化学分析方法验证程序
编制说明
一、任务来源
经国家标准化管理委员会同意，设立认证认可行业标准，由国家认监委归口管理。本标准是由国家认监委下达的2013年认证认可行业标准制修订计划项目《化学分析方法验证程序》（立项编号为2012RB010），由上海出入境检验检疫局和广东出入境检验检疫局负责起草。
二、立项背景
对分析方法进行验证的主要目的是确证该方法达到某一分析目标。在验证过程中往往能够发现方法的不足之处，或发现方法中存在的非预期的问题，例如出现干扰物、试剂和设备不再可用、设备需要改造等，这些问题的出现要求对方法进行的改进。此外，通过实验室间的验证还常常会发现这样的情况，一个新建方法在某一实验室内获得的分析结果令人满意，但在同样的操作条件下应用于另一实验室则不能获得满意结果，这也同样说明方法存在问题和需要改进。对方法进行验证和改进两个步骤需要反复进行，直到方法的各方面参数均能满足预期的分析目标。
目前我国针对方法的验证尚无统一的验证程序，以往国家标准及检验检疫行业标准制定过程中对方法的验证均是按照约定俗成的做法（以下称为“原验证模式”），即仅进行实验室内验证及协同试验验证两个步骤。近年来在标准的审定过程中发现，原验证模式在实施中存在以下几个主要问题：
（1）原验证模式对验证参数的选择这一关键性验证步骤未作规范，导致方法起草人在实施验证过程中做法不一致，影响验证的有效性。
原验证程序中未规定如何选择验证参数（即方法的特性参数），一般由方法起草人自行选择，则可能出现所选验证参数不全面或不具代表性的问题。此外，即使是对同一参数的验证，起草人的做法也不统一和不规范。新验证程序中规范了验证参数的选择及具体验证过程的实施等技术要点，统一验证做法。
（2）原验证模式中对验证实验室的选择、验证物料的获取等直接影响到验证结果有效性的步骤未设定具体要求。
原验证模式中，已有一些文件对标准的验证作出部分规定，如《SN/T 0001-1995 出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定》和《SN/T 1831-2006 进出口化矿金商品化学分析方法标准编写的基本规定》。然而这些文件仅对验证提出简单要求，例如规定协同试验应由8-11家实验室进行等。在实际操作过程中，由于现存文件对于验证实验室的选择未作规定，一般由起草人自行选择，因而可能存在所选验证实验室不具代表性的问题，这将直接影响验证结果的有效性。新的验证程序中对可能影响到验证结果的参数均作出详细规定，保障了验证结果的有效性。
因而，验证是保证一个新建方法具有适用性、科学性和严谨性的关键步骤，因此，十分有必要建立一个统一的验证程序来规范标准方法开发过程中的验证工作。
三、标准制定依据
1、参考文献
本标准在大量调研国内外同类文件、文献的基础上制定，主要参考文献列举如下：
（1）美国公职分析化学家协会（AOAC）单实验室验证导则（AOAC Guidelines for Single Laboratory validation ）和协同试验验证导则（AOAC Guidelines for Collaborative Study validation ）。
（2）欧盟委员会决议2002/657/EC分析方法性能及结果解释（COMMISSION DECISION of 12 August 2002 implementing Council Directive 96/23/EC the performance of analytical methods and the interpretation of results ）
（3）国际纯粹与应用化学协会（IUPAC）统一的单实验室分析方法验证指导原则（IUPAC harmonized guidelines for single laboratory validation of methods of analysis）
（4）人用药品注册技术规定国际协调会议（ICH）分析过程的确证：方法学（Guidance for Industry Q2B Validation of Analytical Procedures: Methodology）。
（5）国内转化ICH导则：化学药物质量控制分析方法验证技术指导原则。
（6）ISO 5725-2/GB/T6379.2：测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）第2部分：确定标准测量方法重复性与再现性的基本方法。
（7）HJ 168-2010 环境监测分析方法标准制修订技术导则
2、本标准和同类文献的差异
本标准的技术内容与上述文献的主要差异如下：
（1）较之于国内外同类程序及文件，本标准将“实验室内验证”、“独立实验室验证”、“协同试验验证”三个关键性步骤，规范于同一个标准程序中，以使整个验证流程更具完整性、延续性和可操作性，有利于标准使用者了解并顺利完成整个验证流程；
（2）本标准参考了上述国内外权威文献资料中的技术手段，但对于每一项“验证参数”，都具体制定了的验证方法，以资料性附录的形式给出，以供标准使用者参考使用。
四、标准主要内容的技术论证
1、适用范围
化学分析方法种类多样，在化学品、矿产品、金属材料等化矿金分析领域的化学方法占比例较大，其中包括化学分析方法和仪器分析方法，仪器分析方法又包括色谱法、质谱法、光谱法等。本标准制定的验证程序，适用于化学品、矿产品、金属材料等领域化学分析方法的验证，由于食品检测项目较多、检测方法较为复杂，因而对分析方法验证的要求也与化矿金化学分析方法验证的要求略有差异，因而本标准适用范围未将食品检测用化学分析方法列入其中，但食品检测类化学分析方法的验证也可参考本标准的技术内容进行。因而本标准的适用范围规定如下：
本标准规定了对化学分析方法进行验证的程序。
本标准适用于化学品、矿产品、金属材料等领域化学分析方法的验证。2、技术内容概要
根据方法验证的步骤，分为三个部分：
一为实验室内验证（in-house validation），指方法开发方通过本实验室内对方法特性指标的测试，初步判断方法的适用性；
二为独立实验室验证（independent laboratory validation），指独立于方法开发方的实验室，通过重复测试方法的性能指标，以审核方法特性指标是否能够满足预期的分析目标；
三为协同实验验证（collaborative study validation），指协同实验室通过协同实验以获得测量方法与结果的准确度（正确度与精密度）。
3、“实验室内验证程序”技术内容的设定
本实验室内验证程序部分：规定了本实验室内验证方案的设计，包括对方法文本的要求、对方法稳健性的验证、对方法预期用途的描述、验证参数的选择方法、本实验室内验证步骤等技术参数。
3.1 对“方法文本”的技术要求
由于验证所考察的分析方法应是一个标准化的方法，因而这个方法（1）首先应是稳健的，即试验过程中的微小变动不会导致试验结果产生不可预估的大变化。为便于标准使用者，本标准以资料性附录的方式，在附录A中给出了稳健性试验步骤。（2）此外，所建立分析方法的文件应该是明确和完整的。所有涉及该方法使用环境的重要操作，包括试剂和器具、设备的初始检查、测试样品的准备等都应包括在分析方法中。分析方法中还应规定校正程序和校正频率。
3.2 对“方法预期用途描述”的技术要求
“方法预期用途”是指开发一项方法的目的。为达到好的验证效果，方法开发方应根据实际情况描述方法的预期用途。预期用途的描述内容应当包括制定方法的目的，分析物的形态、存在形式及其分布的介质、浓度，现有法规及动态等相关信息；必要时，还应包括其应用的时域、地域、行业等信息。
3.3 验证参数的选择方法
方法开放方应根据所开发方法的预期用途选择合适的验证参数，并形成实验室内验证方案。典型的验证参数包括方法的选择性、检出限、定量限、线性、范围、灵敏度、稳健性、正确度、精密度。方法的预期用途决定了对方法性能的具体要求，验证参数的选择应根据方法的预期用途加以确定。对于不同类型的化学检测方法，标准给出了验证参数的选择原则：
3.4 对“实验室内验证步骤”的技术要求
