免疫应答主要分为哪几个阶段？
1）识别阶段 2）活化和增值阶段 3）免疫效应
中枢免疫器官和外周免疫器官有哪些器官组成？各有什么功能？
1）中枢免疫器官：免疫细胞发生、分化、成熟的场所，如骨髓，胸腺2)外周免疫器官：免疫细胞产生应答的场所。如脾脏，淋巴结，黏膜，扁桃体等。
T细胞、B细胞和NK细胞的主要功能分别是什么？
1）T细胞：介导细胞免疫，辅助体液免疫。2）B细胞：产生体液免疫3）NK细胞：介导天然免疫，发挥细胞毒作用。
根据作用方式及其特点的不同，机体存在两类免疫简述各自的概念和特征？
1)先天性免疫或固有性免疫，是个体出生是就具有的天然免疫，可通过遗传获得，是机体在长期进化过程中逐渐建立起来的主要针对入侵病原体的天然防御功能。其主要特征是反应迅速，针对外来异物的范围较广，不针对某个特定异物抗原，也称非特异性免疫。2)适应性免疫，是个体出生后，接触到生活环境中的多种异物抗原，并在不断刺激中逐渐建立起来的后天免疫，也称获得性免疫。其主要特征是针对某个特定的异物抗原而产生免疫应答，开始的应答过程比较缓慢，一旦建立清除该抗原的效率很高，特异性很强，也称特异性免疫。
简述抗原抗体反应的原理。
答：抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合
简述抗原抗体反应的类型。
答：抗原抗体反应分为五种类型：①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应；
②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应；③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应；④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应；⑤免疫标记的抗原抗体反应等。
什么是带现象?
答：在抗原抗体反应等价带前后，由于抗体或抗原过量(形成前带或后带)，上清液中可测出游离的抗体或抗原，形成的沉淀物少，不出现可见反应，这种现象在做血清学试验时称为带现象。
影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素?
答：环境条件包括：电解质，酸碱度和温度。稳定条件：①电解质：常用O．85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液；②酸碱度：pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质，抗原抗体反应一般在pH为6～8时进行；③温度：一般以15，
40℃为宜，最佳反应温度为37℃。
简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。
单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内
接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。
试述免疫血清应如何进行纯化。
免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗体的方法有：硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。另外，还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗原交联于sephamse 4B上，通过亲和层析去除杂抗体。
叙述杂交瘤技术的基本原理。
杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。
简述间接血凝试验的基本原理。
间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞，与相应抗体(或抗原)作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象，又称被动血凝试验
简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但在一般条件下不出现可见反应，利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，可使红细胞凝集。 Coombs试验有二种类型：(1)直接Coombs试验：用于检测红细胞结合的不完全抗体。(2)间接Coombs试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。
抗球蛋白试验主要应用于那些方面？
①输血：对于“危险”受体（指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人）的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查，以抗球蛋白法最为可靠。②血型抗原抗体的检查：主要检查Rh—者，其体内是否有抗-D抗体，应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性的供体血液作常规检查。最可靠和灵敏的方法是将待检D 阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D 血清混合，然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断：母体产生的最常见的免疫性抗体为Rh 抗体和ABO 抗体，一般为7S 的IgG，可通过胎盘屏障，作用于胎儿红细胞，引起新生儿溶血性疾病，可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。④对溶血性贫血的研究：获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。⑤对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。Coombs 试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清，如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等，分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。
什么是协同凝集试验？主要用于何种检测？
协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似，但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这
种细菌的细胞壁中含有A蛋白（SPA），SPA 能与特异性抗体IgG 的Fc段结合（IgG3除外）。抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍保持与相应抗原特异性结合的特性。当这种葡萄球菌与IgG抗体连接时，就成为抗体致敏的载体颗粒，若与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。可用于细菌、病毒、毒素及各种可溶性抗原的检测。
何谓间接凝集反应？
将可溶性抗原（或抗体）先吸附或偶联于与免疫无关大小适当的颗粒表面，使之成为致敏载体颗粒，然后与相应抗体（或抗原）作用，在适宜电解质存在条件下，出现特异性的凝
集现象，称为间接凝集反应
间接凝集反应如何进行分类？各试验的原理是什么
根据致敏载体用的是抗原或抗体分为正向间接凝集试验和反向间接凝集试验；根据载体种类，分为间接血凝试验和胶乳间接凝集试验；根据反应方式分为间接凝集试验、间接抑制凝集试验和协同凝集试验。间接凝集试验是用抗原致敏载体检测标本中的相应抗体。将可溶性抗原与载体颗粒结合，再与标本中的抗体反应，通过抗体桥联，形成肉眼可见的凝集颗粒或凝集块，为阳性反应。反向间接凝集试验选用已知特异性抗体致敏载体检测标本中的相应抗原。用特异性抗体致敏颗粒，与样品中的待检抗原反应，通过抗原桥联，形成肉眼可见的凝集为阳性。临床上用于检测HbsAg、AFP 等。间接凝集抑制试验诊断试剂为已知抗原致敏的颗粒载体及相应的抗体，用于检测标本中与致敏抗原相同的抗原。将标本与抗体试剂相反应，然后加入致敏抗原，若出现凝集现象，说明标本中不存在相应抗原;如未出现凝集现象，则说明待检标本中含有相应抗原，凝集反应被抑制。同理，用抗体致敏载体颗粒及相应抗原作为诊断试剂，检测标本中的抗体，称为反向间接凝集试验。协同凝集试验与间接凝集反应的原理相似，但所用载体为金黄色葡萄球菌，该菌细胞壁上的SPA 能与特异性抗体的IgG 的Fc 段结合（IgG3除外），抗体的F(abˊ)2 段暴露在葡萄球菌的表面，仍能与相应抗原特异性结合。当这种葡萄球菌与IgG 抗体连接时，就成为抗体致敏的载体颗粒，若与相应抗原接触，即出现反向间接凝集反应。间接血凝试验是以红细胞作为载体的间接凝集试验，用已知的抗原或抗体致敏红细胞，然后与样品中的抗体或抗原在适宜条件下反应，出现红细胞凝集者为阳性。根据红细胞凝集的程度判断阳性反应的强弱。胶乳凝集试验是以聚苯乙烯胶乳微粒作为载体的间接凝集试验。
HAT培养基筛选杂交瘤细胞的机制是什么？
答：1.淋巴细胞：不能生长，5到7天死亡；DNA的主要合成途径被A阻断2.骨髓瘤细胞：不能生长，5到7天死亡；HGPRT缺乏，DNA合成的旁路途经受阻3.骨髓瘤细胞和脾细胞融合形成杂交瘤细胞，可长期生长繁殖。利用淋巴细胞的HGRT将Ｈ合成为嘌呤碱并最终与Ｔ一起合成ＤＮＡ从淋巴细胞获得产生某种抗体的遗传信息，从骨髓瘤细胞获得不断繁殖的能力
简述免疫系统的三个生理功能。
答：免疫系统的三个生理功能为免疫防御、免疫自稳、免疫监视免疫防御：是机体排斥外来抗原性异物的一种免疫保护功能。该功能正常时，机体可抵御病原微生物及其毒性产物的感染和损害，即抗感染免疫；异常情况下，反应过高会引起超敏反应，反应过低或缺失可发生免疫缺陷。免疫自稳：是机体免疫系统维持内环境稳定的一种生理功能。该功能正常时，机体可及时清除体内损伤、衰老、变性的细胞和免疫复合物等异物，而对自身成分保持免疫耐受；该功能失调时，可发生生理功能紊乱或自身免疫性疾病。免疫监视：是机体免疫系统及时识别、清除体内突变、畸变细胞和病毒感染细胞的一种生理功能。该功能失调时，有可能导致肿瘤发生，或因病毒不能清除而出现持续感染。
决定抗原抗体最佳配比的方法有几种?
(1)抗原稀释法：将可溶性抗原作一系列倍比稀释，然后向各管中加入一定浓度的适量抗血清，37℃反应后，产生的沉淀量随抗原量变化而不同，以沉淀物最多的管为最适比例管。(2)抗体稀释法：是将恒定量抗原与不同倍比稀释的抗体反应，出现沉淀物最多的管为抗体最适比例管。(3)棋盘格法：亦称方阵法。抗原抗体同时稀释，可一次完成抗原和抗体的滴定，并找出抗原、抗体的最适比。是前二法的结合
简述单向免疫扩散试验的基本原理和技术要点。(1)原理：待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成白色沉淀环，沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关。(2)技术要点：将抗体和热融化琼脂(约50％)混合，倾注成平板。待凝固后在琼脂板上打孔，孔中加入已稀释的抗原液，和不同浓度的抗原标准品，置37~12温箱，24～48h后观察孔周围沉淀环。量取沉淀环直径，通过抗原标准品，计算待测抗原的浓度。
在双向免疫扩散试验中，如何判定结果?
双向免疫扩散中，出现沉淀线，表明存在相应的抗原、抗体，不出现沉淀线则表明缺乏抗原或抗体。沉淀线的形成是根据抗原抗体两者比例所致，沉淀线靠近抗原孔，提示抗体含量高；靠近抗体孔，提示抗原含量较多
免疫电泳技术的优点是什么?免疫电泳有哪些用途?
1)优点：免疫电泳技术是将免疫扩散和电泳相结合的一种免疫学分析技术，既有抗原抗体反应的高度特异性，又有电泳分离技术的快速、灵敏和高分辨力，广泛应用于牛物医学领域。(2)用途：①纯化抗原或抗体的成分分析，分析其纯度；②正常及异常体液中蛋白质成分的分析，如无丙种球蛋白血症、冷球蛋白血症、多发性骨髓瘤、白血病、系统性红斑狼疮、肝病等病人的血清蛋白成分的分析，多发性骨髓瘤血清M蛋白的检测和鉴定；③免疫后不同抗体组分的动态变化研究
对流免疫电泳时，抗体为什么流向负极?
大部分蛋白质抗原在碱性溶液中带负电荷，电泳时从负极向正极泳动，而抗体IgG 分子量大，暴露的极性基团较少，在缓冲液中解离的也少，向正极的泳动速度较慢，电泳时由电渗引向负极的液流速度超过了IgG向正极的泳动，带动抗体流向负极，使抗原和抗体定向对流并发生反应，出现肉眼可见的沉淀线。
简述火箭免疫电泳的原理和主要用途。
(1)原理：火箭免疫电泳是将单向免疫扩散和电泳相结合的技术。抗原在电场作用下，在含有适量抗体的琼脂糖凝胶中向正极泳动，逐渐形成梯度浓度，在抗原抗体比例适当时形成沉淀，随着抗原量的减少，沉淀带越来越窄，形成火箭峰样沉淀，峰形高低与抗原量呈正相关。用已知量标准抗原作对照，绘制标准曲线，根据检测样品沉淀峰的高度可算出待测抗原的含量。(2)主要用途：①抗原蛋白定量，如IgA、IgG、IgM和sIgA检测；②C3、C4及其裂解产物检测；③AFP等检测。
免疫浊度测定的基本原理是什么?有哪些类型?
(1)基本原理：免疫浊度测定是将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合的一项分析技术。当可溶性抗原与相应的抗体特异结合，在二者比例合适、并有一定浓度的电解质存在时，可以形成不溶性的免疫复合物，使反应液出现浊度。这种浊度可用肉眼或仪器测知，并可通过浊度推算出复合物的量，即抗原或抗体的量。(2)类型：按测量方式可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。按测定速度可分为速率比浊法和终点比浊法。
散射免疫比浊法的基本原理是什么?
沿水平轴照射的一定波长的光，在通过溶液时，光线可被其中的免疫复合物粒子颗粒折射，发生偏转，产生散射光。根据Rayle培h散射方程，散射光强度与粒子(免疫复合物)的浓度和体积成正比，通过测量散射光的强度，可计算出待测抗原的浓度。
速率散射比浊法中的“速率”是指什么?
