石蜡切片免疫组化染色实验操作流程

石蜡切片免疫组化染色实验操作流程_ 1.石蜡切片脱蜡至水:(石蜡切片染色前应置60℃1小时)。①二甲苯I、II,各30分钟。②梯度酒精:100%I、II,各10分钟;95%,5分钟;80%,5分钟;70%5分钟。③蒸馏水洗:5分钟,2次(置于摇床)。2抗原修复:根据待检测的抗原,选择适当的方法。附:抗原修复液(10mMpH6.0枸橼酸钠缓冲液)的配制:①储备

2020-10-25
免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结

免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结1、方法操作不难,最大的难处是出现异常结果时如何解决?这就需要掌握免疫组化实验原理,每一步知道为什么这样做,这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间,这三者一般是相互成反比的(相对),其中浓度是最重要的先决条件,温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说,可以

2021-04-11
免疫组化染色操作步骤

免疫组化染色操作步骤 Document serial number【UU89WT-UU98YT-UU8CB-UUUT-UUT108】免疫组织化学染色原理和操作步骤一、免疫组织化学原理免疫组织化学(IHC)又称免疫细胞化学,是根据抗原—抗体特异性结合的原理,应用带有可见标记的特异性抗体作为探针,检测组织和细胞中抗原性物质的一种技术。免疫组化技术主要有直接法和间

2020-10-29
免疫组化超详细步骤

免疫组化超详细步骤 Prepared on 22 November 2020免疫组化一实验目的:分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的表达情况二实验原理:应用基本原理——抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使的(、酶、、)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和),对其进行定位、定性及定量的研究,称

2024-02-07
免疫组化操作方法原理步骤以及常见问题处理大总结

免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结1、方法操作不难,最大的难处是出现异常结果时如何解决?这就需要掌握免疫组化实验原理,每一步知道为什么这样做,这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间,这三者一般是相互成反比的(相对),其中浓度是最重要的先决条件,温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说,可以

2024-02-07
免疫组化超详细步骤

免疫组化一实验目的:分别用KRAS、NRAS、HRAS蛋白抗体检测肺癌组织中KRAS、NRAS、HRAS蛋白的表达情况二实验原理: 应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术或免疫

2024-02-07
免疫组化入门实验操作

免疫组化入门实验操作一、实验目的:1.了解免疫组化基本原理。2.了解免疫组化实验操作及注意事项。3.免疫组化结果判定。通过实验,让学生熟悉免疫组化操作流程及注意事项,对抗原抗体结合、抗原修复和酶催化底物显色进行研究。要求学生通过查阅文献,在归纳、对比、总结的基础上对免疫组化有进一步的了解。二、实验原理:三、实验材料:一抗:CD5、CK8、Ki67二抗:Max

2024-02-07
免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结

免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结1、方法操作不难,最大的难处是出现异常结果时如何解决?这就需要掌握免疫组化实验原理,每一步知道为什么这样做,这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间,这三者一般是相互成反比的(相对),其中浓度是最重要的先决条件,温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说,可以

2024-02-07
免疫组化染色操作步骤

免疫组织化学染色原理和操作步骤一、免疫组织化学原理免疫组织化学(IHC)又称免疫细胞化学,是根据抗原—抗体特异性结合的原理,应用带有可见标记的特异性抗体作为探针,检测组织和细胞中抗原性物质的一种技术。免疫组化技术主要有直接法和间接法:直接法是以标记的一抗孵育标本以检测其中的抗原成分;间接法则先后加入一抗和二抗,形成抗原—一抗—二抗复合体以达到检测该抗原的目的

2024-02-07
免疫组化操作步骤(自编)

免疫组化操作步骤一免疫组化( LP 法)操作步骤:1.切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ultra V Block ,在室温

2024-02-07
石蜡切片免疫组化操作步骤

石蜡切片免疫组织化学操作流程一、组织获取(本实验室多做脑组织,所以以脑组织为例)1.动物麻醉:所用麻醉药物(水合氯醛水溶剂)剂量为350mg/kg动物体重,常用麻醉药物浓度为5%、6%、7%、10%(麻醉浓度越大,动物进入麻醉时间越短,但麻醉致死率相应较高,本人使用7%浓度,若注射位置正确,约3min进入麻醉状态);动物麻醉后,将其固定于灌流操作平台,仰卧位