方法开发方应按照计划的验证方案首先完成本实验室内的验证，初步判断方法的适用性。为便于标准使用者，标准以资料性附录的方式，在附录B中给出了选择性、检出限、定量限、线性、范围等各验证参数的具体验证步骤。本实验室内验证的目的，是为了让方法开发方在其实验室内对方法的性能指标进行验证，判断在其实验室内，所开发的方法是否已经能够达到方法制定之初所设定的目标。因而，在本实验室内的验证过程中，若某一参数的结果表明分析方法不能满足检测目标的特定要求，方法开发方应对该方法进行必要的修改后，并重新进行验证，直至能够证明其满足检测要求。
4、“独立实验室验证程序”技术内容的设定
在建立化学分析方法的过程中常常会发现，一个新建方法在某一实验室内获得的分析结果令人满意，但在同样的操作条件下应用于另一实验室则不能获得满意结果，可能由于地域、操作人员、仪器设备等各种原因导致，这也同样说明方法存在问题和需要改进。此时，“独立实验室验证”发挥的作用就尤为重要，需要由1-2 家独立于方法开发方的验证实验室，按照方法开发方设计的验证方案，即选择的验证参数，进行独立实验室验证。
验证实验室通过重复测试实验室内验证参数，以审核方法性能指标是否能够满足预期的分析目标，或查找和发现方法无法满足预期分析目标的原因。若独立实验室验证结果无法满足方法预期的分析目标，则应将结果反馈给方法开发方，并要求其对方法进行必要的审查并重新进行本实验室内验证流程；若结果能满足方法预期的分析目标，则完成独立实验室验证流程。
5、“协同试验验证程序”技术内容的设定
本部分的技术内容涉及：协同试验验证实验室的选择、物料的准备、以及协同试验的开展实施等技术内容，分别论证如下：
5.1 对“验证实验室数”规定的技术要求
为了使验证试验的数据具有统计学意义，实验室数的选择是在可利用资源与将估计值的不确定度降低至一个满意的水平之间的一种折中。从图1中可以看出，当参加试验的实验室数很小（p=5）时，重复性标准差和再现性标准差的不确定度是很大的，而且增加2-3个实验室，不确定度将会有很大的降低。而当p 大于20时，再增加2到3个实验室只能使估计值的不确定度降低很少。一般取
p 为8～15为宜。只有在极个别的情况下，如能够参加验证试验的实验室确实不足，或者测试非常昂贵，或者样品本身确实难以得到等原因，可以采用5个实验室进行验证试验（SN/T 0001中规定参加协同试验的实验室个数不得少于5个，且所提供的结果数据都要在统计估计的置信区间之间。另一来自ASTM E691的规定为：在任何情况下分析方法的精密度结果必须基于来自同一物料的不少于6个验证实验室的可接受测试结果），在这种情况下，鼓励验证试验的组织者要增加每个实验室的重复测量次数n ，不低于4次。
图1 以概率水平95%，预期sr 的偏离不超过其真值得倍数
因而本标准中规定：“6.1.1参加协同实验的实验室个数一般取8～15，要求获得至少8 个有效数据报告。只有在极个别的情况下，如参加验证试验的实验室确实不足，或者测试非常昂贵，或者样品本身确实难以得到等原因，可以采用较少实验室（不少于5 个有效数据报告）进行验证试验。”
5.2对“每个实验室在每个测试水平需要进行的测试次数，n ”规定的技术要求
ISO 5725中说明，当实验室间标准差σL 大于重复性标准差σr （即γ大于2，
γ=σR /σr ，22r L
R σσσ+=）时，每个实验室在每个水平的测试结果数n=2时，
并不会获得比n=2时多太多的信息。因此若认为存在可疑测试结果的危险性较小时，一般可取n=2（如图2）。ASTM E691规定，一般情况下每个实验室在每个测试水平进行测试的次数为化学测试3次，物理或光学测试3～4次。
图2：以概率水平95%，预期sR的偏离不超过其真值的倍数因而本标准中规定：“6.3.2一般情况下每个实验室在每个测试水平进行测试的次数为3 次。若认为存在可疑测试结果的危险性较小时，一般可取n为2”。
5.3对“验证实验室的选择”的技术要求
从统计的观点来看，那些参加验证试验的实验室宜从所有可使用该测量方法的实验室中进行随机选取，自愿参加的实验室可能不代表实验室的实际组成。且参加的实验室不宜仅由那些在对测量方法进行标准化过程中已获得专门经验的特别“标准”的实验室组成。在征集所需数目的协同实验室时，应明确规定这些实验室的职责。一个“实验室”被认为是操作员、设备和测试场所的一个组合。一个测试场所（或通常意义的一个实验室）可产生几个“实验室”，只要它能够为几位操作员的每一位提供独立的仪器设备和测试场地。
因而本标准中规定：“6.1.2验证实验室选择要具代表性和公信力，参加的实验室不宜仅由那些在对测量方法进行标准化过程中已获得专门经验的特别“标准”的实验室组成”。
5.4对“物料水平”的技术要求
在确定一个测量方法的准确度的测试中，所使用的物料应该完全能代表该测量方法在正常的使用中的那些物料。作为一般规则，使用5种不同的物料通常就能够满足较大的水平变化范围，用这些水平完全能够确定所要求的准确度。（ISO 5725）此外，实验室间验证中物料的类型和数目将取决于该类待测物料的水平范围以及在此范围内精密度与浓度水平的关系，取决于获取、加工、及分发样品过程的难度和费用，取决于进行测试所需要的时间和费用等。例如，若已知道在待测物料的水平范围内精密度相对恒定或与平均水平成比例，则较之于仅仅知道在不同水平精密度不同，前一种情况下只需要较小的物料数目。一个实验室间验证试验应最少选择3种物料代表不同的测试水平。（ASTM E691）
因而本标准中规定：“6.2.2作为一般规则，使用5 种不同的物料通常就能够满足要求。此外，实验室间验证中物料的类型和数目还取决于获取、加工及分发样品过程的难度和费用，取决于进行测试所需要的时间和费用等。一个实验室间验证试验应最少选择 3 种物料代表不同的测试水平。物料的选择既应确保其能代表测量方法在正常使用中的那些物料，又应满足方法的预期用途。如为评估材料与技术法规的符合性而开发的化学检测方法，在进行实验室间验证时，物料中至少应包含一种目标分析物浓度（含量）接近于法规限量的样品”。
5.5 对“物料制备”的技术要求
物料的制备应考虑抽样、均匀性、稳定性、在运输中可能的损坏及周围环境条件的影响等。应尽可能选择均质的物料或对物料进行均质化。当物料必须进行均质化时，应对该种物料以最合适的方式进行均质化。在对不能均质化的固体物料（如金属、橡胶、纺织品等）进行测量时，或不能对相同试样重复测量时，物料的非均质性将成为该测量方法精密度的一个重要分量。（ISO 5725）如果容器一旦被打开，物料就有变质的危险（例如被氧化、损失挥发或吸湿物料），那么对于每一水平下的样本，应对每个实验室使用n个不同的容器。对于不稳定的物料，应给出特殊的储藏和处置说明书。如果要测量的物料是由不同相对密度的粉状物料混合而成或由不同大小的颗粒组成的，那么由于震动可能会产生分离（例如在运输过程中），因此需要特别注意。在受试样本可能与空气发生反应时，样品可以被封在被抽空或者用惰性气体填充的玻璃瓶内。
因而本标准中对物料制备的要求规定如下：“6.2.1方法开发人应进行验证用样品的准备，对样品进行匀质化，并对其均匀性和稳定性进行测试”。此外，，本标准中以资料性附录的方式在附录C中给出了均匀性与稳定性实验步骤。
5.6 对“物料数量”的技术要求
在决定试验所需的物料数量时，应考虑到在获得某些测试结果时会出现偶然的操作过失，从而需用到额外的物料。（ISO 5725）需准备的物料数量应当足以满足测试之用，并且允许适当的冗余。应考虑在得到正式的测试结果之前一些实验室为了熟悉测量方法而获得某些初步测试结果是否可取，如可取，则也应考虑是否应提供额外的物料（非精密度试验样本）。（ASTM E691）但是，也不能提供过多的物料样品，以防止有实验室出于某种原因，过多地进行实验，并且从中“挑选”报告某些检测结果，从而人为地提高了该实验室的精密度。一般以所需试验的物料量的2-5倍为宜。
因而在本标准中规定：“6.2.3在决定试验所需的物料数量时，应考虑到在获得某些测试结果时会出现偶然的操作过失，从而需用到额外的物料。需准备的物料数量应当足以满足测试之用，并且允许适当的冗余。但是，也不能提供过多的物料样品，以防止有实验室出于某种原因，过多地进行实验，并且从中“挑选”报告某些检测结果，从而人为地提高了该实验室的精密度。一般以所需试验的物料量的2-5 倍为宜”。
6、资料性附录
6.1 稳健性实验步骤（附录A）
