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超滤法提取肌苷几个主要参数

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第31卷　第1期河南师范大学学报(自然科学版)Vol.31　No.1

　2003年2月JournalofHenanNormalUniversity(NaturalScience)

Feb.2003　

文章编号:1000-2367(2003)01-0093-03

超滤法提取肌苷几个主要参数的研究Ξ

常景玲(河南职业技术师范学院生物工程系,河南新乡,453003)摘　要:

本实验对超滤法提取肌苷乾地了研究.采用超过滤膜对肌苷发酵液进行超滤,再经浓缩、结晶、干燥,

得到粗苷.实验确定最佳超滤条件为:压力0.15Mpa,温度64.9℃.肌苷提取收率为:85.7%,其粗苷中粗苷含量为:

73.2%.比离子交换法提取肌苷,收率提高15个百分点,肌苷成本降低40%左右.关键词:

肌苷;超滤;收率

中图分类号:Q81 文献标识码:

A

肌苷又名次黄嘌呤核苷,是治疗肝炎、心脏病、眼病等疾病的辅助性药物.近年来的研究表明,肌苷有望成为中风患者完全恢复肢体机能的第一药物.目前,研究生物产品下游技术中未见超滤法用于肌苷提取工艺的报导.发酵法生产肌苷的提取方法长期以来采用离子交换柱吸附工艺,即肌苷发酵液→732#阳离子交换柱→活性炭柱→浓缩→结晶→干燥→粗苷,工艺流程复杂,提取收率低,只有70%左右,设备利用率低、劳动强度大,酸碱用量大,环境污染严重,产品成本高.

本实验对超滤法提取肌苷进行了研究.其工艺流程为肌苷发酵液→超滤→浓缩→结晶→干燥→粗苷.采用超过滤膜对肌苷发酵液进行超滤,截留分子量在500以上的物质[1～2],只让肌苷(M:268.23)等小分子物质

通过,经浓缩、结晶、干燥,得到粗苷.此过程中认真考察了压力、温度、超滤速度等几个主要参数.肌苷的提取收率可达85.7%,粗苷中肌苷含量为73.2%,并无次黄嘌呤杂质.比传统的离子交换吸附工艺提取肌苷,收率提高15个百分点,工艺过程简单,生产周期缩短一半,省去了树脂、活性炭、酸液、碱液、酒精用量,一年内能为年产1000t肌苷的企业节约400万元,肌苷成本降低40%左右;降低了劳动强度,改善了劳动条件,显著降低了环境污染,保护了生态环境;同时滤渣烘干,制得蛋白饲料和植物化肥,变废为宝,为企业增加经济效益.用超滤法代替传统的离子交换吸附工艺提取肌苷,是一次肌苷提取工艺的大改革,可为企业带来显著的经济效益和社会效益.

1　仪器设备与原料1.1　仪器设备:超滤设备、旋转蒸发器、紫外光分析仪、7512G紫外光分光光度计.1.2　原料:肌苷发酵液

2　操作方法与结果2.1　肌苷发酵液超滤最佳条件的确定:用“二元二次回归的正交组合设计”方法,确定最佳超滤条件[3,4,6].实验方案及结果如表1.

指标:Y—过滤速度(ml󰃗min);Z1—温度(40℃～80℃);Z2—过滤压差(0.05～0.15Mpa)

取三个水平:

Ξ收稿日期:2002-10-14.

作者简介:常景玲(1963～),女,河南新乡人,河南职业技术师范学院高级工程师.

© 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved. Z1 40℃ 60℃ 80℃ Z2 0.05Mpa 0.1Mpa 0.15Mpa

Z1i0=(80-40)󰃗2 Z2i0=(0.15-0.05)󰃗2

作变换: X

1

=(Z1-60)󰃗20 X2=(Z

2

-0.1)󰃗0.05

表1　实验方案及实验结果

实验号X1X2X1X2X1’X2’YX1YX2YX1X2YX1’YX2’Y

11111󰃗31󰃗319.9219.9219.9219.926.646.6421-1-11󰃗31󰃗319.0619.06-19.06-19.066.3546.3543-11-11󰃗31󰃗318.74-18.7418.74-18.746.2466.2464-1-111󰃗31󰃗317.14-17.14-17.1417.145.7145.71451001󰃗3-2󰃗319.82006.606-13.2126-1001󰃗3-2󰃗317.94-17.94005.98-11.967010-2󰃗31󰃗320.5020.50-13.6666.83480-10-2󰃗31󰃗319.480-19.480-12.9866.4949000-2󰃗3-2󰃗320.54000-13.694-13.694∑173.144.983.84-0.74-2.806-0.854

