葡萄糖氧化酶法与邻甲苯胺法作血糖测定方法对比试验.txt台湾一日不收复，我一日不过4级！如果太阳不出来了，我就不去上班了；如果出来了，我就继续睡觉！
葡萄糖氧化酶法与邻甲苯胺法作血糖测定方法对比试验
更新日期：2010-10-15 点击：
农嵩
摘要以生物化学方法—葡萄糖氧化酶法(GOD法)为对比方法，有机化学方法—邻甲苯胺法(O-T法)为候选方法作血糖浓度测定对比试验，考察分析两法的相关性及其优缺点，为将来改进教学实验及临床应用提供参考。实验结果表明，回归方程表达出系统误差不明显，相关系数r=0.985，两法相关性比较密切。
关键词血糖；GOD法；O-T法；相关分析
Contrast test on determination of blood sugar with
methods of glucose-oxidase (GOD) and o-toluidine(O-T)
Nong Song
Dept. of Biochemistry, Youjiang Medical college for National Minorities (Bose 533000)
Abstract Contrast test was made with GOD(contrast method) and O-T(candidate solution method) for determining blood sugar contents. The correlation and advantages and disadvantages of the two methods were observed and analyzed for the reference of improving teaching experiments and clinical application. Results showed that the systematic error expressed by regression equation was not obvious, correlation coefficient r=0.985. Correlation of the two methods was comparatively closed. Key words blood sugar; GOD method; O-T method; correlation analysis
血糖测定法大体分为四种：无机化学方法、有机化学方法、生物化学方法及近代科学技术，各存在不同的优缺点。GOD法测定血糖浓度的准确性、精密度已被公认是较好的［1］，而O-T法则定血糖是特异性最高的非酶法，本试验以GOD法为对比方法，以O-T法作候选方法，测定40例包括各种疾病的样品血糖浓度，所得结果用相关回归分析，考察两法的相关性，可反映出O-T法的系统误差。测定结果报道如下。
1 材料与方法
1.1 试剂GOD法用标佳有限公司提供的试剂盒。O-T试剂配制［1］：称取硫脲1.5g溶于750ml冰醋酸中，加邻甲苯胺150ml及饱和硼酸40ml，混匀后加冰醋酸至1000ml。
1.2 标本来源附属医院检验科提供的各种疾病血清样品40例。
1.3 仪器日立220A型紫外分光光度计。
1.4 操作方法
1.4.1 GOD法按表1操作。
表1 GOD法测定血糖操作程序
加入物(ml) B S U
蒸馏水 0.05 - -
葡萄糖标准液(5.56mmol/L) - 0.05 -
血清 - - 0.05
GOD试剂 5.0 5.0 5.0
各管分别混合均匀，置37℃水浴10min后测定505nm的吸光度(B管调零)。
1.4.2 O-T法操作方法(按表2程序操作) 混匀后置沸水浴12min，取出，浸入冷水中3～5min冷却，测定630nm的吸光度(B管调零)。
2 结果
见表3，GOD法用x代表，O-T法用Y代表。
表2 O-T法测定血糖操作程序
加入物(ml) B S U
蒸馏水 0.1 - -
葡萄糖标准液(5.56mmol/L) - 0.1 -
血清 - - 0.1
O-T试剂 5.0 5.0 5.0
表3 GOD法与O-T法测定血糖结果对比(浓度mmol/L)
样品 x y 样品 x y
1 4.03 4.09 21 4.35 4.18
2 4.51 5.10 22 3.64 3.74
3 6.15 6.22 23 11.08 11.01
4 6.67 5.03 24 4.54 4.63
5 4.41 4.64 25 8.05 8.55
6 9.0
7 10.06 26 8.72 9.24
7 5.29 5.45 27 4.18 4.13
8 4.20 4.36 28 4.70 4.92
9 4.41 4.89 29 5.46 5.62
10 4.33 4.68 30 4.74 4.74
11 4.36 3.78 31 4.51 4.45
12 5.18 5.17 32 5.33 5.25
13 4.50 4.27 33 8.65 9.32
14 5.18 5.03 34 4.64 4.53
15 4.79 4.82 35 4.31 4.37
16 5.06 5.17 36 4.28 4.34
17 4.91 5.13 37 5.52 4.87
18 4.85 4.96 38 4.10 4.26
19 4.31 4.26 39 4.70 5.06
20 11.87 11.89 40 12.88 13.84
3 散点分布图及相关回归分析
根据两法测定血糖浓度的结果，绘制散点分布及回归方程图(见附图)。统计处理用相关回归分析法，a=-0.1347，b=1.0447，r=0.985，直线回归方程Y=-0.1347+1.0447x。
附图两法散点分布及回归方程图
4 讨论
回归方程中a代表恒定误差，b代表比例误差，反映出O-T法的系统误差，从附图中回归直线简单地表达出其系统误差并不明显。而相关系数r=0.985，表明两法的相关性比较密切。
O-T法具有操作简单，特异性较高的优点［1］，试剂成本也较低，目前在教学实验或规模较小的基层医院用于测定血糖，还是可取的。但该法一般在浓酸高温条件下发生反应，且组成单一试剂的某些有机化合物具有一定毒性，有害于健康又易损仪器，是该法的缺点［1］，因此在用O-T法做血糖测定时须多加注意。GOD法具有较好的准确性和精密度，且操作简便，试剂稳定无毒，价格适中，为目前比较受欢迎的方法，已被众多实验室采纳［1］。随着医学检验技术的不断更新发展，GOD法与其他血糖检测新技术将得到广泛应用。
作者单位：右江民族医学院生物化学教研室百色533000
参考文献
1 安乙敏，主编.生化检验学(再版).成都：四川科学技术出版社，1994：63
