(药理药化(
收稿日期:2008-10-09; 修订日期:2008-12-20基金项目:国家自然科学基金(N o .30873360);
吉林省科技发展计划资助课题(No .20080105)
作者简介:随志刚(1979-),男(汉族),吉林长春人,现为吉林大学药学院在读博士研究生,硕士学位,主要从事质谱分析化学研究工作.
*
通讯作者简介:刘忠英(1964-),女(汉族),吉林白城人,现任吉林大学
药学院教授,博士生导师,博士学位,主要从事生物化学分析研究工作.
草乌中乌头类生物碱提取方法比较研究
随志刚1
,陈明玉1
,刘志强2
,皮子凤2
,刘忠英
1*
(1.吉林大学药学院,吉林长春 130021; 2.中国科学院长春应用化学研究所,吉林长春 130022)
摘要:目的优化草乌中乌头类生物碱提取方法,比较草乌、
附子生品及市售炮制品中乌头类生物碱的含量,为相关中药中生物碱的测定和临床应用提供参考。方法分别用7种提取方法提取附子中乌头类生物碱,比较各方法对3种双酯型生物碱的提取效率,并测定乌头类生药及其炮制品中乌头类生物碱含量。结果10%氨水乙醚冷浸法对3种双酯型生物碱的提取效率最高。炮制品中的乌头类生物碱含量明显低于生药,各种炮制品中乌头类生物碱的含量差别也比较大。结论采用10%氨水乙醚冷浸法,高效液相色谱-紫外光谱(H PLC-UV )法对药材中乌头类生物碱进行提取和含量测定,能真实反映药材中药效和毒性成分。不同的炮制品中各生物碱含量差别较大,临床应用应有差别。
关键词:提取方法; 草乌; 附子; 乌头碱类生物碱中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2009)03-0513-02
Co mparison of D ifferent Extraction M ethods of Aconitu m A lkaloids fro m Radix Aconiti Kus nezoff ii
S U I Z h-i gang 1,C H EN M
ing -yu 1,L I U Z h-i q iang 2,P I Z -i feng 2,L I U Z hong -y i n g
1*
(1.College of Phar m acology,J ilin Un i v ersit y ,Changchun 130021,China;2.Changchun Institute of App lied Che m istry ,Chinese Acade m y of Sciences ,Changchun 130022,China )
Abst ract :O bjective T o opti
m ize the ex tracti on techno logy of acon itu m a l ka l o i ds from R adi x A con iti K usnezoff ii ,and to de ter -m i ne the contents o f acon it u m a l kalo i ds i n R ad i x A conitiK usnezoffii ,Fuzi and their processed produc ts so l d i n Ch i nese phar m acy .
M ethods The effi c iency of seven ex tracti on m ethods w ere compared by deter m i n i ng the conten ts o f acon i tine ,m esacon iti ne and hypacon iti ne of sa m ples extracted by d ifferent m ethods .The H PLC -UV m ethod w as used to deter m i ne t he contents o f acon itu m a l ka l o i ds i n R ad i x A conitiK usnezoffii ,Fuzi and their processed products .Re s u lts The m ost e fficient me t hod was to ex tract sa m ple w it h e t her from the herb sub m erged i n 10%a mm onia .T he three diester-d iterpeno i d a l ka l o i ds o f processed products w ere m uch lo w er than t hose o f the raw herbs and the con tents o f acon it u m a l kalo i ds i n d iffe rent processed products we re different w i de l y .Conc l u sion The me t hods used i n ex tracti on and ana l ysis f o r acon itu m a l ka l o i ds from herbs are e ffecti v e ,reli able and si m ple .D i -f ferent k i nds o f processed products of ra w herbs shou l d be d i scri m i nati ng l y treated in cli nic applica ti on .
K ey w ords :Ex tracti on m ethod ; R ad i x A coniti Kusnezoff ii ; Fuz;i A conitu m a l kalo i ds 在乌头类生药及炮制品中,生物碱成分既是药效成分同时也
是毒性成分[1],而且稳定性不好,很容易降解[2],所以生物碱的提取方法在其成分分析中十分重要。目前有关生物碱的提取方法有很多[3~5],但是,各种方法对双酯型生物碱的提取效率的比较研究尚无报道。中医临床常用的乌头类中药为附子的炮制品,市售的附子炮制品饮片按不同的炮制方法分为盐附子、黑附片、白附片、淡附子、熟附片及炮附子等[6],但是,不同的炮制方法,必然会造成生物碱含量的不同,在使用上应有所区别。本文比较了7种提取方法对乌头类中药中3种双酯型生物碱的提取效率,并测定乌头类生药及其炮制品中乌头类生物碱含量,以期准确测定附子中生物碱,为保证此类中药的临床应用更为安全合理提供可靠的分析方法。1 仪器与试剂
1.1 仪器LC -10A 高效液相仪(Shi m adzu ,日本);超声清洗器(Autosc i ence ,天津);高速离心机(Eppendo r,f 德国);电子天平(Sarto ri us ,德国)。
1.2 试剂乌头碱,中乌头碱和次乌头碱对照品购自中国药品生物制品检定所。生附子、生草乌购自四川江油,制草乌、黑附片、
白附片、盐附子、淡附子购自吉林省长春市吉深药店,经长春中医
药大学王淑敏教授鉴定均为正品。甲醇为色谱纯,水为去离子水,乙醚、二氯甲烷等其他试剂为分析纯。2 方法与结果2.1 方法学考查
2.1.1 色谱条件A g ilent extended C 18色谱柱(150mm @4.6mm,5L m );流动相为甲醇B 0.1%三乙胺(65B 35);流速为0.6m l #m i n -1
;检测波长为230nm ;柱温为30e ;样品经过0.45L m 微孔滤膜过滤,滤液进样10L l 。
