中蒙药生物碱的提取方法与工艺研究
李云超1陈建平2布仁2塔娜2贾慧2朱晓伟2*
（1.内蒙古赤峰学院附属医院药房，内蒙古赤峰 024000；2.内蒙古医科大学药学院，内蒙古呼和浩特
市010110）
摘要：阐述了近年来对生物碱类化合物提取方法的研究进展，生物碱类化合物具有广泛的生物和光学活性, 生物碱类化合物的提取方法有冷浸提法、浸渍法、超声波提取法、渗漉法、回流提取法、超临界提取法、酶提取法、醇类溶剂提取法、有机溶剂提取法、索式提取法、微波萃取法[1]等。本文详细介绍了中蒙药生物碱的提取方法与工艺，并比较了各种方法的优缺点。通过对这些提取方法与工艺进行综合性的论述与分析，为中蒙药生物碱的开发利用提供了借鉴和理论依据。
关键词：生物碱类化合物；提取工艺；中蒙药；
Extraction methods and technology research of alkaloids in traditional Chinese medicines and Mongolian medicines
Li Yun-chao1 Chen Jian-ping2, Bu Ren2, et al.
(Pharmacy, Affilited hospital of Chifeng College,Chifeng 024000 Inner Mongolia China;Pharmacy
department,Inner Mongolia Medical University,Hohhot 010110 China)
Abstract The article elaborated the research progress of extraction methods of alkaloids in recent years. Alkaloids compounds have comprehensive biological and optical activity.The extraction methods of alkaloids compounds include quenching method,impregnation,ultrasound extraction method, percolating method, refluxing method,supereritical fIuid extraction method,enzyme-assisted extraction,the ethanol refluxing method,organic solvent extraction method,Soxhlet extraction,microwave extraction and so on.The article introduced detailedly the extraction and techonology of traditional Chinese medicine and Mongolian medicin es’alkaloids.Moreover,it compared the above methods’ advantages and disadvantages.Through comprehensive discussion and analysis,the article provided successful experiences and theoretical foundation for development and utilization of alkaloids. Key Words alkaloids compounds;extraction technology; traditional Chinese medicine and Mongolian medicin e
生物碱类化合物广泛存在于自然界的植物中,属植物次生代谢产物。根据其结构特点,可将生物碱类化合物分类为有机胺类、吡咯烷类、吡啶类、异喹啉类、吲哚类、莨菪烷类、咪唑类、喹唑酮类、嘌呤类、甾体类、二萜类等。多数生物碱具有显著的生理活性。如黄连中的小檗碱有抗菌消炎的作用；罗芙木中的利血平有降压作用；长春花中的长春新碱具有抗癌活性；罂粟中的吗啡具有镇痛作用；基金项目：内蒙古医科大学本科教学质量工程建设项目（2012年）
作者简介：李云超(1974 -)，男，蒙古族，内蒙古赤峰学院附属医院主管药师
通讯作者：朱晓伟，副教授，E-mail:zxwtxwd@https://www.doczj.com/doc/1f11242207.html, 内蒙古医科大学，010110
延胡索中的去氢紫堇具有抗血栓的作用；包公藤中的包公藤甲素具有降低眼压、缩小瞳孔的作用，可用于治疗青光眼；海洋生物海绵中的甾体生物碱pLakinamina A、B有抗菌作用[2]。随着对生物碱类化合物药理作用的深入研究，大量的生物碱类药物已经应用于临床，如吗啡、麻黄碱、苦参碱、长春新碱等，同时，临床需求的日益增大也要求我们能够从植物中分离纯化得到大量生物碱；此外，自然界许多动植物中也含有大量生物碱类值得我们进一步分离，以得到新的具有更好药理作用的生物碱，因此不断研究生物碱类化合物的提取分离方法具有重要意义。
1 冷浸提法
从含淀粉较多的物质中提取生物碱[3]一般采用冷浸取法。仝燕等从苦参（道古勒-乌布斯）中提取生物碱的最佳工艺是1%醋酸水溶液冷浸3次，以1/3 (生药重) 量的阳离子树脂纯化，5%氨水乙醇回流解吸附，提取物中苦参总生物碱含量可达95%以上[4]。随志刚等比较了草乌中乌头类生物碱提取方法，结果显示10%氨水乙醚冷浸法对3种双酯型生物碱的提取效率最高 [5]。刘学湘等提取川乌中总生物碱筛选出的最佳提取工艺为药材用氨试液浸润，加入15倍乙醚溶剂，冷浸24h，结果乌头碱、次乌头碱和新乌头碱含量平均值分别为0.0924、0.578、0.254mg/g[6]。冷浸样品工艺简单、节能,提取液杂质较少,对今后的精制较有利，但此法不适用于贵重药材、毒性药材及高浓度的制剂。
2 浸渍法
浸渍法是将处理过的药材，用水或者稀醇在常温或温热（60～80 ℃）的情况下浸渍以溶出其中成分，反复数次，合并浸渍液，减压浓缩即可。闵勇等通过单因素试验和正交试验，优化提取工艺得出了从断肠草中提取生物碱的最佳条件:提取温度为55 ℃、乙醇浓度为75%、提取时间为9h、料液比为1∶20。在此最佳工艺条件下，断肠草中生物碱的提取率可达0.654%[7]。刘威等[8]通过对北豆根中总生物碱不同提取方法的比较，确定酸水温浸提取的总生物碱含量最高，蝙蝠葛碱含量为116.32mg/g,蝙蝠葛苏林碱含量为100.51mg/g。该法简单易行，提取过程不用加热，适用于挥发性或受热易破坏以及含淀粉或粘液质较多的成分，但是提取时间长，浸出率较差，特别是用水为溶剂，提取液易于发霉变质，须注意加入适当的防腐剂。
3 超声波提取法
超声波是指频率为0.02～50MHz的弹性波，超声波提取植物中有效成分的基
本原理是超声波的空化作用、机械作用和热作用。超声波的空化作用能使液体内部产生无数小气泡，气泡内部可达几千度的高温和几千个大气压的高压，可使植物细胞壁破裂。超声波的机械作用可在液体中形成有效的搅动，使细胞内的物质加速溶解到介质中[9]。如用超声提取药材中的小檗碱,与常规的煎煮、浸泡提取法相比,超声的空化作用大大加速了小檗碱成分的提取速度,还很好地保持生物碱的特性, 同时也提高了小檗碱成分的提取效率[10,11]。李军等[12]对比了超声提取法、回流提取法、冷浸提取法和微波提取法对苦豆草（嘎顺-包日其格）生物碱的提取效率，结果表明超声波提取法效果优于其他提取方法,确定超声波法提取的最佳条件为以0.4％盐酸为溶剂，料液比1：20，超声提取2次，每次提取20min。Demagglo等从曼佗罗叶中提取曼佗罗碱,发现超声波提取30分钟比煎煮法提取3小时的样品含碱量高9%[13]。郭孝武等用溶剂提取-超声波法提取益母总碱,与热回流相比较,发现超声波法所得益母草总生物碱的提取率高于热回流法并缩短了时间[14]。由于超声波作用时无需加热,因此,在提高热敏性生物碱提取率的同时,对其生理活性基本没有影响。鉴于超声波提取的优点,建议将其引入到中蒙药生物碱的工业提取中，当然,将提取工艺大规模工业化尚需进行进一步研究。
4 渗漉法
