洁净手术室空气采样方法

空气、物体表面、医务人员手的监测采样及检查原则：采样应具有一定数量和代表性，采样后必须尽快对样品按要求指标进行检测，送检时间不得﹥6小时，若样品保存在冰箱内送检时间不﹥24小时。

一、空气监测：1、采样时间：消毒处理后，操作前2、采样方法：平板沉降法（1）布点方法：室内面积≤30ｍ²，设内、中、外对角线3点，两端距墙1米；室内面积＞30ｍ²，设东、西、南、北4角及中央5点，其中东、西、南、北均距墙1米。

洁净手术室9个点。

（2）采样方法：将直径为9cm普通营养琼脂平板在室内各采样点处，采样高度为距地面0.8--1.5米，采样时将平板盖打开，扣放于平板旁，暴露5-15-30分钟，盖好立即送检。

( 3)注意事项：采样前，关好门、窗，在无人走动的情况下，静止10min 进行采样。

表4：洁净手术室静态（空态）时空气采样方法（沉降法）等级空气洁净度级别布点要求细菌最大平均浓度手术区周边区手术区周边区100级1000级0.2 0.4Ⅱ1000级10000级0.75 1.5Ⅲ10000级100000级2 4辅Ⅲ100000级 5(5)质控标准：Ⅰ类区域（洁净手术室）：细菌总数≤4cfu/m3(30分钟9cm平皿)，新风机组2d清洁一次，初效过滤器1-2月更换，中效每周检查3个月更换，高效每年更换，末端高效每年检查3年更换。

回风口每周清洁一次、每年更换一次。

Ⅱ类区域：细菌总数≤4cfu/m3(15min9cm平皿)，Ⅲ类区域：细菌总数≤4cfu/m3(5min9cm平皿)，二、医务人员手的监测：1、采样时间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样。

2、采样面积及方法：放被检人（五指并拢），用浸有无菌盐水的棉拭子在双手指屈面从指根到指端往返涂擦各2 次(双手涂擦面积约60平方厘米），并随之转动采样棉拭子，剪去操作者手接触部位，将棉拭子投入5ml 无菌盐水试管内，立即送检。

3、质控标准：工作人员手卫生：细菌总数≤10cfu/cm2。

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3.采样时间 : 在消毒处理后，进行医疗操作前 采样，静止1Omin采样。
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4.布点方法 室内面积≤30㎡，对 角线内、中、外处设 3点，内外点布位距 墙壁1m处。（图1）
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5.采样高度:距地面0.8-1.5m
6.采样方法：采样时，将平板盖打开，暴露 5min或者10min，盖好平板。在平皿上注明 采自的科室或者科室的房间，用胶布把平 皿和平皿盖子固定好，以免在送检途中平 皿和平皿盖子分离而造成污染。
空气培养采集操作规范
康复医学科 主讲人：金婷 2016年12月21日
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一、医院常规空气细菌培养采样方 法
1.定义： 空气细菌培养的采样方法是一种检 测空气细菌总数的细菌培养法平板 暴露法。
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2.基本原理:是空气中细菌等微生物可随尘 粒一起下降，降落在室内各采集点处放好 的营养琼脂平板上。最后，将平板置于37℃ 恒温箱培养48h计算菌落数。
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二、洁净室空气细菌培养监测布点 与标准
1.局部百级，周围千级： 共放13个培养皿，其中手术区域5点，周边区8点。
采样布置点示意图如下：
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2.局部千级，周围万级：
共放9个培养皿，其中手术区域3点，周边区6 点，采样布置点示意图如下：
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3.局部万级，周围十万级：
共放7个培养皿，其中手术区域3点，周边区 域4点，采样布置点示意图如下：
致病菌为消毒合格 Ⅲ类区域细菌总数≤500cfu/m3，并且未检出
致病菌为消毒合格
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区域分类说明：
Ⅰ类区域：层流洁净手术室，层流洁净病房。
Ⅱ类区域：普通手术室、产房、婴儿室、早 产儿室、普通保护性隔离室、供应室无菌 区、烧伤病房、重症监护病房。

