生化检验辅导：尿纤维蛋白降解产物测定

【关键字】形成D-二聚体生理学背景(fibrinolysis system)是人体最重要的抗凝系统，由4种主要部分组成：纤溶酶原(plasm ingen)、纤溶酶原激活剂(plasmingen activator, 如t-PA, u-PA)、(plasmin)、纤溶酶抑制物(pl asmin activator inhibitor, PAI-1, antiplasmin)。

当纤维蛋白凝结块(fibrin clot)形成时，在tP A的存在下, 纤溶酶原激活转化为纤溶酶, 纤维蛋白溶解过程开始, 纤溶酶降解纤维蛋白凝结块形成各种可溶片段,形成纤维蛋白产物(FDP)，FDP由下列物质：X-寡聚体(X-oligomer)、D-二聚体(D-Dimer)、中间片段(Intermediate fragments)、片段E(Fragment E)组成。

其中, X-寡聚体和D-聚体均含D-二聚体单位。

人体纤溶系统，它对保持血管壁的正常通透性，维持血液的流动状态和组织修复起着重要作用。

D-二聚体血浆中水平增高说明存在继发性纤溶过程，而先生凝血酶,后又有纤溶系活化；并且也反映在血栓形成的局部纤溶酶活性或浓度超过血浆2‰—抗纤溶酶活性或浓度。

溶栓治疗是指用药物来活化纤维蛋白溶解系统。

一般为投入一种纤溶酶原活化物如尿液酶、链激酶或组织型纤溶酶原活化物(tpA)，使大量纤溶酶生成，从而加速已形成血栓的溶解。

FDP或D-二聚体生成，则表明达到溶栓效果。

纤溶蛋白降解产物中，唯D-二聚体交联碎片可反映血栓形成后的溶栓活性。

因此,理论上，D-二聚体的定量检测可定量反映药物的溶栓效果、及可用于诊断、筛选新形成的血栓。

但是，到目前为止，商品的D-二聚体检测手段都尚存在一定局限性。

其中D-二聚体的胶乳免疫比浊法检测，由于其快速测定、灵敏度高、阴性预报值高，重复性良好，临床医师较多采用。

定义是纤维蛋白单体经活化因子XIII交联后，再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物，是一个特异性的纤溶过程标记物。

2. 血液标本的采集
生化检验用的血液标本可来自于静脉、 动脉或毛细血管。静脉血是最常用的标本， 静脉穿刺是最常用的采血方法。毛细血管采 血主要用于儿童，血气分析多使用动脉血。
（1） 采血前准备
为了使实验室结果有效地用于临床，实验室 应了解在收集标本前和收集标本时，所有会 影响实验室的非患者内在疾病因素。采取各 种措施，提出对患者采集标本前以及采集时 的要求，称之为患者准备。
（2） 注意事项 收集尿液标本的容器必须清洁干燥， 最
好是一次性使用的容器。若容器反复使用， 则须用洗涤液和自来水清洗， 再用蒸馏水冲 洗。尿标本要防止混入月经血、阴道分泌物、 精液、前列腺液、粪便等异物。尿标本收集 后应 12 时内送检，以免细菌作用和化学成分 分解。若不能及时检验（如收集 24 小时尿 液），将标本置冰箱保存，若加入防腐剂， 保存效果更佳。
对不是因操作不当引起的溶血、脂血或胆红 素血，应在检验报告上注明，供医生参考。
尿液、脑脊液和胸腹水等标本常需离心，取 上清液进行分析
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分离后的标本若不能及时检测或需保留以备 复查时，一般应放于4℃冰箱，某些检测项 目的标本存放于-20℃冰箱更稳定。标本存 放时需加塞，以免水分挥发而使标本浓缩。
3.尿液标本的采集
尿液标本的采集 （1） 采集方法 尿液标本有随机新鲜尿、定时尿及 24 小时尿， 根据检查项目选择标本的采集类型。定量生化分析 多收集 24 小时尿液， 24 小时尿标本采集方法如 下：
嘱病人在早晨 8 时排尿弃去，以后每次排尿均 收集于一大容器内，至次日早晨 8 时最后一次尿亦 收集于容器内。测量并记录 24 小时尿液总量，然 后混匀尿液，取适量尿液送检。
通常用量为0．5 ～1．0ml 浓盐酸／100 ml 尿液，适用于24 小时尿儿茶酚胺、秀草 扁桃酸（V M A）、17 －羟皮质类固醇和 17 －酮类固醇等定量测定。

