1100临床肺科杂志2021年7月 第26卷第7期肺腺癌免疫组化标记物的临床应用及其与基因突变关系的研究进展杨翠林1自宝莉1李萍1周开华2肺癌是最常见诊断和导致死亡的恶性肿瘤之 —⑴!非小细胞肺癌(noncmUl cell lung ccrcinomu, NSCLC)约占所有肺癌的80% -85% ,腺癌(约占 40% -50%)和鳞癌(约占20% -30%)是非小细胞 肺癌的主要亚型［2-3］o在以前由于治疗的局限性， 通常不需要对非小细胞肺癌进一步分类，因此在小 样本中很少区分腺癌和鳞癌,随着靶向治疗和免疫 治疗的发展，不仅改变了治疗策略，而且强调将 NSCLC进一步分类为特定亚型的重要性［4-5］o在 临床实践中，超过60%的肺癌患者就诊时已是晚期 或出现远处转移，无法通过手术切除进行形态学诊 断,诊断通常仅限于小活检标本或细胞系标本，而小 活检标本在形态学上往往不足以确定组织学类型! 在上述背景下，结合2015年世界卫生组织更新的肺 癌亚分类指南，建议使用免疫组化法进一步对非小 细胞肺癌精确分类;TTF-1、NapsFA、CK7和CK5/6 % P63、P40分别为肺腺癌和鳞癌标记物［3］ o本文就肺 腺癌免疫组化标记物的临床应用及其与基因突变关 系作一综述。一、TTF-1的生物学特征与功能TTF-1 ( Thyroid transc/ption factor-1)是 NKx2 家 族的成员之一，官方全名为(NK-2 homeobvx 1 , NKX2-1)，是一种含有同源结构域的转录因子。人 类TTFG由位于14号染色体上的单基因编码,cD- NA克隆实验表明,TTFG由三个外显子和两个内含 子组成，多个转录起始点和选择性剪接产生5,末端 具有异质性的mRNAs,3,端有一个较长的非翻译 区［6］o牛、大鼠、小鼠和人类的TTFG由371 - 378 个氨基酸组成,分子量在38 -42kDu之间，它们的 氨基酸序列具有98%相似性,60个氨基酸同源结构 域完全保持不变［7］，表明TTFG具有高度的序列保doi: 10. 3969/j. imn. 1009 - 6663. 2021.07.029基金项目：北京医卫健康公益基金会“医学科学研究基金"(No.B20186CS)作者单位：1 650000云南昆明，昆明医科大学附属甘美医院2.650000云南昆明，昆明市第一人民医院呼吸科通信作者：周开华,E-mail ：zkh51033528@ sina. com 守。TTFG在胚胎发生过程中调节甲状腺、肺和间 脑的基因表达，研究表明,敲除小鼠中的TTFG基因 会导致幼崽无法同时出现肺实质和甲状腺，并且在 前脑中具有广泛的缺陷［8］。肺组织中，TTFG控制 对肺稳定和肺宿主防御至关重要的表面活性蛋白的 表达，通过直接与SP-A、SP-B、SP-C、Clara细胞分泌 蛋白"CCSP)和T1的启动子直接结合来调节表面活 性剂蛋白的转录，从而确定了肺的谱系特异性发 育⑼。、 N3psinA 的生物 特征 功Napsin A(novel aspaaiv proteinasa A) 是一种天 冬氨酸蛋白酶，基因位于染色体19q13.3上，编码 45 kDu的单链蛋白和420个氨基酸,其转录产物长 度为1 263 bp,Napsin A基因的一级结构由信号肽、 前肽区、功能区和C末端四部分组成［10］。Giovanna 等+11〕研究表明，早在妊娠第12周Napsin A就在胎 儿肺腺结构中表达，到妊娠第30周时表达减少，此 时 Napsin A 的 相 , Napsin A 的表达在病理条件下增加,包括炎症性疾病和肺发育 不全,这大概是为了纠正功能性肺衰竭。