作者：章培标，侯宜，侯立中，曲福军，周余来，颜炜群，杨同书【摘要】目的观察无血清培养中不同钙离子浓度对皮肤角质形成细胞(Kc)增殖与分化的影响，为角质形成细胞的体外扩增和人工表皮形成提供依据。方法取第二代新生兔背皮肤角质形成细胞，按0.5×104/cm2细胞密度接种于含不同浓度CaCl2角质形成细胞培养液的96孔板中，培养1周，每日观察细胞生长情况，至第7日以MTT法检测OD值。结果当CaCl2浓度低于5mg/L时，细胞贴壁增殖缓慢，甚至无法贴壁；浓度为12.5mg/L 时Kc呈单层快速生长，并能保持较好的表型，是体外Kc培养扩增的最适钙离子浓度；当CaCl2的浓度达到25mg/L时，Kc形成复层，集落中央出现大量分化程度较高的角化细胞和角化物，周边仍存在增殖能力较强的单层Kc，逐渐向四周扩展。随着Ca2＋浓度的增高，细胞角化程度也随之增高。结论 Ca2+浓度对体外培养的Kc贴壁、增殖、分化等不同阶段产生影响，通过控制无血清培养液中Ca2+浓度可以调控Kc的增殖和分化。【关键词】钙离子角质形成细胞分化人工皮肤组织工程 Calcium is one of the key factors adjusting proliferation and differentiation of epidermal keratinocytes cultured in vitro 【Abstract】 Objective To explore the effects of calcium at different levels on proliferation and differentiation of epidermal keratinocytes cultured in serum free medium in vitro' which is the base of tissue engineering skin.Methods Second passage epidermal keratinocytes of neonatal rabbits were seeded into 96-poles plate according to the cell density of 0.5×104/cm2'and cultured with serum free medium contained different levels of CaCl2 for 1 week.The cultured keratinocytes were observed' and identified with immunohistochemical test. Then' MTT test was used to detect the relative growth ratios(RGR) of keratinocytes cultured in K-SFM with different levels ofcalcium.Results The results showed that keratinocytes grown slowly in K-SFM at the level of 5mg/L CaCl2.As the concentration of CaCl2 was 12.5mg/L' keratinocytes grown rapidly in mono-layer keeping its well phenotype. When it grown up to the level of 25mg/L' keratinocytes became stratum and differentiated apparently.Conclusion It is suggested that calcium is one of important factors to decide the growth' differentiation of epidermalkeratinocytes. Two suitable concentrations of calcium could be used to culture keratinocytes and artificial epidermis of tissue engineering in vitro respectively.[!--empirenews.page--] 【Key words】 calcium keratinocyte serum free culture artificial skin tissue engineering 1 材料与方法 1.1 试剂 K-SFM(GIBCO，不含钙，其完全培养液按说明书添加CaCl2)，大豆胰酶抑制剂(SIGMA)，CaCl2(分析纯，国产)，硫酸链霉素（SIGMA），角蛋白免疫组化试剂盒（武汉博士德公司），MTT（SIGMA），DMSO（AMRESCO），胰蛋白酶(HYCLONE)，中性蛋白酶（SIGMA）。 1.2 设备器材超净工作台(国产)，二氧化碳培养箱(SANYO)，倒置生物显微镜(OLYMPUS)，酶联免疫检测仪（国产），塑料培养板（皿）（Nunc）。
1.3 实验动物日本大耳白兔，来自长春208医院动物部。 1.4 实验方法 1.4.1 Kc的分离培养取新生兔背部皮肤，Kc的分离、培养和传代方法及角蛋白(广谱)ABC免疫组化鉴定按文献［1］进行。 1.4.2 Ca2+浓度对Kc增殖分化的影响 (1)取第二代Kc，D-Hank’s离心洗3次后，以不含Ca2+的K-SFM制成细胞悬液，按0.5×104细胞数/孔接种于96孔板，同时添加20μl不同浓度CaCl2，CaCl2终浓度分别为0、
2.5、5、12.5、25、50、100、200、400mg/L，均在36℃ 5%CO2条件下培养1周，每日观察细胞生长情况，1周时以MTT法检测OD值。(2)取第二代Kc'按1×104细胞数/孔接种于6孔板内盖玻片上，以含12.5mg/L CaCl2的K-SFM 培养1周后，实验组更换为25.0mg/L CaCl2的K-SFM继续培养，待Kc形成复层后再换成无钙K-SFM进行培养，观察Kc的生长情况及形态变化并做角蛋白(广谱)ABC免疫组化染色分析。
2 结果与讨论无血清培养液中Ca2＋的浓度对Kc的生长分化极为重要。培养液中Ca2+浓度