fdp和d-二聚体题目
FDP（纤维蛋白原降解产物）和D-二聚体是与血液凝固和纤维
蛋白溶解过程相关的两种生物标志物。

这两种标志物在临床诊断中
常常被用来评估血栓形成和溶栓过程的情况。

首先，我们来谈谈FDP。

FDP是一种在纤维蛋白溶解时产生的分
解产物，它们是由纤维蛋白原降解而来的，通常在血液中的浓度会
在血栓形成或纤维蛋白溶解增加时升高。

因此，FDP的浓度可以用
来评估血栓形成和纤维蛋白溶解的程度，对于深静脉血栓、肺栓塞
等血栓性疾病的诊断和监测具有重要意义。

接下来是D-二聚体。

D-二聚体是一种纤维蛋白的降解产物，它
在血液中的浓度也会在血栓形成或纤维蛋白溶解增加时升高。

因此，D-二聚体的浓度也可以用来评估血栓形成和纤维蛋白溶解的程度。

临床上，D-二聚体常常被用于怀疑存在血栓性疾病的患者的辅助诊断，例如深静脉血栓、肺栓塞等疾病的诊断和鉴别诊断。

需要注意的是，尽管FDP和D-二聚体在临床诊断中具有一定的
辅助价值，但它们并不是特异性很高的标志物，因此在临床上仍需
要结合其他临床症状、体征和其他检查结果来综合判断患者的病情。

此外，不同的疾病状态或治疗过程也可能影响到FDP和D-二聚体的
浓度，因此在应用这两种标志物时需要综合考虑患者的具体情况。

总之，FDP和D-二聚体是与血液凝固和纤维蛋白溶解过程相关
的两种生物标志物，它们在临床诊断中具有一定的辅助价值，但在
应用时需要综合考虑患者的具体情况，以达到更准确的诊断和评估。

用fdnb法和edman降解法测定蛋白质原理
FDNB法和Edman降解法是两种常用的测定蛋白质氨基酸序列的方法。

1. FDNB法（硫氰酸二硝基苯酯法）：
该方法是通过将硫氰酸二硝基苯酯（FDNB）与蛋白质中的内源性氨基酸中的氨基团（主要是赖氨酸）反应，形成黄色的光吸收化合物，从而定量分析蛋白质中该氨基酸的含量。

原理如下：
- FDNB与蛋白质中的氨基团反应，生成硫氰酸羰基二硝基苯酯（一种黄色产物）。

这个反应对于其中部分内源性氨基酸特异性，而对于其他氨基酸不起反应。

- 通过测定生成物的吸收光谱，可以知道蛋白质中该氨基酸的含量。

2. Edman降解法：
该方法是通过将蛋白质中的N末端氨基酸（谷氨酸或其他）与二硫苯酚（Edman试剂）反应，生成稳定的二硫苯酚胺酸衍生物，然后脱去N 端衍生物，并对其进行定量分析，以确定蛋白质的序列。

原理如下：- 蛋白质与Edman试剂反应生成二硫苯酚胺酸衍生物。

这个反应对于N 末端氨基酸特异性，而对于其他氨基酸不起反应。

- 通过将衍生物从蛋白质上脱去并采用高效液相色谱等分析方法，可以确定蛋白质的N末端氨基酸。

- 重复该过程，每次逐步分析蛋白质的N末端氨基酸，可以得到其序列信息。

这两种方法都可用于测定蛋白质的序列信息，具体选择哪种方法取决于蛋白质的性质和实验要求。