实验报告教师版
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河 南 省 高 等 教 育 自 学 考 试
实 验 报 告
检验专业使用
所在学校:_____________
姓 名:_____________
学 号:_____________
河南科技大学高等教育自学考试办公室
二○ 年 月
2 注 意 事 项
1.各专科学校负责安排考生完成实验任务。
2.考生应如数按要求独立完成。
3.考生在实验前应认真预习实验指导书的有关内容，遵守实验操作规程，确保人身和设备安全，认真做好每一个实验，并独立完成实验报告，有问答题的实验，必须认真回答，不能空项。填写实验报告必须用蓝黑色钢笔（插图可用铅笔），要求字迹工整清洁。
4.实验指导教师应按指导要求，指导考生完成实验并认真批阅实验报告，确定初评成绩，填写课程实验报告评分栏。
5.根据我院“实践课程考核细则”规定，实验报告成绩占总成绩的40%，实验室考核占总成绩的60%。完成本实验报告且成绩达到24分以上者方可申请实验室考核。
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目 录
实验一 免疫学及免疫学检验实验-ABO血型的测定 ...................... 4
实验二 病原微生物学实验-细菌革兰染色 ............................. 6
实验三 血液学及血液学检验实验-凝血时间测定 ....................... 8
实验四 生物化学及生物化学检验实验--紫外分光光度法测定蛋白质含量 .. 10
实验五 计算机应用基础—Windows基本操作 .......................... 10
实验室管理学论述题 ............................................... 16
实验报告评分栏 ................................................... 17
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实验一 免疫学及免疫学检验实验-ABO血型的测定
[实验目的]学会用玻片法测定ABO血型，根据测定结果确定血型。
[实验原理]红细胞膜上的A抗原与另一人体内血浆中的抗A抗体相遇或B抗原与抗B抗体相遇时会发生红细胞凝集反应。故可利用已知含抗A凝集素和抗B凝集素的诊断血清，分别与被测者的红细胞混合，根据是否发生红细胞凝集反应，判断红细胞所含的凝集原，从而鉴定其血型。
[实验药品与试剂]
人、抗A诊断血清(从B型血的血清中茯得)、抗B诊断血清(从A型血的血清中茯得)、双凹玻片，采血针，滴管，小试管，竹签，生理盐水，75％酒精棉球，低倍显微镜。
[实验步骤]
1．取干净双凹玻片一块，用玻璃蜡笔在两端分别标明A、B字样。
2．在A侧凹内滴加抗A诊断血清l滴，B侧凹内滴加抗B诊断血清1滴，注意不可混淆。
3．用75%酒精棉球消毒耳垂或指端后，以消毒针刺破皮肤，滴1～2滴血于盛有1ml生理盐水的小试管中混匀，制成红细胞混悬液。
4．用吸管吸红细胞混悬液，在双凹玻片的抗A、抗B诊断血清中各加一滴，分别用竹签使其充分混匀。放置10-15分钟后用肉眼观察有无凝集现象，肉眼不易分辨者用低倍显微镜观察。
5．根据有无凝集现象判定血型。
[注意事项]
1.采血针和采血时必须严格消毒，以防感染。
2.制备红细胞混悬液不能过浓或过稀，以免造成假结果。
3.滴标准血清的滴管和作混匀用的竹签各2只(根)，专用，搅动血清时切不可使抗A、抗B两种血清发生混合。
4.注意区别凝集现象与红细胞叠连。发生红细胞凝集时，肉眼观察呈朱红色颗粒，且液体变得清亮。
5 [思考题]
1.在实验结果中，我们判断血型的具体依据是什么？
2.制备红细胞混悬液时要注意什么？
评分细则：
操作（每项10分） 得分
1. 玻片编号
2. 采取静脉血方式
3. 红细胞混悬液的制备
