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眼针对IBS模型大鼠结肠组织5_HT含量及转化率的影响_宋士一

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眼针对IBS模型大鼠结肠组织5－HT含量及转化率的影响宋士一，王德山，王艳杰，李丹，李任峰（辽宁中医药大学基础医学院，辽宁沈阳110032）

摘要：目的：研究肠易激综合征（Irritablebowelsyndrome，IBS）模型大鼠结肠组织5－羟色胺（5－hydroxytryptamine，5－HT）含量、5－HT转化率以及眼针治疗的影响。方法：实验动物分成对照组、IBS模型组、眼针组，采用束缚刺激与应

激刺激相结合的方法建立IBS动物模型并进行眼针治疗。各组采用ELISA法检测结肠组织5－HT和5－羟吲哚乙酸（5－hydroxyindoleaceticacid，5－HIAA）的表达，采用RT－PCR法检测结肠组织5－HT重摄取转运体（serotoninreuptaketransporter，SERT）、色氨酸羟化酶1（Tryptophanhydroxylase1，TPH1）的mRNA表达。结果：与对照组比较，IBS模型组5－HT、5－HIAA水平显著升高，5－HT转化率也显著升高，SERTmRNA表达下调而TPH1mRNA表达上调；与IBS模型组

比较，眼针组5－HT和5－HIAA水平明显下降，5－HT转化率显著降低，SERTmRNA表达上调而TPH1mRNA表达下调。结论：5－HT降解与合成分泌的不相匹配可能是IBS模型大鼠5－HT水平升高的重要原因，眼针治疗可有效改善IBS大鼠5－HT代谢，使5－HT恢复至正常水平。关键词：肠易激综合征；5－羟色胺；5－羟吲哚乙酸；眼针中图分类号：R245文献标识码：A文章编号：1000－1719（2010）11－2222－03

EffectsofOcularAcupunctureTherapyonColonic5－HTContentandPercentConversionintheRatwithIrritableBowelSyndrome

SONGShi-yi，WANGDe-shan，WANGYan-jie，LIDan，LIRen-feng（CollegeofBasicMedicine，LiaoningUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shenyang110032，Liaoning，China）

Abstract：Objective：Toinvestigatecolonic5－HTcontentandpercentconversionintheratwithIBSandeffectsofocularac-upuncturetherapy（OAT）．Methods：Animalswereclassifiedintocontrol、IBSmodelandOATgroups．RatmodelofIBSwasestab-lishedbymethodofstressandcombiningbound，andOATwasgiven．Colonic5－HTand5－HIAAofeachgroupwereexaminedbyELISA．SERTmRNAandTPH1mRNAwereexaminedbyRT－PCR．Results：Comparedwiththoseincontrol，thelevelsof5－HTand5－HIAAincreased，percentconversionof5－HTincreasedtoo，expressionofSERTmRNAdecreasedandTPH1mRNAexpressionincreasedinIBSmodel．ComparedwiththoseinIBSmodel，thelevelsof5－HTand5－HIAAandpercentconversionof5－HTdecreased，expressionofSERTmRNAincreasedandTPH1mRNAexpressiondecreasedinOAT．Conclusion：Thediffer-enceof5－HTbetweenanabolicmetabolismandcatabolisminIBSmodelsuggestesthatthedisharmonyisinvolvedinthepatho-genesisofIBS．OATcancorrect5－HTmetabolismeffectively．Keywords：irritablebowelsyndrome；5－hydroxytryptamine；tryptophanhydroxylase1；serotoninreuptaketransporter；ocularacupuncturetherapy

收稿日期：2010－04－22基金项目：国家重点基础研究发展计划（973计划）资助项目（2007CB512702）作者简介：宋士一（1965－），男，辽宁沈阳人，副教授，博士研究生，研究方向：中医药对消化系统神经内分泌功能影响的机制研究。通讯作者：王德山（1951－），男，教授，博士研究生导师，E－mail：wwddss5768@sina．com

