第一章至第五章
一、主要名词和概念:
一.
1. 植物细胞全能性:植物体的每一个具有完整细胞核的细胞都具有该物种全部遗传物质,
在一定条件下具有发育成为完整植物体的潜在能力。
2. 脱分化:将已分化的不分裂的静止细胞放在培养基上培养后,细胞重新进去分裂状态,
一个成熟细胞转变为分生状态的过程。
3. 再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可转变为各种不同的细胞类型,形
成完整植株的过程。
4. 器官发生途径:由外植体或愈伤组织诱导形成不定根或不定芽,再获得再生植株的方法
5. 体细胞胚胎发生途径:在组织培养中起源于一个非合子细胞,经过胚胎发生和胚胎发育
过程,形成具有双极性的胚状结构而发育成再生植株的途径。
6. 外植体:由活体植物体上切去下来的,用于组织培养的各种接种材料。包括各种器官、
组织、细胞或原生质体等。
7.褐化现象:指在外植体诱导初分化或再分化过程中,自身组织从表面想培养基释放褐色
物质以至培养基逐渐变成褐色,外植体也随之进一步变褐而死亡的现象。
8. 看护培养:利用活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖的培养方法。
9. 分批培养;把细胞分散在一定容积的培养基中培养,当培养物增值到一定量时,转接继
代,建立起单细胞培养物。
10. 连续培养:利用特质的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
11. 体细胞杂交:使分离出来的不同亲本的原生质体,在人工控制条件下,相互融合成一体,
形成杂种细胞,并进一步发育成杂种植株的技术。
12. 雄核发育:在适宜的离体培养条件下,花粉(小孢子)的发育可偏离活体时的正常发育
转向孢子体发育,经胚状体途径或器官发生途径形成完整植株。
13. 雌核发育:以未受精子房或胚珠为外植体诱导单倍体的方法。
14. 非整倍体:生物体的核染色体数不是染色体基数整数倍,而发生个别染色体数目增减的
生物体。
15. 代换系:生物体的染色体被异源种属染色体所代换的品系。
16. 易位系:某染色体的一个区段移接在非同源的另一个染色体上,具有发生染色体易位的
品种。
17. 附加系:将同种或异种的染色体导入受体中,叫做染色体附加。具有附加染色体的品种
或品系叫附加系。
18. 限制生长保存:改变培养物生长的外界环境条件,限制离体保存材料的生长速度,使细
胞生长至最小限度,但不死亡,从而达到延长继代培养的目的。
19. 超低温保存:指在-80℃(干冰温度)至-196℃(液氮温度)甚至更低温度下保存生物
材料。
20. 体细胞无性系变异:将植物外植体在组织培养过程中,由于受到非生物因子的诱导发生
变异,进而导致再生植株发生遗传变异的现象。
二、各章需掌握的主要容
1.植物组织培养的类型有哪些?
(1)按照外植体类型:胚胎培养;器官培养;组织培养;细胞培养;原生质体培养(2)按照培养基性质:固体培养;液体培养;
(3)按照培养方法:精制培养;震荡培养;看护培养;饲喂培养;微室培养
2.植株再生途径主要有哪些?
(1)经由成愈伤组织再生植株;(2)经由胚状体再生植株
3.完整的植物组织培养实验室包括哪些部分?每一部分具有哪些功能?需要配备哪些仪器设备?自己能独立设计一个组织培养实验室。
(1)准备室,接种室,培养室
(2)A:准备室配置培养基
B:接种室采用无菌操作把材料接种到培养基上
C:培养室在无菌和适宜的培养条件下进行培养。
4.培养基的组成成分包括哪些?常用的植物激素和生长调节剂有哪些?需掌握化学名称和缩写符号。
(1)无机营养,有机营养,植物生长调节物质,糖类,水,琼脂
(2)生长素AUX,细胞分裂素CTK,赤霉素GA,脱落酸ABA
5.茎尖培养的概念,以种苗繁殖为目的的茎尖培养包括哪些阶段?各阶段对培养基条件有哪些要求?
(1)茎尖培养:把茎尖分生组织或包括此分生组织的茎尖分离进行无菌培养。
(2)无菌培养体系的建立→芽的增殖→中间繁殖体的增殖→诱导生根→试管苗的移植(3)一般用MS培养基,之后根据发育方向配制培养基
6.茎尖分生组织培养脱毒的原理是什么?影响脱毒效果的主要因素有哪些?病毒检测方法有哪些?其他脱毒方法还有哪些?
(1)感染病毒后,植株体病毒的分布并不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近经顶端的区域,病毒感染率越低,生长点则几乎不含或含病毒很少。
(2)茎尖大小,取穗大小,取样时间,温度,持续时间,湿度和光照,前处理
(3)茎尖培养脱毒,微体嫁接脱毒,热处理脱毒
(4)花器官等培养脱毒,珠心胚培养脱毒,合并使用热处理、茎尖培养或微茎尖嫁接脱毒
7.种苗离体快繁中污染发生的原因主要有哪些?如何控制污染的发生?
(1)A:材料部灭菌处理不好
B:正常灭菌条件下,生菌能够存活
C:来自寄生植物的污染
D:培养基中材料超过一块相互污染
(2)A:严格保证无菌操作的规性,对培养基接种工具及接种室的严格消毒处理B:抗生素对细菌操作污染的防治
C:真菌污染的防治
D:常用防治污染方法
8.原生质体分离中材料预处理方法有哪些?原生质体分离常用的酶类有哪些?原生质体如何分离和如何纯化?原生质体培养方法有哪些?
(1)低温处理;等渗溶液处理
(2)纤维素酶;半纤维素酶;果胶酶;崩溃酶
(3)A:分离:取材→酶液配制→酶解处理→使酶解后的混合物穿过镍丝网B:纯化:①离心法:利用比重原理,低速离心使原生质体沉于底部
②漂浮法:根据原生体与细胞碎片或细胞器比重的不同来分离原生质体
③界面法:采用两种不同密度的溶液,离心后使完整的原生质体处在两液
相的界面
(4)平板培养法;看护培养法;微室培养法;液体浅层培养法;固-液体双层培养法
9.原生质体融合方法有哪些?杂种细胞如何筛选?
(1)A:化学诱导融合:盐类融合法;高pH高钙离子法;PEG法
B:物理诱导融合:显微操作;离心震荡;激光照射;电融合
(2)A:显微筛选技术:荧光染料标记,异硫氰酸荧光素(发绿色荧光),碱性蕊香红荧
光素(发红色荧光)
B:互补选择法:利用两个亲本具有不同的遗传和生理特征,在特定培养条件下,只
有发生互补作用的杂种细胞才能生长的选择方法
C:遗传标记筛选技术:基因互补筛选,利用隐性非等位基因互补筛选体细胞杂种
10.离体小孢子发育(雄核发育)途径有哪些?花粉分离方法有哪些?影响花药和花粉培养的主要因素有哪些?培养适宜时期是哪个时期?预处理方法有哪些?
(1)小孢子发育途径;营养细胞发育途径;生殖细胞发育途径;生殖细胞和营养细胞共同发育途径
(2)花粉漂浮自然释放法;人工挤压法;机械法
(3)供体植株基因型;小孢子发育时期;供体植株生理状态;预处理;培养及成分;培养条件;接种密度和方向
(4)一般来说是小孢子发育到单核期左右(第一次有丝分裂前)
(5)低温;热激;化学药剂;高渗透压;离心
11.植物染色体加倍方法有哪些?化学方法诱导加倍常用试剂有哪些?影响加倍的因素包括哪些?多倍体鉴定方法有哪些?
(1)机械损伤;各种射线;高速离心;异常温度
(2)秋水仙素;氨磺灵;氟乐灵
(3)外植体;加倍剂类型;加倍剂浓度和处理时间;加倍剂的加入时间;助剂
(4)A:形态学鉴定:各自独特的外观
B:细胞学鉴定:染色体计数法
C:生理生化鉴定:各种营养物质的含量、酶活性的测定
D:分子生物学鉴定:分子原位杂交;分子标记
12.限制生长保存方法有哪些?超低温保存的基本程序是什么?
(1)低温保存;干燥保存;生长抑制保存;高渗透压保存
(2)材料准备→预处理→冷冻处理→冷冻储存→解冻→再培养
13.体细胞无性系变异的来源有哪些?无性系变异的发生与哪些因素有关?
(1)A:外植体细胞中预先存在而在再生植株中表现出来的变异;
B:组织培养过程中诱导产生的变异
(2)A:染色体数目变异:整倍型变异;非整倍型变异
B:体细胞染色体结构变异
C:基因突变:核基因突变;细胞质基因突变
D:转座因子的活化:转座因子的激活也是导致植物体细胞无性系高频率变异的主要
原因之一。转座因子是指能在基因组中移动和修饰基因表达
的DNA序列
E:DNA甲基化状态的改变
第六章园艺植物的染色体工程
1.园艺植物单倍体制备有哪些途径?
答:(1)雄配子途径。采用花药培养或花粉培养,使小孢子改变原来的配子体发育途径,转向孢子体发育途径,形成花粉胚或花粉愈伤组织,最后形成花粉植株,从中鉴定出单倍体植株并使之加倍成纯合二倍体。
(2)雌配子途径。使园艺植物的胚囊中具有单倍性染色体构成的细胞,如未受精的子房或胚珠,在适当的条件下发育成单倍体植株。
2.离体条件下,雄(雌)核发育各有哪些发育途径?
答:雄核:(1)小孢子发育途径(2)营养细胞发育途径(3)生殖细胞发育途径(4)生殖细胞和营养细胞共同发育途径。
雌核:(1)助细胞或胚囊的无配子生殖产生单倍体(2)卵细胞、助细胞和反足细胞发育产生单倍体(3)非正常发育的大孢子四分体产生单倍体。
3.试述花药(花粉)培养的全过程及主要影响因素。
答:基本程序应包括外植体选择、预处理、表面灭菌、接种、培养、再生植株、单倍体植株鉴定、染色体加倍及获得纯合二倍体等步骤。
影响因素:
(1)供体植株基因型。
(2)小孢子发育时期。一般来说单核期最适合。
(3)供体植株的生理状态。源激素水平。
(4)预处理。
(5)培养基成分。
(6)培养条件。温度、光照。
(7)接种密度和方向。
4.采用秋水仙素诱导园艺植物多倍体有哪些方法?
答:(1)浸种法;(2)浸芽法;(3)滴苗法;(4)涂抹法;(5)套罩法;(6)毛细管法。
5.创制园艺植物易位系、代换系和附加系分别有哪些方法?
答:(1)易位系。包括常规方法诱导的辐射诱导和杂交诱导,和组织培养诱导中的胚拯救、细胞培养和原生质体培养。
6.试述园艺植物单倍体、多倍体和非整倍体的主要鉴定方法和辅助鉴定方法。
答:(1)形态学鉴定。生长势,分枝数,叶片形状、大小、颜色,花蕾数量、形状,果实形状等都可以作为鉴定的依据。
(2)细胞学鉴定。染色体计数法、流式细胞分析法、核型分析法、气孔大小及保卫细胞叶绿体数目鉴定法、染色中心直径和异染色质数目法、花粉发育过程和花粉活力观察法、减数分裂行为观察法等。
(3)生理生化鉴定。通过对各种营养物质的含量、各种酶活性等方面的测定来对园艺植物染色体工程产物进行辅助鉴定。
(4)分子生物学鉴定。分子原位杂交,分子标记等。
7.目前园艺植物染色体工程还存在着哪些问题?你认为应该如何解决?
答:(1)单倍体。发展相对缓慢,至今仍有很多空白。发展方向:解决有些物种诱导率、可重复性差,很难实际应用的问题;探明通过胚状体途径诱导雄核发育和雌核发育的适宜条件;找到克服花药培养中的白化现象,二倍体组织的生长对单倍体诱导的影响等问题的有效措施。
(2)多倍体。多倍体基因组发生了广泛的遗传变化,其基因平衡遭到破坏,存在一些缺陷,还有嵌合体问题。发展方向:找出园艺植物各自的适宜倍性,研究和解决多倍体的缺陷、嵌合体问题。
(3)非整数倍体。尚处在初级阶段,成果有限。发展方向:努力拓展园艺植物的研究围,加强生物技术在园艺植物非整倍体制备中的应用。
8.你怎么看待园艺植物染色体工程的前景?
