一、显
微成像技术
（一）普通光学显微镜
?1.构成：
?①照明系统
?②光学放大系统
?③机械装置
?2.原理：经物镜形成倒立实像，经目镜放大成虚像。
?3.分辨力：指分辨物体最小间隔的能力。
?光学显微镜的分辨力R=0.61λ/N．A．
?其中λ为入射光线波长；
?N．A．为镜口率＝ｎs i nα/2；
?n=介质折射率；
?α=镜口角（样品对物镜镜口的张角）。
2、常用的光学显微镜
?（1）普通双筒显微镜有较强的立体感。
?（2）荧光显微镜：研究细胞内物质的吸收、运输、
及化学物质的分布及定位以紫外为光源。
?（3）相差显微镜，观察无色、透明、活细胞中的
结构（未经染色的活细胞）产生明暗差异
?（4）暗视野显微镜：观察未经染色的活体或胶体
粒子适合观察细胞核、线粒体、细菌、霉菌等。
?（5）倒置显微镜培养细胞观察03年选择题
倒置显微镜i n v e r s e m i c r o s c o p e
?物镜与照明系统颠倒；
?用于观察培养的活细
胞，通常具有相差或
D I C物镜，有的还具有
荧光装置。
?学习重点：
?1.光学显微技术中要掌握几种常用显微镜成像的基本原理,包括
普通双筒显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、暗视野显微
镜、倒置显微镜。掌握电子显微镜的原理和样品制备方
法，以及和光学显微镜的差别．
?２.掌握酶细胞化学技术、免疫细胞化学技术、细胞分选技
术的原理
?３.了解细胞培养和细胞融合、细胞生物反应器、染色体转
移、细胞器移植、基因转移、细胞及组织培养
?4.离心分离技术
?这一章每年都有真题出现，大部分以填空，选择和判断的
题型出现，总体看来，题目难度在下降，但是实际应用的能力
越来越看重，07、08年就近30分的考题第二章：细胞生物学研究方法
1. 原
理
?
以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束波长与 加速电压(通常50~120K V )的平方根成反比；
?
由电子照明系统透镜成
像
系统、真
空 录系统、电源系统等5部分构成；? 分辨力0.2n m ，放大倍数可达百万倍；
?
用于观察超微结构（小于0.2μm ）。
TRANSMISSION ELECTRON MICROSCOPE ，
TEM
2. 制样技术
?
1）超薄切片 ? 超薄切片厚度仅50n m 左右，用超薄切片机
（u l t r a m i c r o t o m e ）制作。
? 通常以锇酸和戊二醛固定样品，丙酮逐级脱水，
环氧树脂包埋，以热膨胀或螺旋推进的方式切片，重金属（铀、铅）盐染色。
4、 电子显微镜
? 由三大部分组成∶电子光学系统(镜筒)、真空
系统、电子学系统(供电系统)。 观察的是亚显微结构
? 电子显微镜的样品也需固定、包埋、切片 （超薄切片，切片放在载网上）、染色等。 采用负染色：只染背景不染样品
? 透射电子显微镜，扫描电子显微镜
3、 光学显微镜的样品制备与观察
? 3.1 样品的固定(f i x a t i o n )：醛类
? 3.2 包埋和切片(e m b e d d i n g a n d s e c t i o n i n g ) 切
片厚度：1-10u m
? 3.3 染色(s t a i n i n g ):有机染料
? 3.4 放射自显影技术
? 断面的三种处理方法： ? 蚀
刻（ e t c h i
n g 蚀刻
（
n
o e t c h i n g
蚀刻（d e e p e t c h i n g ）
tip cell with etching.
培养细胞内面的深度蚀刻电镜照片，示Clathrin 衣被
（二）扫描电子显微镜 ? 20世纪60年代问世，用来观察标本表面结构；
?
分
辨力为6~10n m ，因人眼的分辨力（区别荧光屏上 距离最近两个光点的能力）为0.2m m ，扫描电镜的 有效放大倍率为0.2m m /10n m =20000X 。 Scanning electron microscope （ SEM ）
3）冰冻蚀刻 f r e e z e -e t c h i n g
?
亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中冰冻。然后断开，升温后，冰升华，暴露断面结构。向断面喷涂一层蒸汽铂和碳。然后将 组织溶掉，把铂和碳的膜剥下来，此膜即为复膜（r e p l i c a ）。
2）负染技术
?
电镜观察需要有足
够的反差。用重金属盐(如磷钨酸) 染 色；吸去染料干燥后， 样品凹陷处铺了一层重金属盐，而凸的出地方没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5n m 左右。
aine
Archaebact
?
光学和电子显微镜成像原理
?照明系统的波长是显微镜成像的一个重要因素，
因为波长决定能被检测样品的最小极限
电子显微镜与光学显微镜的基本区别
分辨本领光源透镜真空
光学显微镜
300 nm可见光玻璃透镜不需真空
200 nm(油镜)可见光玻璃透镜不需真空
100 nm紫外光玻璃透镜不需真空
电子显微镜0.1 nm电子束电磁透镜真空
二、细胞化学技术
?1、酶细胞化学技术
┌────酶的细胞化学反应─────┐
│酶+条件初级捕捉剂│
底物──→反应产物──→最终反应产物
（酶反应）（捕捉反应）
?2、免疫细胞化学技术（免疫荧光技术和免疫电
镜技术）
?3、细胞分选技术
?流式细胞计，掌握原理
?细胞的分选
?染色体的分选
F l o w C y t o m e t r y’s b a s i c s t r u c t u r e
单细胞悬液
真题再现2000年用流式细胞仪分选细胞和染色体，从生物学角度来
看，应该注意的三个关键技术环节 (比较难)
三、细胞工程技术
?1
、
细
胞
培
养
*
*
*
7
年
大
题
研
究
方
法
：
体
外
培
养
动
物
细
胞
?08大题两道A为研究工作的需要，请你提出建设一间动物细胞培
养室的设计规划，包括培养室的大小、格局、基本设备、经费预算等
（10分）
?B为了将培养中的单层表皮细胞制备成单细胞悬浮液，通常要添加
E D T A或E G T A，以胰蛋白酶，请问添加这些试剂作用是什
么？（5分）
?1
.