渗漉法是将中草药粉末装在渗漉器中，不断向其中添加新溶剂，使溶剂将药材渗透，自上而下从渗漉器下部流出浸出液的一种方法。当溶剂渗进药粉且由于溶出成分比重加大而向下移动时，上层的稀浸液或溶液便置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散可以较好地进行[15]。张达古拉等[16]对蒙药查干汤中苦参生物碱的提取用不同的提取方法作了比较，结果显示渗漉法的提取率最高, 以75%乙醇渗漉为宜。渗漉属于动态浸出方法，溶剂利用率高，有效成分浸出完全，可直接收集浸出液。渗漉法可用于贵重药材、毒性药材及高浓度制剂，也可用于有效成分含量较低的药材提取，但对于新鲜的、无组织结构及易膨胀的药材则不宜选用此法。
5 回流提取法
此法使用的回流溶剂一般有醇、水及混合溶剂。此法操作简便，但效率不够高，有时不能一次完全提取生物碱，需要反复回流提取[17]。郑师明等比较了以不同溶剂回流提取精制益母草生物碱, 结果表明在回流法中以0.05％盐酸乙醇提取的干膏生物碱含量和提取率最高[18]。康雪琴等通过实验优选铁牛七中生物碱的提取工艺，确定采用6倍量酸性乙醇溶液回流提取0.5h时总生物碱提取量最高,3次提取基本可将其完全提出，测得总生物碱含量为0.980%[19]。但回流法中提取液
在蒸发锅中受热时间较长，故不适用于受热易遭破坏的原料成分的浸出。
6 超临界提取法
超临界流体萃取（SFE）是在近代化工分离中出现的高新技术，SFE将有机溶剂萃取与传统的蒸馏结合，利用超临界CO
优良的溶剂力，将基质与萃取物进行
2
提取的特征是用无毒、不残留的有效分离、提取和纯化。通常所用的超临界CO
2
代替有机溶剂作提取介质，在接近室温的条件下萃取，其物理化学基础源于CO
2
的溶剂性质在很宽的范围内可以调控，仅需改变温度或压力就可以使超临界CO
2
中的溶解度发生很大改变，从而为高选择性提取和分离、获取高质量溶质在CO
2
技术从蒙药荜茇中萃取胡椒碱，经的产品提供了可能。李仙义等[20]采用SFE-CO
2
系统观察法考察了SFE 的最佳萃取条件，并用反向高效液相色谱法进行分离测定，得出最佳萃取条件为萃取压力38.5 MPa，萃取温度70℃，夹带剂甲醇量0.4mL，静态萃取时间5min及动态萃取体积5mL，以上述SFE最佳萃取条件进行萃取,测得的胡椒碱含量为2.920%。超临界流体萃取法最大的优点在于其将萃取、分离精制和去除溶剂等多个过程合为一体，大大简化了工艺流程，从而提高了生产效率，是一种对环境友好的绿色化工技术，具有无毒、无害、无污染的优越性能[21]。
7 酶提取法
利用酶催化技术提取和分离天然产物中的有效成分是一项新兴技术。在天然产物有效成分提取过程中，活性成分通常被植物纤维所包裹，植物细胞壁是提取有效成分的主要屏障，使有效成分不能很好的与反应体系接触，阻碍细胞中有效成分的溶出。利用纤维素酶或果胶酶可将植物细胞壁的纤维成分水解或降解，加速有效成分的溶出，提高了目标产物的提取率，也降低了成本[22]。张福维等[23]采用酶浸法和氯仿法两种不同的工艺提取马钱子（混其勒、高吉拉、都木达克、札普日勒布）生物总碱，在实验中用纤维素酶进行预处理马钱子，结果显示使用酶浸法提取生物总碱的产率比氯仿法高0.99%。张福维等采用酶浸提取法和酸水温浸提取法提取北豆根（宁巴）生物总碱，结果显示酶浸提取法提取北豆根生物总碱在浸提3.5h的产率即可达到酸水温浸法6.5h的产率，大大节省了提取时间，用纤维素酶促使生物总碱浸出的同时，山豆根碱的含量增加，同时也增加了其它生物碱成分[24]。基于细胞壁的构成和特性，选择合适的酶将细胞壁降解为小分子或易溶物质，将细胞壁内有效成分释放出来，加大其与溶剂的接触面积，可加快提取速度，提高生物碱的收率。
8 醇类溶剂提取法
游离生物碱或者盐均可溶于甲醇或乙醇，配合酸水-碱化-萃取法可以除去脂溶性杂质[25]。魏秀德等采用酸性乙醇提取马钱子生物碱，以马钱子碱、士的宁2种生物碱在提取物中的总含量作为马钱子提取工艺的评价指标,确定最佳工艺为12倍量80%pH=5的乙醇溶液,提取3次,每次1h，在此工艺下2种生物碱的平均含量为1.3132g/100g[26]。丁春霞等 [27]比较了可能影响浙贝母（陶日格-诺格图如-乌布斯）生物碱提取率的几个因素,确定摇床振荡法效果优于室温冷浸法,所得生物碱含量可达0.203%，最佳提取条件为用浙贝母粉末重量的30倍75%乙醇作为提取溶剂, 结合摇床振荡法,振荡速度为150r/min,提取24h,经乙酸乙酯萃取,生物碱的提取率最高。
9 亲脂性有机溶剂提取法
大多数游离生物碱为亲脂性化合物，可用氯仿、苯、二氯甲烷、乙醚等溶剂提取，提取前将药材用少量碱水润湿，以使生物碱游离，也可增加溶剂对植物细胞的穿透力。李雅臣等用不同的溶剂对钩藤的总生物碱进行提取，结果显示乙醚是提取钩藤总生物碱的适宜溶剂，总生物碱含量可达0.4%，但由于其沸点低、易燃，安全性较差，实验室少量提取尚好控制,大规模提取则存在很大危险性[28]。李文科等提取骆驼蓬（乌姆希一乌布斯）中生物碱仅用了氯仿提取法,生物碱含量达3.46%，该法所得产品收率，纯度都较高，缺点是氯仿用量大[29]。
10 索氏提取法
即利用索氏提取器多次提取生物碱，可以反复利用溶剂，提取效率高且操作方便,已为人们广泛利用。温俊峰等采用索氏提取法优化沙芥（沙拉格老）生物碱提取工艺，最佳提取工艺为：乙醇浓度为80%，索氏提取时间2.5h，提取温度80℃，料液比1：12.5；总生物碱的提取率为0.229%[30]。陈毅挺等[31]采用索氏提取法和超声提取法优选了翻白草中生物碱类物质的提取方法,结果表明使用索氏提取法的效果优于超声提取法，最佳因素组合是: pH为4.0、乙醇浓度为65%、料液比为1∶25、提取时间为4h。索氏提取法适用于提取溶解度较小的物质，但当物质受热易分解和萃取剂沸点较高时，不宜用此种方法。
11 微波萃取法
微波萃取又称微波辅助提取（MAE），即利用介电损耗和离子传导的原理根据不同结构物质吸收微波能力的差异对某些组分选择性加热可使被萃取物质从体系中分离进入萃取剂。与传统中草药提取方法相比，微波萃取具有瞬间产生高温,浸提时间短,加热均匀,微波能量利用率高，伴随有生物效应等特点。是一种安全、快速、高效、无污染的清洁萃取技术[32]。李永春等[33]采用微波法提取苦豆子生物碱的最佳工艺条件确定为是微波提取时间为30s、微波功率为360W、料液比为l：5，在此工艺条件下所得生物碱含量为0.553%。马燮等用微波辅助萃取蛇足石杉总生物碱，确定最佳工艺条件为l％盐酸150mL，在微波加热功率为600W 的条件下辐照处理180s，与传统的浸提提取工艺相比，采用微波辅助萃取技术，可使总生物碱的回收率提高15.7％[34]。微波萃取技术在中蒙药有效成分提取的应用已开始从实验室推向生产，但在大规模工业化生产中的应用尚不多见，有待进一步研究和突破。
结语
根据中蒙药提取分离有效成分的特点，综合上述提取方法可以看出溶剂提取法应用广泛，但存有不足，如酸水提取液体积较大，浓缩困难，且杂质多；而亲脂性有机溶剂如氯仿等毒性较大，有的易燃易爆；近几年来，随着中蒙药现代化的不断深入，许多医药专家提出，要利用超临界萃取等先进技术进行中蒙药研究，超临界流体萃取技术在中蒙药开发及产业化应用中具有以下优越性：萃取能力强，提取率高，有效成分高度富集；操作温度低，有效成分不被破坏；提取时间短，生产周期短；操作参数容易控制，有效成分及质量稳定；流程简单，操作方便，节省劳动力和有机溶剂；避免了易燃易爆的危险，减少污染，是一种集提取、分离、浓缩为一体的高新技术[35]。因此为了最大限度的发挥生物碱的临床应用，优化生物碱的提取工艺，使中蒙药走向现代化，超临界流体萃取及超声、微波等先进技术将会在中蒙药生物碱的提取中发挥较大作用。
随着科学技术的不断发展，中蒙药生物碱的提取将会更加先进，在研究工作中我们应根据实际条件，按照要求根据物质的不同生物碱特性采用不同的提取方法，以达到最高的提取效率。随着研究工作的不断深入，将会涌现出更加高效和方便快捷的中蒙药生物碱提取方法，中蒙药生物碱提取技术的研究开发将会进入一个全新的阶段。
参考文献：
[1]刘军红,廖国玲.生物碱提取、分离和纯化的研究进展[J].时珍国医国药,2007;18(5):1230-1231.
[2]周贤春,何春霞,苏力坦·阿巴白克力. 生物碱的研究进展[J].生物技术通讯,2006;17(3):476-479.
[3]宵崇厚.中蒙药化学[M].上海:上海科学技术出版社,1997;11(1):16-17.
