菌种的来源

- 1 - 菌种的种植方法

菌种是生产菌类产品的重要原料之一，其种植方法的好坏直接关系到产品的质量和产量。本文将介绍菌种的种植方法，希望对菌类生产者有所帮助。

一、 菌种的选择

选择优质菌种是种植成功的关键。首先要选择符合国家标准的菌种，其次要选择活力强、繁殖力强、抗病能力强的菌种。菌种的来源可以是自然采集，也可以是从菌块中提取。

二、 菌种的培养

菌种的培养是种植的第一步。菌种的培养可以使用液体培养和固体培养两种方法。

液体培养是将菌种放入含有营养物质的液体培养基中进行培养。液体培养需要注意的是培养基的pH值、温度、通气等因素，同时要避免污染。

固体培养是将菌种放入含有营养物质的固体培养基中进行培养。固体培养需要注意的是培养基的配方、温度、湿度等因素，同时要避免污染。

三、 菌种的接种

接种是种植的第二步。接种可以使用直接接种和间接接种两种方法。

直接接种是将培养好的菌种直接接入生产菌种的培养基中。直接接种需要注意的是接种量、接种位置、接种时间等因素。 - 2 - 间接接种是将培养好的菌种先接入一定量的培养基中进行繁殖，然后再将其接入生产菌种的培养基中。间接接种需要注意的是繁殖时间、繁殖温度、接种量等因素。

四、 菌种的培育

培育是种植的第三步。培育是将接种好的菌种放入适宜的环境中进行生长繁殖。培育需要注意的是温度、湿度、通风、光照等因素，同时要避免污染。

五、 菌种的储存

储存是种植的最后一步。储存是将培育好的菌种保存在适宜的环境中，以备下次使用。储存需要注意的是温度、湿度、通风等因素，同时要避免污染。

六、 结语

以上就是菌种的种植方法。菌种的种植方法需要综合考虑多种因素，只有科学合理的种植方法才能获得优质的菌种，从而保证产品的质量和产量。希望本文对菌类生产者有所帮助。

工业微生物菌种得分离与筛选

来源:青岛海博

一、微生物工业对菌种得要求

(一)、微生物工业得生产水平由三个要素决定:生产菌种得性能、发酵及提纯工艺条件、生产设备。其中生产菌种得性能就是最重要得因素。

(二)、微生物工业对菌种得要求就是:

(１)菌株高产,在较短得时间内发酵产生大量发酵产物得能力;

(２)在发酵过程中不产生或少产生与目标产品相近得副产品及其她产物;

(3)生长繁殖能力强,较强得生长速率,产孢子得菌种应该具有较强得产孢子能力;

(4)能够高效地将原理转化为产品;

(５)能利用广泛得原材料,并对发酵原料成分得波动敏感性小;

(６)对需要添加得前体物质有耐受能力,并且不能将这些前体物质作为一般碳源利用;

(7)在发酵过程中产生得泡沫要少;

(8)具有抗噬菌体得能力;

(9)遗传稳定性,

二、工业用微生物菌种得来源及选育

(一)微生物菌种得来源

一般通过以下几个途径收集菌种、采集样品与分离筛选:

(1)就是根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂或菌种保藏部门索取或购买;

(２)从大自然中采集样品分离;

(3)从一些发酵制品中分离筛选目得菌株、

当前发酵工业所用菌种总趋势就是从野生菌转向变异菌,自然选用转向代谢育种,从诱发基因突变转向基因重组得定向育种。

(二)微生物工业菌种得分离

1、野生菌株得分离、筛选过程

(１)新菌种分离与筛选得步骤

菌种分离得流程如下:

标本采集 →标本材料得预处理→富集培养→菌种初筛→ 菌种复筛→性能鉴定→ 菌种保藏

①采样

采样季节:以温度适中,雨量不多得秋初为好。

采土方式:在选好适当地点后,用小铲子除去表土,取离地面5—1５cm处得土约10g,盛入清洁得牛皮纸袋或塑料袋中,扎好,标记,记录采样时间、地点、环境条件等,以备查考。为了使土样中微生物得数量与类型尽少变化,宜将样品逐步分批寄回,以便及时分离、