所谓速率是指单位时间内抗原与抗体反应的速度。抗原与抗体结合形成免疫复合物的速度，在每个单位时间内是不相同的，在抗体过量的情况下，随着反应时问的延长，免疫复合物的总量逐渐增加，通常在25s时出现一个反应最快的速率峰。峰值与抗原量呈正相关。
免疫浊度测定的反应体系中，为什么必须始终保持抗体过量
抗原和抗体的比例是浊度形成的关键因素，抗原和抗体必须在一个适当的浓度才会出现最高结合率。当抗原过量时，由于钩状效应，形成的免疫复合物分子小，而且会发生再解离，使浊度下降，光散射减少。当反应液中抗体过量时，免疫复合物的形成随着抗原量的增加而递增，光散射的强度也随之递增，因此，免疫浊度测定的反应体系中必须始终保持抗体过量，以保证免疫复合物的生成量与浊度的改变一致，这是免疫浊度测定的基本原则。
单向琼脂扩散试验有那些影响因素？
单向扩散试验有下列影响因素：①抗血清的亲和力、特异性、及效价。要求亲和力强，特异性好、效价高。注意存放的方法，防止效价下降。②标准曲线必须在每次测定时同时制作，绝不可一次作成，长期应用。③测定时必须加测质控血清，以保证定量的准确性。④有时出现扩散环呈现两重的双环现象，这是出现了抗原性相同的两个组分，其扩散率不同，例如α重链病血清中出现的α重链和正常的IgA两种成分并存，皆与抗IgA 抗体发生反应，就形成内外两重环。⑤在单扩试
验时，有时回出现结果与真实含量不符，这主要出现在 Ig 测定中。如用单克隆抗体或骨髓瘤纯抗原免疫动物获得的抗血清，都存在单一结合价的现象，若用此作为单扩试剂测量正常人的多态性抗原，则抗体相对过剩，是沉淀圈直径变小，测量值降低。⑥测得假阳性升高现象与上面相反，如用多克隆抗体测定单克隆病，则抗原相对过剩（单一抗原决定簇），致使沉淀圈呈不相关扩大，从而造成某一成分的伪性增加。
沉淀反应可应用在那些方面？
沉淀反应主要应用于体液内包括血液、尿液、脑脊液、胸水、泪液、关节腔液等内的蛋白质（如MW10000~50000，标本浓度为 1mg/L~100g/L）测定，应用最广泛的是可以准确定量的免疫浊度法，也可用于药物的测定。
双向琼脂扩散试验的原理是什么？
双向琼脂扩散试验的原理为可溶性抗原和抗体在含有一定电解质的琼脂凝胶板的对应孔中各自向对方扩散，在最适当的比例处形成抗原抗体沉淀线，根据沉淀线的位置、形状及对比关系，可作出对抗原或抗体的定性分析
试对沉淀反应各类试验方法进行评价。
沉淀反应可分为单向免疫扩散试验、双向免疫扩散试验、絮状沉淀试验、免疫浊度测定
等试验。单向免疫扩散试验是一种稳定、简便、不需要特殊设备、一般试验室都可使用的常规方法。双向免疫扩散试验简单易行，结果可靠，特异性高，分辨率高于对流免疫电泳，成本低廉，结果可经染色干燥后长期保存；缺点是敏感性较低、扩散缓慢，不能精确定量。
免疫浊度法①快速、②敏感，最小检出量可达 ng 水平。③检测范围广④缺点是所用抗血清质量要求高，仪器须装电脑，价格较贵。絮状沉淀试验较实用、简便、不需要特殊设备一般试验室都可使用，但须稀释标本比较麻烦。
放射免疫分析技术有何应用？
答：放射免疫技术由于其测定的灵敏度高，特异性强，精密度好，而且可对半抗原和抗原测定以及测定仪器设备条件要求不高，因此广泛用于生物医学检验。常用于各种激素、微量半抗原、肿瘤标志物、药物等微量物质的测定。由于大多数检验项目均有 RIA 或 IRMA 试剂盒供应，目前仍是基层单位对超微量物质测定的主要手段。
试述放射免疫分析与免疫放射分析。
答：放射免疫分析（RIA）是放射免疫技术最经典的模式。它是以放射性核素标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争性结合特异性抗体为基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析方法。而免疫放射分析（IRMA）是用放射性核素标记的过量抗体与待检测抗原直接结合，采用固相免疫吸附载体分离结合与游离标记抗体的非竞争性放射免疫分析。二者的异同点如下：①标记物 RIA 以放射性核素标记抗原；IRMA 则是标记抗体。②反应速率 IRMA 反应速度比RIA 快。③反应原理 RIA 为竞争抑制性结合，反应参数与待检抗原量成反相关；IRMA为非竞争结合，反应参数
与待检抗原成正相关。④特异性 IRMA 特异性较RIA高。⑤灵敏度和检测范围IRMA测定的灵敏度明显高于RIA， IRMA标准曲线工作范围较RIA宽1~2个数量级。
⑥其他 RIA 所用抗体为多克隆抗体，对亲和力和特异性要求较高，但用量很少；IRMA 为试剂过量的反应，对抗体亲和力的要求不及 RIA，但用量大。此外，RIA 可以测量半抗原，但IRMA只能测定至少有两个以上表位的抗原。
试述用于标记的荧光素应具备什么条件?
DA用于标记的荧光素应符合以下要求：①应具有能与蛋白质分子形成共价键的化学基团，结合后不易解离，而未结合者易清除；②荧光效率高，与蛋白质结合后，仍能保持较高的荧光效率；③荧光色泽与背景组织的色泽对比鲜明；④与蛋白质结合后不影响蛋白质原有的生化与免疫学性质；⑤标记方法简单、安全无毒；⑥与蛋白质的结合物稳定，易于保存。
试述荧光免疫显微技术基本原理。
DA荧光免疫显微技术是以荧光显微镜为检测工具，用荧光素标记特异性抗体或抗抗体，检测固定组织细胞上的抗原或血清中的抗体，常用于定性和定位检查的一门技术。
试述荧光免疫显微技术的临床应用。
DA临床常应用于：①血清中自身抗体的检测；②各种微生物的快速检查和鉴定；⑧寄生虫感染的诊断；④白细胞分化抗原的检测。
时间分辨荧光免疫测定法具有哪些优点?
DA时间分辨荧光免疫测定法具有特异性强，灵敏度高，标准曲线范围宽，分析速度快，标记物制备较简便、有效使用期长，无放射性污染等优点，因此是很有发展前途的超微量物质免疫分析技术。
目前临床检验中常用的荧光物质有哪些？
DA目前临床检验中常用的荧光物质有：四乙基罗丹明、异硫氰酸荧光素、四甲基异硫氰酸罗丹明、Eu3+的螯合物等。
简述荧光抗体的制备及纯化方法。DA荧光抗体的制备方法纯化方法有透析法、凝胶过滤法、有撑搅拌法及透析法。
荧光抗体技术有哪些优缺点，在临床上有哪些应用？
荧光抗体技术的优点：（1）能做到快速、敏感、定位。（2）Ag 和Ab 的特异性与形态的检查结合在一起；缺点：⑴对组织细胞进行微细结构的观察做不到；⑵标本不能永久保存，荧光有自然消退现象，需及时观察及对照相；⑶有非特异性荧光的干扰。荧光抗体技术的应用：⑴病毒学方面：病毒鉴定和病毒在感染cell内的定位；
⑵寄生虫学方面：用于寄生虫的诊断（鉴定、分型）；⑶免疫学方面：研究、用于自身免疫病的诊断；⑷细菌学方面：菌种鉴定和Ag结构的研究。
用于标记的酶应符合哪些要求?
DA(1)酶活性高，能对低浓度底物产生较高的催化反应率。(2)具有可与抗原、抗体共价结合的基团，标记后酶活性保持稳定，而且不影响标记抗原与抗体的免疫反应性。(3)酶催化底物后产生的信号产物易于判定或测量，且方法简单、敏感和重复
性好。(4)酶活性不受样品中其他成分(内源性酶、抑制物)的影响；用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。(5)酶、辅助因子及其底物均对人体无危害，理化性质稳定，且价廉易得。
简述酶免疫技术的分类。
DA(1)酶免疫技术按实际用途，分为酶免疫组化和酶免疫测定两大类。(2)按抗原抗体反应后是否需将结合的和游离的酶标记物分离，分为均相酶免疫测定和异相酶免疫测定，异相酶免疫测定又可分为固相酶免疫测定和液相酶免疫测定。
简述均相酶免疫测定的原理。
DA酶标抗原(AgE)与Ab结合形成AbAgE后，其中的酶(E)活性将减弱或增强。因此，不需对反应液中的AbAgE和AgE进行分离，直接测定反应系统中总酶活性的变化，即可推算出被测样品中Ag的含量。
简述双抗体夹心法的原理。
DA连接于固相载体上的抗体和酶标抗体，与待检抗原上两个不同的抗原决定基结合，形成固相抗体一抗原一酶标抗体复合物。由于反应系统中固相抗体和酶标抗体的量相对于待检抗原是过量的，因此复合物的形成量与待检抗原的含量成正比。测定复合物中酶作用于加入的底物后生成的有色物质量，即可确定待检抗原含量。斑点-ELISA有哪些优点?
DA(1)NC膜吸附蛋白力强，微量抗原吸附完全，故检出灵敏度可较普通的EusA高6～8倍；(2)试剂用量较EusA省10倍；(3)操作简便，试验及结果判断不需特殊设备条件；(4)吸附抗原(抗体)或已有结果的NC膜可长期保存(-20℃可达半年)。
简述ELISA的基本原理、方法类型及应用。
DA(1)基本原理：抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面；测定时，将受检样品(含待测抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物；反应终止时，固相载体上酶标抗原或抗体被结合量(免疫复合物)即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例；经洗涤去除反应液中其他物质，加入底物进行显色，最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中待测物质含量。(2)方法类型及应用：①双抗体夹心法：用于检测抗原，适用于检测两个或两个以上抗原决定基的多价抗原；②间接法：用于检测抗体；③竞争法：用于抗原和半抗原的定量测定，也可对抗体进行测定；④捕获法：用于血清中某种抗体亚型成分(如IgM)的测定。
简述酶增强免疫测定技术的原理。
DA具抗原及酶活性的Ag-E与Ab结合形成AgAb后，所标的酶(E)因与Ab接触
紧密，空间位阻影响了酶的活性中心，酶活性受到抑制。加入未标记抗原(标准或样品
中的Ag)后，Ag即与Ab叫竞争结合反应系统中限量的Ab形成AgAb复合物，从而使反应液中AgAb*(酶活性被抑制)的比例减少，具酶活性的游离AgE增多。最终测得的酶活性随着反应体系中未标记抗原(Ag)浓度升高而增强。
简述免疫印迹法的原理。
免疫印迹法由SDS-PAGE、蛋白质转印和酶免疫测定三项技术结合而成。抗原等蛋白样品经SDS处理后带负电荷，SDS-PAGE时从阴极向阳极泳动，分子量小者，泳动速度快；将凝胶中已经分离的蛋白质条带在电场作用下转移至硝酸纤维素膜上；将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用，加入能形成不溶性显色物的酶反应底物，使区带染色；根据电泳时加入的分子量标准，可确定各组分的分子量。
何谓金免疫测定技术?简述其技术类型及原理。
DA金免疫测定技术是指用胶体金颗粒作为标记物进行抗原抗体反应的一类免疫学测定技术，其主要技术类型有斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验。1)斑点金免疫渗滤试验：在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中，依次滴加标本、免疫金及洗涤液，因微孔滤膜贴置于吸水材料上，故溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用，达到快速检测目的，阳性反应在膜上呈现红色斑点。2)斑点金免疫层析试验：是将胶体金标记技术和蛋白质层析技术相合的以硝酸纤维素膜为载体的固相膜免疫分析技术，滴加在膜一端的标本溶液受载体膜的毛细管作用向另一端移动，犹如层析一般，在移动过程中被分析物与固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被固相化，无关物则越过该区域而被分离，然后通过胶体金的呈色条带来判读实验结果。
免疫溶血试验的原理和用途。
DA原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。免疫溶血试验所参与的成分有补体，抗原(SRBC)及抗体(溶血素)，这三种成分中如有两种是已知的就可测知第三个成分，稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定，溶血空斑试验，CH50试验，补体结合试验，抗补体试验等。
如何进行补体单个成分的测定?