肠易激综合征是以腹痛、腹部不适、大便性状和排便习惯改变为其特征的，流行病学调查显示健康人群中的10%～20%患有此病［1］，而IBS的病理生理过程中都发现有5－HT的参与。本研究旨在通过观察IBS模型大鼠结肠组织5－HT含量、5－HT转化率以及眼针治疗的影响，来进一步研究眼针治疗IBS的机制。1材料与方法1.1实验动物选用健康SPF级Wistar雄性大鼠，11周龄，体重（240±20）g，北京中医药大学动物实验中心提供。大鼠饲养适应3日后进行实验，自由摄食及饮水。饲养期间每日8：00—16：00时给予恒定灯光照明。1.2分组与造模采用随机数字法分成：对照组、IBS模型组、眼针组，每组10只。按文献方法［2］进行改良，IBS模型组、眼针组每日放入自制束缚性鼠笼（直径

5cm长度20cm，钢丝网制）1h进行束缚刺激，并每日

依次交替进行一项下列应激刺激：①禁水24h，②置于温箱40℃，5min，③电击刺激30V，电击5s间歇5s共120s，④冷水游泳14℃，5min，⑤禁食24h，⑥夹尾

180s；共循环3次计18日造模结束。对照组无处理。1.3眼针处理眼针组在IBS大鼠造模成功后第2天开始，取下焦区、大肠区、肝区、脾区针刺，定位参照人体取穴方法；用31号13mm毫针，于大鼠眶周2mm

·2222·辽宁中医杂志2010年第37卷第11期处平刺，进针3mm，留针20min，留针期间捻转行针3次，每次1min，每12h针刺1次，针刺7天。1.4标本采集标本采集前24h禁食，各组大鼠水合

氯醛麻醉，开腹在距肛门上10cm处取远端结肠，肠段长约2cm，液氮冻存后－80℃保存。1.5主要试剂和仪器组织5－HT、5－HIAA的

ELISA试剂盒（美国ADL），2010型anthos酶标仪、an-thos全自动酶标洗板机，Rabbit-anti-ratSERT抗体、Rabbit-anti-ratTPH1抗体（美国SantaCruz）；mouse-an-ti-ratβ－actin抗体（美国Abcam）；小鼠及兔的二抗

（美国KPL）；Trizol试剂（美国Invitrogen）；SDS－PAGE仪（美国BIO－RAD）；DYCZ－40B型电泳转移

槽（北京市六一厂）；图像分析系统（美国UVP）。引物由大连宝生物工程合成，引物设计参照文献及核苷酸序列数据库：SERTF1GAGTTCTACTTGCGCCATGTCR1GCTAGCAAAAGCCAGGAGAA360bpTPH1F1GAAAATCTTCCAGGAGAACCACR1TCTTTGAAGCCAGGATGGTC309bpBETAACTINF1CCTAGGCACCAGGGTGTGR1GATGGCATGAGGGAGCG414bp1.6ELISA法测定5－HT、5－HIAA水平各组结肠

组织块用冷盐水洗净，滤纸吸干，按1∶9加入生理盐水制备组织匀浆，离心取上清。分别按照ELISA试剂盒操作步骤进行，应用全自动酶标仪在450nm处测定OD值，采用CurveExpert1.3进行标准曲线的绘制，并

计算对应的浓度值。1.7RT－PCR法测定SERTmRNA、TPH1mRNA表达

参照说明书用Trizol试剂从大鼠结肠组织抽提总RNA，空气干燥后，溶解于无RNase水中，－80℃保存

备用。转成cDNA时取上述RNA溶液稀释，测定吸光度计算RNA浓度。在25μL逆转录体系中，加入总RNA1μg，以逆转录反应液1.0μL作为模板，加入上下

游引物各25pmol，在GeneCycler中进行PCR扩增，β－actin为内参照。首先94℃预变性3min，以后94℃变性45s→（SERTmRNA）58℃或（TPH1mRNA）56.8℃退火45s→72℃延伸45s，共35个循环，72℃