2.1.2 标准曲线精密称取中乌头碱、乌头碱和次乌头碱对照品适量置于容量瓶中,加入二氯甲烷溶解并定容,得浓度为1.08m g #m l -1的中乌头碱、1.12m g #m l -1的乌头碱和1.22m g #m l -1
的次乌头碱标准品储备液。每种对照品溶液分别进样2,4,6,8,10L ,l 高效液相色谱法测定。以浓度(L g #m l -1)对峰面积计算回归曲线。得到中乌头碱标准曲线方程为Y =20672.0X -58377.5,r =0.9995;乌头碱标准曲线方程为Y =18114.2X -28544.2,r =0.9999;次乌头碱的标准曲线方程为Y =186632X -13386.7,r =0.9993。说明乌头碱在5.6~112L g #m l -1、中
乌头碱在5.4~108L g #m l -1
,次乌头碱在6.1~122L g #m l -1的浓度范围内均呈良好的线性。
2.1.3 重复性实验同一生草乌粉末按优选的提取方法操作,提取6份溶液,H PLC 测定,记录乌头碱、中乌头碱、次乌头碱峰面积。乌头碱、中乌头碱和次乌头碱含量的RSD 值分别为4.32%,
3.57%和
4.84%。说明方法重复性较好。
2.1.4 回收率实验精密称取已知含量的生草乌粉末18份,每份0.2g 。第1个6份分别加入0.05m g 乌头碱,第2个6份分别
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加入0.4m g中乌头碱,第3个6份分别加入0.2m g次乌头碱,同法操作计算含量,乌头碱的平均回收率为91.2%,RSD值为2.84%;中乌头碱的平均回收率为90.4%,RS D值为3.12%;次乌头碱的平均回收率为92.8%,RS D值为3.10。表明方法回收率较好。
2.1.5稳定性实验同一生草乌粉末样品溶液保存于-80e冰箱中,于放入冰箱后第4,8,12,18,24小时测定,计算含量。24h 内乌头碱、中乌头碱和中乌头碱含量的RSD值分别为5.21%, 4.35%和6.24%。表明提取液在-80e冰箱中24h内较稳定。
2.2提取方法的优选
2.2.1水提氯仿萃取法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加30m l蒸馏水,振荡6h后,转移至50m l离心管中,3000r# m i n-1离心20m i n,取上清液,沉淀水洗2次,合并上清液,用10%氨水调p H值为10,分别加入15,5,5m l氯仿萃取3次,合并氯仿层,蒸干。加甲醇溶解,定容至25m l。
2.2.2酸提法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加30m l 0.04%H C,l振荡6h,转移至50m l离心管中,3000r#m in-1离心20m i n,取上清液,沉淀用0.04%HC l洗2次,合并上清液,加0.04%H C l定容至50m l。
2.2.3酸提乙醚萃取法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加30 m l0.04%HC,l振荡6h,转移至50m l离心管中,3000r#m i n-1离心20m i n,取上清液,沉淀0.04%HC l洗2次,合并上清液,用10%氨水调p H值为10,加入15,5,5m l乙醚萃取3次,合并乙醚层,蒸干。加甲醇溶解,定容至25m l。
2.2.4酸提氯仿萃取法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加30 m l0.04%HC,l振荡6h,转移至50m l离心管中,3000r#m i n-1离心20m i n,取上清液,沉淀用0.04%HC l洗2次,合并上清液,用10%氨水调p H值为10,加入15,5,5m l氯仿萃取3次,合并氯仿层,蒸干。加甲醇溶解,定容至25m l。
2.2.5氨水乙醚冷浸法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加4 m l10%氨水,加30m l乙醚,振荡5m i n,冷浸6h,转移至50m l离心管中,3000r#m i n-1离心5m i n,取乙醚层,沉淀用乙醚洗2次,合并乙醚层,蒸干。加甲醇溶解,定容至25m l。
2.2.6氨水乙醚超声提取法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加4m l10%氨水,加30m l乙醚,超声30m i n,转移至50m l离心管中,3000r#m i n-1离心5m in,取乙醚层,沉淀用乙醚洗2次,合并乙醚层,蒸干。加甲醇溶解,定容至25m l。
2.2.7酸超声提氯仿萃取法称生草乌2.0g于带塞锥形瓶中,加30m l0.04%HC,l超声30m i n,转移至50m l离心管中,3000 r#m i n-1离心20m i n,取上清液,沉淀5m l0.04%HC l洗2次,合并上清液,用10%氨水调p H值为10,加入15,5,5m l氯仿萃取3次,合并氯仿层,蒸干。加甲醇溶解,定容至25m,l。
采用/2.1.10项下的色谱条件对上述7种提取方法所得样品进行含量测定。得到结果见表1。各种提取方法的提取率(3种生物碱之和)顺序为:氨乙醚冷浸>酸提>酸超声提氯仿萃取>氨乙醚超声提取>酸提氯仿萃取>酸提乙醚萃取>水提氯仿萃取。确定氨乙醚冷浸为最有效的提取方法。
表1不同提取方法双酯型乌头碱的含量m g#kg-1
提取方法中乌头碱含量乌头碱含量次乌头碱含量水提氯仿萃取367.936.8117.5
酸提2191.3253.81039.7酸提乙醚萃取1863.8172.1755.2
酸提氯仿萃取1976219.8932.1
氨水乙醚冷浸2365286.71222.3
氨水乙醚超声提取2167220.91044.8
酸超声提氯仿萃取2201.2227.21025.8
2.3草乌、附子生药及炮制品的含量分析分别准确称取白附片、炮附子、黑附片、淡附子、生草乌、生附子、制草乌粉末各0.4 g,加10%氨水0.5m l润湿,加乙醚10m,l浸泡过夜,取乙醚层,药渣用乙醚1m l洗2次,合并乙醚层,蒸干,加色谱纯甲醇定容至2m l。采用/2.1.10项下的色谱条件对样品进行测定。利用当日标准曲线计算提取液中3种双酯型生物碱的含量,每种样品均取3份平行操作。实验结果见表2。不同炮制方法得到的炮制品中各生物碱含量差别较大。生草乌、生附子及各炮制品中双酯型生物碱的含量顺序为,生草乌>生附子>制草乌>黑附片>淡附子>白附片>炮附子。
表2各种乌头类中药中乌头类生物碱含量m g#kg-1样品名称中乌头碱含量乌头碱含量次乌头碱含量
生草乌2416.00287.501221.00
生附子1002.40186.60565.00
白附片15.22未检出28.70
淡附子19.79未检出28.90
炮附子未检出未检出未检出
黑附片29.618.70110.75
制草乌50.6330.20372.30
3讨论
效率较高的乌头类生物碱提取方法是氨乙醚和稀盐酸提取法,这是由于乌头碱类双酯二萜生物碱的极性较小,易溶于乙醚、氯仿等有机溶剂。虽然乌头类生物碱难溶于水,但是人们在服用乌头属中药时基本采用水煎煮的方法,所以本实验比较了分别以乙醚,氯仿和水为溶解的7种提取方法。