其中X1=X1󰃝X1-2󰃗3X2=X2󰃝X2-2󰃗3

∑y󰃖y=3341.348∑y󰃗9=173.14󰃗9=19.238

有b1=4.98󰃗6=0.83b2=3.48󰃗6=0.58

b12=-0.74󰃗4=-0.186b11=-2.806󰃗2=-1.403

b22=-0.584󰃗2=-0.292b0.=173.14󰃗9=19.238

回归方程为:

y=b-′+b1X1+b2X2+b12X1X2+b11X1′+b22X

2′

=20.368+0.83X1+0.58X2-0.186X1X2-1.403X1󰃖X10.292X2.X

2

Lyy=

∑yy-(∑y󰃗9)󰃖(∑

y󰃗9

)

=3341.348-19.238×19.238=10.422LX1y=4.98 LX2y=3.48 LX1X2y=-0.74 LX′1y=-2.806 LX′2y=-0.584 U=b1Lx1y+b2Lx2y+b12Lx1x2y+b11Lx′1y+b22Lx′2y=10.397

R=U󰃗Lyy=10.397󰃗10.442=0.9978

对 a=0.05,N1=5,N2=3,查F分布表,得Fa=9.9

Ra=5Fa󰃗(3+5Fa

)=0.968

因为 R>Ra,所以回归效果显著.

因为 ∃=b12󰃖b12-b11󰃖b

22=-1.604<0,

所以 y有极大值.

令 ay󰃗aX1=0 ay󰃗aX

2=0

即 2.804X1+0.186X2=0.830.186X1+0.584X2=0.58 解得 X1=0.253 X

2=0.918

Z1=20X+60=64.7 Z2=0.05X+01=0.15

此时 y=20.73

(

ml󰃗min)

2.2　在最优超滤条件下,对肌苷发酵液进行超滤、浓缩、结晶将10L发酵液加热至於65℃,泵水超滤膜系统进行超滤.超滤压差为0.15Mpa,温度为65℃,过滤至发酵液为黑色粘稠状,滤清液很少流出为止.超滤结束时,得滤清液9L,滤渣6.75g,滤速20.7ml󰃗min.滤清液肌苷

49河南师范大学学报(自然科学版) 2003年© 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.含量8.6‰,在真空度0.095Mpa,温度60℃进行浓缩,4℃结晶48h,得粗苷90.6g

(净重)

.

2.3　粗苷质量分析取粗苷制品和肌苷标准品,用电子天平精确称取1.0000克,按1󰃘100的比例,用蒸馏水溶解,取样进行纸层析,在紫外光分析仪下254nm处观察,样品和标准品均为紫色边沿整齐的椭圆形斑点,即粗苷中没有次黄嘌呤杂质.测定粗苷量为73.2%.

2.4　肌苷收率计算肌苷收率=(粗苷重量×粗苷中肌苷含量)÷(滤清液中肌苷含量)×100%

=(90.6×73.2%)÷(9×8.6)×100%=85.7%

3　结果讨论3.1　通过“二元二次回归的正交组合设计”,计算结果表明回归效果显著,比较准确地确定了肌苷超滤的最佳条件,即温度64.7℃、超滤压差0.15Mpa时,超滤速度20.73ml󰃗min为最大.

3.2　超滤法提取肌苷与离子交换法提取肌苷最大的优势就在于生产周期短,劳动强度低,肌苷收率高,生产成本低,基本解决了环境污染问题.

4　结　论试验研究结果表明:用超滤法代替离子交换法提取肌苷是完全可行的,能使企业获得巨大的社会效益和经济效益,这将是肌苷提取工艺的一次质的改革,对降低肌苷成本,提高企业的经济效益和社会效益,减少环境污染,保护生态环境,具有重大的意义.