一个好的分析方法应该不受环境等因素的变化而变化，即对于温度、湿度、气压等环境因素的变化，以及对于加入试剂量、反应时间等其他因素呈现不灵敏性。稳健性（耐变性）试验是考察环境或其他条件变量对分析方法影响的一项检验程序，进行稳健性试验的目的在于鉴别这些必须仔细控制的实验条件，并在试验方法文本中予以明确的书面说明。例如，实验室温度或试验中使用的某一加热装置的温度，这些条件在某些情况下具有不可忽略的影响，而在另一些情况下则影响很小，进行稳健性试验可引入温度自由变量以建立温度控制允许范围。
本标准附录A中介绍的是数理统计学家尤登设计的耐变性试验（Youden’s Ruggedness Test），无需繁琐的方差分析，只需一般的数学计算即能对因素的影
响作出判断，同时它还具有试验次数少的优点。
6.2化学分析方法验证参数验证方法（附录B）
本标准在附录B中给出了各验证参数的验证方法，分别进行技术论证如下：（1）选择性（附录B.1）：选择性指在杂质、辅料等其他成分可能存在的情况下，采用的分析方法能够正确鉴定、检出被分析物质的特性。为一种分析物或一组分析物选定一种方法，这种方法就是特定的，通常鉴别、杂质测定、含量测定方法中均应考察其选择性。应当用各种样品来研究方法的选择性，所用的样品种类从单纯的测量标准到具有复杂基体的混合物。在每种情况下，都应当确定被研究的分析物的分离情况，并充分说明可疑干扰的影响。如采用的方法的选择性不够，应采用多个方法予以补充，方法选择性的任何限制都应在方法中有文件化的规定。标准附录B.1给出了了选择性的具体验证方法。
（2）检出限（附录B.2）：检出限指试样中的被分析物能够被检测到的最低量，但不一定要准确定量。该验证指标的意义在于考察方法是否具备灵敏的检测能力。如对杂质限量试验，需证明方法具有足够低的检测限，以保证检出需控制的杂质。方法检出限的确定方法可有以下几种，根据不同的检测方法选择合适的确定方法。然而无论用何种方法，均应用一定数量的浓度为近于或等于检测限试样进行分析，以可靠地确证检测限。建议在给出检测限时说明引用的是哪一种方法。标准附录B.2给出了了检出限的具体验证方法。
（3）定量限（附录B.3）：定量限指试样中的被分析物能够被定量测定的最低量，其测定结果应具有一定的准确度和精密度。定量限体现了分析方法是否具备灵敏的定量检测能力。杂质定量试验，需考察方法的定量限，以保证含量很少的杂质能够被准确测出。方法检出限的确定方法有许多种，根据不同的检测方法选择合适的确定方法。然而无论用何种方法，均应用一定数量浓度为近于或等于定量限的试样进行分析，以可靠地确定定量限。建议在给出定量限时说明引用的是哪一种方法。标准附录B.3给出了了定量限的具体验证方法。
（4）校正与线性（附录B.4）：线性是定量测定的基础，涉及定量测定的项目，如杂质定量和含量测定均需要验证线性。对线性进行验证时需考虑到基质效应。基体对待测组分的影响称为基体效应，基体效应对于选择合适的测量方式有很大的影响。常用的校准曲线测量法只有在没有基体效应或基体效应不影响测定
结果时才能使用。如果基体效应影响测定结果，但对测定结果影响不是太大时，可用标准加入测量法来消除存在的基体效应的影响。但基体效应很明显时，只能用预先分离基体的测量法（即校准曲线测量法与标准加入测量法的结合）。标准附录B.4给出了了校正与线性的具体验证方法。
（5）范围（附录B.5）：范围指能够达到一定的准确度、精密度和线性，测试方法适用的试样中被分析物高低限浓度或量的区间。通常取特定方法的定量限为方法适用范围的定量检测下限，取工作曲线弯曲处作为方法适用范围的定量检测上限。标准附录B.5给出了了范围的具体验证方法。
（6）正确度（附录B.6）：正确度是指测试值与约定真值之间的接近程度。正确度可用“偏倚”定量地表示，偏倚越小说明正确度越高。偏倚通常通过比较方法响应值与被赋予已知值的参考物质测得。标准对正确度参考值的选用进行了规定。标准附录B.6给出了了正确度的具体验证方法。
（7）重复性精密度（附录B.7）：重复性指在一定的操作条件下，由同一操作人员，在同一实验室内，使用同一仪器，并在短期内，对相同试样所作多个单次测试结果间的接近程度。通常用同时测量的双平行值或多个平行值的相对标准偏差RSDr表示。标准附录B.7给出了了重复性精密度的具体验证方法。
6.3验证样品均匀性与稳定性评价方法（附录C）
物料的制备应考虑抽样、均匀性、稳定性、在运输中可能的损坏及周围环境条件的影响等。应尽可能选择均质的物料或对物料进行均质化。当物料必须进行均质化时，应对该种物料以最合适的方式进行均质化。在对不能均质化的固体物料（如金属、橡胶、纺织品等）进行测量时，或不能对相同试样重复测量时，物料的非均质性将成为该测量方法精密度的一个重要分量。
如果容器一旦被打开，物料就有变质的危险（例如被氧化、损失挥发或吸湿物料），那么对于每一水平下的样本，应对每个实验室使用n个不同的容器。对于不稳定的物料，应给出特殊的储藏和处置说明书。如果要测量的物料是由不同相对密度的粉状物料混合而成或由不同大小的颗粒组成的，那么由于震动可能会产生分离（例如在运输过程中），因此需要特别注意。在受试样本可能与空气发生反应时，样品可以被封在被抽空或者用惰性气体填充的玻璃瓶内。
标准的附录C给出了物料制备的均匀性及稳定性检验方法。
五、标准征求意见情况
本标准于2012年12月13日完成了标准的征求意见稿，并进行了征求意见，情况如下：
CNAS-GL037 临床化学定量检验程序性能验证指南Guidance on the Verification of Quantitative Measurement Procedures used in the Clinical Chemistry 中国合格评定国家认可委员会
前言 本文件由中国合格评定国家认可委员会（CNAS）制定，是对CNAS-CL02《医学实验室质量和能力认可准则》和CNAS-CL02-A003《医学实验室质量和能力认可准则在临床化学检验领域的应用说明》中有关临床化学定量检验程序进行性能验证实验所做的具体解释和指导，供医学实验室和评审员参考使用。 本文件为首次发布。
临床化学定量检验程序性能验证指南 1 范围 本指南适用于申请认可或已获认可的医学实验室对临床化学检验程序进行性能验证，也可供评审员在现场评审过程中参考使用。 本指南主要适用于医学实验室使用的临床化学定量检验方法，其他专业领域使用的定量检验程序/方法可参考使用。 临床化学定量检验程序，也称临床化学定量检验方法，在本指南中统一称为临床化学定量检验程序（以下简称“检验程序”）。 本指南适用于实验室采用的经确认的检验程序。 2 规范性引用文件 下列文件对于本指南的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅该版本适用于本指南。凡是未注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改部分）适用于本指南。 GB/T 26124-2011《临床化学体外诊断试剂（盒）》 WS/T 408-2012《临床化学设备线性评价指南》 WS/T 416-2013 《干扰实验指南》 WS/T 420-2013《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》 WS/T 492-2016《临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证》 3 术语和定义 对于本指南，GB/T 29791.1-2013（ISO 18113-1：2009，IDT）中的定义适用。下列术语和定义适用于本指南。 3.1 可报告范围 reportable range 体外诊断医疗器械性能特征已被验证的测量区间。[GB/T29791.1-2013/ISO 18113-1：2009 3.46 注1] 4总则