层流手术室空气日常监测方法：要求日常实行动态监测，必测项目为平板采样法（沉降法）或采样器法(浮游菌法)检测细菌菌落总数。

（1）回风口动态平板采样法：应在手术开始、手术2小时、手术结束前抽检3-4次。

每个回风口中部摆放3个倾斜30℃，Φ90 培养皿，暴露30分钟后，37°C培养24小时。

标准：每皿菌落计数平均值应符合表4标准要求。

单皿最大值不应超过平均值3倍。

（2）动态采样器法：浮游菌菌落检测应在手术进行如切皮、缝合、连台手术之间、手术进行4小时等，选择不少于3个程序，测定细菌菌落总数。

标准：I级<30cfu/m3 ；II级<150 cfu/m3；III级<450 cfu/m3；IV级<500 cfu/m3。

（3）其他洁净用房在当天上午10时和下午4时各测1次，在每个回风口中部摆放3个Φ90培养皿，沉降0.5h后在37℃下培养24h。

标准：同回风口动态平板采样法标准。

层流手术室静态（空态）时空气采样方法：1、采样方法：（1）当送风口集中布置时，应对手术区和周边区分别检测；当送风口分散布置时，按全室统一布点方法检测。

（2）沉降法采样时，用直径9cm的培养皿，在空气中暴露30min，37℃培养24h，培养皿中的菌落数（cfu）代表空气中沉降下来的细菌数，以个/皿表示。

（3）浮游法采样时，用裂隙采样器在空气中随机采样30min，对采样皿或采样条培养得出的菌落数（cfu），代表空气中浮游下来的细菌数，以个/m3表示。

2、采样高度：（1）采样点可布置在地面上或不高于地面0.8m的任意高度上；（2）在手术区检测时应无手术台；当手术台已固定时，检测高度应在台面之上0.25cm。

3、布点方法：（见表1）4、采样注意事项：（1）在100级区域检测时，采样口应对着气流方向；在其他区域检测时，采样口均向上；（2）采样后的培养基条或培养皿，应37℃条件下培养24h，并计算菌落数，菌落数的平均值均四舍五入选位到小数点后1位；（3）当采用浮游法测定浮游菌浓度时，细菌浓度测点数应和被测区域的含尘浓度测点数相同，且宜在同一位置上。

医院空气、物表与医务人员手卫生学监测根据卫生部下发的《医院空气净化管理规范》、《医疗机构消毒技术规范》（2012年8月1日实施）及《医务人员手卫生规范》要求，特制定我院环境卫生学监测方法与结果判断标准，请遵照执行。

一、空气净化效果的监测1.监测科室医院应对感染高风险部门如手术室、产房、导管室、层流洁净病房、骨髓移植病房、器官移植病房、重症监护病房、新生儿室、母婴同室、血液透析中心(室)、烧伤病房的空气净化与消毒质量进行监测。

2.监测频率（1）感染高风险部门每季度进行监测；（2）洁净手术室及其他洁净场所、新建与改建验收时、换高效过滤器后应进行监测；（3）遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时监测，并进行相应致病微生物检测。

3.采样时间（1）采用洁净技术净化空气的房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；（2）非洁净技术净化空气的房间在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样；（3）怀疑与医院感染暴发有关时采样。

4.监测方法（1）洁净手术室及其他洁净用房可选择沉降法或浮游菌法，参照GB50333要求进行监测。

浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其他经验证的空气采样器。

监测时将采样器置于室内中央0.8m～1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超过30min。

房间面积＞10 m2者，每增加10 m2增设一个采样点；（2）未采用洁净技术净化空气的房间采用沉降法：室内面积≤30 m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30 m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。

将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m～1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检；（3）平皿暴露时间：①层流洁净手术室或场所暴露30min；②非洁净手术室、产房、导管室、新生儿室、重症监护病房、器官移植病房、血液病病区、烧伤病房等感染高风险部门暴露15min；③儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊暴露5min。