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大鼠白介素10 ELISA试剂盒

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北京索莱宝科技有限公司

仅供研究，不用于临床诊断大鼠白介素10ELISA试剂盒

产品编号：SEKR-0006适用于大鼠血清、血浆或细胞培养上清液等样本

北京索莱宝科技有限公司

目录

背景介绍…………………………………………….............................................…………………………………01

检测原理……………………………………………………………………………………………………………01

注意事项……………………………………………………………………………………………………………02

安全提示……………………………………………………………………………………………………………02

试剂盒组成及储存…………………………………………………………………………………………………03

自备实验器材………………………………………………………………………………………………………03

样品收集及储存……………………………………………………………………………………………………03

试剂准备……………………………………………………………………………………………………………04

检测步骤……………………………………………………………………………………………………………06

结果判断……………………………………………………………………………………………………………06

参数表征……………………………………………………………………………………………………………07

参考文献……………………………………………………………………………………………………………09

常见问题分析及解决办法…………………………………………………………………………………………10

北京索莱宝科技有限公司

第1页共10页背景介绍：

IL-10是一种多效性细胞因子，是α-螺旋细胞因子IL-10家族成员。小鼠、大鼠和人IL-10cDNA序列均含178个氨基酸残基，内有18氨基酸信号肽序列。成熟IL-10分子为160氨基酸残基，小鼠和人IL-10分子中分别含5个和4个半胱氨酸残基，分子量为35～40kDa。在氨基酸水平上，大鼠IL-10与人和小鼠IL-10分别有85％和74％的同源性。IL-10为调控病毒感染、过敏反应、自身免疫炎症的关键分子，促进吞噬摄取和Th2应答，但抑制抗原提呈和促炎症反应应答。IL-10的单核细胞可有效调节单核/巨噬细胞功能。能抑制前列腺素E2和产炎性细胞因子包括TNF-,IL-1,IL-6和IL-8的产生等。

检测原理：本ELISA试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗大鼠IL-10单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的大鼠IL-10会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗大鼠IL-10抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的大鼠IL-10发生特异性结合；洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的大鼠IL-10，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；最后，在λmax=450nm（OD=450nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的大鼠浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中大鼠的浓度。原理图：

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第2页共10页注意事项：1.试剂盒应在有效期内使用，请不要使用过期的试剂。2.试剂盒未使用时应保存在2-8℃冰箱，已复溶但未用完的标准品，请丢弃。3.试剂盒使用前请在室温恢复30min，且充分混匀试剂盒里的各种成份及制备的样品。4.在试验中标准品和样本建议作复孔检测，且加入试剂的顺序应保持一致。5.为避免交叉污染，请在试验中使用1次性试管，枪头，封板膜（※）及洁净塑料容器。.6.浓缩生物素化抗体和浓缩酶结合物的体积较少，在运输过程中微量液体会沾到管壁及瓶7.盖上，使用前请离心处理（5-10S即可），使管壁上的液体集中在管底部，取用时，请用移液器小心吹打几次。8.除了试剂盒中的浓缩洗涤液和终止液可以通用外，请不要使用其他来源试剂盒内含的试剂代替本试剂盒中的某单个组分。9.为保证结果准确，每次检测均需做标准曲线。

安全提示：试剂盒中的终止液为酸性溶液，操作大鼠员在使用时请带上手套并注意防护；在操作过程中也要避免试剂接触皮肤和眼睛，如果不慎接触，请用大量清水清洗；检测血液样本及其它体液样本时，请按国家生物实验室安全防护有关管理规定执行。

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第3页共10页试剂盒组成及储存：试剂盒组成规格（96T）规格（48T）保存条件抗体预包被酶标板8*128*62-8℃

标准品2支1支-20℃

SR1标准品/样本稀释液16ml/瓶8ml/瓶2-8℃

浓缩生物素化抗体120ul(100X)60ul(100X)2-8℃

SR2生物素化抗体稀释液16ml/瓶8ml/瓶2-8℃

浓缩酶结合物（避光）120ul(100X)60ul(100X)2-8℃

SR3酶结合物稀释液16ml/瓶8ml/瓶2-8℃

浓缩洗涤液（20×）30ml/瓶15ml/瓶2-8℃

显色底物（避光）12ml/瓶6ml/瓶2-8℃

终止液12ml/瓶6ml/瓶2-8℃

封板胶纸4张2张

说明书1份1份

自备实验器材（不提供，可代购）

1．酶标仪（主波长450nm，参考波长630nm）

2．高精度移液器及一次性吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl

3．洗板机或洗瓶

4．37℃孵育箱

5．双蒸水，去离子水，量筒等

6．稀释用聚丙烯试管

样本收集及储存：

1.细胞培养上清：

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第4页共10页将细胞培养基移至无菌离心管，在4℃条件下1000×g离心10min,然后将上清等量分装于小EP管并于