DA补体单个成分可测其溶血活性或含量。测定溶血活性应先制备缺乏该补体单个成分的“补体试剂"。而后利用免疫溶血试验的原理，将致敏红细胞与“补体试剂”混合，再加入待测血清，孵育后，溶血程度与待测血清中的该补体成分的溶血功能有关。测定含量可用已知抗体以单向琼脂扩散等方法进行。
血清免疫球蛋白测定方法有那些？
答：单向免疫扩散法：原理，优点：简单，条件要求低，但抗体需要高效价高特异性，灵敏度： mg/ml 免疫比浊法:原理，优点：检测结果准确，精密度高，耗时短，灵敏度高ug/ml
免疫球蛋白IgG、IgA、IgM测定有何意义？
答：IgG、IgA、IgM均升高则慢性疾病， IgG升高则多为细菌感染导致，新生儿血清IgM升高则常为宫内感染。单一Ig显著升高则多为免疫增殖病：多发性骨髓瘤，重链病、恶性淋巴瘤。Ig降低则体液免疫缺陷或联合免疫缺陷。
某患者临床疑为细胞免疫功能缺陷，应做哪些检查以协助诊断？
答：从以下几个方面检测1)皮肤试验，显示有迟发超敏反应能力，表示受试验者细胞免疫功能完善2)T细胞及其亚群检测，常采用荧光抗体检测T细胞表面标志分
子CD3，CD4等
3)T细胞功能检测，利用PHA刺激淋巴细胞增殖，转化来判断T细胞的功能
简述原发性吞噬细胞缺陷病的发病机制主要包括哪几种？
主要包括：①吞噬细胞趋化和（或）粘附功能障碍。②吞噬和杀菌功能障碍。③单核吞噬细胞的特殊异常，如IgG Fc受体缺陷。
简述AIDS的主要免疫学特征？
①免疫系统的CD4T淋巴细胞受HIV感染，使CD4T细胞受损而减少。②单核-巨噬细胞、滤泡树突状细胞和朗格汉斯细胞亦可受HIV 感染而受损。③进行性细胞免疫缺陷，继而体液免疫缺陷。④B淋巴细胞可克隆激活伴免疫球蛋白增多。
简述体液免疫缺陷的检测方法？
有①血清Ig 的测定，常用免疫扩散法和免疫比浊法。②分泌型IgA 的测定，用单向免疫扩散或ELISA 等。③同种血细胞凝集素测定。④特异性抗体产生能力测定，疫苗接种后抗体产生的测定。⑤抗IgA抗体的测定，测自身抗体。⑥SmIg测定，检测B细胞数量和其成熟程简述细胞免疫缺陷的检测方法？
有①迟发性皮肤过敏反应试验，常为初筛试验。②T细胞及其亚群的检测，为主要的试验测定CD3、CD4、CD8 分化抗原进行分类鉴定。③E 玫瑰花结试验，现常用CD2 测定所代替。④淋巴细胞增殖反应试验，为体外免疫功能试验，方法有形态法和同位素法。⑤T细胞分泌产物功能测定，测定激活的T细胞和单个核细胞分泌的细胞因子。
简述IDD的共同临床特点？
.①对病原体的易感性强、常发生反复感染、严重感染，难以治愈。T细胞缺陷易发生病毒真菌和寄生虫感染。余缺陷病易发生细菌感染，尤以化脓感染为主。②易发生恶性肿瘤和并发自身免疫病。③临床表现和病理损伤有明显的多样性，症状各异，复杂多样，主要是累及多系统和多器官所致。
简述IDD的常见发病原因？①遗传基因异常，常表现为X 连锁隐性遗传和常染色体隐性遗传，显性遗传亦有，少见。②中枢免疫器官发育障碍，由遗传或其他原因所致。③免疫细胞内在酶的缺陷，如ADA、PNP、G-6-PD 缺乏所致。④免疫细胞间调控机制异常，辅助不足或抑制过剩均可导致免疫缺陷。
简述原发性B细胞缺陷病的主要免疫学和临床特征？
.本组疾病有三种主要免疫学和临床特征：①全部Ig 缺失或极度降低，如Bruton 综合征。②部分Ig缺失，如选择性Ig缺陷。③Ig量正常，但在抗原刺激后无免疫应答，功能缺陷。
叙述AIDS三大标志的主要免疫学检测？
AIDS 检测主要是病毒标志、免疫标志和相关标志三大类。病毒标志主要是直接分离培养检测病毒或检出HIV 组分，P24、gp120 和gp160 的免疫印迹检测；免疫标志主要是检测HIV的抗原或抗体及T细胞，HIV抗体用ELISA测定为初筛试验，确认试验用免疫印迹法，亦可用PCR法。我国判定标准为：①HIV抗体阳性：至少有两条膜（gp41/gp120/gp160）或至少有一条膜带与P24 带同时测定；②HIV 抗体阴性：无
HIV 抗体特异性条带出现；③HIV 抗体可疑：出现特异性抗体带，但带型不足以确认阳性者，T 细胞检测减少，常＜1.5×109/L。CD4+T细胞绝对值下降至（2~4）×109/L，CD4/CD8比值＜1，还有Ig、免疫复合物等测定；④相关标志是指与HIV感染、AIDS病情有关的检测，如有关微生物检测、白细胞、ESR等。
叙述AIDS的主要发病机制？
AIDS 的主要发病机制：HIV 感染后，主要是损伤CD4+T 细胞减少和功能缺陷而导致机体细胞免疫功能继而体液免疫功能全面障碍为其主要的发病机制。同时还损伤巨噬细胞、树突状细胞、B细胞和脑组织小胶质细胞，导致相应的功能障碍。HIV损伤T细胞是通过HIV外膜蛋白gp120 和gp41 与T细胞发生拈附、溶解、使病毒核心进入靶细胞，在靶细胞内进行复制，繁殖，最后以芽生方式破坏细胞膜而移出，进行感染扩散，从而破坏CD4+T细胞，导致免疫缺陷。
论述流式细胞术在免疫学中的应用。
1.淋巴细胞及其亚型的分析
2.淋巴细胞功能的分析
3.淋巴造血系统及白血病免疫分型
4.肿瘤耐药基因分析
5.AIDS检测中的应用
6.自身免疫病相关HLA分析
7.移值免疫中的应用
何谓重链病？
重链病是由于浆细胞发生突变和异常增生，致使血清和尿中出现大量游离的无免疫功能的免疫球蛋白重链所导致的疾病。
何谓轻链病？
轻链病是突变的单克隆浆细胞产生的大量轻链，血浆中轻链含量异常增加，增加的轻链从肾脏排泄，血和尿中可查及大量的轻链蛋白。
何谓免疫球蛋白异常增生性疾病？
免疫球蛋白异常增生性疾病是指由于浆细胞的异常增殖而导致的免疫球蛋白异常
增生造成机体病理损伤的一组疾病。
何谓浆细胞异常增殖？
浆细胞异常增殖通常是指单克隆浆细胞异常增生并伴有单克隆免疫球蛋白或其多
肽链亚单位合成异常。
何谓ANA，简述荧光免疫组化法(间接法)检测血清总ANA的原理。
ANA即抗核抗体，指各种成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体，可与不同的细胞核反应，无器官特异性和种属特异性间接法检测ANA原理：用小鼠肝切片或印片或HEP2细胞作为细胞核基质抗原，加待测血清，若含有ANA，则与细胞核基质抗原反应，再加荧光素标记的抗抗体(二抗)，结合一抗，在荧光显微镜下见到细胞核有荧光着色为阳性反应。
ANA有哪些种类，它们在SLE诊断中的价值如何？
答：抗核抗体是一种广泛存在的自身抗体，主要包括，抗DNP抗体，抗DNA抗体，抗ENA抗体，抗组蛋白抗体。约99%（86%～100%）的活动期SLE病人ANA阳性，ANA 阴性几乎可除外SLE的诊断。
你知道哪些自身抗体，临床应用价值如何？
答：1）ANA：在未经治疗的SLE患者中阳性率可达90%以上，其他自身免疫病也可阳性。可作为自身免疫病，尤其是SLE的筛选指标。2）抗Sm抗体：SLE的特征性标志抗体，是SLE重要诊断指标。3）抗dsDNA抗体： SLE的特征性标志抗体，是SLE重要诊断指
试述自身免疫病的防治原则。
答：自身免疫病的防治原则大致为：（1）预防和控制病原体的感染，避免因自身组织细胞的抗原性发生改变和交叉抗原诱发的免疫应答，同时也避免感染引起的抗原提呈细胞和T细胞的激活。（2）使用免疫抑制剂如环孢霉素A、FK-506、皮质激素、中药雷公藤治疗主要以抗体引起的自身免疫病，用Th2因子治疗主要以T细胞引起的身身免疫病。（3）特异性抗体治疗，如用抗CD3单抗，抗炎症性细胞因子单抗等。（4）疫苗激发免疫耐受。如口服II型胶原等自身预防和治疗类风温关节炎等
试述系统性红斑狼疮，自身抗体的检测。
答：疾病诊断相关的主要自身抗体:1．抗核抗体2．抗DNA抗体3．抗磷脂抗体和抗血小板抗体4．抗红细胞抗体5．RF 6．抗细胞质抗体
自身免疫病的共同特征。
1.多数病因不明；
2.有遗传倾向；
3.患者以女性居多，并随年龄增加发病率有所增加；
4.患者血清中游多种自身抗体或自身反应致敏淋巴细胞存在；
5.疾病有重叠现象；
6.病程一般较长，多迁延为慢性；
7.病损局部可发现淋巴细胞，浆细胞，中性粒细胞等浸润；
8.免疫抑制剂治疗可取的一定疗效。
简单叙述Ⅰ型超敏反应的特点。
答:Ⅰ型超敏反应的特点是：①具有明显的个体差异和遗传背景；②反应发生快，几秒至几十分钟内出现症状，恢复也较迅速；③由结合在肥大细胞和嗜碱粒细胞上的IgE抗体所介导；④通常反应发生后效应器官出现功能紊乱，而没有严重的组织细胞损伤；⑤补体不参与该反应。
I型超敏反应的免疫学检验方法有哪些？
1）皮试检测变应原。2）免疫球蛋白检测：总IgE和特异性IgE。3）嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞检测。
以血型不合引起的输血反应为例，简述Ⅱ型超敏反应靶细胞损伤机制。
答：抗ABO血型抗体多为IgM型(1分)，当血型不合进行输血时，血型抗体可与红细胞表面相应的血型抗原物质结合(1分)，通过三个机制溶解红细胞：抗体和补体介导的红细胞溶解(2分)，免疫调理作用(1分)，ADCC作用
试述III型超敏反应发生机制。
答：III型超敏反应，IC沉积引起组织损伤的机制如下：（1）激活补体IC沉积可激活补体，产生C3a、C5a等过敏毒素，使趋化至局部的肥大细胞、嗜碱粒细胞脱颗粒，释放组胺等活性介质，造成血管通透性增加、渗出和局部水肿。同时吸引中性粒细胞聚集于IC沉积的部位。（2）中性粒细胞浸润趋化至IC沉积部位的中性粒细胞在吞噬IC时释放多种溶酶体酶，使血管基底膜和周围组织细胞民生损伤，
造成以上中性细胞浸润为主的炎症。（3）血小板活化IC和C3b可使血小板在局部聚集并活化，释放血管活性胺类物质，使血管扩张、通盘性增加、加剧局部渗出和水肿，并激活凝血系统，形成微血栓，造成局部组织缺血、出血和坏死。
Rh血型不符引起的新生儿溶血症属于哪一种类型的超敏反应性疾病?