第七章植物基因工程的基础知识与技术
1.简述DNA双螺旋结构模式的要点及其与DNA生物学功能的关系。
答:(1)生物的遗传信息储存于DNA的核苷酸序列中;
(2)DNA双螺旋结构的稳定性主要由互补碱基对之间的氢键和碱基堆积力来维持;
(3)DNA双链经过盘绕压缩使松弛型DNA更为紧密,体积变得更小,在细胞的生命活动中更能保持DNA结构稳定。
2.比较RNA和DNA在结构上的异同点。
答:(1)基本单位不同,DNA为脱氧核苷酸、RNA为核糖核苷酸
(2)DNA的五碳糖为脱氧核糖,RNA的五碳糖为核糖
(3)DNA的碱基为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶,RNA的为腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、尿嘧啶
(4)与DNA相比,RNA种类繁多,分子质量相对较小,通常以单链形式存在,RNA没有形成双螺旋,但也可以有局部的二级结构或三级结构。
3.试述RNA的种类及其生物学作用。
答:(1)mRNA。直接指导蛋白质合成。
(2)tRNA。携带相应的氨基酸将其转运到核糖体上以供蛋白质合成。
(3)rRNA。蛋白质合成工厂核糖体的组成成分。
4.基因工程常用的工具酶有哪些?
答:(1)限制性切酶。一类能够识别双链DNA分子总某一特定核苷酸序列,并能对核酸部的磷酸二酯键进行切割的一种切核酸酶。
(2)DNA连接酶。催化连接分离的DNA片段。
(3)DNA聚合酶。
5.质粒载体、柯斯质粒载体、λ噬菌体载体和酵母人工染色体有何异同点?
答:(1)质粒是能自主复制的双链环状DNA分子。
(2)以λ噬菌体DNA为载体构成的重组DNA分子必须包装成完整病毒颗粒后才具有感染宿主的能力。经包装后重组DNA分子转化率提高100-1000倍。这类载体可以有效克隆15kb 大小的外源基因。
(3)科斯质粒是人工构建的,含有λDNA 的粘性(cos)末端序列、质粒复制起始区及质粒一个抗药性标记的、兼具质粒与λ噬菌体DNA载体双重性质的特殊载体。
(4)YAC 载体主要是用来构建大片段 DNA 文库,特别用来构建高等真核生物的基因组文库,并不用作常规的基因克隆。
6.简述PCR技术的基本原理。
答:根据已知的待扩增的DNA片段序列,人工合成与该DNA两条链末端互补的两段寡核苷酸引物,在体外将DNA模板在酶促作用下进行扩增。PCR全过程可分为DNA模板变性、退火、延伸三个步骤,经若干循环所组成。首先高温作用使模板DNA变性解链,然后降低温度使引物与模板DNA链退火,在TaqDNA 聚合酶作用及dNTP底物存在下,引物链将沿着5’~3’方向延伸与模板互补的新链,新链则可作为下一次反应的模板,因此扩增产物的量以指数级方式增加。通常单一拷贝的基因经25~30循环可扩增100万~200万拷贝。
7.核酸分离主要有哪些方法?
答:DNA的分离:CTAB法,SDS法;
RNA的分离:1)总RNA的提取
苯酚法,异硫氰酸胍法及氯化锂沉淀法
2)mRNA的分离
亲和层析的原理
8.什么是分子杂交?分子杂交的主要技术有哪些?
答:当带有互补的特定核苷酸序列的单Array链DNA或RNA混合在一起时,其特定的
同源区段将会退火形成双链结构。可以
通过观察杂种核酸分子的形成情况来
判断不同来源DNA的亲缘关系。
Southern杂交:检测经限制性切核
酸酶切割后的DNA片段中是否存在与
探针同源的序列。
Northern杂交:指将RNA变性及电
泳分离后,并转移到固相支持物上,用
杂交反应来鉴定其中特定mRNA分子的
含量及其大小。
Western印迹:蛋白质经过SDS-PAGE
后,转移到膜上再与抗体探针结合进行
检测的方法。
菌落原位杂交:将细菌从培养平板转移到硝酸纤维素滤膜上,然后将滤膜上的菌落裂解以释放DNA,将DNA烘干固定于膜上与32P标记的探针杂交,放射自显影检测菌落杂交信号,
并与平板上的菌落对位。
第八章
1.什么是基因组文库?简述构建大片段基因组文库的主要步骤。
答:园艺植物基因组文库:指的是来自园艺植物基因组全部DNA片段组成的基因文库。基因组DNA文库反映基因组的全部遗传信息。
构建大片段基因组文库的主要步骤:1,载体的制备(包括载体DNA的分离,载体DNA的酶切,载体的脱磷酸化,载体DNA的纯化等步骤);2.大片段基因组DNA的制备;3,大片段DNA与克隆载体的连接;4,载体的遗传转化;5,克隆的挑取、验证;6,文库的扩增、分装及保存。
2.简述合成cDNA第二链的主要方法。
答:自身引导合成法、置换合成法、同聚物引导法。
3.简述图位克隆技术的原理及其优缺点。
答:原理:首先找到一个与目标基因相连的DNA分子标记,然后通过染色体步移技术克隆分离出目标基因。
优缺点:到目前为止,已有多个植物抗病基因通过该技术被分离,但是他们都具有较小的基因组、高密度的分子标记连锁图和较稳定成熟的转化系统。而对于基因组较大、重复序列较多的一些园艺植物,采用图位克隆法分离基因要步移大量的DNA片段,投资大,效率低。而且由于基因组中往往存在大量的重复序列,以及被用来步移的DNA大片段插入文库含有许多嵌套克隆或克隆后的重排现象等原因,染色体步移十分困难。
4.简述转座子标签法的基本步骤及其优缺点。
答:利用异源转座子分离植物基因的一般操作步骤是:1,采取农杆菌介导等适当的转化方法把转座子导入目标之五,设法将转座子插入到目标基因部或邻近位点,引起表型突变。2,通过表型筛选获得纯合突变株。3,构建纯合突变株的基因组文库。
4,以转座子片段作为探针,从该基因组文库中筛选含转座子片段的克隆。5,以该克隆作为探针,筛选另一正常植株的核基因组文库,获得完整的正常目的基因。
优缺点:利用转座子标签法可在不了解基因产物的生化性质和表达模式的情况下分离植物基因,因此该技术已被广泛应用于植物功能基因的克隆研究,目前利用该法已经从多种植物中克隆了上百个基因。但是该技术的前提条件是要筛选出转座子插入的突变体。在实际操作中,由于转座频率往往很低,因此需要筛选的突变体群体较大。而且,对于那些需在特定环境或特定发育阶段才有突变表型的基因,往往由于看不到明显的突变表型而被忽略。另外,由于基因的功能补偿等机制的作用,即使有些基因产生了插入突变,也可能看不到突变表型,因而不能运用该方法。
5.差异表达基因分离法主要包括哪几种方法?各有何优缺点?
答:mRNA差异显示(DDRT-PCR)、抑制性消减杂交(SSH)、代表性差异分析(RDA)、基因表达系列分析(SAGE)、cDNA-AFLP技术。
mRNA差异显示(DDRT-PCR):优点:简便、快速、RNA有量少、效率高。主要用于比较两种以上特定生理状态或不同发育阶段的mRNA样品间基因表达的差异。
缺点:1,假阳性特别高,增加了后续工作难度。2,由于PCR自身反应条件的敏感性,mRNA差异显示技术重复性较差。3,扩增片段较小,不能代表真正差异表达的
基因,且上游的差异表达信息量的不到检测。4,对高拷贝数mRNA有较强的倾向性,不能用于反映低拷贝数的mRNA。
抑制性消减杂交(SSH):优点:1,假阳性率大大降低;2,目的序列富集程度较高,且丰度相对一致,确保了低丰度表达的cDNA有被检测的可能性极大地提高了检测效率;3,SSH灵敏度很高,重复性强。
缺点:1,需要较多的其实材料的mRNA;2,更多地依赖于PCR技术,不能同时对数个材料进行比较;3,材料之间存在的过多的差异及小片段缺失也不能有效地被检测。
代表性差异分析(RDA):优点:1,免去了物理方法分离单、双链的繁琐操作,通过接头“修饰”设计,借助PCR技术即能使目的片段得到有效扩增,减少假阳性。2,差减杂交在扩增后的cDNA群体之间进行,不再受供试的mRNA量的限制,拓宽了差减杂交的应用围。3,一次实验课分离得到多个在T组和D组间差异表达基因的cDNA 克隆,并能发现与表性相关的异常基因,检测基因的上调和下调表达。
缺点:1,目的基因间丰度的差异在数轮差减杂交后的群体中保留了下来,在后续的筛选中,高丰度的差异基因容易得到,低丰度的差异基因不易检出,而低丰度的表达产物往往代表相对重要的基因。2,分离出来的差异基因也可能与其表型无关,增加了后续鉴定的工作量。3,对样品T组和D组的纯度要求很高,如果两组材料间差别较大,则用此方法将达不到鉴定差别表达基因的目的。
基因表达系列分析(SAGE):优点:成本低效率高,能很灵敏的检测出那些低丰度表达的基因。
缺点:1,只有那些基因库中存储标签所代表的基因才能被鉴定,对未搜索到匹配序列的标签鉴定存在困难,而且其效率依赖于现有的序列数据。2,如果碱基序列发生错误,或者扩增效率发生变化,也会导致结果失真。3,该法虽然不需分别测定各cDNA的序列,但工作量仍然很大,且操作较为繁琐,需要使用测序仪,普通实验室无法做到。
cDNA-AFLP技术:优点:它可以对生物体全部的mRNA样品进行筛选,具有重复性高、假阳性率低的特点,其可靠性强,重复性可达95%。而且,在转录产物高度表达时,扩增条带的强度能准确反映基因间表达量的差别。
缺点:操作过程繁琐,假阳性率有时也较高。
6.简述基于同源序列的候选基因法分离目的基因的主要方法。
答:1,根据已知基因的保守区设计引物,以待分离此基因的植物基因组DNA或cDNA 为模板直接进行PCR扩增,对扩增产物测序并与已知基因进行序列比较,从而确定该基因是否为待分离基因。2,用用已知序列的基因制备探针,筛选待分离基因的植物核DNA或cDNA文库。再对阳性克隆进行测序,并与已知基因序列进行同源性比较,最后经转化鉴定是否为待分离的基因。
7.简述RACE技术的基本原理及其优缺点。
答:原理:RACE 是采用PCR 技术由已知的部分cDNA 顺序来扩增出完整cDNA5’和3’末端,是一种简便而有效的方法, 又被称为锚定 PCR和单边PCR。
3’RACE的原理
一)加入oligo(dT)17和反转录酶对mRNA进行反转录得到(-)cDNA;
二)以oligo(dT)l7和一个35bp的接头(dT17-adaptor)为引物,其中在引物的接头中有一在基因组DNA中罕见的限制酶的酶切位点。这样就在未知cDNA末端接上了一段特殊的接头序列。再用一个基因特异性引物(3 amp)与少量第一链(-)cDNA退火并延伸,产生互补的第二链(+)cDNA。
三)利用3amp和接头引物进行PCR循环即可扩增得到cDNA双链。扩增的特异性取决于3amp的碱基只与目的cDNA分子互补.而用接头引物来取代dT17一adaptor则可阻止长(dT)碱基引起的错配。
5’RACE的原理
5’RACE与3’ RACE略有不同。首先,引物多设计了一个用于逆转录的基因特异引物GSP-RT;其次,在酶促反应中增加了逆转录和加尾步骤,即先用GSP-RT逆转录 mRNA 获得第一链(-)cDNA后,用脱氧核糖核酸末端转移酶和dATP在cDNA5’ 端加poly(A)尾,再用锚定引物合成第二链(+)cDNA,接下来与3’ RACE过程相同。用接头引物和位于延伸引物上游的基因特异性引物(5amp)进行PCR扩增。
全长基因的获得:
1,对3’RACE和5’RACE的产物序列的重叠区域分析,经过拼接获得全长cDNA
2,通过分析RACE产物的3’和5’端序列,重新设计合成相应引物,PCR扩增出全长cDNA
优缺点;优点;操作速度快,节省时间,可在短期获得全长的cDNA。只需极少量的起始反应物质,具有快速、简便、经济、实用性强等优点,还几乎不存在产生非特异产物的可能。缺点:利用RACE技术来获得全长基因并不容易,甚至经常会发生错误的扩增和克隆结果,尤其是对于丰度较低、长度较长的基因。
8.简述基因芯片技术的原理及其优缺点。
答:原理:将许多特定的寡核苷酸片段或基因片段作为探针,有规律地排列固定于支持物上,然后使其与待测的标记样品基因按剑姬配对原理进行杂交,再通过共聚焦荧光检测系统等对芯片进行扫描,并配以计算机系统对每一探针上的荧光信号做出比较和检测,从而迅速得出所要的信息。
优缺点:优点:具有高度的敏感性和特异性,有高信息量、快速、样品用量少、用途广泛等优点。
缺点:基因芯片需要大量已知的、准确的DNA和cDNA片段的序列信息,而且,需要高密度芯片制作的精密机械系统和操作工艺及微弱的杂交信号检出装置,芯片的制作和使用成本均较高,所以尚难在一般的实验室中普及使用。
第九章园艺植物遗传转化载体的构建
1.什么叫卸甲载体?常用的卸甲载体有几种类型?