②标本预处理

④纯种分离:采用划线分离法、稀释分离法等纯化方法获取单菌落、

菌种传代与复苏

菌种是从事微⽣物学及⽣命科学研究的基本材料，在医学领域中，诊断制品的制备，菌苗的⽣产、微⽣物致病性研究，药物的抑菌试验及药品微⽣物检验等都有⼀套完整的菌种、微⽣物具有⽣命活⼒，在传代过程中易发⽣变异甚⾄死亡，因此菌种传代与保藏是⼀项重要的基础⼯作。

菌种代号

国内药品微⽣物检验所⽤的菌种代号是CMCC(F)或CMCC(B)，CMCC--中国医学菌种保藏中⼼，、，B——代表细菌，F——代表真菌。

⾦黄⾊葡萄球菌CMCC(B)26003⼤肠杆菌CMCC(B)44102 枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501 ⽩⾊念珠菌CMCC(F)98001 ⿊曲霉CMCC(F)98003

传代和接种

菌种冻⼲粉复苏

把冻⼲菌种管、灭菌1ml滴管、双碟、镊⼦、营养⾁汤培养基、营养琼脂斜⾯数⽀，移⼊接种室或净化台。

先⽤砂轮将冻⼲菌种安瓿瓶颈部挫出挫痕，再将冻⼲菌种管外壁⽤75%酒精擦洗消毒，稍⼲，⽤75%⼄醇棉擦净，放在灭菌双碟内，待⼲。点燃酒精灯，将菌种管的封⼝⼀端在⽕焰上烧灼红热，⽤灭菌滴管吸取营养⾁汤培养基，滴在灼热的菌种管封⼝⼀端，是骤冷⽽炸裂。

取灭菌镊⼦，在⽕焰旁，将炸裂的管⼝打开，放⼊灭菌双碟内，领取⼀只灭菌滴管，在⽕焰旁吸取营养⾁汤少许，加⾄菌种管底部，

将冻⼲菌搅动促使溶解，随即吸出管内菌液，分别接种⾄营养琼脂斜⾯及普通⾁汤内，并将滴管及菌种管投⼊消毒液内，将已接种的营养⾁汤及营养琼脂斜⾯进⾏培养。

菌种斜⾯传代操作

培养基应新鲜制备，如斜⾯已⽆冷凝⽔者，不宜再使⽤。标签上注明菌种名及菌种编号。⾄冰箱取出的菌种斜⾯，应在室温放置约30分钟，待温度平衡后再移⼊接种室或超净⼯作台。

点燃酒精灯，⽤左⼿握住菌种斜⾯，将管⼝靠近⽕焰旁，右⼿拿接种棒后端，将接种环烧红30秒，随后将全部接种棒⾦属部分在⽕焰上烧灼，往返通过3次。左⼿将管⼝在⽕焰上旋转烧灼，右⼿⽆名指，⼩指及掌部夹住棉塞，拨开棉塞，将接种环深⼊管内先在近壁的琼脂斜⾯上靠⼀下，稍冷却再移⾄菌苔上，刮去少量菌苔，随即取出接种环，并将菌种管⼝移⾄⽕焰旁。

食用菌菌种的概念

一,菌种的概念 原意是指孢子(相当于植物的种子) ,但在实际生产中,常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种.

二,菌种的类型 在生产中根据菌种的来源,繁殖代数及生产目的,把菌种分为母种,原种和栽培种.分别叫一级种,二级种,三级种.

母种:将纯菌丝体或孢子在试管培养基中繁殖而成.可以繁殖原种,也适宜菌种保藏.

原种:母种菌丝在固体培养基上繁殖而成.这一过程增强菌丝对培养环境的适应性,又起到扩繁的作用.原种可以直接出菇.

栽培种:由原种扩繁而成.主要是为了扩繁,为生产提供足够的菌种.

菌种制备

也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。种子制备包括孢子制备和菌丝体制备（见图）

菌种制备

其中(1)～(4)为孢子制备过程。保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天(或较长时间)。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子，对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基。将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。放线菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液、牛肉膏及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28～37℃培养5～14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐 (6)的种子。如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶（5）液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆等）,及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应是生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。 细菌