Napsin A 广泛分布于肺泡巨噬细胞以及n型肺泡表面上皮细 胞,负责表面活性剂蛋白B的N端裂解事件，其蛋 白水解活性对肺表面活性蛋白的成熟具有诱导作 用,以此来维持肺的形态及功能［12］ !三、 CK7的生物学特征与功能CK7(细胞角质蛋白7)的相对分子质量为54 KDu,主要在腺上皮和移行上皮中表达，研究表明, 几乎百分之百的肺腺癌表达CK7,对肺腺癌的诊断 具有极高的敏感性，但其特异性较差，大约30% + 60%的肺鳞癌也可表达CK7［13］o此外，CK7在乳 腺、 、 腺、 、 皮 和 位 生的腺中 , , 在 腺 和 别 时,需联合其他特异度较高的抗体如TTF-1、Napsin A 共同应用。CK7的表达在肺癌的预后、与肺癌基因 突变的相关性尚无研究，它的作用主要在肿瘤的诊 断方面。四、 TTFG与NapsinA
文章编号:1007-8738(2002)06-673-03甘露糖受体在免疫调节中的作用
徐 明综述 郭 宁审校(军事医学科学院基础医学研究所,北京100850)
收稿日期:2002-06-10; 修回日期:2002-08-10作者简介:徐 明(1972-),男,安徽芜湖人,硕士生.北京市太平路27号,Tel.(010)66931327Email:ningguo@nic.bmi,关键词:甘露糖受体;免疫调节中图分类号:R392 文献标识码:A
甘露糖受体(MR)属于多凝集素(multilectin)受体,可识别细胞表面或病原体细胞壁上的多种糖分子,通过参与受体介导的内吞作用(receptor2mediatedendocytosis)和吞噬作用(phagocytosis),来维持内环境的稳定,并将先天性免疫与获得性免疫联系起来,组成机体的一种免疫防御系统。本文对近几年来甘露糖受体的结构和功能等方面的研究进行综述,主要介绍甘露糖受体在维持机体组织内环境稳定、参与非特异性免疫防御、诱导特异性免疫应答和调节免疫反应等方面的重要生物学作用。
1 MR的分布和结构特征1.1 MR的组织分布 MR最早发现于大鼠肝枯否细胞,后来发现其广泛分布于脾红髓、淋巴结副皮质及胸腺皮质等特定组织的巨噬细胞(Mφ)。近来在未成熟的树突状细胞(DC)、一些内皮细胞亚群、气管平滑肌细胞、视网膜上皮细胞、肾血管系膜细胞和Kaposi肉瘤细胞等细胞内,也发现MR的表达。由外周血CD14+单核细胞分化的DC和脐血CD34+造血祖细胞在GM2CSF和IL24刺激下分化的DC中,亦可检测到MR的表达。新分离的鼠郎格汉斯细胞(LC),可摄取甘露糖化牛血清白蛋白,并且其吞噬作用在甘露聚糖存在下受到抑制,但鼠的LC并不表达MR,而在新分离的人LC中却能检测到MR的表达[1]。Linehan等[2]用原位杂交和免疫细胞化学法,检测正常成年鼠MR的表达,认为MR仅表达于一些巨噬细胞和内皮细胞亚群,LC、DC以及脾和淋巴结中具有甘露糖配体结合活性的细胞所表达的是MR样受体,免疫后DC是否表达MR?还需进一步实验证实。1.2 MR的结构特征 MR是C2型凝集素家族成员,即与碳水化合物的结合需要Ca2+的参与。MR也是模式识别受体(patternrecognitionreceptor,PRR),即Mφ可依靠该受体来识别病原体的分子模式。最初在内质网合成的MR为无活性的前体,自高尔基体分泌后才成为具有生物学活性的分子。MR为相对分子质量(Mr)180000的Ⅰ型跨膜蛋白,含有5个结构域[3]:即氨基端富含半胱氨酸区(cysteine2richregion,CR)、Ⅱ型纤连蛋白重复区(FNⅡ)、8个连续的凝集素样碳水化合物识别结构域(CRD)、跨膜区和胞质内羧基端结构域。通过比较人与鼠MR的氨基酸序列,发现两者CR的同源性为86%,FNⅡ结构域的同源性为93%,CRD的同源性在76%～92%之间,其中CRD4的同源性最高,8个CRD之间的同源性大致为30%。