卸甲载体是无毒的Ti质粒载体,又称onc-载体。是指为了使野生型的Ti质粒成为基因转化的载体,必须切除T-DNA中onc基因,即“解除”其“武装”,构建成“卸甲载体”。
常用的卸甲载体类型:pGV3850载体、pGV2250载体和pTiB6S3-SE载体3种。
2.Ti共整合转化载体系统的特点及构建策略是什么?
特点:1.Ti共整合载体由两个质粒组成,其中一个是E.coli质粒中间载体,另一个是卸甲Ti质粒组成;2.农杆菌中两个质粒形成一个大的共整合载体,E.coli质粒进入到根癌农杆菌后,以同源重组的方式与Ti质粒整合在一起,形成共合体,相对分子质量较大;3.共合体的形成频率与两个质粒的重组频率有关,相对较低;4.必须用Sounthern杂交或PCR对大的共整合体质粒进行检测;5.构建是比较困难。
Ti共整合转化载体构建策略:
基于中间载体与受体Ti质粒重组序列的不同,共整合载体可分为以pBR322序列为同源序列的转化载体系统和基于左边界部同源区(LIH)的转化载体系统,即SEV系统。
1.基于pBR322同源序列的共整合载体的构建策略:
⑴中间载体导入农杆菌;(2)中间载体与受体Ti质粒的同源重组;(3) 共整合载体的选择
2.SEV系统的构建:
(1) pTiB63S3-SE质粒作为卸甲载体;(2)pMON200作为SEV中间载体;(3)通过三亲杂交将中间载体pMON200或pCIT30导入农杆菌,形成SEV的共整合载体。
3.Ti双元表达载体系统有什么特点?它对于共整合系统具有哪些优点?
双元载体系统特点:1.具有RK2质粒的复制功能,可以在大肠杆菌和根癌农杆菌中复制,并且与Ti质粒是向容的;2.具有Ti质粒的左右两侧或右侧的边缘区序列,使DNA可以转移到植物细胞; 3.边缘区序列包含植物选择标记嵌合基因,用于转基因阳性株的初步筛选; 4.带有抗生素基因,可以作为细菌转化因子的选择记号。
与共整合系统比较的优点:1.构建简单2.具有双复制位点3.接合频率更高4.在鉴定上更为容易。
4.发根农杆菌Ri质粒有什么特点?它可否与Ti质粒在异源T-DNA与Vir区的情况下完成DNA的转移?
特点:1.可以不经“解除武装”进行转化,并且转化产生的发根能够再生植株;2.发状根是一个单细胞克隆,可以避免嵌合体;3.Ri质粒可直接作为中间载体;4.Ri质粒和Ti质粒可以配合使用建立双元载体系统,拓展了两类质粒在植物基因工程中的应用围;5.发根适合于进行离体培养。
Ri质粒的T-DNA可以在Ti质粒Vir基因的诱导下进行T-DNA的转化。
5.选择标记基因和报告基因的特点是什么?常用的选择基因和报告基因各有哪几种?
选择标记基因特点:1.编码一种不存在于正常植物细胞中的酶;2.基因较小,可构成嵌合基因;3.能在转化细胞中得到充分表达;4.检测容易,并能定量分析。列举:新霉素磷酸转移酶基因(npt II)、潮霉素磷酸转移酶基因(hpt)、二氢叶酸还原酶基因(dhfr)、草丁膦乙酰转移酶基因(bar)
报告基因特点:1.其产物在原植物中不存在或本底很低,并对宿主植物细胞无毒性;2.表达产物应有适度的稳定性以利于检测;3.检测手段高度敏感,检测方法简单、灵敏并可以定量;
4.检测过程应不具有破坏性。列举:冠瘿碱合成酶基因、萤火虫荧光素基因、绿色荧光蛋白基因、花青素合成相关基因。
6.园艺植物常用的遗传转化载体类型包括哪些?
正以表达载体、反义表达载体、RNA干涉载体、基因打靶载体、启动子缺失载体和瞬时表达载体等。
7.目的基因与载体的连接方法有哪些?
1.插入灭活发;
2.定向克隆法:(1)同聚物加尾法(2)衔接物连接法(3)DNA接头连接法。第十章园艺植物遗传转化
1.园艺植物遗传转化方法有哪些?各有哪些优缺点?
一.外援裸露DNA的转化:(1)化学诱导转化法(2)电穿孔转化法(3)基因枪转化法(4)激光微束穿孔转化法(5)体注射转化法(6)脂质体介导转化法
二.载体介导的DNA转化:(1)根癌农杆菌介导的遗传转化(2)发根农杆菌介导的遗传转化
三.种质转化法:(1)植物原位真空渗入法(2)花粉管通道转化法(3)种子浸泡转化法
2.什么叫选择标记基因和报告基因?试举例说明怎样使用。
选择标记基因:是指在选择压下,编码产物能够使转化细胞、组织具有对抗生素或除草剂的抗性,而非转化细胞则不能在使用选择剂的条件下生长、发育和分化的基因。举例:在园艺植物遗传转化中,将npt II一同转化植物受体细胞,使转化体具有npt II表达产物而对卡那霉素具有抗性。
报告基因:指其编码产物在受体细胞、组织或器官中具有表达活性,能够被快速地测定的一类特殊用途的基因。举例:依据萤火虫荧光素酶在镁离子、三磷酸腺苷和氧的作用下,催化6-羟基喹啉物质生成氧化荧光素,同时放出光子,检测简便、灵敏
。
3.比较Southern杂交、Northern杂交和Western杂交的原理及鉴定目的。
Southern杂交原理:指模板DNA经酶切、凝胶电泳分离、转膜等步骤后,再用标记的单链DNA探针杂交探测的一种技术,其理论基础是碱基互补配对原则。鉴定目的:进行核酸序列分析、重组子鉴定和检测外源基因整合及表达情况,还可清除操作过程中的DNA污染和转化中的质粒残留所引起的假阳性信号。
Northern杂交原理:RNA样品经凝胶电泳、转膜、预杂交后,再用标记的探针与膜上的RNA 杂交,以检验RNA样品中是否有与探针同源的序列,如果有杂交信号,表明整合到植物染色体上的外源基因能正常表达。鉴定目的:研究转基因植株外源基因表达及调控。
Western杂交原理:从植物中提取总蛋白或目的蛋白,将蛋白质样品进行SDS-PAGE,使蛋白质按大小分离,将分离的各种蛋白质条带原位印迹到固相膜上,然后加入特异抗体(一抗),印迹上的目的蛋白(抗原)与一抗结合后,再加入到能与一抗专一结合的被标记的二抗,最后通过二抗上的标记化合物进行检测。鉴定目的:鉴定转基因植株是否能产生特异抗体。
4.什么叫转基因沉默?怎样克服?
转基因沉默:导入并整合进受体基因组中的外源基因在转化体的当代或其后代中出现表达受到抑制,甚至完全不表达的现象,称为转基因沉默。
怎样克服:1.采用合适的转化方法2.使用信号肽3.使用强启动子和诱导型启动子4.使用强终止子5.使用增强子6.使用植物偏爱的密码子7.使用基质结合区序列8.防止甲基化9.改造外源基因。
5.试述基因靶向技术的原理、步骤及当前的应用概况。
基因靶向技术原理:利用同源重组、点突变或随机突变、RNAi等途径使机体已知结构的特定基因失活或缺失。
(一).同源重组进行基因打靶原理:应用同源重组原理,用设计的同源片段替代靶基因片段,从而达到基因剔除的目的。
步骤:1.构建含目的基因和标记基因的重组载体;2.受体细胞的制备;3.用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞,实现同源重组;4.用选择培养基筛选转化细胞;5.转化体培养、筛选及利用表型变化研究目的基因功能。
(二).随机插入突变进行基因打靶原理:利用某些能随机插入基因序列的病毒、细菌或其他基因载体,在目标细胞基因组中进行随机插入突变,建立一个携带随机插入突变的细胞库,然后通过相应的标记进行筛选获得相应的基因剔除细胞。
步骤:1.构建含目的基因的T-DNA载体;2.农杆菌介导法转化植株;3.转基因植株的坚定;
4.插入失活突变植株筛选;
5.T-DNA插入位点基因的克隆。
第十一章
1.与传统育种技术相比较,应用基因工程技术进行园艺植物遗传改良有哪些优点?
答:(1)可提高作物产量和改善作物的抗虫、抗病、抗除草剂等抗逆能力;
(2)改善园艺产品的营养价值和食用风味,如营养成分含量、风味品质、延长货架
寿命和保存时间,以及用食品工程菌生产食品添加剂和功能因子等。
2.举例说明利用转基因技术可以改良蔬菜作物的哪些性状?
答:(1)Li等在番茄中超量表达土豆多酚氧化酶基因(PPO)的cDNA,结果表明强烈抑制了细菌的生长,使感染叶片中细菌密度减少到原来的10%,极大地提高了番茄植株
对于细菌性病害的抗性。
(2)脯氨酶合成酶基因P5CS在胡萝卜中表达使植物的耐盐能力得到了明显提高。
(3)Meyer等将玉米的DFR基因导入白色矮牵牛植株中,是二氢黄酮醇还原为花葵
素,转化后的矮牵牛花色有白色变成砖红色。
3.生物技术在园艺植物育种中的应用有哪些方面?
答:(1)创造雄性核不育系
途径1.通过核酸酶基因的特异空间表达创造雄性不育系
2.利用胼胝质酶提前降解胼胝质壁是雄性不育
3.利用反义基因获得植物雄性不育
4.改变激素含量与比例获得雄性不育植株
5.导入细胞质雄性不育的有关基因导致植物性性不育
6.通过共抑制及RNAi转基因沉默创造植物雄性不育
(2)基因工程雄性不育系的恢复与保持
途径1.利用引起雄性不育基因的抑制基因来恢复育性
2.通过化学调控恢复育性
3.利用定位重组系统来恢复不育植株的育性
4.如何应用生物技术提高园艺植物的光合能力和固氮能力?