2024-02-07
免疫组化操作规程及操作流程

免疫组化操作规程一、实验原理与意义免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、

2024-02-07
《分子实验》06 免疫组化实验

免疫组化操作步骤(一)、仪器设备1. 18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉.2. 水浴锅(二)、试剂1. PBS缓冲液(ph7.2―7.4):NaC137mmol/L,KCl2.7mmol/L ,Na2HPO4 4.3mmol/L, KH2PO4 1.4mmol/L.2.0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,ph6.0,1000ml):柠檬酸三钠3g,柠檬

2024-02-07
免疫组化染色SP法

免疫组化SP 法一.实验原理SP 法是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素是一种从链霉菌中提取的蛋白质,分子量47000. 同亲和素一样,对生物素分子有极高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍。亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变为中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,IP=6.0~6.5 ,对组

2024-02-07
细胞免疫组化步骤

细胞免疫组化步骤(2010-06-1921:40:50)细胞免疫组化(SABC法)步步看:细胞冻存够了,且状态良好!咋们就开始做细胞免疫组化吧!开始做实验了,先看要准备些什么吧!实验准备:?实验用品:???移液枪:1ml、200ul、10ul???枪头:1ml、200ul、10ul???枪头盒:1ml、200ul、10ul????细胞消化液、完全培养基、4%

2024-02-07
免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结

免疫组化操作方法、原理、步骤以及常见问题处理大总结1、方法操作不难,最大的难处是出现异常结果时如何解决?这就需要掌握免疫组化实验原理,每一步知道为什么这样做,这样你才敢大胆地改革先前的不对的方法步骤。如抗体孵育条件主要是抗体浓度、温度、时间,这三者一般是相互成反比的(相对),其中浓度是最重要的先决条件,温度决定反应的速度、时间决定反应的量。就拿温度来说,可以

2024-02-07
免疫组化实验

免疫组化实验实验原理:应用免疫学基本原理——抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使酶标记的抗体与显色剂进行显色反应,生成有色的不溶性产物,来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量。实验目的:通过染色结果强弱,对所研究蛋白在组织水平的表达进行判断比较。(干净的背景会使结果判断的更加准确)。在实验室实验时遇到的难题:

2024-02-07
免疫组化操作步骤

免疫组化操作步骤第一节免疫组化操作步骤及抗原修复(供参考)第二节免疫组化抗原热修复得技术要点(供参考)ﻫ(一)、仪器设备1、18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉、ﻫ2. 水浴锅ﻫ(二)、试剂1、PBS缓冲液(pH7.2―7、4)ﻫ2。0、01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,pH6。0,1000ml)ﻫ3。3%甲醇―H2O2溶液:用30%H2O2与80%甲醇溶

2024-02-07
免疫组化操作步骤

免疫组化操作步骤第一节免疫组化操作步骤及抗原修复(供参考)第二节免疫组化抗原热修复的技术要点(供参考)(一)、仪器设备1. 18cm不锈钢高压锅或电炉或用微波炉.2. 水浴锅(二)、试剂1. PBS缓冲液(pH7.2―7.4)2.0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(CB,pH6.0,1000ml)3. 3%甲醇―H2O2溶液:用30%H2O2和80%甲醇溶液配

2024-02-07
免疫组化染色操作顺序

免疫组化染色操作顺序文件编码(GHTU-UITID-GGBKT-POIU-WUUI-8968)免疫组织化学染色原理和操作步骤一、免疫组织化学原理免疫组织化学(IHC)又称免疫细胞化学,是根据抗原—抗体特异性结合的原理,应用带有可见标记的特异性抗体作为探针,检测组织和细胞中抗原性物质的一种技术。免疫组化技术主要有直接法和间接法:直接法是以标记的一抗孵育标本以检

2024-02-07