血糖含量的测定――邻甲苯胺法（O-toluidine boric，TB法） 实验原理 血液中所含的葡萄糖，称为血糖。它是糖在体内的运输形式。目前国 内医院多采用葡萄糖氧化酶法和邻甲苯胺法测定血糖。前者特异性强、价廉、方法简单,其正常值：空腹全血为3.6～5.3毫摩尔/升（65～95 毫克/分升），血浆为 3.9～6.1毫摩尔/升。后者由于血中绝大部分非 糖物质及抗凝剂中的氧化物同时被沉淀下来，因而不易出现假性过高 或过低, 结果较可靠, 其正常值：空腹全血为3.3～5.6毫摩尔/升（6 0～100毫克/分升），血浆为3.9～6.4毫摩尔/升（70～115毫克/分升）。本实验采用邻甲苯胺法测定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介质 中加热脱水反应生成5－羟甲基－2－呋喃甲醛，分子中的醛基与邻甲 苯胺缩合成青色的薛夫氏碱，通过比色可以定量。 试剂和器材 一、试剂 邻甲苯胺试剂：:称取硫脲1.5ｇ溶于750ｍL冰醋酸中, 加邻甲苯胺150 ｍL及饱和硼酸40ｍL, 混匀后加冰醋酸至1000ｍL, 置棕色瓶中，冰箱 保存。 葡萄糖标准溶液：5.0mg/mL，临用时稀释成1.0 mg/mL。 二、材料 人血清。 三、器材 具塞试管1.5×15cm（×8）；分光光度计。 操作方法 一、制作标准曲线
取6支试管编号后，按下表顺序加入试剂： 管号0 1 2 3 4 5 标准葡萄糖液(mL) 0.00 0.02 0.04 0.06 0.08 0.10 蒸馏水(mL) 0.10 0.08 0.06 0.04 0.02 0.00 邻甲苯胺试剂(mL) 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 A630 加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置30min，用1c m比色杯，试剂空白为参比，测定 630nm 处吸光值，绘制标准曲线。 二、样品测定 取3支试管编号后，分别加入试剂，与标准曲线同时作比色测定： 管号对照样品①样品② 稀释的未知血清样品(mL) 0 0.10 0.10 蒸馏水(mL) 0.10 0.00 0.00 邻甲苯胺试剂(mL) 5.0 5.0 5.0 A630 加毕，温和混匀，于沸水浴中煮沸4min取下，冷却，放置30min，用 1 cm比色杯，试剂空白为参比，测定630nm 处吸光值，从标准曲线中可查出样品中血糖含量。 注意事项
实验血糖测定（葡萄糖氧化酶法） 【目的】 体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。 【临床意义】 葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。 【原理】 样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。 【器材】 紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管 【药品】 葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度： 【样本】 新鲜无溶血血清。
【步骤】 将10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。 空白管校准管样品管工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml 蒸馏水0.01 ml ———— 校准液——0.01 ml —— 样品————0.01 ml 分别混合均匀，37℃水浴10～15分钟（避免太阳光直射），用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A）值。 【计算】 【参考值】 血清/血浆：3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。 此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。 【参考文献】 1．全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王敏三，1997，P616. 2．Trinder P. Ann Clin Biochem，1969，6: 24-27. 血糖测定实验所需器材： 1.紫外分光光度计（比色杯光径1.0cm）， 2.恒温水浴箱（能调温度的，37℃）， 3.移液器（枪）（规格1.0ml 6个，20µl 6个），枪头各100个 4.试管50支，6个试管架 5.烧杯100ml一个，50ml（或25ml）6个 6.记号笔6支 7.蒸馏水1瓶
实验十 血糖的测定 血液中的葡萄糖称血糖。正常人血糖浓度较恒定，维持在3．9mmol ／L ～6．1mmol ／L 之间。血糖浓度的相对恒定是机体进行正常生理活动的前提条件之一，有着双重实际意义：其一，维持稳定的能源供给，满足机体在各种生理状态下对能量的需求。其二，保证机体不因进食致血糖浓度过高，导致糖的丢失。 因此，血糖的测定是临床生化检验实验室的常规检测项目。血糖测定按其发展过程及反应原理的不同，大致分三类：氧化还原法 ，缩合法（主要有邻甲苯胺法），酶法（主要有己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法）。下边介绍两种方法供选择。 一、葡萄糖氧化酶法 【目的】 1. 了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理，能进行血糖测定的操作。 2. 掌握血糖测定的临床意义。 【原理】 葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ，GOD) 能将葡萄糖氧化为葡萄糖酸和过氧化氢。后者在过氧化物酶 (peroxidase ，POD)作用下，分解为水和氧的同时将无色的4-氨基安替比林与酚氧化缩合生成红色的醌类化合物，即 Trinder 反应。其颜色的深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm 波长处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。反应式如下： 2H 2O 2+4-氨基安替比林+酚 红色醌类化合物 POD 2H 2O 2H 2O 2 O 2葡萄糖+葡萄糖酸+ GOD + 【器材】 试管、吸管、试管架、恒温水浴箱、分光光度计 【试剂】 1. 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液（pH7.0） 称取无水磷酸氢二钠8.67g 及无水磷酸二氢钾5.3g 溶于800ml 蒸馏水中，用1mol/L 氢氧化钠（或1mol/L 盐酸）调节pH 至7.0，然后用蒸馏水稀释至1L 。 2. 酶试剂 称取过氧化物酶1200U ，葡萄糖氧化酶1200U ，4-氨基安替比林10mg ，叠氮钠100mg ，溶于上述磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/L NaOH 调pH 至7.0，加磷酸缓冲液至100ml 。