-20℃下保存（24小时内检测可放入2-8℃储存），避免反复冻融。

2.血清样本：

室温血液自然凝固20min后，在4℃条件下1000×g离心10min，然后将上清等量分装于小EP管并于

-20℃下保存（24小时内检测可放入2-8℃储存），保存过程中如有沉淀，请再次离心，避免反复冻融。

3.血浆样本：

将全血收集到含抗血凝剂的管中，根据标本的实际要求选择EDTA，柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混

合20min，在4℃条件下1000×g离心10min，然后将上清等量分装于小EP管并于-20℃下保存（24

小时内检测可放入2-8℃储存），避免反复冻融。

※注意：血清血浆样本避免使用溶血、高血脂样本，以免影响检测结果；如果样本中的靶标物检测浓度高

于标准品的最高值，请将样品做适当倍数稀释后检测，建议正式实验前做预实验以确定稀释倍数。

试剂准备：

1.试剂回温：首先在实验前30min将试剂盒，待测样本放置于室温下，浓缩洗涤液如出现结晶，请放入

37℃温浴直到结晶全部溶解。

2.配制洗涤液：预先计算好稀释后的洗涤液使用体积，然后用双蒸水或去离子水将20倍浓缩洗涤液稀释

成1倍应用液，未用完的浓缩洗涤液放入4℃冰箱保存。

3.标准品梯度稀释：加入标准品/样本稀释液（SR1）1000L至冻干标准品中，静置15分钟待其完全溶解后

轻轻混匀(浓度为、2000pg/ml)，按照以下浓度进行2倍稀释：2000、1000、500、250、125、62.5、31.25、

0pg/ml进行稀释。2000pg/ml作为标准曲线的最高点浓度，标准品/样本稀释液（SR1）作为标准曲线的零

点（0pg/ml）。复溶过的标准品原液（2000pg/ml）未用完的应废弃或根据需要按照一次用量分装，并将

其贮存在-20～-80℃冰箱，具体如下图。

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第5页共10页4.生物素化抗体工作液：预先计算好试验所需用量，用检测稀释液（SR2）将100倍抗体浓缩液稀释成1倍应用工作液（稀释前充分混匀），请在30分钟内加入到反应孔中。生物素化抗体工作液具体稀释方法如下：板条浓缩生物素化抗体（1:100）：μL检测稀释液（SR2）：μL2201980

4403960

6605940

8807920

101009900

1212011880

4.酶结合物工作液：按每次试验所需用量配制，用酶结合物稀释液（SR3）将100倍浓缩酶结合物稀释成

1倍应用工作液（稀释前离心），请在30分钟内使用。酶结合物工作液具体稀释方法如下：板条浓缩酶结合物（1:100）：μL检测稀释液（SR3）：μL2201980

4403960

6605940

8807920

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第6页共10页101009900

1212011880

5.洗涤方法：自动洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，注入洗涤液为300ul/孔,注与吸出间隔为30秒，洗板5次。手工洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，用洗瓶加入洗涤液300ul/孔，静止30秒后甩净酶标板孔中液体，在厚迭的吸水纸上拍干，洗板5次。

检测步骤：

结果判断：

1.用酶标仪450nm波长测定OD值。选择双波长检测，参考波长为630nm。如不能进行双波长检测，请用450nm的OD测定值减去630nm的OD测定值。2.计算标准品、样品的平均OD值：每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值3.以标准品浓度为横坐标，吸光度OD值为纵坐标，用软件绘制标准曲线，样品中含量可通过对应OD值由标准曲线换算出相应的浓度。4.若标本OD值高于标准曲线上限，应做适当稀释后重新检测，计算浓度时再乘以稀释倍数。

拍板&洗板4次拍板&洗板5次拍板&洗板4次实验前30min,拿出试剂盒，恢复至室温，加入标准品/样本前，请洗板3次并甩干

加入100l标准品及检测样本至反应孔中,封板后于37℃孵箱孵育90min

加入100l生物素化抗体工作液至反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育60min

加入50l终止液，即刻用酶标仪450nm波长下测量OD值（5分钟内）加入100l显色底物至反应孔中，封板后于37℃避光显色15min加入100l酶结合物工作液至反应孔中，封板后于37℃孵箱孵育30min