水提取氯仿萃取法提取率最低,这是乌头类生物碱在水中的溶解度较低,不能全部被溶出的缘故。氨乙醚冷浸法的提取率最高,这是由于乌头类生物碱在碱性的环境下以游离型存在,能充分溶于有机溶剂而被萃取出来。其余方法的提取率均低于氨乙醚冷浸法。乌头类生物碱在酸性环境下成盐导致水溶性增大(张洪贵.5毒性乌头生物碱碱代谢产物研究6.吉林大学2006博士生毕业论文),故酸提法的提取率较高,但是乌头碱在酸性水溶液中的溶解度仍然低于在乙醚中的溶解性。酸提乙醚萃取法和酸提氯仿萃取法由于在萃取的过程中,乌头类生物碱被分配在水层一部分,导致提取不完全,所以提取率要低于氨乙醚冷浸法。氨乙醚超声提取法和酸超声提氯仿萃取法是由于在超声的过程中,溶剂内部产生的热量导致不稳定的乌头类生物碱水解而使提取率下降。
炮制品与生药相比较,提取液中双酯型生物碱含量明显减少,毒性大大降低。制草乌的各成分含量明显高于其它炮制方法,因此在使用时应适量。炮附子中双酯型生物碱含量非常低,中乌头碱、乌头碱、次乌头碱均未检出,因此在乌头类中药临床应用中总结出来的/仅炮附子能大量入药0,从化学成分分析上是合理的。
参考文献:
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时珍国医国药2009年第20卷第3期LISH IZ HEN M EDI C I NE AND MATERI A M ED I CA RESEARCH2009VOL.20NO.3
工艺与设备 中草药中生物碱的提取与分离 蔡艳华赵红卫钟本和 (四川大学化工学院,成都,610051) 摘要 生物碱是许多中草药的有效成分。因其具有广泛的生理功能,引起了人们的关注。本文综述了近年来不同的提取和分离方法在生物碱中的应用原理。指出了各方法的优缺点及其今后发展的方向。 关键词:中草药生物碱提取纯化 1前言 生物碱是动植物中一类具有碱性的含氮物质。它们大多是极有价值的药物。中草药含有很多种生物碱,中草药的疗效大多是由所含的生物碱而来。 近年来生物碱作为中草药中的有效成分之一成为研究的热点。提取工艺是生物碱工业化生产的首要环节,特别是其提取和分离操作[1]。传统的生物碱提取分离方法能耗、物耗大,杂质多,效率低。针对这种情况,众多学者从不同角度对中药材中生物碱的提取分离进行了优化和改进[3)22]。本文就生物碱的提取分离技术,特别是几种新兴技术进行了综述。 2生物碱的提取方法 211传统提取方法 绝大多数生物碱是利用溶剂提取法进行提取。生物碱在溶剂中的溶解符合/相似相溶0的规律。极性强的生物碱亲水性较强,易溶于极性溶剂;弱极性生物碱亲脂性较强,易溶于弱极性溶剂。游离的生物碱大多亲脂性较强,而生物碱盐一般亲水性较强。按极性强弱可将生物碱提取溶剂分为极性溶剂、半极性溶剂和非极性溶剂[2]。 21111极性溶剂 极性溶剂有水、甘油、二甲亚砜等。水是最常用的强极性溶剂。具有碱性的生物碱在植物体中多以盐的形式存在,可直接以水作为提取溶剂。而弱碱性或中性生物碱则以不稳定的盐或游离的形式存在,这部分生物碱的亲水性比较弱,为增加其溶解度,可以采用酸水为提取液,使生物碱与酸生成盐而溶出。水提取物不易稳定,易染菌,此外含果胶,黏液质类成分的水提物难于过滤,影响分离操作。 21112半极性溶剂 半极性溶剂有乙醇、丙酮、丙二醇等。乙醇是最常用溶剂,游离的生物碱及盐类一般都能溶于乙醇。它可与水、甘油、丙二醇以任意比例混溶提取生物碱。有时也可采用醇酸溶液作提取剂。 21113非极性溶剂 非极性溶剂有乙醚、石油醚,氯仿、脂肪油、乙酸乙酯、液体石蜡等。以盐的形式存在于植物细胞中的生物碱采用非极性溶剂提取时,必须先使生物碱转变成游离碱后再用溶剂提取。非极性溶剂提出的总生物碱一般只含有亲脂性生物碱,不含水溶性生物碱。这种方法得到的生物碱杂质较少,易于进一步纯化。但溶剂渗入能力较弱,需反复提取。 溶剂提取法按具体操作可分为浸渍法、渗漉法、煎煮法、热回流法和连续回流法(索氏提取法)。21114浸渍法 浸渍法是将处理过的药材用适当的溶剂在常温
当今国内麻黄碱提取分 离工艺的概况精编 W O R D版 IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】
“坚挺”的“绿色卫士”。据统计，每提取一公斤麻黄碱需5亩麻黄草。每年，因采摘麻黄草被沙化的草场约达200万亩，滥采滥挖麻黄草是沙尘暴的重要成因之一。寻求低成本合成麻黄碱的方法，以及产业化制备工艺，想让拔草制药无利可图，最终弃拔麻黄草。如今，其年产量可达500吨，基本能够满足我国制药行业对麻黄碱的需求，每年可以保护约250万亩西部草场。接下来，越来越多的麻黄草可以幸免被拔，茁壮成长，抓牢脚下的西北沙土，重筑“绿色生态”隔离带，让西部沙尘慢慢地难以“起舞”。? 脱氧麻黄碱的成本：?麻黄碱与冰毒从化学结构上看，是“同门兄弟”，差别非常之小。如果是买麻黄素脱氧，麻黄素市场价4500到6000元一公斤，而麻黄碱最好的市场价格达数万元一公斤。黑市价格已经达到1-3万元以上了，其他辅料每公斤需要不超过2000元。现在一般采用氢碘酸红磷还原法，用这个方法理论上产率能达到92%，实际生产达到50-80%，肉的纯度一般在95%以上。产率500到800克，一克成本10元左右，纯度95%以上。天然麻黄素生产出来的毒品纯度高、口感好、外观漂亮，能够吸引许多好奇者。如果自己合成麻黄素，成本更低了。该方法制作工艺技术过程比较简单，成品颜色鲜亮，口感较好，成品柔。植物的是碱性，生物碱！麻黄素制造的叫植物冰。? 而化学合成麻黄碱，采用不对称转化和立体选择性还原等方法，最终能够高效、定向合成高光学纯度的麻黄碱，并实现此多手性中心药物的产业化。由原料苯丙酮经溴化到溴代苯丙酮经甲胺化到甲胺基苯丙酮，然后还原到苯基甲胺基丙醇然后萃取到RL-麻黄碱然后拆分得到L-麻黄碱。用这种方法合成冰毒，他的生产周期一般是5—10天，一公斤麻黄素，一脱氧就可以得到0.7公斤的冰毒。与天然麻黄素相比，化学法合成麻黄素整套工艺便于规模化生产、产品质量好、三废少，每公斤麻黄碱的合成成本，较天然提取降低60%，即
实验六：咖 啡 因 的 提 取 【实验目的】 1、学习生物碱提取及其衍生物的制备方法； 2、学会升华操作； 【实验原理】 咖啡碱具有刺激心脏，兴奋大脑神经和利尿等作用。主要用作中枢神经兴奋药。它也是复方阿斯匹林（A. P. C ）等药物的组分之一。现代制药工业多用合成方法来制得咖啡碱。 茶叶中含有多种生物碱，其中咖啡碱（或称咖啡因,caffeine ）含量约1%-5%，丹宁酸（或称鞣酸）约占11%-12%，色素、纤维素、蛋白质等约占0.6%。咖啡因是弱碱性化合物，易溶于氯仿、水、热苯等。 咖啡碱为嘌呤的衍生物，化学名称是1，3，7-三甲基-2，6-二氧嘌呤，其结构式与茶碱，可可碱类似。 嘌呤（Purine ） 咖啡因(Caffeine) 茶碱(Guanine) 可可碱(Adenine) 含结晶水的咖啡碱为白色针状结晶粉末，味苦。能溶于水、乙醇、丙酮、氯仿等。微溶于石油醚，在100℃时失去结晶水，开始升华。120℃时升华显著，178℃以上升华加快。无水咖啡因的熔点为238℃ 从茶叶中提取咖啡因，是用适当的溶剂（氯仿、乙醇、苯等）在脂肪提取器中连续抽提，浓缩得粗咖啡因。粗咖啡因中还含有一些其它的生物碱和杂质，可利用升华进一步提纯。咖啡因是弱碱性化合物，能与酸成盐。其水杨酸盐衍生物的熔点为138℃，可借此进一步验证其结构。 【操作过程和实验装置图】 N N NH N 12 3 67 9 CH 3 3 CH 3 N N O O N N N O O CH 3 NH N CH 3N N N CH 3 HN N O O 3
