下载文档原格式
第七讲生物碱分析生物碱分布■含生物碱较多的科有粗榧科、毛莨科、小檗科、防已科、罂含生物碱较多的科有粗榧科、毛莨科、小檗科、防已科、罂粟科、豆科、马钱科、夹竹桃科、茄科、菊科、百合科和石蒜粟科、豆科、马钱科、夹竹桃科、茄科、菊科、百合科和石蒜科等。
有些科几乎全科植物均含生物碱，如罂粟科。
同一科属或亲缘关系相近的植物中往往含有相同或相似的生物碱，如茄或亲缘关系相近的植物中往往含有相同或相似的生物碱，如茄科的颠茄属(Atropa Atropa)、曼陀罗属(Datura Datura)、莨菪属( Hyoscyamus Hyoscyamus)、东莨菪属(Scopolia Scopolia)等属的植物都含有莨菪碱(hyoscyamine hyoscyamine)。
■同一种生物碱也可分布于不同科中，如在毛莨科、小檗科、防已科与芸香科的一些植物中都有小檗碱。
已科与芸香科的一些植物中都有小檗碱。
■生物碱可存在于植物体内各个器官中，同种植物中所含生物碱常不止一种，有的可含数种至数十种，如罂粟约含25种生物碱，长春花中含70余种生物碱。
■生物碱在植物体内各部分中分布是不相等的，往往集中于某一器官或某一部分中。
如乌头（根）、黄连（根茎）、黄柏（树皮）、颠茄（叶）、麻黄（地上茎）、洋地黄（花）、吴茱萸皮）、颠茄（叶）、麻黄（地上茎）、洋地黄（花）、吴茱萸（果实）、马钱子（种子）等。
在同一植物的不同部分，不但生物碱的含量有差异，而且生物碱的种类也可能不同。
特点■生药中生物碱的含量大多低于1%，有少数含量特别低，如长春花中长春新碱含量为百万分之一，美登木中美登木素含量为千万分之一；也有些含量特别高，如黄连中小檗碱含量可达9%、金鸡纳皮中奎宁含量高达15%。
在植物体内，生物碱一般与有机酸（苹果酸、枸橼酸、酒石酸等酸和鞣酸等）结合成盐类，呈溶解状态存在于液泡中，有些是与糖结合成甙而存在，更有少数生物碱是呈游离状存在的，如咖啡碱(caffeine)与秋水仙碱(colchicine)等。
荷叶提取物最佳工艺的研究摘要：荷叶提取物有较好的调节血脂功效，有药理[1]研究表明其主要活性组分为荷叶生物碱、黄酮类化合物。
并且目前荷叶生物碱[2]、黄酮的需求量不断增加，但是缺少方便有效的分离分析荷叶生物碱和黄酮的方法[3]，限制了对荷叶资源进一步的开发和利用。
本实验通过对荷叶生物碱、黄酮的提取、分离纯化，寻找荷叶提取物的最佳工艺，以期为荷叶提取物的深入研究和合理开发利用提供参考。
关键词：荷叶提取物;黄酮;生物碱;分离纯化Abstract: Better regulation of blood lipid effect of the extract from Lotus leaf, pharmacological research has shown that group into the alkaloid from Lotus leaf, its main activity of flavonoid compounds. And Lotus Leaf alkaloids, flavonoids in demand now increasing, but the lack of convenient and effective method of separation and analysis of alkaloids and flavonoids in Lotus leaf, limited the further development and utilization of resources in Lotus leaf. This experiment by alkaloids from Lotus leaves, extraction, isolation and purification of the flavonoids, finding best technology of Lotus leaf extract, for in-depth research and rational development and utilization of Lotus leaf extract of reference.Key words: Lotus leaf extract; flavonoids; alkaloids; isolation and purification1.前言荷叶属睡莲科植物(Nelumbo nuxifera Gaerth)的叶片，作为一种天然、安全有效的保健食品和药物[4]，越来越受到人们的青睐。
实训二十一华山参片总生物碱的含量测定一、实训目的1.掌握紫外-可见分光光度法（对照品比较法）含量测定的一般操作步骤和技能。
2.理解紫外-可见分光光度法（对照品比较法）含量测定原理二、测定依据1.华山参片药品标准 [《中国药典》2005年版（一部）正文部分 440页]本品为华山参浸膏片【含量测定】对照品溶液的制备精密称取在120℃干燥至恒重的硫酸阿托品，加水制成每1ml相当于含莨菪碱7μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备取本品40片，除去糖衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于12片的重量），置具塞锥形瓶内，精密加入枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）25ml，振摇5分钟，放置过夜，用干燥滤纸滤过，取续滤液，即得。
测定法精密量取供试品溶液与对照品溶液各2ml，分别置分液漏斗中，各精密加枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）10ml，再精密加入用上述缓冲液配制的0.04%溴甲酚绿溶液2ml，摇匀，用10ml三氯甲烷振摇提取5分钟，待溶液完全分层后，分取三氯甲烷液，用三氯甲烷湿润的滤纸滤入25ml量瓶中，再用三氯甲烷提取3次，每次5ml，依次滤入量瓶中，并用三氯甲烷洗涤滤纸，滤入量瓶中，加三氯甲烷至刻度。
照紫外-分光光度法（附录ⅤA）分别在415nm的波长处测定吸光度，计算，即得。