[4]仝燕,王锦玉,张锴镔等.苦参总生物碱提取纯化工艺研究[J].中国实验方剂学杂志,2007;13(1):19-22.
[5]随志刚,陈明玉.草乌中乌头类生物碱提取方法比较研究[J].时珍国医国药,2009;20(3):513-514.
[6]刘学湘,陈建伟.川乌中总生物碱提取工艺优化研究[J].中华中医药杂志,2009;24(1):98-100.
[7]闵勇,张薇,王洪等.断肠草生物碱提取工艺研究[J].中成药,2011;33(3):525-527.
[8]刘威,张振秋,胡佳.北豆根中总生物碱提取方法的研究[J].中医药学刊,2006;24(7);1291-1292.
[9]王富科,闰乾顺,郑志祥.超声波提取醉马草中生物碱的研究[J].安徽农业科学,2011;39(34):21010—21012.
[10]赵兵,伍志春,王玉春等.超声波在植物提取中的应用[J].中草药,1999;30(9):附1-附3.
[11]冯若,赵逸云,李化茂等.超声波在生物技术中应用的研究进展[J].生物化学与生物物理进
展,1994;21(6):500.
[12]李军,冷晓红,郝彩琴.苦豆草生物碱的提取工艺研究[J].安徽农业科学,2011;39(12):7068-7070.
[13]那日斯,包金莲.中蒙药有效成分提取方法新进展[J].中国民族医药杂志,2006;(6):51-54.
[14]郭孝武. 超声波提取法提取益母草中的总生物[J].声学技术,1996;15(4):195-197.
[15]李赞忠,李发旺,乔子荣.生物碱提取分离方法研究新进展[J].化工进展,2010;29(增刊):293-299.
[16]张达古拉,洪风兰.提取方法对查干汤中苦参生物碱提取率的影响[J].中国民族医药杂志,1999;5(增刊):105-107.
[17]蔡珺.生物碱提取方法综述[J].商品与质量,2011;(1):164.
[18]郑师明,严鹏科.精制益母草生物碱提取纯化工艺研究[J].中国药房,2010; 21(15):1370-1373.
[19]康雪琴,范智超,张志琪.铁牛七生物碱提取工艺研究[J].中药材,2007;3(6):715-718.
[20]李仙义,袁海龙,苟奎斌等.超临界二氧化碳流体从荜茇中萃取胡椒碱[J].中国医院药学杂
志,2000;20(10):597-599.
[21]秦竹丽,江元汝.超临界萃取技术在生物碱提取中的应用进展[J].化工时刊,2006;20(7):60-63.
[22]李永生.酶促乌头生物碱提取工艺的影响研究[D].北京:北京化工大学,2009:1-55.
[23]张福维,孙小平,关崇新等. 酶浸提取方法对士的宁产率的影响[J].生物技术,2005;15(5):62-63.
[24]张福维,关崇新,李学成等. 酶浸提取法对北豆根生物碱产率的影响[J].中成药,2006;28(10);1420-1422.
[25]刘艳红.生物碱提取分离方法研究进展[J].中国新技术新产品,2012(14);7.
[26]魏秀德,杨波,范里等.马钱子生物碱提取工艺的研究[J].吉林农业大学学报：2011;33(2):195-198.
[27]丁春霞,屠善军,应敏.浙贝母中生物碱提取方法以及条件的优化[J].现代中药研究与实践,2004;18 (2):28-30.
[28]李雅臣,马雪梅,陈鸿英等.钩藤总生物碱提取溶剂的选择探讨[J].天津中医药,2003;20(4)：67.
[29]李文科.中药骆驼蓬生物碱提取及抗包虫化学成份研究[J].兰州医学院学报,1996;22(1):16-18.
[30]温俊峰,王高祥.沙芥生物碱的提取工艺研究[J].内蒙古中医药,2012;(1)49-50.
[31]陈毅挺,何雷玉,邓秀梅.翻白草中生物碱的提取工艺[J].闽江学院学报,2012;33(2):116-120.
[32]吴龙琴,李克.微波萃取原理及其在中草药有效成分提取中的应用[J].中国药
业,2012;21(12):110-112.
[33]李永春,叶新红,舒翔等.微波法提取苦豆子生物碱的研究[J].中国食品添加剂,2008;(5):73-76.
[34]马燮,刘丽娟,杨虎等.微波辅助萃取蛇足石杉总生物碱的工艺研究[J].中成
药,2008;30(10):1544-1545.
[35]赵骏,齐喜红.生物碱提取方法研究概述[J].天津中医学院学报,2003;22(4):43-44.
从茶叶中提取茶多酚及咖啡碱实验设计 一、茶多酚相关 从百度百科○1中，我了解到： 学名:Camellia sinensis 简称:GTP 别名:茶鞣质、茶单宁 物理性状： 1 外观：白色晶体。2 易溶于水及有机溶液，味苦涩。 稳定性：在 PH4-8 稳定。遇强碱、强酸、光照、高热及过渡金属易变质。最高耐热温度在1个半小时内，可达250℃左右，在三价铁离子下易分解。 安全性评价：无毒 定义：是茶叶中儿茶素类、丙酮类、酚酸类和花色素类化合物的总称。 成分：是一种稠环芳香烃，可分为黄烷醇类、羟基-[4]-黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。其中以儿茶素最为重要，约占多酚类总量的60%-80%；儿茶素类主要由EGC、DLC、EC、EGCG、GCG、ECG等几种单体组成。茶多酚在茶叶中的含量一般在20—35%。在茶多酚中各组成份中以黄烷醇类为主，黄烷醇类又以儿茶素类物质为主。儿茶素类物质的含量约占茶多酚总量的70％左右。 理化性质 1、物理性质 茶多酚在常温下呈浅黄或浅绿色粉末，易溶于温水(40℃一80℃)和含水乙醇中；稳定性极强，在PH值4—8、250℃左右的环境中，1.5个小时内均能保持稳定，在三价铁离子下易分解。1989年被中国食品添加剂协会列入GB2760-89食品添加剂使用标准，1997年列为中成药原料。 2、化学性质 茶多酚是从茶叶中提取的全天然抗氧化食品，具有抗氧化能力强，无毒副作用，无异味等特点。 茶多酚是指茶叶中一大类组成复杂、分子量及其结构差异很大的多酚类及其衍生物混合物，主要由儿茶素、黄酮醇、花色素、酚酸及其缩酚酸等组成的有机化合物，以儿茶素为主的黄烷醇类化合物占茶多酚总量的60％一80％，其中含量最高的几种组分为L—EGCG(50％-60％)、L—EGC(15％-20％)、L—ECG(10％-15％)和L—EC(5％-10％)。 药理作用○2 1．具有很强的消除有害自由基的作用。 2．抗衰老作用。 3．抗辐射作用。 4．对癌细胞的抑制作用。
茶多酚 学名:Camellia sinensis 简称:GTP 别名:茶鞣质、茶单宁 英文名：tea Polyphenol，简称TP 定义:是茶叶中儿茶素类、丙酮类、酚酸类和花色素类化合物的总称。 成分:可分为黄烷醇类、羟基-[4]-黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。其中以儿茶素最为重要，约占多酚类总量的60%-80%；儿茶素类主要由EGC、DLC、EC、EGCG、GCG、ECG等几种单体组成。茶多酚在茶叶中的含量一般在15％－－20％。在茶多酚中各组成份中以黄烷醇类为主，黄烷醇类又以儿茶素类物质为主。儿茶素类物质的含量约占茶多酚总量的70％左右。茶多酚的理化性质 物理性状： 1 外观：棕黄、淡黄或淡黄绿色粉末。 2 性状：易溶于水及乙醇，味苦涩。 稳定性：在PH4-8 稳定。遇强碱、强酸、光照、高热及过渡金属易变质。最高耐热温度在1个半小时内，可达250℃左右，在三价铁离子下易分解。 安全性评价：无毒 茶多酚具有很强的抗氧化作用，其抗氧化能力是人工合成抗氧化剂BHT、BHA 的4-6倍，是VE的6-7倍，VC的5-10倍，且用量少：0.01-0.03％即可起作用，而无合成物的潜在毒副作用；儿茶素对食品中的色素和维生素类有保护作用，使食品在较长时间内保持原有色泽与营养水平，能有效防止食品、食用油类的腐败，并能消除异味 【药理作用】 1．具有很强的消除有害自由基的作用。 2．抗衰老作用。 3．抗辐射作用。 4．对癌细胞的抑制作用。 5．抗菌、杀菌作用。 6．对艾滋病病毒的抑制作用。 【主要用途】 实际上茶叶的许多作用都是因为茶叶中的茶多酚在起作用。茶多酚可用于食品保鲜防腐，无毒副作用，食用安全。茶叶能够保存较长的时间而不变质，这是其他的树叶、菜叶、花草所达不到的。茶多酚参入其他有机物（主要是食品）中，能够延长贮存期，防止食品退色，提高纤维素稳定性，有效保护食品各种营养成份。其主要用途如下:
实验二十茶叶中有效成分的提取 一、实验目的 1.通过茶叶和咖啡中有效成分的提取了解固、液相分离方法； 2．掌握吸滤、萃取、分液、升华等实验操作。 二、实验原理 咖啡因( caffeinum )化学式为C8H10N402 - H20(1，3，7-三甲基-2，6-氧嘌呤)，是具有绢丝光泽的一种白色针状晶体。其结构式为 100℃时晶体失去结晶水后开始升华，120℃时升华显著，至178℃时升华很快。无结晶水物的熔点为235℃，能溶于水(2%)、乙醇(2%)、苯(1%)、氯仿(12.5%)等。 由于其在氯仿中溶解度较大，可通过萃取茶叶的水浸渍液提取咖啡因。根据其易升华的性质，可用升华法进一步提纯咖啡因。 茶多酚是由30种以上的酚类物质组成的混合物。其中儿茶素（又名儿茶酚）含量最高，在茶多酚总量中占60%—80%。其结构式为 茶多酚在乙酸乙酯中溶解度较大，并且能与重金属作用产生沉淀，故可用沉淀、萃取等方法来提取茶多酚。也可用此方法从细、粗咖啡中提纯咖啡因作为对照实验。 三、实验用品
仪器和材料烧杯(50、100、200mL)、50rnL量筒、150mL分液漏斗、布氏漏斗、吸滤瓶、酒精灯、点滴板，真空泵（或水流吸气泵）、托盘天平、剪刀、铁架台、滤 纸。 药品饱和石灰水、5%氢氧化钠溶液、氨水、2mol．L-1硫酸、盐酸、氯仿、乙酸乙酯，茶叶（当年新茶，隔年陈茶）、咖啡（粗，细）、氢氧化钙固体、氯酸钾固体，酸性碘一碘化钾试剂。 四、实验内容及操作 1．方法I-热水浸渍法 (1)称取5.0g茶叶，剪碎，浸渍于盛有200mL蒸馏水的烧杯中； (2)加热煮沸约半小时； (3)过滤； (4)用30mL氯仿分三次(15、8、7mL)萃取滤液，合并氯仿相，先用5%氢氧化钠溶液，再用适量水洗涤； (5)挥发掉有机溶剂[4]，得粗咖啡因； (6)用30mL乙酸乙酯分三次(15、8、7mL)萃取氯仿萃取过的水相； (7)用适量水洗涤萃取液； (8)挥发有机溶剂，即得茶多酚。 2．方法Ⅱ——碱液浸渍法 (1)称取茶叶5.Og，用剪刀剪碎； (2)将茶叶放人盛有200mL饱和石灰水的烧杯中； (3)再向烧杯中投入2,Og氢氧化钙固体； (4)煮沸30min后过滤； (5)将过滤所得清液用30mL氯仿分三次萃取(15、8、7mL)； (6)合并有机相，先用5%氢氧化钠溶液洗涤，再用适量水洗涤； (7)将洗涤后的氯仿相挥发溶剂[41可得粗咖啡因； (8)将过滤所得固相用硫酸溶液(2mol.L-1)100mL转溶，搅拌10min以上； (9)过滤，固相弃去；
实验六：咖 啡 因 的 提 取 【实验目的】 1、学习生物碱提取及其衍生物的制备方法； 2、学会升华操作； 【实验原理】 咖啡碱具有刺激心脏，兴奋大脑神经和利尿等作用。主要用作中枢神经兴奋药。它也是复方阿斯匹林（A. P. C ）等药物的组分之一。现代制药工业多用合成方法来制得咖啡碱。 茶叶中含有多种生物碱，其中咖啡碱（或称咖啡因,caffeine ）含量约1%-5%，丹宁酸（或称鞣酸）约占11%-12%，色素、纤维素、蛋白质等约占0.6%。咖啡因是弱碱性化合物，易溶于氯仿、水、热苯等。 咖啡碱为嘌呤的衍生物，化学名称是1，3，7-三甲基-2，6-二氧嘌呤，其结构式与茶碱，可可碱类似。 嘌呤（Purine ） 咖啡因(Caffeine) 茶碱(Guanine) 可可碱(Adenine) 含结晶水的咖啡碱为白色针状结晶粉末，味苦。能溶于水、乙醇、丙酮、氯仿等。微溶于石油醚，在100℃时失去结晶水，开始升华。120℃时升华显著，178℃以上升华加快。无水咖啡因的熔点为238℃ 从茶叶中提取咖啡因，是用适当的溶剂（氯仿、乙醇、苯等）在脂肪提取器中连续抽提，浓缩得粗咖啡因。粗咖啡因中还含有一些其它的生物碱和杂质，可利用升华进一步提纯。咖啡因是弱碱性化合物，能与酸成盐。其水杨酸盐衍生物的熔点为138℃，可借此进一步验证其结构。 【操作过程和实验装置图】 N N NH N 12 3 67 9 CH 3 3 CH 3 N N O O N N N O O CH 3 NH N CH 3N N N CH 3 HN N O O 3
1、生物碱及其衍生物的提取与制备方法。 2、升华操作 流程 图2.8.2 常压升华装置 【实验关键和注意事项】 （1）滤纸套筒大小要合适，以既能紧贴器壁，又能方便取放为宜，其高度不得 超过虹吸管；要注意茶叶末不能掉出滤纸套筒，以免堵塞虹吸管；纸套上面折成凹形，以保证回流液均匀浸润被萃取物，也可以用塞棉花的方法代替滤纸套筒。用少量棉花轻轻阻住虹吸管口。 （2）瓶中乙醇不可蒸得太干，否则残液很粘，转移时损失较大。 （3）生石灰起吸水和中和作用，以除去部分酸性杂质。 （4）在萃取回流充分的情况下，升华操作是实验成败的关键。升华过程中，始 终都需用小火间接加热。如温度太高，会使产物发黄。注意温度计应放在合适的位置，使正确反映出升华的温度。 【主要试剂及产品物理常数】
3 生物碱的碱性与哪些有关 (1)氮原子的杂化类型:随杂化度升高而增强；②诱导效应：氮原子所连接的基团如为供电基团则碱性增强，如为吸电基团则碱性减弱；③诱导一场效应：使生物碱的碱性降低；④共轭效应：若生物碱分子中氮原子孤对电子成P-兀共轭体系时，通常情况下，其碱性较弱；⑤空间效应：若生物碱的空间环境不利于氮原子接受质子，其碱性减弱；反之，则碱性增强；⑥分子内氢键形成：若生物碱分子结构中氮原子附近存在羟基、羰基等取代基团，碱性增强。 4．生物碱类化合物的鉴别方法①沉淀反应：大多数生物碱能和某些酸类、重金属盐类以及一些较大分子量的复盐反应，生成单盐、复盐或络盐沉淀。如与碘化铋钾试剂的反应； ②显色反应：用于生物碱的冠色试剂很多，它们往往因生物碱的结构不同而显示不同的颜色，Mandelin试剂(1％钒酸铵的浓硫酸溶液)；③成盐反应：绝大多数生物碱可与酸形成盐类，但不同类型的生物碱与酸成盐的形式不同，主要有：季铵生物碱的成盐反应、含氮杂缩醛生物碱的成盐反应、具有烯胺结构生物碱的成盐反应、涉及氮原子跨环效应生物碱的成盐反应。 5．生物碱类化合物的提取一般从天然药物巾提取总生物碱通常采用溶剂法、离子交换法、沉淀法等提取分离方法。①对于脂溶性生物碱可采取酸水提取法、醇类溶剂提取法、亲脂性有机溶剂提取法；②对于水溶性生物碱可采取沉淀法、溶剂萃取法。 6．生物碱类化合物的分离对于生物碱的分离通常分为系统分离与特定分离。一般的方法是先对总碱进行初步分离，将性质相近的生物碱分成几个类别或部位。然后再按各成分的碱度、极性或功能团的差异分离生物碱单体。①总生物碱的初步分离：根据总生物碱中各成分理化性质的差异，可将其初步分离为强碱性的季铵碱、中等强度碱性的叔胺碱及其酚性碱、弱碱性生物碱及其酚性碱等几个部分；②生物碱单体的分离：利用生物碱碱性的差异、利用生物碱极性的差异或生物碱盐的溶解度差异、利用生物碱特殊官能团、利用色谱法进行分离。 7．生物碱类化合物的结构鉴定①色谱法：色谱法在生物碱鉴别中的应用主要体现在天然药物及天然药物制剂中有无生物碱存在的检识、指导生物碱的分离、检查生物碱的纯度及对已知生物碱的鉴定等多个方面，主要有：薄层色谱法、纸色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法；②谱学法：目前，在生物碱结构鉴定工作中，最常用的分析方法有紫外光谱(U V)、红外光谱(IR)、质谱(M S)和核磁共振 (N M R)。 【习题】 一、名词解释 1．生物碱 2．两性生物碱 3．生物碱沉淀反应 4．诱导效应 5．共轭效府 6．空间效应 7．诱导一场效应 8．氢键效应 二、填空题 1．小檗碱呈黄色，而四氢小檗碱则无色，其原因在于。 2．弱碱性生物碱在植物体内是以状态存在。 3．在生物碱的色谱检识中常用的显色剂是，它与生物碱斑点作用常显色。 4．Mayer’s试剂的主要成分为；Dragendorff’s试剂的主要成分为。 5．总生物碱的提取方法大致有以下三类：、、。 6．麻黄碱和伪麻黄碱的分离可利用它们的——盐在水中的溶解度不同，在水中溶