试述其发生机制。答:（1） Rh血型不符引起的新生儿溶血症为型Ⅱ超敏反应性疾病。（2）Rh血型不符引起的新生儿溶血症发生于Rh一母亲所怀的Rh＋胎儿，尤其多见于再次妊娠所分娩的新生儿。当首次妊娠分娩时，胎儿的Rh＋红细胞可进入母体，剌激母体产生抗Rh抗体。当再次妊娠仍为Rh＋胎儿时，母体产生的抗Rh抗体(IgG)即可通过胎盘进入胎儿体内，与胎儿Rh＋红细胞结合，导致胎儿红细胞的破坏。从而引起流产或出生后的严重溶血现象，甚至死亡。
试述Ⅰ型超敏反应的发生机制
答：Ⅰ型超敏反应的发生机制：Ⅰ型超敏反应是由于变应原再次进入体内后引发的超敏反应，其发生通常分三个阶段：（1）致敏阶段在此阶段，变应原进入机体，刺激机体特异的B淋巴细胞，使其增殖分化为浆细胞，浆细胞分泌产生针对特异变应原的IgE抗体，此抗体吸附于肥大细胞和嗜碱性粒细胞上，使机体处于致敏状态。（2）发敏阶段当有相同变应原再次进入机体时，与致敏靶细胞表面的IgE Fab段超变区特异性结合，触发靶细胞的细胞膜活化，使其脱颗粒及合成新的生物活性介质。（3）效应阶段颗粒中的生物活性介质及新合成的生物活性介质作用于相应的效应器官，引起效应器官病理改变
单克隆抗体：是指仅识别单一抗原表位的B细胞杂交瘤产生的同源抗体，具有特异性强、效价高、生物活性单一、理化性状高度均一等特点。
佐剂：是指先于抗原或与抗原一起注入机体，能够增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
基因工程抗体：是指应用DNA重组及蛋白工程技术对编码抗体的基因按不同的需要进行改造和装配，经导人适当的受体细胞后重新表达的抗体，主要包括人源化抗体、小分子抗体、双价特异性抗体和抗体融合蛋白等类型。
双特异性抗体：又称双功能抗体，它不同于天然抗体，其两个抗原结合部位具有不同的特异性，可以同时与两种不同特异性的抗原发生结合。
滴度(效价)：血清标本进行一系列倍比稀释后进行反应，以出现明显凝集反应的血清最高稀释度、即滴度(效价)。
凝集反应：凝集反应是指细菌或红细胞等颗粒性抗原与相应抗体在适当条件下结合形成凝集的现象。现也指颗粒化抗原或抗体与相应抗体或抗原的反应。
直接凝集反应：细菌、螺旋体和红细胞等颗粒抗原，在适当电解质参与下可直接
与相应抗体结合出现凝集，称为直接凝集反应。
凝集原：指凝集反应中的抗原。
凝集素：指凝集反应中的抗体。
试管凝集试验：是在试管内颗粒性抗原与相应抗体直接结合，在一定条件下，会
出现肉眼可见的凝集现象。
间接凝集反应：将可溶性抗原(或抗体)先吸附于适当大小的颗粒性载体表面，
然后与相应抗体(或抗原)作用，在适宜的电解质存在的条件下，出现特异性凝集现象
称间接凝集反应或被动凝集反应(passive agglutination test)。
沉淀反应：沉淀反应是指可溶性的抗原和抗体特异性结合后，所形成的复合物以沉淀的形式出现。
凝胶内沉淀试验：又称凝胶扩散，是将可溶性抗原与相应抗体分别放人凝胶内进行扩散，两者在比例合适的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。
免疫电泳：是凝胶电泳和凝胶扩散相结合。在电场作用下，位于琼脂凝胶中的抗原样品因各组分的电泳迁移率不同而彼此分开形成不同的区带。电泳结束后，在琼脂板中
间所挖的长形槽内加人相应的抗血清，由于经电泳分离后的各种抗原成分在琼脂中呈放射
状扩散，而抗体呈直线扩散，因而形成的沉淀线多呈弧状。
对流免疫电泳：是在电场作用下的免疫双扩散。抗原向阳极移动，而抗体向阴极移动，在一定时间内，相向移动的抗原和抗体在两孔间相遇，在浓度比例适当处形成沉淀线。
带现象:在抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关，当抗原与抗体达到最适比时，沉淀物形成最多。如果抗原或抗体极度过剩则无沉淀物形成，这种现象称为带现象。出现在抗原过量时，称为后带。出现在抗体过量时，称为前带。
放射化学纯度：指单位标记物中结合于被标记物上的放射性占总放射性的百分率，一般要求大于 90%。
比放射性：指单位化学量标记物中所含的放射性强度，也可理解为每分子被标记物平均所挂放射性原子数目，常用Ci/g，mCi/mg或Ci/mmol等单位表示。
放射免疫分析：是该类技术最经典的模式。它是以放射核素标记抗原与反应系统中未标记的抗原竞争特异性抗体的基本原理来测定待检样品中抗原量的一种分析法。
荧光免疫技术：是将抗原抗体反应的特异性与荧光物质检测的敏感性和直观性结起来的一种免疫分析技术。
荧光效率：是指荧光物质将吸收的光能转变成为荧光的百分率。
荧光寿命：指荧光物质被一瞬时光脉冲激发后产生的荧光随时间而衰减到一定程度时所用的时间。
荧光的淬灭：指荧光分子在某些理化因素作用下、荧光分子的辐射能力受到激发光较长时间的照射后会减弱的现象。
荧光素：是能产生荧光并能作为染料使用的有机化合物。
荧光抗体：荧光素与特异性抗体以化学共价键的方式结合而成，是免疫荧光技术的关键试剂。
非均相荧光免疫测定法：在抗原抗体反应后，先把Ab*Ag与Ab*分离，然后测定
Ab*Ag或Ab*中的标记物的量，从而推算出标本中的Ag量，该方法称非均相荧光免疫测定法。
均相荧光免疫测定法：在抗原抗体反应后Ab*Ag中的标记物失去荧光特性，则不
需进行Ab*Ag与Ab*的分离，可以直接测定游离的Ab*量，从而推算出标本中的Ag量，该方法称为均相荧光免疫测定法。
时间分辨荧光免疫测定：时间分辨荧光免疫测定是用镧系稀土元素螯合物(如
螯合物)标记抗体或抗原，检测标本中的相应抗原或抗体的荧光免疫测定技术
酶免疫技术：是指利用酶的高效催化和放大作用与特异性免疫反应结合而建立的
一种标记免疫技术。
封闭：是指在抗原或抗体包被ELISA板后，用1％～5％牛血清白蛋白或5％～20％小牛血清等再包被，以防止非特异性吸附。
异相EIA：是指在酶免疫测定中，抗原抗体反应后，需分离游离的和与抗原(或
抗体)结合形成复合物的酶标记物，然后对经酶催化的底物显色程度进行测定，再推算
出样品中待测抗原(或抗体)的含量。
包被：是指将抗原或抗体固相化的过程。
均相酶免疫测定：是指抗原抗体反应平衡后，无需分离F和B，直接根据反应前
后酶活性的改变进行待检物质的测定。
肿瘤抗原: 肿瘤在发生、发展中产生的或过度表达的抗原物质。
肿瘤相关抗原：非肿瘤细胞所特有的，正常组织或细胞也存在的抗原，含量在细胞癌变时明显增高。
肿瘤特异性抗原：肿瘤细胞所特有的，正常组织或细胞不存在的抗原。
封闭因子:一种小分子的多肽,可存在于肿瘤患者的血清中。体外培养时,它可抑制非特异性致有丝分裂因子,如植物血凝素或刀豆素A对淋巴细胞的转化
移植(transplantation)：指健康细胞、组织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、用以代替或补偿机体所丧失的结构和功能的现代医疗手段。
移植抗原：代表个体特异性的由MHC编码的HLA是引起排斥反应的同种抗原
移植排斥反应(transplantation rejection)：针对移植抗原产生的引起移植物功能或受者机体损害的免疫应答。
宿主抗移植物反应(host versus graft reaction, HVGR)：宿主针对供体组织或细胞的HLA抗原产生的移植排斥反应
移植物抗宿主反应(graft versus host reaction, GVHR)：一定条件下移植物中的过客（免疫）细胞针对移植物产生的排斥反应。
免疫缺陷(immunodeficiency):由遗传因素或其他原因导致的免疫系统发育或免疫应答障碍而导致的一种或多种免疫功能不全.
免疫缺陷病:由免疫缺陷所致的各种临床综合特征的疾病.
获得性免疫缺陷综合征 (AIDS)：，由HIV感染引起，因CD4+T细胞质和量的缺失，导致细胞免疫功能严重缺陷，临床上以反复机会感染、恶性肿瘤和中枢神经系统退行性变为主要特征。
流式细胞术：是指借助流式细胞仪，精确、快速地对生物细胞的理化特性和生物学特性进行多参数定量分析，并对特定细胞群体分选的新技术。
细胞分选：是指从细胞群体中将选定的细胞分离出来。
荧光补偿技术：是指利用已知标准样品或根据细胞样品的生物学意义，合理设置各荧光信号之间的相互补偿值。
M蛋白:单克隆免疫球蛋白，是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白；
冷球蛋白:一组低温下发生沉淀，加温后又复溶的Ig。
本-周蛋白（bence-Jones）:尿中游离的免疫球蛋白轻连。
免疫增殖病（immunoproliferative disease）：LC异常增殖引起的疾病.