药品微生物检验替代方法验证指导原则 本指导原则是为所采用的试验方法能否替代药典规定的方法用于药品微生物的检验提供指导。 随着微生物学的迅速发展，制药领域不断引入了一些新的微生物检验技术，大体可分为三类：（1)基于微生物生长信息的检验技术，如生物发光技术、电化学技术、比浊法等；(2)直接测定被测介质中活微生物的检验技术，如固相细胞技术法、流式细胞计数法等；（3)基于微生物细胞所含有特定组成成分的分析技术，如脂肪酸测定技术、核酸扩增技术、基因指纹分析技术等。这些方法与传统检查方法比较，或简便快速，或具有实时或近实时监控的潜力，使生产早期采取纠正措施及监控和指导优良生产成为可能，同时新技术的使用也促进了生产成本降低及检验水平的提高。 在控制药品微生物质量中，微生物实验室出于各种原因如成本、生产量、快速简便及提高药品质量等需要而采用非药典规定的检验方法（即替代方法）时，应进行替代方法的验证，确认其应用效果优于或等同于药典的方法。 微生物检验的类型及验证参数 药品微生物检验方法主要分两种类型：定性试验和定量试验。定性试验就是测定样品中是否存在活的微生物，如无菌检查及控制菌检査。定量试验就是测定样品中存在的微生物数量，如菌落计数试验。 由于生物试验的特殊性，如微生物检验方法中的抽样误差、稀释误差、操作误差、培养误差和计数误差都会对检验结果造成影响，因此，药品质量标准分析方法验证指导原则（附录XIX A)不完全适宜于微生物替代方法的验证。药品微生物检验替代方法的验证参数见表1。 表1 不同微生物检验类型验证参数 注： 尽管替代方法的验证参数与药品质量标准分析方法验证参数有相似之处，但是其具体的内容是依据微生物检验特点而设立的。替代方法验证的实验结果需进行统计分析，当替代方法属于定性检验时，一般采用非参数的统计技术；当替代方法属于定量检验时，需要采用参数统计技术。 进行微生物替代方法的验证时，若替代方法只是针对药典方法中的某一环节进行技术修改，此时，需要验证的对象仅是该项替代技术而不是整个检验方法。如无菌试验若改为使用含培养基的过滤器，然后通过适宜的技术确认活的微生物存在，那么，验证时仅需验证所用的微生物回收系统而不是整个无菌试验方法。 替代方法验证的一般要求 在开展替代方法对样品检验的适用性验证前，有必要对替代方法有一个全面的了解。首先，所选用的替代方法应具备必要的方法适用性证据，表明在不含样品的情况下，替代方法
目的：建立分析方法学验证的指导程序，用以证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，保证验证工作能够有计划、按步骤的进行，同时使与质量检验有关的活动符合GMP的要求。 范围：适用于本公司所有的分析方法的验证的活动。 职责：QC：负责起草分析方法验证的验证方案、报告；负责按批准的验证方案执行验证；负责检验仪器运行和保养。 QA：负责确定分析方法的验证条件、标准、限度及检验方法；负责验证方案、报告的审核；QA负责人负责方案、报告的批准。 1 相关定义 1.1 分析方法：法是为完成检验项目而设定和建立的测试方法，它详细描述了完成分析检验的每一步骤。一般包括分析方法原理、仪器及仪器参数、试剂、供试品溶液与对照品溶液的制备，测定，计算公式及检测限度等。 1.2 方法验证：方法验证就是根据检验项目的要求，预先设置一定的验证内容，并通过设计合理的实验来验证所采用的分析方法是否符合检验项目的要求。在建立产品质量标准时，分析方法需经验证。 1.3 方法确认：在应用已验证的药典方法和其他法定方法前，应在当前的实验室条件下进行方法确认来证明方法在该实验室的适用性。 2 验证的适用范围 2.1 产品的物料、中间产品、中间过程控制和产品的理化分析方法的验证和确认； 2.2 清洁验证方法的验证。 3 需要验证的分析项目 根据检验项目的设定目的和验证内容的不同要求，将需验证的检验项目分为四类：3.1 鉴别试验；鉴别的目的在于判定被分析物是目标化合物，而非其它物质。用于鉴别的分析方法要求具有较强的专属性和耐用性。 3.2 杂质的限度检查与定量测定；杂质检查主要用于控制主成分以外的杂质，如无机杂质，有机杂质等。杂质检查分为限度检查和定量测定两部分。用于限度检查的分
标准操作规程 STANDARD OPERATING PROCEDURE 目的：建立检验方法验证标准操作规程，规范验证操作。 适用范围：所有检验方法的验证。 责任者：质量保证部、质量控制部 程序： 1、检验方法验证的基本内容 检验方法验证的基本内容包括方案的起草及审批，检测仪器的确认．适用性验证(包括准确度试验、精密度测定．线性范围试验、专属性试验等)和结果评价及批准四个欠的方面。它的基本内容可以用下图表示。 2、检验方法验证的基本步骤 首先是制定验证方案，然后对大型精密仪器进行确认，最关键的一步是检验方法的适用性试验，最后是检验方法评价及批准。 2．1验证方案的制定 检验方法的验证方案通常由质量验证小组提出。根据产品的工艺条件、原辅料化学结构、中间体、分解产物查阅有关资料，提出规格标准，确定检查项目，规定杂质限度，即为质量标准草案。根据质量标准草案确定检查和试验范围，对检验方法拟定具体操作步骤，最后经有关人员审批方可实施。 2．2大型精密仪器的确认 分析测试中所用的检测仪器一般可分为三类 (1)普通仪器：崩解仪，折光仪、分析天平、酸度计、溶点测定仪、电导仪等： (2)较精密仪器：旋光仪、永停滴定仪、费休氏水分测定仪、自动滴定仪、药物溶出度仪、可
见分光光度计、电泳仪等； (3)大型精密仪器：紫外分光光度计、红外分光光度计、气相色谱仪、高效液相色谱仪、薄层扫描仪等。 为了保证分析测试数据准确可靠，每台检测仪器在投入正式使用之前都应进行确认。检测仪器的确认是检验方法验证的基础，应在其它验证试验开始之前首先完成。检测仪器确认工作内容应根据仪器类型。技术性能而定，通常包括：安装确认、校正、适用性预试验和再确认。2．2．1安装确认 同工艺验证中机械设备一样，仪器安装确认的土要内容包括如下各点： (1)要登记仪器名称．型号。生产厂商的编号、生产日期．生产厂商名称，企业内部的固定资产设备登记号及安装地点； (2)收集汇编和翻译仪器使用说明书和维修保养手册； (3)检查并记录所验收的仪器是否符合厂方规定的规格标准： (4)检查并确保有该仪器的使用说明书。维修保养手册和备件清单： (5)检查安装是否恰当，气、电及管路连接是否符合要求； (6)制定仪器标准操作规程(SOP)和维修保养制度，建立使用记录和维修记录； (7)制定清洗规程；． (8)明确仪器设备技术资抖(图纸，手册，备件清单、各种指南及该机器设备有关的其它文件)的专管人员及存放地点。 除上面提到的内容外，在安装确认方案中对仪器的性能用途应有一概述并记录维修服务单位名称。联系人、电话号码、传真号、银行帐号等，以利于日后的维修保养活动，这对大型精密仪器尤为重要。对于仪器来说，安装确认中的一项重要内容是功能试验。这项工作在安装结束，检查合格后即可着手进行。仪器功能试验足在不使用样品的前提下，确认仪器达到设计要求，也可认为是空载试验。例如气相色谱仪的程序升温设定后能否按设定程序执行，溶出仪转速能否达到规定的性能要求。紫外分光光度计的吸收度与透光率的转换是否符合要求。高效液相色谱仪高压泵过压保护是否起作用等，这是检查仪器安装后能达到规定的性能指标。对普通仪器进行的功能试验比较简单，有的除仪器校正外，没有其它特殊的功能试验要做，如酸度计，电导仪，折光仪等。不同的仪器有不同的技术标准，应根据仪器使用说明书的要求进行试验。 2．2．2校正 校正是仪器确认及检验方法验证中的一个重要环节，应当在验证试验以前进行校正。紫外分光光度计校正包括波长校正、吸收度测试、准确度测试、杂散光检查。 气相色谱仪与高效液相色谱仪均要求做系统适用性试验。在规定的色谱条件下测定色谱柱的最小理论塔板数。分离度和拖尾因子，并规定变异系数应不大于2％。 对于化学检验中使用的计量仪器包括容量瓶、移液管、滴定管、分析天平亦均应校正。
9012 生物样品定量分析方法验证指导原则
1. 范围
准确测定生物基质（如全血、血清、血浆、尿）中的药物浓度，对于药物和 制剂研发非常重要。这些数据可被用于支持药品的安全性和有效性，或根据毒动 学、药动学和生物等效性试验的结果做出关键性决定。因此，必须完整地验证和 记录应用的生物分析方法，以获得可靠的结果。
本指导原则提供生物分析方法验证的要求，也涉及非临床或临床试验样品实 际分析的基本要求，以及何时可以使用部分验证或交叉验证，来替代完整验证。
生物样品定量分析方法验证和试验样品分析应符合本指导原则的技术要求。 应该在相应的生物样品分析中遵守 GLP 原则或 GCP 原则。
2. 生物分析方法验证
2.1 分析方法的完整验证
分析方法验证的主要目的是，证明特定方法对于测定在某种生物基质中分析 物浓度的可靠性。此外，方法验证应采用与试验样品相同的抗凝剂。一般应对每 个物种和每种基质进行完整验证。当难于获得相同的基质时，可以采用适当基质 替代，但要说明理由。
