碧云天一氧化氮合成酶检测试剂盒

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-1683301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)产品编号 产品名称包装 S0056谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)100次产品简介：谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(NADPH 法)(Cellular Glutathione Peroxidase Assay Kit with NADPH)是一种简单易行的通过紫外比色来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase, GPx)活性的试剂盒。

绝大部分细胞内的谷胱甘肽过氧化物酶都是含硒的，且硒为该酶的活性中心组成部分。

细胞内也有很少量的不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶存在。

本试剂盒检测的是最常见的含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。

本试剂盒的使用灵活方便，样品用量和检测时间的范围宽，样品用量可以根据样品中GPx 的活力在0.1-50微升之间调整，检测时间可以根据样品中GPx 的活力在5-30分钟内进行调整。

本试剂盒和总谷胱甘肽过氧化物酶检测试剂盒(S0058)配合使用，可以定量检测出样品中不含硒的谷胱甘肽过氧化物酶。

谷胱甘肽过氧化物酶可以清除活细胞内的过氧化物，在保护细胞免受自由基损伤过程中起着关键作用。

细胞内的脂类容易和自由基发生反应，产生脂类过氧化物。

谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)还原脂类过氧化物，从而消除自由基的毒害作用。

谷胱甘肽过氧化物酶几乎在所有组织中都有分布。

在一些病理状况下谷胱甘肽过氧化物酶的活力会发生明显上调或下调。

谷胱甘肽过氧化物酶可以利用还原型谷胱甘肽(GSH)催化过氧化氢以及许多有机过氧化物，产生水或有机醇。

但以过氧化氢为底物进行检测会受同样可以分解过氧化氢的过氧化氢酶(Catalase)的影响，因为过氧化氢酶的酶活性会干扰谷胱甘肽过氧化物酶的测定。

一氧化氮（NO ）含量检测试剂盒说明书（化学法）微量法货号：BC5485 规格：100T/96S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称 规格 保存条件 提取液 液体110 mL×1瓶2-8℃保存 试剂一 粉剂×1瓶 2-8℃保存 显色液A 液 液体6 mL×1瓶 2-8℃保存 显色液B 液 液体6 mL×1瓶 2-8℃保存 标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、 试剂一：临用前加入6mL 蒸馏水，可50℃助溶，2-8 ℃可保存12周。

冷却至常温使用；2、 显色液：临用前根据样本数量按照显色液A 液：显色液B 液=50μL: 50μL （100μL ，1T ）的比例配制显色液，充分混匀，现配现用； 3、 标准品：10μmol/mL 亚硝酸钠。

4、 0.05μmol/mL 标准溶液的配制：取50μL 10μmol/mL 亚硝酸钠，加入950μL 蒸馏水，配制浓度为0.5 μmol/mL ；再取100μL 0.5μmol/mL 亚硝酸钠和950μL 蒸馏水混匀配制成0.05 μmol/mL 的标准溶液备用。

产品说明：一氧化氮（Nitric Oxide ，NO ）是一种极不稳定的生物自由基，分子小，结构简单，常温下为气体，微溶于水，具有脂溶性，可快速透过生物膜扩散，作为一种新型的生物信使分子，在细胞间及细胞内发挥传递信号的作用。

其广泛分布于生物体内各组织中，特别是神经组织中。

在机体神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中也起着十分重要的作用。

NO 在体内或水溶液中极易氧化生成NO 2-。

在酸性条件下，NO 2-与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm 处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO 含量。

NO NO 2-NO 2- + 4-Aminobenzenesulfonamide Diazonium SaltDiazonium Salt + N-(1-Naphthyl)-Ethylenediamine Red Azo Dyes (550nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线：400-168-3301或800-8283301 订货e-mail ：******************技术咨询：*****************网址：碧云天网站 微信公众号β-NADPH (≥97%, Reagent grade)产品编号 产品名称包装 ST1110-5mg β-NADPH (≥97%, Reagent grade) 5mg ST1110-25mg β-NADPH (≥97%, Reagent grade) 25mg ST1110-100mgβ-NADPH (≥97%, Reagent grade)100mg产品简介：CAS Number Chemical Formula Molecular Weight Purity Grade 2646-71-1 (anhydrous)C 21H 26N 7Na 4O 17P 3·xH 833.35 (anhydrous≥97%Reagent grade基本信息(General Information)：Name (Chinese) β-NADPHName (English)β-NADPH|beta-Nicotinamide adenine dinucleotide2'-phosphate reduced tetrasodium salt hydrateSpecifications Reagent grade, ≥97% Chemical Formula C 21H 26N 7Na 4O 17P 3·xHSynonym (Chinese) 还原型辅酶II 四钠盐, 2′-NADPH 水合物, 二氢烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 四钠盐, 还原型三磷酸吡啶核苷酸 四钠盐Synonym (English) beta-NADPH; 2'-NADPH hydrate; Coenzyme IIreduced tetrasodium salt; Dihydronicotinamide adeninedinucleotide phosphate tetrasodium salt; NADPH Na4;TPNH2 Na4; Triphosphopyridine nucleotide reduced tetrasodium saltBeilstein Registry No. - EINECS Number 220-163-3 MDL Number MFCD00036263 UNSPSC Code 41106305 产品描述(Description)：Applicationβ-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸2'-磷酸(NADP +)和还原型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸2'-磷酸(NADPH)包含参与广泛的酶催化氧化还原反应的辅酶氧化还原对(NADP +：NADPH)。

