第一章1 紫外可见分光光度法

C=C C=C ; N=N ; C=O • 有机化合物的紫外-可见吸收光谱分析多以这两类 跃迁为基础
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例子：
1）乙醛分子在160, 180,290nm处产生吸收，它们对应的电子跃迁类型分别是：
2）环戊烯（190nm）、甲醚（185nm）、三乙胺（195nm）分别对应的跃迁类型是： 3）一化合物可能是=N-CH2-CH2-CH3或=N-CH=CH2其紫外吸收光谱为： 该化合物是何种化合物？
<100
吸收带的划分：落在200-780 nm的紫外-可见光区的吸收可以用紫外可见吸收光谱测定，在有机化合物的结构解析以及定量分析中常用。
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电荷转移吸收谱带
电荷转移吸收谱带涉及的是给予体的一个电子向接受体的一个电子轨道上 的跃迁，激发态是这一内氧化还原过程的产物。电荷转移过程可表示如下：
hv CO R
光的粒子性是指光可以看成是由一系列量子化的能量子（即光子）组成。 光子能量为E＝h= hc/n。h 为Plank常数，h=6.626×10-34Js。
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➢电磁辐射与光谱分析法
物质具有能量，是诱电体。物质与光的作用可看成是光子对能量的授受，即 h=E1-E0,该原理广泛应用于光谱解析。电磁辐射与物质的作用本质是物质吸 收光能后发生跃迁。跃迁是指物质吸收光能后自身能量的改变。因这种改变 是量子化的，故称为跃迁。不同波长的光,能量不同，跃迁形式也不同，因 此有不同的光谱分析法。
190
280
CO
190
160
COOH
204
9000 20
2000
41
*
n
*
n
*
*
n
*
COOR
205
50

第11页，共36页。
二、Lambert-Beer定律 Lambert-Beer定律： A=kbc
K--吸光系数 b--吸光液层的厚度(光程)， cm c--吸光物质的浓度， g L-1, molL-1
第12页，共36页。
吸光系数
吸光系数(K)
物质的性质 入射光波长 温度
与浓度无关，只是符号、取值与浓度 的单位相关
如：硒光电池：
金属膜
硒片
－
e-
＋
铁片
第24页，共36页。
稳压电源
72型分光光度计结构图
钨灯
狭缝 反射镜
透镜
棱镜
G
检流计 硒光电池
狭缝
比色室
波长读数盘
反射镜 透镜
第25页，共36页。
二、定量分析方法
1、标准曲线法
取系列浓度标准溶液，测 定吸光度A，作吸光度A
对溶液浓度c的图，得过 坐标原点的直线。
¨ 光学因素 复色光引起
对Beer定律的偏离。
¨ 主观误差
两种不同吸光系数的混合 光对Beer定律的偏离
第31页，共36页。
二、提高测量灵敏度和准确度的方法
1、选择适当的显色剂 灵敏度高
选择性好 显色剂在测定波长处无明显吸收
反应生成的有色化合物组成恒定。
2. 选择合适的测定条件
(1)入射光波长的选择 一般选择λmax作为入射光的波长，但有干扰存在
第22页，共36页。
3、吸收池——比色皿
玻璃比色皿 用于可见光
石英比色皿 用于λ＜400nm的紫外光
比色皿的质量要求：无色、透明、耐腐蚀、同一厚度的
透光率误差<5%。
0.5cm
1cm

5. 结果显示记录系统
检流计、数字显示、微机进行 仪器自动控制和结果处理
第三节 可见分光光度法
二、测定方法 可见分光光度法常用于定量测定，
根据Lambert-Beer定律，在一定波长条 件下，吸光度与浓度成正比，因此在分 光光度计上测出吸光度，通过下列方法 即可求出被测物质含量:
第三节 可见分光光度法
可见光区：钨灯作 为光源，其辐射波长范 围在320～2500 nm。
紫外区：氢、氘灯。 发射185～400 nm的连 续光谱。
2.单色器
将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任 波长单色光的光学系统。
①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅；
第四节 提高测量灵敏度和准确度的方法
三、选择合适的测定条件
1.波长的选择（入max）；
2.显色剂的用量要适量； 3.酸度（A – pH曲线）； 4.显色时间（A – t曲线）； 5.溶液浓度控制在 A = 0.2 ~ 0.7 范围; 6.掩蔽干扰离子。
第五节 紫外分光光度法简介
一、751-G型分光光度计 二、紫外分光光度法的应用
紫外—可见分光 光度法
第一节 物质的吸收光谱 第二节 分光光度法基本
原理 第三节 可见分光光度法 第四节 提高测量灵敏度
和准确度的方法 第五节 紫外分光光度法
简介
目的要求
1. 掌握分光光度法的基本原理——LambertBeer定律；吸光度及透光率、吸光系数、 摩尔吸光系等概念、相互关系及计算。
2. 熟悉标准曲线法及标准对照法。 3. 了解吸收光谱的意义及绘制方法。 4. 了解分光光度计的基本构造,提高测量灵敏

AsO3H2
OH OH
H2O3As
NN
NN
HO3S
SO3H
可用于测定铀、钍、锆等，
三 显色条件的选择：
显色条件主要包括显色剂用量、 显色反应的酸度、显色温度和显 色时间等，
1 显色剂用量：
显色反应就是将待测组分转变成有 色化合物的反应,其反应一般可用下式 代表：
1 显色剂用量：
显色反应一般可用下式代表： M＋R = MR
紫
TiO H2O2 2+
黄
VO H2O2 3+ Nb2O3 SO4 2 H2O2
红橙 黄
λmax /nm 480 460
405 420 670～820 670～820 660 420
620 500 580 420
400～450 360
2．有机显色剂：
显色剂
测定元素
反应介质
λmax /nm
ε
/ L/ mol·cm
其不足之处是价格昂贵，
第四节 紫外可见分光光度法条件选 择
一、显色条件的选择 一 显色反应 在光度分析中将试样中的待测组分转 变成有色化合物的反应叫显色反应，
显色反应常用的有两大类： 一类是配位反应； Fe3＋＋3SCN－=Fe SCN 3； 另一类是氧化还原反应， Mn2＋＋S2O82-= MnO4－＋SO42在这两类反应中,用得较多的是配 位反应， 此外还有：吸附显色反应、多元配 合物显色体系
透镜或凹面反射镜 、色散元件、聚焦
元件和出射狭缝，
800
λ1
600
500 白光
入射狭缝 准光器
λ
400
棱镜 聚焦元件2 出射狭缝
单色器的核心部分是色散元件， 色散元件主要是棱镜和光栅，