参　考　文　献1　毛忠贵.生物工业下游技术[M].北京:中国轻工业出版社,1999.1922　[德]R󰃖劳顿巴赫,R󰃖阿尔布雷特.膜分离方法—超滤和反渗透.黄怡华,董汝秀译[M].北京:化学工业出版社,1991.983　朱彬华.超滤法浓缩a2淀粉酶的研究[J].膜科学与技术,1988,8(3):15～204　LinShu2suetal.PreconcentrationofL2alaninewithNADHragenertionbyananofiltrationmembranereactor[J].Biotech,Biochem,1997,(12):2029～20335　天津轻工业学院,大连轻工业学院,无锡轻工学院,华南工学院.工业发酵分析[M].北京:中国轻工业出版社,1994.1976　胡运权,张宗洁.试验设计基础[M].哈尔滨:哈尔滨工业大学出版社,1997.19

StudiesonMajorParametersofInosineProcessingCHANGJing2ling(DepartmentofBiologicEngineering,HenanVocation2TechnicalTeachersCollage,Xinxiang,453003,China)Abstract:Extractionofinosineinfermentionbrothwithultrafiltrationmembranewereinvestigatedandfiltrationcondition

werefounded.Theywere0.15Mpaforpressureand64.9forthetemperature.Theresultshowedthat:extractionratewas85.7%andthecontentofinosineintherough2inosinewas73.2%.Comparedwiththeextractionofinosinebyion2exchangoftheinosinetheexractionratewesimprovedby15%andtheinvestment(capital)costofinosinewasdecreasedbyabout40%.Keywords:inosine;ultrafiltration;extractionrate

59第1期 常景玲:超滤法提取肌苷几个主要参数的研究© 1995-2005 Tsinghua Tongfang Optical Disc Co., Ltd. All rights reserved.

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77、肌苷检验规程

77、肌苷检验规程

版本/版次 E/0 文件类别作业指导书页 码 1/3肌苷检验规程肌苷检验规程1. 1. 检验检验检验项目项目项目感观、含量、水法透光、干燥失重、堆积密度 2. 检验方法检验方法 2.1 感观检查称取试样10g 倒入托盘中，用玻璃棒摊平，用目视法检查是否符合要求。

2.2含量检验2.2.1 测定原理肌苷嘌呤基团对紫外光吸收，在260nm 的紫外光吸收值最大，且吸光度与其含量之间呈线性关系，根据试样吸光度求出肌苷含量。

2.2.2 试剂 盐酸溶液：0.001mol/L。

2.2.3 仪器1240紫外分光光度计。

2.2.4 操作将样品混合均匀，准确称取样品0.1g （精确至0.0001g）,转移至100mL 容量瓶中，用0.001mol/L 的盐酸溶液溶解，定容至刻度线,摇匀，准确吸取2mL 稀释液于100mL 容量瓶中，用0.001mol/L 的盐酸溶液稀释，摇匀定容至刻度线, 以0.001mol/L 盐酸溶液作参比液。

在紫外分光光度计上，于260nm 波长下，测其吸光度。

2.2.5 计算X=m710023268260×××NA .×100式中:X——样品肌苷含量，%； N——稀释倍数；A260——260nm 下样液的系光度。

7100——1毫摩尔肌苷消光系数； 268.23——肌苷摩尔质量g/mol；m ——干成品质量，g。

2.2.6 允许误差平行测定结果绝对值之差不得超过0.2%，取算术平均值为分析结果，结果保留一位小数。

2.3 水法透光检测2.3.1 仪器722分光光度计。

版本/版次 E/0 文件类别作业指导书页 码 2/32.3.2 操作将样品混合均匀，准确称取样品0.5g（精确至0.0001g），加50mL 蒸馏水溶解， 摇匀，将仪器和比色皿校正，用1cm 比色皿，以蒸馏水做参比液，在分光光度计上，于430nm 下，测定样液的透光率。

