实用文档 用心整理 千里之行 始于足下 1
第1讲 基因工程和细胞工程
[考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ)。3.基因工程的应用(Ⅱ)。4.蛋白质工程(Ⅰ)。5.植物的组织培养(Ⅱ)。6.动物细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。8.实验：DNA的粗提取与鉴定。
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1．基因工程
(1)基因工程的3种基本工具
①限制性核酸内切酶：识别特定核苷酸序列，并在特定位点上切割DNA分子。
②DNA连接酶：a.E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端；b.T4 DNA连接酶能连接黏性末端和平末端。
③载体：需具备的条件包括：a.能在宿主细胞内稳定存在并大量复制；b.有一个至多个限制酶切割位点；c.具有特殊的标记基因，以便对含目的基因的受体细胞进行筛选。
(2)获取目的基因的途径：①从基因文库中获取；②利用PCR技术扩增；③化学方法直接人工合成。
(3)基因表达载体的组成：启动子、目的基因、终止子及标记基因等。
(4)将目的基因导入受体细胞
①植物：体细胞或受精卵——常用农杆菌转化法(双子叶植物和裸子植物)、花粉管通道法、基因枪法(单子叶植物)。
②动物：受精卵——显微注射技术。
③微生物：细菌(常用大肠杆菌)——感受态细胞法(钙离子处理法)。
(5)目的基因的检测与鉴定方法 实用文档 用心整理
千里之行 始于足下 3 ①检测目的基因是否插入转基因生物的DNA上：DNA分子杂交技术。
②检测目的基因是否转录出mRNA：分子杂交技术。
③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原—抗体杂交技术。
④个体生物学水平鉴定：根据表达性状判断。
易混辨析
①限制酶≠DNA酶≠解旋酶
限制酶的作用是识别双链DNA分子上某种特定的核苷酸序列，并使两条链在特定的位置断开；DNA酶的作用是将DNA水解为基本组成单位；解旋酶的作用是将DNA两条链间的氢键打开形成两条单链。
细胞工程
(限时：25分钟)
1．(2015·潍坊模拟)下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图，据图回答下列问题：
(1)图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有______________(填写抗体的名称)的混合物，这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低，而且纯度低。与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点在于它的___________________________，并能大量制备。
(2)图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有________；如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有________种类型。
(3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出______________，筛选②的目的是筛选出______________。筛选时所用的培养基是特定的______________培养基。
(4)科学工作者正在研究的用于治疗癌症的“生物导弹”是________________。用“生物导弹”治疗癌症的方法优于化疗的原因是_____________________________________。
(5)由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的______________和____________两大技术。
2．(2015·湖北七市联考)育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。请据图回答问题： (1)图Ⅰ过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程需要经过____________________两个关键步骤，该过程依据的原理是_____________________________________________。
(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、________、温度和光照外，还必须在________的条件下进行。
(3)已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性，少室(M)对多室(m)为显性，控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行Ⅱ、Ⅲ有关实验，则Ⅱ过程中，从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是______________。Ⅲ过程中植物体C的基因型为______________。(细胞A为两两融合细胞)
用心 爱心 专心 高三生物复习细胞工程人教版
【同步教育信息】
一. 本周教学内容：
复习细胞工程
二. 学习过程：
（一）生物膜系统：
1. 概念：指活细胞内，核膜、线粒体、叶绿体以及内质网、高尔基体等由膜围成的细胞器，在结构和功能上是紧密联系的统一整体，它们形成的结构和功能的体系。
2. 各种生物膜在结构上的联系：
直接联系：是指膜与膜直接相连，如内质网膜外连细胞膜，内连外层核膜；
间接联系：是指膜之间通过小泡互相转化，如内质网膜可以转移到高尔基体膜，再转移到细胞膜。
3. 各种生物膜在功能上的联系：各种生物膜功能上的分工和联系，如分泌蛋白的合成和分泌。
4. 研究生物膜的重要意义
（1）理论上：有助于阐明细胞的生命活动规律。
（2）实践中：进行海水淡化处理，污水过滤、分离；研究农作物抗寒、抗旱、耐盐的机理，改善农作物的品质；人工膜材料替代病变器官行使正常生理功能。
（二）植物细胞工程：
1. 理论基础：细胞全能性
细胞全能性比较：受精卵>生殖细胞>未分化细胞>成熟细胞
2. 植物组织培养：
外植体脱分化愈伤组织再分化根、芽
应用：植物快速繁殖、植物脱毒、制造人工种子、转基因植物的培育。
3. 植物体细胞杂交：
植物体组织培养杂合原生质体融合原生质体乙原生质体甲去壁植物细胞乙植物细胞甲
意义：克服远缘杂交不亲和的障碍。
（三）动物细胞工程：
动物细胞工程常用技术：动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。
1. 动物细胞培养：
离散细胞原代培养、传代培养细胞株癌变细胞系
应用：① 大规模的生产重要价值的蛋白质生物制品 ② 烧伤病人植皮③ 培养的动物细胞用于检测有害物质④ 培养正常或病变细胞用于科研（如海拉细胞系）
2. 动物细胞融合
应用：单克隆抗体
单克隆抗体筛选体内、体外培养杂交瘤细胞融合骨髓瘤细胞细胞效应B 用心 爱心 专心 3. 胚胎移植：属于有性生殖
第 2 章 细胞工程
第 1 节 植物细胞工程
01 植物细胞工程的基本技术
1.P36从社会中来：其芽葺葺,其叶青青,犹绿衣郎,挺节独立,可敬可幕。迨夫花开，凝晴滚露，万态千妍，薰风自来，四坐芬郁，岂非入兰室乎!岂非有国香乎!”这是我国历史上第一部兰谱一-《金漳兰谱》(宋.赵时庚)中对兰花的一段描述。从古至今，我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征，很多人喜欢养兰花。但是，兰花种子通常发育不全，在自然条件下萌发率极低;传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题，如果靠自然繁殖，兰花的价格可想而知了。如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖，从而走入寻常百姓家呢?
提示:利用植物组织培养技 术可以大量、快速地培育兰花。兰花是观赏植物中最常见的一类依靠植物组织培养繁育种苗的植物，其组培苗的数量约占观赏植物组培苗总量的40%.
2.P36探究·实践：菊花的组织培养
(1)接种3-4d后，检查外植体的生长情况，统计有多少外植体被污染，有多少能正常生长，并分析它们被污染的原因。根了吗?用于植物组织培养的培养基同样适合某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此，要进行严格的无菌操作。导致外植体被污染的原因可能有：培养基、接种工具灭菌不彻底；外植体消毒不彻底；操作过程不符合无菌操作要求等。
(2)你培养出愈伤组织了吗?如果培养出来了，从刚接种的外植体到长出愈伤组织经历了多少天?这些愈伤组织进一步分化出芽和
提示：观察实验结果，看看是否培养出了愈伤组织，记录多长时间长出了愈伤组织。从刚接种的外植体到长出愈伤组织一般需要 2周左右的时间。统计更换培养基后愈伤组织进一步分化成芽和根的比例和时间。
(3)观察外植体的分化情况，填好结果记录表，并及时分析结果。
提示：做好统计和对照，填好结果记录表，培养严谨的科学态度。从实验的第一步开始就要做好实验记录，可以分组配制不同的培养基，如诱导愈伤组织的培养基、诱导生芽的培养基等，还可以进行不同配方的比较。