1
原
代
培
养
(
p
r
i
m
?传代培养（二者区别？？）
?1.2细胞系和细胞株(c e l l l i n e a n d c e l l s t r a i n)
?1.3动物细胞培养方法
?贴壁培养
?悬浮培养
?1.4植物组织培养(p l a n t t i s s u e c u l t u r e)（可以留意）
?1.5植物原生质体培养
（三）激光共聚焦扫描显微境
L a s e r c o n f o c a l s c a n n i n g m i c r o s c o p e,L C S M
?用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描；
?能显示细胞样品的立体结构；
?分辨力是普通光学显微镜的3倍；
?用途类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成
立体图像。
?工作原理：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面
激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级
电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强
度，显示出与电子束同步的扫描图像。
?为了使标本表面发射出次级电子，标本在固定、脱水后，
要喷涂上一层重金属膜，重金属在电子束的轰击下发出次级电
子信号。
2.3
显微操作术
?细胞核移植、基因注入、染色体微切和胚
胎切割等手术
四、分离技术
?1、离心分离技术
?速度离心和等密度离心
?1.1速度离心分离细胞器和大分子
?●差速离心
?●移动区带离心
?1.2等密度离心
?蔗糖、甘油和氯化铯都是密度离心分离中
的介质
一、离心技术
?是分离细胞器及各种大分子基本手段。
?转速10~25k r/m i n的离心机称为高速离心机。
?转速>25k r/m i n，离心力>89K g者称为超速离
心机。
?超速离心机的最高转速可达100000r/m i n，离心
力超过500k g。
（一）差速离心D i f f e r e n t i a l c e n t r i f u g a t i o n
?特点：
?介质密度均一；
?速度由低向高，逐级离心。
?用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。
?沉
降
顺
序
：
核
?可
可可将
将将细
细细胞
胞胞器
器器初
初初步
步步分
分分离
离离，
，，常
常常需
需需进
进进一
一一步
步步通
通通过
过过密
密密度
度度梯
梯梯离
离离心
心心再
再再行
行行分
分分
离
离离纯
纯纯化
化化。
。。
2.2单克隆抗体技术(m o n o c l o n a l
a n t i
b o d y t e
c h n i q u e)
筛选用的H A T培养基是选择性培养基在
H A T培养基中，只有肿瘤细胞和正常细胞
融合形成的杂交瘤细胞才能生存，而未融
合的肿瘤细胞、正常细胞及非肿瘤细胞和正
常细胞融合形成的细胞都会死亡
单个细胞融合方法：
有限稀释法
2、细胞融合与单克隆抗体技术
?2.1细胞融合(c e l l f u s i o n)
?灭活的仙台病毒：促进融合的原因
?聚乙二醇(p o l y e t h y l e n e g l y c o l，P E G)：促进
融合的原因
（三
）密度梯度离心
?用介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细
胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过离心力场的作用使细胞
和细胞成分分层、分离。
?类型：速度沉降、等密度沉降。
?常用介质：氯化铯、蔗糖、多聚蔗糖。
?分离活细胞的介质要求：
?1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；
?2）P H中性或易调为中性；
?3）浓度大时渗透压不大；
?4）对细胞无毒。
1.速度沉降v e l o c i t y s e d i m e n t a t i o n
?用途：分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器
?特
特特点
点点：
：：介
介介质
质质密
密密度
度度较
较较低
低低，
，，介
介介质
质质的
的的最
最最大
大大密
密密度
度度应
应应小
小小于
于于被
被被分
分分
离
离离生
生生物
物物颗
颗颗粒
粒粒的
的的最
最最小
小小密
密密度
度度。
。。
?原
原原理
理理：
：：介
介介质
质质密
密密度
度度梯
梯梯度
度度平
平平缓
缓缓，
，，分
分分离
离离物
物物按
按按各
各各自
自自的
的的沉
沉沉降
降降系
系系
数
数数以
以以不
不不同
同同的
的的速
速速度
度度沉
沉沉降
降降而
而而达
达达到
到到分
分分离
离离。
。。
2.等密度沉降i s o p y c n i c s e d i m e n t a t i o n
?用途：分离密度不等的颗粒。
?特点：
?介质密度高，陡度大，介质最高密度大于被分离组分的最大密度。
?力场比速率沉降法大10~100倍，需要高速或超速离心。
?原理：样品各成分在连续梯度的介质中经过一定时间的离
心则沉降到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到
平衡，从而将不同密度的成分分离。
介质
?蔗糖，甘油（1.3g/c m3）
?氯化铯(大于1.3g/c m3)----- 浮力密度离心
二移动区带离心
?常用的是蔗糖密度梯度离心
Differential centrifugation
High
speed
Low speed
五、分
子生物学方法
?1、基因工程技术：分，切，连，转，选（基因克隆）
?2、P C R技术p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n
?P C R即：p o l y m e r a s e c h a i n r e a c t i o n。
?反应体系：①样品D N A；②引物（p r i m e r），约15-20个核苷酸；③4种d N T P；
④T a g D N A聚合酶，来自于嗜热水生菌T h e r m u s a q u a t i c u s，最适作用温度
75~80℃，短时间在95℃下不失活。⑤缓冲体系和M g2+。
?反应过程：①变性：约90-95℃；②复性：约60℃左右；③延伸：70-
75℃；④重复“变性——复性——延伸”过程20-30次循环。
3、选择性基因敲除与转基因鼠
?2007年美国的马里奥·卡佩奇、奥利弗·史密斯和英
国的马丁·伊文思因对基因打靶技术的研究而获诺贝
尔生理学医学奖。
?4、乳腺生物反应器技术
?这是一项综合技术
Sm
?比较放大率和分辨率
?比较差速离心和密度梯度离心
?比较透射电子显微镜和扫描电子显微镜
2、层析分离技术
?凝胶过滤层析
?亲和层析
?离子交换层析
Velocity (A) and Equilibrium (B) sedimentation