2.3.3 允许误差平行测定结果绝对值之差不得超过0.1%T，取算术平均值为分析结果，结果保留一位小数。

CRRT治疗过程中各参数的设置

CRRT治疗过程中各参数的设置


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6、意志坚强的人能把世界放在手中像 泥块一 样任意 揉捏。 2020年 12月13 日星期 日上午 3时52 分26秒0 3:52:26 20.12.1 3
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7、最具挑战性的挑战莫过于提升自我 。。20 20年12 月上午 3时52 分20.12. 1303:5 2December 13, 2020
CRRT治疗参数的设置
可调节参数类型
·血流速 ·膜内预冲量 ·膜外预冲量
回血量
·透析液速率 ·置换液速率 ·抗凝剂
碳酸氢钠速率
葡萄糖酸钙速率 ·超滤量 ·温度
其它
类型
血流速· 根据费森尤斯官数据，血流速<150ml/min， 影响清除率。血流量与置换液比率<20%时， 可能导致滤器凝血。
· 常用模式建议流速在
合理设定加温囊温 方法 度
发展历程
稳定患者体温，达 目的 到治疗目的
注意
适当调整血液净化
治中滤的器2温0灌度1流可6器有凝效血防。
超滤量
小容量或者传统计量:20-35ml/kg.h 大剂量:>42.8ml/kg.h HVHF高容量血液滤过 高容量尚无明确定义： 1.朝阳医院SICU：>100.35ml/kg.h为高容 量 2.超滤量>60L/d
注意： 1.与置换液、血流速比值。 2.根据医嘱要求及病情和患者生命体征合 理选择超滤量。可先快后慢，达到治疗目 的。
膜内/膜外预冲量
预冲效果影响透析性能： 排尽微气泡，使膜充分湿化。 无抗凝剂治疗：1.强化预冲，增加预冲量和时间
2.先用肝素盐水预冲，后用生理盐水冲洗。
CVVHDF: 膜内预冲量：500ml 膜外预冲量：300ml
2020 3:52:26 AM03:52:262020/12/13
参数值

参数值

KT/V尿素清除指数的正常值范围：≥1.2---1.4
其中：K指的是Effective Urea Clearance（有效尿素清除率）
T指的是Effective Dialysis Time（有效透析时间）
V指的是Volume of Distribution of Urea（尿素容积分布）
费森尤斯4008S的联机清除率监测器（OCM）可根据性别、年龄、身高、体重，自动计算，并有图表模式可直观查看。

超滤率要计算吗？
CRRT超滤率设置是看你是否对这个病人脱水，
如脱水，预计每小时脱多少，我们对无尿的脱水大约每小时50-100ml/h，一般脱50就可以了，设置超滤率数值就是50加碳酸氢钠的速度（因为碳酸氢钠另管给的）；如不脱水就是碳酸氢钠的速度。

超滤率（ultrafiltration rate,UFR)：也称超滤系数（UF coefficient)或超滤指数（UF index), 即水分清除率，单位是ml/(mmHg.h),表示某一透析器每小时在跨膜压1mmHg时超滤液的毫升数。

一文读懂透析器性能参数超滤透析高通透析液mg

一文读懂透析器性能参数超滤透析高通透析液mg

一文读懂透析器性能参数超滤透析高通透析液mg展开全文溶质渗透示意图（来源于网络）熟悉的透析器，陌生的参数。

说明书上的各种参数究竟代表什么，你真的了解吗？今天，我们分享一篇文章，一起认识一下每天使用的透析器......01超滤系数（Kuf）--透水性能每 mmHg TMP下，每小时通过膜转运的液体的体积,该值因膜类型不同而异。

单位：ml/h/mmHgkuf与两个因素有关，膜面积A与膜的水力渗透性(Lh)膜的超滤系数(Kuf)是代表透析膜透水性的参数。

Kuf越大，液体透过膜材料阻力越小。

举个例子：当KUf为2.0时，每小时脱水1000ml，需要500 mmHg的TMP。

如果KUf是4.0，每小时脱水1000ml，只需要250mmHg的TMP。

超滤系数用来划分高、低通透析器：低通：< 8 ml/h/mmHg中通：8-20 ml/h/mmHg高通：> 20 ml/h/mmHg实际的Kuf可能与厂商标注值不同，说明书上的标注值是体外实验的数值。

在实际透析中，体内的Kuf通常会低5%-30%。

患者的红细胞压积、白蛋白水平等影响膜表面积和透水性的因素也会对Kuf有影响。

当血液在透析器中流动时，由于持续脱水，使HCT和血浆蛋白质含量沿透析器的长度增加。

随着透析的进展，膜的超滤系数下降。

02 尿素传质系数（KOA）--效率KOA为传质系数（Ko）和膜表面积（A）的乘积，单位为mL/min。

该参数是小分子(通常为尿素)清除率的最大值(即无限大血液和透析液流量的最大清除量) 。

KOA理论上应该为常数，但中空纤维透析器纤维束内部的液体流动对KOA曲线产生了影响，实际研究发现KOA与透析液流量与血流量有关。

KOA可以直接对比不同透析器的溶质清除效率。

不同透析器在一定条件下的实际KOA值KoA值用来评价透析器效率：低效透析器 KoA< 500mL/min中效透析器 KoA: 500--600mL/min高效透析器 KoA>600 mL/min高效透析器（KOA>600）与高通透析器(Kuf >20)，实际上是两个概念，尽管高通透析器通常高效。