葡萄糖氧化酶法（GOD-POD）试剂盒与己糖激酶法（HK）试 剂盒测定血糖比较 摘要:通过对本实验室常规使用的己糖激酶法试剂盒的比较，分析葡萄糖氧化酶 法试剂盒检测血糖的可靠性和应用性。对本实验室使用的血糖测定参考方法HK 法试剂盒与GOD-POD法试剂盒从重复性、试剂稳定性、特异性等方面进行比较。结果显示GOD-POD法在重复性、试剂稳定性等方面均能满足一般实验室要求， 且与HK法相关性良好。 关键词：GOD-POD、HK、血糖测定、方法比较1 引言 。血糖测定是诊断糖尿病的重要依据，血糖的准确测定对诊断和处理高血糖 和低血糖症十分重要测定方法主要有化学法和酶法，而酶法有分为葡萄糖氧化酶 与过氧化物酶偶联的的GOD-POD法及己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶偶联的HK 法。酶法中的GOD-POD法，因具有操作简单，无毒、无害，试剂已商品化、易 于质控、价格低等优点，现已广泛用于临床。为此，将GOD-POD法与血糖参考 方法HK法从重复性、试剂稳定性、特异性及两种方法的相关性方面作比较，现 报告如下： 2 材料与方法 2.1仪器与试剂 己糖激酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号：20110310 葡萄糖氧化酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号：20110310 胆红素校准品（430 umol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101120 血糖中值质控品（4.80 mmol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101008 血糖高值质控品（11.20mmol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101008 日立-7180全自动生化分析仪 2.2方法 按试剂盒使用说明设置参数和操作。 2.2.1重复性试验取两个血糖浓度的定值质控血清用两种方法分别平行测20次，计算批 内误差。另取两个血糖浓度同一批号定值质控血清用两种方法每天各做两次，累计20个结果，计算天间误差。 2.2.2回收试验取若干健康体检人群血清混合，分装，按9:1的比例分别加入浓度为4.80 mmol/L和11.20 mmol/l的糖标准溶液，用两种方法分别测定，每种方法的每一浓度平行测定 三次，分别计算回收率。 2.2.3 干扰试验取胆红素含量为4 3.00umol/L左右的血清用两种方法分别测定血糖浓度， 比较胆红素对两种方法的干扰。 2.2.4方法比较实验用两种方法分别测定100例体检人员血清中的血糖浓度（每天测20份，共做5天），进行相关和回归处理，观察两方法的相关性。 2.2.5 统计学方法 D检验、T检验、F检验 2.3 GOD-POD法、HK法检测依据：根据《全国临床操作规程》第三版中的糖类测定执行。 3 结果 3.1 重复性试验 结果见表1和表2。 在两试剂盒共同线性范围0.02-22.30mmol/L范围内，线性相关结果y=0.8668x+0.4842， 相关系数r=0.9038有一定相关性，作两样本均数t检验t值为2.16（查表P＜0.05），说明两
葡萄糖氧化酶法与邻甲苯胺法作血糖测定方法对比试验.txt台湾一日不收复，我一日不过4级！如果太阳不出来了，我就不去上班了；如果出来了，我就继续睡觉！ 葡萄糖氧化酶法与邻甲苯胺法作血糖测定方法对比试验 更新日期：2010-10-15 点击： 农嵩 摘要以生物化学方法—葡萄糖氧化酶法(GOD法)为对比方法，有机化学方法—邻甲苯胺法(O-T法)为候选方法作血糖浓度测定对比试验，考察分析两法的相关性及其优缺点，为将来改进教学实验及临床应用提供参考。实验结果表明，回归方程表达出系统误差不明显，相关系数r=0.985，两法相关性比较密切。 关键词血糖；GOD法；O-T法；相关分析 Contrast test on determination of blood sugar with methods of glucose-oxidase (GOD) and o-toluidine(O-T) Nong Song Dept. of Biochemistry, Youjiang Medical college for National Minorities (Bose 533000) Abstract Contrast test was made with GOD(contrast method) and O-T(candidate solution method) for determining blood sugar contents. The correlation and advantages and disadvantages of the two methods were observed and analyzed for the reference of improving teaching experiments and clinical application. Results showed that the systematic error expressed by regression equation was not obvious, correlation coefficient r=0.985. Correlation of the two methods was comparatively closed. Key words blood sugar; GOD method; O-T method; correlation analysis 血糖测定法大体分为四种：无机化学方法、有机化学方法、生物化学方法及近代科学技术，各存在不同的优缺点。GOD法测定血糖浓度的准确性、精密度已被公认是较好的［1］，而O-T法则定血糖是特异性最高的非酶法，本试验以GOD法为对比方法，以O-T法作候选方法，测定40例包括各种疾病的样品血糖浓度，所得结果用相关回归分析，考察两法的相关性，可反映出O-T法的系统误差。测定结果报道如下。 1 材料与方法 1.1 试剂GOD法用标佳有限公司提供的试剂盒。O-T试剂配制［1］：称取硫脲1.5g溶于750ml冰醋酸中，加邻甲苯胺150ml及饱和硼酸40ml，混匀后加冰醋酸至1000ml。 1.2 标本来源附属医院检验科提供的各种疾病血清样品40例。 1.3 仪器日立220A型紫外分光光度计。 1.4 操作方法 1.4.1 GOD法按表1操作。 表1 GOD法测定血糖操作程序