可影响Kc的增殖分化，其浓度不同，Kc生长状态也不同［2］。在低Ca2+浓度（0.1mM）条件下，培养的Kc可不形成细胞间连接而迅速扩增，而通过增加胞外Ca2+浓度（1.2～2.0mM），可诱导发生多种变化，包括形成复层、桥粒和黏着连接［3，4］。钙是细胞分化过程的一个首要条件，尤其是复层及桥粒的形成和聚集。同时，也是鳞状细胞分化中表皮谷氨酰胺转移酶激活的前提。低浓度Ca2+（0.05～0.1mM）下，体外培养的人Kc不能集聚桥粒，也不能出现复层，即使退出细胞周期并且仍然合成外皮蛋白和桥粒蛋白［5］。通过增加钙浓度到生理水平（1.2mM），Kc在24h内即可形成复层［6，7］。因此，可以通过控制Ca2＋浓度实现控制Kc的增殖与分化。体外成功构建组织工程人工皮肤，首先需要获得大量的具有增殖能力的Kc。因此，Kc的培养阶段应尽可能保持细胞表型，延缓其分化。传统的含血清培养方法，通常在合成培养基中添加10%～20%的胎牛血清，而血清中的Ca2+含量足可以加速Kc分化，减少传代次数［1］。无血清培养方法其营养组分稳定、清晰可控，通过在无钙的K-SFM中根据需要添加不同浓度的CaCl2可以实现调控Kc的增殖与分化。本研究结果表明，Ca2+浓度可对体外培养的Kc贴壁、增殖、分化等不同阶段产生影响。当CaCl2浓度低于5mg/L时，细胞贴壁增殖缓慢，甚至无法贴壁。12.5mg/L CaCl2即可保证细胞的生长增殖，在此浓度下Kc 呈单层生长，能较好地保持表型，是体外Kc培养扩增的最适钙离子浓度。当Ca2＋的浓度为25mg/L时，Kc形成复层，集落中央出现大量分化程度较高的角化细胞和角化物，但周边仍存在增殖能力较强的单层Kc，逐渐向四周扩展。同时，随着Ca2＋的浓度增高，细胞角化程度也随之增高，见图1～5。形成复层的Kc，换成无钙的K-SFM后2天，上层角化细胞脱落，转变为单层生长。文献报道［8］，完全融合后的正常Kc和转化Kc以K-SFM继续培养，细胞不能持续生长，不能形成复层细胞结构，也无法形成Kc膜片。通过在K-SFM中添加1.8mmol/L Ca2+可发生进一步的细胞分化、形成复层和完整的Kc膜片。提示无血清培养液中选择合适的钙离子浓度对体外Kc的扩增和组织工程人工皮肤的构建具有重要意义。
高三生物二轮复习练习——细胞增殖与分化 1．细胞周期包括G1期、S期、G2期和M期。抑素是细胞释放的、能抑制细胞分裂的物质，主要作用于细施周期的G2期。M期细胞的细胞质中含有一种促进染色质凝集为染色体的物质。下列有关叙述正确的是 A．S期时间较长的细胞更适合做“观察细胞有丝分裂”实验的材料 B．如果缺少氨基酸的供应，动物细胞一般会停留在细胞周期的S期 C．抑素抑制DNA复制所需蛋白质的合成，阴断细胞分裂 D．M期细胞与G1期细胞融合，可能不和于G1期细胞核中的DNA表达 2．关于豌豆细胞有丝分裂过程中相关细胞器作用的叙述，正确的是A．在间期，核糖体上合成DNA聚合酶B．在前期，由中心粒发出纺锤丝形成纺锤体 C．在中期，线粒体为DNA的复制提供能量D．在末期，高尔基体与赤道面形成有关 3．细胞周期的运转是十分有序的，是基因有序表达的结果。基因的有序 表达，使
进行有丝分裂的细胞按G1－S－G2－M时期的顺序周而复始地进行。 下图显示周期中的某种生理变化与其对应时期的关系，其中表示正确的是B 4．用32P标记了玉米体细胞（含20条染色体）的DNA分子双链，再将这些细胞转入不含32P的培养基中培养，在第二次细胞分裂的中期、后期，一个细胞中的染色体总条数和被32P标记的染色体条数分别是 A．中期20和20、后期40和20 B．中期20和10、后期40和20 C．中期20和20、后期40和10 D．中期20和10、后期 40和10 5．某种植物细胞减数分裂过程中几个特定时期的显微照片如下。下列叙述正确的是 A．图甲中，细胞的同源染色体之间发生了基因重组
B．图乙中，移向细胞两极的染色体组成相同 C．图丙中，染色体的复制正在进行，着丝点尚未分裂 D．图丁中，细胞的同源染色体分离，染色体数目减半 6．某动物体细胞基因型为AaX B X b， 甲图为该生物体细胞的细胞周期示意图， 乙图为该生物产生的一个卵细胞，不考虑 基因突变。下列说法错误的是 A．图甲中的④时期会出现染色体数目加倍的现象 B．完整减数分裂周期可用①→②→③→④表示 C．图乙中细胞产生过程中可能发生了交叉互换 D．与图乙中细胞同时形成的极体基因型可能是aX B X b 7．某生物的一个精原细胞经减数分裂后形成的其中一个精细胞如图所示。下列解释不正确的是 A．减数第一次分裂中发生了同源染色体的交叉互换 B．通过减数分裂形成的4个精细胞中有两个基因型为Aa C．该变异类型属于染色体结构变异 D．减数第一次分裂中这对同源染色体没有分离 8．一个基因型为AaBb的细胞（基因A和a，B和b分别位于两对同源染色体上），当进入有丝分裂后期时，两对基因随染色体移向细胞
Ca2+在细胞内的生理作用摘要：本文主要介绍Ca2+的一些作用，钙是人体内最重要的元素之一，参与 一切生命活动过程，维系着细胞的生理功能。钙主要是以离子形式发挥作用，其作用方式类似于激素的第二信使，因此有人称之为“生物学信使”。血浆中的钙离子浓度虽比细胞内高千倍以上，但比起骨骼和其他组织来说，还是很少的。但它存在于身体各部分，是调节体内钙浓度的重要因素之一。就是这些钙离子，通过平衡细胞内钙离子水平，在细胞中发挥着重要的作用。它维持了神经、肌肉、凝血机制，并在神经介质和激素的释放等生理功能方面发挥着重要作用，与细胞的受精等作用也有着密切关系。 一Ca2+与突触前神经递质的释放和突触后整合作用 当神经冲动抵达神经末稍时，末梢产生动作电位和离子转移，钙离子由细胞膜外进入膜内，使一定数量的小泡与突触前膜贴紧、融合起来，然后小泡与突触前膜粘合处出现破裂口，小泡内递质和其他内容物就释放到突触间隙内。在这一过程中钙离子的转移很重要。如果减少细胞外钙离子的浓度，即细胞膜内外的钙离子浓度差下降，则神经递质释放就要受到抑制，而增加细胞外钙离子的浓度差，则递质释放就增加。所以，钙离子由膜外进入膜内数量的多少，是直接关系到递质释放量的。钙离子是小泡膜与突触前膜贴紧融合的必要因素。钙离子有两方面作用：一方面是降低轴浆的粘度，有利于小泡移动；另一方面是消除突触前膜内的负电位，便于小泡和突触前膜接触而发生融合。 神经递质释放后，穿过突触间隙，激活突触后受体，这是突触后整合作用的第一步。