本品含生物碱以莨菪碱（C17H23NO3）计，应为标示量的80.0%～120.0％。
【规格】0.12mg2.紫外-可见分光光度法[《中国药典》2005年版（一部）附录Ⅴ A]三、测定原理1.本品有效成分为莨菪类生物碱，主要有莨菪碱、东莨菪碱、山莨菪碱和东莨菪内酯等（图5-36）。
药品标准以莨菪碱为指标，测定总生物碱的含量，以此控制药品质量的优劣。
N OCOCHCH 2OHR 1R 2CH 3图5-36 主要莨菪类生物碱的结构式莨菪碱（R 1,R 2=H ） 东莨菪碱（C 6-O-C 7 R 1,R 2=H ） 山莨菪碱（R 1=OH,R 2=H ） 2.莨菪类生物碱为无色结晶，具有中强碱性，溶于酸水、甲醇、乙醇、三氯甲烷等，故本实验采用枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液（pH4.0）提取总生物碱。
乌头碱类生物碱的测定
乌头碱是一种含氮的生物碱，主要存在于乌头属植物中，如乌头、白附子等。
测定乌头碱的方法有多种，常用的方法有以下几种：1. 酸碱滴定法：将待测样品加入酸性介质中，使乌头碱转变为酸性溶液，再加入酸性碘化钾溶液，溶液呈现深蓝色，用硫酸滴定至溶液颜色变浅为止，根据滴定所需的硫酸量计算乌头碱的含量。
2. 气相色谱法：将待测样品经过提取和洗涤，得到乌头碱的纯化样品。
然后将样品注入气相色谱仪中，通过样品在色谱柱中的分离和检测，测定乌头碱的含量。
3. 高效液相色谱法：将待测样品经过提取和洗涤，得到乌头碱的纯化样品。
然后将样品注入高效液相色谱仪中，通过样品在色谱柱中的分离和检测，测定乌头碱的含量。
4. 紫外分光光度法：将待测样品溶解于酸性溶液中，然后使用紫外分光光度计测定样品溶液的吸收光谱，根据乌头碱在特定波长下的吸光度值，计算乌头碱的含量。
以上是常用的几种乌头碱的测定方法，具体选择哪种方法可以根据实际情况和实验要求来确定。
苦参碱的含量测定方法苦参碱（Matrine）是一种从苦参中提取得到的天然生物碱，具有广泛的药理活性，被广泛用于药物研发和临床治疗。
为了保证苦参碱的质量和安全性，准确测定其含量非常重要。
下面将介绍十种常用的苦参碱含量测定方法，并详细描述其原理和操作步骤。
这些方法包括二氧化硅柱层析法、高效液相色谱法、气相色谱法、红外光谱法、紫外分光光度法、差示扫描量热法、核磁共振法、质谱法、比色法和比重法。
1. 二氧化硅柱层析法原理：利用苦参碱与二氧化硅柱的亲和作用差异，通过洗脱移除非目标化合物，然后定量检测苦参碱峰。
操作步骤：1）样品准备：采用适当的溶剂将苦参提取物溶解，过滤除去杂质。
2）装柱：将提取液加入装有二氧化硅的柱子，柱子上部用砂芯填塞。
3）洗脱：用适当的溶剂冲洗柱子，将非目标化合物洗脱。
4）检测：用合适的检测方法检测苦参碱峰进行定量。
2. 高效液相色谱法原理：利用样品在高效液相色谱柱中的分离性，通过检测样品峰面积或峰高来定量苦参碱。
操作步骤：1）样品制备：将苦参提取物溶解并过滤除去杂质。
2）色谱条件：选择适当的色谱柱、流动相和检测波长，保证样品分离效果和检测信号。
3）进样：用合适的进样器将样品注入色谱柱。
4）检测：采用紫外检测器检测样品峰面积或峰高，进而定量苦参碱。
3. 气相色谱法原理：将样品中的苦参碱转化为易于挥发的衍生化物，然后通过气相色谱柱的分离、检测来定量苦参碱。
操作步骤：1）样品制备：将苦参提取物溶解并经过适当的衍生化反应。
2）色谱条件：选择合适的气相色谱柱、进样方式和检测条件，确保样品分离和检测的可行性。
3）进样：将衍生化后的样品注入气相色谱柱。
4）检测：采用化学检测器或质谱检测器检测苦参碱的峰面积或峰高。
4. 红外光谱法原理：苦参碱的分子结构中含有特定的红外吸收峰，通过红外光谱仪测定样品中的红外吸收峰强度来定量苦参碱。
操作步骤：1）样品制备：将苦参提取物溶解并制备适当的样品片。
2）光谱扫描：将样品片放入红外光谱仪中，进行光谱扫描，记录样品的红外吸收峰。
款冬花炮制前后总生物碱含量测定王明芳1，张朔生*1（山西中医学院制药与食品工程学院，山西，太原，030619）摘要目的：制订款冬花经蜜炙和甘草炙前后总生物碱含量的测定方法。
方法：以氧化苦参碱为对照品，采用酸性染料比色法，在417.5nm波长处测定款冬花中总生物碱含量。
结果：氧化苦参碱在6.75-135μg范围内，吸光度值与对照品溶液浓度呈良好的线性关系，回归方程为：y=85.228x-0.0401 r=0.9995。
结论：经方法学考察，该方法简便、稳定、准确，可用于款冬花中总生物碱的测定。
不同炮制品规格的款冬花总生物碱含量相比较有显著变化，蜜炙品的总生物碱含量最高，生品次之，甘草炙品总生物碱含量最少。
关键词：酸性染料比色法；款冬花；总生物碱；蜜炙；甘草炙Determination of Total Alkaloids Content in Tussilago farfaraBefore and after ProcessingStudent:Wang Ming-fang Guiding teacher:Zhang Shuo-shengShanxi University of Traditional Chinese medicineAbstract Objective: To determine the total alkaloids content in Tussilago farfara before and after processing with liquorrice juice and honey. Methods: Using the oxymatrine as standard,acid dye colorimetry was used to determine the total alkaloids content in Tussilago farfara at the wavelength of 417.5 nm. Results:The concentration of oxymatrine showed good linearity in the range of 6.75-135 μg ,its regression