再延伸

7min终止反应，4℃保存。取6μLPCR产物和标准分

子Markerladder加入20g/L琼脂糖凝胶内，80V电泳40min，凝胶置凝胶成像及分析系统拍照，密度扫描，然

后用其表达量与对应的β－actin表达量的比值进行比较分析。1.8统计处理实验数据采用均数±标准差（珋x±s）表示，采用SPSS12.0软件，多组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异显著。2结果

实验过程中动物无死亡。实验动物的一般状态观察结果：与对照组比较，IBS模型大鼠出现易怒好斗、毛色晦暗、食欲下降等表现，稀便状态持续存在，慢性腹泻形成，依据成模标准表明造模成功［2］。经过眼针

治疗后大鼠一般状态明显改善，大便性状和排便次数逐渐恢复正常。2.1眼针对结肠5－HT含量及5－HT转化率（5－

HIAA/5－HT百分率）的影响

表1眼针对结肠5－HT含量及5－HT转化率的影响（n=10，珋x±s）

组别5－HT（ug/mg）5－HIAA（ug/mg）5－HT转化率（%）对照组9．65±2．361．09±0．3111．30±2．16IBS模型组18．24±2．40*3．97±0．85*20．63±3．58

*

眼针组13．04±1．13＊＊1．66±0．47＊＊12．73±2．85＊＊注：与对照组比较：*P＜0.05，与模型组比较：＊＊P＜0.05由表1可见与对照组比较，IBS模型组5－HT、5－HIAA水平显著升高（P＜0.05），5－HT转化率显著

升高（P＜0.05）；与IBS模型组比较，眼针组5－HT、5－HIAA水平及5－HT转化率显著降低（P＜0.05）。2.2眼针对结肠SERTmRNA、TPH1mRNA表达水平

的影响由图1、图2、表2可见，在β－actin扩增效率大致相同的情况下，与对照组比较，IBS模型组SERT-mRNA表达下调（P＜0.05），TPH1mRNA表达上调（P＜0.05）；而与IBS模型组比较，眼针组SERTmRNA表

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增液承气汤对热结肠道型气分证大鼠肠道组织结构、血清IL-1β、IL-6及TNF-α含量的影响

增液承气汤对热结肠道型气分证大鼠肠道组织结构、血清IL-1β、IL-6及TNF-α含量的影响

增液承气汤对热结肠道型气分证大鼠肠道组织结构、血清IL-1β、IL-6及TNF-α含量的影响王自力;王晓谦;张翥;涂君平;蒋会会;别应堂;张家骅【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2016(047)004【摘要】为了探讨增液承气汤对热结肠道型气分证大鼠肠道组织结构及血清炎性细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α含量的影响,给热结肠道型气分证模型大鼠预防性或治疗性灌服增液承气汤,测定大鼠体温、体重、肠道黏膜组织结构变化和血清相关炎性细胞因子含量.结果表明:热结肠道型气分证大鼠肠道屏障功能受损,肠道黏膜脱落,部分绒毛断裂,炎性细胞浸润,上皮内淋巴细胞(IEL)数量增多,杯状细胞(GC)数量减少,且血清中炎性细胞因子IL1β、IL-6和TNF-α均会出现显著升高(P＜0.05).预防性给予增液承气汤后,可有效减轻肠道黏膜脱落,绒毛断裂和炎性细胞浸润等损伤,并能有效降低大鼠血清中IL 6和TNF-α含量(P＜0.05);治疗性给予增液承气汤能有效地降低大鼠体温,使大鼠肠道组织结构基本恢复正常,恢复肠道黏膜免疫屏障功能,可有效降低大鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α含量.增液承气汤可通过降低体温、维护肠道组织结构正常,降低IEL及升高GC细胞数量,抑制血清炎性细胞因子的分泌而起到良好的防治作用.【总页数】8页(P828-835)【作者】王自力;王晓谦;张翥;涂君平;蒋会会;别应堂;张家骅【作者单位】西南大学动物科技学院,重庆400715;重庆市光大(集团)有限公司,重庆400020;西南大学动物科技学院,重庆400715;西南大学动物科技学院,重庆400715;西南大学动物科技学院,重庆400715;西南大学动物科技学院,重庆400715;重庆市光大(集团)有限公司,重庆400020;西南大学动物科技学院,重庆400715【正文语种】中文【中图分类】S853.9【相关文献】1.IL-1、IL-6、TNF-α及 IFN-γ在脾肾阳虚型溃疡性结肠炎模型大鼠血清及组织中的表达 [J], 殷银霞;许雅清;李海龙;邱家权;程小丽;明海霞;梁永林;吴玉泓2.大鼠热结肠道型气分证模型的构建及肠道结构、IEL和GC数量的变化研究 [J], 王自力;贺庭祯;张翥;王陈超;王明周;涂君平;谢尔玛;张家骅;别应堂3.星蒌承气汤加味对脑出血大鼠血清IL-1β、IL-6、IL-17A、TNF-α表达及神经功能的影响 [J], 赵晓君;吴晓光;徐樱;王建福4.复方仙灵脾注射液对全脑缺血再灌注大鼠脑组织含水量、血清TNF-α、IL-1、IL-6含量的影响 [J], 武继涛5.参附芎泽注射液对压力超负荷大鼠血液流动力学和心肌组织及血清TNF-α IL-1β IL-6含量的影响 [J], 于远望;韩曼;张淑珍;黄文华;赵晓明;宋亮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