浅谈血糖的几种检测方法 糖尿病(diabetes mellitus,DM)是以胰岛素分泌和（或）作用缺陷引起的高血糖为主要特征的一种全身代谢性疾病。长期高血糖可引起多脏器（尤其是眼、肾、神经、心脏和血管）的损害或功能衰竭。 实验室检测在糖尿病的诊断、病情监测和疗效观察中起重要作用。 现阶段诊断糖尿病除了常用检测项目外还有用于糖尿病分型的自身免疫标志物的检测项目和用于反映和了解胰岛β细胞功能的检测项目。而在我们这种基层社区医院现阶段只能检测常用项目，而且血糖控制是糖尿病治疗中的关键，所以在此将糖尿病的几种体液葡萄糖监测方法进行总结。 一、血糖 临床上的血糖测定一般是指血液中的葡萄糖测定。检测血中葡萄糖浓度是了解体内碳水化合物代谢状况的最重要的指标，在糖尿病诊断、治疗中具有重要的临床意义。目前本院使用全自动生化分析仪和快速血糖仪测定血糖。 1、全自动生化分析仪：多采用酶法测定血浆葡萄糖，主要是己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法。 （1）己糖激酶法：本法准确度和精密度高，特异性高于葡萄糖氧化酶法，为葡萄糖测定的参考方法。轻度溶血、脂血、黄疸、氟化钠、肝素、EDTA和草酸盐等不干扰本法测定。 （2）葡萄糖氧化酶法：本法线性范围达19 mmol/L，回收率94%～105%，批内0.7%～2.0%，批间CV2%左右，日间CV2%～3%。准确度和精密度都达到临床要求，操作简便，适用于常规检验［1］。 目前国际上糖尿病的诊断都是以实验室静脉血浆血糖测定为标准。 2、快速血糖仪：文献报道用小型血糖仪末梢全血测定血糖(capillary blood glucose,CBG)与静脉血浆(venous plasma glucose,VPG)葡萄糖氧化酶法测定值在一定范围内有高度相关性，美国糖尿病协会等不但推荐CBG为患者自用，且定为住院患者床边检查之用，尤其在急诊室、手术室、特护病房(ICU、CCU)等更为适用，但采用血糖仪测定时由于所用标本不同、电极干扰、患者不正确的操作等原因会造成15%～20%左右的偏差，因此一般用于血糖的动态观察。对DM的诊断和治疗则应采用自动生化分析仪，以葡萄糖氧化酶法或己糖激酶法准确测定血糖 ［2-3］。 糖尿病是一组以血浆葡萄糖水平增高为特征的代谢性疾病群，血糖控制是糖尿病治疗中的关键。快速血糖仪利用电化学反应测定血糖，测定快速，并且可以存储多个结果，越来越受到医护人员和糖尿病患者的欢迎。快速血糖仪能够及时为患者提供血糖数据，了解血糖的动态变化，为临床工作带来了很大的方便。 但由于血糖仪测定的是毛细血管葡萄糖，而且各种血糖仪之间的不精密性和变异较大，所以检测结果不能应用于糖尿病的诊断。血糖仪的应用存在不少问题，主要有：患者如何准确适用血糖仪；血糖仪的检测准确性和检测精密性；不同血糖仪甚至同一型号血糖仪之间测定值的可比性；血糖仪测定值与医院检验部门之间的一致性等等［4］。有文献报道［5］，专业人员和非专业人员血糖仪检测结果间差异明显，非专业人员的结果不准确度偏大，重复性差，经培训后结果精密度和准确度均明显提高。为了保证快速血糖仪测定结果的准确性，应定期对血糖仪的测定值与生化分析仪的测定值进行比较、校正。由于影响血糖仪测定的因素多，
葡萄糖氧化酶法测空腹血糖（标准管法） 实验目的： 1.了解自动生化分析仪的工作原理 2.熟悉糖尿病相关生化的检测项目及检测方法 3.掌握糖尿病相关生化检测项目的临床意义。 实验原理： 葡萄糖氧化酶法测空腹血糖:葡萄糖可由葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸并产生过氧化氢，后者与苯酚及4-氨基安替比林在过氧化物酶作用下产生红色化合物。在505nm波长测定该红色化合物的吸光度，能计算出葡萄糖含量。 实验操作： 1.将准备好的酶工作液（葡萄糖氧化酶和过氧化物酶、苯酚、4-氨基安替 比林）加入空白管、浓度标准管、测定管各3ml，再向标准管加20μl 葡萄糖标准液（5.55mmol/L），再向测定管加入20μl血清。 2.将三支试管放入水浴锅中，37℃保温20分钟 3.调节分光光度计波长505nm,透光度T至100%，将空白管酶工作液对光的 吸收调节为0，再用空白管调“零”点测定其他各管的吸光度。 实验结果： 分光光度计测得标准管吸光度和测定管吸光度，根据朗伯-比尔定律,得到血清样品血糖值=（测定管吸光度/标准管吸光度）x5.55 分析讨论： 酶酚混合液变成了红色是否还可以继续使用？ 不可以。酶酚混合液应为无色，如酶酚混合液已经变为红色，说明试剂污染，不可使用。 思考题： 1.高血糖对机体的影响有哪些？ 1)引起血管、神经并发症。糖尿病患者长期高血糖会使血管、神 经并发症发生和发展使病 情加重。
2)β细胞功能衰竭。长期高血糖对胰岛β细胞不断刺激，使其功 能衰竭，胰岛素分泌更 少。 3)电解质紊乱。高血糖时大量排尿，从尿带走电解质，使电解质 紊乱。 4)严重失水。高血糖引起渗透性利尿，尿量增加，机体失水。 5)渗透压增高。高血糖时，细胞外液渗透压增高,细胞内液向细胞 外流动，导致细胞内失 水。当脑细胞失水时，可引起脑功能紊乱，临床上称高渗性昏迷。 6)全身乏力。血糖过高，葡萄糖不能很好地被机体吸收利用而从尿中排出。 7)视力减退。血糖升高时，眼睛视力往往减退。 2.糖尿病患者为何会出现尿糖阳性？ 糖尿病患者的血糖超过肾糖阈（8.96～10.08mmol/L）时，近端小管对葡萄糖的重吸收达到极限，尿中开始出现葡萄糖。 3.胰岛素对人体有哪些生理作用？ 1）对血糖代谢的调节：促进细胞摄取葡萄糖。血糖浓度升高时,迅速引起胰岛素的分泌,使全身各组织加速摄取和储存葡萄糖,尤 其能加速肝细胞和肌细胞摄取葡萄糖,并且促进它们对葡萄糖的 贮存和利用。肌肉组织在无胰岛素作用时，几乎不能摄取葡萄糖。 肝细胞和肌细胞大量吸收葡萄糖后, -方面将其转化为糖原贮存 起来，或在肝细胞内将葡萄糖转变成脂肪酸，转运到脂肪组织贮 存;在肝脏,胰岛素使进食后吸收的葡萄糖大量转化成糖原,并促 进葡萄糖转变成脂肪酸,转运到脂肪组织贮存.此外胰岛素还抑 制糖原异生。胰岛素不但可使葡萄糖迅速转运入肌细胞,而且可 加速葡萄糖的利用和肌糖原的合成,从而使血糖浓度降低。胰岛 素缺乏时糖不能被贮存利用。另一方面促进葡萄糖氧化生成高能 磷酸化合物作为能量来源,结果使血糖水平下降。 2）对脂肪代谢的调节：胰岛素对脂肪合成和贮存起着非常重要的作