整合作用的一部分经由亲离子受体的开放产生电位变化直接总合而发生在质膜水平；而另一部分额外的、重要的突触后整合作用通过信号级联发生在细胞内，这些信号级联控制着多种代谢过程和生物合成过程，进而调节长时程神经元反应，如调节突触强度、神经元兴奋性和调控蛋白质合成，Ca+在所有这些过程中所扮演的至关重要的作用。和控制膜通道的许多依赖Ca2+的信号、长时程突触可塑性及基因表达都被详细描述过。ER在信息的突触后处理过程中有特殊的作用，因为ER是个通用的、发信号的细胞器，能够把新产生的信号和正在进行的细胞进程进行整合，如将蛋白质合成及翻译后修饰和多种分子的细胞内转运进行整合。依赖于内膜Ca2+的兴奋性，ER密切参与在高度极化的神经细胞的末梢远端突触后部位产生的信号传递。这个ER参与的信号传播对突触活性与基因表达之间的偶联尤为重要。 二Ca2+与血液凝固 凝血开始到形成凝血酶之前为止，是由内源性和外源性两个系统组成。内源性（血液的内在性）凝血机制，为血液的单独过程。血液与异物表面（血管壁的胶原纤维等）接触时，所谓接触因子的第XII因子和第XI因子就被激活，当第VI因子被激活后，它再使无活性的第IX因子活化。另一方面，血小板也在异物表面上粘着、凝集，并引起血小板变性（viscous me－tamorphosis）释放血小板第III因子。紧接着血浆中第VIII因子和钙离子与这些有活性的第XI因子和血小板第III因子发生反应，把无活性的第X因子激活。第V因子再和血小板
钙离子在调控细胞凋亡和细胞迁移中的作 用综述 中国农业大学植生071 薛永铭0702040118 摘要钙离子对生命活动具有重要作用。本文集中讨论钙离子在细胞凋亡与迁移的调控中所扮演的重要角色。亚细胞区室内钙离子分布的微妙变化可以有效地正调控或负调控细胞凋亡，这是钙离子参与四条信号通路来调控细胞凋亡的基础。程和平教授研究组最近发现钙闪烁在细胞定向迁移中的作用，对细胞迁移的研究有重要作用。 关键词钙离子信号通路细胞凋亡Caspase（半胱天冬酶）细胞迁移钙闪烁 一、钙离子对生命活动具有重要作用。 钙离子对多项生命活动具有重要作用。在动物生理的教科书中对其主要生理功能进行了总结： 1.钙离子是凝血因子，参与凝血过程； 2.参与肌肉（包括骨骼肌、平滑肌）收缩过程（内质网内钙库的释放）； 3.参与神经递质合成与释放、激素合成与分泌； 4.是骨骼构成的重要物质。 这些重要生理功能已经有了几十年的研究基础，然而近些年的研究却揭示了钙离子在细胞凋亡与迁移的调控中所扮演的重要角色，使人们得以钙离子的生理功能，所以我认为集中笔墨将这两个方面进行介绍也是很有意义的。 二、钙离子参与四条主要的凋亡信号通路。 长期研究表明，亚细胞区室内钙离子分布的微妙变化可以有效地正调控或负调控细胞凋亡，因此钙离子扮演着细胞生存的捍卫者或是无情的死刑执行者的双重角色。近年来，研究者发现并总结出了引起哺乳动物细胞凋亡的四条信号通路：外部
通路（死亡受体通路）、内部通路（线粒体通路）、依赖Caspase-2的通路、不依赖于Caspase的通路（GrA介导通路）。四条通路图示见图1。 图1 引发哺乳动物细胞凋亡的四条信号通路。（引自Sten Orrenius et al., 2003）1.钙离子与死亡受体通路 死亡受体（DR）通路是目前研究最多最清楚的凋亡诱导机制。死亡受体包括Fas、TRAILR2、TRAILR1等，都属于肿瘤坏死因子受体超家族。以Fas为例，Fas 触发的凋亡机制是通过升高钙离子浓度来实现的。钙结合蛋白对内质网腔内钙离子变化非常敏感，与Fas结合后使钙离子内流，启动细胞凋亡，激活Caspase-8。在I 型细胞中，Caspase-8激活Caspase-3，而Caspase-3是细胞凋亡的直接执行者之一；在II型细胞中，Caspase-8剪切Bid蛋白，而后依赖线粒体通路诱导凋亡。 2.钙离子与线粒体通路 线粒体是胞内重要的钙库，内质网与线粒体之间的钙离子交流对细胞命运有深刻地影响。在一些刺激作用下，内质网将其储存的钙离子释放，然后线粒体摄取钙离子，引起钙离子超载，导致线粒体的损伤。线粒体的损伤会导致细胞色素c的释放，引发凋亡体（apoptosome）的形成，apoptosome激活Caspase-9，Caspase-9又激活了细胞凋亡的直接执行者Caspase-3，诱导了细胞凋亡。线粒体通透孔的开放使
体外刺激淋巴细胞增殖试验 1 样品配制 精确称取样品于灭过菌的eppendorf管中，用无菌的PBS配制成浓度5mg/mL 的样品液。充分溶解然后以15000g离心30min，无菌条件下将上清转移至新的无菌eppendorf管中，将样品稀释成所需浓度待用。 2 小鼠淋巴细胞的制备 选取8-10周龄，体重22±1g的Balb c或C57BL/6小鼠颈椎脱臼处死，取脾脏，用PBS冲洗3~4次。将脾脏磨碎后过100目筛，过筛后的混悬液以400g/min 离心6min。吸去上清液，沉淀中按每只小鼠1.5mL的量加入氯化铵红细胞裂解液，反复冲打，静置10min后，加PBS至50mL，然后以400g/min离心6min，吸去上清液，加PBS缓冲液冲洗并离心2遍后，吸去上清，加入RPMI1640培养基（含双抗及10％胎牛血清）混匀，用细胞计数仪计数并稀释成2×106个/mL细胞液备用。 3 细胞培养 将2×106个/mL淋巴细胞悬浮液加至96孔板中，每孔加180μL，同时加入20μL样品液，以20μL PBS和20μL 60μg/mL的PHA溶液分别作阴、阳性对照。于37℃、含5%的CO 条件下培养3d，加入相应试剂测定 2 4 淋巴细胞增殖率的测定 4.1 Alamarblue试剂测定法 在上述细胞培养的96孔板中，每孔分别加入20μL Alamar Blue试剂，再培养，加Alamar Blue试剂前及变色后分别用ELISA自动读板仪测定570nm和600nm处的吸光度，然后根据Alamar Blue试剂的公式计算各种样品对淋巴细胞增殖率。计算公式为： 增殖率(%)=[117216×Aλ570(sample)-80586×Aλ600(sample)] /[117216×Aλ570(control)-80586×Aλ600(control)]×100% 4.2 MTT法测定 4.2.1 MTT 溶液的配制方法 称取MTT 0.5g溶于100 ml的磷酸缓冲液（PBS）中，用0.22μm滤膜过滤分装，－20℃避光保存。在配制和保存的过程中容器最好用铝箔纸包住。在用酶标仪检测结果的时候为了保证实验结果的线性，MTT吸光度最好在0-0.7 范围