本科毕业设计（论文） 中药莲子心中总生物碱的提取及特征图谱 研究 学院轻工化工学院 专业制药工程 年级班级2011级（3）班 学号3211001806 学生姓名练利芳 指导教师郑俊霞 2015年6 月
中药莲子心中总生物碱的提取及特征图谱研究 练利芳 轻 工 化 工 学 院 梁华杰 轻工化工学院
摘要 目的：本实验是对莲子心药材中的化学成分进行初步分离，并对所得到的总生物碱成分进行HPLC分析，根据特征图谱来确定莲子心总生物碱的种类以及成分。相信随着科学技术的进一步发展，也会有越来越多的相关研究，能够早日实现其最大的药用价值。 方法：经过前期查阅文献从而确定本次实验方案，本实验将莲子心药材（10.5 kg）粉碎，加12倍80%乙醇，回流提取3次，每次2 h。合并提取液，浓缩至无醇味，浓缩液用1%盐酸调至pH = 3，纱布过滤；滤液加氨水调PH至9，二氯甲烷萃取，浓缩萃取液，得到暗黄色沉淀200 g，即为莲子心总生物碱部分。对莲子心总生物碱部分进行HPLC分析，探索总生物碱的HPLC分析条件，确定了最优的分析条件。在最优的分析条件下，建立了HPLC特征图谱。 结果：结合所得的特征图谱发现莲子心中所含生物碱成分远远多于文献报道的十几个化合物。这表明其中包含有大量结构未知的生物碱类化合物，需要进一步系统研究。 结论：通过此次实验所得到的实验数据，可以为莲子心总生物碱成分的探索和技术开发提供理论基础，为日后研究莲子心总生物碱的药理作用奠定基础。 关键词：莲子心，总生物碱，特征图谱。
Abstract Objective：This experiment is to preliminary separate the chemical composition of Plumula，and HPLC analysis the total alkaloids，which make sure the kind and composition of total alkaloids separate from separate. I believe that with the further development of science and technology , there will be more and more relevant research , as early as possible to achieve its maximum medicinal value. Method: After a preliminary literature review to determine this experimental program , This experiment crushed the Plumula（10.5 kg），added 12 times 80% ethanol to the powder，refluxed and extracted them three times，each time two hours.And combined the extract,concentrated it until we could’t smell the taste of alcohol, the concentrate was adjusted to pH=3 with 1% hydrochloric acid, then filtered with gauze. The filtrate was adjusted to pH=9 with ammonia, the solvent extraction with dichloromethane,concentrated the extracts, we got 200g dark yellow precipitate., which was the total alkaloids of plumula. After a HPLC analysis to the total alkaloids, explored the analytical conditions of HPLC, made sure the best of the analytical conditions of HPLC.The characteristic spectrum was bulit in the best of the analytical conditions of HPLC. Results: It was found that the kind of alkaloids in Plumula contained far more than reported in the literature through the result of characteristic spectrum.It indicated that the Plumula contains a large number of unknown structure of alkaloids. Conclusion:The experimental data obtained in this experiment may provided a theoretical basis for the exploration and technology odevelopment of Plumula total alkaloids, and lay the foundation for future study of the pharmacological effects . Keywords : Plumula, total alkaloids, the characteristic spectrum.
生物碱提取和分离方法的研究新进展 令狐文艳 摘要: 生物碱是一类具有生理活性的物质，是许多药用植物的重要有效成分之一。如何从天然产物中提取与分离生物碱是生物碱制备的关键环节。它吸引了人们的广泛关注，其提取与分离方法也不断地改进和发展。本文综述了近年来，不同的提取和分离方法在生物碱制备中的应用和进展。随着众对生物碱药用价值的认识提高，生物碱的撮与分离方法将更加高效、迅速、完善。 关键词:生物碱；提取；分离；研究；进展 1.前言 生物碱是自然界中广泛存在的一大类碱性含氮化合物，具有广泛的生理功能，是许多药用植物的有效成分 ,目前运用于临床的生物碱药品已达80 种之多 ,相当多的生物碱具有抗肿瘤活性、低毒性和成本低之特性 ,因而引起了人们的广泛关注[1 ]。与此同时 ,人们对生物碱的提取和分离方法研究也在不断地深入和加强。随着各类生物碱的市场需求量的增加 ,经济效益的提高 ,提取分离生物碱的方法也在不断改进和提高。 2.生物碱提取方法的研究进展 绝大多数生物碱是利用溶剂提取法进行提取。生物碱及其盐类的溶解度与生物碱分子中氮原子的存在形式、极
性基团的有无及数目、溶剂种类都有密切关系。极性强的生物碱亲水性较强, 易溶于极性溶剂；弱极性生物碱亲脂性较强,易溶于弱极性溶剂。游离的生物碱大多亲脂性较强, 而生物碱盐一般亲水性较强。按极性强弱可将生物碱提取溶剂分为极性溶剂、半极性溶剂和非极性溶剂[2]。 2. 1 按所用溶剂不同可分为以下几种方法 2. 1. 1 水提取法(以水作溶剂) 直接以水作为溶剂 ,采用最佳的提取工艺来提取生物碱。此法操作简便 ,成本较低 ,但提取次数多 ,水用量大。如蒙药忠论— 5 汤提取[3 ]就是一个很好的例子。 2. 1. 2 酸性水溶液提取法 对于那些碱性较弱不能直接溶解于水的生物碱提取 ,就可采用偏酸性的水溶液 ,使生物碱与酸作用生成盐而得到提取。 2. 1. 3 碱性水溶液提取法 对于那些化学结构非常独特、化学性质与一般生物碱不同且在酸性或中性条件下不稳定的生物碱来说 ,可以采用此法。而原有的乙醇作为溶剂渗漉提取法 ,不仅存在成本高 ,而且存在防火等级高、提取时间长、能耗大等诸多问题 ,远不如使用稀NaOH溶液好。 2. 1. 4 有机溶剂提取法 (1) 乙醇提取法在生物碱的提取中应用较为普遍 ,对于游离生物碱及其盐类一般采用乙醇提取法。