1、生物碱及其衍生物的提取与制备方法。 2、升华操作 流程 图2.8.2 常压升华装置 【实验关键和注意事项】 （1）滤纸套筒大小要合适，以既能紧贴器壁，又能方便取放为宜，其高度不得 超过虹吸管；要注意茶叶末不能掉出滤纸套筒，以免堵塞虹吸管；纸套上面折成凹形，以保证回流液均匀浸润被萃取物，也可以用塞棉花的方法代替滤纸套筒。用少量棉花轻轻阻住虹吸管口。 （2）瓶中乙醇不可蒸得太干，否则残液很粘，转移时损失较大。 （3）生石灰起吸水和中和作用，以除去部分酸性杂质。 （4）在萃取回流充分的情况下，升华操作是实验成败的关键。升华过程中，始 终都需用小火间接加热。如温度太高，会使产物发黄。注意温度计应放在合适的位置，使正确反映出升华的温度。 【主要试剂及产品物理常数】
实验四麻黄中麻黄碱的提取、分离与检识 麻黄是一种常用中药，为我国特产的药材之一。为麻黄科植物草麻黄（Epheclra sinica stapf）、木贼麻黄（E.equssetina Bunge）和中草麻黄（E.intermedia Schrenk ex Meyer）的干燥草质茎。具有发汗、解表、镇咳、平喘等作用。它的主要成份是生物碱，在草麻黄中的含量为1.3%以上，木贼麻黄中则达1.75%，这些生物碱已知的有六种以上，主要为：(-)麻黄碱（L-ephedrine）一般占总碱60%以上，其次为(+)伪麻黄碱（d-pseudophedrine）和少量甲基麻黄碱、去甲基麻黄碱、甲基伪麻黄碱、去甲基伪麻黄碱等。它们以盐酸盐的形式存在于植物体中。 一、麻黄中已知主要成份的理化性质 1．(-)麻黄碱：为无色蜡状固体或晶形固体，也可能是颗粒。无臭，常含半分子结晶水，熔点40℃。易溶于水（1∶20）或乙醇，可溶于氯仿、乙醚、苯或甲苯。有挥发性，可随水蒸气蒸馏而不分解。其水溶液呈强碱性（pkb4.42），能与无机酸或酸性较强的有机酸结合成盐，这些盐大多易溶于水（草酸盐难溶于冷水），要溶于乙醇，但几不溶于氯仿、乙醚、苯等有机溶剂。2．(+)伪麻黄碱：由乙醚结晶出来的为长斜方形晶体，易溶于乙醇、乙醚、苯或甲苯等有机溶剂，而难溶于水。碱性较(-)麻黄碱略强（pkb4.26），可应用离子交换层析法将两者分离。(+)伪麻黄碱的盐类均易溶手水，但其盐酸盐能溶于丙酮或氯仿，草酸盐易溶于冷水，而与盐酸(-)麻黄碱不同． 二、目的要求 1．掌握水溶性生物碱类溶剂提取和分离方法。 2．熟悉用离子交换树脂法纯化处理水溶性生物碱的操作技术。 3．了解麻黄碱的性质和检识方法。 三、实验原理 本实验是利用麻黄生物碱的盐酸盐可溶于水的性质，而采用稀盐酸水溶液为提取溶剂，对麻黄草进行蒸煮或浸渍，提取液经碱化后转化为游离麻黄碱，可为氯仿所萃取。麻黄碱的氯仿溶液又可为稀盐酸转溶成盐，于此盐酸麻黄碱的水溶液中加入适量乙醚，则可降低盐酸麻黄碱的水中溶解度而析出结晶。
3 生物碱的碱性与哪些有关 (1)氮原子的杂化类型:随杂化度升高而增强；②诱导效应：氮原子所连接的基团如为供电基团则碱性增强，如为吸电基团则碱性减弱；③诱导一场效应：使生物碱的碱性降低；④共轭效应：若生物碱分子中氮原子孤对电子成P-兀共轭体系时，通常情况下，其碱性较弱；⑤空间效应：若生物碱的空间环境不利于氮原子接受质子，其碱性减弱；反之，则碱性增强；⑥分子内氢键形成：若生物碱分子结构中氮原子附近存在羟基、羰基等取代基团，碱性增强。 4．生物碱类化合物的鉴别方法①沉淀反应：大多数生物碱能和某些酸类、重金属盐类以及一些较大分子量的复盐反应，生成单盐、复盐或络盐沉淀。如与碘化铋钾试剂的反应； ②显色反应：用于生物碱的冠色试剂很多，它们往往因生物碱的结构不同而显示不同的颜色，Mandelin试剂(1％钒酸铵的浓硫酸溶液)；③成盐反应：绝大多数生物碱可与酸形成盐类，但不同类型的生物碱与酸成盐的形式不同，主要有：季铵生物碱的成盐反应、含氮杂缩醛生物碱的成盐反应、具有烯胺结构生物碱的成盐反应、涉及氮原子跨环效应生物碱的成盐反应。 5．生物碱类化合物的提取一般从天然药物巾提取总生物碱通常采用溶剂法、离子交换法、沉淀法等提取分离方法。①对于脂溶性生物碱可采取酸水提取法、醇类溶剂提取法、亲脂性有机溶剂提取法；②对于水溶性生物碱可采取沉淀法、溶剂萃取法。 6．生物碱类化合物的分离对于生物碱的分离通常分为系统分离与特定分离。一般的方法是先对总碱进行初步分离，将性质相近的生物碱分成几个类别或部位。然后再按各成分的碱度、极性或功能团的差异分离生物碱单体。①总生物碱的初步分离：根据总生物碱中各成分理化性质的差异，可将其初步分离为强碱性的季铵碱、中等强度碱性的叔胺碱及其酚性碱、弱碱性生物碱及其酚性碱等几个部分；②生物碱单体的分离：利用生物碱碱性的差异、利用生物碱极性的差异或生物碱盐的溶解度差异、利用生物碱特殊官能团、利用色谱法进行分离。 7．生物碱类化合物的结构鉴定①色谱法：色谱法在生物碱鉴别中的应用主要体现在天然药物及天然药物制剂中有无生物碱存在的检识、指导生物碱的分离、检查生物碱的纯度及对已知生物碱的鉴定等多个方面，主要有：薄层色谱法、纸色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法；②谱学法：目前，在生物碱结构鉴定工作中，最常用的分析方法有紫外光谱(U V)、红外光谱(IR)、质谱(M S)和核磁共振 (N M R)。 【习题】 一、名词解释 1．生物碱 2．两性生物碱 3．生物碱沉淀反应 4．诱导效应 5．共轭效府 6．空间效应 7．诱导一场效应 8．氢键效应 二、填空题 1．小檗碱呈黄色，而四氢小檗碱则无色，其原因在于。 2．弱碱性生物碱在植物体内是以状态存在。 3．在生物碱的色谱检识中常用的显色剂是，它与生物碱斑点作用常显色。 4．Mayer’s试剂的主要成分为；Dragendorff’s试剂的主要成分为。 5．总生物碱的提取方法大致有以下三类：、、。 6．麻黄碱和伪麻黄碱的分离可利用它们的——盐在水中的溶解度不同，在水中溶
生物碱提取和分离方法的研究新进展 令狐文艳 摘要: 生物碱是一类具有生理活性的物质，是许多药用植物的重要有效成分之一。如何从天然产物中提取与分离生物碱是生物碱制备的关键环节。它吸引了人们的广泛关注，其提取与分离方法也不断地改进和发展。本文综述了近年来，不同的提取和分离方法在生物碱制备中的应用和进展。随着众对生物碱药用价值的认识提高，生物碱的撮与分离方法将更加高效、迅速、完善。 关键词:生物碱；提取；分离；研究；进展 1.前言 生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮化合物，具有广泛的生理功能，是许多药用植物的有效成分 ,目前运用于临床的生物碱药品已达80 种之多 ,相当多的生物碱具有抗肿瘤活性、低毒性和成本低之特性 ,因而引起了人们的广泛关注[1 ]。与此同时 ,人们对生物碱的提取和分离方法研究也在不断地深入和加强。随着各类生物碱的市场需求量的增加 ,经济效益的提高 ,提取分离生物碱的方法也在不断改进和提高。 2.生物碱提取方法的研究进展 绝大多数生物碱是利用溶剂提取法进行提取。生物碱及其盐类的溶解度与生物碱分子中氮原子的存在形式、极
性基团的有无及数目、溶剂种类都有密切关系。极性强的生物碱亲水性较强, 易溶于极性溶剂；弱极性生物碱亲脂性较强,易溶于弱极性溶剂。游离的生物碱大多亲脂性较强, 而生物碱盐一般亲水性较强。按极性强弱可将生物碱提取溶剂分为极性溶剂、半极性溶剂和非极性溶剂[2]。 2. 1 按所用溶剂不同可分为以下几种方法 2. 1. 1 水提取法(以水作溶剂) 直接以水作为溶剂 ,采用最佳的提取工艺来提取生物碱。此法操作简便 ,成本较低 ,但提取次数多 ,水用量大。如蒙药忠论— 5 汤提取[3 ]就是一个很好的例子。 2. 1. 2 酸性水溶液提取法 对于那些碱性较弱不能直接溶解于水的生物碱提取 ,就可采用偏酸性的水溶液 ,使生物碱与酸作用生成盐而得到提取。 2. 1. 3 碱性水溶液提取法 对于那些化学结构非常独特、化学性质与一般生物碱不同且在酸性或中性条件下不稳定的生物碱来说 ,可以采用此法。而原有的乙醇作为溶剂渗漉提取法 ,不仅存在成本高 ,而且存在防火等级高、提取时间长、能耗大等诸多问题 ,远不如使用稀NaOH溶液好。 2. 1. 4 有机溶剂提取法 (1) 乙醇提取法在生物碱的提取中应用较为普遍 ,对于游离生物碱及其盐类一般采用乙醇提取法。