一个生物分析方法的主要特征包括：选择性、定量下限、响应函数和校正范 围（标准曲线性能）、准确度、精密度、基质效应、分析物在生物基质以及溶液 中储存和处理全过程中的稳定性。
有时可能需要测定多个分析物。这可能涉及两种不同的药物，也可能涉及一 个母体药物及其代谢物，或一个药物的对映体或异构体。在这些情况下，验证和 分析的原则适用于所有涉及的分析物。
对照标准物质 在方法验证中，含有分析物对照标准物质的溶液将被加入到空白生物基质 中。此外，色谱方法通常使用适当的内标。 应该从可追溯的来源获得对照标准物质。应该科学论证对照标准物质的适用 性。分析证书应该确认对照标准物质的纯度，并提供储存条件、失效日期和批号。 对于内标，只要能证明其适用性即可，例如显示该物质本身或其相关的任何杂质 不产生干扰。 当在生物分析方法中使用质谱检测时，推荐尽可能使用稳定同位素标记的内 标。它们必须具有足够高的同位素纯度，并且不发生同位素交换反应，以避免结 果的偏差。
1
I. INTRODUCTION This guidance provides recommendations to applicants on submitting analytical procedures, validation data, and samples to support the documentation of the identity, strength, quality, purity, and potency of drug substances and drug products. 1. 绪论 本指南旨在为申请者提供建议，以帮助其提交分析方法，方法验证资料和样品用于支持原料药和制剂的认定，剂量，质量，纯度和效力方面的文件。 This guidance is intended to assist applicants in assembling information, submitting samples, and presenting data to support analytical methodologies. The recommendations apply to drug substances and drug products covered in new drug applications (NDAs), abbreviated new drug applications (ANDAs), biologics license applications (BLAs), product license applications (PLAs), and supplements to these applications. 本指南旨在帮助申请者收集资料，递交样品并资料以支持分析方法。这些建议适用于NDA，ANDA，BLA，PLA及其它们的补充中所涉及的原料药和制剂。 The principles also apply to drug substances and drug products covered in Type II drug master files (DMFs). If a different approach is chosen, the applicant is encouraged to discuss the matter in advance with the center with product jurisdiction to prevent the expenditure of resources on preparing a submission that may later be determined to be unacceptable. 这些原则同样适用于二类DMF所涉及的原料药和制剂。如果使用了其它方法，鼓励申请者事先和FDA药品评审中心的官员进行讨论，以免出现这种情况，那就是花了人力物力所准备起来的递交资料后来发现是不可用的。 The principles of methods validation described in this guidance apply to all types of analytical procedures. However, the specific recommendations in this guidance may not be applicable to certain unique analytical procedures for products such as biological, biotechnological, botanical, or radiopharmaceutical drugs. 本指南中所述的分析方法验证的原则适用于各种类型的分析方法。但是，本指南中特定的建议可能不适用于有些产品所用的特殊分析方法，如生物药，生物技术药，植物药或放射性药物等。 For example, many bioassays are based on animal challenge models, 39 immunogenicity assessments, or other immunoassays that have unique features that should be considered when submitting analytical procedure and methods validation information. 比如说，许多生物分析是建立在动物挑战模式，免疫原性评估或其它有着独特特性的免疫分析基础上的，在递交分析方法和分析方法验证资料时需考虑这些独特的性质。Furthermore, specific recommendations for biological and immunochemical tests that may be necessary for characterization and quality control of many drug substances and drug products are beyond the scope of this guidance document. 而且，许多原料药和制剂的界定和质量控制所需的生物和免疫化学检测并不在本指南的范围之内。 Although this guidance does not specifically address the submission of analytical procedures and validation data for raw materials, intermediates, excipients, container closure components, and other materials used in the production of drug
药品及生物制品的分析方法和方法验证指导原则 目录 1.介绍...................... (1) 2.背景..................... .. (2) 3.分析方法开发. ..................... . (3) 4.分析程序内容.............................................. ......... ..................................... .. 3 A.原则/范围 (4) B.仪器/设备............................................. . (4) C.操作参数.............................................. .. (4) D.试剂/标准............................................. . (4) E.样品制备.............................................. .. (4) F.标准对照品溶液的制备............................................ .. (5) G.步骤......... ....................................... (5) H.系统适应性..... (5) I.计算 (5) J.数据报告 (5) 5.参考标准和教材............................................ (6) 6分析方法验证用于新药，仿制药，生物制品和DMF (6) A.非药典分析方法............................................. (6) B.验证特征 (7) C.药典分析方法............................................. .. (8) 7.统计分析和模型 (8) A.统计 (8) B.模型 (8) 8.生命周期管理分析程序 (9) A.重新验证 (9) B.分析方法的可比性研究............................................ . (10) 1.另一种分析方法............................................... .. (10) 2.分析方法转移的研究 (11) C.报告上市后变更已批准的新药，仿制药，或生物制品 (11) 9.美国FDA方法验证............................................... . (12) 10.参考文献