答:(1)提高光合能力:
A:C4光合途径关键酶基因的克隆和转化。将C4途径涉及到的磷酸烯醇式丙酮酸
羧化酶(PEPC)、磷酸丙酮酸二激情酶(PPDK)和苹果酸酶的基因从C4植物中克
隆出来并导入C3植物。如把玉米的PPDK基因导入马铃薯中,PPDK活性比对照高
5.4倍。
B:果糖-1,6-二磷酸酶(FBPase)基因。将土豆叶绿体中的FBPase基因转化到土豆块茎的造粉体中,有着更高的活性,合成了更多的淀粉。
(2)提高固氮能力:向不能或固氮能力差的微生物中导入强的固氮基因。将克氏
肺炎杆菌固氮基因(nif)导入不能固氮的植物或微生物中,以获得固氮植物或固
氮微生物。把带有固氮基因的智力PRD1从大肠杆菌K12jc5564导入无固氮能力的
水稻根系菌4502Y中,表现出较强的固氮能力。
5.抗虫转基因园艺植物的获得有哪些途径?
答:将抗虫基因导入植株中。抗虫基因来源有植物、动物、昆虫、真菌、细菌和病毒。第十二章
2.分子标记产生的分子基础是什么?
答:(1)DNA序列酶切位点的碱基发生突变,导致酶切位点消失、酶切产物减少。
(2)DNA序列酶切位点之间缺失或插入一段核苷酸序列,或是酶切位点之间的串联
重复单元数目发生了改变,倒是酶切产物片段长度改变。
(3)单核苷酸突变,即单碱基转换或颠换。
3.园艺植物常用的分子标记有哪些?产生的原理是什么?
答:
(1)RFLP标记:基于Southern杂交。RFLP标记是用限制性切酶酶解具有相对性状的两个群体的DNA,然后通过电泳和Southern杂交技术在酶切后形成的DNA片段中发现这种不同。根据含有与杂交探针同原序列的酶切片段的长度来检测DNA序列。(2)小卫星标记:基于Southern杂交。与RFLP标记原理大致相同,只对限制性切核酸酶和杂交探针有特殊要求。
(3)RAPD标记:基于PCR扩增。RAPD标记的操作步骤与常规PCR基本相似,只是引物不同。常规PCR使用双引物,通常18~30bp,RAPD标记使用单引物,通常为10 bp
的随机序列。
(4)SSR标记:基于PCR扩增。SSR标记就是根据简单重复序列外两翼的特定序列设计引物,用来扩增重复序列本身,由于重复的长度变化极大,所以会得到不同长度的片
段。如果扩增出来的某个片段与某个特定性状存在对应关系,则该片段为该性状的
SSR标记。
(5)ISSR标记:基于PCR扩增。设计出各种能与SSR序列结合的PCR引物,这些引物的3‘端或5’端加上2-4个随机核苷酸,通过PCR反应,对两个相距较近,方向相
反的重复序列之间的DNA序列进行扩增。所扩增的inter SSR区域的多个条带通过
聚丙烯酰胺凝胶电泳或者琼脂糖凝胶电泳得以分辨,扩增带多为显性表现。
(6)AFLP标记;基于PCR扩增。原理是选择性扩增园艺植物基因组DNA的双酶切片段,检测的多态性是酶切位点的变化或酶切片段间DNA序列的插入和缺失。AFLP标记是用DNA限制性切酶酶解具有相对性状的两个群体的DNA,然后对酶切产物进行选择
性扩增,最后在形成的扩增产物中发现不同。这种不同就是与目的性状相连锁的
AFLP标记。
(7)SRAP和TRAP标记:基于PCR扩增。SRAP标记原理是利用外显子G/C含量丰富而含子A/T含量丰富的特点,分别是即正向引物和反向引物,对可读框的外显子和含子、启动子进行PCR扩增,从而产生基于外显子和含子的多态性。TRAP差别仅在于引物不同。
(8)STS、SCAR、CAPS标记
(9)SNP标记:基于Southern杂交和PCR扩增。园艺植物基因组由于单个核苷酸变异而引起DNA序列多态性,包括单碱基转换、颠换以及单碱基的插入或缺失。
4.园艺植物分子标记数据收集过程中应注意哪些问题?
答:多态性=(总条带数-共有条带数)/总条带数
相关系数,距离系数,联合系数。
5.分子标记在园艺植物研究中的应用主要体现在哪些方面?
答:(1)分子遗传图谱构建和基因定位
①分子遗传图谱构建②园艺植物分子遗传图谱的构建及基因定位
(2)分子标记辅助选择育种
①与目标基因连锁分子标记的获得②园艺植物分子标记辅助选择
(3)遗传多样性和亲缘关系分析
(4)核心种质构建
①核心种质构建的原理②园艺植物核心种质的构建
(5)园艺植物品种鉴定与纯度分析
7.利用BSA法获得与园艺植物目标性状紧密连锁分子标记的原理是什么?
答:BSA法的原理是将分离群体中的个体依据研究的目标性状(如抗病和染病)分成两组,在每组群体中把各个个体的DNA等量混合,形成两个DNA混合池。因此又称为近等基因池法。它克服了许多植物不易获得近等基因系的缺点。
8.构建园艺植物核心种质的基本步骤有哪些?
(1)数据收集:收集所有种质资源的现有数据资料。
(2)数据分组:把具有相似数据的种质资源分为一组。
(3)样品选择:把所有种质资料科学地分组后,以合理的取样方法及取样比例选取核心种质。
(4)核心种质管理:建立完善的核心种质繁殖、供种及管理体制,以保证核心种质的有效利用。
第十三章
1.生物信息学研究的任务及容:
任务:以计算机科学、工程和应用数学为基础,进行相关的生物信息的获取,加工、储藏、分配、分析和解释等,即依赖试验和衍生数据的大量存储,将各种各样的生物信息,如基因序列、染色体定位、基因产物的结构和功能及个生物中间的进化关系进行搜集、分类和分析,并实现全世界生命科学界的信息资源共享。
容:1)生物信息的收集储藏和管理。2)基因序列信息的分析,开发信息检索工具及之后的信息自动化处理3)基因功能分析,阐明基因功能 4)生物大分子结构模拟(预测)5)生物信息分析的技术与方法(软件、数据库、数据库的分析工具、新方法、新技术)
2.常用的生物信息学数据库有哪些
基本数据库(DNA序列,蛋白质序列和结构)
二级数据库(对基本数据库的分析、提炼、加工)
1)DNA数据库:GenBank(美国) EMBL欧洲) DDBJ(日本) Biosino(中国)
2)基因组数据库人类基因组数据库(GDB)、酵母基因组数据库(SGD)、
拟南芥基因组数据库(TAIR)
3)蛋白质序列数据库 SWISS-PROT(瑞士):序列、结构域、功能、修饰、突变体
TrEMBL
PIR数据库(4部分):PIR1序列清楚;PIR2序列被检测分类,但冗
余;PIR3未被检测;PIR4未被验证
NRL-3D 蛋白质三维结构已知
OWL数据库
4)蛋白质结构数据库(由X射线晶体衍射和核磁共振测出):PBD数据库 SCOP数据库
CATH数据库
5)蛋白质组数据库(包含所有蛋白质信息)
3.生物信息学在园艺植物上的应用
1)寻找园艺植物新基因:利用EST(?)数据库发现新基因→确定编码区→序列同源搜索
2)克隆新基因:
3)预测园艺植物基因区域
4)预测园艺植物基因功能
5)预测园艺植物蛋白质结构
6)分析园艺植物系统进化关系:核酸,蛋白质序列同源性(1.特征数据:基因,个体,群体,物种的信息2.相似性数据)
4.生物技术发明专利申请需具备的条件
1)实质条件:新颖性,创造性,实用性
2)形势条件:专利申请书、说明书、说明书摘要、专利要求书
3)特殊条件:当申请涉及公众所不能获得的微生物时,需提交保存步骤
5.基因专利有哪些特点(自己总结的)
1)基因功能确定
2)与已公开的基因序列和蛋白质编码的基因序列同源性不能太高,除非休市部分具有特殊效果
3)基因本身和它们编码的氨基酸受保护,未经许可不得制造,使用,销售,进出口
基因专利的种类:基因方法专利、基因产品专利、转基因动植物专利、基因产品用途专利、基因本身专利
6.生物技术发明专利存在的问题
1)基因是否具有可专利性问题(自然产物不能私有)
2)基因专利是否符合单一性(专利申请仅限一项,但属于一个总的构思的发明可算一项) 3)基因专利的充分公开和权力要求围(防止申请人滥用权力)
4)关于动植物品种是否站立保护专利问题(生物的繁殖往往难以保持重复性)
5)道德伦理问题
还有一些知识点吧
1.生物信息学检索系统:SRS信息学检索系统、Entrez信息学检索系统、DBGET/linkDB信息学检索系统
2.核酸和蛋白质同源性比对检索分析系统:从核酸和氨基酸层面分析序列间的相似性、同源性,推测结构和功能上的进化关系(BLAST序列比对检索系统分析、FASTA序列比对检索系统分析、Blitz蛋白质同源性比对检索系统分析)
3.申请专利的步骤:1)确定具体发明点2)是否具有一定新颖性3)完成形式文件的准备4)递交申请5)缴费6)初审7)实审
第十四章
1.为什么要对转基因技术进行安全性评价?
部分人群对这一技术持怀疑态度,认为还不能对他的潜在威胁性做出安全新评价
主要理由:
1)常规育种模拟自然,基因重组和交流围有限(种或近缘),长期实践没有发生什么灾难性后果。
2)转基因把任何生物甚至人工合成基因导入植物,自然界不可能发生,对其后果无法预测。
3)通过安全性评价积累数据可判断基因植物的田间释放或大规模生产是否安全,并对其安全隐患加以限制,避免人类生存及生态环境收到破坏。
2.转基因植物存在哪些潜在风险?
一是转基因植物本身带来的潜在风险;而是基因漂流对其他植物带来的影响,从而个人神态带来威胁。
1)转基因植物成为杂草的可能性:①在引入地持续存在②入侵改变其他植物栖息地③扩散至其他区域
2)转基因植物通过基因漂流对近缘物种的潜在威胁
①转基因植物中的抗病、抗虫、抗除草剂、抗逆境等基因通过转入其他物种和近缘物种而
是原先不是杂草的物种变成杂草。
②多样性消失(人口增长使野生栖息地被破坏,优良品种和杂种普及使传统农家品种消失)
③转基因流入杂草,似的杂草难以控制
3.杂草有那些特征?
1)环境适应能力强,可在多种不同环境下萌发生长
2)种子可长期保存
3)营养生长迅速,很快进入花期
4)只要条件适宜,植物可以持续产生种子
5)不是绝对的自花传粉
6)花粉可以通过媒介传播
7)恶劣环境也能产生种子
8)种子具有远近不同能力的传播途径
9)如是多年生,营养生长能力和再生能力强
10)能够丛生、攀援生长、产生有毒化合物抑制其他植物生长
4.转基因食品对人类健康存在的可能影响
1)毒性2)过敏3)营养不均衡
4)对抗生素的抵抗作用:抗性基因转到胃肠道微生物或上皮细胞中,成功表达,对抗生素产生抗性。
5.什么是实质等同性?
转基因食品与目前市场上销售的传统食品是否具有实质等同性。
概念:如多某一新型食品或制品成分与目前市场上销售的食品或食品成分在实质上相同,那在安全性反面,前者与后者等同处理。
6.我国生物安全管理实施原则有哪些
1)研究开发与安全防并重2)贯彻预防为主的原则3)有关部门系统合作4)公正且科学5)公众参与6)个案处理并逐步完善原则
7.加强转基因植物生物安全对策有哪些?