用荧光测定法，通过测定荧光强度来反映细胞中的钙离子浓度是目前普遍采用的细胞内钙离子检测方法。根据激发光的波长不同，可以将检测细胞内钙离子用的荧光染料分为紫外光激发的钙离子荧光指示剂和可见光激发的钙离子荧光指示剂。其中，紫外光激发的钙离子荧光指示剂有Fura 2、lndo-1、Bis-fura、Ouin-2、Fura-4 F、Fura-5F、Fura-6F、Benzothiaza-1、Benzoth． Iaza-2、BTC等；可见光激发的钙离子荧光指示剂有FIno-3、Fluo-4、Fluo-5N、Rhod-5N、X-rhod-5N 、Calcium Green-1 、Calcium Green-2、Calcium Orange、Calcium Crimson、Fura Red等。Fluo-3具有Kd值较高、可见光激发、监测背景低等优点，被广泛用于荧光监测的指示剂[9]。Fluo-3/AM在与钙结合后表现为荧光强度的增加，细胞内钙离子浓度愈高，荧光愈强，细胞内钙离子浓度愈低，荧光愈弱[10]。以往测定细胞内钙离子浓度变化的方法通常是利用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)来完成，但缺点是LSCM扫描采集速度慢，对培养器皿要求特殊，且价格高昂，检测成本高，对细胞伤害大。为降低长时间采集对样品造成的损伤，作者应用高灵敏度的流式细胞仪和流式细胞技术相结合，以纯化的T淋巴细胞为研究对象，选择Fluo-3/AM负载细胞，成功获得了实时监测并分析受到外界信号刺激时细胞内Ca2+ 浓度的动态变化。结果显示随着刺激信号的加入和时间的变化，Fluo-3/AM负载的T淋巴细胞内的钙离子浓度呈现动态变化。该方法能简单快速、可直接动态实时检测细胞内钙离子荧光信号，为研究细胞内的Ca2+浓度的动态变化提供了实用的解决方案和方法。 水母发光蛋白（ＡＥＱ）广泛应用于Ｃａ２＋信号监测领域己有近４０年。ＡＥＱ是由一个２２ＫＤａ大小的可结合Ｃａ２＋的脱辅基发光蛋白和辅基腔肠素（ＣＴＺ）组成的，在有
第九章细胞增殖与分化的分子机制?细胞的增殖（proliferation）与分化（differentiation）是生物体整个生命活 动中的两个重要事件，与生物体的生长、发育、衰老以及疾病密切相关。 第一节细胞增殖的分子基础 ?（一）概念: ?细胞增殖（cellproliferation）：指细胞通过生长和分裂使细胞数目增加，子细胞获得和母细胞相同遗传特性的过程，是细胞生命活动的重要体现。 ?生物体生长包括细胞数目增多、细胞体积增大和细胞外基质的合成。细胞的增多就是细胞增殖的过程。 ?(二）细胞增殖的意义： ?1、生命的延续、繁衍依靠细胞增殖。 ?低等的单细胞生物依靠细胞增殖分裂繁殖，高等生物依靠细胞减数分裂产生生殖细胞。 ?2、生物体生长发育依赖细胞增殖。 ?3、补充生命活动中衰老和死亡的细胞。 ?4、创伤的修复。 ?（三）细胞增殖的方式 ?无丝分裂：没有纺锤体形成，无核膜核仁的消失和重建。 ?减数分裂：有性生殖中生殖细胞形成过程中发生，连续两次分裂DNA只复制一次。?有丝分裂：有纺锤丝形成，细胞核先分裂再发生胞质分裂，是真核细胞的主要增殖方式。 二、细胞周期 ?细胞周期（cellcycle）：是指细胞从上一次分裂结束开始到下一次分裂结束为止所经历的整个过程。 细胞周期的划分 ?一个细胞周期可以分为间期（interphase）和分裂期（metaphaseM期）两个大阶段。 ?间期可以分为G1期、S期和G2期。 ?细胞周期各期主要特征 ?G1期：从有丝分裂完成到DNA复制之前的一段时期。特点：大量RNA和蛋白质合成，蛋白质磷酸化，细胞膜转运功能加强。 ?G1期的后期细胞的自身监控机制可以根据内外环境是否适于细胞增殖而决定是否进入下一阶段S期。这一特定时期在酵母细胞中称为起始点，哺乳动物细胞中称为限制点（R点）。 ?如环境适于细胞增殖则进入S期，不适合细胞增殖则细胞可能延迟通过G1期或者进入休眠状态。进入休眠状态的细胞蛋白质合成急剧下降（仅有正常的20%），这期细胞。 种细胞称为G
第二章细胞的增殖和分化 1、（了解）细胞周期 定义：连续分裂的细胞从一次分裂结束到下次分裂结束所经历的整个过程。 不同生物或同一生物不同种类的细胞，细胞周期长短不一。 2、（理解）动、植物细胞有丝分裂的过程、各时期分裂图 3、（理解）动、植物细胞有丝分裂异同及意义
细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。细胞有丝分裂的重要意义（特征），是将亲代细胞的染色体经过复制以后，精确地平均分配到两个子细胞中去，因而在生物的亲代和子代间保持了遗传性状的稳定性，对生物的遗传具重要意义。 4、（理解）“观察细胞的有丝分裂：目的要求、材料用具、方法步骤、实验现象和结果、讨论 5、（理解）“制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片”：目的要求、材料用具、方法步骤、实验现象和结果、讨论(见课本) 6、（理解）细胞分化的概念和生物学意义 特点：分化是一种持久的、稳定的渐变过程。 细胞分化的意义：一般多细胞生物体的发育起点是一个细胞（受精卵），细胞的分裂只能繁殖出许多相同的细胞，只有经过细胞分化才能形成胚胎、幼体，并发育成成体，细胞分化是生物个体发育的基础。细胞分化使多细胞生物体中的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。 细胞分化的实例：如根尖的分生区细胞不断分裂、分化，形成成熟区的输导组织细胞、薄壁组织细胞、根毛细胞等；胚珠发育成种子，子房发育成果实；受精卵发育成蝌蚪，再发育成青蛙；骨髓造血；皮肤再生等都包涵着细胞的分化。 细胞分化过程：细胞通过有丝分裂数量越来越多，这些细胞又逐渐向不同个方向变化 定义：在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态，结构和生理功能上发生稳定性差异的过程。 实质：基因选择性表达的结果 7、（了解）癌细胞的主要特征 （1）能够无限增殖。（2）癌细胞的形态结构发生了变化。（3）癌细胞的表面也发生了变化。癌细胞表面的糖蛋白减少, 细胞彼此之间黏着性减小，导致在有机体内容易分散和转移。8、（理解）细胞发生癌变的原因 （1）内因：人体细胞内有原癌基因和抑癌基因 （2）外因：①物理致癌因子；②化学致癌因子；③病毒致癌因子。 恶性肿瘤的防治：远离致癌因子。做到早发现早治疗 9、（理解）细胞的全能性 （1）概念：已经分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能 （2）体细胞具有全能性的原因 由于体细胞一般是通过有丝分裂增殖而来的，一般已分化的细胞都有一整套和受精卵相同的DNA分子，因此，分化的细胞具有发育成完整新个体的潜能。 （3）全能性大小：受精卵>生殖细胞>体细胞 （4）植物细胞全能性高度分化的植物细胞仍然具有全能性。