重链病(heavy chain disease):突变的浆细胞产生异常增多的重链或质量不能与L 链装配的 Ig重链，血清和尿中H链过剩导致的疾病。
轻链病：异常的LC产生大量的Ig的L链在肾脏和内脏组织，导致肾损伤和淀粉样病变的疾病。
自身免疫机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的现象，为生理性免疫应答的一部分。
自身免疫病（ AID）因机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的组织损伤或功能紊乱，属于病理性免疫应答。
抗核抗体（ ANA）：抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分[脱氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等]作为靶抗原的自身抗体的总称。
类风湿因子（ RF）：自身免疫病人体内表达的抗自身变性IgG的IgM类抗体。
隐蔽抗原：指体内在解剖位置上某些与免疫系统隔绝的成分，如眼组织、精子等。当外伤、手术和感染等情况下，释放并与机体免疫系统接触可以引起免疫应答，导致自身免疫病。
超敏反应：又称为变态反应，是指机体对某些抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。变应原：是指能够选择性地激活CD4＋Th2细胞及B细胞，诱导产生特异性IgE抗体应答，引起变态反应的抗原性物质。
皮试：用少量抗原注射、挑刺或划痕等方法注入到受试者皮肤，用于变应原的检测。
1.免疫防御功能异常可导致(感染)和(免疫缺陷)疾病。
2.抗原抗体反应的特点有特异性、比例性、可逆性
3.抗原抗体反应的温度一般以15～40℃为宜，最适温度37℃
3．影响抗原抗体反应的环境因素主要有电解质、pH、温度
4．某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求，如冷凝集素在4℃左右与红
细胞结合最好20％以上反而解离。
5．抗原抗体的结合分子间的引力包括静电引力、范德华引力、氢键引力和疏水作用力
2.间接凝集反应的类型包括正向间接凝集、反应反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应四种类型。
3参与凝集反应中的抗原称为（凝集原）抗体称为(凝集素)试验有(玻片法)(试管法)(玻片法)常用的直接凝集
4．在间接凝集反应中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体)而反向间接凝集反应是用(抗体)致敏载体以检测标本中相应(抗原)
5．间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体)可用于输血前的(交叉配血)试验。
1．免疫沉淀反应是（可溶性抗原）与（相应抗体）特异性结合
2．棋盘格法（抗原）和（抗体）同时稀释，可一次完成（抗原）和（抗体）的滴定
3．单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量（抗体）的（凝胶）内自由向周围扩散，抗原抗体特异性结合，在两者比例合适的部位，形成（沉淀环）。
4．Maneini曲线适用于大分子抗原的测定，在一定范围内，沉淀环随时间延长而扩大，抗原浓度与（扩散环直径的平方）呈线性关系，常用（普通）坐标纸作图。5．Fahey曲线适用于小分子抗原的测定，在一定范围内，沉淀环随时间延长而扩大，沉淀环直径与（抗原浓度的对数）呈线性关系，常用（半对数）坐标纸作图。
6.双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析，沉淀线靠近抗原孔指示（抗体含量）较大；靠近抗体孔则指示（抗原含量较高）；不出现沉淀线则表明（无对应的抗原和抗体）
7.免疫电泳是将（电泳）与（双向免疫扩散）相结合的一种免疫化学分析技术。
8.火箭电泳是（电泳）与（单向免疫扩散）相结合的免疫技术。
9.对流免疫电泳是（电泳）与（双向免疫扩散）相结合的免疫技术。
10.对流免疫电泳中，抗体流向负极，是因为（抗体分子量大）（电泳）速度小（电渗）速度。
1l.免疫浊度测定的基本原理是抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成（免疫复合物），使反应液出现（浊度），并可根据其推算出抗原或抗体的量。
12.根据Rayleigh方程，散射比浊法中的散射光强度与入射光波长成（反）比，与粒子的浓度和体积成（正）比。
13.速率散射比浊法是测定单位时间内免疫复合物形成的（最快时间段）的散射信号值，此时的散射信号最强，速率散射信号值最大。
14.免疫胶乳浊度测定的原理与透射比浊法相似。载体为大小适中、均匀的胶乳颗粒其直径应稍（小于）入射光波长目前多用（200）nm的胶乳颗粒。
15.免疫浊度测定的基本原则之一是反应体系中必须始终保持（抗体）过量。
16.凝胶内沉淀试验包括（单向扩散试验）和（双向扩散试验）抗原抗体最适比的
基本测定方法为（抗原稀释法）和（抗体稀释法）。
1．标记免疫技术的示踪物有(酶）、(放射性核素)、(荧光素)、(化学或生物发光剂)(胶体金 )
2．放射免疫技术可分为(放射免疫分析)和(免疫放射分析)两种基本类型。
3.采用125I制备标记物的基本原理是以放射性碘原子置换被标记物分子中(酪胺酸
或酪胺残基)或(组胺残基)上的氢原子。
1.荧光免疫技术的主要类型包括(荧光抗体染色技术)（荧光免疫测定技术)。
2．荧光物质有(荧光素)和(其他荧光素物质)。
3．荧光抗体染色技术可分为(荧光免疫显微技术)和（流式荧光免疫技术)。
4．镧系稀土元素标记物制备的螯合剂有(多羧基酸类螯合剂)、(B-二酮体类螯合剂)、(BCPDA)和(菲洛林)
5．荧光免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的荧光标记物而
分为(均相)和(非均相)两种类型。
6．非均相荧光免疫测定法包括(时间分辨荧光免疫测定)（荧光酶免疫测定)。
7．均相荧光免疫测定法包括(荧光偏振免疫测)和（底物标记荧光免疫测定)。
8．荧光素标记抗体的方法有(搅拌标记)和(透析标记法)。
l.膜载体酶免疫测定技术的类型主要有(斑点-ELISA免疫渗滤试验)、(免疫层析试验)、(免疫印迹法)
3.酶免疫组织化学技术常用的酶有(HRP )、(AP )和(GOD )。
4．EIJSA方法类型主要有(双抗体夹心法)、(间接法)、(竞争法)和(捕获法)。5．ELISA中三种必要试剂是(固相的抗原或抗体)(酶标记的抗原或抗体)(酶的反应
底物)。
6．制备酶结合物常用的方法有(戊二醛交联法)和(过碘酸盐氧化法)。
7．在稀释液和洗涤液中加入(吐温一20)，可以去除非特异性吸附。
8．均相酶免疫测定技术的类型主要有(酶增强免疫测定技术)(克隆酶供体免疫分析
技术)。
9．非标记抗体酶免疫组织化学技术的类型主要有(酶桥法)、(PAP法)、(双桥PAP法) (APAAP法)。
10. (SDS-PAGE), (蛋白质转运)和(酶免疫测定)三项技术结合而成形成免疫印迹法。
11.常用于HRP标记抗( 戊二醛交联法 )和( 过碘酸钠法 )。
1.不受位阻效应影响,更易发挥生物素活性作用的是（BCNHS）。
2.用于标记蛋白质醛基的,适用范围较BHZ宽的活化生物素是（BCHZ）。
3.在一定波长的光照射下,光敏基团可转变为芳香基硝基苯而直接与腺嘌呤N7位氨
基结合的是（光生物素）。
4.生物素化蛋白质衍生物有二类,一种是（生物素化的大分子生物活性物质）,另一
种是（标记材料结合生物素后制成的标记物）。
5.用于亲和素标记的物质中,最常用的是（酶）, （异硫氰酸荧光素(FITC)）和（胶
体金）。
1.用丙酮做固定剂的抗原是（免疫球蛋白）；用1%聚甲醛做固定剂的抗原是（激素）；用10%甲醛做固定剂的抗原是（类脂质）；用95%乙醇做固定剂的抗原是（蛋白质）；用四氯化磺做固定剂的抗原是（酶）。
2.免疫染色对特殊标本的进一步处理常用（冰冻切片）和（石蜡切片）法。
3.免疫组化染色后，阳性细胞的染色分布有三种类型，分别是（胞质型）、（细胞核型）和（细胞膜表面型）。
4.酶免疫组化技术中最常用的酶有（辣根过氧化物酶）（碱性磷酸酶）及（葡萄糖氧化酶）。
5.免疫电镜标本的制备主要有（非包埋法免疫染）（包埋前免疫染色）（包埋后免疫染色）
6.免疫组化中最常用的制片方法是（蛋白酶消化法）和（非特异吸附法）。
1．金免疫技术主要有(金免疫组织化学染色技术)和(金免疫测定技术)，前者包括(免疫金(银)光镜染色技术)和(免疫金电镜染色技术)；后者包括(斑点金免疫渗滤试验)和(斑点金免疫层析试验)等。
2．免疫金是指(胶体金与抗原(抗体))的结合物，在免疫组织化学染色技术中，习惯上称之为(金探针)
3．斑点金免疫层析试验方法学类型有(双抗体夹心法)(竞争法)和(间接法)。
4．渗滤装置是斑点金免疫渗滤试验试剂盒中主要组成部分之一，由(塑料小盒)、(吸水垫料 )和(点加了抗原或抗体的硝酸纤维素膜片)三部分组成。
5．斑点金免疫渗滤试验试剂盒由(渗滤装置)(胶体金标记物)和(洗涤液)组成。6．用于电镜的免疫金法可分为(包埋前染色)和(包埋后染色)两大类。
7．免疫金电镜染色技术包括(标本包埋)、(免疫组化染色)两个主要步骤。
8．为了消除待测血清标本中(非特异性IgG)的干扰，斑点金间接免疫层析法测抗体常设计成（反流,免疫层析法）
1．PBMC包括（淋巴细胞）和（单核细胞）。
2．在反相溶血空斑试验中每一个空斑代表一个（分泌Ig的细胞）。
3．B细胞表面特异的标志是（SmIg）。
4．常用的测定淋巴细胞活力的方法是（台盼蓝染色法）。
5．淋巴细胞转化情况的判定方法有（形态学方法）、（H—TdR掺入法）和（ MTI"检测法）。
6．淋巴细胞转化试验应用的同位素是（3 H ），细胞毒试验应用的同位素是（51Cr）7．分离外周血白细胞常用的方法是（自然沉降法）和（聚合物加速沉降法）。8．去除白细胞悬液中残留红细胞的常用方法有（无菌蒸馏水低渗裂解法）和（0．83％氯化铵处理法）。
9．去除单个核细胞悬液中单核细胞的常用方法有（黏附去除法）和（羰基铁粉吞噬去除法）。
10．检测T细胞数量的花环技术包括（E花环试验）（葡萄球菌花环法）和（抗体致
敏红细胞花环法）；检测B细胞数量的花环技术主要有（EA花环试验）和（EAC花环试验）。
11.淋巴细胞和单核细胞的密度为（1.077+0.001）。
12．外周血经Ficoll分离液离心后从上到下分为（血清）（PBMC ）（粒细胞、红细胞）层。
1．活化的TH1细胞产生的细胞因子主要有（IL2 ）（IFN）和（IL12 ），而TH2细胞主要产生的细胞因子为（IL4）（IL5）和（IL10）。
2.细胞因子常用的检测法包括（生物学检测法）（免疫学检测法）和（分子生物学检测法）。
3.ELISA 测定法测定细胞因子常用（双抗夹心法）。
1．补体参与的反应试验类型包括(免疫溶血试验)(补体结合试验)、(补体依赖的细胞毒验 )和(免疫黏附试验).