201507 FDA行业指南：分析方法验证（中英文）（下） VII. STATISTICAL ANALYSIS AND MODELS 统计学分析和模型 A. Statistics 统计学 Statistical analysis of validation data can be used to evaluate validation characteristics against predetermined acceptance criteria. All statistical procedures and parameters used in the analysis of the data should be based on sound principles and appropriate for the intended evaluation. Several statistical methods are useful for assessing validation characteristics, for example, an analysis of variance (ANOVA) to assess regression analysis R (correlation coefficient) and R squared (coefficient of determination) or linear regression to measure linearity. Many statistical methods used for assessing validation characteristics rely on population normality, and it is important to determine whether or not to reject this assumption. There are many techniques, such as histograms, normality tests, and probability plots that can be used to evaluate the observed distribution. It may be appropriate to transform the data to better fit the normal distribution or apply distribution-free (nonparametric) approaches when the observed data are
化学检验工国家职业标准 发布者：chk-jyc 发布时间：2011-1-7 浏览次数：190次【字体：大中小】 化学检验工国家职业标准 1．职业概况 1．1职业名称 化学检验工。 1．2职业定义 以抽样检查的方式，使用化学分析仪器和理化仪器等设备，对试剂溶剂、日用化工品、化学肥料、化学农药、涂料染料颜料、煤炭焦化、水泥和气体等化工产品的成品、半成品、原材料及中间过程进行检验、检测、化验、监测和分析的人员。 l.3职业等级 本职业共设五个等级，分别为：初级(国家职业资格五级)、中级(国家职业资格四级)、高级(国家职业资格三级)、技师(国家职业资格二级)、高级技师(国家职业资格一级)。 1．4职业环境 室内，常温。 1．5职业能力特征 有一定的观察、判断和计算能力，具有较强的颜色分辨能力。 l．6基本文化程度 高中毕业(或同等学力)。 l．7培训要求 1．7.1培训期限 全日制职业学校教育，根据其培养目标和教学计划确定。晋级培训期限：初级、中级、高级不少于180标准学时；技师、高级技师不少于150标准学时。
1．7．2培训教师 培训中、高级化学检验工的教师应具有本职业技师以上职业资格证书或本专业中级以上专业技术职务任职资格；培训技师的教师应具有本职业高级技师职业资格证书或本专业高级专业技术职务任职资格；培训高级技师的教师应具有本职业高级技师职业资格证书2年以上或本专业高级专业技术职务任职资格。 1．7．3培训场地设备 标准教室及具备必要检验仪器设备的试验室。 1．8 鉴定要求 1．8．1 适用对象 从事或准备从事本职业的人员。 1．8．2 申报条件 ——初级(具备以下条件之一者) (1)经本职业初级正规培训达规定标准学时数，并取得毕(结)业证书． (2)在本职业连续见习工作2年以上。 ——中级(具备以下条件之一者) (1)取得本职业初级职业资格证书后，连续从事本职业工作3年以上，经本职业中级正规培训达规定标准学时数，并取得毕(结)业证书。 (2)取得本职业初级职业资格证书后，连续从事本职业工作4年以上。 (3)连续从事本职业工作5年以上。 (4)取得经劳动保障行政部门审核认定的、以中级技能为培养目标的中等以上职业学校本职业(专业)毕业证书。 ——高级(具备以下条件之一者) (1)取得本职业中级职业资格证书后，连续从事本职业工作3年以上，经本职业高级正规培训达规定标准学时数，并取得毕(结)业证书。
化学分析方法验证程序 编制说明 一、任务来源 经国家标准化管理委员会同意，设立认证认可行业标准，由国家认监委归口管理。本标准是由国家认监委下达的2013年认证认可行业标准制修订计划项目《化学分析方法验证程序》（立项编号为2012RB010），由上海出入境检验检疫局和广东出入境检验检疫局负责起草。 二、立项背景 对分析方法进行验证的主要目的是确证该方法达到某一分析目标。在验证过程中往往能够发现方法的不足之处，或发现方法中存在的非预期的问题，例如出现干扰物、试剂和设备不再可用、设备需要改造等，这些问题的出现要求对方法进行的改进。此外，通过实验室间的验证还常常会发现这样的情况，一个新建方法在某一实验室内获得的分析结果令人满意，但在同样的操作条件下应用于另一实验室则不能获得满意结果，这也同样说明方法存在问题和需要改进。对方法进行验证和改进两个步骤需要反复进行，直到方法的各方面参数均能满足预期的分析目标。 目前我国针对方法的验证尚无统一的验证程序，以往国家标准及检验检疫行业标准制定过程中对方法的验证均是按照约定俗成的做法（以下称为“原验证模式”），即仅进行实验室内验证及协同试验验证两个步骤。近年来在标准的审定过程中发现，原验证模式在实施中存在以下几个主要问题： （1）原验证模式对验证参数的选择这一关键性验证步骤未作规范，导致方法起草人在实施验证过程中做法不一致，影响验证的有效性。 原验证程序中未规定如何选择验证参数（即方法的特性参数），一般由方法起草人自行选择，则可能出现所选验证参数不全面或不具代表性的问题。此外，即使是对同一参数的验证，起草人的做法也不统一和不规范。新验证程序中规范了验证参数的选择及具体验证过程的实施等技术要点，统一验证做法。 （2）原验证模式中对验证实验室的选择、验证物料的获取等直接影响到验证结果有效性的步骤未设定具体要求。