GLU测定 实验方法： 酶法 1葡萄糖氧化酶法（GOD） 实验原理：葡萄糖氧化酶GOD能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸和H2O2,生成的H2O2参与Trinder反应，生成醌亚胺色素，在505nm 波长下比色检测，生成的吸光度与葡萄糖浓度成正比。反应式：葡萄糖+O2 GOD 葡萄糖酸+H2O2 H2O2+4-氨基安替比林+酚POD 醌亚胺类+4H2O （无色）（红色） GOD仅高特异的催化β-D-葡萄糖，而葡萄糖中α型约占36%，因此葡萄糖的完全氧化需要α型变旋为β型。现在的试剂大多含有变旋酶，延长孵育时间也可以达到自发变旋。 GOD-POD法还可测定脑脊液葡萄糖，但不能测定尿液葡萄糖，这是因为尿液中还原性干扰物质浓度过高而影响结果的真实性。2己糖激酶法（HK） Glu + ATP HK Glu-6-P +ADP Glu-6-P +NADP+ G-6-PD 6-磷酸葡萄糖内酯+NADPH NADPH在340nm处有吸收峰，其吸光度增加与标本中的葡萄糖浓度成正比。 HK法的特异性比葡萄糖氧化酶高，是目前公认的测定血糖的方法，适用于自动化分析仪。轻度溶血、脂血、黄疸、维生素C、
氟化钠、肝素、EDTA和草酸盐等不干扰标本测定。溶血标本若血红蛋白超过5g/L时，因为从红细胞释放的有机磷酸酯和一些酶能消耗NADP。 无机化学法 Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的还原性。 Cu2+ +Glu OH- Cu+ 磷钼酸显色特异性差 有机化学法： 邻甲苯胺+Glu 缩合葡萄糖基胺脱水希夫式碱分子重排蓝灰色化合物干扰因素多 参考范围：空腹血糖<6.1mmol/L 服糖后30~60min血糖升高达峰值，一般<10mmol/L 服糖2小时恢复至空腹血糖水平 临床意义1．糖是人体的主要能量来源，也是构成机体结构物质的重要组成成分。血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的相对平衡时，则会出现高血糖或低血糖。临床检测血糖浓度主要用于糖尿病的诊断。2．血搪升高可见于：①生理性高血搪：可见于饭后1～2h或情绪紧张肾上腺分泌增加时。②病理性高血糖：可见于内分泌功能障碍引起的糖尿病；颅外伤、颅内出血、脑膜炎引起的颅内高压；脱水引起的高血糖，急慢性胰腺炎、肝功能障碍等。3．血糖降低可见于：①生理性低血糖：常见于饥饿和剧烈运动等；②病理性低血糖：可见于高胰岛素血症、非胰性肿瘤、糖原贮积症、自身免疫性疾病、半乳糖血症及肝和肾脏疾病等。
血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法） 一目的 掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理和方法。 二原理 血清样品中的葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热时，葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色的醛亚胺（Schiff碱）。血清中的蛋白质则溶解在冰醋酸和硼酸中不发生混浊。将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，在630nm波长处比色，即可测得样品中葡萄糖含量。邻甲苯胺法测得正常空腹血糖值为3.9～6.11mmol / L (即100ml血清中葡萄糖的正常值为70～100mg)。 邻甲苯胺法对葡萄糖特异性高，测定结果为真糖值，为临床上常用的血糖测定方法。此方法不受血液中其他还原物质的干扰，测定时也无需去除血浆或血清中的蛋白质。 由于血液葡萄糖在进食后明显升高，所以必须采取空腹血做血液葡萄糖测定，血细胞糖酵解作用会降低血液葡萄糖浓度，所以血液抽出后应及时测定，或用含氟化钠的抗凝剂抑制糖酵解，可稳定24小时。 三操作 1.采得待测血样（抗凝）后立即离心以分离血浆（3,000转离心15分钟）。 2.取干燥试管4支，分别标出号码，按下表添加试剂。
3.混匀各管内容物置沸水浴中加热15分钟后取出用流水冷却。 4.以空白管调零，读取各管630nm处吸光度值。 5.计算 血糖mmol/L = 测定管吸光值× 5 标准管吸光值 四实验器材与试剂 分光光度计、沸水浴、试管、移液管、电炉、烧杯、洗耳球、试管夹。 邻甲苯胺试剂：称取硫脲(AR)级1.5g，溶于940ml冰醋酸(AR级)中，加邻甲苯胺60ml。置棕色瓶中至少可用两个月。此试剂腐蚀性极强，应避免接触皮肤。 12 mmol/L苯甲酸溶液：900ml蒸馏水中加入1.4g苯甲酸，加热助溶，冷却后定容到1L。 葡萄糖标准储存液（100 mmol / L）：称取无水葡萄糖（烘箱80烘干至恒重，干燥器中保存）1.802g，溶于80ml苯甲酸溶液中，再定容到100ml。 葡萄糖标准应用液（5 mmol / L）：取标准储存液5ml，加苯甲酸溶液至100ml。
第八章糖及其代谢物的测定 第一节血清(浆)葡萄糖测定 血液中的葡萄糖称为血糖。血糖测定是临床生化检验中历史最久、占日常工作量比重较大的项目之一。过去测定血糖多采用全血，但目前多采用血清或血浆。测定血糖的方法很多，可分为三大类：氧化还原法、缩合法及酶法。国际上推荐的参考方法是已糖激酶法，但试剂比较昂贵，不适用于常规分析。我国已淘汰氧化还原法，推荐的方法是葡萄糖氧化酶法，而目前有些基层单位仍沿用邻甲苯胺法。 实验39 葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖 【原理】葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。 【试剂】 1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0) 称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g 溶于蒸馏水800ml中，用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调pH至7.0，用蒸馏水定容至1L。 2．酶试剂称取过氧化物酶1 200U，葡萄糖氧化酶1 200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于磷酸盐缓冲液80ml中，用1 mol/L NaOH调pH至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置4℃保存，可稳定3个月。 3．酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中，用棕色瓶贮存。 4．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合，4℃可以存放1个月。 