2．参与补体结合试验的试剂可分为(指示系统)和(反应系统)两个系统。
3．Ⅲ型变态反应疾病患者的血清中补体水平(降低)。
4．补体的最佳保存温度是(一20℃以下)。
5．CH50试验中有（绵羊红细胞)(溶血素 )和(人血清 )参与反应。
1．免疫球蛋白根据重链的不同可分为（IgM），(IgG ），（IgA），(IgE）和（IgD ）2．免疫固定电泳的特点是：（周期短）（敏感性高）(分辨清晰）（结果易于分析）3．Ig 中k/λ比率正常范围是（1.2～2.4）
1．肿瘤抗原可分为（肿瘤相关抗原）和（肿瘤特异性抗原）两类。
2．肿瘤标志物检测的临床意义，归纳起来有（早期普查）（肿瘤诊断）和（监测病情）等
3．肿瘤标志物的检测对临床某些肿瘤有重要辅助诊断价值，如：AFP可辅助诊断（肝癌）可辅助诊断（结肠癌）PSA可辅助诊断（前列腺癌）。
4．细胞免疫是抗肿瘤免疫的重要机制，参与抗肿瘤免疫的细胞主要有（T细胞 B细胞 NK 细胞树突状细胞 )等。
5．根据肿瘤抗原分布的范围，可将其分为（肿瘤特异性抗原）和(肿瘤相关抗原）两大类。
1．宿主抗移植物反应根据临床出现症状情况一般分为（超急性排斥），（急性排斥）和（慢性排斥）三类。
2. ( HLA)是不同个体间进行器官或组织移植时发生排斥反应的重要成分。
3. HLA三类分子中Ⅰ、Ⅱ类分子是能发生移植排斥反应的首要抗原尤其是（HLA-DR ）位点。
4. HLA-A、B、C和HLA-DQ、DR抗原采用( 补体依赖的微量细胞毒)试验检测
临床免疫学检验 1、免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。 3、中枢免疫器官：骨髓、胸腺；外周免疫器官：淋巴结、脾脏（最大）、黏膜相关淋巴组织 4、 B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导体液免疫；B细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（SmIg）、 Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟 B 细胞： CD19、CD20、 CD21、 CD22 （成熟 B 细胞的 mIg 主要为 mIgM和 mIgD）同时检测 CD5分子，可分为 B1 细胞和 B2 细胞。 B 细胞功能检测方法：溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。 5、T 细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是 CD3（多链糖蛋白）；辅助 T 细胞的标志是 CD4；杀伤 T 细胞的标志是 CD8； T 细胞受体 =TCR。 T 细胞和 NK细胞的共同表面标志是CD2（绵羊红细胞受体）； CD3＋ CD4＋CD8－ =辅助性T细胞（Th） CD3＋ CD4－CD8＋ =细胞毒性T 细胞（ Tc 或 CTL）（ T 细胞介导的细胞毒试验） CD4＋ CD25＋ =调节性T细胞（Tr或Treg） T 细胞功能检测：植物血凝素（ PHA）刀豆素（ CONA）刺激 T 细胞增殖。增殖试验有：形态 法、核素法。 T 细胞亚群的分离：亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法 *E 花环试验是通过检测SRBC受体而对T 细胞进行计数的一种试验； 6、 NK细胞：具有细胞介导的细胞毒作用。直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC）、 CD56。 测定人 NK细胞活性的靶细胞多用K562 细胞株，而测定小鼠胞株。NK细胞活性则常采 用 YAC-1 细 7、吞噬细胞包括：单核 - 吞噬细胞系统（MPS，表面标志外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。CD14，包括骨髓内的前单核细胞、（表达 MHCⅡ类分子） 8、人成熟树突状细胞（DC）（专职抗原呈递功能）：表面标志为CD1a、CD11c和CD83。 9、免疫球蛋白可分为分泌型（ sIg ，主要存在于体液中，具有抗体功能）及膜型（ mIg，作为抗原受体表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白） 10、免疫球蛋白按含量多少排序：IgG＞IgA＞IgM＞IgD＞IgE五类（按重链恒定区抗原性（CH）排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于恒定区（CH、CL） 12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上VH和 VL（高变区）是抗原结合部位。
临床血液学和血液学检查知识点 （一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清晰；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有汇集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞2/3~1/2，核染色质汇集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一种区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内布满粗大而均匀、排列紧密橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但经常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上具有排列零乱、大小不等数量不多紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷限度不超过假设直径一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，布满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及构造与中性晚幼粒相似；胞浆内布满橘红色、大小一致嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。 5. 杆状核粒细胞（stab granulocyte） ①中性杆状核粒细胞（neutrophilic stab granulocyte）：10~15μm，核凹陷限度超过假设直径一半，
抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。 抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强，它是在水溶液中两个疏水基团相互接触，由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。 亲和性（affinity）：是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位（AD）之间的结合强度，取决于两者空间结构的互补程度。 亲合力（avidity）：是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度，它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。 抗原抗体反应的特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。 带现象（zone phenomenon）：一种抗原-抗体反应的现象。在凝集反应或沉淀反应中，由于抗体过剩或抗原过剩，抗原与抗体结合但不能形成大的复合物，从而不出现肉眼可见的反应现象。抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。 免疫原（immunogen）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。免疫佐剂（immuno adjustvant）：简称佐剂，是指某些预先或与抗原同时注入体内，可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。 半抗原（hapten）：又称不完全抗原，是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性)，而单独不能诱导抗体产生（无免疫原性）的物质。当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。 载体（carrier）：结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。 载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原结合在同一载体上，才能使机体产生对半抗原的免疫应答，该现象称为~。 单克隆抗体（McAB）：将单个B细胞分离出来，加以增殖形成一个克隆群落，该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体，即~。 多克隆抗体（PcAb）：天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位，以该抗原物质刺激机体免疫系统，体内多个B细胞克隆被激活，产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白，即~ 基因工程抗体（GEAb）：是利用DNA重组及蛋白工程技术，从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配，经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。 杂交瘤技术 【原理】以聚乙二醇（PEG）为细胞融合剂，使免疫后能产生抗体的小鼠脾细胞与能在体外长期繁殖的小鼠骨髓瘤细胞融合产生杂交瘤细胞，通过次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷（HAT）选择性培养基的作用，只让融合成功的杂交瘤细胞生长，经反复的免疫学检测筛选和单个细胞培养（克隆化），最终获得机能产生所需单克隆抗体又能长期体外繁殖的杂交瘤细胞系。将这种细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，可从小鼠腹水中得到高效价的单克隆抗体。（一）小鼠骨髓瘤细胞 理想骨髓瘤细胞的条件：①细胞株稳定，易于传代培养；②细胞株本身不产生免疫球蛋白或细胞因子；③该细胞是HGPRT或TK的缺陷株；④能与B细胞融合成稳定的杂交瘤细胞； ⑤融合率高。 目前最常用的是NS-1和SP2/O细胞株 （二）免疫脾细胞
骨髓增殖性肿瘤（MPN）是以骨髓中分化成熟相对正常的一系或多系髓系（粒系、红系、巨核系）细胞持续异常增殖为特征的一组克隆性造血干细胞疾病。与MDS所见无效造血相反，增殖的细胞分化成熟相对正常。临床一般起病缓慢，有血细胞质和量的改变，肝、脾肿大，常并发出血、血栓及髓外造血。疾病进展到终末期，可出现骨髓纤维化、无效造血，或转化为急性白血病。 本组疾病中典型的4种，除了慢粒还包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症及原发性骨髓纤维化等。 一、原发性血小板增多症（ET） 是一种主要累及巨核细胞系的克隆性骨髓增殖性疾病，以血小板数持续增多，血栓形成和/或出血为特征。 【临床表现】 本病好发于50岁以上，多缓慢起病，部分病人发病时无症状，偶尔因发现血小板增多或脾大或手术后出血不止而确诊。多数病人有出血或血栓形成。出血以胃肠道、鼻出血较常见，皮肤、粘膜出血少见。血栓栓塞以指（趾）小血管、中枢神经血管和肢体血管栓塞为主。脾大见于多数病例，一般为轻到中度肿大，少数病人有肝肿大。 【检验】 （1）血象：血小板计数多在（1000～3000）×10^9/L。MPV增大，血小板比积明显增加。可见巨大型、小型及不规则血小板，常自发聚集成堆。可见巨核细胞碎片。白细胞计数多在（10～30）×10^9/L，偶可达（40～50）×10^9/L。分类以中性分叶核粒细胞为主，偶见幼粒细胞。 （2）骨髓象：有核细胞增生明显活跃，巨核细胞系统增生尤为突出，原始及幼稚巨核细胞的比例增高，部分病例可见到小巨核细胞。巨核细胞形态异常，核质发育不平衡，颗粒稀缺，空泡形成，核分叶过多，血小板生成增多。红细胞和粒细胞系统亦明显增生。 （3）血小板功能检查：多数患者主要表现为对二磷酸腺苷、肾上腺素诱发的血小板聚集功能减低，部分患者又有自发性血小板聚集性增高的现象。 【诊断】 WHO的ET诊断标准： 阳性标准：（1）血小板持续性>600×10^9/L；（2）骨髓活检主要为巨核细胞增生，胞体大而形态成熟的巨核细胞增多。
《临床血液学检验》课程教学大纲 [课程概述] 临床血液学检验是采用各种实验方法和技术分析研究血液和造血器官的病理变化，以阐明血液系统疾病的发生机制，用于造血系统疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察和预后监测的一门科学。血液学检验既属于血液学范畴，又是检验医学的一个分支，是检验医学的主干课程之一。近十年来，血液学基础理论研究随着实验手段的不断更新而迅速发展，而实验性很强的血液学，也越来越多的引进各种新的检验项目或赋予基础检验以新的评价。 作为一门理论与实践相结合的课程，临床血液学检验设置在检验医学专业必修课程中，其目的是使该专业的学生掌握血液学检验的基本理论、基本知识和基本技能，为今后临床工作打下坚实的基础。通过本课程的学习，要求学生能够掌握本门课程的基本理论知识，熟悉临床血液学相关基础知识；同时掌握血细胞的正常形态和常见血液病的检验方法及血液学特点，能对常见血液病作出初步诊断结论。 [课程目标] 设置本课程的具体目标是：临床血液学检验的任务是利用血细胞的检验技术，超微结构技术、病理学技术、生物化学技术、免疫学技术、分子遗传学技术、生物遗传工程、细胞生物学及分子生物学技术以及其他多种技术，对血液系统疾病和非血液系统疾病所致的血液学异常进行基础理论的研究和临床诊治的观察，从而促进血液学和临床血液学的发展和提高，推动了血液病学研究向更高层次迈进。学生需要经过基础医学、临床医学和实验医学的专门学习和培养，不仅要有熟练的实验医学技能，正确掌握各项有关血液病诊断和反映病情的实验；适应血液学的发展，建立有关新实验，还要有一定程度的基础医学和临床医学知识，为血液病做出诊断。 该课程共分四篇：造血细胞及其检验、红细胞疾病及其检验、白细胞疾病及其检验和血栓与止血及其检验。它是以血液学的理论为基础，以检验的实验方法为手段，以临床常见的血液病为主线，创建了一个理论-检验-疾病相结合、紧密联系的新体系，且在实践过程中不断发展、完善和提高。 [使用范围] 检验学专业，本科层次。
