植物细胞微核检测技术

洗洁精对蚕豆根尖细胞的微核诱导及检测学生姓名：xxx 指导老师：xxx班级：xxx 学号：xxx摘要根据微核诱导的原理，以未受污染的蚕豆和洗洁精为材料，测定洗洁精对根尖细胞的影响。

结果表明，洗洁精会诱导微核的产生。

说明洗洁精在超过一定浓度内对生物细胞是有害的。

关键字蚕豆、洗洁精、微核、诱导Abstract According to the principle of micronucleus induced by unpolluted favor beans and a detergent, detergent effect on root tip cells. The results show that the detergent will not induce micronucleus. Detergents in a certain concentration in biological cells are harmless.Key words: beans, detergent, microkernel, induction一、实验原理微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。

在细胞间期微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外、大小应在主核1/3以下。

微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。

一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，但有些实验也证明整条的染色体或多条染色体也能形成微核。

这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。

已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变的情况一样。

所以可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。

由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们需要有一套高度灵敏、技术简单的测试系统来监视环境的变化。

只有真核的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。

微核正式报告正式报告利用花露水对蚕豆(Vicia faba)根尖细胞微核的诱导及观察（焦锦花 1020212128 生物技术1011班）组员名单：葛笑、孙晓玮、周晓杰、徐中洋、李亚峰、程石、蒋沈琳、焦锦花一、实验目的：1、了解微核测试的原理和毒理遗传学在实际生活中的应用范围及意义2、学习蚕豆根尖的微核测试技术并掌握其操作方法3、探究花露水对微核的诱导作用4、进行小组合作，掌握设计实验基本能力二、实验原理：微核简称(MCN)，是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。

利用蚕豆根尖作为实验材料进行微核测试，可准确的显示各种处理诱发畸变的效果，并可于污染程度的监测。

花露水包含少量劣质香精和75%左右的酒精，还有一种叫“伊默宁”的成分，而花露水芬芳剂成分部分有毒。

本实验通过用实验室蒸馏水（对照组）、重铬酸钾（阳性对照）、和一定范围内不同浓度的花露水处理蚕豆根尖，通过观察计数后计算蚕豆根尖细胞微核千分率得出花露水的细胞毒性效应。

本实验即运用蚕豆根尖微核实验检测，研究花露水对蚕豆根尖微核诱导的作用，进而为花露水对人体以及环境的影响提供一定的理论参考三、实验材料和主要试剂蚕豆种子、花露水：用蒸馏水配制成25％、50％、75％梯度的溶液及原液、卡诺固定液（无水酒精：醋酸=3：1）、改良石炭酸品红、重铬酸钾溶液四、实验过程1、催芽：将实验用蚕豆种子按需要量放入盛有蒸馏水的烧杯中，在25℃下浸泡8小时。

种子吸胀后，放入培养皿中，用棉花保持湿度，在25℃温箱中催芽三天浸种催芽2．花露水处理：每一处理选取3粒初生根良好、根长较一致的种子。

将蚕豆不定根置于不同浓度（25％、50％、75％溶液及原液）的花露水培养6~8小时，第二组用蒸馏水处理作对照，第三组用重铬酸钾作阳性对照。

正式报告正式报告3．根尖细胞恢复培养：处理后的根尖用蒸馏水浸洗三次，每次2～3分钟。

洗净后置入培养皿，25℃下恢复培养24小时组别 1 2 3 4 5 6 被检测液 3个根尖分生组织区微核数微核率（MCN‰）蒸馏水（阴性对照组） 25%花露水 50%花露水 75%花露水花露水原液重铬酸钾（阳性对照组） 5，4，5 7，6，8 7，9，11 8，10，10 8，7，9 8，9，12 14.00‰ 21.00‰ 27.00‰ 28‰ 24‰ 29‰ 4．根尖细胞固定：剪取0．5～lcm长根尖，蒸馏水清洗后，放入卡诺固定液中固定8h。