正确认识麻黄碱 麻黄碱，即麻黄素，是我国传统中药麻黄的主要有效成分之一。它能收缩血管、松弛支气管平滑肌，有显著的中枢兴奋作用。主要用于治疗支气管哮喘、感冒、过敏反应、鼻粘膜充血、水肿及低血压等疾病。麻黄碱在发挥药用价值的同时，其特殊性也不容忽视。麻黄碱是制备冰毒的主要原料，1988 年通过的《联合国禁止非法贩运麻醉药品和精神药物公约》就将麻黄碱列入了管制名单，随后我国也专门制定了关于麻黄碱的管理规定，如先后制定了《麻黄素管理办法》和《易制毒化学品管理条例》，对麻黄碱实行特殊管理。随着我国对麻黄碱管理的加强，不法分子难以直接获取麻黄碱，于是将目光转向含麻黄碱的复方制剂。含麻黄碱复方制剂，即含有麻黄碱的两种或两种以上药物的混合制剂。目前多为感冒药、止咳平喘药以及外用膏药等。近年来一系列制造冰毒案暴露了目前含麻黄碱复方制剂的监管存在着很大的问题，更凸显了加强对含麻黄碱复方制剂监管的必要性。 二、含麻黄碱复方制剂监管制度 根据《关于切实加强部分含特殊药品复方制剂销售管理的通知》，含麻黄碱复方制剂的经营企业为具有《药品经营许可证》的企业即可；核实并留存购销方资质证明复印件、采购人员（销售人员）法人委托书和身份证明复印件、核实记录等；指定专人负责采购（销售）、出（入）库验收、签
订买卖合同等；经营活动必须按照有关规定开具、索要销售发票；严格执行出库复核制度；禁止现金交易。 三、监管中存在的问题 （一）含麻黄碱复方制剂的特殊性 1、药品的本质属性。含麻黄碱复方制剂本身是药品，而且还是人民群众日常生活不可或缺的常用药品，如新康泰克、白加黑、日夜百服咛等。所以国家对其的管理方式不同于麻黄碱原料药或是单方制剂，没有将其纳入《易制毒化学品管理条例》当中。但是由于它们含有麻黄碱，不法分子通过提取这些药物可以从中分离出麻黄碱，进而进行冰毒的制备。因此，它们又是毒品的制备原料。但是，它们的本质是药品，在药品经营活动中，药品经营企业大量购进超出医药正常使用量的含麻黄碱复方制剂但又没有将其转化为冰毒时，很难判定它的真实目的，不能对其进行取证、立案。只有当这些含麻黄碱复方制剂真正开始转变为冰毒时才能够予以查处。因此，含麻黄碱复方制剂的药物属性决定了对其监管的难度，导致很多可疑案件没能第一时间予以制止。 2 、品种较多。含麻黄碱复方制剂不同于麻黄碱原料药，亦或是麻黄碱单方制剂，它的品种数量非常多，据不完全统计，含麻黄碱复方制剂的品种有500 多种，多为感冒药、止咳平喘药、外用膏药等，并且这些药品大多还是非处方药，患者可以自行选择购买，所以不可能对其所有品种进行管
Dictamnine 白鲜碱；Skimmianine 茵芋碱； Fagarine 青椒碱；Robustine ； <分子式> C12H9NO2 <相对分子质量> 199 <性状>棱柱粉末。又称白鲜胺，白藓碱。棱柱结晶(由乙醇中结晶)，熔点133℃。溶于热乙醇和氯仿，微溶于乙醚，难溶于水。其盐酸盐为针状结晶(由乙醇中结晶)，熔点170℃(分解)。其苦味酸盐为黄色棱晶(由乙醇中结晶)，熔点1.63℃。存在于芸香科植物白鲜(Dictamnus dasycarpus Turcz.)的根。 芸香科植物白鲜的根；芸香科植物欧白鲜；芸香科植物花椒属竹叶椒的根；芸香科植物阿诺梯花椒的茎；芸香科植物得卡瑞花椒的茎皮；芸香科植物刺异叶花椒的根；芸香科植物蚬壳花椒的茎；芸香科植物乔木状花椒的叶；芸香科植物崖椒的茎皮；芸香科植物两面针；芸香科植物松风草的地上部分；芸香科花椒属植物梅宇崖椒的树皮；芸香科植物的树皮；芸香科植物似番樱桃叶芸香草地上的部分；芸香科植物火山生芸香草的全草；芸香科植物的茎；芸香科植物的根和茎；芸香科的叶；芸香料的树皮 <生物活性>强心和对平滑肌的作用；松弛血管的作用；抗真菌和DNA光毒性作用；皮肤光损害作用；抗血小板聚集作用；昆虫拒食作用。 防己提取物 【英文或拉丁名】：Stephania Tetrandra extract 【产品规格】：Tetrandrine12% Fangchinoline6% 【包装规格】：25kg/paper drum 【产品介绍】：药材为防己科植物石蟾蜍Stephania tetrandra S. Moore的根。棕色粉末。
【化学成分】：含多种异喹啉生物碱，主要有粉防己碱(tetrandrine )、防己诺林碱(fangchinoline)、轮环藤酚碱(cyclanoline)、二甲基粉防己碱(dimethyltetrandrine) 以及小檗胺(berbamine)等。 【功能主治】：利水消肿，祛风止痛。用于水肿脚气、小便不利、风湿痹痛、湿疹疮毒、高血压症。 【备注】： 植物形态多年生落叶缠绕藤本。茎纤细，有纵条纹。叶互生，宽三角状卵形，先端钝，具小突尖，基部截形或略心形，两面均被短柔毛，全缘，掌状脉5条；叶柄盾状着生。花小，单性，雌雄异株；雄花序为头状聚伞花序，排成总状，萼片4，花瓣4，雄蕊4，花丝连成柱状体，上部盘状，花药着生其上；雌花萼片、花瓣与雄花同，心皮1。核果球形，熟时红色。花期5-6月，果期7-9月。 生于山坡、丘陵地带的草丛及灌木林缘。主产浙江、安徽、湖北、湖南。 采制秋季采挖，除去粗皮，晒至半干，切段或纵剖，干燥。 性状根不规则圆柱形，或剖切成半圆柱形或块状，常弯曲，弯曲处有深陷横沟而呈结节状，长5-15cm，直径1-5cm。表面灰黄色，有细皱纹及横向突起的皮孔。质坚重，断面平坦，灰白色，粉性。气微，味苦。
皂苷的提取分离 皂苷部分极性较大，首先应该附集皂苷部位，通常可用正丁醇萃取或是大孔树脂得到总皂苷部位。 对于具体皂苷的分离，若使用硅胶柱层析，一般以氯仿：甲醇：水进行洗脱，氯仿：甲醇：水一般为9：1：0.1，8：2：0.3，7：3：0.5，同时应注意要加大柱层析硅胶的装柱量，减少样品的上样量；另外也可使用反相柱。 此外有些皂苷类成分极性较大容易含有一些色素，不易结晶，可使用 Sephedex LH-20去除色素，进而使皂苷结晶。 类似物的hplc分离注意的问题 HPLC时生物碱对流动相的PH值很敏感。 三萜皂苷的提取与分离 （1）提取：三萜皂苷常用醇类溶剂提取，若皂苷含有羟基、羧基极性基团较多，亲水性强，用稀醇提取效果较好。提取物先用石油醚脱脂，然后再用正丁醇萃取，萃取物再经大孔吸附树脂，得粗皂苷。 （2）分离：采用分配柱色谱法要比吸附柱色谱法好，常用硅胶为支持剂，以氯仿-甲醇-水为或乙酸乙酯-乙醇-水为洗脱剂。 氨基酸的分离 将氨基酸分离成酸性氨基酸，碱性氨基酸，中性氨基酸和芳香族氨基酸。取酸水解氨基酸液适量通过阳离子交换的层析柱，碱性氨基酸就保留在层析柱上；而中性氨基酸和酸性氨基酸的混合液则进入滤液中。再将滤液通过阴离子交换的层析柱，一切酸性氨基酸就保留在层析柱上；而中性氨基酸就进入滤液中。吸附在阳离子交换层析柱上的氨基酸，用2 N HAc洗脱；吸附在阴离子交换层析柱上的氨基酸，用0.5 NNaOH洗脱。 黄酮类化合物的分离 黄酮类化合物在硅胶上的吸附较多，可以采取减压硅胶柱或者中压硅胶柱，上样量稍大一些（这样可以减小吸附量），将样品分段，然后采用sephadex LH－20进行细分。采用sephadex LH－20时，最好选择一个比较合适的水与甲醇的比例（样品不会毫无保留），进行等度洗脱。因为水甲醇梯度洗脱很容易产生气泡。个人认为经过硅胶和sephadex LH－20后，黄酮和多糖应该能够分开。 