Dictamnine 白鲜碱；Skimmianine 茵芋碱； Fagarine 青椒碱；Robustine ； <分子式> C12H9NO2 <相对分子质量> 199 <性状>棱柱粉末。又称白鲜胺，白藓碱。棱柱结晶(由乙醇中结晶)，熔点133℃。溶于热乙醇和氯仿，微溶于乙醚，难溶于水。其盐酸盐为针状结晶(由乙醇中结晶)，熔点170℃(分解)。其苦味酸盐为黄色棱晶(由乙醇中结晶)，熔点1.63℃。存在于芸香科植物白鲜(Dictamnus dasycarpus Turcz.)的根。 芸香科植物白鲜的根；芸香科植物欧白鲜；芸香科植物花椒属竹叶椒的根；芸香科植物阿诺梯花椒的茎；芸香科植物得卡瑞花椒的茎皮；芸香科植物刺异叶花椒的根；芸香科植物蚬壳花椒的茎；芸香科植物乔木状花椒的叶；芸香科植物崖椒的茎皮；芸香科植物两面针；芸香科植物松风草的地上部分；芸香科花椒属植物梅宇崖椒的树皮；芸香科植物的树皮；芸香科植物似番樱桃叶芸香草地上的部分；芸香科植物火山生芸香草的全草；芸香科植物的茎；芸香科植物的根和茎；芸香科的叶；芸香料的树皮 <生物活性>强心和对平滑肌的作用；松弛血管的作用；抗真菌和DNA光毒性作用；皮肤光损害作用；抗血小板聚集作用；昆虫拒食作用。 防己提取物 【英文或拉丁名】：Stephania Tetrandra extract 【产品规格】：Tetrandrine12% Fangchinoline6% 【包装规格】：25kg/paper drum 【产品介绍】：药材为防己科植物石蟾蜍Stephania tetrandra S. Moore的根。棕色粉末。
【化学成分】：含多种异喹啉生物碱，主要有粉防己碱(tetrandrine )、防己诺林碱(fangchinoline)、轮环藤酚碱(cyclanoline)、二甲基粉防己碱(dimethyltetrandrine) 以及小檗胺(berbamine)等。 【功能主治】：利水消肿，祛风止痛。用于水肿脚气、小便不利、风湿痹痛、湿疹疮毒、高血压症。 【备注】： 植物形态多年生落叶缠绕藤本。茎纤细，有纵条纹。叶互生，宽三角状卵形，先端钝，具小突尖，基部截形或略心形，两面均被短柔毛，全缘，掌状脉5条；叶柄盾状着生。花小，单性，雌雄异株；雄花序为头状聚伞花序，排成总状，萼片4，花瓣4，雄蕊4，花丝连成柱状体，上部盘状，花药着生其上；雌花萼片、花瓣与雄花同，心皮1。核果球形，熟时红色。花期5-6月，果期7-9月。 生于山坡、丘陵地带的草丛及灌木林缘。主产浙江、安徽、湖北、湖南。 采制秋季采挖，除去粗皮，晒至半干，切段或纵剖，干燥。 性状根不规则圆柱形，或剖切成半圆柱形或块状，常弯曲，弯曲处有深陷横沟而呈结节状，长5-15cm，直径1-5cm。表面灰黄色，有细皱纹及横向突起的皮孔。质坚重，断面平坦，灰白色，粉性。气微，味苦。
《天然药物化学》实验教学大纲 (供四年制药学本科药物制剂、药品检验专业使用) Ⅰ前言 《天然药物化学实验》是天然药物化学课程的重要组成部分。其主要目的是：通过实验，检验在课堂上所学的理论知识。使学生对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固。通过实验，训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练。在实验中，重点是要加强对学生基本操作技能的训练。天然药物化学实验要求学生掌握以下技能：（一）提取分离方面：要求掌握常用的经典方法的原理及操作。其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、反流分布法）、重结晶法等。掌握纸色谱、薄层色谱的原理和基本操作。（二）鉴定方面（化学方法）：①掌握一般定性反应在鉴定中的用，②掌握重要衍生物（乙酰化物等）的制备方法及其在结构鉴定中的应用。本大纲适用于四年制本科药物制剂、药品检验专业使用。 现将大纲使用中有关问题说明如下: 一为了使教师和学生更好地掌握教材,大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解,教学内容与教学要求对应,并统一标示(核心内容即知识点以下划实线,重点内容以下划虚线,一般内容不标示)便于学生重点学习。 二教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容。三总教学参考学时为36学时。 四使用教材：《天然药物化学实验指导》，人民卫生出版社，裴月湖主编，第一版，2006年。 II 正文 实验一芦丁的提取、分离与鉴定 一教学目的 学习碱提酸沉法提取黄酮类化合物的原理及方法；掌握化学鉴别、苷的水解；了解其衍生物制备和薄层层析、纸色谱等方法手段在苷类结构鉴定上的作用；了解光谱法在黄酮类化合物结构鉴定中的作用。 二教学要求： （一）掌握碱提酸沉法提取黄酮类化合物的方法原理。 （二）掌握化学方法鉴别苷元、苷及糖；苷的水解。 （三）了解衍生物制备和薄层层析等方法手段在苷类结构鉴定上的作用。 （四）了解光谱法在黄酮类化合物结构鉴定中的作用。 三教学内容 （一）称取槐花米粗粉20g，置于500ml烧杯中，加入沸水250ml及硼砂1g，在搅拌下加石灰乳调至pH8~9保持微沸30分钟，不断补充蒸发掉的水分，以保持pH8~9，趁热用尼龙布拧挤过滤，滤渣再加100ml沸水，再提取一次。合并滤液，在60℃~70℃用浓盐酸调pH4~5，放置过夜，抽滤，沉淀用水洗至中性，置空气中晾干得粗品芦丁。 （二）槐花米中芦丁成分的预试：取芦丁3~4mg，加乙醇5~6ml使其溶解，分成三份作下述试验： 1. 盐酸-镁粉反应。
皂苷的提取分离 皂苷部分极性较大，首先应该附集皂苷部位，通常可用正丁醇萃取或是大孔树脂得到总皂苷部位。 对于具体皂苷的分离，若使用硅胶柱层析，一般以氯仿：甲醇：水进行洗脱，氯仿：甲醇：水一般为9：1：0.1，8：2：0.3，7：3：0.5，同时应注意要加大柱层析硅胶的装柱量，减少样品的上样量；另外也可使用反相柱。 此外有些皂苷类成分极性较大容易含有一些色素，不易结晶，可使用 Sephedex LH-20去除色素，进而使皂苷结晶。 类似物的hplc分离注意的问题 HPLC时生物碱对流动相的PH值很敏感。 三萜皂苷的提取与分离 （1）提取：三萜皂苷常用醇类溶剂提取，若皂苷含有羟基、羧基极性基团较多，亲水性强，用稀醇提取效果较好。提取物先用石油醚脱脂，然后再用正丁醇萃取，萃取物再经大孔吸附树脂，得粗皂苷。 （2）分离：采用分配柱色谱法要比吸附柱色谱法好，常用硅胶为支持剂，以氯仿-甲醇-水为或乙酸乙酯-乙醇-水为洗脱剂。 氨基酸的分离 将氨基酸分离成酸性氨基酸，碱性氨基酸，中性氨基酸和芳香族氨基酸。取酸水解氨基酸液适量通过阳离子交换的层析柱，碱性氨基酸就保留在层析柱上；而中性氨基酸和酸性氨基酸的混合液则进入滤液中。再将滤液通过阴离子交换的层析柱，一切酸性氨基酸就保留在层析柱上；而中性氨基酸就进入滤液中。吸附在阳离子交换层析柱上的氨基酸，用2 N HAc洗脱；吸附在阴离子交换层析柱上的氨基酸，用0.5 NNaOH洗脱。 黄酮类化合物的分离 黄酮类化合物在硅胶上的吸附较多，可以采取减压硅胶柱或者中压硅胶柱，上样量稍大一些（这样可以减小吸附量），将样品分段，然后采用sephadex LH－20进行细分。采用sephadex LH－20时，最好选择一个比较合适的水与甲醇的比例（样品不会毫无保留），进行等度洗脱。因为水甲醇梯度洗脱很容易产生气泡。个人认为经过硅胶和sephadex LH－20后，黄酮和多糖应该能够分开。 生物碱与生物酸分离方法 https://www.doczj.com/doc/1f11242207.html,/bbs/post/view? ... sty=1&age=0#4271305 差向异构体的分离 https://www.doczj.com/doc/1f11242207.html,/bbs/post/view? ... 1&sty=1&age=0#62893 生物碱的提取： 由于各种生物碱的结构不同，性质各异，提取分离方法也不尽相同，主要是根据生物碱的溶解度而定。生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂，除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外，一般均不溶或难溶于水，而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。基于这种特性，可用不同的溶剂将生物碱从中药中提出，常用的提取溶剂有下列3种： （1）非极性溶剂：样品先用10%氢氧化铵溶液湿润，使中草药中与酸结合成盐的生物碱呈游离状态，然后用氯仿或乙醚等提取，一些与酸结合比较稳定的生物碱盐类和鞣酸盐或碱性较强的生物碱盐等，氢氧化铵不能将其完全分解，可用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钙或氧化镁，甚至氢氧化钠碱化，这个方法的缺点是不能提出水溶性生物碱。 （2）极性溶剂：极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水（常