Arabidopsis thaliana
年前的今天自己在宿舍为了是否要考研而辗转反侧，直到现在当初试结果跟复试结果都出来之后，自己才意识到自己真的考上了。 其实在初试考完就想写一篇关于考研的经验，毕竟这也是对自己一年来努力做一个好的总结，也希望我的经验，可以帮助奋斗在考研路上的你们。 首先当你决定考研的时候，请先想想自己是为了什么才决定要考研，并且要先想一下为什么非要选这个专业，作为你今后职业的发展方向，学习的动机决定了之后备考路上努力的成功还有克服一切困难的决心。考研是一个很重要的决定，所以大家一定要慎重，千万不要随波逐流盲目跟风。 我选择这所学校的原因，一是因为这里是我的本校，二是因为这里离家也比较近。所一大家一定更要个根据自己的实际情况来做出选择。 好啦，接下来跟大家好好介绍一下我的复习经验吧，希望对你们有所帮助。 另外还要说一句，这篇经验贴分为三个部分，先说英语政治，再说专业课，并且文章结尾分享了资料和真题，大家可以放心阅读。 兰州大学细胞生物学的初试科目为: (101)思想政治理论 (201)英语一 (613)细胞生物学 (810)分子生物学 参考书目为： 1.《细胞生物学》翟中和高等教育出版社 2.《分子生物学》（第三版）朱玉贤编高等教育出版社 3.《木糖英语真题手译》2021版
先介绍一下英语 现在就可以开始背单词了，识记为主（看着单词能想到其中文章即可，不需要能拼写）从前期复习到考试前每天坚持两到四篇阅读（至少也得一篇）11月到考试前一天背20篇英语范文（能默写的程度）。 那些我不熟悉的单词就整理到单词卡上，这个方法也是我跟网上经验贴学的，共整理了两本，每本50页左右，正面写英语单词，背面写汉语意思。然后这两本单词卡就陪我度过了接下来的厕所时光，说实话整理完后除了上厕所拿着看看外还真的没专门抽出空来继续专门学单词。按理说，单词应该一直背到最后，如果到了阅读里的单词都认识，写作基本的词都会写的地步后期可以不用看单词了，当然基础太差的还是自动归档到按理说的类别里吧。 阅读就一个技巧，做真题、做真题、做真题，重要的事情说三遍！常规阅读就40分，加之新题型、完型填空、翻译都算是阅读的一种，总之除了作文基本都是阅读，所以得阅读者得天下啊。阅读靠做真题完全可以提升很大水平，当然每个人做真题以及研究真题的方法不一样，自然达到的效果不一样，这里方法就显得尤为重要了。 对于阅读，首先要做题并校对，思考答案为何与你的选择不同，并把阅读中不懂的单词进行记录并按照上面提及的方法对单词进行识记。第二遍：做题，并翻译全文（可口头翻译），有利于对文章更深入的理解。 在开始做题的时候，并思考出题者出每道题的意图、思考出题人的陷阱设置。第三遍时应能做到明白出题人对每个选项是如何设置陷阱的，每个选项的错误是属于什么类型的错误以及出题人为什么要这样出题。一篇阅读做三遍并不是一次就把这三遍做完。打个比方，我先按照上面提及的第一遍的方法把阅读从99年
细胞生物学教案 （来自https://www.doczj.com/doc/431856062.html,）目录 前言 第一章绪论 第二章细胞结构概观 第三章研究方法 第四章细胞膜 第五章物质运输与信号传递 第六章基质与内膜 第七章线粒体与叶绿体 第八章核与染色体 第九章核糖体 第十章细胞骨架 第十一章细胞增殖及调控 第十二章细胞分化 第十三章细胞衰老与凋亡
前言 依照高等师范院校生物学教学计划，我们开设细胞生物学。 一、学科本身的重要性 要最终阐明生命现象，必须在细胞水平上。细胞是生命有机体最基本的结构和功能单位，生命寓于细胞之中，只有把各种生命活动同细胞结构相联系，才能在细胞水平上阐明各种生命现象。世界著名生物学家Wilson（德国人）曾说过：“一切生物学问题的答案最终要到细胞中去寻找”。 二、学科发展特点 细胞生物学涉及知识面广、内容浩繁且更新迅速。它同生物化学、遗传学形成生命科学的鼎立三足，既是当代生命科学发展的前沿，又是生命科学赖以发展的基础。 三、欲达到的目的 通过系统地学习细胞生物学，丰富细胞学知识，以适应当代人类社会知识结构发展的需求，也是为考研做准备。 本课程讲授51学时，实验21学时，共72学时。 参考资料 1 De.Robertis，《细胞生物学》，1965年（第四版）；1980年（第七版）《细胞和分子生物学》 2 Avers，“Molecular Cell Biology”， 1986年 3 Alberts，《细胞的分子生物学》，“Molecular biology of the cell”，1989年 4 Darnell，《分子细胞生物学》，1986年（第一版）；1990年（第二版）“Molecular Cell Biology”5郑国錩，细胞生物学，1980年，高教出版社；1992年，再版 6 郝水，细胞生物学教程，1983年，高教出版社 7 翟中和，细胞生物学基础，1987年，北京大学出版社 8 韩贻仁，分子细胞生物学，1988年，高等教育出版社；2000年由科学出版社再版 9 汪堃仁等，细胞生物学，1990年，北京师范大学出版社 10 翟中和，细胞生物学，1995年，高等教育出版社，2000年再版 11 郑国錩、翟中和主编《细胞生物学进展》， 12翟中和主编《细胞生物学动态》，从1997年起（1—3卷），北师大出版社 13徐承水等，《分子细胞生物学手册》1992，中国农业大学出版社 14徐承水等，《现代细胞生物学技术》1995，中国海洋大学出版社 15徐承水，《细胞超微结构研究》2000，中国国际教育出版社 学术期刊、杂志 国外：Cell、Science、Nature、J.Cell Biol.、J.Mol. Biol. 国内：中国科学、科学通报、实验生物学报、细胞生物学杂志等
Southern杂交: 是体外分析特异DNA序列的方法，操作时先用限制性内切酶将核DNA或线粒体DNA切成DNA片段，经凝胶电泳分离后，转移到醋酸纤维薄膜上，再用探针杂交，通过放射自显影，即可辨认出与探针互补的特殊核苷序列。 将RNA转移到薄膜上，用探针杂交，则称为Northern杂交。 RNAi技术: 是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-stranded RNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达，所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗领域。可以利用siRNA或siRNA表达载体快速、经济、简便的以序列特异方式剔除目的基因表达，所以现在已经成为探索基因功能的重要研究手段。 Southern杂交一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段，将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上，经干烤或者紫外线照射固定，再与相对应结构的标记探针进行杂交，用放射自显影或酶反应显色，从而检测特定DNA分子的含量]。 扫描电镜技术：是用一束极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。 细胞显微分光光度计：用来描述薄膜、涂层厚度超过1微米的物件的光学性能的显微技术。 