分解纤维素的微生物的分离

2019年高考全国Ⅱ卷37. （4）该小组将人工合成的一段DNA 转入大肠杆菌，使大肠杆菌产生能降解W的酶（酶E）。为了 比较酶E与天然酶降解W能力的差异，该小组拟进行如下实验， 请完善相关内容。
①在含有一定浓度W的固体培养基上，A处滴加酶E的缓冲液，
B处滴加含有相同浓度天然酶的缓冲液，C处滴加_缓___冲__液___，
三处滴加量相同。
②一段时间后，测量透明圈的直径。若C处没有出现透明圈，
说明__缓__冲___液__不__能__降___解__W_____；若A、B处形成的透明圈直径 大小相近，说明_酶___E_与__天__然___酶__降__解__W__的___能__力__相__近______。
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鉴别纤维素分解菌的培养基
培养基组成 CMC-Na 5~10g (水溶性羧甲基纤维素钠)
提供的主要营养物质 碳源
酵母膏 1g
碳源、氮源、生长因子
KH2PO4 0.25g 土豆汁 100mL
无机盐 碳源、生长因馏水定容至1000mL
氢元素、氧元素
涂布：
分离细菌，通常选取104、 105、106的土壤稀释液
练习巩固
3、在加入刚果红的培养基中会出 现如右图所示的透明圈，产生的 透明圈是( ) A.刚果红与纤维素形成的复合物 B.刚果红被纤维素分解菌分解
形成的 C.纤维素分解后形成的葡萄糖导致的 D.以纤维素分解菌为中心形成的
2019年高考全国Ⅱ卷37. 物质W是一种含氮有机物，会污染 土壤。W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某 研究小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌（目标菌）。回 答下列问题。 （1）要从土壤中分离目标菌，所用选择培养基中的氮源应该
本节书内容的背景知识

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制备菌悬液： 按照本专题课题1的稀释操作方法，将 选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大 倍数至106。 涂布平板： 将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1 mL，滴加在平板培养基上，用涂布器将菌液 涂布均匀，在30 ℃倒置培养，至菌落长出。 每个稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对 照。刚果红染色的具体操作步骤参照课本［资 料三］。
选择培养
梯度稀释
将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上
挑选单菌落
发酵培养
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本课题知识小结:
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根据用途分 选择培养基——在培养基中加入某种化学
物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所 需要的微生物的生长
鉴别培养基——在培养基中加入某种指示
剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物 。 例如：伊红和美蓝,和大肠杆菌的代谢产物结 合,使菌落呈黑色（老教材说法：深紫色,带 有金属光泽）, 鉴别大肠杆菌
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1.本实验的流程与课题2中的实验流程 有哪些异同？
答：本实验流程与课题2的流程的区别如 下。课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在 以尿素为惟一氮源的选择性培养基上，直接 分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤 维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选 择培养基上。其他步骤基本一致。
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2.为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素 分解菌？
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5.为什么选择培养能够“浓缩”所需的微 生物？
答：在选择培养的条件下，可以使那些能 够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁 殖，而那些不适应这种营养条件的微生物 的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的 作用。
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6.学完这个专题后,你能否总结出分离培养微生物 的一般方法?请用流程图表示.

课题3分解纤维素的微生物的分离理一理判一判1.纤维素是构成植物细胞壁的主要成分，在纤维素酶的作用下，纤维素可以水解成葡萄糖。

(√)2．纤维素分解菌能利用纤维素的根本原因是它们能产生纤维素酶。

(√)3．纤维素可为微生物提供碳源和能源。

(√)4．葡萄糖苷酶能将纤维素分解为葡萄糖。

(×)5．刚果红可以与纤维素形成透明复合物，所以可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

(×)6．分离纤维素分解菌的实验中，应从富含纤维素的环境中取土样。

(√)7．刚果红染色法只能在培养微生物的时候加入刚果红。

(×) 8．鉴别纤维素分解菌的刚果红培养基是固体培养基。

(√)9．在刚果红培养基上有透明圈的菌落一定是纤维素分解菌。

(×)悟一悟1.纤维素分解菌的选择培养基为液体培养基，利用液体培养基能使营养成分充分消耗，以增加纤维素分解菌的浓度。

纤维素分解菌的鉴别培养基为固体培养基，因为需要在培养基上形成我们肉眼可见的菌落。

2．在上述选择培养基中能以纤维素作为碳源和能源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；而在上述鉴别培养基中，绝大多数微生物都可以正常生长。