1）抽提 称取10g茶叶，放入索氏提取器的滤纸套筒中（底部垫少许棉花）, 并加入95%乙醇至离虹吸管顶端1cm处。再在圆底烧瓶中加入30ml95%乙醇，加一块沸石。再由下至上装好提取装置，连续提取2～3小时（大约虹吸5次，第6次提取液不用虹吸入烧瓶）。 2）回收乙醇 稍冷后，将茶叶弃之，提取液全部倒入圆底烧瓶中，改为蒸馏装置，回收提取液中的大部分乙醇。将底烧瓶中液体浓缩至约20～30ml，稍冷后，趁热将烧瓶中的残液倾入蒸发皿中，在蒸汽浴上浓缩至5～6ml后，拌入3-4g生石灰粉，使成糊状，在蒸气浴上蒸干，其间应不断搅拌，并尽可能压碎块状物，使之完全成干粉。（注：可用烧杯加水后在电炉上产生热蒸汽，将蒸发皿置于烧杯口。小心烫伤！） 3)升华提纯 最后将蒸发皿放在大铁圈上，用电炉进行空气加热（＜100℃），大铁圈与电炉保持12～15cm。期间仍不断搅拌。使水分全部除去（注意：小心操作铁圈，切勿烫伤！浓缩和干燥过程中温度不能太高，应严防焦化、炭化）。冷却后，擦去沾在边上的粉末，以免在升华时污染产物。粉末表面盖上一张刺有许多小孔的滤纸。取一支口径合适的玻璃漏斗，罩在盖有滤纸的蒸发皿上，在空气浴中小心加热升华。控制砂浴温度在120℃～140℃左右，此时滤纸上出现许多白色毛状晶体，暂停加热，让其自然冷却至100℃左右。小心取下漏斗，揭开滤纸，用刮刀将纸上和器皿周围的咖啡因刮下。然后重新装好升华装置，调高温度到150～170℃，重复第一次升华过程，合并两次收集的咖啡因，称重。 1.称取干茶叶8g装入滤纸筒中，轻轻压实，放入索氏提取器中，另外在圆底烧瓶中加入100mL 95%乙醇，放入一粒沸石，安装好索氏提取装置（脂肪提取器）。小火加热至沸腾，连续提取1小时，此时提取液的颜色变得很淡，待提取器中的液体刚虹吸下去时，立即停止加热。 ⒉装好蒸馏装置，将萃取液倒入蒸馏瓶中蒸除乙醇。当蒸馏瓶中液体剩约8mL时，立即停止蒸馏，将残留液倒入蒸发皿中，加入4g生石灰（起中和及脱水作用）。在蒸气浴上加热，赶尽乙醇，然后将蒸发皿移至石棉网上焙烧，除尽水分。 ⒊在蒸发皿上盖一张用大头针刺有许多小孔的圆形滤纸，取一个合适的玻璃漏斗罩在滤纸上，在石棉网上小心加热，逐渐升温，尽可能使升华速度慢一些，提高结晶纯度。咖啡因蒸气通过纸孔遇到漏斗内壁冷却，直到冷凝为固体，附着在漏斗内壁和滤纸上。当滤纸上出现大量白色晶体时，停止加热，揭开漏斗和滤纸，观看咖啡因的颜色形状，仔细用小刀将附在其上的咖啡因刮下。 ⒋若产品中仍含有杂质或色素，可用半微量减压升华管再次升华：将粗咖啡因放入一个试管底部，把装好的仪器放入油浴中，浸入深度以直型冷凝管的底部与油表面在同一水平面为宜。冷凝管内通入冷却水，开启水泵抽气减压，并加热油浴至(180～190)℃，咖啡因升华凝结于直型管上。小心取出冷凝管，将咖啡因刮在洁净的表面皿上。 纯净的咖啡因为熔点236℃的白色针状晶体
实验六茶叶中咖啡因的提取（升华法） 一、实验目的 1.学习从茶叶中取提咖啡因的原理与方法； 2.掌握索氏提取器的原理及其应用； 3.掌握升华原理及其操作。 二、实验原理 咖啡因具有刺激心脏、兴奋大脑神经和利尿等作用，主要用作中枢神经兴奋药。它也是复方阿斯匹林（A.P.C）等药物的组分之一。现代制药工业多用合成方法来制得咖啡因。 咖啡因为嘌呤的衍生物，其化学名称为1,3,7-三甲基-2,6-二氧嘌呤，其结构式与茶碱，可可碱类似。 嘌呤（Purine）咖啡因(Caffeine) 茶碱(Guanine) 可可碱(Adenine) 纯品咖啡因为白色针状结晶体，无臭，味苦；易溶于水、乙醇、氯仿、丙酮；微溶于石油醚；难溶于苯和乙醚。它是弱碱性物质，水溶液对石蕊试纸呈中性反应。咖啡因在100℃时即失去结晶水，并开始升华，120℃时升华相当显著，至178℃时升华很快。无水咖啡因的熔点为234.5℃。 茶叶中含有多种生物碱，其主要成分为含量约1～5%的咖啡因，并含有少量茶碱和可可豆碱，以及11～12%的单宁酸(又名鞣酸)，还有约0.6%的色素、纤维素和蛋白质等。 为了提取茶叶中的咖啡因，往往利用适当的溶剂（如氯仿、乙醇、苯等）在脂肪提取器中连续萃取，然后蒸出溶剂，即得粗咖啡因。粗咖啡因中还含有一些生物碱和杂质，利用升华法可进一步纯化。 本实验利用咖啡因易溶于乙醇、易升华等特点，以95%乙醇作溶剂，通过索氏提取器进行连续抽提，然后浓缩、焙烘得到粗品咖啡因，再通过升华提取得到纯品咖啡因。 三、仪器药品 1.试剂与仪器 茶叶：5g；95乙醇：90ml，生石灰：1.5g。 索氏提取器一套，表面皿，蒸发皿，不锈钢刮铲，玻璃漏斗，锥形瓶。 四、实验装置
生物碱常用的提取方法 生物碱的提取： 由于各种生物碱的结构不同，性质各异，提取分离方法也不尽相同，主要是根据生物碱的溶解度而定。生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂，除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外，一般均不溶或难溶于水，而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。基于这种特性，可用不同的溶剂将生物碱从中药中提出，常用的提取溶剂有下列3种： （1）非极性溶剂：样品先用10%氢氧化铵溶液湿润，使中草药中与酸结合成盐的生物碱呈游离状态，然后用氯仿或乙醚等提取，一些与酸结合比较稳定的生物碱盐类和鞣酸盐或碱性较强的生物碱盐等，氢氧化铵不能将其完全分解，可用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钙或氧化镁，甚至氢氧化钠碱化，这个方法的缺点是不能提出水溶性生物碱。 （2）极性溶剂：极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水（常用0.1%～1%盐酸、硫酸、乙酸、酒石酸等）以及缓冲液等进行提取，该方法较简便，但提出的杂质较多，需进一步净化。 （3）混合溶剂：用不同极性的溶剂按不同比例混合，可以较好地进行提取，如麦角用氯仿：甲醇：氢氧化铵（90:9:1），百部、粉防已用乙醚：氯仿：乙醇：10%氢氧化铵溶液（25:8:25:1）等。 水溶性生物碱还可采用与生物碱沉淀试剂如雷氏盐（硫氰化铬铵）、磷钨酸等生成不溶的复盐而从水溶液中析出。生物碱与雷氏盐生成的沉淀可溶于丙酮，再通过阳离子交换树脂，用氢氧化铵洗脱即得游离的生物碱，生物碱与磷钨酸生成的沉淀可与固体碳酸钾研磨使干燥，再用无水乙醇热提。 实际上，每种分析法的建立都要对上述三类溶剂作比较，以优选出最佳提取溶剂。 生物碱的提取方法，常用的有冷浸、渗漉、超声波、索氏提取、热回流提取，由于中药分析所涉及到的大部分内容是有机化合物微量分析，故需要的样品量很少，因此，实际上是少量样品与大量提取溶剂，加上样品又经粉碎过筛，常常冷浸提取液中被测组分浓度与提取液中粉碎的样品内所含被测组分相当，即能提取完全。为了使提取更完全，也常常对上述方法进行组合如冷浸-渗漉，冷浸-超声 波，冷浸-索氏提取，冷浸-热回流提取，因冷浸、冷浸-超声波提取操作简便，