秦艽提取物对便秘大鼠血清及结肠组织 NO、SOD、MDA、GSH 水平的影响

秦艽提取物对便秘大鼠血清及结肠组织 NO、SOD、MDA、GSH 水平的影响

秦艽提取物对便秘大鼠血清及结肠组织 NO、SOD、MDA、GSH 水平的影响牛明了;甄欢欢;周晓丽【摘要】目的：探讨秦艽提取物对便秘大鼠血清及结肠组织中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（ GSH）、一氧化氮（ NO）、超氧化物歧化酶（ SOD）水平的影响。

方法选择SPF级SD大鼠60只，随机均分为正常组、模型组、阳性组、秦艽高剂量组、秦艽低剂量组。

制造大鼠便秘模型。

造模成功后正常组、模型组生理盐水灌胃，阳性组麻仁软胶囊灌胃，秦艽低剂量组秦艽提取物0．9 g／kg灌胃，秦艽高剂量组秦艽提取物1．8 g／kg灌胃。

给药治疗4周后，眼底静脉丛采血，分离血清备用。

3d后采用活性炭推进法测定肠道传输率的变化。

脱颈椎处死大鼠，制作结肠组织匀浆，分别按试剂盒方法测定大鼠血清和结肠组织匀浆液中NO、MDA、SOD、GSH水平。

结果模型组大鼠血清及结肠中NO、MDA水平与正常组相比上升，SOD、GSH水平下降（P均＜0．05）；与模型组大鼠相比，秦艽高剂量组、低剂量组结肠组织中NO水平降低，且秦艽低剂量组结肠组织中GSH水平升高（P均＜0．05）。

结论秦艽提取物可能通过调控便秘大鼠模型的NO、MDA、SOD、GSH表达水平起到治疗便秘的作用。

【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2016(000)005【总页数】3页(P27-29)【关键词】便秘;秦艽提取物;丙二醛;谷胱甘肽;一氧化氮;超氧化物歧化酶;大鼠【作者】牛明了;甄欢欢;周晓丽【作者单位】河南省中医院，郑州450002;河南省中医院，郑州450002;河南中医学院第三附属医院【正文语种】中文【中图分类】R256.35大叶秦艽为龙胆科植物，其主要化学成分为生物碱类、环烯醚萜苷类、甾醇类等，具有抗炎、镇痛、镇静、解热、保肝等作用，可以祛风湿、止痹痛、退虚热、清湿热，主要用于风湿痹痛、筋脉拘挛、骨节酸痛等病症[1]。