3．利用选择培养基可选择出某种微生物并通过培养增加数量，而利用鉴别培养基可鉴别微生物种类。

4．在使用顺序上，一般先使用选择培养基培养，梯度稀释后再用鉴别培养基鉴别。

感悟体会：练一练1.[2019·江苏高考题]下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述，不合理的是()A．筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养B．可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌C．在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力D．用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值解析：应该用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌，只有纤维素分解菌能够存活，A项错误；木材、秸秆中富含纤维素，故可以从富含腐殖质的林下土壤中筛选出产纤维素酶菌，B项正确；用以纤维素为唯一碳源的培养基筛选纤维素分解菌后，为了确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，C项正确；用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆，可以把纤维素分解成葡萄糖，提高饲用价值，D项正确。

专题二第三节分解纤维素的微生物的分离测试题知识点：有关纤维素的基础知识1．以下材料中纤维素含量最高的是（）A．杨树B．小麦C．玉米D．棉花2．纤维素酶能够分解（）A．纤维素的微生物B．淀粉的微生物C．纤维素D．淀粉3．寻觅纤维素分解菌应到（）A．湿润的环境中B．富含纤维素的环境中C．富含无机盐的环境中D．水池中4、微生物体内能够使纤维素分解成纤维二糖的酶是（）A．C1酶和Cx酶B．C1酶和葡萄糖苷酶C．Cx酶和葡萄糖苷酶D．C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶5．以下生物能分解纤维素的是（）①人②兔③牛④蘑菇⑤纤维杆菌A．①②③④⑤B．②③⑤C．②③④⑤D．③⑤6．刚果红是一种染料，能将以下哪些物质染色（）①纤维二糖②葡萄糖③纤维素④苏木精⑤弹性纤维A．①③④B．①②③C．②③④D．③④⑤7．在对纤维素分解菌进行选择培育时用液体培育基的目的是（）A．用液体培育基可取得大量菌体B．纤维素分解菌适宜在液体培育基上生长C．用液体培育基能够充分利用培育基中的营养物质D．用液体培育基可取得高纯度的纤维素分解菌知识点：分解纤维素的微生物的分离的实验设计8．从土壤中挑选蛋白酶产生菌时，所用培育基为（）A．加富培育基B．选择培育基C．基础培育基D．辨别培育基9．辨别纤维素分解菌的培育基中碳源为（）A．CMC­Na B．木聚糖C．纤维素D．裂解酶10．分离土壤中纤维素分解菌用到的方式是（）①稀释倒平板法②涂布平板法③单细胞挑取法④选择培育分离A．①②B．②③④C．②③D．①③④11．纤维素分解菌的选择培育基有选择作用，缘故在于其含有（）A．NaNO3 B．KCl C．酵母膏D．纤维素粉12．选择培育时应将锥形瓶固定在（）A．桌子上B．温箱里C．窗台上D．摇床上13．选择培育的结果：培育液变（）A．清澈B．浑浊C．红色D．产生透明圈14．在将样品稀释涂布到辨别纤维素分解菌的培育基上之前一样先进行选择培育，其要紧目的是（）A．完全除去其他微生物B．没成心义，去掉这一步更好C．增加纤维素分解菌的浓度D．使纤维素分解菌充分长大15．刚果红染色时，加入刚果红可在（）①制备培育基时②梯度稀释时③倒平板时④涂布时⑤培育基上长出菌落时A．①③B．②⑤C．③⑤D．④⑤16．两种刚果红染色法的结果是（）A．均会显现透明圈B．均可不能显现透明圈C．方式一显现，方式二不显现D．方式一不显现，方式二显现17．以下对刚果红染色法的表达，不正确的选项是（）A．能够先培育微生物，再加入刚果红进行颜色反映B．能够在倒平板时就加入刚果红C．既能够先培育微生物，再加入刚果红进行颜色反映，也能够在倒平板时就加入刚果红D．能够将刚果红与培育基中的其他物质混合后再灭菌倒平板知识点：分解纤维素的微生物的分离的结果分析与评判18．纤维素酶的测定方式一样是（）A．对纤维素进行定量测定B．对纤维素酶分解纤维素后所产生的葡萄糖进行定量测定C．对纤维素酶分解纤维素后所产生的纤维二糖进行定量测定D．对纤维素分解菌进行定量测定19．以纤维素为惟一碳源挑选出了真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与以下哪一种生物类似（）A．硝化细菌B．蓝藻C．蚯蚓D．兔子20．在加入刚果红的培育基中会显现透明圈，产生的透明圈是（）A．刚果红与纤维素形成的复合物B．刚果红与纤维二糖形成的复合物C．纤维素分解后形成的葡萄糖致使的D．以纤维素分解菌为中心形成的21．下表为纤维素分解菌的辨别培育基配方，请设计实验测定该培育基用于鉴定纤维素分解菌的最适pH。