12、抗体由浆细胞产生。抗体分子上 VH 和VL （高变区）是抗原结合部位。 临床免疫学检验 免疫防御（对外）；免疫自稳（防自身免疫病）；免疫监视（防肿瘤）。 中枢免疫器官：骨髓、胸腺； 外周 免疫器官：淋巴结、 脾脏（最大 ）、黏膜相关淋巴组 B 细胞：通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原，介导 体液免疫;B 细胞受体=BCR=mIg 表面标志：膜免疫球蛋白（Smig ）、Fc 受体、补体受体、EB 病毒受体和小鼠红细胞受体。 成熟B 细胞：CD19 CD20 CD21 CD22 （成熟B 细胞的 mig 主要为mIgM 和mIgD ）同时检 测CD5分子，可分为B1细胞和B2细胞。 B 细胞功能检测方法： 溶血空斑形成试验（体液免疫功能）。 5、T 细胞：介导细胞免疫。共同表面标志是CD3（多链糖蛋白）；辅助T 细胞的标志是CD4; 杀伤T 细胞的标志是 CD8 T 细胞受体=TCR T 细胞和NK 细胞的共同表面标志是 CD2（绵羊红细胞受体）； CD 外CD4+ CD8-=辅助性T 细胞（Th ） CD 外CD4 CD8+ =细胞毒性T 细胞（Tc 或CTL ）（ T 细胞介导的细胞毒试验） CD 知CD25^ =调节性T 细胞（Tr 或Treg ） T 细胞功能检测：植物血凝素（PHA ）刀豆素（CONA 刺激T 细胞增殖。增殖试验有：形态 法、核素法。 T 细胞亚群的分离： 亲和板结合分离法，磁性微球分离法，荧光激活细胞分离仪分离法 *E 花环试验是通过检测SRBC 受体而对T 细胞进行计数的一种试验; 6、NK 细胞：具有细胞介导的 细胞毒作用。直接杀伤靶细胞（肿瘤细胞和病毒感染的细胞） 表面标志： CD16（ ADCC ）、 CD56。 测定人NK 细胞活性 的靶细胞多用 K562细胞株，而测定小鼠 NK 细胞活性则常采用 YAC-1细 胞株。 7、吞噬细胞包括：单核-吞噬细胞系统 （MPS 表面标志CD14包括骨髓内的前单核细胞、 外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞）和中性粒细胞。 （表达MH ffi 类分子） 8、人成熟树突状细胞 （DC （专职抗原呈递功能）： 表面标志为CD1a CD11C 和CD83 9、免疫球蛋白可分为分泌型（sig ，主要存在于体液中，具有 抗体功能）及膜型（mIg ，作 为抗原受体 表达于 B 细胞表面，称为膜表面免疫球蛋白） 10、免疫球蛋白按 含量多少排序：lgG > IgA > IgM > IgD > IgE 五类（按重链恒定区抗原性（CH 排序） 免疫球蛋白含量测定：单向环状免疫扩散法、免疫比浊法。 11、免疫球蛋白的同种型抗原决定簇位于 恒定区（ CH 、 CL ） 1、 免疫：是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能 2、 3、 4、
临床医学检验技术（中级)-临床免疫学和免疫学检验 (B1型题) 1、既具有抗原吞噬能力又有抗原提呈能力的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 2、既不表达HLA-Ⅰ类抗原又不表达HLA-Ⅱ类抗原的细胞是 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞 E.单核细胞 3、应用CDC方法检测HLA-DR抗原所使用的待测细胞为 A.纯化的T细胞 B.纯化的B细胞 C.纯化的红细胞 D.外周血单个核细胞
E.单核细胞 4、PHA刺激法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 5、免疫比浊法可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 6、流式细胞仪可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验
7、细胞毒试验可用于 A.测定Tc细胞的效应功能 B.IgG测定 C.可溶性细胞因子测定 D.T细胞亚群测定 E.淋巴细胞转化试验 8、测定抗体生成细胞数 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 9、测定T细胞数量 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验
10、测定NK细胞的杀伤活性 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 11、测定非特异性细胞免疫功能 A.免疫印迹法 B.细胞毒试验 C.反向溶血空斑试验 D.E花结试验 E.PHA淋巴细胞转化试验 12、白血病儿童从骨髓库中得到别人捐献的骨髓，属 A.自体移植 B.同种移植 C.异种移植 D.同系移植 E.胚胎组织移植 13、试验性将猪心移植给猴，属
1. 造血：造血器官生成各种血细胞的过程。能够生成并支持造血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为造血器官。 2. 胚胎期造血分为：中胚叶造血、肝脏造血和骨髓造血；出生后的造血分为:骨髓造血和淋巴造血。 3. 髓外造血（EH ）：正常情况下，胎儿出生2个月后骨髓以外的组织如肝、脾、淋巴结等不再制造红细胞、粒细胞和血小板，但在某些病理情况下，如骨髓纤维化、骨髓增生性疾病及某些恶性贫血时，这些组织又可重新恢复其造血功能，称为髓外造血。 4. 造血微环境（HIM ）：由骨髓基质细胞、微血管、神经和基质细胞分泌的细胞因子构成，是造血干细胞生存的场所。 5. 造血干细胞（HSC ）：由胚胎干细胞发育而来，具有高度自我更新能力和多向分化能力，在造血组织中含量极少，形态难以辨认的类似小淋巴细胞样的一群异质性的细胞群体。 6. CFU-S ：能形成脾结节的干细胞称脾集落形成单位。 7. 造血祖细胞（HPC ）：是指一类由造血干细胞分化而来，但部分或全部失去了自我更新能力的过渡性、增殖性细胞群。 也称为造血定向干细胞。 8. 骨髓间质干细胞（MSC ）：是一种成体干细胞，具有多向分化潜能和高度自我更新能力等干细胞的共性，可在不同环境中分化成不同种类的细胞，如成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞和血管内皮细胞。 9. 细胞凋亡：是细胞死亡的一种生理形式，是调控机体发育、维护内环境稳定、由基因控制的细胞自主的有序死亡，又称为程序性细胞死亡。 10. 无效造血：幼红细胞在骨髓内分裂成熟过程中发生的“原位溶血”，或红细胞进入循环后很快被破坏，称无效造血。 11. 原始粒细胞：胞体直径10-20 微米，圆形或类圆形，胞核较大，圆形或类圆形，居中或略偏位，约占细胞的2/3，核染色质呈细粒状染淡紫红色，排列均匀，平坦如一层薄纱，无浓集，核膜较模糊，核仁2-5 个，较小，清楚，胞质量少，呈水粉画蓝色，绕于核周，一般无颗粒。 12 早幼粒细胞：胞体直径12-25 微米，比原始粒细胞大，园形或椭园形。胞核大，圆形或椭圆形，居中或偏位，核染色质开始聚集，比原始粒细胞粗糙，核仁清晰可见、模糊或消失。胞质量较多，呈淡蓝、蓝或深蓝色，有时在核凹陷处可见淡染或无色区域称初浆。胞质内含有大小、形态、多少不一的紫红色非特异性颗粒，分布不均。 14. 中幼粒细胞：胞体直径10-20 微米，圆形。胞核椭圆形或一侧开始扁平可能出现凹陷，其核凹陷程度与假设圆形和直径之比常小于1/2，核常偏于一侧，占细胞的2/3-1/2，染色质聚集呈索块状，核仁消失。胞质量多，染淡红偏淡蓝色，浆内含中等量细小、大小较一致分布密集的特异性颗粒，呈淡红色或淡紫红色，常在近核处先出现。特异性颗粒和非特异性颗粒可同时存在。 15. 晚幼粒细胞：胞体直径10-16 微米，圆形。胞核明显凹陷呈肾形、马蹄形、半月形，但其核凹现程度一般不超过核假设直径的一半或核凹陷程度与假设圆形核直径之比为1/2~3/4,核常偏于一侧，核染色质粗糙，呈小块状，排列更紧密，出现副染色质，核仁消失。胞质量多，充满特异性颗粒 16. 杆状核粒细胞：胞体直径10-15 微米，圆形，胞核凹陷程度超过核假设直径的一半，横径最窄处大于最宽处的1/3 以上，形态弯曲呈带状、粗细均匀，也可见核呈S”、”U”、”E”型，核染色质粗糙呈块状，核两端钝圆，核仁消失。胞 质量多，充满特异性颗粒 17. 分叶核粒细胞：胞体直径10-14 微米，圆形，胞核分叶状，叶与叶之间有细丝相连或完全断开，或原始粒细胞者虽未断开，但有明显的切迹，核常分2-5 个叶，核染色质浓集或呈较多小块，胞质量较多，充满特异性颗粒。 18. 原始红细胞：胞体直径15-25 微米圆形或椭圆形，边缘常有钝角状或瘤状突起。胞核圆形或椭圆形，占细胞直径的 4/5，居中或略偏位，染色质呈颗粒状，较原始粒细胞粗而密，核仁1-3 个，大小不一,边界不清。胞浆量少，绕于核周，呈深蓝色浓稠不透明，有油画蓝感，近核周围染色较淡，称核周带，呈鱼肚白色。 19. 早幼红细胞：胞体直径15-20 微米，圆形或椭圆形，边缘可有钝角状或瘤状突起，胞核圆形或椭圆形，占细胞直径的2/3 以上，居中或略偏位，核染色质可浓集成粗密的小块，核仁模糊或消失。胞质量较多，呈深蓝色浓稠不透明，其蓝色较原始红细胞深，有油画蓝感，近核周围染色较淡，称核周带，呈鱼肚白色。 20. 中幼红细胞：胞体直径8-15 微米，圆形。胞核圆形，居中，占细胞的1/2，核染色质聚集成索块状或团块状，核染色质呈紫红色，副染色质明显，有碎墨样感，核仁消失。核质量多，胞浆内血红蛋白生成逐渐增多，嗜碱性物质逐渐减少，由于血红蛋白量的不同，胞浆呈嗜多色性。 21. 晚幼红细胞：胞体直径7-10 微米，圆形，胞核圆形，占细胞的1/2 以下，居中或偏位，核染色质聚集成数个紫黑色团块或凝缩成炭块。胞浆量多，呈浅灰色或浅红色。 22..网织红细胞为晚幼红细胞刚脱核向成熟红细胞过渡的中间分化阶段，仍属未成熟红细胞，用煌焦油蓝做活体染色时，可在细胞内看到网状、线状、颗粒状网织结构 23. 红细胞平均直径为7.2 微米，呈双凹圆盘状，无核
智慧树知到《临床免疫学检验技术》章节测试答案第一章 1、免疫球蛋白的分类依据是： A.轻链恒定区 B.重链恒定区 C.轻链可变区 D.重链可变区 E.铰链区 正确答案：重链恒定区 2、IgG的补体结合位点位于： A.VH和VL B.CH1和CL C.CH2 D.CH3 E.CH4 正确答案：CH2 3、各种抗体单体分子共有的特性是： A.与靶细胞结合后能介导ADCC作用 B.具有两个完全相同的抗原结合部位 C.轻链与重链以非共价键结合 D.与抗原结合后能激活补体 E.与颗粒性抗原结合后能介导调理作用
正确答案：具有两个完全相同的抗原结合部位 4、以下哪种技术极大提高了免疫学检测的特异性？ A.标记技术； B.单克隆抗体技术； C.计算机技术； D.分子生物学技术； E.细胞培养技术。 正确答案：标记技术； 5、最早用于标记免疫测定的标记物是 A.荧光素 B.放射性核素 C.酶 D.化学放光物质 E.胶体金 正确答案：荧光素 6、抗体的基本单位是： A.由2条不同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 B.由1条重链和1条轻链组成的二肽链结构 C.由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构 D.由2条相同重链和2条不同轻链组成的多肽链结构 E.由4条相同的肽链组成的四肽链结构 正确答案：由2条相同的重链和2条相同的轻链组成的四肽链结构
7、木瓜蛋白酶能将抗体水解成： A.Fab和Fc B.F(ab’)2和Fc C.Fab和pFc’ D.Fab’和pFc’ E.F(ab’)2和pFc’ 正确答案：Fab和Fc 8、抗体中与抗原表位互补结合的部位： A.仅重链可变区 B.仅轻链可变区 C.重链恒定区 D.轻链恒定区 E.重链和轻链的高变区 正确答案：重链和轻链的高变区 9、血清中含量最高的抗体是： A.IgG B.IgM C.IgA D.IgD E.IgE 正确答案：IgG 10、机体再次免疫应答的主要抗体是：
简述抗原抗体反应的原理。 答：抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性，这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的，它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合简述抗原抗体反应的类型。 答：抗原抗体反应分为五种类型：①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应；②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应；③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应；④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应；⑤免疫标记的抗原抗体反应等。 影响抗原抗体反应的环境条件有哪些?在实验中如何控制这些条件因素? 答：环境条件包括：电解质，酸碱度和温度。稳定条件：①电解质：常用O．85％氯化钠或各种缓冲液作抗原及抗体的稀释液及反应液；②酸碱度：pH过高或过低都将影响抗原与抗体的理化性质，抗原抗体反应一般在pH为6～8时进行；③温度：一般以15，40℃为宜，最佳反应温度为37℃。 简述单克隆抗体制备技术的主要步骤。 单克隆抗体是应用B细胞杂交瘤技术进行制备的，其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。 试述免疫血清应如何进行纯化。 免疫血清的纯化主要是指提纯免疫血清中的IgG并去除无关的杂抗体。提纯IgG类抗体的方法有：硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法，采用亲和层析法提取IgG时，可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白A交联sephamse 4B制成层析柱。另外，还可通过吸附法获得单价特异性抗血清。方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂，以吸附免疫血清中的杂抗体，或将杂抗原交联于sephamse 4B上，通过亲和层析去除杂抗体。 叙述杂交瘤技术的基本原理。 杂交瘤技术是在细胞融合技术的基础上，将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。这种杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，即既能够分泌抗体又能在体外长期繁殖，经过克隆化后成为单个细胞克隆，分泌的抗体即为单克隆抗体。 简述间接血凝试验的基本原理。 间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞，与相应抗体(或抗原)作用，在有电解质存在的条件下，经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞凝集现象，又称被动血凝试验 简述抗人球蛋白试验的原理(又称Coombs试验)、类型及其在临床上的应用。 Coombs试验又称抗人球蛋白试验，其原理是不完全抗体多半是7S的IgG类抗体，能与相应的抗原牢固结合，但在一般条件下不出现可见反应，利用抗球蛋白抗体作为第二抗体，连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，可使红细胞凝集。 Coombs试验有二种类型：(1)直接Coombs试验：用于检测红细胞结合的不完全抗体。(2)间接Coombs试验：用于检测血清中游离的不完全抗体。 抗球蛋白试验主要应用于那些方面？ ①输血：对于“危险”受体（指曾经输血、肌肉注射过血液制品或母子间血型不合的妊娠而可能产生免疫性血型抗体的人）的配血试验必须包括各种不完全抗体的检查，以抗球蛋白法最为可靠。②血型抗原抗体的检查：主要检查Rh—者，其体内是否有抗-D抗体，应用抗球蛋白试验对外表为D 阴性的供体血液作常规检查。最可靠和灵敏的方法是将待检D 阴性的红细胞与高效价的不完全抗-D 血清混合，然后加抗球蛋白血清检查细胞上有无致敏抗体。③对新生儿溶血性贫血性疾病的诊断：母体产生的最常见的免疫性抗体为Rh 抗体和ABO 抗体，一般为7S 的IgG，可通过胎盘屏障，作用于胎儿红细胞，引起新生儿溶血性疾病，可借抗球蛋白试验检出而采取预防性措施。④对溶血性贫血的研究：获得性溶血性贫血患者大多数可借助该方法证实有自身红细胞的抗体存在。⑤对细菌或立克次体的不完全抗体的检查。Coombs 试验还可采用专一性特异性的抗球蛋白的血清，如抗IgG 血清、抗IgM、抗IgA以及抗补体血清等，分析结合于红细胞上的不完全抗体免疫球蛋白的亚类。 什么是协同凝集试验？主要用于何种检测？ 协同凝集试验与间接凝集反应的原理相类似，但所用的载体为金黄色葡萄球菌。这种细菌的细胞壁中含