5．12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至l L。 6．100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L 苯甲酸溶液约70ml中，以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。 7．5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法） 血糖是指血液中葡萄糖的含量。葡萄糖是人体主要的能量来源，血糖的测定是检查人体内部能量代谢状态的重要项目之一。这篇文章将介绍血糖定量测定的实验原理、方法以及实验注意事项。 一、实验原理 血糖的定量测定方法主要是利用葡萄糖氧化酶将血液中的葡萄糖在催化反应下转化为过氧化氢和D-酮糖酸，利用过氧化氢的比色法来测定血糖的含量。具体反应式为： (1)葡萄糖+O2+H2O→葡萄糖氧化酶 D-酮糖酸+H2O2 (2)2H2O2+Fe2+→2H2O+Fe3++O2 (3)Fe3++TSC(三硝基苯胺)→FeTSC3（红色化合物） 其中，TSC（三硝基苯胺）为过氧化氢的比色试剂，用Fe2+作催化剂促进反应进行，所生成的红色化合物FeTSC3与过氧化氢的浓度呈线性关系。 二、实验材料 1.血糖标准品：10mmol/L 2.葡萄糖氧化酶 3.三硝基苯胺（TSC）、醋酸钠、乙二胺四醋酸盐二水合物（EDTA•2H2O）、氢氧化钠（NaOH） 4.0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.5） 5.准确量杯、试管、离心管、吸光度计、恒温水浴器、移液管 三、实验步骤 1.制备血清样品：将血液放置静置后离心取血清，制成5mmol/L、10mmol/L、 15mmol/L、20mmol/L的葡萄糖标准品。 2.实验组织：3个组别，每组3个试管。A组：加1mL的10mmol/L葡萄糖标准品；B 组：加1mL的血清标本；C组：加入1mL的磷酸盐缓冲液作为对照组。注意，每组要做三个平行实验。 3.反应体系准备：
①将实验组织中的标准品、血清样本和磷酸盐缓冲液分别加入3毫升离心管中。 ②分别加入1mL葡萄糖氧化酶。 ③分别加入1mL EDTA全部气泡排除。 ⑤每组混合后放置在37℃下反应20分钟。 ⑥在上述反应过程中，加入2毫升0.1mol/L的NaOH溶液使溶液呈碱性，使催化反应更为稳定。 4.吸光测定：将反应充分混合后，吸取适量的样品，放到吸光度计槽，设定波长为505nm，用对照组值进行比较，计算出各组的吸光度，并根据标准曲线计算出各样本的葡萄糖含量。 四、实验注意事项 1.所有试剂瓶和仪器须充分清洗和消毒。 2.离心管和移液管须标志清楚，避免误用。 3.实验过程中，要控制温度、时间、试剂用量等的准确性。 4.检测样品所用的选择性比色法适用于酸性条件，需加入碱液以改变溶液PH值。 5.实验结果的准确性与精密度与试剂的质量、设备的精度等因素有关，需实验者严格操作。
竭诚为您提供优质文档/双击可除葡萄糖氧化酶法的实验报告 篇一：葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法 葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖 【原理】 葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase，goD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。过氧化物酶(peroxidase，poD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。 【试剂】 1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液(ph7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中，用 1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调ph至7.0，用蒸馏水定容至1L。
2．酶试剂称取过氧化物酶1200u，葡萄糖氧化酶1200u， 4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/Lnaoh调ph至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置4℃保存，可稳定3个月。3．酚溶液称取重蒸馏酚100mg 溶于蒸馏水100ml中，用棕色瓶贮存。4．酶酚混合试剂酶 试剂及酚溶液等量混合，4℃可以存放1个月。 5．12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至lL。 6．100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，以 12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。2h以后方可使用。 7．5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。 【操作步骤】 1．自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。 2．手工操作法取试管3支，按下表操作。 读取标准管及测定管吸光度。 【计算】 【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89～6.11mmol/L。 【临床意义】 1．生理性高血糖可见摄入高糖食物后，或情绪紧张肾
葡萄糖氧化酶法测血糖实验报告 实验目的，通过葡萄糖氧化酶法测定不同浓度的葡萄糖溶液，并利用标准曲线测定未知血糖浓度。 实验原理，葡萄糖氧化酶是一种特异性酶，只能催化葡萄糖的氧化反应。在此反应中，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同时还伴随着NAD+被还原成NADH+H+。而NADH+H+在紫外光下有较强的吸收，其吸收峰位于340nm处。因此，可以通过测定NADH+H+的吸光度来间接测定葡萄糖的浓度。 实验步骤： 1. 预先配制不同浓度的葡萄糖溶液，分别为0.1mmol/L、0.2mmol/L、 0.3mmol/L、0.4mmol/L和0.5mmol/L。 2. 取5个比色管，分别加入0.5ml不同浓度的葡萄糖溶液。 3. 加入0.5ml葡萄糖氧化酶溶液，混匀后放置在37℃恒温槽中反应10分钟。 4. 分别加入0.5mlNADH+H+溶液，混匀后立即测定吸光度A1。 5. 将比色管放入37℃恒温槽中反应5分钟后，再次测定吸光度A2。 实验数据处理： 1. 以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度差ΔA（ΔA=A2-A1）为纵坐标，绘制标准曲线。 2. 用标准曲线测定未知血糖浓度。 实验结果，标准曲线方程为ΔA=0.05C+0.01，R²=0.998，未知血糖浓度为 0.35mmol/L。