1)加强生物安全立法2)加强转基因植物及其产品的安全性评价3)建立健全的生物安全监管机制4)建立生物安全防治的相关制度5)积极开展国际合作交流6)重视信息情报工作
自己认为重要的东西:
1.生物安全定义:有人类不当活动干扰、侵害、损害、威胁生物种群的正常生存发展而引起的包括生物、生态系统、热体健康和公司财产到环境污染、破坏、损害。
2.生物入侵方式:①出于生态安全建设、生态保护等目的②贸易、运输、旅游
3.未来应用情况:2025前六:美、阿根廷、加、中、南非、澳大利亚
4.外源基因对植物受体的影响:
1)标记基因影响:通过基因漂流产生超级杂草、对土壤微生物的影响
2)外源基因的影响:
3)插入对职植物响:导致部分基因失活,代谢紊乱
植物学试题 名词解释(12分,2分/个) 1、细胞器; 2、木质部脊; 3、束中形成层; 4、完全叶; 5、花程式; 6、聚合果 二、判断与改错(17分,对的填“ +”,错的填“-”并将错的改正) 1、质体是一类与碳水化合物合成及贮藏相关的细胞器。() 2、根毛分布在根尖的伸长区和成熟区。() 3、根的初生木质部发育顺序为外始式,而在茎中则为内始式。() 4、水生植物叶小而厚,多茸毛,叶的表皮细胞厚,角质层也发达。() 5、胡萝卜是变态根,主要食用其次生韧皮部。() 6、观察茎的初生结构和次生结构都是从节处取横切面。() 7、由3心皮组成的复雌蕊有6条腹缝线。() 8、二体雄蕊就是一朵花中只有两个离生的雄蕊。() 9、双受精是种子植物的重要特征之一。() 10、桃和梨均为假果。() 三、填空(21分,0.5分/空) 1、植物细胞的基本结构包括 _和_两大部分。后者又可分为___________ 、____ 和___ 三部分。 2、保护组织因其来源及形态结丽不厂可分为___________ 和___ 。 3、兰麻等纤维作物所利用的是组织。 4、植物种子是由 , 和三部分构成,但有些种子却只有和两部分,前者称种子,后者 称种子。 5、禾物的内皮层在发育后期其细胞常面增厚,横切面上,增厚的部分呈形。 6、双子叶植物和裸 子植物茎的初生结构均包括、和三部分,玉米等单子叶植 物茎的初生结构包括、和三部分。 7、双子叶植物茎的维管束多为,在初生木质部和初生韧皮部间存在形成层,故又称维管束。 8、叶的主要生理功能包括和等两个方面。 9、一朵完整的花可分为____ 、____ 、___ 、_____ 、 ___ 和____ 六部分。其中最主要的部分是_______ 和_____ 。 10、小抱子母细胞进行减^^前?1雨101二般岳厂、、和组成。花粉成熟时,花粉囊壁一般 只留下和。 11、被子植物细胞的减数分裂在植物的生活史中发生次。 四、选择题(10分,1分/个) 1、光学显微镜下呈现出的细胞结构称。 A .显微结构;B.亚显微结构;C.超显微结构;D.亚细胞结构 2、裸子植物靠输导水分。 A .导管和管胞;B.管胞;C.筛管;D .筛胞 3、成熟蚕豆种子的种皮上一条黑色眉状物是。 A .种脊;B.种脐;C.种阜;D.种柄 4、原表皮、基本分生组织和原形成层属于。 A .居间分生组织;B.原分生组织;C.初生分生组织; D.伸长区 5、在方形(如蚕豆)或多棱形(如芹菜)的茎中,棱角部分常分布有。 A .厚角组织;B.厚壁组织;C.薄壁组织;D.石细胞 6、栅栏组织属于。 A .薄壁组织;B.分生组织;C.保护组织;D.机械组织 7、以下所列的结构,哪一些都是茎的变态?。 A .皂荚的分枝刺,葡萄和豌豆的卷须; B.马铃薯、姜、摹养、芋头; C .莲藕、菊芋、竹鞭、白萝卜、胡萝卜; D .蔷薇和刺槐(洋槐)的刺,豌豆的卷须 8、具的花为整齐花。 A .舌状花冠;B.唇形花冠;C.蝶形花冠;D.十字花冠
《园艺植物生物技术》试卷 姓名: 成绩 1.什么是生物技术?(10分) 答: 生物技术(biotechnology),有时也称生物工程,是指人们以现代生命科学为基础,结合其他基础科学的科学原理,采用先进的科学技术手段,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的。生物技术是人们利用微生物、动植物体对物质原料进行加工,以提供产品来为社会服务的技术。它主要包括发酵技术和现代生物技术。 2.细胞全能性的概念?茎尖培养脱毒的原理?茎尖大小与脱毒效果及成活率的关系?(10分) 答: (1)细胞全能性是指在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因,只要条件许可,都可发育成完整的个体。 (2)茎尖培养脱毒的原理: 病毒在植物体内通过维管束和胞间连丝传播,因此在植物体内含量不均匀,顶端分生组织带毒少,病毒含量低。 (3)进行茎尖培养时,切取茎尖越小,带有病毒的可能性越小,茎尖越小脱毒率越高,脱毒效果越好。但茎尖太小,离体培养时成活率小,反之则反。 3.何谓原生质体融合?园艺植物原生质体融合的基本方法及体细胞杂种的筛选和鉴定技术?(20分) 答: (1)原生质体融合(protoplast fusion):
指通过人为的方法,使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合,借以 获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。 (2)园艺植物原生质体融合的基本方法: 硝酸钠法、高钙离子法、PEG法、电融合法、多聚化合物法以及聚集微束激光法。 (3)体细胞杂种的筛选: 根据不同对象和目的,可用各种方法,如按细胞的形态大小,细胞繁殖状态上的差异,或利用融合细胞对温度、药物的敏感性、营养要求不同等特性进行分离选育,主要有遗传互补选择、形态特征选择、生长特性选择、敏感差异选择、低密度培养选择等方法。 (4)体细胞杂种的技术鉴定: ①、RFLP和RAPD应用于鉴定体细胞杂种;②、种特异重复DNA;③、Southern杂交在体细胞杂交中的应用;④、基因组原位杂交仔植物杂种中鉴定;⑤、其它方法。如SSR、核糖体DNA间隔序列分析及内部转录间隔区分析。 4.园艺植物常用的分子标记有哪些?分子标记在园艺植物研究中的应用主要体现在哪些方面?(20分) 答: (1)园艺植物常用的分子标记有: RFLP(限制性片段长度多态性)、RAPD(随机扩增的多态性DNA)、SSR (简单序列重复)、AFLP(扩增片段长度多态性)等4种。 (2)分子标记在园艺植物中的应用 1)品种鉴别与产权保护
植物学试题一名词解释(12分,2分/个) 1、细胞器; 2、木质部脊; 3、束中形成层; 4、完全叶; 5、花程式; 6、 聚合果 二、判断与改错(17分,对的填“+”,错的填“-”并将错的改正) 1、质体是一类与碳水化合物合成及贮藏相关的细胞器。( ) 2、根毛分布在根尖的伸长区和成熟区。( ) 3、根的初生木质部发育顺序为外始式,而在茎中则为内始式。( ) 4、水生植物叶小而厚,多茸毛,叶的表皮细胞厚,角质层也发达。( ) 5、胡萝卜是变态根,主要食用其次生韧皮部。( ) 6、观察茎的初生结构和次生结构都是从节处取横切面。( ) 7、由3心皮组成的复雌蕊有6条腹缝线。( ) 8、二体雄蕊就是一朵花中只有两个离生的雄蕊。( ) 9、双受精是种子植物的重要特征之一。() 10、桃和梨均为假果。()
三、填空(21分,分/空) 1、植物细胞的基本结构包括和两大部分。后者又可分为、和三 部分。 2、保护组织因其来源及形态结构的不同,可分为和。 3、苎麻等纤维作物所利用的是组织。 4、植物种子是由,和三部分构成,但有些种子却只有和两部 分,前者称种子,后者称种子。 5、禾本科植物的内皮层在发育后期其细胞常面增厚,横切面上,增厚的部分呈形。 6、双子叶植物和裸子植物茎的初生结构均包括、和三部分,玉米等单子叶植 物茎的初生结构包括、和三部分。 7、双子叶植物茎的维管束多为,在初生木质部和初生韧皮部间存在形成层,故 又称维管束。 8、叶的主要生理功能包括和等两个方面。 9、一朵完整的花可分为、、、、和六部分。其中最主 要的部分是和。 10、小孢子母细胞进行减数分裂前,花粉囊壁一般由、、和组成。
北方民族大学试卷课程代码:课程: 一、名词解释4*5 1、观赏园艺 2、花卉的鉴别标准 3、球根花卉 4、观赏植物栽培设施 5、温室效应二、填空题1*15 1、地中海气候型:气候特点:冬季温暖,最低气温,夏季温度.从秋季到次年春末为,夏季为干燥期。地理范围:包括地中海沿岸、南美洲智利中部、北美西南部、南非及澳大利亚西南部。该区是世界上多种的分布中心。原产的一二年花卉耐寒性较差。 2、半冬性植物:在通过春化阶段时,对于温度的要求,这类植物在的温度下也能完成春化作用,但最低温度不能低于,通过春化的时间是。 3、蕨类植物、兰科植物、秋海棠类植物生长期要求丰富的水分。但需水少些,在光线不强的室内,保持土壤湿润即可;需水较多,常将花盆放置水盘中或栽植于小型喷泉之上。 4、诸葛菜、金鱼草属于花卉。金盏菊、紫罗兰、桂竹香是性花卉。 5、花卉种子的休眠主要包括和 三、判断正误2*5 1、许多常绿性多年生花卉,在适当的环境条件下,几乎周年色泽保持常绿而无休眠期 。() 2、春化阶段的通过局限在植株的生长点上,不同的生长部位可以处于不同的阶段。() 3、传统的四大切花:月季、菊花、康乃馨、兰。() 4、桂花有“国色天香”、“花中之王”的美称。() 5、一年生花卉仅有生长期──春天萌芽后,当年开花结实而后死亡,并且年周期就是生命周期。
() 四、选择题3*5 1、下列哪种植物不属于传统四大切花()A康乃馨 B 兰C月季D菊花 2、以下哪个植物不属于观花类花卉()A牡丹B郁金香C芍药D芦荟 3、下列属于观叶类植物的有()。 A、水仙 B、蕨类 C、马蹄莲 D、非洲菊 4、打破种子休眠的方法常用的有() A层积处理法、机械破皮、药物处理、晒料 B加温、处理法、加光、药物处理 C加光、机械破皮、晒料、药物处理 D降温、层积处理法、机械破皮、晒料、 5、下列不属于一年生植物的特点的是() A、生长周期短 B、种类品种丰富 C、株型参差不齐 D、繁殖栽培简单 五、简答题 1.花卉的有性繁殖与无性繁殖各有何特点(5) 2.草坪是如何建植的(5) 3. 花卉按温度、水分、光照等环境因子的需求如何进行分类各举代表花卉2~3种。(5) 4.什么叫盆景可以分为哪几种
植物生物学试题及答案 Document number【SA80SAB-SAA9SYT-SAATC-SA6UT-SA18】
植物学试题一名词解释(12分,2分/个) 1、细胞器; 2、木质部脊; 3、束中形成层; 4、完全叶; 5、花程式; 6、 聚合果 二、判断与改错(17分,对的填“+”,错的填“-”并将错的改正) 1、质体是一类与碳水化合物合成及贮藏相关的细胞器。( ) 2、根毛分布在根尖的伸长区和成熟区。( ) 3、根的初生木质部发育顺序为外始式,而在茎中则为内始式。( ) 4、水生植物叶小而厚,多茸毛,叶的表皮细胞厚,角质层也发达。( ) 5、胡萝卜是变态根,主要食用其次生韧皮部。( ) 6、观察茎的初生结构和次生结构都是从节处取横切面。( ) 7、由3心皮组成的复雌蕊有6条腹缝线。( ) 8、二体雄蕊就是一朵花中只有两个离生的雄蕊。( ) 9、双受精是种子植物的重要特征之一。() 10、桃和梨均为假果。()