目前，便秘的发病机制尚未完全清楚，临床亦无特效治疗药物。

5-羟色胺在肠易激综合征中作用的研究

5-羟色胺在肠易激综合征中作用的研究

5-羟色胺在肠易激综合征中作用的研究
姜敏;凌立平;傅宝玉
【期刊名称】《中国医科大学学报》
【年(卷),期】2006(035)002
【摘要】目的:探讨5-羟色胺(5-HT)在肠易激综合征发病中作用以及与其临床症状的相关性.方法:免疫组化方法染色,兔抗人5-HT多克隆抗体测定5-HT阳性细胞,计数阳性细胞数量并进行分析.结果:肠易激综合征直肠-乙状结肠交界部5-HT阳性细胞明显高于正常对照组(P＜0.05),腹泻型肠易激综合征增加更明显(P＜0.01).结论:5-羟色胺对结肠的运动、分泌以及感觉等有调节作用.
【总页数】2页(P171-172)
【作者】姜敏;凌立平;傅宝玉
【作者单位】中国医科大学附属第一医院消化内科,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学附属第一医院消化内科,辽宁,沈阳,110001;中国医科大学附属第一医院消化内科,辽宁,沈阳,110001
【正文语种】中文
【中图分类】R574.4
【相关文献】
1.逍遥散对肠易激综合征大鼠5-羟色胺及5-羟色胺转运体作用研究 [J], 石君杰;王海云;宋李亚;梅诗雪
2.5-羟色胺系统在肠易激综合征内脏感觉过敏机制中的作用研究 [J], 沈忠飞;郭燕
君
3.5-羟色胺系统在肠易激综合征内脏感觉过敏机制中的作用研究 [J], 沈忠飞;郭燕君
4.腹泻型肠易激综合征患者结肠黏膜5-羟色胺和5-羟色胺3受体的研究 [J], 李运红;朱晓蕾;徐肇敏
5.肠易激综合征患者5-羟色胺及5-羟色胺2B受体变化的研究 [J], 孙咏红; 张野; 王宇; 王福成; 李青; 孙秀丽; 张静
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5－羟色胺与胃肠动力障碍的关系

5－羟色胺与胃肠动力障碍的关系

5－羟色胺与胃肠动力障碍的关系俞媛洁(综述);陈继红(审校)【摘要】正常的肠道动力对生命至关重要。

肠道动力紊乱，尤其是结肠动力障碍性疾病，如慢性便秘等，发病率在我国乃至世界范围内日趋增高，严重影响患者生活质量及社会功能，给患者带来沉重的医疗负担。

胃肠道5－羟色胺（5－HT）（血清素）由肠神经系统和肠黏膜嗜铬细胞参与合成与分泌，参与胃肠道多种功能调控。

5－HT信号通路异常参与多种胃肠道疾病的发生、发展。

该文主要围绕5－HT与胃肠动力障碍疾病的关系进行综述。

%Intestinal motility is essential to life.The prevalence of intestinal dysmotility,particularly the colon dysmotility,for example chronic constipation,has been increasing in China and in the world recently, seriously affecting the patient′s quality of life and their social function with heavy medical and social burden . 5-hydroxytryptamine(5-HT)/serotonin in the gut is synthesized and secreted in the enteric nerves system and the intestinal enterochromaffin cells,and it is involved in multiple gastrointestinal functions.Abnormalities of 5-HT receptors′pathways have been involved in the occurrence and development of gastrointestinal disor-ders.Here is to make a review of the relationship between 5-HT and gastrointestinal motility disorders.【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2016(022)004【总页数】4页(P636-639)【关键词】5-羟色胺;5-羟色胺受体;肠易激综合征;慢性便秘【作者】俞媛洁(综述);陈继红(审校)【作者单位】武汉大学人民医院消化内科，武汉 430060;武汉大学人民医院消化内科，武汉 430060【正文语种】中文【中图分类】R574.4△在读研究生※通讯作者E-mail:***********************.cn constipation5-羟色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)，即血清素，是胃肠道重要的神经递质与旁分泌信使，是胃肠道运动及感知功能调节的重要的信号分子[1]。