细胞膜蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒产品简介：碧云天的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒(Membrane and Cytosol Protein Extraction Kit)提供了一种比较简单、方便地从培养细胞或组织中抽提细胞膜蛋白和细胞浆蛋白的方法。

抽提的膜蛋白不仅包括质膜上的膜蛋白，也包括线粒体膜、内质网膜和高尔基体膜等上的膜蛋白。

本试剂盒通过匀浆适度破碎细胞，经低速离心去除细胞核和少数未破碎的细胞产生的沉淀，随后取上清高速离心获得细胞膜沉淀和含有细胞浆蛋白的上清，然后通过优化的膜蛋白抽提试剂从沉淀中抽提获取膜蛋白。

约90分钟即可完成培养细胞或组织的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白的分离和抽提。

抽提得到的蛋白可以用于SDS-PAGE，Western、酶活性测定等后续实验。

膜蛋白抽提试剂中含有蛋白酶抑制剂、磷酸酯酶抑制剂和EDTA等，后续不适合用于蛋白酶、磷酸酯酶等受这些抑制剂影响的酶的活性测定，但抽提获得的膜蛋白或细胞浆蛋白适合用于检测蛋白的磷酸化水平。

本试剂盒按照本说明书的操作步骤可以抽提100个细胞或组织样品。

保存条件：-20℃保存，一年有效。

注意事项：需自备PMSF。

PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。

PMSF(ST506)可以向碧云天订购。

使用本试剂盒抽提到的细胞膜蛋白与细胞浆蛋白均可直接用碧云天生产的BCA法蛋白浓度测定试剂盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)测定蛋白浓度。

抽提获得的细胞膜蛋白不适合用Bradford法测定蛋白浓度。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：1.准备试剂：室温融解并混匀膜蛋白抽提试剂A和B，融解后立即置于冰浴上。

取适量的膜蛋白抽提试剂A和B备用，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。

2.准备细胞或组织样品：a. 对于细胞(1) 收集细胞对于贴壁细胞：培养约2000-5000万细胞，用PBS洗一遍，用细胞刮子刮下细胞或用含有EDTA但不含胰酶的细胞消化液处理细胞使细胞不再贴壁很紧，并用移液器吹打下细胞。

双荧光素酶报告基因检测试剂盒产品简介：碧云天生产的双荧光素酶报告基因检测试剂盒(Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit)，是先以荧光素(luciferin)为底物来检测萤火虫荧光素酶(Firefly luciferase)，后以coelenterazine为底物来检测海肾荧光素酶(Renilla reniformis luciferase，简称Renilla luciferase)，并且在后续加入Renilla luciferase的底物时同时加入了抑制Firefly luciferase催化luciferin发光的物质，使后续检测仅仅测定到Renilla luciferase的活性，实现双荧光素酶报告基因检测。

萤火虫荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光(bioluminescence)。

海肾荧光素酶可以催化coelenterazine氧化成coelenteramide，在coelenterazine氧化的过程中也会发出生物荧光。

然后可以通过荧光测定仪也称化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪测定上述荧光素酶催化的氧化过程中释放的生物荧光。

通过荧光素酶和其底物这一生物发光体系，可以极其灵敏、高效地检测基因的表达。

通常把感兴趣的基因转录的调控元件克隆在firefly luciferase的上游或其他适当的地方，构建成报告基因质粒。

然后转染细胞，适当刺激或处理后裂解细胞，测定荧光素酶活性。

通过荧光素酶活性的高低判断刺激前后或不同刺激对感兴趣的调控元件的影响。

Rinilla luciferase更多地被用作转染效率的内参，以消除细胞数量和转染效率的差异。

萤火虫荧光素酶催化luciferin发光的最强发光波长为560nm。

海肾荧光素酶催化coelenterazine发光的最强发光波长为465nm。

脂质氧化(MDA)检测试剂盒产品简介：碧云天的脂质氧化(MDA)检测试剂盒(Lipid Peroxidation MDA Assay Kit)采用一种基于MDA和硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)反应产生红色产物的显色反应，随后通过比色法用于对血浆、血清、尿液、动植物组织或细胞裂解液中MDA进行定量检测，广泛用于脂质氧化(lipid peroxidation) 水平检测的试剂盒。

丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一种生物体脂质氧化的天然产物。

动物或植物细胞发生氧化应激(oxidative stress)时，会发生脂质氧化。

一些脂肪酸氧化后逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括MDA。

此时通过检测MDA的水平即可检测脂质氧化的水平，因此MDA的测定被广泛用作脂质氧化的指标。

生物体内的一些其它生化反应也会产生MDA，例如thromboxane synthase也可以催化产生，但只要在测定时设置适当对照即可观察到脂质氧化水平的变化。

丙二醛在较高温度及酸性环境中可与TBA发生反应，形成红色的MDA-TBA加合物，相应的反应原理图如下：MDA TBA MDA-TBA AdductMDA-TBA加合物在535nm处有最大吸收，据此可以通过比色法进行检测。