临床血液学检验考试题 姓名：学号：班级： 一、单项选择题 A型题（每题1分，共10分） 1、带3蛋白是红细胞膜中含量最多的一种（D） A、锚蛋白 B、收缩蛋白 C、肌动蛋白 D、跨膜糖蛋白E肌球蛋白 2、影响DNA合成的常见因素（ E ） A、丙酮酸激酶缺乏 B 、铁缺乏 C 、维生素C缺乏 D 、微量元素缺乏E、叶酸和维生素B12(vitamin B12)缺乏 3、早期诊断缺铁性贫血的主要指标是（ A ） ` A、血清铁蛋白降低 B 、血清铁降低 C 、转铁蛋白饱和度降低 D 、总铁结合力升高 E 、铁粒幼细胞增多 4、PAS染色对下列哪项最有意义: （A） A、巨贫与红血病的鉴别 B、急淋与急非淋的鉴别 C、PNH与再障的鉴别 D、外周血象检查 E、以上均不正确 5、活化蛋白C可灭活下列哪些因子（C） A、因子Ⅹa、Ⅺa B、因子Ⅶa、Ⅹa C、因子Ⅴa、Ⅷa D、因子Ⅹa、Ⅸa E、AT、HCⅡ 6、关于NAP的临床意义，哪项是错误的（ C ） A、慢性粒细胞白血病时NAP活性降低，而类白血病反应时则增强 B、{ C、化脓性感染时NAP活性增加，而病毒感染时则无变化 D、急性淋巴细胞白血病时NAP活性降低，而急性粒细胞白血病时则增强 E、慢性粒细胞白血病患者急性变时NAP活性增强 F、再生障碍性贫血患者NAP活性增强，PNH时则降低 7、下列哪项符合血管外溶血的实验室指标（ B ） A、血浆中出现高铁血红素 B、血浆血红素结合蛋白下降 C、尿中含铁血黄素试验阴性 D、尿中出现游离血红蛋白 E、血浆游离血红蛋白增高 8、急性粒细胞白血病与急性淋巴细胞白血病的鉴别依据是（D） A、巨核细胞受抑、血小板减少 B、原始细胞形态差别显著 C、骨髓增生明显活跃 [ D、POX染色 E、胞质中可见Auer小体 9、由可溶性纤维蛋白单体形成交联性纤维蛋白的过程中，参与的凝血因子有（ C ） A、因子ⅩⅢ B、因子ⅩⅢa C、因子ⅩⅢa 、Ca2+ D、因子Ⅹ E、因子Ⅹa、Ca2+ 10、下列检查哪项改变与溶血无关（ B ）
（一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞的2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清楚；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有聚集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一的紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞的2/3~1/2，核染色质聚集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一个区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷程度不超过假设直径的一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，充满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及结构与中性晚幼粒相似；胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。 5. 杆状核粒细胞（stab granulocyte） ①中性杆状核粒细胞（neutrophilic stab granulocyte）：10~15μm，核凹陷程度超过假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1/3以上，呈带状弯曲，核染色质粗糙呈块状；胞浆充满中性颗粒。 ②嗜酸性杆状核粒细胞（eosinophilic stab granulocyte）：11~16μm，核与中性杆状相似；浆内充满嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性杆状核粒细胞（basophilic stab granulocyte）：10~12μm，核呈模糊杆状；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性颗粒。 6. 分叶核粒细胞（segmented granulocyte） ①中性分叶核粒细胞（neutrophilic segmented granulocyte）：10~14μm，核呈分叶状，叶与叶之间有细丝相连或全断开，常分2~5叶，核染色质已浓集呈粗的小块状，染深紫红色；胞浆丰富，内含淡红色均匀细小颗粒。
免疫学简介 一、免疫学概念与免疫应答 免疫应答过程：抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以及产生一系列的免疫效应分子 免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段 1、识别阶段：是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报及相关淋巴细胞的阶段 2、活化阶段：是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后，在一系列免疫分子的参与下，发生活化、增值、分化的阶段。B细胞接受抗原信息分化为浆细胞，T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞 3、效应阶段：是浆细胞分泌特异性抗体，执行体液免疫功能。T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子，T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。另外有少量T、B细胞在增值分化后，不直接执行效应功能，而成为记忆细胞 免疫应答效应多为生理性，是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应 二、免疫组织与器官 免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成 免疫器官按功能不同，分为中枢免疫器官和外周免疫器官。中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所，由骨髓和胸腺组成；外周免疫器官是免疫应答的场所，有淋巴结、脾及扁桃体等组成。单核细胞核淋巴细胞经血液循环及淋巴循环进出于外周淋巴组织及淋巴器官，形成机体免疫系统的免疫网络。 （一）中枢免疫器官 1、骨髓 2、胸腺：是一级淋巴上皮组织，是T细胞发育的重要中枢器官，胸腺由胸腺基质细胞（TSC）和胸腺细胞组成。 （二）外周免疫器官及组织 1、淋巴结：分为皮质区及髓质区。皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。淋巴结的中心是髓质区，由淋巴索和淋巴窦组成，淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞，包括B 细胞、浆细胞、T细胞及巨噬细胞 淋巴结主要功能：是共淋巴细胞栖息和增值的场所；是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地；是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站 2、脾：是富含血管的最大外周淋巴器官。 3、黏膜伴随的淋巴组织：有B细胞、T细胞、浆细胞及巨噬细胞，受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答，使B淋巴细胞活化分化为浆细胞，产多种Ig类别的看那个题，其中最主要的是IgA及分泌型IgA，执行体液免疫及局部特异免疫作用 （三）淋巴细胞再循环与归巢 三、免疫细胞 （一）淋巴细胞：是免疫系统的主要细胞，包括T细胞、B细胞核NK细胞 1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。 （1）、T细胞受体（TCR）：是T细胞特有的表面标志，可表达于所有的成熟T细胞表面。T细胞识别抗原和转导信号是由TCR特异识别MHC分子递呈的抗原肽，CD3分子转导T 细胞活化的第一信号，TCR与CD3分子通过盐桥结合形成稳定的复合物，TCR识别抗原的这一特点构成MHC限制性的基础 （2）簇分化抗原（CD）：是区分T淋巴细胞的重要标志，T细胞发育不同阶段的亚群存在
【血液学检验】知识点整理 （一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞的2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清楚；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有聚集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一的紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞的2/3~1/2，核染色质聚集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一个区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷程度不超过假设直径的一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，充满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及结构与中性晚幼粒相似；胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；胞浆内及核上分布有少量嗜碱性非特异颗粒。 5. 杆状核粒细胞（stab granulocyte） ①中性杆状核粒细胞（neutrophilic stab granulocyte）：10~15μm，核凹陷程度超过假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1/3以上，呈带状弯曲，核染色质粗糙呈块状；胞浆充满中性颗粒。 ②嗜酸性杆状核粒细胞（eosinophilic stab granulocyte）：11~16μm，核与中性杆状相似；浆内充满嗜酸性颗粒。
《临床血液学和血液学检验》 实验指导 （供医学检验专业五年制本科使用） 遵义医学院医学检验系组编 2005年12月
第一章血细胞形态（示教） 概念：是指血细胞经瑞氏染色后在光学显微镜下的形态特征。 第一节血细胞多媒体示教2学时 了解：初步认识各种血细胞外形及核的形态、胞浆着色情况、核染色质结构的不同点。 第二节正常血细胞形态（显微镜下示教）4学时 了解：初步认识粒细胞系、红细胞系、淋巴细胞系、单核细胞系、浆细胞系、巨核细胞系的各阶段细胞形态学特征，并画出每一台显微镜下的细胞图像。 （一）粒细胞系统 1. 原始粒细胞（myeloblast）：10~18μm，胞体圆或类圆形，核占细胞的2/3以上，居中或略偏位，核染色质呈细颗粒状排列均匀，核仁2~5个、较小、清楚；胞浆量少，染天蓝色，有透明感，无颗粒。 2. 早幼粒细胞（promyelocyte）：12~20μm，较原粒细胞大，核染色质较原粒细胞粗糙，染色质颗粒开始有聚集，核仁可见或消失；胞浆染淡蓝色、蓝色或深蓝色，含大小不等、形态不一的紫红色颗粒（即非特异性颗粒）。 3.中幼粒细胞（myelocyte） ①中性中幼粒（neutrophilic myelocyte）：10~18μm，胞核椭圆形或一侧开始扁平，可有凹陷，其凹陷处约占细胞的2/3~1/2，核染色质聚集呈索块状，核仁隐约可见或消失；胞浆量多，染淡红或少数区域略偏蓝，含大小一致的红色颗粒、即特异性颗粒（致少有一个区域）。 ②嗜酸性中幼粒（eosinophilic）：15~20μm：核与中性中幼粒相似；胞浆内充满粗大而均匀、排列紧密的橘红色特异性嗜酸性颗粒。 ③嗜碱性中幼粒（basphilic）：10~15μm，核圆形或椭圆形、但常常轮廓不清，核染色质较模糊；胞浆内及核上含有排列零乱、大小不等数量不多的紫黑色嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞（metamyelocyte） ①中性晚幼粒（neutropilic metamyelocyte）：10~16μm，核明显凹陷呈肾形，马蹄形，半月形，但其核凹陷程度不超过假设直径的一半，核染色质粗糙，排列更紧密，无核仁；胞浆量多，浅红色，充满中性特异性颗粒。 ②嗜酸性晚幼粒（eosinophilic metamyelocyte）：10~16μm，核形及结构与中性晚幼粒相似；胞浆内充满橘红色的、大小一致的嗜酸性特异性颗粒。 ③嗜碱性晚幼粒（basophilic metamyelocyte）：10~14μm，核固缩呈肾形，轮廓模糊；
脑脊液部分 脑脊液（CSF）：是存在于脑室、蛛网膜下腔和脊髓中央管中的无色透明液体。主要由脑室脉络丛主动分泌。 作用：①缓冲、减轻或消除外力对脑组织和脊髓的损伤；②调节颅内压；③供给中枢神经系统营养物质，并运走代谢产物；④调节神经系统碱储量，维持脑脊液pH在7.31~7.34；⑤转运生物胺类物质，参与神经内分泌调节。 【参考值】 健康人脑脊液总量约120ml~180ml，约占体液总量的1.5% 颜色 正常无色透明。新生儿由于胆红素移行，可呈黄色。当中枢系统有炎症、损伤、肿瘤或梗阻时，破坏了血脑屏障，使成分发生改变，而导致其颜色发生变化。 （1）红色：常见于各种原因的出血，特别是穿刺损伤的出血、蛛网膜下隙或脑室出血。 除此以外，脑脊液中黄色素、胡萝卜素、黑色素、脂色素增高时，也可使脑脊液呈黄色。 （2）黄色：脑脊液黄色称为黄变症，可由出血、黄疸、淤滞、梗阻等引起。 ①出血性黄变症：见于陈旧性蛛网膜下隙出血或脑出血，由于红细胞释放出血红蛋白，胆红素增加。出血4～8h后脑脊液即可呈黄色，48h颜色最深，并可持续21d左右。 ②黄疸性黄变症：见于重症黄疸性肝炎、肝硬化、钩端螺旋体病、胆管梗阻、新生儿溶血症等，由于脑脊液中胆红素增高，而使其呈黄色。 ③淤滞性黄变症：由于颅内静脉、脑脊液循环淤滞时，红细胞从毛细血管内渗出，导致脑脊液中胆红素增高，从而使脑脊液呈黄色。 ④梗阻性黄变症：见于髓外肿瘤等所致的椎管梗阻，导致脑脊液中蛋白质含量显著增高。当蛋白质超过1.5g/L时，可使脑脊液呈黄色。黄色的程度与脑脊液蛋白质含量呈正比，且梗阻部位越低，黄色越明显。 （3）白色：多因脑脊液中白细胞增多所致，常见于脑膜炎奈瑟氏菌、肺炎链球菌、溶血性链球菌引起的化脓性脑膜炎。 （4）绿色：多见于铜绿假单胞菌性、急性肺炎双球菌性脑膜炎。