3．对各个部件要轻拿轻放，不要碰撞，尤其是硬盘。 4．防止液体进入计算机内部：在安装计算机元器件 时，也要严禁液体进入计算机内部的板卡上。因为这些液 体都可能造成短路而使器件损坏，所以要注意不要将饮料 摆放在机器附近，对于爱出汗的朋友，也要避免头上的汗 水滴落，还要注意不要让手心的汗沾湿板卡。
12.2.5 组装前的注意事项
取出豆种，用调温水浸洗 3 次，每次 5 min，
按照规定的条件恢复培养24 h。
处理6h
处理过程中，根尖如出现相关的急性毒性症
状，则按要求增加试样急性毒性预试验；否 则，直接进行后续试验。
实验步骤
4.根尖固定
用卡诺氏液固定
切取顶端 l.0 cm 左右根尖置于具盖指管内（同一试样处理 的根尖放入一个指管），加卡诺氏液固定 2 h。固定时间 最长不超过 24 h。
8．插拔时不要抓住线缆拔插头，以免损伤线缆。
12.2.6 台式计算机组装基本步骤
1．主机的安装 （1）准备好机箱并安装电源，主要包括打开空机箱和安装电源； （2）驱动器的安装，包括硬盘、光驱的安装； （3）CPU和散热器的安装，在主板处理器插座上安装CPU及散 热风扇； （4）内存条的安装，将内存条插入主板内存插槽内； （5）主板的安装，将主板固定在机箱内； （6）显卡的安装，根据显卡接口类型将显卡安装在主板上合适 的扩展槽内； （7）声卡等的安装，根据声卡的总线类型选择合适的扩展槽将 它们安装在主板上； （8）机箱与主板间连线的连接，是指各种指示灯、电源开关线、 PC喇叭等面板插针的连接，以及硬盘、光驱。
用乙醇保存
如不能及时染色制片，则弃去卡诺氏液，用实验用水洗净， 加入乙醇溶液浸没，于冰箱内冷藏，72h内染色镜检。
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浸洗根尖

利用蚕豆根尖细胞微核技术对新疆伊犁河水质检测买孜拉木·肉扎洪;麦合甫再木·阿不都热合曼;吾尔麦提汗·麦麦提明;谢仁娜依·甫拉提;艾尔肯·热合曼【摘要】[目的]研究新疆伊犁河水域的不同位点的水质污染程度.[方法]利用蚕豆根尖微核技术对新疆伊犁河水域的30个水样进行动态监测和评价.[结果]各样点MCN‰和对照组相比差异极显著(P＜0.01),30个水样点中有12个水样点无污染(PI值在0～1.5);10个水样点轻度污染(PI值在1.5 ～2.0);8个水样点中度以上污染(PI值2.0以上).[结论]新疆伊犁河水质受到不同程度的污染,部分区域中度以上污染,应及时加以治理.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2014(000)017【总页数】4页(P5369-5371,5379)【关键词】蚕豆根尖;微核技术;污染指数;伊犁河【作者】买孜拉木·肉扎洪;麦合甫再木·阿不都热合曼;吾尔麦提汗·麦麦提明;谢仁娜依·甫拉提;艾尔肯·热合曼【作者单位】新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046;新疆大学生命科学与技术学院,新疆乌鲁木齐830046【正文语种】中文【中图分类】S643.6随着城市工业化的发展，城市污水量在逐年增加，污水成分日趋复杂，污水中含有大量的病原体、致癌原以及对人有急慢性毒作用的化学物质和放射性物质［1］。

在多种监测方法中，生物学方法的优越性就在于能直接监测污染物对生物危害程度的生物效应。

所谓微核是指由于生物受到内外环境因素的影响，染色体的结构发生异常变化，形成无着丝粒断片或染色体在后期时移动滞后，在细胞分裂后期，无着丝粒断片或滞后染色体不能向细胞的两极运动，而是残留在细胞中央的赤道板附近，当子代细胞形成时，游离于细胞浆中形成微核［2］。