免疫荧光技术：将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。 电镜超薄切片技术：超薄切片是为电镜观察提供极薄的切片样品的专门技术。用当代较好的超薄切片机，大多数生物材料，如果固定、包埋处理得合适，可以切成50-100微米的超薄切片。 Northern印迹杂交（Northern blot）。这是一种将RNA从琼脂糖凝胶中转印到硝酸纤维素膜上的方法。 放射自显影技术：放射自显影技术是利用放射性同位素的电离辐射对乳胶（含AgBr或AgCl）的感光作用，对细胞内生物大分子进行定性、定位与半定量研究的一种细胞化学技术。放射自显影技术（radioautography；autoradiography）用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等等。其原理是将放射性同位素（如14C和3H）标记的化合物导入生物体内，经过一段时间后，将标本制成切片或涂片，涂上卤化银乳胶，经一定时间的放射性曝光，组织中的放射性即可使乳胶感光。 核磁共振技术：可以直接研究溶液和活细胞中相对分子质量较小(20，000 道尔顿以下)的蛋白质、核酸以及其它分子的结构，而不损伤细胞。 DNA序列分析：在获得一个基因序列后，需要对其进行生物信息学分析，从中尽量发掘信
细胞生物学考研复习笔记 ------------翟中和第一章绪论 第二章细胞基本知识概要 第三章细胞生物学研究方法 第四章细胞质膜与细胞表面 第五章物质的跨膜运输与信号传递 第六章细胞质基质与细胞内膜系统 第七章细胞的能量转换──线粒体和叶绿体 第八章细胞核(nucleus)与染色体(chromosome) 第九章核糖体(ribosome) 第十章细胞骨架(Cytoskeleton) 第十一章细胞增殖及其调控 第十二章细胞分化与基因表达调控 第十三章细胞衰老与凋亡
第一章绪论 细胞生物学研究的内容和现状 细胞生物学是现代生命科学的重要基础学科 细胞生物学的主要研究内容 当前细胞生物学研究的总趋势与重点领域 细胞重大生命活动的相互关系 细胞学与细胞生物学发展简史 细胞的发现 细胞学说的建立其意义 细胞学的经典时期 实验细胞学与细胞学的分支及其发展 细胞生物学学科的形成与发展 细胞生物学的主要学术组织、学术刊物与教科书 细胞生物学 生命体是多层次、非线性、多侧面的复杂结构体系，而细胞是生命体的结构与生命活动的基本单位，有了细胞才有完整的生命活动。 细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学，它是在不同层次（显微、亚显微与分子水平）上以研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细 胞信号传递、真核细胞基因表达与调控、细胞起源与进化等为主要内容。核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来。 主要内容 细胞结构与功能、细胞重要生命活动： 细胞核、染色体以及基因表达的研究 生物膜与细胞器的研究 细胞骨架体系的研究 细胞增殖及其调控 细胞分化及其调控 细胞的衰老与凋亡 细胞的起源与进化
2017版武汉大学《661细胞生物学》全套考研资料 我们是布丁考研网武大考研团队，是在读学长。我们亲身经历过武大考研，录取后把自己当年考研时用过的资料重新整理，从本校的研招办拿到了最新的真题，同时新添加很多高参考价值的内部复习资料，保证资料的真实性，希望能帮助大家成功考入武大。此外，我们还提供学长一对一个性化辅导服务，适合二战、在职、基础或本科不好的同学，可在短时间内快速把握重点和考点。有任何考武大相关的疑问，也可以咨询我们，学长会提供免费的解答。更多信息，请关注布丁考研网。 以下为本科目的资料清单（有实物图及预览，货真价实）： 2017版武汉大学《661细胞生物学》考研复习全书是武汉大学高分已录取的学长收集整理的，全国独家真实、可靠，是真正针对武汉大学考研的资料。我们将所有的资料全部WORD化，高清打印。真题编写了详细的答案解析，即使是小题也明确指出了考察的知识点，对于做题帮助更大。同时，我们在分析历年考研真题的基础上，针对武大考研，编写了详细的复习备考讲义，明确列出考研的重点、难点和考点，可在短时间内快速把握重点，提升成绩。初试大家只需要准备我们的资料+教材+配套辅导书就足够了，不用再四处寻找其它资料。 全套资料包括以下内容： 一、武汉大学《细胞生物学》考研内部信息汇总 “备考篇”主要汇总了考武汉大学生物专业必备的一些信息，主要包括：历年复试分数线，本专业报考难度及竞争情况分析，根据历年真题的考察范围而归纳的考试大纲，学长对于政治、英语等公共课及本专业课的复习策略等。掌握初试必备的信息，才可安心复习。 二、武汉大学《细胞生物学》历年考研真题及答案解析 注：后期真题及答案均免费更新，请在备注处留下邮箱，更新后会第一时间将电子档发给大家。 2015年武汉大学《细胞生物学》考研真题（含答案解析） 2014年武汉大学《细胞生物学》考研真题（含答案解析） 2013年武汉大学《细胞生物学》考研真题（含答案解析） 2012年武汉大学《细胞生物学》考研真题（含答案解析） 2011年武汉大学《细胞生物学》考研真题（含答案解析） 2010年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2009年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2008年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2007年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2006年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2005年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2004年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2003年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2002年武汉大学《细胞生物学》考研真题 2001年武汉大学《细胞生物学》考研真题
第二章细胞生物学研究方法 第三节细胞分离技术 一、离心技术 离心是研究如细胞核、线粒体、高尔基体、溶酶体和微体，以及各种大分子基本手段。一般认为，转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kｇ者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/min，离心力超过500Kg。 （一）、差速离心（differential centrifugation） 在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心，用于分离不同大小的细胞和细胞器（图2-22）。 在差速离心中细胞器沉降的顺序依次为：核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高基体、最后为核蛋白体。 由于各种细胞器在大小和密度上相互重叠，而且某些慢沉降颗粒常常被快沉降颗粒裹到沉淀块中，一般重复2～3次效果会好一些。 差速离心只用于分离大小悬殊的细胞，更多用于分离细胞器。通过差速离心可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分离纯化。 图2-22 速度逐渐提高，样品按大小先后沉淀 （二）、密度梯度离心（density gradient centrifugation） 用一定的介质在离心管内形成一连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质的顶部，通过重力或离心力场的作用使细胞分层、分离。这类分离又可分为速度沉降和等密度沉降平衡两种（图2-23）。密度梯度离心常用的介质为氯化铯，蔗糖和多聚蔗糖。分
