不同产地当归中阿魏酸、藁本内酯及总多糖含量比较
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2007年12月第14卷第12期 中国中医药信息杂志 ・37・
・中药研究与开发・
不同产地当归中阿魏酸、藁本内酯
及总多 糖含量比较
赵奎君,钟萌,谢俊大
(首都医科大学附属北京友谊医院,北京100050)
摘要:目的通过测定不同产地当归中阿魏酸、藁本内酯和总多糖的含量,探讨产地对当归药材质量的影响及当
归道地性的科学依据。方法采用高效液相色谱法和比色法,测定甘肃、云南、四川、陕西等地所产当归中阿魏酸、藁
本内酯和总多糖的含量。结果在4个产地的当归中,阿魏酸、藁本内酯和总多糖的含量均以甘肃产当归为最高。结论
甘肃产当归质量较好,甘肃当归的道地性是有科学依据的。
关键词:当归;阿魏酸;藁本内酯;总多糖;高效液相色谱法
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1005—5304(2007)12 0037—02
Contlmts Com ̄n of Yerulle Ackl,Ug啊 and Total Pl 龃。cha—de lII眦
 ̄lnensisfromDifgerent] ̄gJOJ ZHAOKui-jun,ZHONGMeng,XIE Jun.da(BeijingFriendshipHospital,Capital
Medical University,Beifing 10005&ChinaJ Aba I:ObJective To study the affection of cultivating re舀ons to the quality of Radix Angeficae
Sinensis and the scientific basis of authenticity of Radix Angeficae Sinensis. mods The amounts of
ferulic acid,ligustilide and total polysaccharide in Radix Angeficae Sinensis cultivated in Gansu,Yunnan,
Sichuan,Shanxi provinces were determined by HPLC and UV spectrophotometry.R鞠I.1b Radix Angeficae
Sinensis cultivated in Gansu province possesses the highest contents of ferulic acid,ligustilide and total
polysaccharide among that from four regions.Co--on The quality of Radix Angeficae Sinensis cultivated
in Gansu province is better than that from other regions.It is reasonable to regard Radix Angeficae
Sinensis cultivated in Gansu province as authentic medical herbs.
Keyinlli'dlJ:Radix Angelicae Sinensis ̄ferulic acid;ligustilide;total polysaccharide;HPLC
当归为伞形科植物当归Angelica sinensis(01iv.)Die]S
的干燥根,具有补血活血、调经润肠功效…,主产于甘肃,云南、
陕西、四川等地亦有栽培。据考证,中国历代一直以现今甘肃
岷山山脉所产当归为道地品种,早在公元六世纪初,就已作为
贡品 。为探讨产地对当归药材质量的影响及当归道地性的科
学依据,我们对产于甘肃、云南、四川、陕西等地当归中阿魏
酸、藁本内酯及总多糖含量采用高效液相色谱法和比色法测定。
1仪器与材料
LC—lOAvp高效液相色谱仪(日本岛津),包括LC lOAvp泵、
DAD SPD—MlOAvp紫外~可见光检测器,C-R6A数据处理机;722G
型分光光度计(上海光学仪器厂)。阿魏酸对照品(美国Sigma;
St.Louis,M0);藁本内酯对照品由总后卫生部药检所提供;右
旋糖苷(dextran,分子量10000—20000,美国Sigma;St.Louis.
M0)。当归采自甘肃岷县、宕昌,云南丽江、中甸,四川宝兴、
南平,陕西龙县、平利。经过笔者鉴定为当归Angelica sinensi
(O1iv.)Diels。乙腈为色谱纯,其它试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1色谱条件
Nova—Pak Cl8色谱柱(150 lIl【Il×3.9 lIl【Il,4 lam),预柱Nova— Pak C s(20 T『lJTl×3.9 T『lJTl,4 pm)。流动相为乙腈一水(磷酸调至
pH 4.O),梯度洗脱,O~1O min,5%~35%乙腈;10 ̄30 min,35%~
70%乙腈;30 ̄40 min,7O%~5%乙腈。检测波长为284 nm,体
积流量为1 mL/min,柱温为室温,进样量2O uL。在上述色谱条
件下,阿魏酸、藁本内酯与样品中其它组分色谱峰可达基线分
离,相邻色谱峰分离度大于1.5。色谱图见图1。
2
A
l l
0 J0 2
30
t/mi“