细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod-2，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定细胞线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞（动物、人体等）内线粒体钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。 技术背景 钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calcium fluorophosphate apatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexed calcium）和离子钙（ionized calcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscular excitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的A TP产量达到细胞需求，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flame photometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要线粒体纯化。Rhod-2，罗丹明123（rhodamine 123）的衍生产物，一种与钙离子结合产生荧光，同时其正电荷特性，特异性地聚集在线粒体里，由此用于测定线粒体内钙离子水平。在荧光分光光度仪下，激发波长550nm，散发波长590nm，来定量测定线粒体的钙浓度。 产品内容 清理液（Reagent A）40毫升 染色液（Reagent B）30微升 介导液（Reagent C）600微升 饱和液（Reagent D）2毫升 阴性液（Reagent E）2毫升 产品说明书1份 保存方式 保存染色液（Reagent B）和介导液（Reagent C）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月 用户自备 1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器 细胞培养箱：用于染色孵育 黑色96孔板：用于样品操作的容器
细胞的增殖与分化集团文件发布号：（9816-UATWW-MWUB-WUNN-INNUL-DQQTY-
细胞增殖与分化 1．什么是细胞周期 指连续分裂的细胞从上一次分裂结束到下一次分裂结束所经历的整个过程。由分裂间期和分裂期组成。间期历时长，在前，分为G1期（主要是蛋白质合成，核糖体增生）S期（主要发生DNA的复制）和G2期（主要发生有丝分裂所必需的一些蛋白质的合成）；分裂期（M期）在后，历时较短，人为分为前中后末四个时期。 2．有丝分裂的过程、特征和意义分别是什么 有丝分裂的过程及特征：
有丝分裂的意义：亲代细胞内的染色体经过复制后，平均分配到两个子细胞中，从而使细胞的亲代与子代之间保持遗传性抓观念的稳定性3．动植物细胞有丝分裂的主要不同 4．核DNA、染色体、每条染色体上DNA含量变化曲线 5．什么是细胞分化本质特点意义 细胞分化：细胞的后代在形态结构、功能上发生差异的过程。 本质：基因在特定时间和空间条件下有选择的表达（同一个体的不同细胞遗传物质是相同的） 特点：持久性；稳定性；普遍性 意义：使多细胞生物体的细胞趋于专门化，有利于提高各种生理功能的功率，生物个体发育就是通过细胞分化来实现。 6．细胞的全能性含义动植物举例比较与分化程度的关系同一生物体内全能性的比较 细胞的全能性：已分化的细胞仍具有发育成完整个体的能力 植物细胞的全能性：eg：组织培养脱分化再分化
（外植体——愈伤组织——胚状体——完整植株） 动物细胞核的全能性：eg：核移植 与分化程度的关系：细胞全能性高低与分化程度负相关，分化程度越大，全能性越低 同一生物体内全能性比较：受精卵＞生殖细胞＞体细胞 7．细胞的凋亡与衰老 细胞凋亡：原因：细胞凋亡是一种编程性细胞死亡，是由某种基因引发的，属于正常生命现象。例如：蝌蚪的尾和鳃的消失，人神经细胞数量的调整。 细胞衰老特征：（1）细胞内多种酶的活性降低；（2）细胞呼吸变慢 （3）随细胞年龄增大，线粒体数量减少，体积增大 （4）细胞核体积增大、核膜不断向内折叠等 8．细胞的癌变 含义：由于受到致癌因素的作用，变成不受控制而无限增殖的恶性增殖细胞 特征：（1）有无限增殖的能力（2）能在体内转移，与正常细胞相比，癌细胞表面的粘连蛋白很少或缺失 致癌因素：各种射线，许多种无机或有机化合物，许多种病毒等9．对比细胞的凋亡、衰老与癌变
虿袃羂膃螁蚆芁膂蒁 细胞分化细胞分化示意图目录第2节细胞的分化 在个体发育中，由一个或一种细胞增殖产生的后代，在形态结构和生理功能上发生安定性的差异的过程称为细胞分化（cellulardifferentiation）。细胞分化是一种持久性的变化，细胞分化不仅发生在胚胎发育中，而是在一生都进行着，以补充朽迈和死亡的细胞．如：多能造血干细胞分化为例外血细胞的细胞分化过程。大凡来说，分化了的细胞将一直保持分化后的状态，直到死亡。 导言 也可以说，细胞分化是同一来源的细胞逐渐发生各自特有的形态结构、生理功能和生化特征的过程。其结果是在空间上细胞之间出现差异，在时间上同一细胞和它以前的状态有所例外。细胞分化是从化学分化到形态、功能分化的过程。 从分子水平看，细胞分化意味着各种细胞内合成了例外的专一蛋白质（如水晶体细胞合成晶体蛋白，红细胞合成血红蛋白，肌细胞合成肌动蛋白和肌球蛋白等），而专一蛋白质的合成是通过细胞内一定基因在一定的时期的选择性表达实现的。因此，基因调控是细胞分化的核心问题。特点 正常情况下，细胞分化是安定、不可逆的。一旦细胞受到某种刺激发生变化，开始向某一方向分化后，即使引起变化的刺激不再存在，分化仍能进行，并可通过细胞分裂不断继续下去。 胚胎细胞在显示特有的形态结构、生理功能和生化特征之前，需要经历一个称作决定的阶段。在这一阶段中，细胞虽然还没有显示出特定的形态特征，但是内部已经发生了向这一方向分化的特定变化。细胞在整个生命进程中,在胚胎期分化达到最大限度. 细胞决定的早晚，因动物及组织的例外而有差异，但大凡情况下都是渐进的过程。例如，在两栖类，把神经胚早期的体节从正常部位移植到同一胚胎的腹部还可改变分化的方向，不形成肌肉而形成肾管及红细胞等。但是到神经胚晚期移植体节，就不能改变体节分化的方向。