4. 红细胞混悬液的吸取方式
5. 凝集现象的观察
6. 试验原理的熟悉程度
7. 试验用品的准备
8. 血型的判定
9. 显微镜的正确使用
10. 凝集现象的原理熟悉程度
合计分数
6 实验二 病原微生物学实验-细菌革兰染色
[实验目的]
1.掌握显微镜油镜的使用与维护。
2.熟练进行细菌涂片、革兰染色及其镜检。
[实验原理]
革兰阳性菌细胞壁较厚，乙醇脱色时，肽聚糖层通透性降低与细胞结合的结晶紫与碘的复合物在细胞壁仍保留初染时的颜色。革兰阴性菌壁薄，乙醇脱色增加了细胞壁的通透性，初染的结晶紫碘复合物渗出经复染又染上复染的颜色。
[实验药品与试剂]
1.菌种：大肠埃希菌、表皮葡萄球菌固体培养物。
2.示教片：细菌基本形态示教片、细菌特殊结构示教片。
3.试剂：革兰染液、生理盐水
[实验仪器与设备]
1．酒精灯、接种环、载玻片等。
[实验步骤]
细菌涂片和革兰染色及其镜检
1.细菌涂片的制备：取生理盐水１滴置玻片上，然后用接种环从固体培养基上取菌落或菌苔少许，在盐水中磨匀，涂布成约１cm2大小的圆形薄膜。细菌涂片在室温下自然干燥，必要时可将膜面向上，在火焰上方高处微微烘烤，以助水分蒸发（以不烫手为度）。固定常用火焰加热法固定，即将已干燥的细菌涂片膜面向上，以钟摆速度通过火焰上方3次，注意切勿将菌体烤焦。
2.革兰染色：1初染：滴加结晶紫于涂片上染色1分钟后，流水冲洗； 2媒染：滴加碘液于涂片上染色1分钟后，流水冲洗。3脱色：滴加95%乙醇于涂片上，摇动玻片数秒钟，然后斜持玻片，再滴加乙醇，直至流下的乙醇无色为止，流水冲洗。4复染：滴加稀释性复红于涂片上染色0.5分钟后，流水冲洗，待干。
3.镜检：用油镜观察，注意染色性。葡萄球菌染成紫色为革兰阳性菌，大肠埃希菌染成红色，为革兰阴性菌。
7 [思考题]
1.革兰染色的意义是什么？
2.影响革兰染色的因素有哪些？
评分细则：
操作（每项10分） 得分
1.试剂、细菌、器材的准备完整，有序
2.接种环的使用，烧灼灭菌方法正确
3.选择菌种，取菌时菌量多少适量。
4.均匀涂布细菌，室温干燥，酒精灯外焰固定。
5.滴加染色液，染色液应遮盖完全、染色顺序及时间符合标准。
6.水洗流程，玻片固定于显微镜置物台上
7.显微镜操作方法，对焦方法正确，能找到相应细菌
8.低倍镜、高倍镜、油镜观察方法正确
9.应具备无菌操作观念
10.仪器和试验台清理
合计分数
8
实验三 血液学及血液学检验实验-凝血时间测定
[实验目的]
1.熟悉凝血时间（CT）机理、正常参考值及临床意义。
2.熟悉CT步骤及注意事项。
[实验原理]
离体静脉血与普通玻璃试管接触后，内源凝血系统被激活，最后生成纤维蛋白使血液凝固，此即为凝血时间（CT）。是内源凝血系统的一种筛选试验。
[实验器材]（以普通试管法为例）
1.内径为10mm小试管。
2.秒表。
[实验步骤]
1.取内径为10mm小试管3支，编号1、2、3。
2.顺利抽取受检静脉血3ml，同时记录时间，分别沿管壁平均注入3支编号的试管内，置37℃水浴中。
3.血液离体3min后每隔30S轻轻倾斜第1支试管1次，直至血液不再流动为止；再依次观察第2管待凝固；再依次观察第2管，以第3管凝固为止。
4.记录血液刚进入注射器至第3管凝固所需时间（min）。
[参考值]
玻璃管法5～10min；塑料试管法10～19min。
[注意事项]
1.抽血不要含泡沫和组织液，不应有溶血。
2.倾斜动作要轻，角度要小（约30度），以减少血液与管壁的接触面积。
3.本试验不甚敏感，仅能检出因子VIII：C水平<2%的患者。
4.所用的试管口径必须符合规定，口径偏小，CT缩短，反之延长。
[思考题]
1.凝血时间缩短说明了什么？
2.抽血时有哪些注意事项？
9
评分细则：
操作（各项10分） 得分
1. 试管编号
2. 采取静脉血方式
3. 静脉血放入试管操作方式
4. 水浴锅温度设定
5. 试管倾斜角度的放置
6. 正确记录凝血时间
7. 小试管的正确使用
8. 秒表的正确使用
9. 试验原理的熟悉程度
10.试验结果的观察
合计分数