离活细胞的介质要求：1）能产生密度梯度，且密度高时，粘度不高；2）PH中性或易调为中性；3）浓度大时渗透压不大；4）对细胞无毒。 图2-23 ?A等速度沉降，B等密度沉降 1、速度沉降 速度沉降（velocity sedimentation）主要用于分离密度相近而大小不等的细胞或细胞器。这种降方法所采用的介质密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度。 生物颗粒（细胞或细器）在十分平缓的密度梯度介质中按各自的沉降系数以不同的速度沉降而达到分离。 2、等密度沉降 等密度沉降（isopycnic sedimentation）适用于分离密度不等的颗粒。 细胞或细胞器在连续梯度的介质中经足够大离心力和是够长时间则沉降或漂浮到与自身密度相等的介质处，并停留在那里达到平衡，从而将不同密度的细胞或细胞器分离。 等密度沉降通常在较高密度的介质中进行。介质的最高密度应大于被分离组分的最大密度，而且介质的梯度要求较高的陡度，不能太平缓。再者，这种方法所需要的力场通常比速率沉降法大10~100倍，故往往需要高速或超速离心，离心时间也较长。大的离心力、长的离心时间都对细胞不利。大细胞比小细胞更易受高离心力的损伤，而且停留在等密度介质
水生所细胞生物学考研试题 2012年水生所细胞生物学考研试题 一、名词解释(每题2分，共20分) 1.半自主性细胞器（semi-autonomous organelles） 2.门通道（gate channel ） 3.核内有丝分裂（endomitosis） 4.过氧化物酶体（peroxisome） 5.非编码RNAs （Non-coding RNA） 6.磷脂酰肌醇信号通路（PI pathway） 7.转录组学（transcriptomics） 8.分子货仓（molecular warehouse） 9.隔离子（chromosome insulator） 10.内膜系统（endomembrane systems） 二、填空题（每空1分，共 20分） 1. 跨膜蛋白主要依靠以及相互作用力,而嵌入脂双层膜上。 2. 迄今端粒酶活性只发现在和组织细胞中。 3. 在细胞周期中染色体的凝集与去凝集作用的主要调节因子是和，它们分别在细胞周 期的期和期活性最强。 4. 磷脂合成是在光面内质网的面上进行的,合成的磷脂向其他细胞部位转移的方式主要是 和。 5. 根据核纤层的成分分析,它应属于细胞骨架的家族,其主要功能是和。 6. 细菌的鞭毛与动物细胞的鞭毛主要区别是和。 7. 早期胚胎细胞周期要比体细胞周期快，因为早期卵裂细胞具有不须而能分裂的能力。 8. 细胞中的蛋白质处于不断更新过程中，决定蛋白质寿命的信号位于通过途径将不稳定的蛋白 质彻底降解。 9. 在动物细胞培养过程中，贴壁生长的正常二倍体细胞表面相互接触时分裂随之停止，这种现象称为细 胞的。 10. 是迄今发现的最小最简单的细胞。 三、简答题(每题10分，共70分) 1.细胞生物学的发展可以分为哪几个阶段？各时期的标志是什么？ 2.简述线粒体与疾病的关系。 3.列表说明常染色质和异染色质的异同。 4.细胞内膜的区室化具有什么生物学意义？ 5.什么是Hayflick界限，什么是端粒，两者关系如何？ 6.简要说明偶线期到粗线期染色体的重要事件及其生物学意义。 7.简述单克隆抗体技术及其意义。 四、论述题(每题20分，共40分) 1.生殖细胞的发生是发育和遗传的基础。假设你从文库中筛选到了一段在生殖细胞中特异表达的cDNA序 列，请设计实验研究其功能。 2.说明细胞识别与通讯中“第一信使”、“第二信使”、“第三信使”的含义、作用及其意义。 2011回忆版
1990 年 试题 一、名词解释 : (每题 6 分，共 30 分) 1.cDNA library 以 mRNA 为模板，经反转录酶合成互补DNA 构建而成的基因库 是以特定的组织或细胞mRNA 为模板，逆转录形成的互补DNA （ cDNA ）与适当的载体（常用噬菌体或质粒载体）连接后转化受体菌形成重组DNA 克隆群，这样包含着细胞全部 mRNA 信息的 cDNA 克隆集合称为该组织或细胞的cDNA 文库 2.Aritotic apparatus 3.跨膜信号 transmembrane signal 4.促有丝分裂原 mitogen 5.Nuclear lamina 二．论述题 : (每题 30 分，共 120 分) 1.细胞有丝分裂后期染色体分离趋向两极的机理是如何证明的? 2. Kinetochore 是由哪几种主要蛋白组成，用什么方法研究其定位、分子量及机能? 3. 举例说明oncogene、 growth factors 及受体之间的联系 4.试述横纹肌、细胞内粗细丝两分子的结构、各种主要蛋白成分在肌肉收缩中的作用。
1991 年试题一、名词解释 : 1.着丝点与着丝粒用 6.蛋白印迹法二、论述题 : 2.核纤层 3.多线染色体 (western blotting) 7.2G 4. cdc2 (cell Division) 5. 受体介导的内吞作 蛋白 8.同源盒 9.原位杂交 10.原癌基因 1.简述细胞连接的儿种类型及共功能 2.简述微管、微丝组装的动力学不稳定模型 1992 年试题 1.胞内体 2.信号肽与导肽 3.跨细胞转运 4.微管组织中心 5.踏车行为 6.核纤层 7.驱动蛋白 8.成 虫盘 9.桥粒和半桥粒 10.周期素二、论述题： 1.膜离子通道的类型及其调节机制 2.糖蛋白的加工部位及其转运 4.细胞有丝分裂过程中染色体的运动及其机理 5.以果蝇举例说明动物体节分化的基因调节 6.核仁组成结构与功能的分子学基础 1993 年试题 二、论述题： 1细胞质膜的主要功能 2.试述鉴别动物细胞各周期时相群体的方法 3.试述非肌肉细胞中肌球蛋白和肌动蛋白相互作用的调节机制 4.如何用实验证明细胞被决定 5.缁类激素调节基因表达的机制 1994 年试题 一、名词解释： 1. 荧光原位杂交 2.内含子、外显子、原初转录体的关系 3.southwestern（ blotting ） 4. 编程性细胞死亡 5.中心体 6.受体介导的胞吞作用 7.小核糖核蛋白颗粒（snRNPs） 8. 同源异形突变 9.联会复合体10.转基因动物 二、论述题： 1. 试述高尔基体对蛋白质的加工及分选功能 2.粘合斑的结构与功能 3.细胞周期中G1 至 S 期、 G2 至 M 期调控事件 4.亲脂类和肽类外信号分子细胞信号传导的异同