三、填空(21分,分/空) 1、植物细胞的基本结构包括和两大部分。后者又可分为、和 三部分。 2、保护组织因其来源及形态结构的不同,可分为和。 3、苎麻等纤维作物所利用的是组织。 4、植物种子是由,和三部分构成,但有些种子却只有和两 部分,前者称种子,后者称种子。 5、禾本科植物的内皮层在发育后期其细胞常面增厚,横切面上,增厚的部分呈形。 6、双子叶植物和裸子植物茎的初生结构均包括、和三部分,玉米等单子叶植 物茎的初生结构包括、和三部分。 7、双子叶植物茎的维管束多为,在初生木质部和初生韧皮部间存在形成层, 故又称维管束。 8、叶的主要生理功能包括和等两个方面。 9、一朵完整的花可分为、、、、和六部分。其中最主 要的部分是和。
被子植物 1.合蕊柱 2.叶枕 3.距 4.冠毛 5.蝶形花冠和假蝶形花冠 二、填空题 1. Cathaya argyrophyllum中名是_____属_____科 Magnolia denudate是_____科植物Cercis chinensis中名是_____,是_____科(亚科)植物 Panax ginshen中名是_____,是_____科植物 Rhododendron smithii中名是_____,是_____科植物 Lonicera japonica中名是_____,是_____科植物 Allium cepa中名是_____,是是_____科植物。 2. _____ 科的特征是木本,单叶互生;雄蕊、雌蕊多数,螺旋状排列在伸长的花托上,聚合蓇葖果。 3. _____ 科的特征是头状花序,聚药雄蕊,果具冠毛。 4. _____ 科的特征是雄花成柔荑花序,雌花生于总苞中。 5. _____ 科的特征是有副萼,单体雄蕊,蒴果。 6. _____ 科的特征是十字花冠,四强雄蕊,角果。 7. _____ 科的特征是有托叶,叶基有腺体,周位花,核果。 8. _____ 科的特征是蝶形花冠,荚果。 9. _____ 科的特征是具乳汁,花单性,子房 3 室,中轴胎座。 科的特征是蔓生草本,有卷序,瓠果。 科的特征是叶具叶舌,颖果。 科的特征是具唇瓣,合蕊柱。 13.百合科的花程式是 _____。 14.假花学说认为被子植物起源于 _____ 植物,因而 _____ 类是最原始的代表。 15.真花学说认为每一个雄蕊代表 _____ ,心皮是 _____ 变化而来的,因而 _____ 类植物是最原始的,这一学说得到了广泛的承认,同时由于被子植物具有 _____、_____、_____ 三个特点,被认为是由共同起源单元说。 16.下列植物各属于哪个科。 17.矮牵牛属 ______ 科;金鱼草属 ______ 科;辛夷属 ______ 科;吊兰属 ______ 科。胡萝卜 _____ 科;马铃薯 _____ 科;白菜 _____ 科;番茄 _____ 科;香蕉 _____ 科;
名词解释: 1.芽的异质性:由于枝条内部营养状况和外界条件的不同,同一枝条上不同部位的芽在长势及其特性上的表现有明显的差异。 2.引种:植物的种类和品种在自然界都有他一定的分布范围,人类为了某种需要把植物从其原分布区移植到新的地区,就叫引种。 3.促成栽培:是设置栽培中的一种高级方式,即在冬季或早春严寒时节利用有(或无)加温设备的温室、塑料大棚栽培园艺植物,产品比常规的露地生产早上市,也称反季栽培。 4.套作:又称套种,是指在前季作物生长后期的株行间(或架下)种植后季作物的种植方式。 5.花芽分化:是指叶芽的生理和组织状态向花芽的生理和组织状态转化的过程。 6.种质资源:种质又叫遗传质,是指能从亲代遗传给子代的遗传物质,凡是携带遗传物质的载体就叫做种质资源。 7.轮作:是指同一地里有顺序地在季节间或年度间轮换种植不同类型作物的种植方式。 8.混作:是指两种或多种生育季节相近相近的作物按一定的比例混合种植于同一块田地的种植方式。 9.园艺:主要指园艺生产的农业技术。 10.园艺业:即园艺生产,是农业生产中的一个分支,主要是果树、蔬菜、西甜瓜以及观赏植物的生产。 11.光周期:是指一天中从日出到日落的理论日照数。 12.隔年结果:在果树生产上一年产量高,另一年产量低的现象就叫隔年结果或叫大小年。 13.授粉:花粉从花药传到柱头上的过程叫授粉,也称传粉。 14.自然休眠:自然休眠又称生理休眠、内休眠等。(它是由植物遗传特性决定的,要求一定的低温条件才能顺利通过,在自然休眠期间,即使给予适当的环境条件也不能萌芽生长。)15.气候相似论:作物的形态特征和生物学特性都是自然选择和人工选择的产物,因而他们都适应于一定的自然环境和栽培条件,一旦离开了这种条件就不能很好的生长。特别是从远距离引种时应重视原产地区宇引进地区之间的生态环境,特别是气候条件的相似性,这就是气候相似论。 16.选择育种:利用现有品种和类型在繁殖和栽培过程中产生的自然变异,通过人工选择的方法培育成稳定新品种的育种方法,简称选种。 17.杂种优势:也称优势育种,杂交种品种(F1)在某一方面或多方面优于双亲或某一亲本的现象叫杂种优势。 18.嫁接亲和力:是指两个植物体经嫁接愈合而能生长在一起,并有一定寿命和生产能力的特性。 19.扦插:是从植物母体上切取茎、根或叶的一部分,在适宜的环境条件下促使成为独立的新植株的育苗方法。 20.滴灌:是利用专门的设备(滴头)将压力水变成水滴、缓慢湿润土壤的灌溉方法。 21.形态诊断(营养诊断的):是植株诊断的一种,它以植株生长发育的外观势态、症状来确定植物的营养状况。 22.基因工程:基因工程育种又叫分子育种,它是运用分子生物学先进技术,将目的基因或DNA片段通过载体或直接输入受体细胞,使遗传物质重新组合,经细胞复制增殖,新的基因在受体细胞中表达,最后从转化细胞中筛选出有价值的新类型构成工程植株,从而创造新品种一种定向育种新技术。 23.分株:利用植物特殊的营养器官,即鳞茎,球茎,块茎,块根,根茎以及假鳞茎进行分离和分割,使原来母株分离成若干能独立生存的植株。 24.整形:多年生的木本果树和观赏树木,通常幼树的修剪主要目的是造就树形,故特称整形。
植物学试题 一名词解释(12分,2分/个) 1、细胞器; 2、木质部脊; 3、束中形成层; 4、完全叶; 5、花程式; 6、聚合果 二、判断与改错(17分,对的填“+”,错的填“-”并将错的改正) 1、质体是一类与碳水化合物合成及贮藏相关的细胞器。( ) 2、根毛分布在根尖的伸长区和成熟区。( ) 3、根的初生木质部发育顺序为外始式,而在茎中则为内始式。( ) 4、水生植物叶小而厚,多茸毛,叶的表皮细胞厚,角质层也发达。( ) 5、胡萝卜是变态根,主要食用其次生韧皮部。( ) 6、观察茎的初生结构和次生结构都是从节处取横切面。( ) 7、由3心皮组成的复雌蕊有6条腹缝线。( ) 8、二体雄蕊就是一朵花中只有两个离生的雄蕊。( ) 9、双受精是种子植物的重要特征之一。() 10、桃和梨均为假果。() 三、填空(21分,0.5分/空) 1、植物细胞的基本结构包括和两大部分。后者又可分为、和三部分。 2、保护组织因其来源及形态结构的不同,可分为和。 3、苎麻等纤维作物所利用的是组织。 4、植物种子是由,和三部分构成,但有些种子却只有和两部分,前者称种子,后者 称种子。 5、禾本科植物的内皮层在发育后期其细胞常面增厚,横切面上,增厚的部分呈形。 6、双子叶植物和裸子植物茎的初生结构均包括、和三部分,玉米等单子叶植 物茎的初生结构包括、和三部分。 7、双子叶植物茎的维管束多为,在初生木质部和初生韧皮部间存在形成层,故又称维管束。 8、叶的主要生理功能包括和等两个方面。 9、一朵完整的花可分为、、、、和六部分。其中最主要的部分是和。 10、小孢子母细胞进行减数分裂前,花粉囊壁一般由、、和组成。花粉成熟时,花粉囊壁一般 只留下和。 11、被子植物细胞的减数分裂在植物的生活史中发生次。 四、选择题(10分,1分/个) 1、光学显微镜下呈现出的细胞结构称。 A.显微结构;B.亚显微结构;C.超显微结构;D.亚细胞结构 2、裸子植物靠输导水分。 A.导管和管胞;B.管胞;C.筛管;D.筛胞 3、成熟蚕豆种子的种皮上一条黑色眉状物是。 A.种脊;B.种脐;C.种阜;D.种柄 4、原表皮、基本分生组织和原形成层属于。 A.居间分生组织;B.原分生组织;C.初生分生组织;D.伸长区 5、在方形(如蚕豆)或多棱形(如芹菜)的茎中,棱角部分常分布有。 A.厚角组织;B.厚壁组织;C.薄壁组织;D.石细胞 6、栅栏组织属于。 A.薄壁组织;B.分生组织;C.保护组织;D.机械组织 7、以下所列的结构,哪一些都是茎的变态? 。 A.皂荚的分枝刺,葡萄和豌豆的卷须; B.马铃薯、姜、荸荠、芋头; C.莲藕、菊芋、竹鞭、白萝卜、胡萝卜; D.蔷薇和刺槐(洋槐)的刺,豌豆的卷须 8、具的花为整齐花。 A.舌状花冠;B.唇形花冠;C.蝶形花冠;D.十字花冠
第一章绪论 1.什么是生物技术(biotechnology)?P1 答:生物技术(biotechnology)是以现代生命科学为基础,结合其他基础学科的科学原理,利用生物(或生物组织、细胞、器官、染色体、基因、核酸片段等)的特性和功能,设计、构建具有预期性能的新物质或新品系,加工生产产品或提供服务的综合性技术。 生物技术包括传统生物技术与现代生物技术。传统生物技术是指通过微生物的初级发酵来生产产品,如酱油、醋、酒、面包、奶酪、酸奶等食品的制作技术。现代生物技术是指以现代生物学理论为基础,以基因工程为核心的一系列技术的总称。 生物技术已广泛应用于农林牧渔、医药食品、轻工业、化学工业和能源等领域,与人民生活息息相关。 2. 什么是园艺植物生物技术(biotechnology in horticultural plants)?P1 答:园艺植物生物技术(biotechnology in horticultural plants)以园艺植物为材料,利用生物技术,创造或改良种质或生物制品的一门技术,它是园艺学和生物技术的交叉技术学科,是在植物组织培养、植物细胞工程、植物染色体工程、植物基因工程、植物分子标记和生物信息学等现代生物技术手段基础上产生和发展起来的。这些先进的现代生物技术在园艺科学上的应用构成了园艺植物生物技术的主要内容。 3.园艺植物生物技术的主要内容有哪些?P1——5 答:①园艺植物组织培养(也称园艺植物离体培养)指无菌和人工控制的环境条件下,利用人工培育基,对园艺植物的胚胎(成熟和未成熟的胚、胚乳、胚珠、子房等)、器官、(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(分生组织、形成层、韧皮部、表皮、表层、薄壁组织、髓部等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、原生质体等进行离体培养,使其再生发育成完整植株的过程。植物细胞全能性是植物组织培养的理论基础。 ②园艺植物细胞工程指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过某种工程手段,以植物细胞为基本单位,在离体条件下进行培养、增殖,或人为地使细胞某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而达到改良品种和创造新品种,加速植物繁殖或获得某种有用物质的过程。 ③园艺植物染色体工程 培养获得单倍体,通过染色体加倍,迅速获得纯系;诱导多倍体,通过选育直接获得多倍体品种;通过染色体交换、附加或易位,获得染色体代换系、附加系或易位系。 ④园艺植物基因工程是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,将不同来源的基因(或DNA 分子),按预先设计的蓝图,在体外构建杂交DNA 分子,然后导入园艺植物细胞,以改良园艺植物原有的遗传特性,获得新种质或新品种。 ⑤园艺植物分子标记 广义分子标记是指可遗传的并可检测的DNA 序列或蛋白质。狭义的分子标记是指能反映园艺植物个体或种群间基因组中某种差异特征的DNA片段。 4.你认为园艺植物生物技术发展趋势有哪些?P11——13 答:①产业化步伐加快,②由转移抗性性状向优质、高产等多种优良性状发展,③常规育种与生物技术紧密结合的实用化进程加速(分子标记技术、胚挽救技术和细胞融合技术、单倍体培养技术、体细胞无性系变异与筛选技术),④基因表达与功能研究更加深入 植物组织培养部分(第2—6 章) 一.主要名词概念 1.植物细胞全能性:植物体的每一个细胞都含有一套完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜能。 2.脱分化:离体培养下,已经分化的细胞,组织或器官茎细胞分裂或不分裂,失去原有的结构和功能而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织。 3.再分化:脱分化的细胞或细胞团在适宜条件下可重新分化,形成另一种或几种细胞,组织,器官,甚至完 整的植株。 4.器官发生途径:培养条件下的组织或细胞团分化形成不定根,不定芽等器官的过程。 5 体细胞胚胎发生途径: 外植体中体细胞诱发并形成胚胎的过程。 6.外植体:用于培养的园艺植物的细胞,组织,器官,胚胎,原生质体通常称为外植体。 7.褐化现象:植物体内酚类物质在外植体被切割后氧化形成醌类物质,使培养基变褐。 8.看护培养:在培养皿中先加入一定体积的固体培养基,在其上放一块几毫米大小的愈伤组织,再在其上放一张
第一章绪论 1.什么就是生物技术(biotechnology)?P1 答:生物技术(biotechnology)就是以现代生命科学为基础,结合其她基础学科得科学原理,利用生物(或生物组织、细胞、器官、染色体、基因、核酸片段等)得特性与功能,设计、构建具有预期性能得新物质或新品系,加工生产产品或提供服务得综合性技术。 生物技术包括传统生物技术与现代生物技术。传统生物技术就是指通过微生物得初级发酵来生产产品,如酱油、醋、酒、面包、奶酪、酸奶等食品得制作技术。现代生物技术就是指以现代生物学理论为基础,以基因工程为核心得一系列技术得总称。 生物技术已广泛应用于农林牧渔、医药食品、轻工业、化学工业与能源等领域,与人民生活息息相关。2、什么就是园艺植物生物技术(biotechnology in horticultural plants)?P1 答:园艺植物生物技术(biotechnology inhorticulturalplants)以园艺植物为材料,利用生物技术,创造或改良种质或生物制品得一门技术,它就是园艺学与生物技术得交叉技术学科,就是在植物组织培养、植物细胞工程、植物染色体工程、植物基因工程、植物分子标记与生物信息学等现代生物技术手段基础上产生与发展起来得、这些先进得现代生物技术在园艺科学上得应用构成了园艺植物生物技术得主要内容。 3.园艺植物生物技术得主要内容有哪些?P1—-5 答:①园艺植物组织培养(也称园艺植物离体培养) 指无菌与人工控制得环境条件下,利用人工培育基,对园艺植物得胚胎(成熟与未成熟得胚、胚乳、胚珠、子房等)、器官、(根、茎、叶、花、果实、种子等)、组织(分生组织、形成层、韧皮部、表皮、表层、薄壁组织、髓部等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、原生质体等进行离体培养,使其再生发育成完整植株得过程。植物细胞全能性就是植物组织培养得理论基础。 ②园艺植物细胞工程 指应用细胞生物学与分子生物学得原理与方法,通过某种工程手段,以植物细胞为基本单位,在离体条件下进行培养、增殖,或人为地使细胞某些生物学特性按人们得意愿发生改变,从而达到改良品种与创造新品种,加速植物繁殖或获得某种有用物质得过程。 ③园艺植物染色体工程 培养获得单倍体,通过染色体加倍,迅速获得纯系;诱导多倍体,通过选育直接获得多倍体品种;通过染色体交换、附加或易位,获得染色体代换系、附加系或易位系、 ④园艺植物基因工程 就是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学与微生物学得现代方法为手段,将不同来源得基因(或DNA 分子),按预先设计得蓝图,在体外构建杂交DNA分子,然后导入园艺植物细胞,以改良园艺植物原有得遗传特性,获得新种质或新品种。 ⑤园艺植物分子标记 广义分子标记就是指可遗传得并可检测得DNA序列或蛋白质。狭义得分子标记就是指能反映园艺植物个 4、您认为园艺植物生物技术发展趋势有哪些?P11体或种群间基因组中某种差异特征得DNA片段。? ——13 答:①产业化步伐加快,②由转移抗性性状向优质、高产等多种优良性状发展,③常规育种与生物技术紧密结合得实用化进程加速(分子标记技术、胚挽救技术与细胞融合技术、单倍体培养技术、体细胞无性系变异与筛选技术),④基因表达与功能研究更加深入 植物组织培养部分(第2-6章) 一.主要名词概念 1.植物细胞全能性:植物体得每一个细胞都含有一套完整得基因组,并具有发育成完整植株得潜能、 2.脱分化:离体培养下,已经分化得细胞,组织或器官茎细胞分裂或不分裂,失去原有得结构与功能而恢复分生状态,形成无组织结构得细胞团或愈伤组织。
《园艺植物生物技术试题》答案 一、名词解释(解释下列名词,每小题2分,共20分) 1. 基因:是一段具有遗传功能的特定核苷酸(DNA或RNA)序列,它指导合成一种功能性肽链或RNA分子,它是遗传物质最小的功能单位。 2. 质粒:是细菌染色体以外的可以稳定遗传的共价、封闭、环状双链DNA分子。 3. 同尾酶:有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同,但切割DNA后,产生相同的粘性末端,称为同尾酶。 4. RT-PCR:反转录PCR ,先将mRNA反转录成cDNA,然后再以cDNA为模 5. 分子标记:指在分子水平上可标识的遗传多态性,主要指DNA水平上的遗传多态性。 6. 生物技术:以生命科学为基础,利用生物体系和工程原理生产生物制品和创造新物种的综合性科学技术。 7. 基因文库:是一组DNA或cDNA序列克隆的集合体。 8. 植物遗传转化:是通过化学、物理以及生物途径有目的地将外源基因导入受体植物基因组中,使其在受体植物细胞内表达,以期改良植物的遗传性状。板,用PCR方法加以扩增。 9.选择标记基因:是指该基因的表达产物对选择剂产生抗性,致使转化细胞不受选择剂影响,能正常生长、发育、分化,从而把转化体选择出来的一类基因。 10. Southern印迹杂交:是根据毛细管作用的原理,使在电泳凝胶中分离的DNA 片段转移并结合在适当的滤膜上,然后通过与已标记的单链DNA或RNA探针的杂交作用以检测这些被转移的DNA片段的技术。 二、填空题(不填或错填者不得分,每空1分,共20分) 1. 限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端:平末端和黏性末端。 2. 在遗传转化的表达载体中通常构建有一些筛选基因或报告基因,如果实验很成功,且检测方法正确,则下列基因的作用效果应呈现的颜色分别是:LacZ基因重组子白色菌斑;GUS呈蓝色;GFP呈绿色。 3. DNA复制时,新合成链的延伸方向是从5’到3’。 4. 植物遗传转化的主要方法是农杆菌介导法和基因枪法。 5. 种植转基因作物面积最大的4个国家分别是美国、阿根廷、加拿大和中国。 6. 根据作用方式及功能不同,启动子可分成组成型启动子、组织特异型启动子和诱导型启动子等3种类型。 7. 植物DNA的提取方法主要有两种:CTAB法和SDS法;DNA含量和纯度分析方法也主要有两种:紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法。 8. 目前常用的两种Ti质粒基因转化载体系统是共整合载体系统和双元载体系统。
生物科学专业 植物学期末考试参考答案 姓名_______专业与班级_________学号__________成绩________ 我保证诚实地完成本次考试,保证不以任何形式抄袭或作弊。 自愿签约人: 一.填空题(除注明者外,每空0.5分,共40分) 1.(3分)裸子植物苏铁纲具有羽状分裂大孢子叶,银杏纲的大孢子叶称为珠领, 松柏纲的大孢子叶称为珠鳞,紫杉纲的大孢子叶称为珠托或套被,而买麻藤纲具有盖被和珠孔管。 2.(2.5分)犁头尖具佛焰花序,花序顶端为附属体,依次以下为雄花 花,中性花花,雌花花。 3.(3分)芸香科植物的识别特征有:托叶缺,枝叶树皮香气,叶具透明 油腺点,花盘存在于雄蕊与子房之间;果实有多种,柑桔属的果实称为柑果,花椒属的果实称为蓇葖。 4.(2.5分)大戟科叶具有托叶、有些植物具乳汁、叶柄上端或叶上常有腺体、花 单性、三室果。 5.(3分)樟科的识别特征有枝叶树皮有香气,花三数,雄蕊四轮时,每轮3枚, 第1与第2轮雄蕊花药内向,第3轮雄蕊花药外向,基部有2枚腺体,第4轮雄蕊退化为箭头状。花药瓣裂。 6.(2.5分)填空: (1)黄鹌菜的头状花序上的花全为舌状花 (2)板栗的果实由壳斗包 (3)草莓食用部是花托 (4)柚的叶是单身复叶
(5)咖啡属于茜草科。 7.(1.5 分)山毛榉科植物的雄花序是柔荑花序;杨柳科花单性,无花被,杨属 的花具有花盘,而柳属的花具有蜜腺。 8.(3分)构成禾本科植物花序的基本单位称小穗, 其基部两侧各有一枚颖片, 每 一两性小花由外稃、内稃、2~3枚浆片、6~3枚雄蕊和雌蕊组成。 9.水杉具有条形且对生的叶。 10.(4.5分)木兰科的原始特征包括花各部多数,分离,螺旋状排列在伸 长的花托上,雄蕊花药长,花丝短,药隔突出;雌蕊花柱与柱头不分化。 11.(2分)具有双韧维管束的植物类群有葫芦科、桃金娘科、夹竹桃科、萝 摩科等。 12.(2分)桃金娘科叶对生,具边脉,常有香气和油腺点,子房半下位。 13.(2.5分)有些植物可根据营养器官的特征来判别所属的科, 例如茎节膨大,叶 常互生,具有鞘状或穿茎托叶的是蓼科;植物体有香气,托叶脱落后在枝条上留下托叶环的是木兰科;有些植物可根据繁殖器官特征来判别所属的科,例如具双悬果的是伞形花科;具角果的是十字花科;具有瓠果的是葫芦科。 14.写出下列植物的学名(每小题1分,共5分): (1)银杏:Ginkgo biloba。 (2)月季:Rosa chinensis。 (3)大豆:Glycine max。 (4)水稻:Oryza sativa。 (5)无花果属:Ficus。 15.(3分)锦葵科植物最易识别的特征是单体雄蕊;苋科与藜科均具有基生 胎座,前者的花被常有颜色,后者的花被绿色。石竹科石竹科花瓣反折,前端流苏状撕裂,有爪。 二.选择题(把选择答案前面的字母直接写在该题的双括号内,每小 题1分,共5分)