equation was y=85.228x-0.0401 ,r=0.9995. Conclusion: The method through the methodology inspection is simple,reliable,stable and can be used for determination of the total alkaloids in Tussilago farfara.The total alkaloids is significantly different in Tussilago farfara of different processed. The total alkaloids is highest in Tussilago farfara after honey-fried processing. The total alkaloids is medium in Tussilago farfara before processing. The total alkaloids is least in Tussilago farfara after liquorice juice processing.Key words acid dye colorimetry; Tussilago farfara; total alkaloids; honey-fried processing; liquorice processing1[通信作者] 张朔生，男，教授，硕士生导师，山西中医学院制药与食品工程学院院长，研究方向为中药炮制现代研究及创新药物开发，Tel:（0351）3179909，E-mail: zhangshuosheng@[作者简介] 王明芳，女，硕士研究生，研究方向为中药炮制现代研究，E-mail: 785934268@款冬花为菊科植物款冬（Tussilago farfara L.）的干燥花蕾，性温、味辛，具有止咳化痰、润肺下气之功效，临床上主要用于喘咳痰多、新久咳嗽、劳嗽咳血等症[1]，为止咳平喘方剂中的常用中药。
2021年 第1期 广 东 化 工 第48卷 总第435期 · 165 ·柱色谱-紫外分光光度法 测定关黄柏中总生物碱的含量蓝松(宜春学院化学与生物工程学院，江西 宜春 336000)[摘 要]目的：采用柱色谱-紫外分光光度法测定关黄柏中总生物碱的含量，为关黄柏药材的全面质量控制提供一定依据。
方法：用柱色谱-紫外分光光度法，以盐酸小檗碱为对照品，采用盐酸-乙醇(1︰100)浸渍后超声提取，经过氧化铝柱分离纯化，在265 nm 处测定关黄柏中总生物碱的含量。
结果：盐酸小檗碱浓度在2.36~11.80 μg/mL 时具有良好的线性关系，平均回收率为98.80 %，重复性试验RSD 为2.8 %(n=5)。
结论：柱色谱-紫外分光光度法测定关黄柏中总生物碱含量，方法简便，重现性好，可以作为关黄柏药材的质量控制方法之一。
[关键词]关黄柏；柱色谱-紫外分光光度法；盐酸小檗碱[中图分类号]O65 [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2021)01-0165-02Content Determination of Total Alkaloids in Phellodendron Amurense RuprLan Song(College of Chemistry and Biologineering of Yichun University, Yichun 336000, China)Abstract: Objective: To establish column chromatography-UV spectrophotometry for determination of total alkaloids (berberine hydrochloride) in Phellodendron amurense Rupr., to provide a scientific basis for the quality control of Radix Phellodendron amurense Rupr. Methods: The sample was extracted with HCl-C 2H 5OH(1︰100) by cold after ultrasonic extraction and total alkaloids were separated on alumina column. Using berberine hydrochloride as control, the content of total alkaloids were determined by UV-spectrophotometry at detection wavelength of 265 nm. Results: The calibration curves for berberine hydrochloride was linear in the range of 2.36~11.80μg/mL. The average recovery was 98.80 %, and the RSD was 2.8 % (n=5). Conclusion: The method is rapid, accurate and reliable, which can be used for the quality control of Phellodendron amurense Rupr.Keywords: Phellodendron amurense Rupr.；column chromatography-uv spectrophotometry ；berberine hydrochloride ；content determination1 前言关黄柏为芸香科植物黄檗Phellodendron amurense Rupr.的干燥树皮，具有清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮的功效[1]。