第二章细胞生物学研究方法 (the research method in the cell biology) 教学目的 1、了解主要工具和常用方法，侧重掌握基本原理和基本应用； 2、认识工具和方法与学科发展的相关性。 教学内容 本章从以下5个方面介绍了细胞生物学的研究方法: 1．显微成像技术 2．细胞化学技术 3．细胞分选技术 4．细胞工程技术 5．分离技术 6．分子生物学方法 计划学时及安排 本章计划3学时。 教学重点和难点 生命科学是实验科学，它的很多成果都是通过实验才得以发现和发展的。许多细胞生物学的重要进展以及新概念的形成,往往来自新技术的应用。因此,方法上的突破,对于理论和应用上的发展具有巨大的推动作用，这是学习本章应确立的基本思想。 1．显微成像包括直接成像和间接成像。显微技术是细胞生物学最基本的研究技术, 包括光学显微技术和电子显微技术。在光学显微技术中要掌握几种常用显微镜成像的基本原理,包括普通双筒显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、倒置显微镜。电子显微镜是研究亚显微结构的主要工具, 透射和扫描电镜的是两类主要的电子显微镜, 对其基本结构、工作原理和样品制备方法则是学习的重点。 2．细胞化学技术介绍了酶细胞化学技术、免疫细胞化学技术、细胞分选技术, 其中流式细胞分选技术是细胞生物学和现代生物技术中的重要技术, 应重点掌握。 3．细胞工程技术是细胞生物学与遗传学的交叉领域，主要利用细胞生物学的原理和方法，结合工程学的技术手段，按照人们预先的设计，有计划地改变或创造细胞遗传性的技术。包括体外大量培养和繁殖细胞，或获得细胞产品、或利用细胞体本身。主要内
一、章（节、目）授课计划第页
二、课时教学内容第 技术的进步在一门学科的建立与发展过程中起着巨大的作用。没有 显微镜的发明就没有细胞的发现，更不会有细胞学说的建立，没有电子显微技 术及其分子生物学技术的结合，就不会有细胞生物学今天的发展。 细胞生物学研究方法：一般来说，凡是用来解决细胞生物学问题所采用的 方法，都属于细胞生物学研究方法。当前细胞生物学研究中常用到的方法有: 核酸和蛋白质成分的分析和序列测定、研究特异DNA、RNA常用的southern杂交、Northwre杂交及蛋白质免疫印迹技术、基因打靶技术等等。 第一节细胞形态结构的观察方法 一、有关显微镜的一些概念 （1）分辨率（resolution）：指分辨物体最小间隔的能力。 光学显微镜的分辨率 R=λ/N．sin（α/2）． 其中λ为入射光线波长； N =介质折射率；空气中N =1 α=物镜镜口角（样品对物镜镜口的张角）。 （2）放大倍数（magnification）：是指眼睛看到像的大小与对应标本大小的 比值。它指的是长度的比值而不是面积的比值。 例：放大倍数为100×，指的是长度是1μm的标本，放大后像的长度是 100μm，要是以面积计算，则放大了10,000倍。 显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。 （3）有效放大倍数（effective magnification）：物镜的数值孔径（NA）决 定了显微镜有效放大倍数。有效放大倍数，就是人眼能够分辨的d′与物镜的 d间的比值，即不使人眼看到假像的最小放大倍数： M=d′/d 二、显微镜的分类 现代显微镜可以分为两大类：一类是光学显微镜，另一类是非光学
细胞膜结合蛋白分为：载体蛋白（通过改变构象介导溶质分子跨膜转运）和通 道蛋白（分为：离子通道 ion channel，孔蛋白 proin，水孔蛋白AQP） 小分子物质（离子）跨膜运输类型（根据跨膜蛋白参与、提供能量）分为： 1、简单扩散(simple diffusion)：小分子物质（O 2、N2、）以热自由运动方式顺电化学梯度或浓度梯度直接通过脂双分子层，无需膜转运蛋白协助，不消 耗能量（ATP）。 2、被动运输（passive transport）：溶质顺电化学梯度或浓度梯度，在膜转运蛋白协助下的跨膜转运方式，又叫（facilitated diffusion），不需要能量，动力来自电化学梯度或浓度梯度，多种极性小分子和无机离子：水分子、糖、 氨基酸、核苷酸、代谢产物。 3、主动运输（active transport）：载体蛋白介导，逆电化学梯度或浓度梯度的跨膜运输方式。分为：ATP驱动泵（水解ATP供能）、间接供能（协同转 运或偶联转运蛋白）、光驱动（细菌利用光能） ATP驱动泵分为：P型泵、V型质子泵、F型质子泵、ABC超家族。 P型泵：两个a亚基具有ATP结合位点，两个β亚基其调节作用，a亚基（磷 酸化、去磷酸化）改变构象，实现离子（Na、K、Ca、H）逆浓度转运。（1）Na-K泵（Na-K pump，Na-K ATPase）结构和转运机制：动物细胞质膜上，2个a亚基、2个β亚基（β亚基：糖基化多肽，不参与离子跨 膜转运，帮助内质网上新合成a亚基折叠）四聚体，a亚基在胞内结合 Na离子促进ATP水解，其上天冬氨酸残基磷酸化后构象改变，将Na 离子泵出胞外；后与胞外K离子结合，去磷酸化将K离子泵入细胞完成 循环（消耗一个ATP,泵出3个Na，泵入2个K），特点：ATP供能，主动转运，逆电化学梯度跨膜转运。功能：1、维持细胞膜电位，2、维 持动物细胞渗透平衡，3、吸收营养（为吸收葡糖、氨基酸提供电化学 梯度势能） （2）Ca离子泵（Ca-ATPase，与Na-K泵a亚基同源）：Ca是胞内重要信号分子，基质内少，细胞器内多，（胞质内游离Ca维持在低水平，质 膜和细胞器上Ca离子泵），通过水解1个ATP泵出2个Ca离子。动 物细胞基质内，Ca与钙调蛋白结合后激活Ca离子泵 （3）P型H+泵：主要存在于植物细胞、真菌、细菌，功能与Na-K泵一致，将H泵出胞质，建立维持跨膜H+电化学梯度，帮助吸收糖、氨基酸跨 膜协同转运，因此胞外呈酸性。 V型质子泵：动物细胞胞内体如：溶酶体膜，植物酵母液泡膜上将胞质内H+ 转运到细胞器中（逆化学梯度，不形成磷酸化中间体，水解ATP供能），维持胞质中性和细胞器内酸性。 F型质子泵：线粒体内膜、植物类囊体膜、细菌质膜，顺H+电化学梯度泵出 H+,合成ATPase。 膜电位：细胞质膜两侧因带电物质浓度差异形成的电位差。 胞吞（endocytosis）胞吐（exoctyosis）作用：真核细胞通过质膜包被大分子物质（蛋白质、多核苷酸、多糖）形成囊泡摄取或分泌大分子物质的过程。（又称膜泡运输） 胞吞作用分为：