第一章细胞的增殖与分化 §4-1 细胞的增殖 一.细胞增殖的意义 单细胞生物:通过细胞增殖而繁殖后代 多细胞生物:补充衰老、死亡的细胞 是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础 二.细胞增殖方式————细胞分裂 生殖细胞 细胞 体细胞 有丝分裂：是真核生物体细胞增殖的主要方式 减数分裂：与真核生物产生生殖细胞有关 三.有丝分裂： （一）细胞周期 1、定义：连续分裂的细胞从一次分裂结束到下次分裂结束所经历的整个过程。 2. 有丝分裂需要 3、不同生物或同一生物不同种类的细胞，细胞周期长短不一。 （二）有丝分裂的过程
（三）有丝分裂过程 前期：膜仁消失现两体中期：形定数清赤道齐后期：粒裂数加均两极末期：两消两现重开始(四)有丝分裂过程中染色体、DNA、染色单体的变化规律 （五）有丝分裂的特点和意义 特点：⑴（间期）染色体复制一次⑵（分裂期）染色体平均分配 结果：亲、子代细胞染色体数目保持恒定 意义：保证了子细胞能得到和母细胞一样的一套遗传物质，从而保证了遗传性状的稳定性
§4-2 细胞的分化 一、细胞分化 （一）概念：由一个或一种细胞增殖产生的后代,在形态、结构和功能上发生稳定性差异的过程。 （二）细胞分化的结果：形成不同的细胞和组织 （三）特点：持久性、稳定性、不可逆性 （四）意义：细胞分化是生物个体发育的基础，细胞分化使多细胞生物体中的细胞趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率 二．细胞的全能性 1.概念：已分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能 2.原因：生物体每个细胞都含有该物种特有的全套遗传物质，都有发育成个体的全部遗传信息 3.全能性的表现： 条件：离体 高低：分化程度越高的细 胞全能性越低 细胞的癌变 一）癌细胞：在某些致癌因素的作用下，有的细胞变得不受控制而无限增殖，这种细胞就是癌细胞。二）癌细胞的特点及癌变原因：
活细胞内钙离子浓度 的检测
钙离子—第二信使 钙离子在信号传导通路中发挥第二信使作用。 在细胞收缩、运动、分泌和分裂等重要活动中，均需要钙离子的参与及调节。 钙离子的信使作用是通过其浓度的升高或降低来实现的。 细胞内游离钙离子的浓度是10-8---10-7M，比细胞外钙离子浓度低104---105倍，当细胞受到特异性信号刺激后，细胞内钙库（内质网、肌浆网）的钙通道或质膜上的钙通道开放，使细胞内钙离子浓度快速升高，产生钙信号，进而使细胞内某些酶的活性和蛋白质功能发生改变，产生细胞效应。
荧光钙离子测定技术发展简史 荧光钙离子浓度测定中常用的指示剂 荧光钙离子测定常用仪器 荧光钙离子测定的原理及具体方法
荧光钙离子测定技术发展简史 In 1920s 许多学者开始着手进行钙离子浓度的测定许多学者开始着手进行钙离子浓度的测定。。 1962年，Shimomura 等首次分离出水母蛋白作为钙激活蛋白检测Ca 2+浓度浓度，，但其发光高峰较相应生理过程出现慢但其发光高峰较相应生理过程出现慢，，且分子量大且分子量大，，通过细胞膜及在胞浆内扩散的能力较差浆内扩散的能力较差，，难于反映细胞内Ca 2+浓度的动态变化浓度的动态变化。。 1967年Ross 使用离子选择性微电极直接测定细胞内Ca 2+水平水平，，该方法简便该方法简便，，但反应时间长但反应时间长，，只能测定静息状态下的Ca 2+水平水平。。 70年代用砷偶氮年代用砷偶氮ⅢⅢ（aresenazo Ⅲ）染色染色，，可定量分析钙离子变化可定量分析钙离子变化，，但用微注射技术将染料注入细胞内注射技术将染料注入细胞内，，故只能测大细胞的Ca 2+变化变化。。
第四章细胞的增殖和分化 第一节细胞的增殖 浙江省定海第一中学赵生、刘敏敏 一、教学目标 【知识目标】 1、说出什么是细胞周期。 2、描述分裂间期细胞的主要特点。 3、描述分裂期细胞不同阶段的主要特点，概述有丝分裂的主要特征。 4、制作植物细胞的有丝分裂装片，观察动植物细胞的有丝分裂过程。 【能力目标】 1、通过有丝分裂实验中熟练使用显微镜，装片的制作过程培养学生的动手能力及绘生物图的能力。 2、通过对动植物细胞有丝分裂过程比较，培养学生比较、类比推理等思维能力。 3、通过细胞周期内染色体变化图像的观察，培养学生视图、分析、判断能力。并使学生掌握从图像、文字、数字三方面三位一体地去理解有丝分裂的学习方法。 【情感态度与价值观】 1、通过细胞有丝分裂过程中染色体变化特点的学习，使学生客观地认识生命现象，建立科学的世界观。增强学生用辩证唯物主义观点去认识生命现象的意识。 2、通过实验、观察、讨论、绘图等一系列活动，使学生养成严谨求实的科学态度，培养勇于探索新知识的精神。 二、教材分析 【教材的地位作用】 本节教材的内容主要涉及有丝分裂。在介绍了细胞周期的概念和分裂间期后，教材安排了“观察细胞的有丝分裂”永久装片活动，使学生对细胞有丝分裂过程有一定的感性认识，并提出相应的问题。在此基础上，教材重点阐述了动、植物细胞有丝分裂的过程和意义。最后通过“观察植物细胞的有丝分裂”的活动，巩固所学的有丝分裂知识，体会人们研究细胞有丝分裂过程的方法和手段，培养熟练制作植物细胞有丝分裂临时装片的技能。 细胞增殖是细胞生命历程的重要阶段。作为生物体的重要生命特征，是生物体生长、发育、繁殖的基础。有丝分裂的内容是学习减数分裂、配子生成和融合、合子发育的重要基础，也是学习DNA复制及遗传信息传递的重要基础。同时对培养学生的动手能力，使学生树立宏观与微观相统一、结构与功能相适应的观念起重要作用。 【教学重点难点】 1、教学重点：有丝分裂的过程和意义、活动“观察植物细胞有丝分裂”。 通过教材的地位作用的分析可知有丝分裂知识的重要性。而细胞周期是学生正确理解和记忆有丝分裂过程的桥梁和保证，因此学生掌握细胞周期的概念是学好有丝分裂的关键之一。有丝分裂中染色体的行为变化是重中之重，因为有丝分裂过程中染色体的复制和平均分配的规律性变化是有丝分裂的本质性特征，体现了有丝分裂在生物遗传中的意义。 观察植物细胞有丝分裂的实验是学完有丝分裂过程后的验证性实验，通过该实验有利于