生物碱与生物酸分离方法 https://www.doczj.com/doc/8913768672.html,/bbs/post/view? ... sty=1&age=0#4271305 差向异构体的分离 https://www.doczj.com/doc/8913768672.html,/bbs/post/view? ... 1&sty=1&age=0#62893 生物碱的提取： 由于各种生物碱的结构不同，性质各异，提取分离方法也不尽相同，主要是根据生物碱的溶解度而定。生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂，除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外，一般均不溶或难溶于水，而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。基于这种特性，可用不同的溶剂将生物碱从中药中提出，常用的提取溶剂有下列3种： （1）非极性溶剂：样品先用10%氢氧化铵溶液湿润，使中草药中与酸结合成盐的生物碱呈游离状态，然后用氯仿或乙醚等提取，一些与酸结合比较稳定的生物碱盐类和鞣酸盐或碱性较强的生物碱盐等，氢氧化铵不能将其完全分解，可用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钙或氧化镁，甚至氢氧化钠碱化，这个方法的缺点是不能提出水溶性生物碱。 （2）极性溶剂：极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水（常
当今国内麻黄碱提取分离工艺的概况
按照加工制造所用原料的不同，麻黄素分为天然麻黄素和化学合成麻黄素。天然麻黄素是以麻黄草为原料加工提取的生物碱。化学合成麻黄素是以苯丙酮或其它结构类似的化学品为起始原料，经酰化、溴代、胺化、还原、拆分等多步化学反应合成的。中国是麻黄草产区，也是目前世界上唯一生产天然麻黄素的国家。我国的麻黄草资源丰富,麻黄素产品多为天然提取物。天然产品具有不含合成过程中残留的有害杂质的优点,很受市场欢迎。印度、德国、美国、澳大利亚、俄罗斯等麻黄素也都有较大生产规模,但大多为化学合成品。天然麻黄碱成分主要来源于麻黄科植物双穗麻黄全草、木贼麻黄全草、山岭麻黄全草、中麻黄全草等植物。其中含有多种生物碱，主要有麻黄素和伪麻黄素，这两种生物碱含量约为总生物碱的60-80%。麻黄的药理作用早在5000年前就被我国所认识。1882年一位药理学家在美国首先从麻黄中提取出麻黄素。麻黄草和木贼麻黄在中医学上全草可入药，茎枝去节用作辛温解表药，味微苦，功能为发汗、平喘。主治伤寒表热、发热恶寒无汗等；根入药性平味甘，用于治疗盗汗自汗等。在北纬43-47度是麻黄草最适合的生长区域，我国的新疆、甘肃、内蒙等地都盛产这类植物。我国麻黄素的年产量约为400-500吨。西部含碱量高的每130-150吨麻黄草可提取1吨麻黄素，东部含碱量较低，230-250吨左右才可以提取到1吨。
除满足国内需要外，大量销往国外市场。赤峰地区提取的总碱中，麻黄素约占70%，伪麻黄素约占25%；大同地区麻黄素约占60%，伪麻黄素约占35%；新疆、甘肃地区伪麻黄素约占80%。我国麻黄素生产始于1920年的全国经济委员会附属药厂，该厂于1937年毁于战火。1940年上海新亚制药厂恢复生产。建国后麻黄素生产被定为首批恢复与建设的项目之一，1950年大同麻黄素厂恢复生产,赤峰制药厂开始投产,新疆制药厂也于1960年代开始生产。现全国麻黄素类产品生产厂达20多家,其中新疆10家,内蒙古6家,其余分布在山西、宁夏、青海、吉林、辽宁等省。但是近来麻黄碱的亩产量下降，麻黄草含碱量由原来的1% --1.5%下降到0.7%左右。一吨麻黄草理论上可以提取7公斤麻黄碱，但实际操作中要损失很多。一吨植物提取麻黄素需要消耗麻黄草230-250吨。按目前市场价计算，麻黄草正常市场价一万多元一吨，高的两万元一吨。提取麻黄素仅麻黄草消耗一项即达2500元每公斤，加上其他提取原料成本至少4000元每公斤以上。而目前市场售价为4500元每公斤左右，植物提取麻黄素已没有成本优势。同时，麻黄草根系发达，是西北戈壁重要的固沙植物，“坚挺”的“绿色卫士”。据统计，每提取一公斤麻黄碱需5亩麻黄草。每年，因采摘麻黄草被沙化的草场约达200万亩，滥采滥挖麻黄草是沙尘暴的重要成因之一。寻求低成本合成麻黄碱的方法，以及
生物碱的提取与分离 化工081班第四小组成员 组长：梁钰泉主讲：牟星（200831204028） 材料收集：秦志浩（200831204023）卢晓波（200831204078）李汪（200831204059）Word制作: 李晓龙（200831204029）柏晓伟（200831204027） PPT 制作: 梁钰泉（200831204025）刘林（200831204031） 生物碱的概述 （一）含义：生物碱是一类来自生物体内含氮有机物，大多氮原子在环状结构内，分子结构复杂，多呈碱性,具有强烈生理活性。 （二）分布概况：1、存在科属:主要分布在植物界, 低等植物...较少高等植物... 多①双子叶植物---- 多如防已科、茄科、罂粟科、夹桃科、毛莨科、豆科、茜草科等。②单子叶植物----- 较少如百合科、石蒜科、兰科2、存在部位:不同植物均可存在于各个部位，在同一植物往往只集中于某一器官。黄连------根长春花------花麻黄------茎罂粟------果3、存在形式：①游离状态-----弱碱性生物碱②与酸结合成盐----- 强碱性生物碱③成酯或苷的形式 （三）生理活性:1、镇痛作用---- 吗啡、延胡索乙素2、抗消炎菌作用----- 黄连素3、抗肿瘤作用---- 喜树碱、美登木碱4、止咳作用---- 可待因 生物碱的分类分类方法(如下5种） 1、按植物来源分类法如长春花，黄连等 2、按生物碱的生源途径分类法 3、按生物碱的溶解性进行分类如游离亲脂性.游离亲性 4、按分子结构中氮原子处的 状态进行分类如双稠吡咯烷（两个吡咯烷共用一个N原子）5、按生物碱氮杂环基本母核分类如异喹啉.吡啶类 生物碱的理化性质 物理性质：1、性状:多为晶形，味苦，有焦灼感.颜色--多为无色，因分子中饱和度大。 少数具有黄色。2、旋光性:多数具有旋光性，且多为左旋而具疗效。3、溶解性: （1）游离亲脂性生物碱：可溶于苯、乙醚、氯仿尤其在氯仿中溶解度大，不溶于水。(2)游离亲水性生物碱：I、结构特点：a、季铵型生物碱---为离子型生物碱，b、具有半极性NO 配位键。c、小分子生物碱，如麻黄碱、菸碱。II、溶解性：-- 可溶于水、甲醇、乙醇，在正丁醇有一定溶解度。难溶于亲脂性强有机溶剂。（3）生物碱盐类：易溶于水，可溶于甲.乙醇难溶于亲脂性有机溶剂。因成盐的酸不同而具有不同的溶解度，其规律是：无机酸生物碱盐水溶性> 有机酸生物碱盐小分子有机酸生物碱盐> 大分子有机酸生物碱盐含氧酸生物碱盐> 卤代酸生物碱盐HCl 〉HBr 〉HI 化学性质：（一）碱性；（二）沉淀反应：生物碱在酸性水溶液中，与某些试剂生成难溶于水的复盐或分子复合物的反应。 用途：鉴别：检查生物碱有无（定性反应）；显色剂：薄层色谱，纸色谱提取分离：检查是否提取完全分离纯化：雷氏铵盐用于季铵碱的分离 常用生物碱沉淀剂碘化物复盐类碘化铋钾试剂：桔红色沉淀碘—碘化钾：红棕色沉淀碘化汞钾：类白色沉淀（若加过量试剂，沉淀溶解）重金属盐类磷钼酸试剂：白色或黄褐色沉淀硅钨酸试剂：淡黄或灰白色沉淀大分子酸类苦味酸试剂：黄色结晶其它：硫氰酸铬钾（雷氏铵盐）：红色沉淀或结晶（季铵碱）沉淀反应结果判断 a.鉴别生物碱的存在，需要采用三种以上生物碱试剂。 b.排除假阳性反应，除去水提液 中含有的蛋多肽、鞣质等杂质。 c.仲胺类不易与生物碱沉淀试剂反应，如麻黄碱.