注:A.混合对照品;B.当归;1.阿魏酸;2.藁本内酯
图1 当归HPLC色谱图
2.2对照品溶液的制备及对照品纯度检查
精密称取阿魏酸、藁本内酯对照品(五氧化二磷减压干燥
36 h)适量,加甲醇制成1
mg/mL阿魏酸和2 mg/mL藁本内酯的 维普资讯 http://www.cqvip.com ‘38‘ Chinese Journa1 of Informat ion on TCM Dec.2007 Vo1.14 No.12
混合对照品溶液,即得。将混合对照品溶液稀释10倍,备用。
吸取混合对照品稀释溶液和窄门试剂各20 I ,注入液相色谱
仪,记录色谱图。除去甲醇溶剂峰后,按峰面积!¨一化法计算各
对照品纯度,2种对照品质量分数均大1:99%。另精衔称取右旋
糖苷(1O5。C干燥至恒重)o.1 g,定容 lOO mL量瓶中,得0.1%
右旋糖苷储备液。
2.3供试品溶液的制备
取当归药粉约0.5 g,精南称定,置50 mL离心管中,加甲
醇20 mL,超声提取(功率120 w,频率40 k[tz)40 re:in,离心后
收集上清液,重复提取1次,合并两次提取液,回收甲醇至十,
精密加甲醇2 mL溶解,供阿魏酸、藁本内酯测定。
另精密称当归药粉5.0 g,加水40 mL,加热,沸腾后保持
40 min。煎煮2次,过滤,滤液离心,合并2次 清液,冰冻干燥,
即得。再精密称取该提取物0.5 g,加水2 mL溶解,再加95%
乙醇使其浓度达85%。静置24 h,抽滤。滤饼用70%E ̄醇沈涤5
次,然后溶解在60℃水中,2 000 r/min离心5 rain,收集上清
液,加水定容至100 mL容麓瓶中,供测定多糖用。
2.4线性关系考察
精密吸取阿魏酸、藁本内酯混合对照品稀释液2、4、8、
16、32、64 L,依次注入高效液相色 仪,按上述色谱条件测
定峰面积。以峰面积积分值为纵坐标,各对照品含量( g)为横
坐标,绘制标准曲线。另精密吸取朽旋糖甘储备液0.10、0.50、
1.O0、2.O0、3.O0、4.O0、5.O0 mL分别置100 mI 容鼍瓶中,
加水定容至刻度,摇匀,得各标准溶液系列。精密吸取各标准溶
液2.50 mL于10 mL具塞试管巾,加入5.O0 mL 0.2%葸酮一浓
硫酸显色剂,摇匀,置沸水浴中加热10 min,取出,放至室温,。-
625 nin波长处进行比色测定。另取2.5 mI 蒸馏水同样操作,
作空白对照。各对照品的 归方程、相关系数及线性范围(mg/mL)
如下:阿魏酸:Y=2×10 肿0.036 2,0.9994,0.1~1.6;藁本
内酯:Y=4×10 0.013 2,0.999 6,0.8~12.8;右旋糖苷:
J,=6.O1×10 +4.71×10 ,0.999 1,0.O1~0.11。
2.5精密度试验
分别精密吸取阿魏酸、藁本内酯对照品稀释液20 uL,重
复进样6次,测定峰面积。另取当归总多糖测定样品液2.50 mE
按照样品多糖含量测定方法测定吸收值, 复测定5次。结果
阿魏酸、藁本内酯和多糖的精密度RSD分别为1.36%、1.34%、
2.21%。 2.6重现性试验 取当归样品0.5 g,平行制备供试品溶液5份,进样,测定
阿魏酸、藁本内酯峰面积积分值。另取当归样品5.0 g,平行
制备供测定多糖用的供试品溶液5份,按“样品含量测定”项
下多糖测定方法操作,测定多糖含量。各对照品重现性RsD为:
阿魏酸0.77%,藁本内酯1.20%,多糖2.81%。
2.7回收率测定
精密称取2批已知含量的当归样品各5份,分别供测定多
糖及阿魏酸、藁本内酯的回收率。其中供测多糖的样品每份
5.0 g,测阿魏酸、藁本内酯的样品每份0.5 g。2批样品分别
加入右旋糖苷对照品5.0 mg,阿魏酸、藁本内酯对照品各1.0 mg 制备供试品溶液,按“样品含量测定”项下各对照品测定法操
作,测定各对照品含量,计算回收率。各对照品平均回收率(%)
分别为:右旋糖苷97.12,阿魏酸97.83,藁本内酯97.82。其
RsD分别为2.39%、1.23%、2.13%。
2.8稳定性试验
取各供试品溶液,分别于配制后0.5、1、1.5、2、3、4、
6、8、10、12 h,按“样品含量测定”项下各对照品含量测定
法操作,测定各对照品含量。阿魏酸、藁本内酯含量在12 h
内基本稳定,多糖在2 h内稳定,其中阿魏酸、藁本内酯多糖
RsD分别为0.82%、0.50%、2.12%。
2.9样品测定
阿魏酸、桑本内酯的测定:分别精密吸取对照品和供试
品溶液,注入液相色谱仪,测定峰面积积分值,按外标法计算,
即得。多糖测定:精密量取供试品溶液2.50 mL,按多糖标准
曲线项下做比色测定,计算样品中多糖含量。含量测定结果见
表1 表1 不同产地当归中阿魏酸、藁本内酯及总多糖含量测定
结果(mg/g原药材,n=5)
注:与云南、旧川I、陕两产当归相比, 尸<0.o1。
3讨论 当归中的有效成分主要是阿魏酸、藁本内酯及多糖类。其
中阿魏酸具有抑制m小板凝集的作用,藁本内酯能抑制子宫平
滑肌,多糖类可促进造血功能。这些成分通常作为当归质量优
劣的评价指标 。因此,本实验通过测定这些成分的含量来评
价不同产地当归的品质。结果表明:在甘肃、云南、四川、陕西
4个省区所产的当!J_j中,甘肃产当归中阿魏酸、藁本内酯和总
多糖含量明显高1=其它产区,具有显著性差异。因此,甘肃当归
质垃的确要优于其它产区的当归,其道地性有一定的科学依据。
参考文献:
[1]国家药典委员会. }=l华人民共和固药典(…部)[s].北京:化学工业出
版社,2005.71. [2]胡世林.中国道地药材[M].哈尔滨:黑龙江科技出版社,1989.461.