五分类血细胞分析仪的原理及使用

血细胞仪白细胞五分类法原理和散点图特征北京协和医院检验科张时民血细胞分析技术已经进入自动化时代，而具有白细胞五分类或更多分析参数的仪器也普遍的应用于国内各级医院实验室中，为临床诊断和治疗服务。

而具有18项参数带有白细胞三分群功能的血细胞分析仪也已经普及进入到基层医院和社区医疗中心，在许多大型医院中已不占主流位置，因此可以说目前在较大医院的检验科，常规血细胞分析仪已经进入全自动化和白细胞五分类的时代。

本文主要介绍全自动血细胞分析仪在白细胞五分类上的原理和散点图分布特点。

此类仪器在红细胞、血红蛋白、血小板和计算参数上一般会采用类似的测定原理和计算方法，此类仪器的进展和其功能特点可参考作者撰写的其它文章（见参考文献）。

具有白细胞五分类功能的血细胞分析仪器是指通过各种物理和化学技术对白细胞进行分析，以获得外周血液中白细胞的五种常见类型，嗜中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，淋巴细胞和单核细胞的百分率和绝对值的测定结果，此外还应该具有对出现异常白细胞的提示或初步分类功能。

目前国内外具有开发研制白细胞五分类法仪器的主要为欧美和日本生产厂商，比较著名的欧美厂家有Beckman-Coulter；ABBOTT；Siemens（Bayer）；ABX；日本有Sysmex和Nihon Kohdon。

在国内已经有迈瑞（MINDRAY）公司生产几个型号的五分类血细胞分析仪器投入医疗市场。

一简要发展史1974年，一种名为HEMALOG D的具有初步白细胞分类功能的白细胞分析仪问世。

1982年，Technicon公司生产了H6000型血液细胞分析仪器，应该是首款具有白细胞五分类能力的仪器。

同时代日本日立公司推出图像分析法的白细胞分析仪HITACHI 8200型，仅仅是用于完成白细胞血片分类的仪器，没有其他血细胞计数分析能力。

Technicon 公司1985 年开发了比较成熟的具有白细胞五分类功能的Technicon H1 型血液细胞分析仪，随后升级为H2型和H3型。

血细胞分析仪五分类检测技术及原理血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着科学技术日新月异的发展，血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类，从二维空间进而转向三维空间，同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术，如鞘流技术、激光技术等。

下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。

1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。

激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况（细胞核以及颗粒情况），侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。

在嗜碱细胞通道中，使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。

幼稚细胞检查通道（IMI）可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象，在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多，对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解，而幼稚细胞不易被破坏，可通过电阻法检测出来。

综合各个测量方法，得到白细胞五分类的图形和数据。

这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。

2 电阻抗和射频电导联合检测法这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:（1）淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，而使白细胞保持完整，细胞浆及核形态近似于生理状态，当这些细胞通过检测系统时，对白细胞进行电阻抗法（测量细胞体积）和射频电导法（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测，结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。

血细胞分析仪五分类检测技术及原理血细胞分析仪是医院临床检验应用非常广泛的仪器之一，随着科学技术日新月异的发展，血细胞分析的技术也从几年前的三分类转向现在的五分类，从二维空间进而转向三维空间，同时现代血细胞分析仪的五分类技术许多采用了先进的技术，如鞘流技术、激光技术等。

下面就五分类血细胞分析仪器的检测方法及其应用加以说明。

1 采用阻抗、激光散射和荧光染色技术检测法直流电阻抗法（DC）用于测量细胞体积大小。

激光散射产生的前向散射光、侧向散射光和侧向荧光可用于探测白细胞体积大小、细胞内含物的情况（细胞核以及颗粒情况），侧向荧光则可以反映细胞内脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）的含量，特有的嗜酸性粒细胞检测溶血剂Str-matolyzer-EO可将除了嗜酸细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜酸细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。

在嗜碱细胞通道中，使用特殊溶血剂Strmatolyzer-BA可将除了嗜碱细胞以外的所有细胞溶解或萎缩，含有完整嗜碱细胞的液体通过小孔可以按照电阻法计数技术进行计数。

幼稚细胞检查通道（IMI）可以根据幼稚细胞膜比成熟细胞膜表面含有脂质较少的现象，在细胞稀释悬液中加入硫化氨基酸，由于占位不同，结合在幼稚细胞表面的氨基酸较多，对溶血剂有抵抗作用，当加入溶血剂后成熟细胞易被溶解，而幼稚细胞不易被破坏，可通过电阻法检测出来。

综合各个测量方法，得到白细胞五分类的图形和数据。

这种技术主要应用在Sysmex研制和开发的SE-9000、SE-9500、XE-2100、XT-1800等系列血液分析仪中。

2 电阻抗和射频电导联合检测法这种方法是分别采用四个检测系统来检测不同类型的细胞:（1）淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞检测系统:在细胞悬浮液中加入溶血剂使红细胞溶解，而使白细胞保持完整，细胞浆及核形态近似于生理状态，当这些细胞通过检测系统时，对白细胞进行电阻抗法（测量细胞体积）和射频电导法（检测细胞核和颗粒密度）的联合检测，结果将细胞分成淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞三个群体。