(整理)天然药物化学-生物碱习题
第十章生物碱【习题】 （一）选择题 [1-220] A型题[1-58] 1.生物碱不具有的特点是 A.分子中含N原子 B. N原子多在环内 C. 具有碱性 D. 分子中多有苯环 E.显著而特殊的生物活性 2.具有莨菪烷母核的生物碱是 A. 甲基麻黄碱 B. 小檗碱 C. 阿托品 D. 氧化苦参碱 E. 乌头碱 3.属于异喹啉生物碱的是 A. 东莨菪碱 B. 苦参碱 C. 乌头碱 D. 小檗碱 E. 麻黄碱 4.在常温下呈液体的生物碱是 A. 槟榔碱 B. 麻黄碱 C. 苦参碱 D. 乌头碱 E. 莨菪碱
5. 具有挥发性的生物碱是 A. 吗啡碱 B. 小檗碱 C. 苦参碱 D. 麻黄碱 E. 乌头碱 6. 具有升华性的生物碱是 A. 烟碱 B. 咖啡因 C. 小檗胺 D. 益母草碱 E. 氧化苦参碱 7. 生物碱的味多为 A. 咸 B. 辣 C. 苦 D. 甜 E. 酸 8. 具有颜色的生物碱是 A. 小檗碱D. 莨菪碱C. 乌头碱 D. 苦参碱 E. 麻黄碱 9. 无旋光性的生物碱为 A. 伪麻黄碱 B. 小檗碱 C. 烟碱 D. 乌头碱 E. 长春新碱 10. 表示生物碱碱性的方法常用 A. pkb B. Kb C. pH D. pka E. Ka 11. 生物碱碱性最强的是
A. 伯胺生物碱 B. 叔胺生物碱 C. 仲胺生物碱 D. 季铵生物碱 E. 酰胺生物碱 12.水溶性生物碱主要指 A. 伯胺生物碱 B. 仲胺生物碱 C. 叔胺生物碱 D. 两性生物碱 E. 季铵生物碱 13. 溶解脂溶性生物碱的最好溶剂是 A. 乙醚 B. 甲醇 C.乙醇 D. 氯仿 E. 水 14.生物碱沉淀反应呈桔红色的是 A. 碘化汞钾试剂 B. 碘化铋钾试剂 C.饱和苦味酸试剂 D. 硅钨酸试剂 E. 碘-碘化钾试剂 15. 生物碱沉淀试剂反应的介质通常是 A. 酸性水溶液 B. 碱性水溶液 C. 中性水溶液 D. 盐水溶液 E. 醇水溶液 16.水溶性生物碱分离的常用方法是 A. 碘化汞钾沉淀法 B. 硅钨酸沉淀法 C. 雷氏盐沉淀法 D. 苦味酸沉淀法 E. 碘化铋钾沉淀法 17. 用离子交换树脂法分离纯化生物碱时，常选用的离子交换树脂是
生物碱常用的提取方法 生物碱的提取： 由于各种生物碱的结构不同，性质各异，提取分离方法也不尽相同，主要是根据生物碱的溶解度而定。生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂，除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外，一般均不溶或难溶于水，而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。基于这种特性，可用不同的溶剂将生物碱从中药中提出，常用的提取溶剂有下列3种： （1）非极性溶剂：样品先用10%氢氧化铵溶液湿润，使中草药中与酸结合成盐的生物碱呈游离状态，然后用氯仿或乙醚等提取，一些与酸结合比较稳定的生物碱盐类和鞣酸盐或碱性较强的生物碱盐等，氢氧化铵不能将其完全分解，可用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钙或氧化镁，甚至氢氧化钠碱化，这个方法的缺点是不能提出水溶性生物碱。 （2）极性溶剂：极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水（常用0.1%～1%盐酸、硫酸、乙酸、酒石酸等）以及缓冲液等进行提取，该方法较简便，但提出的杂质较多，需进一步净化。 （3）混合溶剂：用不同极性的溶剂按不同比例混合，可以较好地进行提取，如麦角用氯仿：甲醇：氢氧化铵（90:9:1），百部、粉防已用乙醚：氯仿：乙醇：10%氢氧化铵溶液（25:8:25:1）等。 水溶性生物碱还可采用与生物碱沉淀试剂如雷氏盐（硫氰化铬铵）、磷钨酸等生成不溶的复盐而从水溶液中析出。生物碱与雷氏盐生成的沉淀可溶于丙酮，再通过阳离子交换树脂，用氢氧化铵洗脱即得游离的生物碱，生物碱与磷钨酸生成的沉淀可与固体碳酸钾研磨使干燥，再用无水乙醇热提。 实际上，每种分析法的建立都要对上述三类溶剂作比较，以优选出最佳提取溶剂。 生物碱的提取方法，常用的有冷浸、渗漉、超声波、索氏提取、热回流提取，由于中药分析所涉及到的大部分内容是有机化合物微量分析，故需要的样品量很少，因此，实际上是少量样品与大量提取溶剂，加上样品又经粉碎过筛，常常冷浸提取液中被测组分浓度与提取液中粉碎的样品内所含被测组分相当，即能提取完全。为了使提取更完全，也常常对上述方法进行组合如冷浸-渗漉，冷浸-超声 波，冷浸-索氏提取，冷浸-热回流提取，因冷浸、冷浸-超声波提取操作简便，
生物碱的提取： 由于各种生物碱的结构不同，性质各异，提取分离方法也不尽相同，主要是根据生物碱的溶解度而定。生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂，除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外，一般均不溶或难溶于水，而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。基于这种特性，可用不同的溶剂将生物碱从中药中提出，常用的提取溶剂有下列3种： （1）非极性溶剂：样品先用10%氢氧化铵溶液湿润，使中草药中与酸结合成盐的生物碱呈游离状态，然后用氯仿或乙醚等提取，一些与酸结合比较稳定的生物碱盐类和鞣酸盐或碱性较强的生物碱盐等，氢氧化铵不能将其完全分解，可用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钙或氧化镁，甚至氢氧化钠碱化，这个方法的缺点是不能提出水溶性生物碱。 （2）极性溶剂：极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水（常用0.1%～1%盐酸、硫酸、乙酸、酒石酸等）以及缓冲液等进行提取，该方法较简便，但提出的杂质较多，需进一步净化。 （3）混合溶剂：用不同极性的溶剂按不同比例混合，可以较好地进行提取，如麦角用氯仿：甲醇：氢氧化铵（90:9:1），百部、粉防已用乙醚：氯仿：乙醇：10%氢氧化铵溶液（25:8:25:1）等。 水溶性生物碱还可采用与生物碱沉淀试剂如雷氏盐（硫氰化铬铵）、磷钨酸等生成不溶的复盐而从水溶液中析出。生物碱与雷氏盐生成的沉淀可溶于丙酮，再通过阳离子交换树脂，用氢氧化铵洗脱即得游离的生物碱，生物碱与磷钨酸生成的沉淀可与固体碳酸钾研磨使干燥，再用无水乙醇热提。 实际上，每种分析法的建立都要对上述三类溶剂作比较，以优选出最佳提取溶剂。 生物碱的提取方法，常用的有冷浸、渗漉、超声波、索氏提取、热回流提取，由于中药分析所涉及到的大部分内容是有机化合物微量分析，故需要的样品量很少，因此，实际上是少量样品与大量提取溶剂，加上样品又经粉碎过筛，常常冷浸提取液中被测组分浓度与提取液中粉碎的样品内所含被测组分相当，即能提取完全。为了使提取更完全，也常常对上述方法进行组合如冷浸-渗漉，冷浸-超声波，冷浸-索氏提取，冷浸-热回流提取，因冷浸、冷浸-超声波提取操作简便，故使用较多，必要时，要对上述方法作比较，以优选出最佳提取方法。分离： 1.净化 上述方法得到的总生物碱中常含有大量杂质，在分离之前一般需净化。净化的方法常依据提取方法及含有的杂质而定。 ?水或酸水提取液的净化 1. 离子交换树脂法 提取液 │ │通过强酸型（氢型）阳离子交换树脂 ┌──────┴───────────┐ ↓↓ 流出液树脂柱 （非碱性物质）┌──────┴───────────┐ │方法一│方法二 │氨液碱化树脂│碱