另外，MDA-TBA加合物也可以在535nm被激发产生最大发射波长553nm，据此也可以进行荧光检测。

特点：本试剂盒中采用了特殊的抗氧化剂，可以有效地抑制样品在检测过程中产生新的MDA，使检测更加准确。

同时本检测试剂盒在检测过程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA，使对脂质氧化的测定更加准确。

本试剂盒可以检测低达1μM的MDA。

血浆、血清样品中的MDA含量通常在约2-4μM，尿液中的MDA含量通常在约5-30μM，在本试剂盒的检测范围内，可以直接用本试剂盒检测血浆、血清、尿液样品等。

本试剂盒共可进行100次检测。

冠状病毒M pro /3CL pro 活性荧光检测试剂盒产品编号 产品名称包装 P0313S 冠状病毒M pro /3CL pro 活性荧光检测试剂盒 100次 P0313M冠状病毒M pro /3CL pro 活性荧光检测试剂盒500次产品简介：碧云天研发的冠状病毒M pro /3CL pro 活性荧光检测试剂盒(Coronavirus M pro /3CL pro Activity Fluorometric Assay Kit)是一种用荧光法快速高灵敏检测冠状病毒主蛋白酶(main protease, 简称M pro ，也称3C-like protease ，简称3CL pro )活性的试剂盒。

2019年底由新型冠状病毒引起的肺炎疫情，从2020年初开始在全球大流行，感染病例快速上升，引发全球关注。

该病毒被世界卫生组织(WHO)命名为2019-nCoV ，被国际病毒分类委员会命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2 (severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)。

由新型冠状病毒导致的疾病，被世界卫生组织正式命名为冠状病毒疾病2019 (Corona Virus Disease 2019, COVID-19），通常称为新型冠状病毒肺炎，简称“新冠肺炎”。

新型冠状病毒(2019-nCoV)属于单正链的RNA 病毒，与SARS-CoV 以及MERS-CoV 具有较高的同源性，该病毒感染进入宿主细胞后，在宿主细胞的帮助下，其遗传物质RNA 的ORF1a/b 首先翻译表达出两条多聚蛋白前体(pp1a 和pp1ab)，多聚蛋白前体在主蛋白酶(main protease, 简称M pro )和木瓜样蛋白酶(papain like proteases)的作用下发生分子内的切割产生多个非结构蛋白。

M pro 也被称为3C-like protease (3CL pro )，因为其切割位点的特异性与微小RNA 病毒(picornavirus)的3C 蛋白酶(3C protease)很相似，两者并称为M pro /3CL pro。

一氧化氮（NO）含量检测试剂盒说明书(货号：NM-W-0132 微量法100T/96S)一、产品简介：一氧化氮（Nitric Oxide，NO）是一种气态分子自由基，在生物体内作为重要的信使分子和效应分子，参与调节血管形成、神经传递、免疫调控及肿瘤生长等多种生理及病理过程。

此外，NO是植物的主要生物活性分子，在植物的生长发育和对胁迫的反应过程中参与了多种生理活动，如种子萌发、叶扩展、根生长、花器官发生、气孔运动的调节以及植物的抗逆反应等。

NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2-。

在酸性条件下，NO2-与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物，进一步与萘基乙烯基二胺偶合，产物在550nm处有特征吸收峰，测定其吸光值，可以计算NO含量。

酶标仪、96孔板、台式离心机、恒温水浴锅/培养箱、超声细胞破碎仪、研钵/匀浆器、天平、可调式移液器、冰和蒸馏水。

四、操作步骤：建议正式实验前选取2个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！1、预实验样本制备℃ 组织样本：称取0.2g样本，加入1mL提取液进行冰浴匀浆后，10000g，4℃离心15min，取上清置于冰上待测。

【注】：若增加样本量，可按照组织质量(g)：提取液体积(mL)为2~5：10的比例进行提取。

℃ 细菌/细胞样本：建议1000万细菌或细胞加入1mL提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3s，间隔7s，总时间5min），10000g，4℃离心15min，取上清置于冰上待测。

【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为1000~2000：1的比例进行提取。

℃ 血清（浆）等液体样本：直接测定。

若液体有浑浊则离心取上清测定。

2、标准溶液的配制：把10μmol/mL标准品母液用蒸馏水稀释成1.25μmol/mL的标准溶3、预实验上机操作：℃ 酶标仪预热30min以上，调节波长至550nm。

4、正式实验：℃ 若预实验∆A 测定小于0.005，可以增加样本量后再进行测定；如果∆A测定大于1.5，建议将样本上清用稀释液适当稀释后再进行测定，并将改变后的W和D代入公式计算；℃ 确定好最适实验条件后，正式实验样本制备同预实验样本制备；℃ 正式实验按照预实验操作步骤进行（标准管和空白管预实验已做，正式实验可选做）。