厦门大学细胞生物学历年考研真题 细胞生物学历年真题 厦门大学1999年招收攻读硕士学位研究生入学考试试题 招生专业：细胞生物学考试课程：细胞生物学 研究方向： 一、填空（每题2分，共20分） 1、光学显微镜的分辨率是指____________________.它与和 有关，光镜的最大分辨率是。 2、构成细胞的最基本的要素是、和完整的代谢系统。 3、超薄切片的染色常采用和双染法。 4、测定细胞的DNA合成，常用的放射性前体物是；测定细胞的RNA合成，常用的放射性 前体物是。 5、组成生物膜的基本成分是，体现膜功能的主要成分是 。 6、细胞器具有特征的酶，线粒体是，溶酶体是， 内质网是，高尔基体是。 7、当核基因编码的线粒体蛋白进入线粒体时，需要和提供能量来推动。 8、在某些生物特定发育段的细胞中，有一类巨大染色体，它包括某些体细胞中的 和生长期卵母细胞中的。 9、中间纤维家族的各成员在体内的分布具有组织特异性，其中存在于上皮细 胞，存在于中胚层起源的细胞和体外培养细胞。 10、与肌动蛋白纤维相关的锚定连接方式主要有和。 二、判断题（判断正确得1分，弃权得0分，错误倒扣1分，共10分。） 1、1665年，荷兰詹森（Janssen）发现第一个植物细胞。（） 2、广义的说，细胞质基质是指细胞质的可溶相，即指除了悬浮在细胞质中的细胞器和内含物以外的基质部 分。（） 3、细胞内核糖体合成有内源性蛋白和外源性蛋白。一般来说，内源性蛋白是由膜旁核糖体合成的，外源性 蛋白是由游离核糖体合成的。（） 4、Ⅱ型糖原增多症（或pompe氏病）是由于常染色体隐性基因缺陷而致使α－葡萄糖酶完全缺乏，使糖 原在许多组织内积蓄，这是先天性溶酶体病。（） 5、线粒体的增殖与细胞的增殖是同步的。（） 6、生物氧化过程中的副产物或中间产物与细胞衰老直接相关，它们能导致细胞结构和功能的改变，这就是 所谓的生物大分子交联论。（） 7、在DNA复制过程，合成冈崎片段的链是不连续的复制链。它是后行链。（） 8、癌组织中的细胞间隙连接的数目显著减少，细胞间通讯发生障碍。（） 9、采用孚尔根（Feulgen）染色和细胞显微分光光度计可测定单个细胞核中的DNA含量。（） 10、生物样品的电镜分辨率通常是超薄切片厚度的十分之一，因而切的越薄，照片中的反差也越强。（） 三、选择题（每小题1分，共10分） 1质膜中各种组分的分布是高度不对称的，在红细胞中（） A外层含磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸较多，而内层则含鞘磷脂、磷脂酰胆碱较多。 B外层含鞘磷脂、磷脂酰胆碱较多，而内层则含磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸较多。 C外层含不饱和脂肪酸较多，内层含饱和脂肪酸较多
第三章 细胞生物学研究方法 第一节细胞形态结构的观察方法 分辨率： 肉眼0.2mm 光镜0.2μm 电镜0.2nm 一、光学显微镜技术 （light microscopy ） （一）普通复式光学显微镜技术 a ． 光学放大系统：目镜和物镜 光镜 照明系统：光源、折光镜和聚光镜，有时另加各种滤光片 组成 机械和支架系统 b ．分辨率D ：分开两个质点间的最小距离。 0．61 λ 其中： λ为光源波长 D ＝ α为物镜镜口张角 N ·sinα/2 N 为介质折射率 c.普通光镜样品制备： 固定（如甲醛）、包埋（如石蜡）、切片（约5μm）、染色 （二）荧光显微镜技术（fluorescence microscopy 光镜水平对特异蛋白定性定位） 1．FM 包括免疫荧光技术和荧光素直接标记技术 2．不同荧光素的激发光波长范围不同，所以同一样品可以同时用两种以上荧光 素标记。荧光显微镜中只有激发荧光可以成像。 （三）激光共焦点扫描显微镜技术（laser scanning confocal microscopy ） 1．特点：瞬间只用很小一部分光照明，保证只有来自焦平面的光成像，成像清晰 分辨率比普通荧光显微镜提高1.4－1.7倍。 通过改变焦平面位置可以观察较厚样品的内部构造，进行三维重构。 2． 共焦点是指物镜和聚光镜同时聚焦到同一小点。 （四）相差和微分干涉显微镜技术 1．相差显微镜（phase-contrast microscopy ） 光线通过不同密度物质产生相位差，相差显微镜将其变成振幅差。它与普通光镜 的不同是其物镜后有一块“相差板”，夸大了不同密度造成的相位差。 2．微分干涉显微镜（differential －interference microscopy ）——用的是平面偏振光 光经棱镜折射成两束，通过样品相邻部位，再经棱镜汇合，使样品厚度上的微 小 差别转化为明暗区别，使样品产生很强的立体感。 二、电子显微镜技术（electron microscope ） （一）电子显微镜基本知识 1．与光镜的基本区别：电子束作光源、电磁透镜聚焦、镜筒高真空、荧光屏等成像 2．分辨本领与有效放大倍数： 分辨率0.2nm ，比肉眼放大有效放大倍 数 分辨本领指电镜处于最佳状态下的分辨率。 实际情况中，分辨率受样品限制。 3．电子显微镜 电子束照明系统：电子枪、聚光镜 基本构造 成像系统：物镜、中间镜、投影镜等 真空系统：用两级真空泵不断抽气 记录系统：荧光屏或感光胶片成像 （二）主要电镜制样技术介绍
第二章：细胞的基本知识概要 1、如何理解“细胞是生命活动的基本单位”这一概念？ 1）一切有机体都有细胞构成，细胞是构成有机体的基本单位 2）细胞具有独立的、有序的自控代谢体系，细胞是代谢与功能的基本单位 3）细胞是有机体生长与发育的基础 4）细胞是遗传的基本单位，细胞具有遗传的全能性 5）没有细胞就没有完整的生命 6）细胞是多层次非线性的复杂结构体系 7）细胞是物质（结构）、能量与信息过程精巧结合的综合体 8）细胞是高度有序的，具有自装配与自组织能力的体系 2、细胞的基本共性是什么？ 1）所有的细胞表面均有由磷脂双分子层与镶嵌蛋白质构成的生物膜 2）所有的细胞都有DNA与RNA两种核酸 3) 所有的细胞内都有作为蛋白质合成的机器――核糖体 4）所有细胞的增殖都是一分为二的分裂方式 3、说明原核细胞与真核细胞的主要差别。 4、何谓细胞外被？它有哪些功能？ 1) 细胞外被是指动物细胞表面的由构成质膜的糖蛋白和糖脂伸出的寡糖链组成的厚约10～20nm的绒絮状结构。 2) 功能：(1) 细胞识别；(2) 血型抗原；(3) 酶活性。 5、细胞连接都有哪些类型？各有何结构特点？ 细胞连接按其功能分为：紧密连接，锚定连接，通讯连接。 1) 紧密连接（封闭连接），细胞质膜上，紧密连接蛋白(门蛋白)形成分支的链索条，与相邻的细胞质膜上的链索条对应结合，将细胞间隙封闭。 2) 锚定连接：通过中间纤维（桥粒、半桥粒）或微丝（粘着带和粘着斑）将相邻细胞或细胞与基质连接在一起，以形成坚挺有序的细胞群体、组织与器官。 3) 通讯连接：包括间隙连接和化学突触，是通过在细胞之间的代谢偶联、信号传导等过程中起重要作用的连接方式。 4) 胞间连丝连接：是高等植物细胞之间通过胞间连丝来进行物质交换与互相联系的连接方式。 第五章物质的跨膜运输与信号传递 6、物质跨膜运输有哪几种方式？它们的异同点。 跨膜运输：直接进行跨膜转运的物质运输，又分为简单扩散、协助扩散和主动运输。 1) 简单扩散：顺物质电化学梯度，不需要膜运输蛋白，利用自身的电化学梯度势能，不耗细胞代谢能； 2) 协助扩散：顺物质电化学梯度，需要通道蛋白或载体蛋白，利用自身的电化学梯度势能，不耗细胞代谢能； 3) 主动运输：逆物质电化学梯度，需要载体蛋白，消耗细胞代谢能。 7、说明Na+-K+泵的工作原理及其生物学意义。