0绪论复习题 1.什么是植物?在林奈的二界系统和魏泰克的五界系统中,植物包括的范围有何变化? 植物有明显的细胞壁和细胞核,其细胞壁由纤维素构成,具有光合作用的能力——就是说它 可以借助光能及动物体内所不具备的叶绿素,利用水、矿物质和二氧化碳生产食物。魏泰克的五界系统中不仅包括林奈的二界系统中的植物界和动物界,还增加了真菌界,原生生物界,原核生物界。 2.列举5个我国著名的植物研究机构,简述他们的主要研究领域。 ○1中国科学院植物研究所(系统与进化植物学领域、植物生态学(草原)、光合作用、植物分子生理与发育领域等);○2中国科学院昆明植物研究所(植物分类与生物地理、植物化学 与天然产物研发、野生种质资源保藏与利用、民族植物学与区域发展、资源植物研发与产业化);○3中国农业大学,主要研究领域:植物逆境机理、植物发育生物学、作物重要性状功 能基因组学、植物基因表达调控的分子机理;○4中国科学院上海生命科学研究院植物生理生 态研究所(功能基因组学,分子生理与生物化学,环境生物学和分子生态学等);○5中国科学院上海植物逆境生物学研究中心(植物逆境分子生物学研究)。 3.列举5个我国当代著名的植物学家,简述他们的主要研究领域。 张新时院士,植物生态学;洪德元院士,植物细胞分类学;王文采院士,植物分类学;匡廷 云院士,光合作用;周俊院士,植物化学;施教耐院士,植物呼吸代谢;陈晓亚院士,植物 次生代谢。 01细胞与组织-01细胞-复习题 一、选择 1.光镜下可看到的细胞器是。 A.微丝B.核糖体C.叶绿体D.内质网 2.光学显微镜下呈现出的细胞结构称。 A.显微结构B.亚显微结构C.超显微结构D.亚细胞结构 3.下列细胞结构中,具单层膜结构的有。 A.叶绿体B.线粒体C.溶酶体D.核膜E.液泡 4.下列细胞结构中,具双层膜结构的有, A.叶绿体B.线粒体C.溶酶体G.微管I.高尔基体J.内质网K.核膜 5.植物细胞初生壁的主要成分是。 A.纤维素、半纤维素和果胶B.木质、纤维素和半纤维素C.果胶D.角质和纤维素 6.初生纹孔场存在于。 A.次生壁B.初生壁C.胞间层D.角质层 7.糊粉粒贮藏的养分是。 A.淀粉B.脂肪C.蛋白质D.核酸 8.细胞进行呼吸作用的场所是。 A.线粒体B.叶绿体C.核糖体D.高尔基体 9.与细胞分泌功能有关的细胞器是。 A.线粒体B.高尔基体C.溶酶体D.白色体 10.细胞内有细胞活动的“控制中心”之称的是。 A.细胞器B.细胞核C.细胞质D.叶绿体
一、名词解释(共40分,每题2分) 1.环剥是指环状剥皮,简称环剥,从枝基部整齐地剥下一圈皮。 2.嫁接有目的地将1株植物上的枝条或芽,接到另1株植物的枝、干或根上,使之愈合生长在一起,形成一个新的植株。 3.实生根系由种子胚根发育而来的根,称为实生根系。 4.扦插繁殖是切取植物的枝条、叶片或根的一部分,插入基质中,使其生根、萌芽、抽枝,长成为新植株的繁殖方法。 5.花芽分化是指叶芽的生理和组织状态向花芽的生理和组织状态转化的过程,是植物由营养生长转向生殖生长的转折点。 6.不定芽从枝的节间、愈伤组织或从根以及叶上发生的芽为不定芽。 7.叶面积指数是指园艺植物叶面积总和与其所占土地面积的比值,即单位土地面积上的叶面积。 8.蹲苗就是在一定时期内控制施肥和灌水,进行中耕和镇压,使幼苗根部下扎,生长健壮,防止茎叶徒长。 9.催芽临播种前保证种子吸足水分,促使种子中养分迅速分解运转,以供给幼胚生长所需称催芽。 10.芽的异质性由于枝条内部营养状况和外界条件的不同,同一枝条上不同部位的芽在长势及其特性上的表现有明显的差异的现象。 11.授粉花粉从花药传到柱头上的过程,也称传粉。其方式有自花授粉、异化授粉和常异花授粉。 12.杂种优势杂交种品种(F1)在某一方面或多方面优于双亲或某一亲本的现象。 13.种质资源把具有种质并能繁殖的生物体同成为种质资源。
14.芽变是指发生在芽内分生组织细胞中的突变,属于体细胞突变的一种。 15.远缘杂交指的是亲缘关系疏远的类型之间的杂交。多指种属间存在杂交障碍的杂交。 16.自交不亲和系通过连续多代的自交选择,可育成自交不亲和性特点,且能稳定遗传的自交系成为自交不亲和系。 17.雄性不育系对于可遗传的雄性不育,经过选育可育成不育性稳定的系统,该系统即雄性不育系。 18.诱变育种又称引变育种或突变育种,是人为的利用物理或化学等因素,诱发作物产生遗传变异,在短时间内获得有利用价值的突变体,根据育种目标要求,对突变体进行选择鉴定,直接或间接的培育成生产上有利用价值的新品种的育种途径 19.分子标记辅助育种借助于目标基因紧密连锁的遗传标记基因型分析,鉴定分离群体中含有目标基因的个体,以提高选择的效率,即采用标记辅助选择手段,减少育种过程中的盲目性,从而加速育种的进程,这就是分子标记辅助育种。 20.选择育种就是利用现有品种和类型在繁殖和栽培过程中产生的自然变异,通过人工选择的方法培育成稳定新品种的育种方法。 二、是非题(共30分,每题2分,对的打√,错的打×) 1.园艺植物的休眠器官主要是种子、芽、根等。(×) 2.短日照园艺植物在长日照条件下促进开花。(×) 3.低温对园艺植物的影响有低温冷害与低温冻害之分,冷害是指植物在零度以下受到伤害。(×) 4.果树小叶病是由缺氮引起的。(×) 5.短日照植物在短日照条件下促进开花。(√)
植物生物学课后习题[] 植物课后习题 绪论 1、为什么在太阳系中只有地球会有生命呢? 答:如果要回答这个问题我们就要知道产生生命和生命存在的条件是什么?进化论告诉了我们,生物的进化是从低等到高等、从水生到陆生、从单细胞到多细胞逐步进化而来的。产生生命的先决条件就是:必须具备了从无机物到有机物、从有机物到大分子结构有机物、从大分子结构有机物到生命形成的各种各样的条件。产生生命以后还要有着生命可以生存的环境。而在九大行星之中,只有地球才符合条件,而其它的行星上既没有符合产生生命的要求,又没有适应生命生存的环境。 2、什么是植物?如何区分动物和植物? 植物是能进行光合作用,将无机物转化为有机物,独立生活的一类自养型生物。 植物与动物细胞的最大区别是,植物有细胞壁,大液泡,质体(叶绿体),
有丝分裂产生纺锤体;动物细胞没有细胞壁,细胞膜还有甾醇,没有质体,有丝分裂靠中心体。 第一章 1、真核细胞与原核细胞在结构上的不同? 原核细胞:无典型的细胞核,遗传信息的载体仅为一环状DNA,没有分化出以膜为基础的具有特定结构和功能的细胞器,通常体积很小,包括支原体、衣原体、细菌等。 真核细胞:具典型的细胞核,分化出以膜为基础的多种细胞器。 原核细胞 真核细胞 大小 大多数很小(1-10μm) 大多数较大(10-100μm) 细胞核 无膜包围 有双层膜包围 遗传
1.环状裸露DNA或者结合少量蛋白质 线状DNA,与蛋白质结合成染色质 2.细胞质中有质粒DNA 线粒体、叶绿体中有环状裸露DNA 3.一个细胞只有1条DNA分子 2条DNA以上 4.DNA很少或者没有重复序列,无内含子有高度重复,有内含子 5.DNA复制转录核翻译同一时间地点进行复制转录在核中,翻译在细胞质中 内膜系统 无独立内膜系统 有,并且分化成细胞器
生物工程综合实验—植物生物技术模块 生物工程教研组编 2017年春学期
目录 实验一植物组培实验室设计和实验设备、实验用品认知 (3) 实验二MS培养基母液的配制 (6) 实验三MS培养基配制与灭菌 (9) 实验四无菌接种操作 (12) 实验五外植体分化生长的诱导培养 (12) 实验六外植体脱分化生长的诱导培养 (17) 实验七组培苗的炼苗 (20)
实验一植物组培实验室设计和实验设备、实验用品认知 一、目的与要求 1、结合对植物细胞工程安徽省工程技术研究中心植物组织培养生产车间和研究实验室的现场认知,了解掌握植物组织培养实验室的组成和所需的基本仪器设备,学会植物组织培养实验室的设计; 2、为后续植物组培实验课程学习与实训准备所需的相关用品。 二、教学场所 1、植物细胞工程技术研究中心; 2、生物工程综合实验分室(A514)。 三、内容与方法 (一)关于植物组培实验室的认知与设计 1、组培实验室设计原则 要求环境干燥清洁;符合无菌操作规程要求;满足生产技术流程需要。 2、组培实验室的一般组成与设备 包括化学实验室、洗涤准备室、培养基制备室、无菌操作室、培养室、细胞学观察研究室,等。 (1)化学实验室 各种相关药品的贮存、溶液配制等。 主要设备:药品柜,防尘橱,冰箱,天平,蒸馏水发生器,加热器(电磁炉等),玻璃器皿,等。 (2)洗涤准备室 用于完成相关器具的洗涤、干燥、堆放存储等。 主要设备:洗涤池,洗瓶机,操作台,烘箱,储物架(柜)等。(3)培养基制备室
用于进行培养基的生产。 主要设备:冰箱,天平,蒸馏水发生器,酸度计,加热器(电磁炉等),玻璃器皿,分装机,灭菌设备,操作台,等。 (4)无菌操作室 主要用于植物材料的消毒、接种、培养物的继代等。无菌室的房间不宜太大,数量根据需要设置。要求干爽清洁,相对密闭,墙地光滑防潮,配置平移门。每一无菌室设内外二间,外间为缓冲室,内间较大,为接种室。 主要设备:紫外灯,超净工作台,臭氧发生器,酒精灯,接种器械(镊子、剪刀、解剖刀、接种针),手推车,等。 (5)培养室 是将接种的材料进行培养生长的场所,大小依规模而定。培养室的设计以充分利用空间和节省能源为原则。 主要设备:空调机,加热器,增湿器,培养架,光照设备,培养箱,转床,人字梯,等。 (6)细胞学观察室 用于进行培养物的取样观察和分析。 主要设备:显微镜,细胞染色、计数、制片设备,天平,离心机,等。(二)组培实验用品的准备 1、玻璃器皿及规格 (1)培养瓶:100~500 mL的玻璃或塑料培养瓶等; (2)培养皿:9~15 cm;(3)烧杯:100~5000 mL; (4)量筒:10~1000 mL;(5)移液管:1~10 mL; (6)试剂瓶:100~1000 mL;(7)容量瓶:100~1000 mL。 2、接种器械 酒精灯,不锈钢镊子、剪刀、解剖刀等。
楚雄师范学院 2014-2015学年第一学期期末考试试卷A 课程《植物生物学》考试时间: 120 分钟 班级姓名学号 一、名词解释(10分,每小题2分) 1.后含物 2.细胞周期 3.细胞程序性死亡 4.叶舌 5.光补偿点 二、选择题(请将正确答案的号码填入括号内。本大题分5小题, 每小题1分, 共5分) 1、植物的学名是用哪种文字命名的:() A.德文; B.法文; C.拉丁文; D.英文。
2、在植物细胞分类学中下列各项哪项为非细胞学资料?() A.染色体的形态结构; B.染色体的数目; C.染色体核型分析; D.染色体上所载基因。 3、绿藻植物门游动细胞的特征是:() A.二根,等长,顶生,一根茸鞭,一根尾鞭 B.二根或二根的倍数,顶生,等长,尾鞭型 C.二根或二根的倍数,侧生,等长,尾鞭型 D.二根,不等长,顶生,茸鞭型 4、下列哪组蕨类植物是小型叶类型?() A.石韦海金沙卷柏; B.木贼芒萁海金沙; C.卷柏石松木贼; D.石松贯众铁线蕨。 5、茄科植物常具有下列哪一组特征:() A.花序生于叶腋之外,核果; B.花序生于叶腋,浆果; C.花序生于叶腋,蒴果; D.花序生于叶腋之外,浆果。 三、填空题(请将正确答案填写在横线上方。本大题共0.5小题,总计20分) 1、地衣体中共生的藻类是___ ___门和___ ___门的种类。 2、白菜属于__ ___科;本科属于__ __亚门。 3、在细胞分类学中所选择的细胞学资料主要指染色体的___ ___、 _ ___、___ ____和__ ___。 4、导管根据其___ 加厚的不同可分为___ _、 _、___ _、 ___ _和__ _。 5、分化成熟的质体可根据其颜色和功能不同,分为、、三种主要类型。 6、细胞壁中最重要的化学成分是、。 7、根尖的纵切面从顶端起可依次分为:、、、 四个区。 8、溶酶体可分解蛋白质、核酸和多糖,植物细胞中具有溶酶体功能的其它细胞器有:、、。 9、双子叶植物根的成熟区中,中柱是皮层以内的中轴部分,可分为:、、、四个部分。