实验结论，通过葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度，可以得到准确的结果。标准曲线的斜率与浓度呈线性关系，R²接近1，说明实验结果可靠。未知血糖浓度为 0.35mmol/L，与实际值接近，证明该方法准确可靠。 实验注意事项： 1. 实验中要注意葡萄糖溶液和酶溶液的配制浓度，避免误差。 2. 在测定吸光度时，要确保比色管内溶液充分混匀，避免测定误差。 实验改进： 1. 可以尝试使用其他方法验证实验结果，提高实验的可靠性。 2. 可以尝试改变反应条件，如温度、反应时间等，观察对实验结果的影响。 总结，葡萄糖氧化酶法是一种常用的测定血糖浓度的方法，通过本次实验验证了其准确性和可靠性。在实际应用中，可以根据标准曲线测定未知血糖浓度，为临床诊断和治疗提供重要参考依据。
生物化学--实验七邻甲苯胺法测定血糖实验七邻甲苯胺法测定血糖 【目的要求】 1.掌握邻甲苯胺血糖测定法的基本原理及操作方法。 2.熟悉邻甲苯胺血糖测定法的影响因素及控制方法。 3.了解邻甲苯胺血糖测定法的临床意义及应用。 【实验原理】 血清样品中的葡萄糖在酸性环境中与邻甲苯胺共热时，葡萄糖脱水转化为5-羟甲基α-呋喃甲醛，后者与邻甲苯胺结合为蓝绿色的醛亚胺(Schiff硷)。血清中的蛋白质则溶解在冰醋酸和硼酸中不发生混浊。将标准葡萄糖溶液与样品按相同方法处理，在680nm波长处比色，即可测得样品中葡萄糖含量。邻甲苯胺法测得正常空腹血糖值为3.9,5.6mmol / L (70,100mg %)。 CHOH——CHOH HC——CH 酸中? CHOH CHOH—CHO C C—CHO HOHC 2HOHC O 2 HO 2 己醛糖羟甲基糠醛 CH3 CH 3 HC———CH HN— 2 C C—CH ,N— HOHC O 2 邻甲苯胺醛亚胺(兰色) 【实验准备】 一、器材 1. 721型分光光度计、沸水浴。 2. 5×15cm试管、刻度吸量管。 二、试剂
1.邻甲苯胺试剂称取硫脲(AR)级 2.5g,溶于750ml冰醋酸(AR级)中，将此溶 液转移入1L容量瓶内，加入刚蒸馏过的邻甲苯胺150ml，2.4, 硼酸溶液100ml及冰醋酸至1000ml刻度，置棕色瓶中至少可用两个月。 2.葡萄糖标准储存液(10 mg / ml) 用0.25,苯甲酸溶液配制。 3.葡萄糖标准应用液(1mg / ml) 取贮存液10ml放入100ml容量瓶中，用0.25,苯甲酸溶液稀释至100ml。 【实验操作】 1.采得待测血样(抗凝)后立即离心以分离血浆(3,000转离心15分钟)。 2.取干燥试管3支，分别标出号码，按下表添加试剂。 邻甲苯胺法测血糖操作表 管别测定管标准管空白管试剂(ml) 血清(浆) 0.20ml ?? ?? 葡萄糖标准液 ?? 0.20ml ?? 蒸馏水 ?? ?? 0.20ml 邻甲苯胺试剂 6.0ml 6.0ml 6.0ml 3.混匀各管内容物置沸水浴中加热15分钟后取出用流水冷却。 4.以空白管校正零点，读取各管680nm处吸光度值。 5.计算 测定管吸光度 100/0.2血糖mg%,× 葡萄糖标准液值× 标准管吸光度 【注意事项】 1.本法不需要除去蛋白质，邻甲苯胺试剂只与糖醛起反应，不与血中其他还原物质起反 应。故测定值较Folin-吴宪法为低。 2.显色反应与水的含量有关，故应使标准管和测定管的含水量一致。 3.温度 对显色反应有明显影响，煮沸时间和温度应准确控制。 4.显色后颜色不稳定，室
临床检验血糖适用方法及注意事项 糖尿病发生率呈现逐年上升趋势，死亡率数值以及致残率均比较高，其属于 终身治疗的代谢性内分泌疾病，长时间患病会造成多种并发症出现，严重威胁人 类健康。基于此，需为患者提供更加精确的实验室检查手段，借助有效治疗措施，强化血糖控制效果，维持代谢平衡，由此降低并发症发生率，对患者预后情况有 效改善。糖尿病是由多种病因造成的胰岛素不足，靶细胞针对胰岛素敏感性比较低，糖、蛋白质以及脂肪代谢异常问题出现。长时间治疗过程中，血管、肾胆等 部位均会产生不同程度损害，严重情况会面临器官功能不全或者是衰竭等，致残 率以及死亡率数值均比较高。 一、传统生化检测分析法分析 生化检测分析法需要抽取静脉血液，需刺破患者手指提取血样，完成升华分析，此种检测方式属于有创检测。血液标本采集过程中需要注意，采血后续对血 浆和血清进行立即分离，放在2-8摄氏度冰箱保存，全血标本室温下葡萄糖会被 分解大写，借助含氟化物或者是碘乙酸盐抗凝管等，针对邻甲苯胺法测血糖凸显 明显增色作用[1]。（1）邻甲苯胺法，血糖检测采用的传统方法之一是邻甲苯胺法，操作相对简单，试剂成本也比较低，现阶段教学实验或者是规模比较小的基 层医院中使用此种方式测定血糖。检测原理是葡萄糖处于酸性环境中中会实现与 邻甲苯胺供热，同时葡萄糖脱水转化为5-羟甲基-呋喃甲醛，后者会与邻甲苯胺 结合形成蓝绿色醛亚胺。标准葡萄糖溶液会与样品按照相同方式处理，采用 680nm波长测定血糖浓度。影响显色反应因素，其一是水含量，标准管和测定管 韩水平保持义齿，其余是温度，对煮沸时间和温度进行准确控制[2]。（2）葡萄 糖氧化酶法，此种方式现阶段主要应用在检测血糖普遍方式，特异性以及准确性 等均比较高，操作较为便利。葡萄糖氧化酶可将葡萄糖氧化成为葡萄糖酸以及过 氧化氢，后者经过氧化物酶作用后，逐渐分解成为水和氧，并且可将无色的4-氨 基安替比林与酚氧化缩合成为红色醌类化合物，颜色深浅处于一定范围中，其会 与葡萄糖浓度构成正比，505nm波长位置测定血糖浓度。（3）已糖激酶法，此种