有关物质（包括已知杂质）检查方法验证标准操作规程 1.目的 为保证检测工作的可靠性和可重现性，在未知样品的检测前必须对检测方法进行验证以证明所采用的检测方法适合于相应的检测要求。 2.范围 建立药品质量标准时、药品生产工艺变更时、制剂组分发生变更时、原分析方法修订时均应进行有关物质检测的方法学的验证。 3.责任人 检测员、项目负责人、各级项目经理：要求系统、全面验证含量测定方法并记录整理验证数据。 4.程序 4.1验证内容：杂质检测方法的建立基于方法学研究，主要包括专属性试验、检测限试验、溶液稳定性试验等内容，如果定量检测杂质则需进行线性、精密度、稳定性、重现性及回收率等试验，从不同的角度、层面验证分析方法的可行，从而保证药品中的杂质能够有效地检测。 4.2 杂质检测方法建立验证及可接受标准 1）专属性试验主要通过破坏性实验实现。 破坏性试验，也称为强制降解试验（stressing test），它是在人为设定的特殊条件下，如酸、碱、氧化、高温、光照等，引起药物的降解，通过对降解产物的测定，验证检测方法的可行性，分析药物可能的降解途径和降解机制。每项破坏性试验通常包括以下内容：酸降解一般采用0.1mol/L－1mol/L盐酸或硫酸；碱降解采用0.1mol/L－1mol/L的氢氧化钠溶液；氧化降解采用合适的过氧化氢溶液。以上三种试验，为了加快反应或者提高降解强度，必要时可以加热或提高浓度；高温试验通常温度高于加速试验温度的10℃，如50℃、60℃等，对于原料药有时需考虑水溶液或混悬液的降解，或者考虑在不同的pH值条件下的降解；光照试验条件可采用4500LX。破坏性试验的具体条件，与具体药物密切相关，需结合具体药物的特点，选择合适的条件，使药物有一定量的降解，并对可能的降解途径和降解机制进行分析，保证实验的意义。 药物经强力破坏产生的降解产物通常采用色谱法测定，需结合药物和可能降
一、准确度 准确度系指采用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，一般用回收率（％)表示。准确度应在规定的范围内测定。 1.化学药含量测定方法的准确度 原料药采用对照品进行测定，或用本法所得结果与已知准确度的另一个方法测定的结果进行比较。制剂可在处方量空白辅料中，加入已知量被测物对照品进行测定。如不能得到制剂辅料的全部组分，可向待测制剂中加人已知量的被测物对照品进行测定，或用所建立方法的测定结果与已知准确度的另一种方法测定结果进行比较。准确度也可由所测定的精密度、线性和专属性推算出来。 2.化学药杂质定量测定的准确度 可向原料药或制剂处方量空白辅料中加人已知量杂质进行测定。如不能得到杂质或降解产物对照品，可用所建立方法测定的结果与另一成熟的方法进行比较，如药典标准方法或经过验证的方法。在不能测得杂质或降解产物的校正因子或不能测得对主成分的相对校正因子的情况下，可用不加校正因子的主成分自身对照法计算杂质含量。应明确表明单个杂质和杂质总量相当于主成分的重量比（％) 或面积比（％ )。 3.中药化学成分测定方法的准确度 可用对照品进行加样回收率测定，即向已知被测成分含量的供试品中再精密加人一定量的被测成分对照品，依法测定。用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。在加样回收试验中须注意对照品的加人量与供试品中被测成分含有量之和必须在标准曲线线性范围之内；加入对照品的量要适当，过小则引起较大的相对误差，过大则干扰成分相对减少，真实性差。 回收率：％= (C - A ) /S X 100% 式中：A为供试品所含被测成分量；B 为加入对照品量； C 为实测值。 4.校正因子的准确度 对色谱方法而言，绝对（或定量）校正因子是指单位面积的色谱峰代表的待测物质的量。待测定物质与所选定的参照物质的绝对校正因子之比，即为相对校正因子。相对校正因子计算法常应用于化学药有关物质的测定、中药材及其复方制剂中多指标成分的测定。校正因子的表示方法很多，本指导原则中的校正因
异烟肼含量测定分析方法验证方案验证原因：验证类型： 新项目验证再验证 其它 预验证 回顾性验证转移验证 方法描述： 本分析方法为中国药典2010版二部方法。为确保其检测结果准确，对该分析方法的专属性、精密度（系统精密度、方法精密度、中间精密度）、线性和范围、准确度、耐用性进行评价。 验证依据： 中国药典2010年版分析方法（295页） 验证时间： 2010年07月09日～2010年07月10日 验证项目组成员及职责：
验证内容:-
a)人员培训： b)仪器设备、标准品和试剂： 仪器设备 标准品和试剂 c)样品
色谱条件 色谱条件 色谱柱：agilent ODS-2 长度：250cm ，内径：4.6mm ，填料 C18 ，填料粒度：5μm 检测波长：262nm，带宽30 柱温：25℃ 进样量：20μl 流速：1.0ml/min 流动相A：0.02mol/l磷酸氢二钠溶液（用磷酸调pH至6.0），流动相B：甲醇 A:B=85:15 停止时间：12min 1.系统精密度 1.1.溶液配制 系统精密度溶液：取异烟肼10mg，置100ml容量瓶中，精密称量，用水溶解并稀释至刻度。 1.2验证过程及结果 系统精密度溶液连续进样6次，记录其异烟肼峰面积、保留时间。 可接受标准：异烟肼峰面积RSD≤2.0%,保留时间RSD≤2.0%。 结论：
2.重现性试验（方法精密度） 2.1.溶液配制 2.1.1.对照溶液：取异烟肼工作标准品10mg，精密称量，置100ml容量瓶中，用水溶解 并稀释至刻度。 2.1.2.方法精密度溶液：取异烟肼样品10mg置100ml容量瓶中，精密称定，用水溶解并 稀释至刻度。用此方法配置同一批号的样品溶液6份。 2.2.验证程序及结果 工作标准品溶液进2针，样品溶液各进2针。记录异烟肼峰面积，计算样品含量。 可接受标准：异烟肼含量的RSD≤2.0%。 结论：
分析方法验证指南 1、目的 本文件的目的是为分析方法验证的数据收集提供基本指南。该指南参考了USP，EEC（BP/EP）和ICH 中的分析方法验证指南，能够满足公司的产品的分析方法验证工作。 2、范围本文件中提供的定义和程序是为了促使公司质量方针的基本原则符合所有关于方法验证 的法 规要求。本指南适用于API、原料、中间体的检测和放行的分析方法，并为新药物的应用收集支持性的数据。本指南是为了规范验证为公司的产品提供一个通用和分析方法验证方案。现有的方法中的小变化不需要全面验证，如：对柱子的固定相的生产厂家变化，样品准备的变化（搅拌和超声，震摇和超声）。在实际分析中，方法验证需要提供更多的信息或细节，需要制定的特殊的方案。这个指南不包括微生物分析方法的验证。 3、参考文件 USP<1225>，法定方法的验证 ICH 指南Q2A&Q2B，分析方法验证程序。 公司关于有效数字修约原则 4、定义降解物：降解物是由于一个物质经一段时间的化学变化（经过诸如光照、温度、pH、水分，经与容器发生反应）产生，也叫降解产物或分解产物。大剂量原料药：原料药在产品中的最大剂量大于2g/天。定量限（LOQ）：指试样中的被分析物能够被定量测定的最低值，其测定结果应具有一定的准确度和精密度。线性：在设计的测定范围内，检测结果与供试品中被分析物的浓度直接呈线性关系的程度。通常相关系数（R）在回归线上有一定的斜率（m）。小剂量原料药：原料药的在产品中的最大剂量小于或等于2g/天。 测量精密度（ICH-重复性）：多次测定同一样品时的重现性（%RSD）。在HPLC 或GC 中也叫进样精密度。方法精密度：同一样品或标准品（若有时）准备多份供试品在测定含量时的重现性（%RSD）。回收精密度：测定同一标准时对准确度和线性的评估。也叫水平精密度。报告限度（RL）：低于某一数值的时候报告中就不体现。报告限度一般大于或等于定量限。再现性 （ICH-中间精密度）：在不同检测条件下对样品检测结果的重现性。（不同的实验室、分析人员、仪器、试剂、分析时间、日期等） 5、指南A、总则因为在对产品的物理性质的评估时，分析方法会因测定的准确性和精密性而有所不同，故验证的可接受标准也不同于一般的检测方法。一个可接受的标准可能需要根据方法的特性和检测的指标