按照加工制造所用原料的不同，麻黄素分为天然麻黄素和化学合成麻黄素。天然麻黄素是以麻黄草为原料加工提取的生物碱。化学合成麻黄素是以苯丙酮或其它结构类似的化学品为起始原料，经酰化、溴代、胺化、还原、拆分等多步化学反应合成的。中国是麻黄草产区，也是目前世界上唯一生产天然麻黄素的国家。我国的麻黄草资源丰富,麻黄素产品多为天然提取物。天然产品具有不含合成过程中残留的有害杂质的优点,很受市场欢迎。印度、德国、美国、澳大利亚、俄罗斯等麻黄素也都有较大生产规模,但大多为化学合成品。天然麻黄碱成分主要来源于麻黄科植物双穗麻黄全草、木贼麻黄全草、山岭麻黄全草、中麻黄全草等植物。其中含有多种生物碱，主要有麻黄素和伪麻黄素，这两种生物碱含量约为总生物碱的60-80%。麻黄的药理作用早在5000年前就被我国所认识。1882年一位药理学家在美国首先从麻黄中提取出麻黄素。麻黄草和木贼麻黄在中医学上全草可入药，茎枝去节用作辛温解表药，味微苦，功能为发汗、平喘。主治伤寒表热、发热恶寒无汗等；根入药性平味甘，用于治疗盗汗自汗等。在北纬43-47度是麻黄草最适合的生长区域，我国的新疆、甘肃、内蒙等地都盛产这类植物。我国麻黄素的年产量约为400-500吨。西部含碱量高的每130-150吨麻黄草可提取1吨麻黄素，东部含碱量较低，230-250吨左右才可以提
取到1吨。除满足国内需要外，大量销往国外市场。赤峰地区提取的总碱中，麻黄素约占70%，伪麻黄素约占25%；大同地区麻黄素约占60%，伪麻黄素约占35%；新疆、甘肃地区伪麻黄素约占80%。我国麻黄素生产始于1920年的全国经济委员会附属药厂，该厂于1937年毁于战火。1940年上海新亚制药厂恢复生产。建国后麻黄素生产被定为首批恢复与建设的项目之一，1950年大同麻黄素厂恢复生产,赤峰制药厂开始投产,新疆制药厂也于1960年代开始生产。现全国麻黄素类产品生产厂达20多家,其中新疆10家,内蒙古6家,其余分布在山西、宁夏、青海、吉林、辽宁等省。但是近来麻黄碱的亩产量下降，麻黄草含碱量由原来的1% --1.5%下降到0.7%左右。一吨麻黄草理论上可以提取7公斤麻黄碱，但实际操作中要损失很多。一吨植物提取麻黄素需要消耗麻黄草230-250吨。按目前市场价计算，麻黄草正常市场价一万多元一吨，高的两万元一吨。提取麻黄素仅麻黄草消耗一项即达2500元每公斤，加上其他提取原料成本至少4000元每公斤以上。而目前市场售价为4500元每公斤左右，植物提取麻黄素已没有成本优势。同时，麻黄草根系发达，是西北戈壁重要的固沙植物，“坚挺”的“绿色卫士”。据统计，每提取一公斤麻黄碱需5亩麻黄草。每年，因采摘麻黄草被沙化的草场约达200万亩，滥采滥挖麻黄草是沙尘暴的重要成
生物碱的提取与分离 摘要 生物碱是一类具有显著生物活性的含氮有机化合物，是许多药用植物的有效成分。生物碱的溶解性能是生物碱提取与分离的重要依据。生物碱及其盐类的溶解度与生物碱分子中氮原子的存在形式、极性基团的有无及数目、采用的溶剂种类都有密切关系。本文综述了近几年来不同的提取和分离方法在生物碱提取分离中应用和进展。 关键词：生物碱，提取，分离
Extraction and Separation of Alkaloids ABSTRACT Alkaloids are a class of organic compounds containingnitrogen with significant biological activity, is the effective ingredients in many medicinal plants. Solubility alkaloids is an important basis for the extraction and separation ofalkaloids. The nitrogen atoms and molecules solubilityalkaloids alkaloids and their salts in the presence of polar groups form, the existence of the number, the type of solventare closely related. This paper reviewed the different methods of extraction and separation of application and advance in separation and extraction of alkaloids. KEY WORDS: Alkaloids,Extraction,Separation
生物碱的提取和分离方法综述 B11070609 黄秀静 摘要 生物碱是一类具有生理活性的物质，是许多药用植物的重要有效成分之一。一些生物碱因其具有抗肿瘤、抗癌、低毒、低成本的特点,最近已经成为人们研究的焦点。利用现代分离技术把生物碱从天然产物中分离出来并对其进行纯化, 对于开发其药用价值, 以满足天然药物和天然保健品日益高涨的社会需求, 促进中药走向世界, 提高天然产物的经济和社会效益均具有非常重要的意义。 关键词：生物碱;药用植物; 有效成分;提取;分离纯化技术 生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮化合物,具有广泛的生理功能,是许多药用植物的有效成分,目前运用于临床的生物碱药品已达80 种之多, 相当多的生物碱具有抗肿瘤活性、低毒性和成本低之特性, 因而引起了人们的广泛关注。与此同时,人们对生物碱的提取和分离方法研究也在不断地深入和加强。随着各类生物碱的市场需求量的增加,经济效益的提高,提取分离生物碱的方法也在不断改进和提高。本文综述了近年来,不同的提取和分离方法在生物碱提取分离中的应用和进展。随着大众对生物碱药用价值的认识提高,生物碱的提取与分离方法将更加高效、迅速、完善。 1. 生物碱的概述 生物碱 ( Alkaloids ) 一般指存在于生物体内的碱性含氮化合物, 多数具有复杂的含氮杂环, 有光学活性和显著的生理效应。生物碱的发现始于 19 世纪初, 是人们研究得最早、最多的一类天然有机化合物。据统计, 1952 年以前共发现生物碱 950 种,到 1962 年达到 2107 种, 1972 年又上升到了 3443种, 目前已发现生物碱约 6000 种, 并且仍以每年约 100 种的速度递增。多数生物碱具有显著的生理活性, 如黄连中的小聚碱 ( 黄连素) 具有抗菌消炎作用; 罗芙木中的利血平具有降压作用; 长春花中的长春新碱具有抗癌活性; 婴粟中的吗啡具有镇痛作用; 延胡索中的去氢紫碱具有抗