钙在细胞内、外的分布相差较大,细胞外液钙离子浓度约为1～3毫摩尔/升,而细胞内胞浆钙离子的浓度约为0、1毫摩尔/升。正常情况下,人体内血清总钙量相当恒定,为2、25～2、75毫摩尔/升,儿童稍高,常外于上限。其中大多数钙以骨盐形式存在于骨骼里。骨骼中钙的含量约占人体总钙量的99%,仅有1%左右分布于各种软组织中,在细胞外液(其中血液占细胞外液的20%,软组织的细胞间液占细胞外液的80%)中的钙含量仅占体内总钙量的0、1%,约1克左右钙就是人体所不可或缺的营养素之一, 钙离子就是机体的必需元素,参与细胞的多种生理活动。对维持细胞各种代谢过程极为重要。 它维持了神经、肌肉、骨骼、凝血机制、肾与呼吸功能,并在神经介质与激素的释放、氨基酸的摄取与结合、维生素的吸收等生理功能方面发挥着重要作用,与细胞的纤毛运动、阿米巴运动、白细胞的吞噬作用、细胞分裂、受精等作用也有着密切关系。图中概括了细胞中钙离子与身体功能的关系。 血钙离子浓度就是通过神经调节及体液调节保持稳定,通过骨钙,与血钙间的转化保持平衡, 正常情况下,钙在各组织的代谢过程中,主要受副甲养腺激素的调节,还受到甲状腺素、肾上腺皮质激素、男女性腺激素雄激素与雌激素的影响。钙的平衡就就是这些激素作用于钙代谢的结果。钙代谢的变化也能影响激素的活动变化,钙代谢的最终目的就就是使血钙与骨钙保持稳定与平衡。骨钙一般相对稳定,而血钙的波动较大因此,钙的调节实际上就就是血钙浓度的调节,钙的调节机能就就是使血钙保持平衡。钙的调节机能有三个环节。 第一个环节:肾脏就是血钙调节的重要器官。当胃肠道吸收大量的钙时,血钙浓度可暂时升高。这时肾的过滤钙就增加,肾脏对钙的吸收减少,尿钙明显增加。然后血钙又逐渐下降到正
细胞内外钙浓度的调节及意义 [日期：2007-12-13] 来源：桂林中学校园网作者：毛 敏 [字体：大中小] 摘要：在正常生理状态下，细胞膜内外钙浓度相差高达1万倍左右。维持如此大的浓度梯度，主要靠细胞膜对Ca2+极低的通透性、钙亲合蛋白的缓冲以及依赖质膜两侧钙泵，Na+-Ca2+交换系统将Ca2+主动排除，或通过细胞内Ca2+库摄取于贮存Ca2+。细胞内游离钙离子浓度的升高可能触发肌肉收缩、递质释放、激素分泌等生理过程，甚至引起细胞死亡，神经细胞老化等。 关键词：细胞钙离子钙泵 正常细胞中，细胞膜内游离的Ca2+浓度约为0?.1umol/L~1.0umol/L,细胞外钙离子浓度比细胞内钙离子浓度高1 万倍，约为1.5 m mol/L。 一、细胞内Ca2+浓度调节机理 细胞膜构成了Ca2+流动的屏障，同时也是细胞功能调节的基础。正常细胞中。膜内Ca2浓度比膜外Ca2+浓度低1万倍左右，这并不等于说细胞内缺少Ca2+，事实上某些细胞器，如：线粒体、内质网和突轴小泡能摄取和贮存Ca2+，其中线粒体是细胞内最重要的钙库之一。另外，细胞内还有一些钙结合到带负电的脂和蛋白上，当细胞受刺激时，细胞外及细胞器中的Ca2+都可能被动的进入细胞质，使游离钙浓度升至1~10 umol/L，从而引起一定的生理反应。 细胞内Ca2+浓度升高，主要由于Ca2+按浓度梯度通过Ca2+通道进入细胞的结果。膜系统上的Ca2+通道可以是电压依赖的，也可以是激动剂依赖的，前者主要在肌肉和神经细胞中起作用。电压依赖的钙通道常有三种类型： L-型，长程型：需要较强的去激化刺激才能开放，失活也慢； T-型，瞬时型：较弱的去激化电压即能使通道开放，但失活也快； N-型，需要较强的去激化电压，失活快。 此外，神经元细胞上还存在一种P-型钙通道，需要较强电压激活，失活也慢。激动剂依赖型的钙通道，也称受体操纵性钙通道，主要通过激动剂与质膜上特点受体结合后，启动通道开放，使细胞外钙进入细胞内，或使细胞器钙库释放，使细胞内游离Ca2+上升。 细胞内Ca2+的排出是由另一类细胞功能蛋白——Ca2+泵来完成的。Ca2+泵逆浓度梯度将Ca2+排到细胞外或使其进入细胞内贮存库中。细胞膜上还有另一类不直接与ATP水解偶联的Ca2+主动传递，就是Na+/Ca2+交换体系，它是利用细胞膜两侧Na+浓度梯度通过Na+ -Ca2+交换将Ca2+排到细胞外。 可见，Ca2+在细胞内外保持动态平衡，依赖四个主要系统维持： 1、电压依赖性钙通道； 2、受体或神经递质操控的钙通道； 3、钙泵； 4、细胞内第二信使（1、4、5三磷酸肌酸IP3）内在机制。 二、钙在细胞中的作用 Ca2+对细胞膜的兴奋性是不可缺少的。当细胞内游离的Ca2+从静息水平的10-8M上升时，则肌体的分泌、收缩、通道门控和其他过程都处于活动之中。钙离子具有胞内信使作用。胞外钙离子是胞内钙离子的主要来源。钙通道开放时，胞外Ca2+浓度的上升，可关闭电压依赖性通道，增加静息膜阻抗，从而也增加了
B细胞慢性淋巴增殖性疾病诊断与鉴别诊断中国专家共识（完整版） 一、概述 B细胞慢性淋巴增殖性疾病（B-CLPD）是一组累及外周血和骨髓的成熟B细胞克隆增殖性疾病，其诊断与鉴别诊断一直是临床工作中的难点。自《中国B细胞慢性淋巴增殖性疾病诊断专家共识（2014年版）》[1]发布以来，B-CLPD一些亚型的诊断更加细化，WHO更新的造血与淋巴组织肿瘤分类已发表[2,3,4]，中华医学会血液学分会与中国抗癌协会血液肿瘤专业委员会、中国慢性淋巴细胞白血病工作组组织国内相关的血液肿瘤学与血液病理学专家经过多次讨论，对这一共识进行了更新修订，以符合临床实际需求。 （一）定义 本共识所指B-CLPD是临床上以外周血/骨髓成熟B细胞克隆性增殖为主要特征，并通过外周血/骨髓的形态学、免疫表型及细胞/分子遗传学检测可以诊断的一组成熟B淋巴增殖性疾病（表1）。 表1 B细胞慢性淋巴增殖性疾病
