤，因此需要谨慎操作。
c18色谱柱冲洗方法 C18色谱柱是一种常用于分离和纯化化合物的色谱柱。为了确保其最 佳效果和延长使用寿命，定期进行冲洗是必要的。下面将介绍C18色谱柱 常用的冲洗方法。 首先，为了减少样品残留和交叉污染，每次使用C18色谱柱之前，都 应该进行初期冲洗。一般来说，可以使用有机溶剂（如乙醇、醋酸乙酯等）进行30分钟的初始冲洗，以除去柱内的杂质和保留剂。 接下来是定期的背压测试。将高压端连接一个压力表，用缓冲溶液 （例如水/乙腈混合物）进行一段时间的流动，观察背压情况。如果背压 过高，可能意味着柱内部堵塞，需要进行彻底的冲洗。 彻底冲洗C18色谱柱时，可以选择不同的方法。以下是一些常用的冲 洗方法： 1.酸碱洗涤法：使用酸和碱溶液交替冲洗柱子。首先，用酸性溶液 （如1M的盐酸）冲洗1小时，然后用纯水冲洗至中性pH值。然后使用碱 性溶液（如1M的氢氧化钠）冲洗1小时，最后用纯水冲洗至中性pH值。 这种方法可以有效地去除有机污染物和离子。 2.有机溶剂洗涤法：使用强极性和非极性有机溶剂进行冲洗。首先， 用极性溶剂（如乙醇）冲洗1小时，然后用非极性溶剂（如甲苯）冲洗1 小时。这种方法适用于去除富集在柱内的极性和非极性杂质。 3.氨水洗涤法：在柱中注入5%氨水溶液，进行一段时间的洗涤，然 后进行纯水冲洗至中性pH值。这种方法适用于去除酸性物质和颗粒。
无论使用哪种冲洗方法，都应该始终检验冲洗效果。可以使用标准样品测试分离效果和恢复率，并使用色谱仪监测峰形和噪音水平。如果发现任何异常，可能需要重复冲洗步骤或更换色谱柱。 总结起来，C18色谱柱的冲洗方法包括初期冲洗、定期背压测试和彻底冲洗。彻底冲洗可以采用酸碱洗涤法、有机溶剂洗涤法或氨水洗涤法。通过定期冲洗，可以确保C18色谱柱的最佳性能和延长其使用寿命。
气相色谱仪清洁方法 一、色谱柱清洗方法 1.插入官方提供的空柱进入色谱仪进行预热，设置温度为20℃高于 样品的最高温度，并将氢气流量调至2毫升/分钟。 2.打开底部的柱炉盖，将气相色谱仪的色谱柱轻轻地取下来。 3.使用洗净涤纶丝放射管，将其接在真空泵上。 4.将色谱柱安全地放入真空泵的插槽中，然后缓慢抽真空直到压力降 到0.05毫巴以下。 5. 当Evac到所需压力时，关闭切换阀，打开洗涤管，用注射器注入 适量的洗涤液，然后打开注射器出口的送风风扇，将洗涤液吹进色谱柱内部，保护洗涤管在10分钟左右。 6.关闭洗涤管，打开切换阀，打开色谱柱的气阀，让色谱柱内的洗涤 液通过切换阀流回到洗涤液瓶中。 7.打开色谱柱上的注射器接口，放空洗涤液，然后关闭注射器接口。 8.使用步骤1中所述的洗净管，将其接在真空泵上，并将色谱柱重新 放入柱炉中。 二、仪器外部清洗方法 1.先用软布或纸巾将表面的灰尘擦拭干净。 2.使用0.1%的肥皂水或洗涤液溶液，在柔软的布上涂抹一些清洁剂。
3.用湿布轻轻擦拭色谱仪的外部表面，特别是控制面板和触摸屏等易污染的区域。 4.对于有油污的地方，可以用少量的乙醇或无水酒精进行清洁。 5.清洗完成后，用干净的软布擦拭干净。 三、其他注意事项 1.尽量避免使用有害物质来清洁色谱仪，以免对色谱柱和仪器产生损害。 2.定期清理仪器的排气系统，以避免污染物堵塞气流。 3.对于色谱柱的保养，要定期更换或检查进样口环境。 4.注意色谱仪的安全使用事项，避免发生事故。 以上就是气相色谱仪的清洁方法。清洁仪器对仪器的正常运行以及分析结果的准确性十分重要，因此清洁工作要非常细致和认真。同时，也要注意在清洁过程中的安全措施，避免对自身和仪器造成伤害。
液相色谱柱维护保养及仪器冲洗 注意：每个色谱柱使用之前都要阅读一下使用说明书。 色谱柱维护保养就是很重要得,关系到色谱柱得使用寿命与检测结果得准确性,所以任何人用过色谱柱之后，一定要对色谱柱进行保养，管理人员与使用者互相监督。 总得原则就是色谱柱要轻拿轻放,避免损坏填料;另外没有使用得情况下，一定要保证两端得堵头封好。对于具体得色谱柱,下面列出常用色谱柱维护保养得具体方法与注意事项,以便使用者参考。 (0、2ｍl/miｎ缓慢升高到０、5ml/ｍin）不接检测器冲洗色谱柱３0分钟后,将色谱柱与检测器连上,流速调为1、0ml/min冲洗色谱柱60分钟,然后不断降低有机相得比例(如８０%、５0％、10%甲醇或乙腈)各冲洗至少3０分钟。若色谱柱暂时不用,则将色谱柱保存在高比例有机相中(如８0%甲醇或乙腈,或者参考该色谱柱使用说明书中建议得溶剂中);色谱柱使用时应用与分析流动相相同比例得有机溶剂(将缓冲盐溶液换成水)冲洗色谱柱15分钟,然后再换成流动相进行样品分析。 样品分析完后,色谱柱维护与保养方法： 流动相中若含酸、碱、盐类物质,则要先用1０％甲醇或乙腈冲洗，１、0ml/min 得流速冲洗至少3０ｍｉn,再用80％甲醇或乙腈冲洗至少30miｎ,柱子保存在80%甲醇或乙腈里(具体问题具体分析，洗脱程序可以就是梯度洗脱程序,注意如果最后色谱柱保存得就是高有机相,第二天用之前一定要用高水相过渡一下,再换成流动相)。如柱子长时间未用,则柱子保存在１００％得甲醇或乙腈里。 对于含有离子对试剂得流动相如庚烷磺酸钠与十二烷基磺酸钠等,柱子应采用梯度洗脱，一般用乙腈-水系统（水：90-１0;乙腈:1０－90）冲洗时间要稍长些,然后保存于９０%乙腈。 需要特别强调得就是,目前所有得Ｃ１8柱均不能用纯水进行长时间(1小时以上)冲洗,除非有专门耐水得专用柱,否则,用纯水长时间冲洗色谱柱,会导致色谱柱得固定相流失与相塌陷,损坏色谱柱。 大多数反相色谱柱得pH稳定范围就是2~８,有得ｐH稳定范围会宽,具体p
反相硅胶键合相色谱柱的清洗 反相硅胶键合相一般包括C18 、C8 、C4 、苯基等，当用二元混合溶剂进行等强度洗脱时。为移去污染物，可用20 个体积的强洗脱溶剂，如甲醇、乙腈或四氢呋喃来冲洗柱子。如果流动相中含缓冲盐溶液，为防止有机溶剂清晰造成的盐析出，阻塞管路，应首先用20 个柱体积的不含缓冲盐的水- 有机相溶剂冲洗色谱柱，然后再用强洗脱溶剂清洗柱子。 如果用强洗脱溶剂仍不能驱除污染物，可以使用更强的溶剂或混合溶剂来洗脱。当需用一系列的有机溶剂清洗色谱柱时，应逐渐增加它们的洗脱强度，并确保溶剂之间的混溶性。对典型的反相硅胶柱，用于洗涤无缓冲盐的体系，推荐使用以下有机溶剂清洗系统：100 ％甲醇→100 ％乙腈→75 ％乙腈+25 ％异丙醇→100 ％异丙醇→100 ％四氢呋喃清洗后，按相反的顺序冲洗色谱柱，以返回到原始的流动相。如果使用者怀疑色谱柱被严重的污染或阻塞，可将二甲基亚砜与水或二甲基甲酰胺与水，以各自50 ％的比例混合，并以低于0.5mL/min 的流速通过色谱柱。 由于污染物聚集在色谱柱头，逆向冲洗会缩短污染物在柱中迁移的距离；又因为色谱柱皆在高于操作压力下填充的，通常逆向液流不会扰动色谱柱床。但如果色谱柱顶端过滤筛板的孔径大于柱底部过滤筛板的孔径，则固定相的微小粒子会在逆向冲洗过程通过筛板流出柱，从而会在柱中产生新的死空间引起柱床松动。因此在逆向冲洗前，应先确认柱管两端过滤筛板的孔径一致。 除盐：对普通反相C18 键合相柱，为除去柱中含有的缓冲盐类或水溶性物质时，不应使用纯水冲洗。因为C18 键合相像一条长链将硅胶黏结，当有有机溶剂存在时，其表面被流动相润湿，C18 长链完全展开，像海水中的海藻一样。当纯水或缓冲溶液通过时，C18 键合相不能被浸润，键合相表面会塌陷，从而将溶剂、样品分子或无机盐分子包合。此时仅用纯水无法将包合物洗脱出，应使用含5 ％有机溶剂的水溶液冲洗，以清除无机盐或水溶性物质。 蛋白污染：如果需从硅胶键合固定相清洗蛋白质残留物，必须使用和前述不同的程序。如果生物材料血浆或血清样品注入色谱柱，在大多数情况下，纯有机溶剂( 如乙腈或甲醇) 并不能溶解肽和蛋白质，用它们清洗色谱柱是无效的。然而，有时使用有机溶剂与缓冲物、酸或离子对试剂的混合物却是有效的。 清洗反相柱中的蛋白质类物质，可使用表1 溶剂系统。 表1 从HPLC 反相柱中清洗蛋白质类物质使用的清洗溶剂系统 金属污染：有时清洗硅胶反相固定相需使用特殊的技术，如在早期硅胶键合相生产中，使用高金属氧化物含量的硅胶，金属离子会吸附在键合相表面，此时可使用0.05mol/ EDTA 冲洗，将金属离子螯合，再用纯水将可溶性螯合物洗掉。 清洗溶液 TSK-SW&SW XL系列色谱柱 1. PH较低（如：pH 3.0）、浓度较高的盐溶液（如：0.5M Na2SO4）； 2. 添加水溶性有机物（MeOH、ACN、EtOH，10% -20%）的极性缓冲液；
TSKHILICAFCHICIEX系列色谱柱使用冲洗方法色谱柱的冲洗方法对于保护色谱柱、延长使用寿命、提高分离效果至 关重要。下面将分别介绍TSKHILIC、AFC、HIC和IEX系列色谱柱的冲洗 方法。 1.TSKHILIC色谱柱的冲洗方法： a.初次使用：先用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱内可能存在 的盐离子和有机溶剂。 b.然后，使用10-20mL纯水/乙醇（80:20，体积比）洗脱样品洗涤剂 残留物，同时保护柱内填料。 c.最后，使用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱床中可能存在的 溶剂残留物。 2.AFC色谱柱的冲洗方法： AFC（Affinity Chromatography）色谱柱是一种亲和色谱柱，常用于 分离具有特定亲和性的分析物。以下是一种常用的冲洗方法： a.初次使用：先用公认的吸附剂（如硫酸铵）溶液冲洗柱床两倍柱床 体积，以平衡柱内填料，并去除可能存在的污染物。 b.然后，使用适宜pH值的缓冲液（如磷酸缓冲液）进行冲洗，以去 除填料和样品中的杂质。 c.最后，使用缓冲液冲洗柱床两倍柱床体积，以达到柱床的稳定状态。 3.HIC色谱柱的冲洗方法：
HIC（Hydrophobic Interaction Chromatography）色谱柱是一种疏 水相色谱柱，常用于分离疏水性物质。以下是一种常用的冲洗方法： a.初次使用：先用有机溶剂（如乙醇）冲洗柱床两倍柱床体积，以去 除柱内可能存在的水分和杂质。 b.然后，使用含盐缓冲液进行冲洗，使样品组分与填料发生疏水相互 作用，以达到最佳分离效果。 c.最后，用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除盐离子和有机溶剂残 留物。 4.IEX色谱柱的冲洗方法： IEX（Ion Exchange Chromatography）色谱柱是一种离子交换色谱柱，常用于分离带有不同电荷的离子。以下是一种常用的冲洗方法： a.初次使用：先用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除柱内可能存在 的杂质。 b.然后，使用合适的缓冲液（含有对应离子交换基团的缓冲液）进行 冲洗，以保持样品组分在填料上的稳定吸附。 c.最后，用纯水冲洗柱床两倍柱床体积，以去除缓冲液和柱内可能残 留的离子。 总结起来，色谱柱的冲洗方法在不同的色谱柱类型中有所不同，但一 般包括先用纯水冲洗柱床，然后使用相应的洗脱剂进行洗脱和间隔冲洗， 最后再用纯水冲洗柱床。不同的冲洗方法有助于去除杂质、平衡填料，达 到最佳的分离效果。
色谱柱冲洗方法范文 色谱柱是色谱分析中非常重要的组成部分，它起到分离、富集和纯化物质的作用。随着色谱分析的发展，色谱柱的种类也越来越多，选择合适的冲洗方法对于延长色谱柱的使用寿命和提高分离效果非常重要。下面将介绍几种常见的色谱柱冲洗方法。 1.水冲洗法 水冲洗法是一种常见的色谱柱冲洗方法。当色谱柱上的样品残留物或杂质堵塞柱子或降低分离效果时，可以通过水冲洗来清洁柱子。具体操作是将色谱柱连接到系统中，使用纯水或者蒸馏水作为移动相，通过一段时间的冲洗来清洗柱子。在冲洗过程中，可以调整冲洗流速和时间以及冲洗液的浓度来达到最佳的冲洗效果。需要注意的是，水冲洗的时候要注意温度，避免将水温过高或过低，以免造成色谱柱损坏。 2.溶剂冲洗法 溶剂冲洗法是利用溶剂的性质对色谱柱进行冲洗的方法。根据需要冲洗的样品性质和柱上残留物的特点，选择合适的溶剂进行冲洗。比较常用的溶剂冲洗方法有乙醇冲洗法、甲醇冲洗法和酸碱冲洗法等。具体操作是将溶剂连接到色谱柱上，用一个较高浓度的溶剂进行冲洗。这种方法适用于非极性或弱极性溶剂的冲洗，可以有效去除柱上的杂质。 3.反向冲洗法 反向冲洗法是指利用与柱上残留物有亲和力的溶剂进行冲洗的方法。这种方法通常适用于极性或离子性化合物的冲洗。具体操作是将反向移动相连接到色谱柱上，并以较高浓度的反向移动相浸泡柱子一段时间，使残
留物解离或溶解。这种方法具有较好的选择性和分离效果，在去除残留物的同时，不会损害柱子的分离性能。 4.温度冲洗法 温度冲洗法是通过加热或降低柱子的温度来清洗色谱柱的方法。在不同温度下，残留物和杂质的溶解度和亲和性不同，可以通过调整温度来达到最佳的冲洗效果。比较常用的温度冲洗方法有高温冲洗和低温冲洗。高温冲洗适用于有机溶剂或高沸点溶剂的冲洗，可以加速残留物的溶解和去除；低温冲洗适用于水溶性溶剂的冲洗，通过降低温度可以减少溶剂的挥发和残留物的沉淀。 综上所述，选择合适的色谱柱冲洗方法对于延长色谱柱的使用寿命和提高分离效果非常重要。根据不同的样品性质和残留物的特点，可以选择适当的冲洗方法，并根据实际情况进行调整，以达到最佳的冲洗效果。此外，在冲洗过程中，要注意冲洗液的浓度、流速和温度等参数的控制，避免对色谱柱造成不必要的损害。
液相色谱柱维护保养及仪器冲洗 注意:每个色谱柱使用之前都要阅读一下使用说明书、 色谱柱维护保养就是很重要得,关系到色谱柱得使用寿命与检测结果得准确性,所以任何人用过色谱柱之后,一定要对色谱柱进行保养,管理人员与使用者互相监督。 总得原则就是色谱柱要轻拿轻放,避免损坏填料;另外没有使用得情况下,一定要保证两端得堵头封好、对于具体得色谱柱,下面列出常用色谱柱维护保养得具体方法与注意事项,以便使用者参考。 (0.2mｌ/min缓慢升高到0.5ml/miｎ)不接检测器冲洗色谱柱30分钟后,将色谱柱与检测器连上,流速调为1。0ml/min冲洗色谱柱60分钟,然后不断降低有机相得比例(如80%、5０％、1０%甲醇或乙腈)各冲洗至少３0分钟。若色谱柱暂时不用,则将色谱柱保存在高比例有机相中(如８0%甲醇或乙腈,或者参考该色谱柱使用说明书中建议得溶剂中);色谱柱使用时应用与分析流动相相同比例得有机溶剂(将缓冲盐溶液换成水)冲洗色谱柱１5分钟,然后再换成流动相进行样品分析。 样品分析完后,色谱柱维护与保养方法: 流动相中若含酸、碱、盐类物质,则要先用10%甲醇或乙腈冲洗,1、０ｍl/ｍin得流速冲洗至少30min,再用8０％甲醇或乙腈冲洗至少30ｍin,柱子保存在80％甲醇或乙腈里(具体问题具体分析,洗脱程序可以就是梯度洗脱程序,注意如果最后色谱柱保存得就是高有机相,第二天用之前一定要用高水相过渡一下,再换成流动相)。如柱子长时间未用,则柱子保存在1０0％得甲醇或乙腈里。 对于含有离子对试剂得流动相如庚烷磺酸钠与十二烷基磺酸钠等,柱子应采用梯度洗脱,一般用乙腈-水系统(水:９0-１0;乙腈:10－90)冲洗时间要稍长些,然后保存于90％乙腈。 需要特别强调得就是,目前所有得C18柱均不能用纯水进行长时间(1小时以上)冲洗,除非有专门耐水得专用柱,否则,用纯水长时间冲洗色谱柱,会导致色谱柱得固定相流失与相塌陷,损坏色谱柱。 大多数反相色谱柱得pH稳定范围就是２～8,有得ｐＨ稳定范围会宽,具体
正相色谱柱冲洗 正相色谱柱冲洗 正相色谱柱是一种常用的色谱分离技术，它广泛应用于各种领域。正 相色谱柱的表面为极性，能够与非极性物质发生相互作用，实现对样 品的有效分离。然而，在使用正相色谱柱进行分析时，为了提高柱的 稳定性和延长其使用寿命，必须进行定期冲洗。 正相色谱柱冲洗的目的是去除残留的样品和杂质，使柱表面恢复到初 始状态，保证分离分析的准确性和重复性。冲洗步骤包括前冲洗、中 冲洗和后冲洗。 首先是前冲洗。在正相色谱柱连接到色谱仪之前，需要将柱内部的残 留物清洗干净。首先，使用纯溶剂（如甲醇或乙腈）进行预冲洗，以 去除柱内的非极性杂质。然后，使用温和的洗涤剂（如混合溶液或酸 碱溶液）进行冲洗，去除极性杂质。最后，用纯溶剂冲洗柱内，使其 恢复到初始状态。 接下来是中冲洗。中冲洗是连接色谱仪后，实际进行分析之前的冲洗 步骤。它的目的是确保柱在使用过程中的稳定性和重复性。中冲洗可 以使用与分析相同的溶剂体系，但浓度要较低，以避免提前洗脱样品。此外，中冲洗也可以采用一些特殊的溶剂体系，如一些有选择性的溶剂，以去除某些特定的杂质。
最后是后冲洗。在一定的时间间隔或分析结束后，需要进行后冲洗以保护柱的寿命和性能。后冲洗可以使用较浓的洗涤剂（如酸碱溶液）进行彻底清洗，去除积累的杂质和结垢。此外，还可以使用一些专门的柱保护剂，如柱保护液或梨铂醇溶液，以增加柱的稳定性和延长其使用寿命。 虽然正相色谱柱冲洗在分析过程中可能会增加一些耗时和成本，但它是保证分析结果准确可靠的重要步骤。定期冲洗正相色谱柱可以有效延长其使用寿命，减少柱堵塞和降低背景噪音。因此，在进行正相色谱分析时，务必要重视柱的冲洗工作，并严格按照前冲洗、中冲洗和后冲洗的步骤进行操作，以确保分析结果的可信度和稳定性。 通过对正相色谱柱的定期冲洗，我们可以避免由于样品残留物和杂质的堆积导致的分析结果的误差和不准确性。同时，也可以提高色谱柱的寿命和稳定性，为后续的分析工作提供良好的基础。因此，在进行正相色谱分析时，务必要重视柱的冲洗工作，并严格按照前冲洗、中冲洗和后冲洗的步骤进行操作。只有这样，才能保证分析结果的可信度和稳定性。
信和液相色谱柱冲洗方法 ES-OVM 1、新柱启用 1)管路替换：如果当前系统管路里是水相流动相（如水/乙腈、缓冲液/甲醇）， 要先用纯水彻底冲洗（约60ml）以除去其中存在的有机溶剂或缓冲液，然后用色谱柱出货溶剂（33%异丙醇水溶液）冲洗彻底管路（约60ml）。如果当前系统是非水流动相（如烷烃类、异丙醇或乙醇）。则先用100%的异丙醇（约60ml）对仪器各个管路进行彻底冲洗，然后用纯水（约60ml）冲洗。然后用色谱柱出货溶剂（IPA/H2O=1/2）冲洗彻底管路（约60ml）。 2)系统冲洗干净后，流动相为IPA/H2O=1/2。开启泵，流速调整为0.2ml/min , 开 始接色谱柱，先接进口，待色谱柱另一端有流动相流出后，再将色谱柱与检测器连接。刚接上色谱柱时，压力会突然升高，稳定15分钟，压力会慢慢下降。 3)流速提高到0.4ml/min，稳定15 分钟。 4)流速提高到0.6ml/min，稳定15 分钟。 5)流速提高到0.8ml/min，稳定10 分钟。如果此时压力超过15Mpa，则不必再 调高流速，在0.8ml/min 流速下稳定1个小时。 6)流速提高到1ml/min，稳定1个小时。 7)平衡过程：封柱液冲洗之后，换用蒸馏水冲洗柱子，冲洗60ml以上后，换用 测试样品流动相平衡。流动相平衡好后，即可测试样品。 2、色谱柱再生 1)当色谱柱被污染时，会引起峰型变化。可用IPA/H2O=1/2冲洗色谱柱。如果 柱子污染后用IPA/H2O=1/2冲洗后无法恢复，有时候采用20~40柱体积的乙腈/蒸馏水进行冲洗恢复（梯度洗脱：10%乙腈水-20%乙腈水-30%乙腈水）。 2)如果因为吸附了样品导致柱压升高，采用以下溶剂将色谱柱反相冲洗： a)30%乙腈水溶液冲洗，0.2ml/min，2h；然后0.5 mL/min, 3h b)33%异丙醇水溶液冲洗，0.2 mL/min, 2h，然后0.5 mL/min, 3h ES-CD ULTRON ES-PhCD 1、新柱启用 1)先用纯水彻底冲洗（约60ml）以除去其中存在的有机溶剂或缓冲液，然后用 色谱柱出货溶剂（33%异丙醇水溶液）冲洗彻底管路（约60ml）。如果当前系统是非水流动相（如烷烃类、异丙醇或乙醇）。则先用100%的异丙醇（约60ml）对仪器各个管路进行彻底冲洗，然后用纯水（约60ml）冲洗。然后用色谱柱出货溶剂（IPA/H2O=1/2）冲洗彻底管路（约60ml）。 2)系统冲洗干净后，流动相为IPA/H2O=1/2。开启泵，流速调整为0.2ml/min , 开 始接色谱柱，先接进口，待色谱柱另一端有流动相流出后，再将色谱柱与检测器连接。刚接上色谱柱时，压力会突然升高，稳定15分钟，压力会慢慢下降。 3)流速提高到0.4ml/min，稳定15 分钟。 4)流速提高到0.6ml/min，稳定15 分钟。
液相色谱柱的冲洗 一、液相色谱柱按基体成分的分类 1、硅胶基体：不键合任何化学基团的为硅胶柱，键合的化学基团有C18、 C8、C4、氨基、氰基、苯基等。 2、聚合物基体：常有的聚合物基体为聚苯乙烯、聚丙烯酸酯、聚乙烯醇。 聚合物上再键合化学基团。 依据填料基体的成分不一样能够分为： 二、色谱柱常有问题的成因 1、硅羟基的死吸附：硅胶粒子表面存在硅羟基，这些硅羟基会吸附样品和 流动相中的好多物质，当吸附达到饱和时就会出现柱效降落、峰形劣化的现 象。有些吸附是可逆的，能够经过冲洗解决。 2、重金属离子：重金属以金属氧化物的形式残余在硅胶粒子的表面,这些金属氧化物很简单与其余化合物形成螯合物,使其被氧化,造成峰形劣化。 3、缓冲液中盐的析出：当流动相中含有缓冲盐溶液，并且剖析结束后,假如没有先用水进行冲刷,而是直接用纯有机相冲刷,瞬时柱子中的微环境是高有机相、低水相。这时流动相中的缓冲盐溶液极易析出盐份,将柱子拥塞,使柱压高升,柱效降落。 4、色谱柱变干：假如对色谱柱保留不妥,使色谱柱中的保留液所有挥发,柱子内部变干,造成色谱柱的损害,会影响分别成效。 三、对色谱柱进行适合冲洗的意义 以上提到的部分故障能够经过合时、适合的冲洗获得解决，恢复色谱柱的 功能，延伸色谱柱的使用寿命。 下边对照较常有的几种型号的色谱柱的冲洗方法进行议论，详细的冲刷方 法要依据实质状况作适合的选择和调整。自然，不一样的用户和色谱产品厂商 对自己的色谱柱会有不尽同样的办理方法。 四、新柱使用前的冲刷 新柱在使用前应先仔细阅读说明书及性能测试报告,认识柱子的性能指标。剖析用的流动相常常与柱子的保留试剂不一样,故在剖析样品以前,应使用适合的试剂将柱子中的保留试剂冲洗出来。要注意冲洗用的流动相与保留溶剂的相溶 性。 1、反相柱如岛津C18、C8等柱保留在甲醇或乙腈来均衡色谱柱。流速应迟缓提升70%甲醇中,可用10～20倍柱体积的,如开始min,10～15min后可慢慢 加速。
住友液相色谱柱冲洗方法 一、OA2000和OA4000系列 该方法适用于以下型号色谱柱：OA-1000，OA-2000，OA-2000S，OA-2200，OA-2500，OA-2500S，OA-3000，OA-3100，OA-3100R，OA-3200，OA-3200R，OA-3300，OA-3300S，OA-4000，OA-4000R，OA-4100，OA-4100R，OA-4400，OA-4400R，OA-4500，OA-4500R，OA-4600，OA-4600R，OA-4700，OA-4800，OA-4900 1、新柱启用 该系列色谱柱出厂溶剂均为正己烷/乙醇=95/5，新柱启用前，请将系统管路置换为正相，并用正己烷/乙醇=95/5冲洗干净后，连接色谱柱。 接上色谱柱后，用正己烷/乙醇=95/5小流速冲洗色谱柱，再缓慢上升流速至1ml/min。之后，维持该流速，冲洗色谱柱60ml以上。 如测试样品流动相为正相，即可直接更换为测样流动相，如果测试样品流动相为反相，则需要将色谱柱中溶剂置换成反相溶剂，置换方法如下： 1)将流动相正己烷/乙醇=95/5换下，换上异丙醇，连手性柱一起冲洗，建议0.1-0.2ml/min 流速，冲洗过夜。 2)换上反相流动相，反相系统中推荐使用醋酸铵/甲醇。流动相中不能有水，否则会损坏 色谱柱。 到此为止，即完成手性柱从正相切换到反相。接下来，您可以换上实验所需流动相，平衡好手性柱后，进行样品检测。 二、OA5000和OA6000系列 该方法适用于以下型号色谱柱：OA-5000，OA-5000L，OA-6100，OA-6100R 1、新柱启用 该系列色谱柱出厂溶剂均为2mm硫酸铜溶解在（水/异丙醇=95/5）的体系中，新柱启用前，请将系统管路用水冲干净，然后用色谱柱出货溶剂冲洗系统60ml。接上色谱柱后，建议用流动相平衡色谱柱1-2h。 该方法适用于以下型号色谱柱：OA-6000，OA-6000R 1、新柱启用 该系列色谱柱出厂溶剂均为2mm硫酸铜溶解在（水/乙腈=98/2）的体系中，新柱启用前，请将系统管路用水冲干净，然后用色谱柱出货溶剂冲洗系统60ml。接上色谱柱后，建议用流动相平衡色谱柱1-2h。