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第十章生物碱【习题】 （一）选择题 [1-220] A型题[1-58] 1.生物碱不具有的特点是 A.分子中含N原子 B. N原子多在环内 C. 具有碱性 D. 分子中多有苯环 E.显著而特殊的生物活性 2.具有莨菪烷母核的生物碱是 A. 甲基麻黄碱 B. 小檗碱 C. 阿托品 D. 氧化苦参碱 E. 乌头碱 3.属于异喹啉生物碱的是 A. 东莨菪碱 B. 苦参碱 C. 乌头碱 D. 小檗碱 E. 麻黄碱 4.在常温下呈液体的生物碱是 A. 槟榔碱 B. 麻黄碱 C. 苦参碱 D. 乌头碱 E. 莨菪碱
5. 具有挥发性的生物碱是 A. 吗啡碱 B. 小檗碱 C. 苦参碱 D. 麻黄碱 E. 乌头碱 6. 具有升华性的生物碱是 A. 烟碱 B. 咖啡因 C. 小檗胺 D. 益母草碱 E. 氧化苦参碱 7. 生物碱的味多为 A. 咸 B. 辣 C. 苦 D. 甜 E. 酸 8. 具有颜色的生物碱是 A. 小檗碱D. 莨菪碱C. 乌头碱 D. 苦参碱 E. 麻黄碱 9. 无旋光性的生物碱为 A. 伪麻黄碱 B. 小檗碱 C. 烟碱 D. 乌头碱 E. 长春新碱 10. 表示生物碱碱性的方法常用 A. pkb B. Kb C. pH D. pka E. Ka 11. 生物碱碱性最强的是
A. 伯胺生物碱 B. 叔胺生物碱 C. 仲胺生物碱 D. 季铵生物碱 E. 酰胺生物碱 12.水溶性生物碱主要指 A. 伯胺生物碱 B. 仲胺生物碱 C. 叔胺生物碱 D. 两性生物碱 E. 季铵生物碱 13. 溶解脂溶性生物碱的最好溶剂是 A. 乙醚 B. 甲醇 C.乙醇 D. 氯仿 E. 水 14.生物碱沉淀反应呈桔红色的是 A. 碘化汞钾试剂 B. 碘化铋钾试剂 C.饱和苦味酸试剂 D. 硅钨酸试剂 E. 碘-碘化钾试剂 15. 生物碱沉淀试剂反应的介质通常是 A. 酸性水溶液 B. 碱性水溶液 C. 中性水溶液 D. 盐水溶液 E. 醇水溶液 16.水溶性生物碱分离的常用方法是 A. 碘化汞钾沉淀法 B. 硅钨酸沉淀法 C. 雷氏盐沉淀法 D. 苦味酸沉淀法 E. 碘化铋钾沉淀法 17. 用离子交换树脂法分离纯化生物碱时，常选用的离子交换树脂是
生物碱提取和分离办法研究新进展 摘要：生物碱是一类具备生理活性物质，是许多药用植物重要有效成分之一。如何从天然产物中提取与分离生物碱是生物碱制备核心环节。它吸引了人们广泛关注，其提取与分离办法也不断地改进和发展。本文综述了近年来，不同提取和分离办法在生物碱制备中应用和进展。随着众对生物碱药用价值结识提高，生物碱撮与分离办法将更加高效、迅速、完善。 核心词:生物碱；提取；分离；研究；进展 1.前言 生物碱是自然界中广泛存在一大类碱性含氮化合物，具备广泛生理功能，是许多药用植物有效成分 ,当前运用于临床生物碱药物已达80 种之多 ,相称多生物碱具备抗肿瘤活性、低毒性和成本低之特性 ,因而引起了人们广泛关注[1 ]。与此同步 ,人们对生物碱提取和分离办法研究也在不断地进一步和加强。随着各类生物碱市场需求量增长 ,经济效益提高 ,提取分离生物碱办法也在不断改进和提高。 2.生物碱提取办法研究进展 绝大多数生物碱是运用溶剂提取法进行提取。生物碱及其盐类溶解度与生物碱分子中氮原子存在形式、极性基团有无及数目、溶剂种类均有密切关系。极性强生物碱亲水性较强，易溶于极性溶剂；弱极性生物碱亲脂性较强,易溶于弱极性溶剂。游离生物碱大多亲脂性较强，而生物碱盐普通亲水性较强。按极性强弱可将生物碱提取溶剂分为极性溶剂、半极性溶剂和非极性溶剂[2]。 2. 1 按所用溶剂不同可分为如下几种办法 2. 1. 1 水提取法(以水作溶剂) 直接以水作为溶剂 ,采用最佳提取工艺来提取生物碱。此法操作简便 ,成本较低 ,但提取次数多 ,水用量大。如蒙药忠论— 5 汤提取[3 ]就是一种较好例
子。 2. 1. 2 酸性水溶液提取法 对于那些碱性较弱不能直接溶解于水生物碱提取 ,就可采用偏酸性水溶液 ,使生物碱与酸作用生成盐而得到提取。 2. 1. 3 碱性水溶液提取法 对于那些化学构造非常独特、化学性质与普通生物碱不同且在酸性或中性条件下不稳定生物碱来说 ,可以采用此法。而原有乙醇作为溶剂渗漉提取法 ,不但存在成本高 ,并且存在防火级别高、提取时间长、能耗大等诸多问题 ,远不如使用稀NaOH溶液好。 2. 1. 4 有机溶剂提取法 (1) 乙醇提取法在生物碱提取中应用较为普遍 ,对于游离生物碱及其盐类普通采用乙醇提取法。 (2) 其她有机溶剂法是依照相似相溶原理 ,对于不同性质生物碱选用最佳有机溶剂进行提取。可采用单一有机溶剂进行分步提取 ,用不同溶剂提取不同成分;也可采用混合溶剂、反映溶剂进行提取。 2. 2 按提取条件不同可分为 2. 2. 1 煎煮法 中药最早、最惯用制剂办法之一,将中药粗粉加水加热煮沸，将中药成分提取出来办法。此法简便易行，合用于有效成分能溶于水，且对加热不敏感药材，可以提取出相对较多有效成分。但含挥发性及有效成分遇热易破坏中药不适当用此法。 2. 2. 2 浸渍法 将解决过药材用恰当溶剂在常温或温热状况下浸渍获取有效成分。该法普通
生物碱的提取： 由于各种生物碱的结构不同，性质各异，提取分离方法也不尽相同，主要是根据生物碱的溶解度而定。生物碱大都能溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂，除季铵碱和一些分子量较低或含极性基团较多的生物碱外，一般均不溶或难溶于水，而生物碱与酸结合成盐时则易溶于水和醇。基于这种特性，可用不同的溶剂将生物碱从中药中提出，常用的提取溶剂有下列3种： （1）非极性溶剂：样品先用10%氢氧化铵溶液湿润，使中草药中与酸结合成盐的生物碱呈游离状态，然后用氯仿或乙醚等提取，一些与酸结合比较稳定的生物碱盐类和鞣酸盐或碱性较强的生物碱盐等，氢氧化铵不能将其完全分解，可用碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钙或氧化镁，甚至氢氧化钠碱化，这个方法的缺点是不能提出水溶性生物碱。 （2）极性溶剂：极性较大的生物碱可用中性甲醇、乙醇、酸性甲醇、乙醇、酸水（常用0.1%～1%盐酸、硫酸、乙酸、酒石酸等）以及缓冲液等进行提取，该方法较简便，但提出的杂质较多，需进一步净化。 （3）混合溶剂：用不同极性的溶剂按不同比例混合，可以较好地进行提取，如麦角用氯仿：甲醇：氢氧化铵（90:9:1），百部、粉防已用乙醚：氯仿：乙醇：10%氢氧化铵溶液（25:8:25:1）等。 水溶性生物碱还可采用与生物碱沉淀试剂如雷氏盐（硫氰化铬铵）、磷钨酸等生成不溶的复盐而从水溶液中析出。生物碱与雷氏盐生成的沉淀可溶于丙酮，再通过阳离子交换树脂，用氢氧化铵洗脱即得游离的生物碱，生物碱与磷钨酸生成的沉淀可与固体碳酸钾研磨使干燥，再用无水乙醇热提。 实际上，每种分析法的建立都要对上述三类溶剂作比较，以优选出最佳提取溶剂。 生物碱的提取方法，常用的有冷浸、渗漉、超声波、索氏提取、热回流提取，由于中药分析所涉及到的大部分内容是有机化合物微量分析，故需要的样品量很少，因此，实际上是少量样品与大量提取溶剂，加上样品又经粉碎过筛，常常冷浸提取液中被测组分浓度与提取液中粉碎的样品内所含被测组分相当，即能提取完全。为了使提取更完全，也常常对上述方法进行组合如冷浸-渗漉，冷浸-超声波，冷浸-索氏提取，冷浸-热回流提取，因冷浸、冷浸-超声波提取操作简便，故使用较多，必要时，要对上述方法作比较，以优选出最佳提取方法。分离： 1.净化 上述方法得到的总生物碱中常含有大量杂质，在分离之前一般需净化。净化的方法常依据提取方法及含有的杂质而定。 ?水或酸水提取液的净化 1. 离子交换树脂法 提取液 │ │通过强酸型（氢型）阳离子交换树脂 ┌──────┴───────────┐ ↓↓ 流出液树脂柱 （非碱性物质）┌──────┴───────────┐ │方法一│方法二 │氨液碱化树脂│碱