（二）B-CLPD共同特征 1．临床特征： 中老年发病；临床进展缓慢，多数呈惰性病程[大多套细胞淋巴瘤（MCL）及B-幼稚淋巴细胞白血病（B-PLL）除外]；可向侵袭性淋巴瘤转化；治疗后可缓解，但难以治愈。 2．形态学： 以小到中等大小的成熟淋巴细胞为主，部分可见核仁。 3．免疫表型： 表达成熟B细胞相关抗原（CD19、CD20、CD22）和表面免疫球蛋白（sIg）单一轻链（κ或λ）。 4．基因重排： 存在免疫球蛋白重链（IgH）和（或）轻链（IgL）基因重排。 二、各主要B-CLPD的临床特征 （一）慢性淋巴细胞白血病（CLL）/小淋巴细胞淋巴瘤（SLL）CLL/SLL为最常见的B-CLPD，以小淋巴细胞在外周血、骨髓、脾脏和淋巴结聚集为特征。中位发病年龄60~75岁，男女比例为2∶1。2016 WHO分型规定CLL诊断标准之一为外周血单克隆B淋巴细胞≥5×109/L，如果没有髓外病变，在B淋巴细胞<5×109/L时即使存在血细胞减少或疾病相关症状也不诊断CLL；2008年国际CLL工作组则明确规定，外周血B淋巴细胞<5×109/L，如存在CLL细胞浸润骨髓所致的血细胞减少时诊断为CLL[4,5,6]。国内绝大多数专家也认为这种情况在排除其他原因导致的血细胞减少后，其临床意义及治疗同CLL，因此应诊断为CLL。SLL指
细胞的增殖与分化 (201509) 7?下列关于细胞生命活动的叙述，正确的是 A. 癌细胞容易转移 B.植物细胞不具有全能性 C.衰老的动物细胞呼吸变快 D.蝌蚪尾的消失是通过细胞增殖实现的 (201509)21.下列关于高等植物细胞周期和有丝分裂的叙述,正确的是 A. S期进行DNA复制并有大量的核糖体增生 B. 中期可观察到核膜解体形成的小泡 C. 后期中心体发出的纺锤丝将染色体拉向两极 D. 末期赤道面向四周扩展形成新的细胞壁 201510 (201510)10.受精卵经多次分裂产生形态、结构和功能不同的后代细胞，发生这种差异的过程称 为 A. 细胞分化 B.细胞癌变 C.细胞衰老 D.细胞凋亡 (201510)16.下列关于高等动物细胞的细胞周期的叙述，错误的是 A. 分裂间期进行DNA复制 B.前期开始出现染色体和纺 锤体 C.中期是观察染色体形态的最佳时期 D.末期进行着丝粒的分裂 201604 (201604)12.蝌科在发育过程中，尾和鳃在一定时期消失。这属于 A .细胞调亡 B .组胞癌变 C .细胞衰老 D .组胞分裂(201604) 22.下列关于制作并观察植物细胞有丝分裂的临时装片”活动的叙述，正确的是 A ?用稀盐酸解离可使细胞间的果胶质层松散 B ?用水漂洗可洗去碱性染料以保持细胞活性 C. 常用苏丹川染液使染色体着色以利于观察 D. 可用高倍镜观察植物细胞连续的分裂过程 (201604) 26.【加试题】下列关于高等动物体细胞的细胞周期的叙述，错误的是 A .细胞处于S期时，显微镜下能观察到核仁 B ?蛙胚卵裂球细胞周期变短，子细胞体积变小 C. 蛙胚卵裂期细胞G2期显著缩短，细胞分化变快 D. 在缺乏营养物质的培养液中培 养细胞，可得到大量的G1期细胞 201610 (201610) 4.在实验条件下，矮牵牛叶片细胞能能发育成完整植株。这说明该细胞具有 A. 普遍性 B.统一性 C.全能性 D.特异性 (201610) 13.下列关于高等动物细胞有丝分裂的叙述，正确的是 A. 前期核膜解体成磷脂分子和蛋白质分子 B. 中期染色体的显微照片可制作染色体组型图 C. 后期着丝粒断裂导致染色单体数目加倍 D. 末期囊泡聚集成的细胞板形成新的膜
名词解释： 钙离子是机体各项生理活动不可缺少的离子。它对于维持细胞膜两侧的生物电位，维持正常的神经传导功能。维持正常的肌肉伸缩与舒张功能以及神经－肌肉传导功能，还有一些激素的作用机制均通过钙离子表现出来。 钙离子的生理作用； 钙在人体内含量很大，绝大部分都存在与骨骼和牙齿中，很少量存在于血液和组织里。由于新陈代谢每天都需要从食物中补充一定量的钙。成人推荐每日摄取1000毫克，长身体的时候推荐每日1300毫克。所以青少年需要的钙比成人高一些，因为骨骼的发育需要。身高发育跟遗传有关，但跟后天营养同样有关。保证足够的营养包括钙很重要，这也是为什么现在的人比父母辈平均身高高的原因。 各种食物里都有钙离子，牛奶和奶制品里最多。比如200毫升牛奶（一杯左右）含钙离子300毫克左右。所以即使胃口不好吃不好东西加上两杯牛奶也足够了。如果真的要补的话多吃些豆制品，菠菜等钙含量高的食物，天然食物营养均衡是最好的选择。 钙离子是机体各项生理活动不可缺少的离子。它对于维持细胞膜两侧的生物电位，维持正常的神经传导功能。维持正常的肌肉伸缩与舒张功能以及神经－肌肉传导功能，还有一些激素的作用机制均通过钙离子表现出来。它的主要生理功能均是基于以上的基本细胞功能，主要有一下几点： 1.钙离子是凝血因子，参与凝血过程； 2.参与肌肉（包括骨骼肌、平滑肌）收缩过程； 3.参与神经递质合成与释放、激素合成与分泌；c 4.是骨骼构成的重要物质。 钙离子是机体各项生理活动不可缺少的离子。1.钙离子是凝血因子，参与凝血过程； 2.参与肌肉【包括骨骼肌、平滑肌】收缩过程； 3.参与神经递质合成与释放、激素合成与分泌； 4.是骨骼构成的重要物质；等。细胞内钙离子增加，导致细胞功能异常【减退或衰竭】，是机体衰老的进程。也就是说，人衰老的过程（机体器官功能减退的过程）就是细胞内钙增加的过程。细胞内为什么钙会增加呢？缺钙是一个主要且重要因素：缺钙——【甲状旁腺激素分泌增加】——骨钙溶解释放至血液（可导致骨质疏松）——钙进入细胞——细胞内钙增加——【降钙素分泌增加】——血钙回至骨骼【导致骨质增生】上述过程是个循环、反馈过程。细胞内钙增加，平滑肌紧张度增加，在部分人就会出现血压升高——高血压。从上述循环过程看，血钙不能真实反映机体钙的水平。因此并不能以血钙水平断定缺钙与否。所以，适当补钙对延缓衰老、预防疾病有相当重要的临床意义。 身体里有一个东西叫破骨细胞，当你的血钙不足时，这里破骨细胞会敲开你的骨小梁，释放出钙离子，当血液中的钙补充足够后，多余的钙就不可能再回到骨小梁中去，这时如果身体骨骼有出现疏松的地方，它就会在那里形成一个支点去支撑，就是所谓的骨刺，所以长骨刺的人也就因为缺钙所致。还有就是多余的钙会在身体里形成游离钙，与草酸结合，就会形成草酸钙结石等等这样的现象。注意补钙哦。 系统的来说，钙离子（一般只有二价的）参与成骨（这个不用多解释吧）和凝血（钙离子是血浆凝血因子4）作用，这是和磷一起参与的，钙离子其他的生理功能有，一，调节细胞功能，因为钙离子是细胞信号传导过程中的信使，二，调节酶的活性，三，维持神经-肌肉的兴奋性，因为钙离子参与了膜电位的组成，和其他的离子共同维持了神经-肌肉的兴奋性，四，钙离子可以降低毛细血管的通透性防止渗血。