合集下载

人白介素1β (IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书

人白介素1β (IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书

2022年修订第一版

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!）

产品货号：E-EL-H0149c

产品规格：96T/48T/24T/96T*5

Elabscience 人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书

Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit

使用前请仔细阅读说明书。如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：

销售部电话

技术部电话************

电子邮箱（销售）********************

电子邮箱（技术）**************************

网址：

具体保质期请见试剂盒外包装标签。请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved2022年修订第一版

目录

用途…………………………………………………………………………………………………………………………3

基本性能……………………………………………………………………………………………………………………3

检测原理……………………………………………………………………………………………………………………3

试剂盒组成及保存…………………………………………………………………………………………………………4

试验所需自备物品…………………………………………………………………………………………………………5

样品收集方法………………………………………………………………………………………………………………5

注意事项……………………………………………………………………………………………………………………6

■ 试剂盒注意事项……………………………………………………………………………………………………6

对氧磷酶3PON3ELISA试剂盒说明书

对氧磷酶3PON3ELISA试剂盒说明书

对氧磷酶3(PON3)ELISA试剂盒说明书

本试剂仅供研究使用 标本：体液

对氧磷酶3(PON3)ELISA试剂盒说明书试验原理：

BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。

对氧磷酶3(PON3)ELISA试剂盒说明书自备材料

1．蒸馏水。

2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。

3．振荡器及磁力搅拌器等。

安全性

1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。

2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。

3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

对氧磷酶3(PON3)ELISA试剂盒说明书操作注意事项

1．试剂应按标签储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

9．按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

对氧磷酶3(PON3)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法

关节腔内注射三氧化二砷治疗胶原诱导的鼠关节炎的实验研究

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pared with group Ⅰ，The arthritis index, posterior paw thickness，ankle

circumferences, synovial thickness of high frequence ultrasound of model

group(group Ⅱand group Ⅲ)，were higher than that before CIA established (P＜

0.05). They were all lower ingroup Ⅲ(P＜0.05), while no consipious decline in

group Ⅱ(P＞0.05) after intra-articular drug injection .Compared between group Ⅱ

and group Ⅲ, they showed stastistically significant differences(P＜0.05).

pared with groupⅠ，X rays of model group(group Ⅱand group Ⅲ) showed

soft tissue swelling, some bone destruction, and H-E staining showed heavy

inflammatory cell infiltrated , synoviocytes increased, new vascular developed.But

after intra-articular drug injection , X scores showed no stastistically significant

differences(P＞0.05)between group Ⅱand Ⅲ, while pathology scores had

白子菜提取物对急性痛风性关节炎大鼠模型抗炎作用的研究

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刘昌盛;陈昉;何颖;李桂元;姚红;童娟

【摘 要】目的：探讨白子菜提取物对急性痛风性关节炎大鼠模型抗炎作用。方法将72只Wistar大鼠随机分为9组（每组8只）：空白组、模型组、秋水仙碱组、白子菜水提取物低、中、高剂量组、白子菜醇提取物低、中、高剂量组。造模5 h后开始连续灌药，7 d后取材，观察各组大鼠关节炎症情况，关节组织单位面积内炎症细胞计数及检测血清白介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（tumour necrosis factor-α, TNF-α）浓度。结果中、高剂量白子菜提取物组与秋水仙碱组在足趾炎症情况显著低于模型组（P<0.05）。在淋巴细胞、中性粒细胞计数方面各药物组显著低于模型组（P<0.05），各药物组间无明显差异（P>0.05）。秋水仙碱组TNF-α表达水平显著低于模型组（P<0.05）。秋水仙碱组及白子菜醇提取物中剂量组IL-1β表达水平显著低于模型组（P<0.05）。结论秋水仙碱及中剂量白子菜醇提物对急性痛风性关节大鼠模型具有抗炎免疫作用。%Objective To explore the anti-inflammatory of Gynura divaricata

(Linn.) DC. extract on rat models with acute gouty arthritis. Methods

Seventy-two Wistar rats were randomly divided into nine groups (eight

rats in each group):blank group, model group, colchicines group, ethanol

extract of G. divaricata groups (high-dose group, middle-dose group and