血球产品全球技术支持部 Hematology Global Technical Support Dept.目录一、 库尔特原理...............................................................................................................2 二、 比色法.......................................................................................................................3 三、 半导体激光流式细胞术...........................................................................................4 四、 判断血细胞分析仪性能的参数...............................................................................61. 准确性.......................................................................................................................6 2. 重复性.......................................................................................................................7 3. 携带污染率...............................................................................................................8 4. 线性...........................................................................................................................9 五、 溯源性与质控、校准 .............................................................................................10 1. 溯源性.....................................................................................................................10 2. 校准.........................................................................................................................13 3. 质控.........................................................................................................................15文件编号：MXQ-12044-血球五分类版本：V1.01of22一、 库尔特原理血球产品全球技术支持部 Hematology Global Technical Support Dept.20 世纪 50 年代初，库尔特先生利用电阻抗原理设计了血细胞计数仪。

五分类血球仪检测原理五分类血球仪是一种常用的医疗设备，用于对血液中的各类细胞进行定量和质量的分析。

本文将介绍五分类血球仪的检测原理，从而帮助读者更好地理解其工作机制。

一、引言五分类血球仪是一种自动化的医疗仪器，主要用于检测全血中的五类细胞，包括白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板和淋巴细胞。

它的主要作用是帮助医生和研究人员及时准确地评估患者的血液状态，为诊断和治疗提供依据。

二、技术原理五分类血球仪主要依靠光学技术来进行细胞的检测和分析。

其工作原理可分为以下几个步骤：1. 采血：首先，需要采集一定量的患者血液样本，通常是通过抽取患者的静脉血或者进行鲜血采样。

采集到的血液样本会被装入特殊的试剂管或者血液盒中。

2. 血液预处理：为了获得准确的分析结果，需要对血液样本进行预处理。

这一步骤主要包括溶血处理以破坏红细胞，使内部的细胞成分可供分析，并定量地将红细胞相关参数转换为有效值。

此外，还需要进行稀释处理，以避免过高的细胞浓度对检测结果产生干扰。

3. 光学检测：对预处理后的血液样本进行光学检测。

五分类血球仪通常配备有多个光学传感器，用于检测不同类型细胞的特定物理或化学特性。

例如，红细胞可以通过测量其吸光度来定量血红蛋白含量，血小板则可通过测量其数量和形状来判断血小板的健康状况。

4. 数据分析和分类：经过光学检测后，机器会自动将收集到的数据进行分析和分类。

通过对不同细胞的特征进行识别和计算，可以得出各类细胞的数量、浓度和形态等信息。

这些结果将被整理成一份详细的血液分析报告。

三、应用与优势五分类血球仪在临床医学和科研领域具有广泛的应用。

它的一大优势是自动化程度高，能够快速、准确地进行细胞分析，大大提高了工作效率。

此外，五分类血球仪还具备以下优点：1. 多功能性：它可以同时检测多种细胞类型，提供全面的血液分析数据。

这对于细胞计数、浓度测量以及异常细胞的发现非常有帮助。

2. 高精度：采用先进的光学技术和算法，使得血球仪具有较高的精度和可靠性。

那么这五个类型的白细胞是根据什么原理来分类的呢？目前主要是根据细胞的如下几个特性来分类：细胞的大小、核浆比例、细胞内细胞器的复杂程度、细胞核所含核酸的多少以及对某些化学试剂（或/和）荧光染液的敏感程度来区分之。

根据白细胞的以上特性，不同厂家、不同型号的五份类血细胞分析仪其检测分析的原理是不同的。

但其最基本的原理目前无非就以下几种情况：1、利用这五类细胞对不同化学试剂（溶血剂或叫溶血素）的溶解性质不同（如嗜酸细胞试剂和嗜碱细胞试剂）以及结合白细胞直方图细胞三分群的库尔特（电阻抗法）检测原理将白细胞分为五类。

例如:早期的Abcus Junior5仪器,（行业内常称为假五分类），当然比起三分群的仪器分类精准了不少，但还是存在很大偏差，因为有些细胞是采用大小分群（即脉冲的大小）和计算出来的。

2、四角度照射法：90°角区分分叶核细胞和单核细胞得到两类：中性粒细胞和嗜酸性粒细胞（分叶核细胞）；单核细胞和淋巴细胞及嗜碱性粒细胞（单核的嗜碱性粒细胞）。

用90°偏振区分：嗜酸性粒细胞和中性粒细胞。

用0°和10°通过核质比及细胞大小，将嗜碱性粒细胞从淋巴和单核细胞中群中分开。

用0°根据大小区分单核细胞和淋巴细胞。

此类仪器以优利特生产的URIT5160五分类为代表。

3、细胞化学-体积法：化学性溶血剂一方面作用于红细胞使红细胞破坏释放血红蛋白，另一方面还作用于白细胞，使白细胞膜表面产生小孔，细胞内浆质外溢，细胞失水皱缩，细胞膜紧贴于核上。

测定时细胞的体积大小是核、颗粒和膜成分的总和，白细胞种类不同、分化程度不同所含的胞浆颗粒、核结构以及大小也不同。

运用V.C.S三种探针，在流式通道的某一位点，对通过的单列白细胞，进行逐个的、同时的、三重的检测，以及三维分析，以确定其亚群性质。

V-低频波（Volume）: 采用低频电流准确分析细胞体积；C-高频波(Conductivity): 采样高频电流分析细胞核型；S-激光（Scatter）: 该激光束可穿透细胞，探测细胞内核分叶状况和胞浆中颗粒情况，分析细胞的颗粒特性。