一、名词解释
诱变育种:利用诱变剂处理微生物细胞，提高基因突变频率，再通过适当的筛选方法获得所需高产优质菌种的方法。
代谢控制发酵:是指利用生物的、物理的、化学的方法，人为的改变微生物的代谢途径，使之合成、积累、分泌我们所需要的产品的过程。
寡核苷酸介导诱变(oligonucleotide-directed mutagenesis):指在DNA水平上改变氨基酸的编码序列，也称定点诱变(site-specific mutagenesis);
补料分批培养:在分批培养过程中补入新鲜的料液，以克服营养不足而导致的发酵过早结束的缺点。
临界溶氧浓度:指不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度。
诱导酶:有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶
固定化酶:通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶.
非水酶学:通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学.
抗体酶:是一种具有催化作用的免疫球蛋白，属于化学人工酶
细胞培养:是指动植物细胞在体外条件下的存活或生长，此时细胞不再形成组织．
愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
接触抑制:细胞从接种到长满底物表面后，由于细胞繁殖数量增多相互接触后，不再增加。细胞系:原代细胞经第一次传代后，形成的细胞群体，即具有增殖能力，类型均匀的培养细胞，一般为有限细胞系。
抗性互补筛选法:利用亲本细胞原生质体对抗生素、除草剂及其它有毒物质抗性差异选择杂种细胞。
细胞拆合:是指以一定的实验技术从活细胞中分离出细胞器及其组分，然后在体外一定条件下将不同细胞来源的细胞器及其组分进行重组，使其重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器．
基因重组 (gene recombination):是指DNA片段在细胞内、细胞间，甚至在不同物种之间进行交换，交换后的片段仍然具有复制和表达的功能。
克隆:来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。
限制性内切酶:限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶。
黏性末端:被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。
CCCDNA:绝大多数的天然DNA质粒具有共价、封闭、环状的分子结构，即CCCDNA。
回文结构:在切割部位，一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。
基因探针:是一段与目的基因互补的核酸序列，可以是ＤＮＡ，也可以是ＲＮＡ，用它与待测样品DNA或RNA进行核酸分子杂交，可以判断两者的同源程度．
Dot印迹杂交:将待测ＤＮＡ或ＲＮＡ的细胞裂解物变性后直接点在硝酸纤维素膜上，不需要限制性酶进行酶切，既可与探针进行杂交反应．
cDNA文库:是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。
二、填空题
1.1972年斯坦福大学的Berg等人完成了首次体外重组实验，并首次用限制性内切酶切割
SV40的DNA片断与 噬菌体的DNA片断，经过连接，组成重组DNA分子，他是第一个实现DNA重组的人。
2.1973年斯坦福大学的Cohen将伤寒沙门氏抗链霉素质粒与含有四环素抗性基因的大肠杆菌质粒pSC101连接成重组质粒，具有双重抗药性。标志着基因工程的诞生。
3.基因工程的特征跨物种性、无性扩增。
4.限制性内切酶分为I、II、III。
5.我国青年科学家陈炬成功地把人的干扰素基因嫁接到烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力，试分析:烟草有了抗病毒的能力，这表明，烟草体内产生了人的干扰素。这说明人和烟草共用一套遗传密码；蛋白质合成的方法相同（填“相同”或“不同”）；也说明了DNA是遗传物质。
6.限制酶是一类专门切割DNA 的酶，它能特异性识别切割双链（单、双）DNA。
7.限制酶命名采用Smith和A thens提议的方案，第一个字母大写取自来源细菌的属名_；第
二、三个字母取自来源细菌的__种名__；第四个字母（如果有）取自来源菌的_株系。
8..基因工程的基本步骤切、接、转、增、检。
9.目的基因的提取方法鸟枪法，_反转录法，_根据已知的氨基酸序列合成DNA。
10.聚合酶链反应（PCR）的基本步骤变性，退火，延伸。所用的酶为TaqDNA聚合酶，酶耐热的特性。
11.DNA序列测定常用方法有末端终止，化学裂解法，DNA测序自动化。
12.运载体的作用_将外源基因转移到受体细胞中去__，利用运载体在受体细胞内，对外源基因进行大量复制_。
13.目的基因导入受体细胞常用的受体，微生物用大肠杆菌，植物用拟南芥。
14.Maxam-Gilbert化学裂解法中使戊糖脱落，用于嘌呤环的试剂是硫酸二甲酯，
而联氨可用于肼解嘧啶环。
15. 基因工程的两个基本特点是: (1)分子水平上的操作__，(2) 细胞水平上的表达_。
16.核酸杂交探针可分为两大类: DNA探针和RNA探针。其中DNA探针又分为基因组DNA 探针和cDNA探针。
17.如果用限制性内切核酸酶切割双链DNA产生5’突出的黏性末端，则可以用Klenow酶填补的方法3’末端标记。如果用限制性内切核酸酶切割DNA产生的是3’突出的黏性末端，可以用T4DNA聚合酶进行3’末端标记。
18.根据Northern杂交的结果可以说明:外源基因是否进行了转录。
19.番茄在运输和贮藏过程中，由于过早成熟而易腐烂。应用基因工程技术，通过抑制某种促进果实成熟激素的合成能力，可使番茄贮藏时间延长，培育成耐贮藏的番茄新品种，这种转基因番茄已于1993年在美国上市。请回答:
（1）促进果实成熟的重要激素是乙烯。
（2）在培育转基因番茄的基因操作中，所用的基因的“剪刀”是限制性内切酶，基因的“针线”是DNA连接酶，基因的“运输工具”是运载体。
（3）与杂交育种、诱变育种相比，通过基因工程来培育新品种的主要优点是目的性强、育种周期短和克服远缘杂交的障碍。
20.在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。请据图回答:
