免疫应答主要分为哪几个阶段？
1
2
1）识别阶段 2）活化和增值阶段 3）免疫效应
3
中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成？各有什么功能？
4
1）中枢免疫器官：免疫细胞发生、分化、成熟的场所，如骨髓，胸腺2)外周免疫器官：免疫细胞产5
生应答的场所。如脾脏，淋巴结，黏膜，扁桃体等。
6
T细胞、B细胞和NK细胞的主要功能分别是什么？
7
1）T细胞：介导细胞免疫，辅助体液免疫。2）B细胞：产生体液免疫3）NK细胞：介导天然免疫，8
发挥细胞毒作用。
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根据作用方式及其特点的不同，机体存在两类免疫简述各自的概念和特征？
10
1)先天性免疫或固有性免疫，是个体出生是就具有的天然免疫，可通过遗传获得，是机体在长期进化11
过程中逐渐建立起来的主要针对入侵病原体的天然防御功能。其主要特征是反应迅速，针对外来异物的12
范围较广，不针对某个特定异物抗原，也称非特异性免疫。2)适应性免疫，是个体出生后，接触到生活环境中的多种异物抗原，并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫，也称获得性免疫。其主要特征是针
13
14
对某个特定的异物抗原而产生免疫应答，开始的应答过程比较缓慢，一旦建立清除该抗原的效率很高，15
特异性很强，也称特异性免疫。
16
简述抗原抗体反应的原理。
17
答：抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特18
性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合
19
20
简述抗原抗体反应的类型。
21
答：抗原抗体反应分为五种类型：①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应；②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应；③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应；④细菌外毒素或病
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毒与相应抗体结合所致的中和反应；⑤免疫标记的抗原抗体反应等。
24
什么是带现象?
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答：在抗原抗体反应等价带前后，由于抗体或抗原过量(形成前带或后带)，上清液中可测出游离的抗26
体或抗原，形成的沉淀物少，不出现可见反应，这种现象在做血清学试验时称为带现象。
27
影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素?
答：环境条件包括：电解质，酸碱度和温度。稳定条件：①电解质：常用O．85％氯化钠或各种缓冲
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29
液作抗原及抗体的稀释液及反应液；②酸碱度：pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质，抗原抗
30
体反应一般在pH为6～8时进行；③温度：一般以15，
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40℃为宜，最佳反应温度为37℃。
32
简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。
33
单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和
制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯
34
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化与鉴定。
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试述免疫血清应如何进行纯化。
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免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗体的方法有：硫酸
38
胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球
39
菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。另外，还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特
异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗
40
41
原交联于sephamse 4B上，通过亲和层析去除杂抗体。
42
叙述杂交瘤技术的基本原理。
杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能
43
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力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又
45
能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。
46
简述间接血凝试验的基本原理。
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间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的
48
红细胞，与相应抗体(或抗原)作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞
49
凝集现象，又称被动血凝试验
50
简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。
51
Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固
结合，但在一般条件下不出现可见反应，利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合52
53
的特异抗体，可使红细胞凝集。 Coombs试验有二种类型：(1)直接Coombs试验：用于检测红细胞结合的
不完全抗体。(2)间接Coombs试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。
54
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抗球蛋白试验主要应用于那些方面？
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①输血：对于“危险”受体（指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生
免疫性血型抗体的人）的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查，以抗球蛋白法最为可靠。②血型抗
57
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原抗体的检查：主要检查Rh—者，其体内是否有抗-D抗体，应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性的供体59
血液作常规检查。最可靠和灵敏的方法是将待检D 阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D 血清混合，然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断：母体产生的最常见
60
61
的免疫性抗体为Rh 抗体和ABO 抗体，一般为7S 的IgG，可通过胎盘屏障，作用于胎儿红细胞，引起新62
生儿溶血性疾病，可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。④对溶血性贫血的研究：获得性溶血性贫63
血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。⑤对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。
64
Coombs 试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清，如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清65
等，分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。
什么是协同凝集试验？主要用于何种检测？
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协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似，但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这种细菌的细胞壁中68
含有A蛋白（SPA），SPA 能与特异性抗体IgG 的Fc段结合（IgG3除外）。抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡69
萄球菌的表面，仍保持与相应抗原特异性结合的特性。当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时，就成为抗体70
致敏的载体颗粒，若与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶71
性抗原的检测。
何谓间接凝集反应？
72
73
将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒表面，使之成为致敏载体颗粒，74
然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在条件下，出现特异性的凝
75
集现象，称为间接凝集反应
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间接凝集反应如何进行分类？各试验的原理是什么
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根据致敏载体用的是抗原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验；根据载体种类，分为间78
接血凝试验和胶乳间接凝集试验；根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验和协同凝集试验。
间接凝集试验是用抗原致敏载体检测标本中的相应抗体。将可溶性抗原与载体颗粒结合，再与标本中的
79
80
抗体反应，通过抗体桥联，形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块，为阳性反应。反向间接凝集试验选用已81
知特异性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。用特异性抗体致敏颗粒，与样品中的待检抗原反应，通82
过抗原桥联，形成肉眼可见的凝集为阳性。临床上用于检测HbsAg、AFP 等。间接凝集抑制试验诊断试83
剂为已知抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体，用于检测标本中与致敏抗原相同的抗原。将标本与抗体试84
剂相反应，然后加入致敏抗原，若出现凝集现象，说明标本中不存在相应抗原;如未出现凝集现象，则85
说明待检标本中含有相应抗原，凝集反应被抑制。同理，用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作为诊断试剂，86
检测标本中的抗体，称为反向间接凝集试验。协同凝集试验与间接凝集反应的原理相似，但所用载体为87
金黄色葡萄球菌，该菌细胞壁上的SPA 能与特异性抗体的IgG 的Fc 段结合（IgG3除外），抗体的F(ab 88
ˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍能与相应抗原特异性结合。当这种葡萄球菌与IgG 抗体连接时，就89
成为抗体致敏的载体颗粒，若与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。间接血凝试验是以红细胞作
90
为载体的间接凝集试验，用已知的抗原或抗体致敏红细胞，然后与样品中的抗体或抗原在适宜条件下反91
应，出现红细胞凝集者为阳性。根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱。胶乳凝集试验是以聚苯乙92
烯胶乳微粒作为载体的间接凝集试验。
93
HAT培养基筛选杂交瘤细胞的机制是什么？
答：1.淋巴细胞：不能生长，5到7天死亡；DNA的主要合成途径被A阻断2.骨髓瘤细胞：不能生长，5
94
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到7天死亡；HGPRT缺乏，DNA合成的旁路途经受阻3.骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成杂交瘤细胞，可长期96
生长繁殖。利用淋巴细胞的HGRT将Ｈ合成为嘌呤碱并最终与Ｔ一起合成ＤＮＡ从淋巴细胞获得产生某种97
抗体的遗传信息，从骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能力
98
简述免疫系统的三个生理功能。
99
答：免疫系统的三个生理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御：是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。该功能正常时，机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害，即抗感
00
01
染免疫；异常情况下，反应过高会引起超敏反应，反应过低或缺失可发生免疫缺陷。免疫自稳：是机体02
免疫系统维持内环境稳定的一种生理功能。该功能正常时，机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的细03
胞和免疫复合物等异物，而对自身成分保持免疫耐受；该功能失调时，可发生生理功能紊乱或自身免疫04
性疾病。免疫监视：是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的一种生理功05
能。该功能失调时，有可能导致肿瘤发生，或因病毒不能清除而出现持续感染。
决定抗原抗体最佳配比的方法有几种?
06
07
(1)抗原稀释法：将可溶性抗原作一系列倍比稀释，然后向各管中加入一定浓度的适量抗血清，37℃08
反应后，产生的沉淀量随抗原量变化而不同，以沉淀物最多的管为最适比例管。(2)抗体稀释法：是将09
恒定量抗原与不同倍比稀释的抗体反应，出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。(3)棋盘格法：亦称10
方阵法。抗原抗体同时稀释，可一次完成抗原和抗体的滴定，并找出抗原、抗体的最适比。是前二法的11
结合
简述单向免疫扩散试验的基本原理和技术要点。(1)原理：待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自
12
13
由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成白色沉淀环，沉淀环的大小与抗原14
的浓度呈正相关。(2)技术要点：将抗体和热融化琼脂(约50％)混合，倾注成平板。待凝固后在琼脂板15
上打孔，孔中加入已稀释的抗原液，和不同浓度的抗原标准品，置37~12温箱，24～48h后观察孔周围沉16
淀环。量取沉淀环直径，通过抗原标准品，计算待测抗原的浓度。
17
在双向免疫扩散试验中，如何判定结果?
双向免疫扩散中，出现沉淀线，表明存在相应的抗原、抗体，不出现沉淀线则表明缺乏抗原或抗体。
18
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沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致，沉淀线靠近抗原孔，提示抗体含量高；靠近抗体孔，提示20
抗原含量较多
免疫电泳技术的优点是什么?免疫电泳有哪些用途?
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22
1)优点：免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术，既有抗原抗体反应的高度
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特异性，又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力，广泛应用于牛物医学领域。(2)用途：①纯化抗
24
原或抗体的成分分析，分析其纯度；②正常及异常体液中蛋白质成分的分析，如无丙种球蛋白血症、冷
25
球蛋白血症、多发性骨髓瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等病人的血清蛋白成分的分析，多发性骨
26
髓瘤血清M蛋白的检测和鉴定；③免疫后不同抗体组分的动态变化研究
27
对流免疫电泳时，抗体为什么流向负极?
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大部分蛋白质抗原在碱性溶液中带负电荷，电泳时从负极向正极泳动，而抗体IgG分子量大，暴露的
29
极性基团较少，在缓冲液中解离的也少，向正极的泳动速度较慢，电泳时由电渗引向负极的液流速度超
过了IgG向正极的泳动，带动抗体流向负极，使抗原和抗体定向对流并发生反应，出现肉眼可见的沉淀30
31
线。
简述火箭免疫电泳的原理和主要用途。
32
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(1)原理：火箭免疫电泳是将单向免疫扩散和电泳相结合的技术。抗原在电场作用下，在含有适量抗
34
体的琼脂糖凝胶中向正极泳动，逐渐形成梯度浓度，在抗原抗体比例适当时形成沉淀，随着抗原量的减
35
少，沉淀带越来越窄，形成火箭峰样沉淀，峰形高低与抗原量呈正相关。用已知量标准抗原作对照，绘
36
制标准曲线，根据检测样品沉淀峰的高度可算出待测抗原的含量。(2)主要用途：①抗原蛋白定量，如
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IgA、IgG、IgM和sIgA检测；②C3、C4及其裂解产物检测；③AFP等检测。
免疫浊度测定的基本原理是什么?有哪些类型?
38
39
(1)基本原理：免疫浊度测定是将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分
40
析技术。当可溶性抗原与相应的抗体特异结合，在二者比例合适、并有一定浓度的电解质存在时，可以
41
形成不溶性的免疫复合物，使反应液出现浊度。这种浊度可用肉眼或仪器测知，并可通过浊度推算出复
42
合物的量，即抗原或抗体的量。(2)类型：按测量方式可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。按测
43
定速度可分为速率比浊法和终点比浊法。
44
散射免疫比浊法的基本原理是什么?
45
沿水平轴照射的一定波长的光，在通过溶液时，光线可被其中的免疫复合物粒子颗粒折射，发生偏转，
46
产生散射光。根据Rayle培h散射方程，散射光强度与粒子(免疫复合物)的浓度和体积成正比，通过测量
47
散射光的强度，可计算出待测抗原的浓度。
速率散射比浊法中的“速率”是指什么?
48
49
所谓速率是指单位时间内抗原与抗体反应的速度。抗原与抗体结合形成免疫复合物的速度，在每个单
50
位时间内是不相同的，在抗体过量的情况下，随着反应时问的延长，免疫复合物的总量逐渐增加，通常
在25s时出现一个反应最快的速率峰。峰值与抗原量呈正相关。
51
52
免疫浊度测定的反应体系中，为什么必须始终保持抗体过量
53
抗原和抗体的比例是浊度形成的关键因素，抗原和抗体必须在一个适当的浓度才会出现最高结合率。
54
当抗原过量时，由于钩状效应，形成的免疫复合物分子小，而且会发生再解离，使浊度下降，光散射减
55
少。当反应液中抗体过量时，免疫复合物的形成随着抗原量的增加而递增，光散射的强度也随之递增，
56
因此，免疫浊度测定的反应体系中必须始终保持抗体过量，以保证免疫复合物的生成量与浊度的改变一
57
致，这是免疫浊度测定的基本原则。
58
单向琼脂扩散试验有那些影响因素？
59
单向扩散试验有下列影响因素：①抗血清的亲和力、特异性、及效价。要求亲和力强，特异性好、
效价高。注意存放的方法，防止效价下降。②标准曲线必须在每次测定时同时制作，绝不可一次作成，60
61
长期应用。③测定时必须加测质控血清，以保证定量的准确性。④有时出现扩散环呈现两重的双环
现象，这是出现了抗原性相同的两个组分，其扩散率不同，例如α重链病血清中出现的α重链和正常的
62
63
IgA两种成分并存，皆与抗IgA 抗体发生反应，就形成内外两重环。⑤在单扩试验时，有时回出现结
64
果与真实含量不符，这主要出现在 Ig 测定中。如用单克隆抗体或骨髓瘤纯抗原免疫动物获得的抗血清，
65
都存在单一结合价的现象，若用此作为单扩试剂测量正常人的多态性抗原，则抗体相对过剩，是沉淀圈
66
直径变小，测量值降低。⑥测得假阳性升高现象与上面相反，如用多克隆抗体测定单克隆病，则抗原
67
相对过剩（单一抗原决定簇），致使沉淀圈呈不相关扩大，从而造成某一成分的伪性增加。
沉淀反应可应用在那些方面？
68
69
沉淀反应主要应用于体液内包括血液、尿液、脑脊液、胸水、泪液、关节腔液等内的蛋白质（如
70
MW10000~50000，标本浓度为 1mg/L~100g/L）测定，应用最广泛的是可以准确定量的免疫浊度法，也可
71
用于药物的测定。
72
双向琼脂扩散试验的原理是什么？
73
双向琼脂扩散试验的原理为可溶性抗原和抗体在含有一定电解质的琼脂凝胶板的对应孔中各自向对
74
方扩散，在最适当的比例处形成抗原抗体沉淀线，根据沉淀线的位置、形状及对比关系，可作出对抗原
75
或抗体的定性分析
76
试对沉淀反应各类试验方法进行评价。
77
沉淀反应可分为单向免疫扩散试验、双向免疫扩散试验、絮状沉淀试验、免疫浊度测定
等试验。单向免疫扩散试验是一种稳定、简便、不需要特殊设备、一般试验室都可使用的常规方法。
78
79
双向免疫扩散试验简单易行，结果可靠，特异性高，分辨率高于对流免疫电泳，成本低廉，结果可经染
80
色干燥后长期保存；缺点是敏感性较低、扩散缓慢，不能精确定量。
免疫浊度法①快速、②敏感，最小检出量可达 ng 水平。③检测范围广④缺点是所用抗血清质量要
81
82
求高，仪器须装电脑，价格较贵。絮状沉淀试验较实用、简便、不需要特殊设备一般试验室都可使用，
83
但须稀释标本比较麻烦。
84
放射免疫分析技术有何应用？
85
答：放射免疫技术由于其测定的灵敏度高，特异性强，精密度好，而且可对半抗原和抗原测定以及测
86
定仪器设备条件要求不高，因此广泛用于生物医学检验。常用于各种激素、微量半抗原、肿瘤标志物、
87
药物等微量物质的测定。由于大多数检验项目均有 RIA 或 IRMA 试剂盒供应，目前仍是基层单位对超
88
微量物质测定的主要手段。
89
试述放射免疫分析与免疫放射分析。
答：放射免疫分析（RIA）是放射免疫技术最经典的模式。它是以放射性核素标记抗原与反应系统中
90
91
未标记抗原竞争性结合特异性抗体为基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析方法。而免疫放射分
析（IRMA）是用放射性核素标记的过量抗体与待检测抗原直接结合，采用固相免疫吸附载体分离结合与92
93
游离标记抗体的非竞争性放射免疫分析。二者的异同点如下：①标记物 RIA 以放射性核素标记抗原；
94
IRMA 则是标记抗体。②反应速率 IRMA 反应速度比RIA 快。③反应原理 RIA 为竞争抑制性结合，
95
反应参数与待检抗原量成反相关；IRMA为非竞争结合，反应参数与待检抗原成正相关。④特异性 IRMA
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特异性较RIA高。⑤灵敏度和检测范围 IRMA测定的灵敏度明显高于RIA， IRMA标准曲线工作范围较
97
RIA宽1~2个数量级。⑥其他 RIA 所用抗体为多克隆抗体，对亲和力和特异性要求较高，但用量很少；
IRMA 为试剂过量的反应，对抗体亲和力的要求不及 RIA，但用量大。此外，RIA 可以测量半抗原，但
98
99
IRMA只能测定至少有两个以上表位的抗原。
00
试述用于标记的荧光素应具备什么条件?
01
DA用于标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团，结合后不易
02
解离，而未结合者易清除；②荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率；③荧光色泽与
03
背景组织的色泽对比鲜明；④与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质；⑤标记方法简单、
04
安全无毒；⑥与蛋白质的结合物稳定，易于保存。
05
试述荧光免疫显微技术基本原理。
06
DA荧光免疫显微技术是以荧光显微镜为检测工具，用荧光素标记特异性抗体或抗抗体，检测固定组织
07
细胞上的抗原或血清中的抗体，常用于定性和定位检查的一门技术。
试述荧光免疫显微技术的临床应用。
08
09
DA临床常应用于：①血清中自身抗体的检测；②各种微生物的快速检查和鉴定；⑧寄生虫感染的诊断；
10
④白细胞分化抗原的检测。
临床免疫学检验 1、免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。 3、中枢免疫器官：骨髓、胸腺；外周免疫器官：淋巴结、脾脏（最大）、黏膜相关淋巴组织 4、 B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导体液免疫；B细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（SmIg）、 Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟 B 细胞： CD19、CD20、 CD21、 CD22 （成熟 B 细胞的 mIg 主要为 mIgM和 mIgD）同时检测 CD5分子，可分为 B1 细胞和 B2 细胞。 B 细胞功能检测方法：溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。 5、T 细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是 CD3（多链糖蛋白）；辅助 T 细胞的标志是 CD4；杀伤 T 细胞的标志是 CD8； T 细胞受体 =TCR。 T 细胞和 NK细胞的共同表面标志是CD2（绵羊红细胞受体）； CD3＋ CD4＋CD8－ =辅助性T细胞（Th） CD3＋ CD4－CD8＋ =细胞毒性T 细胞（ Tc 或 CTL）（ T 细胞介导的细胞毒试验） CD4＋ CD25＋ =调节性T细胞（Tr或Treg） T 细胞功能检测：植物血凝素（ PHA）刀豆素（ CONA）刺激 T 细胞增殖。增殖试验有：形态 法、核素法。 T 细胞亚群的分离：亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法 *E 花环试验是通过检测SRBC受体而对T 细胞进行计数的一种试验； 6、 NK细胞：具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC）、 CD56。 测定人 NK细胞活性的靶细胞多用K562 细胞株，而测定小鼠胞株。NK细胞活性则常采 用 YAC-1 细 7、吞噬细胞包括：单核 - 吞噬细胞系统（MPS，表面标志外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。CD14，包括骨髓内的前单核细胞、（表达 MHCⅡ类分子） 8、人成熟树突状细胞（DC）（专职抗原呈递功能）：表面标志为CD1a、CD11c和CD83。 9、免疫球蛋白可分为分泌型（ sIg ，主要存在于体液中，具有抗体功能）及膜型（ mIg，作为抗原受体表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白） 10、免疫球蛋白按含量多少排序：IgG＞IgA＞IgM＞IgD＞IgE五类（按重链恒定区抗原性（CH）排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于恒定区（CH、CL） 12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和 VL（高变区）是抗原结合部位。
临床血液学和血液学检查知识点 （一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清晰；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有汇集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞2/3~1/2，核染色质汇集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一种区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内布满粗大而均匀、排列紧密橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但经常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上具有排列零乱、大小不等数量不多紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷限度不超过假设直径一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，布满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及构造与中性晚幼粒相似；胞浆内布满橘红色、大小一致嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。 5. 杆状核粒细胞（stab granulocyte） ①中性杆状核粒细胞（neutrophilic stab granulocyte）：10~15μm，核凹陷限度超过假设直径一半，
《临床免疫学与检验》 第一章免疫学概论 一、选择题： 1．机体免疫稳定功能低下，可导致（）A．免疫缺陷病B．免疫增殖病 C．自身免疫病D．恶性肿瘤2．免疫监视功能异常可导致（） A．超敏反应B．自身免疫病 C．肿瘤D．免疫缺陷病3．在现代免疫学中，免疫的概念是指机体免疫系统具有（） A．发现并排除有毒因子的能力 B．识别和排除抗原性异物的能力 C．抵抗并清除传染性因子的能力 D．发现和消除恶变细胞的能力 4．免疫防御、免疫稳定和免疫监视是A．免疫学的三大内容 B．免疫细胞的三大功能 C．免疫器官的三大功能 D．免疫系统的三大功能 5．最早用人痘接种预防天花的国家是（）A．中国B．美国 C．英国D．俄罗斯 6．免疫自稳功能是指： A．抑制病原微生物在体内繁殖和扩散 B．防止自身免疫病的发生 C．清除体内病原微生物，防止感染 D．清除体内突变细胞，防止肿瘤发生 E．防止病毒的持续感染 7．人体内最大的免疫器官是： A．胸腺B．骨髓C．脾 D．淋巴结E．法氏囊 8．人类B细胞分化发育成熟的器官是：A．骨髓B．脾C．淋巴结 D．胸腺E．腔上囊 9．免疫应答反应的过程是： A．识别阶段B．活化阶段 C．活化和效应阶段 D．识别和效应阶段 E．识别、活化和效应阶段 10．CD4+T 细胞与CD8+T 细胞数的正常比是： A．2～2.5 B．1.5～2 C．＞2.5 D．＜0.5 E．0.5～1 11．可非特异直接杀伤靶细胞的是：A．NK 细胞B．TH 细胞 C．Ts 细胞D．Tc 细胞 E．TCRαβ＋细胞 12．与抗体包被的红细胞相结合形成EAC 玫瑰花环的物质是： A．CD32 B．CD35 C．CD21 D．CD40 E．CD80 13．T 淋巴细胞与绵羊红细胞结合形成E 花环的分子是： A．CD8 B．CD2 C．CD28 D．CD3 E．CD4 14．新生儿从初乳中获得的Ig主要是：A．IgE B．IgD C．IgG D．SIgA E．IgM 15．具有调理作用的主要Ig是： A．IgA B．IgM C．IgG D．IgD E．IgE 16．Ig 的生物学功能是： A．调理作用B．呈递作用 C．合成分泌细胞因子 D．细胞毒作用 E．参与T淋巴细胞在胸腺内的分化17．介导ADCC 的主要细胞是： A．T 淋巴细胞B．B 淋巴细胞 C．NK 细胞D．中性粒细胞 E ．嗜酸性粒细胞
抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。 抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强，它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。 亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合强度，取决于两者空间结构的互补程度。 亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。 抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。 带现象（zone phenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中，由于抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应现象。抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。 免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。免疫佐剂（immuno adjustvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。 半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性)，而单独不能诱导抗体产生（无免疫原性）的物质。当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。 载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。 载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半抗原的免疫应答，该现象称为~。 单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。 多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白，即~ 基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。 杂交瘤技术 【原理】以聚乙二醇（PEG）为细胞融合剂，使免疫后能产生抗体的小鼠脾细胞与能在体外长期繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合产生杂交瘤细胞，通过次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷（HAT）选择性培养基的作用，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经反复的免疫学检测筛选和单个细胞培养（克隆化），最终获得机能产生所需单克隆抗体又能长期体外繁殖的杂交瘤细胞系。将这种细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，可从小鼠腹水中得到高效价的单克隆抗体。（一）小鼠骨髓瘤细胞 理想骨髓瘤细胞的条件：①细胞株稳定，易于传代培养；②细胞株本身不产生免疫球蛋白或细胞因子；③该细胞是HGPRT或TK的缺陷株；④能与B细胞融合成稳定的杂交瘤细胞； ⑤融合率高。 目前最常用的是NS-1和SP2/O细胞株 （二）免疫脾细胞
骨髓增殖性肿瘤（MPN）是以骨髓中分化成熟相对正常的一系或多系髓系（粒系、红系、巨核系）细胞持续异常增殖为特征的一组克隆性造血干细胞疾病。与MDS所见无效造血相反，增殖的细胞分化成熟相对正常。临床一般起病缓慢，有血细胞质和量的改变，肝、脾肿大，常并发出血、血栓及髓外造血。疾病进展到终末期，可出现骨髓纤维化、无效造血，或转化为急性白血病。 本组疾病中典型的4种，除了慢粒还包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症及原发性骨髓纤维化等。 一、原发性血小板增多症（ET） 是一种主要累及巨核细胞系的克隆性骨髓增殖性疾病，以血小板数持续增多，血栓形成和/或出血为特征。 【临床表现】 本病好发于50岁以上，多缓慢起病，部分病人发病时无症状，偶尔因发现血小板增多或脾大或手术后出血不止而确诊。多数病人有出血或血栓形成。出血以胃肠道、鼻出血较常见，皮肤、粘膜出血少见。血栓栓塞以指（趾）小血管、中枢神经血管和肢体血管栓塞为主。脾大见于多数病例，一般为轻到中度肿大，少数病人有肝肿大。 【检验】 （1）血象：血小板计数多在（1000～3000）×10^9/L。MPV增大，血小板比积明显增加。可见巨大型、小型及不规则血小板，常自发聚集成堆。可见巨核细胞碎片。白细胞计数多在（10～30）×10^9/L，偶可达（40～50）×10^9/L。分类以中性分叶核粒细胞为主，偶见幼粒细胞。 （2）骨髓象：有核细胞增生明显活跃，巨核细胞系统增生尤为突出，原始及幼稚巨核细胞的比例增高，部分病例可见到小巨核细胞。巨核细胞形态异常，核质发育不平衡，颗粒稀缺，空泡形成，核分叶过多，血小板生成增多。红细胞和粒细胞系统亦明显增生。 （3）血小板功能检查：多数患者主要表现为对二磷酸腺苷、肾上腺素诱发的血小板聚集功能减低，部分患者又有自发性血小板聚集性增高的现象。 【诊断】 WHO的ET诊断标准： 阳性标准：（1）血小板持续性>600×10^9/L；（2）骨髓活检主要为巨核细胞增生，胞体大而形态成熟的巨核细胞增多。
12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上 VH 和VL （高变区）是抗原结合部位。 临床免疫学检验 免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。 中枢免疫器官：骨髓、胸腺； 外周 免疫器官：淋巴结、 脾脏（最大 ）、黏膜相关淋巴组 B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导 体液免疫;B 细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（Smig ）、Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟B 细胞：CD19 CD20 CD21 CD22 （成熟B 细胞的 mig 主要为mIgM 和mIgD ）同时检 测CD5分子，可分为B1细胞和B2细胞。 B 细胞功能检测方法： 溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。 5、T 细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是CD3（多链糖蛋白）；辅助T 细胞的标志是CD4; 杀伤T 细胞的标志是 CD8 T 细胞受体=TCR T 细胞和NK 细胞的共同表面标志是 CD2（绵羊红细胞受体）； CD 外CD4+ CD8-=辅助性T 细胞（Th ） CD 外CD4 CD8+ =细胞毒性T 细胞（Tc 或CTL ）（ T 细胞介导的细胞毒试验） CD 知CD25^ =调节性T 细胞（Tr 或Treg ） T 细胞功能检测：植物血凝素（PHA ）刀豆素（CONA 刺激T 细胞增殖。增殖试验有：形态 法、核素法。 T 细胞亚群的分离： 亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法 *E 花环试验是通过检测SRBC 受体而对T 细胞进行计数的一种试验; 6、NK 细胞：具有细胞介导的 细胞毒作用。直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC ）、 CD56。 测定人NK 细胞活性 的靶细胞多用 K562细胞株，而测定小鼠 NK 细胞活性则常采用 YAC-1细 胞株。 7、吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统 （MPS 表面标志CD14包括骨髓内的前单核细胞、 外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。 （表达MH ffi 类分子） 8、人成熟树突状细胞 （DC （专职抗原呈递功能）： 表面标志为CD1a CD11C 和CD83 9、免疫球蛋白可分为分泌型（sig ，主要存在于体液中，具有 抗体功能）及膜型（mIg ，作 为抗原受体 表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白） 10、免疫球蛋白按 含量多少排序：lgG > IgA > IgM > IgD > IgE 五类（按重链恒定区抗原性（CH 排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于 恒定区（ CH 、 CL ） 1、 免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、 3、 4、
临床医学检验技术（中级)-临床免疫学和免疫学检验 (B1型题) 1、既具有抗原吞噬能力又有抗原提呈能力的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 2、既不表达HLA-Ⅰ类抗原又不表达HLA-Ⅱ类抗原的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 3、应用CDC方法检测HLA-DR抗原所使用的待测细胞为 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞
E.单核细胞 4、PHA刺激法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 5、免疫比浊法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 6、流式细胞仪可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验
7、细胞毒试验可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 8、测定抗体生成细胞数 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 9、测定T细胞数量 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验
10、测定NK细胞的杀伤活性 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 11、测定非特异性细胞免疫功能 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 12、白血病儿童从骨髓库中得到别人捐献的骨髓，属 A.自体移植 B.同种移植 C.异种移植 D.同系移植 E.胚胎组织移植 13、试验性将猪心移植给猴，属
《临床血液学检验》课程教学大纲 [课程概述] 临床血液学检验是采用各种实验方法和技术分析研究血液和造血器官的病理变化，以阐明血液系统疾病的发生机制，用于造血系统疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后监测的一门科学。血液学检验既属于血液学范畴，又是检验医学的一个分支，是检验医学的主干课程之一。近十年来，血液学基础理论研究随着实验手段的不断更新而迅速发展，而实验性很强的血液学，也越来越多的引进各种新的检验项目或赋予基础检验以新的评价。 作为一门理论与实践相结合的课程，临床血液学检验设置在检验医学专业必修课程中，其目的是使该专业的学生掌握血液学检验的基本理论、基本知识和基本技能，为今后临床工作打下坚实的基础。通过本课程的学习，要求学生能够掌握本门课程的基本理论知识，熟悉临床血液学相关基础知识；同时掌握血细胞的正常形态和常见血液病的检验方法及血液学特点，能对常见血液病作出初步诊断结论。 [课程目标] 设置本课程的具体目标是：临床血液学检验的任务是利用血细胞的检验技术，超微结构技术、病理学技术、生物化学技术、免疫学技术、分子遗传学技术、生物遗传工程、细胞生物学及分子生物学技术以及其他多种技术，对血液系统疾病和非血液系统疾病所致的血液学异常进行基础理论的研究和临床诊治的观察，从而促进血液学和临床血液学的发展和提高，推动了血液病学研究向更高层次迈进。学生需要经过基础医学、临床医学和实验医学的专门学习和培养，不仅要有熟练的实验医学技能，正确掌握各项有关血液病诊断和反映病情的实验；适应血液学的发展，建立有关新实验，还要有一定程度的基础医学和临床医学知识，为血液病做出诊断。 该课程共分四篇：造血细胞及其检验、红细胞疾病及其检验、白细胞疾病及其检验和血栓与止血及其检验。它是以血液学的理论为基础，以检验的实验方法为手段，以临床常见的血液病为主线，创建了一个理论-检验-疾病相结合、紧密联系的新体系，且在实践过程中不断发展、完善和提高。 [使用范围] 检验学专业，本科层次。
智慧树知到《临床免疫学检验技术》章节测试答案第一章 1、免疫球蛋白的分类依据是： A.轻链恒定区 B.重链恒定区 C.轻链可变区 D.重链可变区 E.铰链区 正确答案：重链恒定区 2、IgG的补体结合位点位于： A.VH和VL B.CH1和CL C.CH2 D.CH3 E.CH4 正确答案：CH2 3、各种抗体单体分子共有的特性是： A.与靶细胞结合后能介导ADCC作用 B.具有两个完全相同的抗原结合部位 C.轻链与重链以非共价键结合 D.与抗原结合后能激活补体 E.与颗粒性抗原结合后能介导调理作用
正确答案：具有两个完全相同的抗原结合部位 4、以下哪种技术极大提高了免疫学检测的特异性？ A.标记技术； B.单克隆抗体技术； C.计算机技术； D.分子生物学技术； E.细胞培养技术。 正确答案：标记技术； 5、最早用于标记免疫测定的标记物是 A.荧光素 B.放射性核素 C.酶 D.化学放光物质 E.胶体金 正确答案：荧光素 6、抗体的基本单位是： A.由2条不同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 B.由1条重链和1条轻链组成的二肽链结构 C.由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构 D.由2条相同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 E.由4条相同的肽链组成的四肽链结构 正确答案：由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构
7、木瓜蛋白酶能将抗体水解成： A.Fab和Fc B.F(ab’)2和Fc C.Fab和pFc’ D.Fab’和pFc’ E.F(ab’)2和pFc’ 正确答案：Fab和Fc 8、抗体中与抗原表位互补结合的部位： A.仅重链可变区 B.仅轻链可变区 C.重链恒定区 D.轻链恒定区 E.重链和轻链的高变区 正确答案：重链和轻链的高变区 9、血清中含量最高的抗体是： A.IgG B.IgM C.IgA D.IgD E.IgE 正确答案：IgG 10、机体再次免疫应答的主要抗体是：
简述抗原抗体反应的原理。 答：抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合简述抗原抗体反应的类型。 答：抗原抗体反应分为五种类型：①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应；②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应；③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应；④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应；⑤免疫标记的抗原抗体反应等。 影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素? 答：环境条件包括：电解质，酸碱度和温度。稳定条件：①电解质：常用O．85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液；②酸碱度：pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质，抗原抗体反应一般在pH为6～8时进行；③温度：一般以15，40℃为宜，最佳反应温度为37℃。 简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。 单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。 试述免疫血清应如何进行纯化。 免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗体的方法有：硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。另外，还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗原交联于sephamse 4B上，通过亲和层析去除杂抗体。 叙述杂交瘤技术的基本原理。 杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。 简述间接血凝试验的基本原理。 间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞，与相应抗体(或抗原)作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象，又称被动血凝试验 简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。 Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但在一般条件下不出现可见反应，利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，可使红细胞凝集。 Coombs试验有二种类型：(1)直接Coombs试验：用于检测红细胞结合的不完全抗体。(2)间接Coombs试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。 抗球蛋白试验主要应用于那些方面？ ①输血：对于“危险”受体（指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人）的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查，以抗球蛋白法最为可靠。②血型抗原抗体的检查：主要检查Rh—者，其体内是否有抗-D抗体，应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性的供体血液作常规检查。最可靠和灵敏的方法是将待检D 阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D 血清混合，然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断：母体产生的最常见的免疫性抗体为Rh 抗体和ABO 抗体，一般为7S 的IgG，可通过胎盘屏障，作用于胎儿红细胞，引起新生儿溶血性疾病，可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。④对溶血性贫血的研究：获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。⑤对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。Coombs 试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清，如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等，分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。 什么是协同凝集试验？主要用于何种检测？ 协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似，但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这种细菌的细胞壁中含
临床血液学检验考试题 姓名：学号：班级： 一、单项选择题 A型题（每题1分，共10分） 1、带3蛋白是红细胞膜中含量最多的一种（D） A、锚蛋白 B、收缩蛋白 C、肌动蛋白 D、跨膜糖蛋白E肌球蛋白 2、影响DNA合成的常见因素（ E ） A、丙酮酸激酶缺乏 B 、铁缺乏 C 、维生素C缺乏 D 、微量元素缺乏E、叶酸和维生素B12(vitamin B12)缺乏 3、早期诊断缺铁性贫血的主要指标是（ A ） ` A、血清铁蛋白降低 B 、血清铁降低 C 、转铁蛋白饱和度降低 D 、总铁结合力升高 E 、铁粒幼细胞增多 4、PAS染色对下列哪项最有意义: （A） A、巨贫与红血病的鉴别 B、急淋与急非淋的鉴别 C、PNH与再障的鉴别 D、外周血象检查 E、以上均不正确 5、活化蛋白C可灭活下列哪些因子（C） A、因子Ⅹa、Ⅺa B、因子Ⅶa、Ⅹa C、因子Ⅴa、Ⅷa D、因子Ⅹa、Ⅸa E、AT、HCⅡ 6、关于NAP的临床意义，哪项是错误的（ C ） A、慢性粒细胞白血病时NAP活性降低，而类白血病反应时则增强 B、{ C、化脓性感染时NAP活性增加，而病毒感染时则无变化 D、急性淋巴细胞白血病时NAP活性降低，而急性粒细胞白血病时则增强 E、慢性粒细胞白血病患者急性变时NAP活性增强 F、再生障碍性贫血患者NAP活性增强，PNH时则降低 7、下列哪项符合血管外溶血的实验室指标（ B ） A、血浆中出现高铁血红素 B、血浆血红素结合蛋白下降 C、尿中含铁血黄素试验阴性 D、尿中出现游离血红蛋白 E、血浆游离血红蛋白增高 8、急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的鉴别依据是（D） A、巨核细胞受抑、血小板减少 B、原始细胞形态差别显著 C、骨髓增生明显活跃 [ D、POX染色 E、胞质中可见Auer小体 9、由可溶性纤维蛋白单体形成交联性纤维蛋白的过程中，参与的凝血因子有（ C ） A、因子ⅩⅢ B、因子ⅩⅢa C、因子ⅩⅢa 、Ca2+ D、因子Ⅹ E、因子Ⅹa、Ca2+ 10、下列检查哪项改变与溶血无关（ B ）
免疫学简介 一、免疫学概念与免疫应答 免疫应答过程：抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以及产生一系列的免疫效应分子 免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段 1、识别阶段：是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报及相关淋巴细胞的阶段 2、活化阶段：是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后，在一系列免疫分子的参与下，发生活化、增值、分化的阶段。B细胞接受抗原信息分化为浆细胞，T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞 3、效应阶段：是浆细胞分泌特异性抗体，执行体液免疫功能。T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子，T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。另外有少量T、B细胞在增值分化后，不直接执行效应功能，而成为记忆细胞 免疫应答效应多为生理性，是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应 二、免疫组织与器官 免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成 免疫器官按功能不同，分为中枢免疫器官和外周免疫器官。中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所，由骨髓和胸腺组成；外周免疫器官是免疫应答的场所，有淋巴结、脾及扁桃体等组成。单核细胞核淋巴细胞经血液循环及淋巴循环进出于外周淋巴组织及淋巴器官，形成机体免疫系统的免疫网络。 （一）中枢免疫器官 1、骨髓 2、胸腺：是一级淋巴上皮组织，是T细胞发育的重要中枢器官，胸腺由胸腺基质细胞（TSC）和胸腺细胞组成。 （二）外周免疫器官及组织 1、淋巴结：分为皮质区及髓质区。皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。淋巴结的中心是髓质区，由淋巴索和淋巴窦组成，淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞，包括B 细胞、浆细胞、T细胞及巨噬细胞 淋巴结主要功能：是共淋巴细胞栖息和增值的场所；是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地；是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站 2、脾：是富含血管的最大外周淋巴器官。 3、黏膜伴随的淋巴组织：有B细胞、T细胞、浆细胞及巨噬细胞，受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答，使B淋巴细胞活化分化为浆细胞，产多种Ig类别的看那个题，其中最主要的是IgA及分泌型IgA，执行体液免疫及局部特异免疫作用 （三）淋巴细胞再循环与归巢 三、免疫细胞 （一）淋巴细胞：是免疫系统的主要细胞，包括T细胞、B细胞核NK细胞 1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。 （1）、T细胞受体（TCR）：是T细胞特有的表面标志，可表达于所有的成熟T细胞表面。T细胞识别抗原和转导信号是由TCR特异识别MHC分子递呈的抗原肽，CD3分子转导T 细胞活化的第一信号，TCR与CD3分子通过盐桥结合形成稳定的复合物，TCR识别抗原的这一特点构成MHC限制性的基础 （2）簇分化抗原（CD）：是区分T淋巴细胞的重要标志，T细胞发育不同阶段的亚群存在
《临床血液学和血液学检验》 实验指导 （供医学检验专业五年制本科使用） 遵义医学院医学检验系组编 2005年12月
第一章血细胞形态（示教） 概念：是指血细胞经瑞氏染色后在光学显微镜下的形态特征。 第一节血细胞多媒体示教2学时 了解：初步认识各种血细胞外形及核的形态、胞浆着色情况、核染色质结构的不同点。 第二节正常血细胞形态（显微镜下示教）4学时 了解：初步认识粒细胞系、红细胞系、淋巴细胞系、单核细胞系、浆细胞系、巨核细胞系的各阶段细胞形态学特征，并画出每一台显微镜下的细胞图像。 （一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞的2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清楚；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有聚集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一的紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞的2/3~1/2，核染色质聚集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一个区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷程度不超过假设直径的一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，充满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及结构与中性晚幼粒相似；胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；
临床免疫学检验 一、免疫球蛋白检测 ?概念：免疫球蛋白（Ig）是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白统称。由浆细胞产生，存在于机体的血液、体液、外分泌液和某些细胞的膜上。 （一）分类 ?按重链性质分:IgG、IgA、IgM、IgD 、IgE、IgG ?于出生后三个月开始合成，3—5岁接近成人水平。IG是血液中含量最高的Ig，占血清总Ig的75%—80%，是抗感染的主要抗体。是唯一能通过胎盘的抗体。 IgA：分为分泌型和血清型，分泌型的合成和分泌部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺，血清型占总Ig的10—20%。IgM：是分子量最大的Ig。占血清Ig的5-10%。是个体发育过程中最早出现的抗体，在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM。在机体受抗原刺激后，是最先产生的抗体。IgM是血管内抗感染的主要抗体。 IgE:是正常人血清中含量最少的Ig。约0.1—0.9mg/L。占总血清Ig的0.02%，为亲细胞抗体。参与Ⅰ型超敏反应,与变态反应、寄生虫病及皮肤过敏有关。 （四）临床意义 ⒈免疫球蛋白增高 ?（1）单克隆免疫球蛋白增高（M蛋白血症） IgG、IgA 、IgD 或IgE增高。见于：多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症.淋巴样异常增生性疾病等。 ?（2）多克隆免疫球蛋白增高 ?①感染：特别是慢性感染如细菌、寄生虫、螺旋体感染，IgG、IgM增高 ②自身免疫性疾病：SLE以IgG、IgA或IgG、IgM增高多见，类风关以IgM增高为主 ③慢性肝病：IgG、IgA 、IgM可增高，慢活肝IgG、IgM 增高明显
⑶IgD增高：见于IgD型多发性骨髓瘤、妊娠末期、大量吸烟者 ?⑷IgE增高：见于IgE型多发性骨髓瘤、变态反应性疾病、寄生虫病及皮肤过敏、急慢肝、肾综 ⒉免疫球蛋白减少 IgG＜6.0g/L，IgM、IgA＜0.4g/L （1）先天性：见于先天性无丙种球蛋白血症、先天无胸腺症?（2）获得性：见于大量蛋白丢失性疾病：肾综、剥脱性皮炎中毒性骨髓病、白血病、淋巴网状系统肿瘤：淋巴瘤、霍奇金病 长期使用免疫抑制剂 ⑶Ig减少易引起反复感染 ?IgG缺乏：易患化脓性感染 ?IgM 缺乏：易患革兰氏性阴败血症 ?IgA缺乏：易患呼吸道感染 二、血清M蛋白检测 ?M蛋白是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的，具有相同结构和电泳迁移率的免疫球蛋白分子或其分子片段。 M蛋白检测的临床意义 ?多发性骨髓瘤 ?巨球蛋白血症 ?重链病：α型、γ型、μ型 ?半分子病：一条重链+一条轻链 ?恶性淋巴瘤 ?良性M蛋白血症
临床血液学检验（一） 姜春辉
目录 第一章 绪论 第二章 造血与血细胞分化发育 第三章 骨髓细胞学检查的临床意义 第四章 血细胞化学染色的临床应用 第五章 血细胞超微结构检查的临床应用第六章 血细胞染色体检查的临床应用
第一章 绪论 一、概念 血液学 它的研究对象是血液和造血组织。 血细胞形态学：研究血液中有形成分形态； 血细胞生理学：研究细胞来源、增殖、分化和功能； 血液生化学：研究血细胞组成、结构、代谢和血浆成分； 血液免疫学： 研究血细胞免疫和体液免疫； 遗传血液学： 研究血液病遗传方式和信息传递； 血液流变学 ：研究血液流动性和血细胞变形性； 实验血液学： 研究实验技术和建立实验方法的等。 2014-10-31
临床血液学 以疾病为研究对象，包括来源于血液和造血组织的原发性血液病以及非血液病所致的继发性血液病。 临床血液学检验 以血液学的理论为基础，以检验学的实验方法为手段，以血液病为工作对象。 2014-10-31
二、血液学与临床的关系 1.血液学与疾病的关系 1）血液病合并非血液系统疾病 例如：骨髓瘤患者会因为肾衰竭就诊于肾病科；粒细胞缺乏症和白血病同时会出现严重喉头感染和水肿急诊入住五官科等等 2）非血液系统疾病合并血液病 许多非血液系统疾病都会有血液病的并发症：红细胞增高、贫血、白细胞减少等 3）血液制品的临床应用 例如：对于急性失血的患者输注全血、红细胞悬液或血浆等。 2.血液学与检验的关系 2014-10-31
第二章 造血与血细胞分化发育 第一节 造血器官与造血微环境 能够生成并支持造血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为造血器官。造血器官生成各种血细胞的过程称为造血。 一、胚胎期造血器官 分三个期：中胚叶造血期（卵黄囊造血）、肝脏造血期、骨髓造血期 2014-10-31
《临床免疫学检验技术》课程考试大纲 二、课程简介（小标题：黑体/小四，内容：宋体/小四） 临床免疫学检验是医学检验的重要组成部分，是将免疫学基础理论与免疫学技术相结合，研究临床多种疾病发生发展过程和免疫学检验。这部分内容是在学习完免疫学基础的基础上重点介绍免疫学技术和免疫性疾病及其检测两个方面的内容，以免疫学技术为重点。 三、课程目标（小标题：黑体/小四，内容：宋体/小四） 要求学生系统地掌握临床免疫学的基本理论、基本技能、基本技术以及常见免疫性疾病的检测方法，掌握免疫检测质量控制的基本概念和方法，熟悉常见免疫性疾病的免疫学特征及免疫学检验的临床意义；掌握免疫检验技术的正确选择及应用评价。 四、考试内容与考试要求（小标题：黑体/小四，内容：宋体/小四） 第四章标记物及其与抗原抗体的结合物制备 （一）知识点 1.了解：标记物与抗原抗体结合的制备。 2.熟悉：各种类标记物的特性。 3.掌握：临床免疫检验技术常用标记物种类；常用酶及其作用底物。（二）考试要求 1.常用荧光素及其最大发射吸收波长。 2.常用的酶及其作用底物的特点。 3.化学发光剂种类和酶促反应发光剂。 4.胶体金的概念、制备原理。 第五章免疫凝集试验
（一）知识点 1.了解：免疫凝集试验的影响因素。 2.熟悉：各种免疫凝集试验的不同点；免疫凝集试验的临床应用。 3.掌握：各种免疫凝集试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.凝集试验的概念、原理及特点。 2.直接间接凝集试验的种类及其区别。 3.临床常用凝集的试验及其作用。 4.影响凝集试验的因素。 第六章免疫沉淀试验 （一）知识点 1.了解：免疫沉淀试验的临床应用、影响因素。 2.熟悉：液相免疫沉淀试验与凝胶内免疫沉淀试验的不同。 3.掌握：各种免疫沉淀试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.沉淀试验的概念、原理及特点。 2.免疫浊度测定原理及分类，透射比浊和散射比浊的区别。 3.双向免疫扩散的原理及应用。 4.免疫电泳技术。 第八章荧光免疫试验 （一）知识点 1.了解：荧光免疫试验的临床应用；影响荧光免疫试验的主要因素。 2.熟悉：荧光免疫试验的组成要素；各种荧光免疫试验的方法学评价。 3.掌握：各种荧光免疫试验的原理及特点。 （二）考试要求 1.荧光免疫试验的概念、发射和激发光谱、荧光素的要求。 2.间接荧光免疫试验的工作原理、流式荧光免疫试验的基本原理。 3.Stokes位移。 第九章酶免疫试验 （一）知识点 1.了解：酶免疫试验的发展、临床应用。
临床医学检验（临床免疫学）高级职称试题及答案所含题型：单选题、多选题、案例分析题 一、单选题 1.CH50试验中，一个CH50U是指( ) A.引起50%溶血所需要的最小补体量 B.引起100%溶血所需要的最小补体量 C.引起50%溶血所需补体的最高稀释倍数 D.引起100%溶血所需补体的最高稀释倍数 E.以上均不对 答案：A 2.下列关于补体活化的MBL途径的描述，错误的是( ) A.激活起始于急性期蛋白产生前 B.MASP具有与活化的C1q同样的生物学活性 C.C3转化酶是C4b2b D.参与非特异性免疫，在感染的早期发挥作用 E.C反应蛋白可激活C1q 答案：A 3.B细胞膜表面主要Ig是( ) A.IgG和IgA B.IgA和IgM C.IgD和IgM D.IgD和IgE E.IgG和IgM 答案：C 4.下列哪项为非抗原特异性循环免疫复合物的抗球蛋白检测技术( ) A.PEG比浊法 B.C1q固相法 C.mRF凝胶扩散试验 D.Raji细胞法 E.超速离心法 答案：C 5.3～6个月婴儿易患呼吸道感染主要是因为哪类Ig不足( ) A.IgG B.IgM C.SIgA D.IgD E.IgE 答案：C 6.识别抗原抗体复合物的补体是( ) A.C1q B.C1r C.C1s D.C2 E.C1qrs 答案：E 7.补体蛋白约占人体血清总蛋白的( ) A.2% B.5% C.10% D.15% E.25% 答案：C 8.具有刺激肥大细胞脱颗粒、释放组胺的补体裂解片段是( )
C.C5b D.C4b E.C2a 答案：A 9.下列CH50不降低的疾病是( ) A.急性炎症 B.SLE活动期 C.RA D.严重肝病 E.亚急性细菌性心内膜炎 答案：A 10.Raji细胞是( ) A.由淋巴瘤患者分离建立的K细胞株 B.由淋巴瘤患者分离建立的B细胞株 C.由宫颈癌患者分离建立的B细胞株 D.由淋巴瘤患者分离建立的NK细胞株 E.由淋巴瘤患者分离建立的T细胞株 答案：B 11.能抑制C1r和C1s酶活性的物质是( ) A.C8bp B.DAF C.C1INH D.S蛋白 E.C4bp 答案：C 12.IgA、IgD和IgE不能与C1q结合的原因是( ) A.分子结构简单 B.Fc段无补体结合点 C.Fab段结构与补体相差甚远 D.VH无补体结合点 E.VL无补体结合点 答案：B 13.Ig分子的基本结构是( ) A.由两条相同的重链和两条相同的轻链组成的四肽链结构 B.由两条重链和两条轻链组成的四肽链结构 C.由一条重链和一条轻链组成的二肽链结构 D.由一条重链和两条轻链组成的三肽链结构 E.由一条重链和三条轻链组成的四肽链结构 答案：A 14.mRF与下列物质的亲和力的程度应是( ) A.对IC、聚合IgG很低，对变性IgG很高， B.对IC、变性IgG及聚合IgG均很高 C.对IC及变性IgG很低，对聚合IgG很高 D.对IC很高，对变性IgG及聚合IgG很低 E.对IC、变性IgG及聚合IgG很低 答案：B 15.下列哪种补体成分在激活效应的放大作用中起重要作用( ) A.C1 B.C2 C.C3 D.C4