1.3 MR的结合特性 研究发现[4],MR是通过CRD结合糖分子,所结合的糖分子有甘露糖、岩藻糖和N2乙酰氨基葡萄糖等。MR的CRD4和CRD5含有结合配体和钙离子所必需的残基。当CRD中仅表达CRD4时,CRD4毫摩尔数量级可结合D2甘露糖和L2岩藻糖。MR的每个CRD均可结合单糖分子,CRD聚集则可高亲和力地结合体内的多价分枝配体。MR与含分枝链的甘露糖寡糖的结合亲和力远高于线形寡糖或单糖。另外,MR的CRD428与天然糖蛋白配体的结合亲和力接近于完整的MR。近来研究发现,MR中的不同结构域具有多种不同识别模式。例如,Fiete等[5]发现MR的表达具有组织异质性。在大鼠肝脏中观察到一种受体,可识别和内吞Asn位连有末端为SO4242N2乙酰氨基半乳糖、42N2乙酰氨基葡萄糖、22甘露糖(S4GGnM)寡糖的黄体生成素,但来源于肺的MR不能识别S4GGnM。通过MR的缺失突变,证实与SO4242N2乙酰氨基半乳糖的结合位点位于CR结构域。结合硫化糖蛋白的受体在结构和抗原特性上类似MR,推测它与MR为同一cDNA模板翻译,但翻译后修饰不同,从而可改变CR的结合特性。Roseman等[6]认为,肝脏的MR形成二聚体后,CR才具有结合硫化N2乙酰氨基半乳糖的生物学活性。最近Liu等[7,8]通过对结合有硫化糖蛋白的CR晶体结构进行分析认为,CR是利用氢键与硫化糖蛋白相结合,并且结合的亲和力相对较高,Kd值在0.1～1mmol/L之间。在与不同配体,如32SO42Lewis(x),32SO42Lewis(a)和62SO42N2乙酰氨基葡萄糖等结合时,CR不发生构象的改变。
文章编号：１００７—４２８７（２０１３）１０—１８８０—０２ Ｃｈｉｎ Ｊ Ｌａｂ Ｄｉａｇｎ，Ｏｃｔｏｂｅｒ，２０１３，Ｖｏｌ １７，Ｎｏ．１０ 胰岛抗体鉴别诊断自身免疫性糖尿病的临床意义 张利方，刘 莹，石莉萍，龚 勋 （广州军区武汉总医院检验科，湖北武汉４３００７０） 随着糖尿病的研究逐渐深入，胰岛细胞抗体阳 性的检出率不断上升。在部分２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ） 患者的病程中，早期胰岛Ｊ３细胞功能尚存，但随着病 程的发展功能会缓慢衰竭口 ］。因此，实验室检测 胰岛细胞抗体是判断胰岛Ｊ３细胞功能免疫损伤及早 期发现Ｔ２ＤＭ患者中成人隐匿性自身免疫糖尿病 （ＬＡＤＡ）的重要手段。本文通过测定Ｔ２ＤＭ患者 血清谷氨酸脱羧酶抗体（ＧＡＤ－Ａｂ）和酪氨酸磷酸酶 抗体（ＩＡ２一Ａｂ），分析其胰岛自身抗体实验诊断对 Ｉ ＡＤＡ早期预测及临床应用意义。 １材料与方法 １．１研究对象 我院门诊及糖尿病专科确诊为Ｔ２ＤＭ患者９８６ 例，符合中华医学会糖尿病分会建议的诊断标准 ］， 其中男性７８１例，女性２０５例，平均年龄５５岁（２４— ６５岁），另选８０例体检健康，糖耐量正常者为对照， 其中男性４５例，女性３５例，平均年龄４８岁（３０—５５ 岁），排除糖尿病即往病史，家族史，严重肝、肾功能 损伤及其它自身免疫性疾病病史。 １．２实验方法 所有研究对象均记录年龄、病程、测量身高、体 重，计算体质指数（ＢＭＩ）一体重／身高２（Ｋｇ／ｍ ）； 于清晨空腹和餐后２ ｈ采静脉血４ ｍＬ，分离血清， 置一２０。Ｃ保存待检，用酶联免疫吸附法（ＥＬＩｓＡ）测 定ＧＡ【）－Ａｂ和ＩＡ２一Ａｂ，试齐４盒购置德国ＥＵＲＯ— ＩＭＭＵＮ公司，操作严格按试剂说明书进行，其评判 结果均为≥１０ ＩＵ／ｍｌ为阳性。电化学发光法， Ｒｏｃｈｅ公司Ｃｏｂａｓ Ｅ６０１全自动免疫仪器测定血清 胰岛素、Ｃ肽，试剂由罗氏公司提供，根据标准自动 报告结果。 １．３统计学处理 计量资料结果用（ ±ｓ）表示，各组间均数比较 采用ｔ检验，率的比较用 检验，采用ＳＰＳＳ１３．０软 件处理数据，Ｐ＜Ｏ．０５为差异有统计学意义。 ２ 结果 ２．１胰岛自身抗体的检出率 临床诊断为Ｔ２ＤＭ患者中６８例（６．８９ ）呈现 ＧＡＤ—Ａｂ阳性，１１例（１．１２ ）ＩＡ２一Ａｂ阳性，另有 ２２例（２．２３￣／６０）合并阳性。在临床诊断为Ｔ２ＤＭ的 ９８６例患者中有１０１例呈现一种以上的抗体阳性， 占到Ｔ２ＤＭ检出率的１Ｏ．２４ （１０１／９８６），抗体阳性 组与对照组比较差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。 ２．２胰岛 细胞功能比较 将Ｔ２ＤＭ患者按ＧＡＩ）－Ａｂ和ＩＡ２一Ａｂ单独阳 性，ＧＡＤ－Ａｂ合并ＩＡ２一Ａｂ阳性和ＧＡＩ）＿Ａｂ与ＩＡ２一 Ａｂ同时阴性分为４组进行空腹、餐后２ ｈ胰岛素， 空腹、餐后２ｈＣ肽进行比较。见表１。ＧＡ【）＿Ａｂ和 ＩＡ２一Ａｂ同时阳性组患者中胰岛素及Ｃ肽分泌水平 与ＧＡ【）＿Ａｂ和ＩＡ２一Ａｂ单独阳性组分泌水平数值比 较有显著下降，两组差别均有统计学意义（Ｐ＜０． ０１）。ＧＡＤ－Ａｂ和ＩＡ２一Ａｂ同时阴性组患者胰岛素 和ｃ肽分泌水平较正常对照组升高，两组比较同样 有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。 表１胰岛细胞自身抗体功能比较 注：ＦＩＮＳ：空腹胰岛素；２ｂＩＮＳ：餐后２ ｈ胰岛素；ＦＣＰ：空腹Ｃ肽；２ｈＣＰ：餐后２ｈＣ肽；与ＧＡＩＮＡｂ和ＩＡ２一Ａｈ单独阳性组比较＊Ｐ＜０．０１，
生物免疫学中的免疫应答与调节
生物免疫学是生物学中的一个重要分支，研究的是机体对抗外来病原体的免疫系统。免疫系统是人类和其他生物的重要防御机制，能够识别、杀灭病原微生物，保护机体不受感染。免疫系统主要分为先天免疫和获得性免疫两种类型，其中获得性免疫包括细胞免疫和体液免疫，并涉及到免疫应答和免疫调节两个重要过程。
免疫应答是机体对抗外来抗原的一种反应，包括细胞免疫和体液免疫两种反应方式。细胞免疫是指通过吞噬和杀死病原微生物的免疫反应，其中细胞因子和白细胞介导了这一过程，并能够分化出效应细胞和记忆细胞。体液免疫则是指体液内的抗体对抗外来抗原的反应，其中B细胞和T细胞参与了这一过程。免疫应答是人体抵御病原微生物攻击的最重要的过程之一，能够针对特定的病原体发起有效的免疫反应。
免疫调节是机体在免疫应答过程中对免疫反应进行调节和控制的过程，能够平衡机体免疫系统，维护机体健康。免疫调节包括正向调节和负向调节两种方式。正向调节是指免疫细胞因子、抗原呈递和共刺激因子在免疫应答中激活T和B淋巴细胞的过程，促进免疫反应的发生和运行。负向调节则是指免疫细胞因子和共刺激因子在免疫反应中激发抑制性T细胞的产生和活动，以防止过度免疫反应造成机体的损害。
免疫应答和调节的正常运转是机体对抗感染的保障，但当机体免疫系统出现异常时，就会导致免疫系统失衡，出现疾病。例如，自身免疫性疾病就是因为机体免疫系统攻击自身组织而导致的疾病，如类风湿关节炎、红斑狼疮等。而某些疾病则是由于机体免疫系统过度激活，导致异常免疫反应，如过敏和哮喘等。
为了帮助机体维持正常的免疫反应和调节，科学家们研究了许多免疫调节剂和免疫疗法，包括细胞因子、抗体和细胞免疫疗法等。其中，免疫检测技术也是免疫学研究中的一项重要工具，能够帮助医生识别和治疗病人的免疫功能异常，并指导治疗方案的制定。
总之，生物免疫学研究的是机体对抗外来病原体的免疫系统，免疫应答和免疫调节是两个重要过程。科学家们不断探索这些过程的机制和调控方法，希望能够为人类的健康和医学治疗提供更多的思路和选择。