美国FDA分析方法验证指南中英文对照 美国FDA分析方法验证指南中英文对 照 I. INTRODUCTION This guidance provides recommendations to applicants on submitting analytical procedures, validation data, and samples to support the documentation of the identity, strength, quality, purity, and potency of drug substances and drug products. 1. 绪论 本指南旨在为申请者提供建议，以帮助其提交分析方法，方法验证资料和样品用 于支持原料药和制剂的认定，剂量，质量，纯度和效力方面的文件。 This guidance is intended to assist applicants in assembling information, submitting samples, and presenting data to support analytical methodologies. The recommendations apply to drug substances and drug products covered in new drug applications (NDAs), abbreviated new drug applications (ANDAs), biologics license applications (BLAs), product license applications (PLAs), and supplements to these applications. 本指南旨在帮助申请者收集资料，递交样品并资料以支持分析方法。这些建议适 用于NDA，ANDA，BLA，PLA及其它们的补充中所涉及的原料药和制剂。 The principles also apply to drug substances and drug products covered in Type II drug master files (DMFs). If a different approach is chosen, the applicant is encouraged to discuss the matter in advance with
检验检测方法控制程序 1目的 对本公司检测活动所使用的方法进行控制，确保检测数据的准确可靠。 2范围 适用于公司检测活动各个环节（包括被检验检测物品的抽样、处理）的方法的选用、制定和确认。 3职责 3.1综合办公室负责国家标准、方法、规程、规范的及时查新和本公司在用方法的更新工作，保证各场所使用的为现行有效版本。 3.2 技术负责人负责组织对自制方法进行有效性评审，并批准。 4程序 4.1 标准方法的选用 4.1.1 综合办公室负责检索最新标准及技术规范，并按《管理体系文件控制和管理程序》确保检测人员所用文件是最新有效版本。 4.1.2 检测人员按照《作业指导书》的有关规定，在接收到检测业务受理表通知后，对照技术要求，选择符合要求的标准方法，开展检验检测。 4.1.3 本公司车辆检验检测工作严格执行国家、部门或地方颁布的标准和规范，或者参照采用这些标准或规范所规定的方法，或者尽可能选择有关科学书籍和期刊上公布的方法，及仪器设备制造商指定的方法（如技术说明书等）。并且，这些方法若能涵盖所需开展检测的足够信息，则本公司不再重新制定检验检测方法。若是需开展的检测项目的技术指标多，需从多项技术规范中，选用不同种类标准方法组合成新的方法时，则需制定检测方法，经技术负责人批准并备案后使用。 4.1.4 若客户指定检测方法时，业务受理人员应对该方法进行审核，并按《评审客户合同程序》的规定进行确认。 4.2 自制检测方法 本公司原则上不使用自制方法和非标准方法，若确需使用自制方法和非标准方法，首先必须征得客户的同意，并经签字确认。 4.2.1自制方法的验证
使用自制方法开展首次检测后，技术负责人应组织相关人员，采用适当的方法对其结果进行验证，并记录。 4.2.2自制方法的确定 自制方法经试评审及验证后，由技术负责人填写“检测方法确认表”，并批准后交质量负责人按《管理体系文件控制和管理程序》发放到相应部门实施。 4.3数据控制 检测工作所测的数据，由检测人员按检测方法中规定的要求进行处理，核验人员进行检查。当利用计算机自动设备进行数据采集、运算时，则按《保护数据完整性和安全性的程序》处理。 5支持性文件 《质量手册》：4.5.14方法的选择、验证和确认 4.5.18样品处置
1 II. 背景 (2) III. 分析方法的类型 (3) A. 法定分析方法 (3) B. 可选择分析方法 (3) 3 C. 稳定性指示分析 (3) IV. 对照品…………………………………………………………………………… 4 A. 对照品的类型 (4) B. 分析报告单 (4) C. 对照品的界定 (4) V. IND 中的分析方法验证 (6) VI. NDA, ANDA, BLA 和PLA 中分析方法验证的内容和格式 (6) A. 原则 (6) B. 取样 (7) C. 仪器和仪器参数 (7) D. 试剂 (7) E. 系统适应性实验 (7) F. 对照品的制备 (7) G. 样品的制备 (8) H. 分析方法 (8) L. 计算 (8) J. 结果报告 (8) VII. NDA，ANDA,BLA 和PLA 中的分析方法验证 (9) A．非法定分析方法 (9) 1．验证项目 (9) 2. 其它分析方法验证信息 (10) a. 耐用性 (11) b. 强降解实验 (11) c. 仪器输出/原始资料 (11) 3．各类检测的建议验证项目 (13) B．法定分析方法 (15) VIII. 统计分析………………………………………………………………………… 15 A. 总则 (15)
C. 统计 (16) IX. 再验证 (16) X. 分析方法验证技术包：内容和过程…………………………………………… 17 A. 分析方法验证技术包 (17) B. 样品的选择和运输 (18) C. 各方责任 (19) XI. 方法……………………………………………………………………………… 20 A. 高效液相色谱(HPLC) (20) B. 气相色谱(GC) (22) C. 分光光度法，光谱学，光谱法和相关的物理方法 (23) D. 毛细管电泳 (23) E. 旋光度 (24) F. 粒径相关的分析方法 (25) G. 溶出度 (26) H. 其它仪器分析方法 (27) 附件A：NDA，ANDA，BLA 和PLA 申请的内容 (28) 附件B：分析方法验证的问题和延误 (29) 参考文献…………………………………………………………………………………… 30 术语表……………………………………………………………………………………… 32 This guidance provides recommendations to applicants on submitting analytical procedures, validation data, and samples to support the documentation of the identity, strength, quality, purity, and potency of drug substances and drug products. 1. 绪论 本指南旨在为申请者提供建议，以帮助其提交分析方法，方法验证资料和样品用于支持 原料药和制剂的认定，剂量，质量，纯度和效力方面的文件。 This guidance is intended to assist applicants in assembling information, submitting samples, and presenting data to support analytical methodologies. The recommendations apply to drug substances and drug products covered in new drug applications (NDAs), abbreviated new drug applications (ANDAs), biologics license applications (BLAs), product license applications (PLAs), and supplements to these applications.