第二章细胞生物学研究方法 一、名词解释 1、resolution：分辨力是指显微镜或人眼在25cm的明视距离处，能清楚地分辨被检物体细微结构最小距离的能力。能够区分的两点间的距离越小，表示分辨力越高。 2、显微结构：通过光学显微镜所观察到的样品的各种结构，如细胞的大小、外部形态以及细胞核、线粒体、高尔基复合体、中心体等内部构成都属于显微结构。 3、超微结构：也称亚显微结构。指在电子显微镜下所观察到的细胞结构，如细胞核、线粒体、高尔基复合体、中心体、核糖体、微管、微丝等细胞器的微细结构。 4、细胞培养：指活细胞在体外的培养技术，即在无菌条件下，从机体中取出组织或细胞、模拟机体内正常生理状态下生存的基本条件，让它在培养皿中继续生存、生长和繁殖的方法。 5、原代培养：指从机体组织中取材后接种到培养基中所进行的细胞培养，即直接取材于机体的细胞培养。所形成的细胞称原代细胞，它是在体外培养任何一种体细胞所必须经历的阶段和传代培养的基础。 6、传代培养：指当原代培养的细胞在培养瓶中生长、增殖到一定密度后，一分为二或以其他比例分装或转移到2个以上的培养瓶中所进行的再培养。 7、细胞融合：又称为细胞杂交，指细胞彼此接触时，2个或2个以上的细胞合并成为一个细胞的现象。 8、cell line ：原代培养首次传代成功后，则称之为细胞系。如细胞系的生存期有限，则称之为有限细胞系；已获无限繁殖能力，能持续生存的细胞系，则称为连续细胞系或无限细胞系。 二、选择题 【A1型题】 1、A； 2、B； 3、B； 4、A； 5、C； 6、D； 7、A； 8、D； 9、C；10、D；11、C；12、A；13、A；14、B； 15、C；16、A；17、E；18、A；19、C；20、D；21、C；22、E；23、A；24、D；25、B；26、E 【A2型题】 1、E； 2、D； 3、C； 4、D； 5、A； 6、B； 7、C； 8、D； 9、D；10、A 【X型题】 1、ACE； 2、CDE； 3、AE； 4、CE； 5、ABCD； 6、ABC； 7、ABCED； 8、ACD； 9、ABCD 三、填空题 1、普通显微镜相差显微镜暗视野显微镜荧光显微镜 2、照明系统光学放大系统机械装置系统 3、电子照明系统电磁透镜成像系统真空系统记录系统电源系统 4、物镜和照明系统的位置颠倒 5、扫描电子显微镜透射电子显微镜 6、0.1μm 0.1mm 3nm 7、差速离心法密度梯度离心法 8、0.2μm R=0.61λ／N.A. N.A.=n·sinα／2 9、细胞化学法荧光细胞化学和免疫荧光镜检术放射自显影技术细胞显微分光光度测定技术流式细胞计量术细胞组分的分级分离法 10、冰冻蚀刻 11、原代培养传代培养 12、单层生长形态变成多态性具有接触抑制现象 13、体外环境不能与体内的条件完全等同 四、判断题 1、√； 2、×； 3、√； 4、×； 5、√； 6、×； 7、√； 8、√； 9、√；10、×；11、√；12、×；13、×；14、×
一、章（节、目）授课计划第页 GAGGAGAGGAFFFFAFAF
GAGGAGAGGAFFFFAFAF
二、课时教学内容第页 GAGGAGAGGAFFFFAFAF
技术的进步在一门学科的建立与发展过程中起着巨大 的作用。没有 显微镜的发明就没有细胞的发现，更不会有细胞学说的建立，没有电子显微技术及其分子生物学技术的结合，就不会有细胞生物学今天的发展。 细胞生物学研究方法：一般来说，凡是用来解决细胞生物学问题所采用的方法，都属于细胞生物学研究方法。当前细胞生物学研究中常用到的方法有:核酸和蛋白质成分的分析和序列测定、研究特异DNA、RNA常用的southern 杂交、Northwre杂交及蛋白质免疫印迹技术、基因打靶技术等等。 第一节细胞形态结构的观察方法 一、有关显微镜的一些概念 （1）分辨率（resolution）：指分辨物体最小间隔的能力。光学显微镜的分辨率 R=0.61λ/N．sin（α/2）． 其中λ为入射光线波长； N =介质折射率；空气中N =1 GAGGAGAGGAFFFFAFAF
α=物镜镜口角（样品对物镜镜口的张角）。（2）放大倍数（magnification）：是指眼睛看到像的大小与对应标本大小的比值。它指的是长度的比值而不是面积的比值。 例：放大倍数为100×，指的是长度是1μm的标本，放大后像的长度是100μm，要是以面积计算，则放大了10,000倍。 显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。 （3）有效放大倍数（effective magnification）：物镜的数值孔径（NA）决定了显微镜有效放大倍数。有效放大倍数，就是人眼能够分辨的d′与物镜的d间的比值，即不使人眼看到假像的最小放大倍数： GAGGAGAGGAFFFFAFAF
考研专业详细解说之细胞生物学 一、专业介绍 1、学科简介 细胞生物学是一级学科生物学下设的二级学。该学科是在19世纪细胞学的基础上逐步发展起来的，其研究对象是细胞，而细胞是一切生物的基本结构单位，所谓生命实质上就是细胞属性的反映。细胞生物学作为现代生物学的重要基础学科之一，是从细胞整体、超微和分子水平上研究海洋生物的细胞结构、生命活动规律及相关开发应用的学科。随着现代生物学各个分支学科的交叉汇合，各个学科都要到细胞中去探索各自研究领域的生命机理，从而使细胞生物学在现代生物科学中一直处于核心地位。 二、就业前景 1、就业方向 该专业可在与生物技术直接相关的医药、食品、农林类科研单位、高新技术企业、院校从事科研、教学、技术及管理工作。该专业出国是个比较好的选择，在中国一般从事制药业，如果专业知识很强又有门路的话可进政府机关或研究机构。 2、就业前景 生物专业的都不好就业，毕竟是纯理论的，如果你想今后做研究出国，这倒是个不错的选择，不过这行竞争压力很大，要出国的话学历不仅要高，发的文章也要好，而且国家对纯生物的基础研究支持少，多数是应用的支持的多，而国外不尽然了。 三、推荐院校 北京大学、东北师范大学、北京师范大学、厦门大学、浙江大学、上海交通大学、清华大学、山东大学、中国农业大学、兰州大学、武汉大学、南京农业大学、四川大学 四、专家建议 现在细胞生物学在产业上的应用应该有这么两大块：一个是细胞衍生产物，利用细胞来生产抗体、某些重要的蛋白等;另一个是应用与再生医学的干细胞。
前者的产业已经开始运作，但是还没有形成很大的规模。后者正在起步，只有美国已经开始有产品进行临床研究了，用间充质干细胞来进行下颌骨重建等。但是我们国内的干细胞产业刚刚开始，并且面临政策的不明朗性，要真正应用起来，尚需时日。但是这个应用一旦突破，将是一个极大的市场。所以该专业也还是有一定的前景的。 五、就业分布最多的5城市 主要分布在北京、上海及重要的省会城市。 六、相近专业 相同一级学科下的其他专业有：植物学、动物学、生理学、水生生物学、微生物学、神经生物学、遗传学、发育生物学、生物化学与分子生物学、生物物理学、生态学…… 七、课程设置(以河南农业大学为例) 公共课：自然辩证法、科学社会主义理论与实践、硕士生英语; 专业课：现代细胞生物学、现代分子生物学、转基因动植物的方法和原理、现代细胞生物学实验技术、现代生命科学研究专题、专业讨论 选修课：基因组学与蛋白组学、分子生物学实验技术、细胞工程、免疫学原理与技术、专业英语、动物细胞与胚胎工程、植物组织培养、现代生物化学实验技术。 八、目标专业在全国范围内的较强院校 北京大学、浙江大学、中国科学技术大学、四川大学、上海交通大学、北京师范大学、厦门大学、复旦大学、中山大学、清华大学、武汉大学、河北师范大学 九、与目标专业相近的二级学科(可供调剂的专业) 植物学、动物学、生理学、水生生物学、微生物学、神经生物学、遗传学、发育生物学生物化学与分子生物学、生物物理学、生态学 目前已设立细胞工程、细胞分化、细胞毒理和细胞遗传四个主要的研究方向，已具备研究生培养的实验室及仪器设备条件，取得了一系列重大研究成果，总体研究水平接近国际先进水平，部分研究领域已接近国际领先水平。21世纪是生命科学的世纪，处于生命科学核心地位的细胞生物学正在蓬勃发展，它的快速发展必将不断地把生命科学推向更高的新水平。