葡萄糖测定试剂盒---邻苯甲胺法 货号：M100015 描述：葡萄糖与邻甲苯胺在强酸溶液中加热，糖的醛基与邻甲苯胺缩合成葡萄糖基胺，再脱水生成席夫(Schiff)碱，经结构重排产生兰绿色复合物，在630nm处有最大光密度值。据此可测定葡萄糖浓度。 常用的葡萄糖氧化酶和过氧化物酶偶联(GOD-POD)法，能特异测定血液、脑脊液中的葡萄糖浓度，但不适合作尿液中葡萄糖测定。通常尿液中各种还原性物质(如尿酸等)含量较高，会消耗葡萄糖氧化酶反应中产生的过氧化氢，降低呈色反应，从而引起负误差。邻甲苯胺(o-Toluidine)法是一种测定尿液中葡萄糖的常规方法，也可用于检测其他仅含葡萄糖的样品，如血液中的葡萄糖浓度。 用途：测定尿液、也用于仅含葡萄糖的样品如血液葡萄糖浓度。血糖测定还可用氧化酶法 (Glucose Oxidase Method, GOD)“葡萄糖测定试剂盒E1010” 组成(400次微量检测)： 1.葡萄糖标准品5 mM (90mg/100 ml)，4 × 1.5 ml。－20ºC长期保存，2~8ºC数月稳定。 2.邻甲苯胺试剂，120 ml。不用时－20ºC保存，6个月内稳定。闭光室温保存至少稳定2个月。甲苯胺 试剂产生棕色物质，干扰比色测定，应弃去。 所需仪器：(721型)可见光分光光度计、酶标仪、自动或半自动生化分析仪。波长630nm。 安全性：试剂含有冰醋酸，有较强腐蚀性强，避免接触皮肤。一旦接触立即用大量清水清洗。 操作 取数支试管，按下表加样操作(可按比例增减)。 混匀后，置佛水浴中加热10min。取出置冷水中冷却5min。分光光度计630nm，比色杯光径1.0cm，空白管调零，读标准管与测定管吸光度。 计算：葡萄糖浓度(mmol/L) = (测定管吸光度/ 标准管吸光度) ×葡萄糖标准液浓度。 单位换算公式：mmol/L = mg/dL×0.0556；mmol/L×18 = mg/dL。 说明： 1.邻甲苯胺法的测定结果基本上与葡萄糖氧化酶法和己糖激酶法相同，但尿毒症患者，邻甲苯胺法的测 定结果略有偏高。 2.除葡萄糖外，其它糖也能反应产生有色化合物，它们的相对吸光度比率分别为：葡萄糖＝1.00；果糖 ＝0.06；甘露糖＝0.96；半乳糖＝1.42；蔗糖＝0.16；麦芽糖＝0.09；乳糖＝0.29；木糖＝0.12。正常人血清只有葡萄糖、果糖和半乳糖存；但果糖和半乳糖在正常人血液中含量甚微，对实际测定结果影响极小，因而此方法可检测血液中的葡萄糖浓度。 3.邻甲苯胺试剂长期放置可产生棕色物质，干扰比色测定。不用时－20ºC保存。 4.加热温度和时间会影响显色强度。每批测定管数不宜过多，水浴水面应超过试管中的试剂液面，各管 须同时放入水浴以保证加热时间及温度一致。显色后室温每放置1分钟，颜色度约降低0.15％。 5.终反应液产生混浊的常见原因是高脂血症。可向300 µl显色液中加入150 µl异丙醇，充分混匀，溶解 脂质可消除浊度，但所测吸光度乘以 1.5。注射右旋糖酐的血液样品，因右旋糖酐不溶于邻甲苯胺试剂而产生混浊。冷水浴太冷时亦会出现混浊。 6.轻度溶血不干扰测定，但每lg/L血红蛋白能使葡萄糖测定值假性增高0.11 mmol/L，342μmmol/L胆红 质能使葡萄糖测定值假性增高1.39mmol/L，EDTA(>lmg/m1)、氟化钠(>?mg／m1)，能增高显色强度，麝草酚抑制颜色生成。 7.检测标本中葡萄糖值高达11 mmol/L(200mg/d1)。当显色液吸光度值过高时，可用冰醋酸稀释显色液
一、题目：葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度血糖测量仪： 糖尿病患者需要经常独取静脉血以测定血糖，给患者造成一定的不便。有条件的患者可以自备l台血糖检验仪，所测指血或耳血为毛细血管的血糖值，略高于静脉血糖值。但要注意，当寒冷、水肿及血管痉挛时，稍受影响，其测定范围为〔0．5～27．7毫摩尔/升(10～500毫克/分升)〕。目前市场上常见的血糖仪按照测糖技术可以分为电化学法测试和光反射技术测试两大类。前者是酶与葡萄糖反应产生的电子再运用电流记数设施，读取电子的数量，再转化成葡萄糖浓度读数。后者是通过酶与葡萄糖的反应产生的中间物（带颜色物质），运用检测器检测试纸反射面的反射光的强度，将这些反射光的强度，转化成葡萄糖浓度，准确度更高。 目前市场上尚有笔式及其他型号微量血糖测试仪供使用。90年代以来国外研制出无损伤血糖检测仪，是用电脑化的近红外线透过皮肤面测量其吸收变化，可在5秒钟内测出2．22～22．2毫摩尔/升(40～400毫克/分升)血糖。 二、实验目的 教学目的 学习葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度的基础上，掌握血糖的正常参考值，掌握肾上腺素对血糖浓度的影响，熟悉尿糖的半定量检测。 教学要求 （一）掌握血糖的正常参考值，复习血糖的来源与去路；掌握肾上腺素对血糖浓度的影响机理。 （二）熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的操作步骤及注意事项。 （三）熟悉葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理，血清的制备，血糖浓度及血糖增高率的计算，尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理及方法。 (四) 了解动物耳缘静脉取血法，血糖调节的几种因素及血糖测定的临床意义。 教学内容 （一）实验原理：血糖的正常参考值，血糖的来源与去路，血糖调节的几种因素，肾上腺素对血糖浓度的影响机理，血糖测定的临床意义，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖的原理；尿糖的原因及尿糖半定量检测的原理。 （二）实验操作：血糖测定及肾上腺素对血糖浓度的影响（收集注射肾上腺素前后耳缘静脉血，制备血清，葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法测定血糖浓度）；尿糖半定量检测。 （三）计算血糖浓度及血糖增高率。 三、血糖定义： 血糖（BS，BG）指血液中所含的葡萄糖。正常人血糖浓度相对稳定，饭后血糖可以暂时升高，但不超过180mg/dl，空腹血液浓度比较恒定，正常为70-110mg/dl（3.9-6.1mmol/L）。血中的糖类，绝大多数情况下都是葡萄糖，还有乳糖、半乳糖。体内各组织细胞活动所需的能量大部分来自葡萄糖，所以血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。 糖分是我们身体必不可少的营养之一。人们摄入谷物、蔬果等，经过消化系统转化为单糖（如葡萄糖等）进入血液，运送到全身细胞，作为能量的来源。如果一时消耗不了，则转化为糖原储存在肝脏和肌肉中，肝脏可储糖70～120克，约占肝重的6～10%。细胞所能储存的肝糖是有限的，如果摄入的糖分过多，多余的糖即转变为脂肪。当食物消化完毕后，储存的肝糖即成为糖的正常来源，维持血糖的正常浓度。在剧烈运动时，或者长时间没有补充食物情况，肝糖也会消耗完。此时细胞将分解脂肪来供应能量，脂肪的10%为甘油，甘油可以转化为糖。脂肪的其它部分亦可通过氧化产生能量，但其代谢途径和葡萄糖是不一样的。人类的大脑和神经细胞必须要糖来维持生存，必要时人体将分泌激素，把人体的某些部分（如肌肉、皮肤甚至脏器）摧毁，将其中的蛋白质转化为糖，以维持生存。象过去在图片上看到